一種治療肺癌的納米銀抗癌組合物及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種治療肺癌的納米銀抗癌組合物。該組合物含有如下濃度的成分：球形納米銀粉末12—200mg/kg；藥學(xué)上可以接受的分散劑卡波姆700—800mg/kg、三乙醇胺700—800mg/kg、葡萄糖2.8—3.2g/kg、稀釋劑為純水；所述球形納米銀粉末中銀的純度≥99.99%，銀顆粒粒徑為1—5nm。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明的納米銀抗癌組合物能完全抑制人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞A549的增殖，并引起細(xì)胞全部死亡。這說明本申請的納米銀抗癌組合物能夠用于治療肺癌，更能用于制備治療肺癌的藥物。
【專利說明】一種治療肺癌的納米銀抗癌組合物及其制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種治療肺癌的納米銀抗癌組合物及其制備方法和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]肺癌是發(fā)病率和死亡率增長最快，對人群健康和生命威脅最大的惡性腫瘤之一。近50年來許多國家都報(bào)道肺癌的發(fā)病率和死亡率均明顯增高，男性肺癌發(fā)病率和死亡率均占所有惡性腫瘤的第一位，女性發(fā)病率占第二位，死亡率占第二位。肺癌的病因至今尚不完全明確，大量資料表明，長期大量吸煙與肺癌的發(fā)生有非常密切的關(guān)系。已有的研究證明:長期大量吸煙者患肺癌的概率是不吸煙者的10~20倍，開始吸煙的年齡越小，患肺癌的幾率越高。此外，吸煙不僅直接影響本人的身體健康，還對周圍人群的健康產(chǎn)生不良影響，導(dǎo)致被動(dòng)吸煙者肺癌患病率明顯增加。城市居民肺癌的發(fā)病率比農(nóng)村高，這可能與城市大氣污染和煙塵中含有致 癌物質(zhì)有關(guān)。
[0003]一般來說，目前治療肺癌的方法一般都是化療、放療、手術(shù)。每一種治療方法對人體的損傷都很大，而且并不能完全根絕，還有一定程度上的復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)。
[0004]納米銀材料是近年來應(yīng)用納米制備技術(shù)，制備的一種新的功能性材料。是將單質(zhì)金屬銀或其他含銀化合物利用物理或化學(xué)的方法制成納米級別的金屬粉末，粒徑大多為100納米以下。由于材料達(dá)到了納米尺寸，表面積大大增加，暴露的原子鍵及電子增加，活性也極大的增長，所以其理化性質(zhì)顯現(xiàn)一些新的功能。而納米銀最為顯著的功能是殺菌能力大幅增強(qiáng)。國家高能所納米生物效應(yīng)實(shí)驗(yàn)室的研究人員最近發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過適當(dāng)化學(xué)修飾的一種納米顆粒具有高效抑止腫瘤生長的效果，卻不直接殺死細(xì)胞，不僅增強(qiáng)腫瘤小鼠的免疫能力，而且?guī)缀鯚o毒。這與傳統(tǒng)抗腫瘤藥物有很大不同，正是腫瘤治療所追求的效果。令科學(xué)家們感興趣的是，這些納米顆粒不直接殺死細(xì)胞，它們在腫瘤細(xì)胞組織里的分布也很少，只有十萬分之一。這說明納米顆粒不是通過直接殺死細(xì)胞的方式產(chǎn)生抑止腫瘤的藥效，可能存在未知的新的抗腫瘤生長機(jī)制，需要開展深入研究。納米技術(shù)的引用，將有利于抗癌藥物的研發(fā)。
[0005]目前，臨床使用的抗腫瘤藥物大多利用高毒性殺死細(xì)胞，在殺死腫瘤細(xì)胞的同時(shí)，也嚴(yán)重?fù)p害了正常細(xì)胞。納米銀的最新研究結(jié)果克服了這些缺點(diǎn)，被認(rèn)為是提供了實(shí)現(xiàn)高效低毒治療腫瘤夢想的一種可能的新方案。然而，該研究中采用的化學(xué)修飾后的納米顆粒，其安全性并不高，而且這些化學(xué)修飾的納米顆粒中起到殺滅細(xì)胞作用的到底是化學(xué)基團(tuán)還是納米顆粒本身，并沒有相關(guān)的機(jī)理報(bào)道。
[0006]目前，國內(nèi)納米銀粉體生產(chǎn)企業(yè)大多以化學(xué)方法制備，各種尺寸、大小形狀不一，批量生產(chǎn)純度難控制，應(yīng)用于藥用的人體需求的安全性高的、高純度，且尺寸、規(guī)格、形狀統(tǒng)一的納米銀粉體少見。國內(nèi)已有企業(yè)將納米銀的抗菌技術(shù)應(yīng)用到紡織和治療女性生殖道炎癥疾病上，但沒有公開應(yīng)用于腫瘤的情況。

【發(fā)明內(nèi)容】
[0007]本發(fā)明旨在克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種治療肺癌的納米銀抗癌組合物及其制備方法，該納米銀抗癌組合物可用于制備治療和預(yù)防肺癌的藥物。
[0008]為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供的技術(shù)方案為:
每Ikg所述治療肺癌的納米銀抗癌組合物中含有如下重量的成份:
納米銀粉末12— 200 mg ；
卡波姆 700— 800 mg ；
三乙醇胺700— 800 mg ；
匍萄糖2.8 —3.2 g ；
其余為水；
所述納米銀粉末中銀的純度銀純度≥99.99%，銀顆粒粒徑為I一5nm，銀顆粒形狀為球形。本發(fā)明所述的納米銀粉末是5號納米銀粉末，購自光谷納米科技有限公司。
[0009]制備上述納米銀抗癌組合物的方法，包括如下步驟:
(1)按權(quán)利要求1所述的濃度要求準(zhǔn)備好納米銀粉末、卡波姆、三乙醇胺、葡萄糖和水；
(2)將卡波姆加入占水總量1/2~2/3的水中，混合，使用超聲波分散器分散2~5min；
(3)將納米銀粉末及三乙醇胺加入到經(jīng)步驟(2)分散處理的混合物中混合，使用超聲波分散器分散2~5min ；
(4)將葡萄糖和剩余的水加入到經(jīng)步驟(3)分散處理的混合物中，再次分散I~3min；
(5)待經(jīng)步驟(4)分散處理后的混合物冷卻至2~12°C時(shí)，將混合物放入超聲波霧化器中分散至霧狀物，用收集裝置將霧狀物收集后冷凝至液體，即得納米銀抗癌組合物。
[0010]其中，步驟(2)中超聲波分散器的頻率為2段頻率:16~24KHZ。步驟(3)中超聲波分散器的頻率為5段頻率:40~65KHZ。步驟(4)中超聲波分散器的頻率為4段頻率:30~40KHZ。步驟(5)中超聲波霧化器的頻率為15段頻率:120~180 KHZ。
[0011]本發(fā)明的納米銀粉末是5號高純度單質(zhì)納米銀，且要求銀顆粒為球形，銀顆粒粒徑為I一5nm。球形是納米銀顆粒最穩(wěn)定的形狀，當(dāng)粒徑大于5nm時(shí)，顆粒體積增大，其比表面積小、活性變小給藥劑量就會(huì)相應(yīng)增大；當(dāng)顆粒粒徑小于Inm時(shí)，其制備技術(shù)則相當(dāng)困難，成本高。從安全性及效果最優(yōu)化的角度來考慮，本申請要求納米銀粉末中銀顆粒的粒徑范圍為I一5nm。本申請將該高純度、高效能、高穩(wěn)定性、低濃度、高安全性低濃度的納米銀與其適應(yīng)的輔料配伍，并以特定的制備方法形成高分散、高穩(wěn)定、易釋放的分散-保護(hù)-釋放體系。
[0012]實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明的納米銀抗癌組合物能夠強(qiáng)烈抑制人非小細(xì)胞肺癌A549增殖，并引起細(xì)胞死亡。這說明本申請的納米銀抗癌組合物能夠治療肺癌，可以用于制備治療肺癌的藥物。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0013]圖1為納米銀5#對A549細(xì)胞增殖的影響；
圖2為納米銀1#對A549細(xì)胞增殖的影響。
【具體實(shí)施方式】
[0014]實(shí)施例中所用納米銀粉末為納米銀I號(Oppm)，批號2013.05.21—11，納米銀5號(250PPm)，批號:2013.05.21-15，由光谷納米科技有限公司提供。
[0015]實(shí)施例1
Ikg所述治療肺癌的納米銀抗癌組合物中含有如下重量的成分:
納米銀粉末0.0625g ；
卡波姆0.7000g ；
三乙醇胺0.7000g ；
葡萄糖3.0OOOg ；
水 995.5385 g ；
所述納米銀粉末中銀的純度> 99.99%，銀顆粒粒徑為I一5nm，銀顆粒形狀為球形。
[0016]實(shí)施例2
Ikg所述治療肺癌的納米銀抗癌組合物中含有如下重量的成分:
納米銀粉末0.0125g ；
卡波姆0.8000g ；
三乙醇胺0.8000g ；
葡萄糖3.0OOOg ；
水 995.3885g ；
所述納米銀粉末中銀的純度> 99.99%，銀顆粒粒徑為I一5nm，銀顆粒形狀為球形。
[0017]實(shí)施例3
Ikg所述治療肺癌的納米銀抗癌組合物中含有如下重量的成分:
納米銀粉末0.0025g ；
卡波姆0.8000g ；
三乙醇胺0.8000g ；
葡萄糖3.0000 g ；
水 995.3975g ；
所述納米銀粉末中銀的純度> 99.99%，銀顆粒粒徑為I一5nm，銀顆粒形狀為球形。
[0018]實(shí)施例4
制備實(shí)施例1至3所述納米銀抗癌組合物的方法，包括如下步驟:
(1)將卡波姆加入占水總量1/2~2/3的水中，混合，使用超聲波分散器分散2~5min；
(2)將納米銀粉末及三乙醇胺加入到經(jīng)步驟(1)分散處理的混合物中混合，使用超聲波分散器分散2~5min ；
(3)將葡萄糖和剩余的水加入到經(jīng)步驟(2)分散處理的混合物中，再次分散I~3min；
(4)待經(jīng)步驟(3)分散處理后的混合物冷卻至2~12°C時(shí)，將混合物放入超聲波霧化器中分散至霧狀物，用收集裝置將霧狀物收集后冷凝至液體，即得納米銀抗癌組合物。
[0019]其中，步驟(1)中超聲波分散器的頻率為2段頻率:16~24KHZ ;步驟(2)中超聲波分散器的頻率為5段頻率:40~65KHZ ;步驟(3)中超聲波霧化器的頻率為15段頻率:120 ~180 KHZ。
[0020]實(shí)施例5
實(shí)施例4制備的納米銀抗癌組合物對A549細(xì)胞增殖的影響的檢測。
[0021]I實(shí)驗(yàn)材料將用納米銀I號為原料按實(shí)施例4所述方法制備的納米銀抗癌組合物命名為納米銀1#，將用納米銀5號為原料按實(shí)施例4所述方法制備的納米銀抗癌組合物命名為納米銀5#，作為實(shí)驗(yàn)組。
[0022]2試驗(yàn)方法
采用X-celIigence實(shí)時(shí)細(xì)胞分析系統(tǒng)，實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)記錄給藥后72h內(nèi)藥物對腫瘤細(xì)胞增殖的影響。E-Plate培養(yǎng)板中每孔含細(xì)胞5000個(gè)(初始值)、培養(yǎng)基190 μ L，每孔加入藥液體積為10 μ L0設(shè)置納米銀1#和納米銀5#不同劑量組，即50、10、2 μ L組，并設(shè)置一個(gè)溶劑對照組(0.1%DMS0), 一個(gè)無細(xì)胞的培養(yǎng)基對照組(Medium)，觀察納米銀對A549細(xì)胞增殖的影響。[0023]3實(shí)驗(yàn)結(jié)果
納米銀1#對A549細(xì)胞增殖的影響結(jié)果見圖2，納米銀5#對A549細(xì)胞增殖的影響，結(jié)果見圖1。
[0024]4實(shí)驗(yàn)結(jié)論
結(jié)果表明如圖2，對照組I號不同劑量(濃度)對A549的增殖均沒有明顯的抑制作用，說明對照組I號不抑制A549的增殖；如圖1納米銀5號50ul (62.5ppm)、10ul (12.5ppm)組完全抑制A549的增殖，并引起細(xì)胞全部死亡；2ul (2.5ppm)組則對A549的增殖沒有明顯的抑制作用，說明納米銀5號抑制A549的增殖。
【權(quán)利要求】
1.一種治療肺癌的納米銀抗癌組合物，其特征在于，每Ikg所述組合物中含有如下重量的成份: 納米銀粉末12— 200 mg ； 卡波姆 700— 800 mg ；
三乙醇胺700— 800 mg ； 匍萄糖2.8 —3.2 g ； 其余為水； 所述納米銀粉末中銀的純度銀純度> 99.99%，銀顆粒粒徑為I一5nm，銀顆粒形狀為球形。
2.一種制備如權(quán)利要求1所述納米銀抗癌組合物的方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟: (1)按權(quán)利要求1所述的濃度要求準(zhǔn)備好納米銀粉末、卡波姆、三乙醇胺、葡萄糖和水；(2)將卡波姆加入占水總量1/2~2/3的水中，混合，使用超聲波分散器分散2~5min； (3)將納米銀粉末及三乙醇胺加入到經(jīng)步驟(2)分散處理的混合物中混合，使用超聲波分散器分散2~5min ；(4)將葡萄糖和剩余的水加入到經(jīng)步驟(3)分散處理的混合物中，再次分散I~3min； (5)待經(jīng)步驟(4)分散處理后的混合物冷卻至2~12°C時(shí)，將混合物放入超聲波霧化器中分散至霧狀物，用收集裝置將霧狀物收集后冷凝至液體，即得納米銀抗癌組合物。
3.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，步驟(2)中超聲波分散器的頻率為2段頻率:16 ~24KHZ。
4.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，步驟(3)中超聲波分散器的頻率為5段頻率:40 ~65KHZ。
5.如權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，步驟(4)中超聲波分散器的頻率為4段頻率:30 ~40KHZ。
6.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，步驟(5)中超聲波霧化器的頻率為15段頻率:120 ~180 KHZ0
7.如權(quán)利要求1所述納米銀抗癌組合物在制備治療肺癌藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號】A61K33/38GK103933067SQ201410194184
【公開日】2014年7月23日 申請日期:2014年5月9日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月9日
【發(fā)明者】劉進(jìn)軍, 司徒偉怡, 李強(qiáng)柏 申請人:湖南省輕工投資有限公司