一種Aβ聚集抑制劑的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種Aβ聚集抑制劑，其特征在于它的氨基酸序列為：氨基端-CTGWYG-羧基端。本肽序列經(jīng)原子力顯微鏡掃描技術(shù)檢測(cè)，進(jìn)一步用細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)得到。它對(duì)導(dǎo)致阿爾茨海默病的主要毒性體-Aβ的聚集具有良好的抑制作用，可嘗試開(kāi)發(fā)為阿爾茨海默病治療藥物。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種Αβ聚集抑制劑
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及，特別是一種抗阿爾茨海默病的毒性體A β抑制劑。
【背景技術(shù)】
[0002]目前，全球至少有3500萬(wàn)人患有阿爾茨海默病，且每年的致死率正在上升。每年全球的總花費(fèi)估計(jì)達(dá)到2000億美元,研究表明,Αβ (Amyloidβ -peptide)寡聚體是老年癡呆癥病人體內(nèi)的顯著毒性體，因此抑制A β寡聚體的生成是阻止老年癡呆癥發(fā)生最有效的策略。然而，目前無(wú)有效方法用于Αβ抑制劑設(shè)計(jì)，主要面對(duì)三方面的嚴(yán)重挑戰(zhàn):1、缺少有效的高通量篩選方法:實(shí)驗(yàn)篩選方法需要合成和純化Αβ，這對(duì)于大量化合物的篩選無(wú)疑是費(fèi)時(shí)、昂貴且不現(xiàn)實(shí)。2、缺少Αβ寡聚體的高分辨率結(jié)構(gòu):Αβ寡聚體呈亞穩(wěn)態(tài)，因此利用X-射線(xiàn)衍射和NMR技術(shù)很難得到其結(jié)構(gòu)，使基于結(jié)構(gòu)的合理藥物設(shè)計(jì)難以實(shí)現(xiàn)。3、缺少對(duì)Αβ自組裝機(jī)制的理解:包括肽的哪一部分構(gòu)成在淀粉樣纖維生成過(guò)程中起著關(guān)鍵作用；種子和纖維生成相關(guān)的路徑與中間體是什么；Αβ是否親和到特定的受體;Αβ如何生成毒性體以及毒性的機(jī)制是什么。因此，設(shè)計(jì)新型Aβ抑制劑對(duì)老年癡呆癥診斷和治療具有重要的實(shí)踐意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]有鑒于此，為了解決上述問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種Αβ聚集抑制劑，它的氨基酸序列為:氨基端-CTGWYG-羧基端，可嘗試開(kāi)發(fā)為抗阿爾茨海默病治療藥物。 【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0004]為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚，下面將結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)描述，其中:
[0005]圖1是新設(shè)計(jì)肽CTGWYG對(duì)A β抑制作用的原子力顯微鏡掃描結(jié)果。
【具體實(shí)施方式】
[0006]I)肽對(duì)Αβ抑制作用的原子力顯微鏡掃描實(shí)驗(yàn)；
[0007]用單光束硅懸臂探測(cè)器，在輕敲模式(TappingMode)模式下測(cè)定，至少掃描4個(gè)區(qū)域以確保結(jié)構(gòu)正確采樣。圖1為新設(shè)計(jì)肽CTGWYG對(duì)Αβ抑制作用的原子力顯微鏡掃描結(jié)果，可看出，經(jīng)過(guò)2天，CTGWYG對(duì)Αβ具有明顯的抑制作用。此肽可作為Αβ聚集抑制劑，其序列為:氨基端-CTGWYG-羧基端。
[0008]
[0009]圖1新設(shè)計(jì)肽CTGWYG對(duì)A β抑制作用的原子力顯微鏡掃描結(jié)果(Tapping模式，A為對(duì)照實(shí)驗(yàn)(無(wú)抑制劑)，Αβ的濃度為1μπι，Β中Αβ的濃度為20 μ Μ，六肽的濃度為5(^11，存放2天，371:)
[0010]e)細(xì)胞毒性試驗(yàn)；[0011]用Polyanionic dye calcein對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行綠色突光標(biāo)記，并測(cè)定其活性，ethidium-Ι染色對(duì)死細(xì)胞進(jìn)行紅色熒光標(biāo)記。相對(duì)于由Aβ導(dǎo)致的細(xì)胞失活，加入CTGWYG和新制備的A β與細(xì)胞共同培養(yǎng)后，對(duì)應(yīng)的死亡與成活細(xì)胞率為0.678，相對(duì)于沒(méi)有加入肽的對(duì)照實(shí)驗(yàn)可明顯地減少細(xì)胞凋亡。當(dāng)肽與存放24小時(shí)的A β溶液與細(xì)胞進(jìn)行混合后，經(jīng)檢測(cè)得到死與活細(xì)胞比率為0.802。
[0012]以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例，并不用于限制本發(fā)明，顯然，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以對(duì)本發(fā)明進(jìn)行各種改動(dòng)和變型而不脫離本發(fā)明的精神和范圍。這樣，倘若本發(fā)明的這些修改和變型屬于本發(fā)明權(quán)利要求及其等同技術(shù)的范圍之內(nèi)，則本發(fā)明也意圖包含這些改動(dòng)和變型在內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種Αβ聚集 抑制劑，其特征在于它的氨基酸序列為:氨基端-CTGWYG-羧基端。
【文檔編號(hào)】A61P25/28GK103992379SQ201410100021
【公開(kāi)日】2014年8月20日 申請(qǐng)日期:2014年3月18日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月18日
【發(fā)明者】梁桂兆, 喬源, 王秋明, 鄭潔 申請(qǐng)人:重慶大學(xué)