一種甲氨喋呤前藥及其膠束制劑和制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及抗腫瘤藥物制劑領(lǐng)域，具體涉及一種防止惡性腫瘤生長和復(fù)發(fā)的甲氨喋呤前藥及其膠束制劑和制備方法。本發(fā)明甲氨喋呤(MTX)前藥靶向膠束制劑的制備方法，包括如下步驟：1)將DSPE-PEG-NH2溶于有機(jī)溶劑中，得溶液A；MTX溶于DMSO水溶液中，得到溶液B；將溶液A、B混合，得到溶液C；2)將溶液C透析去除雜質(zhì)，凍干得凍干品；3)將MTX-PEG-DSPE化合物凍干品用有機(jī)溶劑溶解，通過超聲乳化或透析法去除雜質(zhì)后凍干，消毒得MTX前藥靶向膠束制劑。本發(fā)明利用DSPE-PEG-NH2與MTX原料藥化學(xué)健合制備MTX前藥，然后進(jìn)一步制成膠束，粒徑在100nm左右，適合作為靜脈用靶向腫瘤制劑。
【專利說明】一種甲氨喋呤前藥及其膠束制劑和制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及抗腫瘤藥物制劑領(lǐng)域，具體涉及一種防止惡性腫瘤生長和復(fù)發(fā)的甲氨喋呤前藥及其膠束制劑和制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]甲氨喋呤(MTX)是一種葉酸類抗代謝藥劑，能與腫瘤細(xì)胞表面的葉酸受體進(jìn)行結(jié)合起到很好的靶向作用，常用于各種惡性腫瘤治療，也是常用的抗風(fēng)濕藥物。MTX在藥用上也有許多不利之處，治療腦部腫瘤時很少量能通過血腦屏障。本品可增加肝腎功能毒性，由于藥物作用機(jī)理是通過對二氫葉酸還原酶的抑制而達(dá)到阻礙腫瘤細(xì)胞DNA的合成，所以對正常的生物細(xì)胞也有藥物作用，毒副作用較大。
[0003]經(jīng)過兩親性高分子修飾的甲氨蝶呤前藥具有提高藥物的靶向性和藥物的生物利用度，減少藥物的毒副作用等優(yōu)點(diǎn)，而且自組裝形成的納米粒子作為藥物載體進(jìn)入體內(nèi)，可以有效地減少人體網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)(RES)巨噬細(xì)胞的吞噬。作為納米級的粒子能穿越細(xì)胞間隙，可通過人體最小的毛細(xì)血管及血腦屏障(BBB)，并被細(xì)胞組織吸收，納米粒子藥物載體可以運(yùn)載藥物到達(dá)靶向部位控制藥物釋放、減少藥物用量、增強(qiáng)藥物療效并降低藥物毒性。同時，納米粒子藥物系統(tǒng)可以避免藥物活性喪失，有利于藥物的貯藏和運(yùn)輸。因?yàn)榧{米粒子的諸多優(yōu)點(diǎn)，使其成為一種很有前途的藥物新劑型，故在癌癥的治療方面?zhèn)涫荜P(guān)注。
[0004]目前關(guān)于高分子前藥的報(bào)道越來越多，應(yīng)用越來越廣泛，本發(fā)明人之前申請的中國專利申請?zhí)枮?201310239345.8，名稱為:一種甲氨喋呤靶向納米粒緩釋制劑及其制備方法，其是將甲氨蝶呤化學(xué)交聯(lián)到高分子載體上，但該載體是MPEG-PLA，該制劑中的靶向納米粒子粒徑較大，一般大于200nm，屬于實(shí)體粒子，該粒子釋藥非常緩慢，比較適合作為腫瘤局部注射用，靜脈注射應(yīng)用受到一定的限制。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是:提供一種利用柔性分子載體制備的粒徑小，適合作為靜脈用靶向腫瘤制劑的甲氨喋呤前藥及其膠束制劑和制備方法。
[0006]為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為:提供一種甲氨喋呤前藥，其原料包括甲氨喋呤原料藥和載體材料，所述載體材料為dspe-peg-nh2。
[0007]本發(fā)明的另一技術(shù)方案為:提供一種甲氨喋呤前藥靶向膠束制劑的制備方法，包括如下步驟:
[0008]I)將DSPE-PEG-Nh2溶于有機(jī)溶劑中，得溶液A ；MTX溶于DMSO水溶液中，得到溶液B ;在溶液B中加入TEA和交聯(lián)劑，所述交聯(lián)劑為DCC和NHS，將溶液A、B混合，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下反應(yīng)12h,得到溶液C ；
[0009]2)將步驟I)所得溶液C依次置于磷酸鹽緩沖液和去離子水中透析去除雜質(zhì)，透析液凍干得到MTX-PEG-DSPE化合物凍干品；
[0010]3)將步驟2所得MTX-PEG-DSPE化合物凍干品用有機(jī)溶劑溶解，通過超聲乳化或透析法去除有機(jī)溶劑后凍干，消毒得MTX前藥靶向膠束制劑。
[0011]本發(fā)明的又一技術(shù)方案為:提供一種上述的甲氨喋呤前藥靶向膠束制劑的制備方法制備的甲氨喋呤前藥靶向膠束制劑。
[0012]本發(fā)明解決了現(xiàn)有技術(shù)中甲氨喋呤靶向納米粒子粒徑較大，釋藥非常緩慢，只適合作為腫瘤局部注射用，靜脈注射應(yīng)用受到一定限制的技術(shù)問題。利用柔性分子載體(DSPE-PEG-Nh2)與MTX原料藥化學(xué)健合制備MTX前藥，然后進(jìn)一步制成膠束，該膠束為柔性粒子，粒徑在IOOnm左右，適合作為靜脈用靶向腫瘤制劑，其靜脈注射具有靶向性強(qiáng)、長循環(huán)和低毒性的特點(diǎn)，使其更容易達(dá)到腫瘤組織發(fā)揮藥效。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0013]圖1為本發(fā)明實(shí)施例中DSPE-PEG-Nh2與MTX合成MTX-PEG-DSPE的簡要示意圖；
[0014]圖2為本發(fā)明實(shí)施例中MTX-DSPE-PEG的核磁共振圖譜，其中8.6,7.7,6.8是MTX的特征峰；
[0015]圖3為本發(fā)明實(shí)施例中MTX-DSPE-PEG和載體材料DSPE-PEG-NH2的紫外及可見分光光譜；
[0016]圖4為本發(fā)明實(shí)施例中MTX前藥靶向膠束制劑的透射電鏡照片，其標(biāo)尺為200nm ；
[0017]圖5為本發(fā)明實(shí)施例中MTX前藥靶向膠束制劑在不同pH的PBS緩沖液中的釋藥曲線圖；
[0018]圖6為本發(fā)明實(shí)施例中MTX前藥靶向膠束制劑腫瘤細(xì)胞靶向?qū)嶒?yàn)(包括激光共聚焦分析和流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn))的結(jié)果圖；
[0019]圖7為本發(fā)明實(shí)施例中MTX前藥膠束制劑與裸藥MTX的腫瘤細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖；
[0020]圖8為本發(fā)明實(shí)施例中MTX前藥靶向膠束在荷瘤裸鼠靜脈注射后的腫瘤靶向?qū)嶒?yàn)及結(jié)果圖。
【具體實(shí)施方式】
[0021]為詳細(xì)說明本發(fā)明的技術(shù)內(nèi)容、構(gòu)造特征、所實(shí)現(xiàn)目的及效果，以下結(jié)合實(shí)施方式并配合附圖詳予說明。
[0022]本發(fā)明使用的藥品名稱說明如表1:
[0023]表1[0024]
【權(quán)利要求】
1.一種甲氨喋呤前藥，其特征在于，其原料包括甲氨喋呤原料藥和載體材料，所述載體材料為 DSPE-PEG-Nh2。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的甲氨喋呤前藥，其特征在于，所述DSPE-PEG-Nh2中聚乙二醇的分子量為2000-5000道爾頓。
3.一種甲氨喋呤前藥靶向膠束制劑的制備方法，其特征在于，包括如下步驟: 1)將DSPE-PEG-Nh2溶于有機(jī)溶劑中，得溶液A；MTX溶于DMSO水溶液中，得到溶液B ；在溶液B中加入TEA和交聯(lián)劑，所述交聯(lián)劑為DCC和NHS，將溶液A、B混合，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下反應(yīng)12h，得到溶液C; 2)將步驟I)所得溶液C依次置于磷酸鹽緩沖液和去離子水中透析去除雜質(zhì)，透析液凍干得到MTX-PEG-DSPE化合物凍干品； 3)將步驟2所得MTX-PEG-DSPE化合物凍干品用有機(jī)溶劑溶解，去除有機(jī)溶劑雜質(zhì)后凍干，消毒得MTX前藥靶向膠束制劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的甲氨喋呤前藥靶向膠束制劑的制備方法，其特征在于，所述步驟I)中DSPE-PEG-Nh2中聚乙二醇的分子量為2000-5000道爾頓。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的甲氨喋呤前藥靶向膠束制劑的制備方法，其特征在于，所述步驟3)具體為: 將步驟2所得MTX-PEG-DSPE化合物凍干品有 機(jī)溶劑溶解，去離子水透析8h，透析液過濾濃縮后凍干，鈷射線消毒得到MTX前藥靶向膠束制劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的甲氨喋呤前藥靶向膠束制劑的制備方法，其特征在于，所述步驟3)具體為: 將步驟2所得MTX-PEG-DSPE化合物凍干品有機(jī)溶劑溶解，加水超聲乳化后過濾，濾液凍干，鈷射線消毒得MTX前藥靶向膠束制劑。
7.權(quán)利要求3所述的甲氨喋呤前藥靶向膠束制劑的制備方法，其特征在于，所述步驟I)和步驟3)中的有機(jī)溶劑為二甲基亞砜，二氯甲烷，丙酮或N，N-二甲基甲酰胺。
8.權(quán)利要求3所述的甲氨喋呤前藥靶向膠束制劑的制備方法，其特征在于，包括如下步驟: 所述步驟I)具體為:將200-600mg聚乙二醇分子量2000-5000道爾頓的DSPE-PEG-Nh2溶于 5-50mL DMF 中得溶液 A ;將 MTX 原料藥 15_40mg，TEA20-50 μ L, DCC15_40mg 和NHS6-30mg溶于DMSO中得到溶液B ;將溶液A、B混合，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下反應(yīng)12h，得到溶液C ； 所述步驟2)具體為:將C液轉(zhuǎn)移到最小通透8000道爾頓的透析袋內(nèi)，依次置于磷酸鹽緩沖液和去離子水中透析去除雜質(zhì)，所得透析液凍干得MTX-PEG-DSPE化合物凍干品； 所述步驟3)具體為:將步驟2所得MTX-PEG-DSPE化合物凍干品用有機(jī)溶劑溶解，通過超聲乳化或透析法去除有機(jī)溶劑后凍干，消毒得到MTX前藥靶向膠束制劑。
9.如權(quán)利要求3-8任一項(xiàng)所述的甲氨喋呤前藥靶向膠束制劑的制備方法制備的甲氨喋呤前藥靶向膠束制劑。
【文檔編號】A61K9/19GK103919738SQ201410181451
【公開日】2014年7月16日 申請日期:2014年4月30日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月30日
【發(fā)明者】侯振清, 藺金燕, 李巖秀, 李陽, 侯魯 申請人:廈門市殼聚糖生物科技有限公司