乳清蛋白組合物及其在美容中的用途
【專利摘要】本發(fā)明提供一種以乳清蛋白為核心的組合物，具體是以乳清蛋白納米粒為主要材質(zhì)，其包含0.1～50重量％的乳清蛋白，0～1重量％的表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(EGF)，所述組合物可單獨(dú)使用，和/或作為載體及傳遞介質(zhì)，負(fù)載表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子生物活性蛋白進(jìn)一步制備成化妝品原料或活性添加成分，并可進(jìn)一步制備成泡沫劑、水劑、乳劑、凝膠劑或膏霜?jiǎng)?yōu)選地，所述乳清蛋白以納米粒形式存在，其粒徑為100nm～2μm，優(yōu)選100nm～500nm，并且所述納米粒負(fù)載有EGF，形成負(fù)載有EGF的乳清蛋白納米粒。本發(fā)明還提供制備負(fù)載有EGF的乳清蛋白納米粒的方法。
【專利說明】乳清蛋白組合物及其在美容中的用途
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明提供一種以乳清蛋白為核心的組合物，具體是以乳清蛋白納米粒為主要材質(zhì)，其可單獨(dú)使用，和/或作為載體及傳遞介質(zhì)，負(fù)載有表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(EGF)生物活性蛋白進(jìn)一步制備成化妝品原料或活性添加成分，并可進(jìn)一步制備成泡沫劑、水劑、乳劑、凝膠劑、膏霜?jiǎng)?。屬于美容護(hù)膚品的【技術(shù)領(lǐng)域】。
技術(shù)背景
[0002]乳清蛋白(whey protein)被稱為蛋白之王，是從牛奶中提取的一種蛋白質(zhì)，牛乳中87%是水分，13%是乳固體；乳固體中37%是乳糖，30%是脂肪，27%是乳蛋白。而乳蛋白中80%是酪蛋白，20%是乳清蛋白，后者是牛乳中的精華。以其純度高、吸收率高、氨基酸組成最合理等諸多優(yōu)勢(shì)被推為“蛋白之王”。它是由干酪生產(chǎn)過程中所產(chǎn)生的副產(chǎn)品乳清經(jīng)過特殊工藝濃縮精制而成的一類蛋白質(zhì)，乳清濃縮蛋白(whey protein concentration,WPC)是指從巴氏殺菌的乳清中盡量去除非蛋白質(zhì)成分，蛋白質(zhì)含量在34%~82%的產(chǎn)品[張丹鳳.乳清蛋白的特性及其在乳制品生產(chǎn)中的應(yīng)用[J].中國(guó)乳業(yè)，2007 (3):27-28.]。乳清蛋白中含有β_乳球蛋白、α-乳白蛋白、乳鐵蛋白、免疫球蛋白和乳過氧化物酶等人體必需的多種活性蛋白，且配比合理，接近人體的需求比例，是人體生長(zhǎng)、發(fā)育、抗衰老等生命活動(dòng)不可缺少的精華物質(zhì)。其中，β_乳球蛋白具有增強(qiáng)細(xì)胞清除自由基，提高細(xì)胞膜抗氧化性的能力；α -乳白蛋白與乳鐵蛋白等成分富含胱氨酸殘基，能促進(jìn)GSH的合成，維持細(xì)胞和組織的GSH水平，并具有在細(xì)胞分裂過程中穩(wěn)定DNA的功能，具有營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞，調(diào)節(jié)細(xì)胞正常代謝，避免表皮細(xì)胞的過早凋亡和角質(zhì)細(xì)胞的堆積，起到美白嫩膚的作用。
[0003]作為天然乳液的典型例子，牛奶從古代就被用于化妝品，也被認(rèn)為是中國(guó)歷史上第一個(gè)“美容秘密”。古埃及艷后克利歐佩特拉和許多公主都用牛奶沐浴為了保持她們皮膚的柔軟。后來，印第安女性用牛奶來做成可撕掉的美容面膜，用于她們的面部和身體，也把牛奶混合于植物制品里來清潔、純化和滋養(yǎng)她們的皮膚和頭發(fā)。法國(guó)Lactofil.GatteffoSSe公司開發(fā)了 Lactofil等一系列以牛奶乳清蛋`白質(zhì)衍生物為基礎(chǔ)的化妝品。這一系列包括三種產(chǎn)品=Lactofil Moist，不僅含有乳糖，脂肪含量低，具有滋養(yǎng)和保濕的活性，保濕性能優(yōu)越；Lactofil Foam，天然的發(fā)泡增強(qiáng)劑，富含酪蛋白酸鈉，提供保濕和發(fā)泡特性，用于身體護(hù)理，頭發(fā)護(hù)理和化妝品；Lactofil Sensitive,具有使敏感肌膚正?；凸袒幕钚?，能在皮膚上能起到緩沖的作用，保持皮膚的濕度平衡進(jìn)而帶來皮膚緊實(shí)的效果。上述產(chǎn)品已經(jīng)上市且得到了廣泛的應(yīng)用。
[0004]雀巢技術(shù)公司的已授權(quán)的發(fā)明專利CN 101031208，發(fā)明名稱為“納米微?；娜榍宓鞍住?對(duì)應(yīng)的國(guó)際公布為W02006/034857)，該專利技術(shù)通過將乳清蛋白水溶液pH值從
5.6調(diào)整至6.4或者在保持pH值恒定的同時(shí)調(diào)節(jié)離子強(qiáng)度并且將水溶液加熱80°C至95°C之間的溫度持續(xù)10秒至30分鐘，以得到微粒大小小于I μ m的納米微?；榍宓鞍?。
[0005]然而，這一技術(shù)需要調(diào)整pH值和進(jìn)行高溫變性操作，這些對(duì)蛋白的生物活性具有不良影響。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]為克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，本發(fā)明分別采用溶劑蒸發(fā)法和乳化交聯(lián)法制備負(fù)載有表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(EGF)(例如，重組人表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(rhEGF))的乳清蛋白納米粒，無須調(diào)整PH值和進(jìn)行高溫變性操作，避免了劇烈條件對(duì)蛋白生物活性的影響。這是本發(fā)明的獨(dú)特之處。
[0007]本發(fā)明還公開了一種以乳清蛋白為核心的組合物，具體是以乳清蛋白納米粒為主要材質(zhì)，其可單獨(dú)使用，和/或作為載體及傳遞介質(zhì)，負(fù)載表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(EGF)生物活性蛋白進(jìn)一步制備成化妝品原料或活性添加成分，并可進(jìn)一步制備成泡沫劑、水劑、乳劑、凝膠劑、膏霜?jiǎng)?。所述組合物具有滋潤(rùn)、保濕、祛角質(zhì)、抗衰、抗氧化的作用，乳清蛋白納米粒還能使攜帶的活性成分深入深層皮膚，清除皮膚內(nèi)部自由基，活化深層皮膚細(xì)胞，特別適用于敏感肌膚，起到重建表皮，修復(fù)敏感肌膚，抗皺嫩膚的作用。
[0008]在本發(fā)明的第一個(gè)方面，提供了一種以乳清蛋白為核心的組合物，其包含0.1~50重量％的乳清蛋白，O~I重量^^9EGF。
[0009]其中所述乳清蛋白來源于哺乳動(dòng)物，優(yōu)選來源于牛，可以是市售的乳清蛋白分離物和濃縮物，特別優(yōu)選是蛋白質(zhì)含量在34%~82%的乳清濃縮蛋白。
[0010]其中所述乳清蛋白是以納米粒的形態(tài)存在，其粒徑為IOOnm~2 μ m,優(yōu)選IOOnm~500nmo
[0011]其中所述EGF優(yōu)選為基因工程技術(shù)獲得的重組人EGF(rhEGF)，其氨基酸序列為SEQ ID NO:1 所示:
[0012]Asn Ser Asp Ser Glu Cys Pro Leu Ser His Asp Gly Tyr Cys Leu His Asp GlyVal Cys Met Tyr He Glu `Ala Leu Asp Lys Tyr Ala Cys Asn Cys Val Val Gly Tyr IleGly Glu Arg Cys Gln Tyr Arg Asp Leu Lys Trp Trp Glu Leu Arg(53aa,SEQ ID NO:1)。
[0013]在本發(fā)明的第二個(gè)方面，提供了一種以乳清蛋白納米粒為載體的負(fù)載EGF的活性半成品(在本發(fā)明中還稱為EGF乳清蛋白納米粒)及其制備方法。
[0014]所述EGF乳清蛋白納米粒中各組分的質(zhì)量百分比如下:
[0015]

EGF 0.001%-0.005%:

乳淸蛋 G 0.1%-10%；
溶劑 15-40%;
脫水劑 50%-80%;

交聯(lián)劑().()丨％-().1%;
[0016]其中所述溶劑為蒸餾水或NaCl溶液，優(yōu)選為IOmM NaCl溶液；
[0017]其中所述脫水劑為甲醇、乙醇或丙酮中的任一種，優(yōu)選乙醇，更優(yōu)選95%的乙醇；
[0018]其中所述交聯(lián)劑為戊二醛、甲基聚乙烯-右旋糖苷中的任一種，優(yōu)選戊二醛。
[0019]本發(fā)明的EGF乳清蛋白納米?？刹捎孟率霾襟E制備:
[0020]其中所述EGF乳清蛋白納米粒各組分的質(zhì)量百分比如下:
[0021]
【權(quán)利要求】
1.一種以乳清蛋白為核心的組合物，其包含0.1~50重量％的乳清蛋白，O~I重量％的表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子EGF。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述乳清蛋白來源于哺乳動(dòng)物，優(yōu)選來源于牛，特別優(yōu)選是蛋白質(zhì)含量在34%~82%的乳清濃縮蛋白。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述乳清蛋白是以納米粒的形態(tài)存在，其粒徑為 IOOnm ~2 μ m,優(yōu)選 IOOnm ~500nm。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中EGF為通過基因工程技術(shù)獲得的重組人EGF，，其氨基酸序列為SEQ ID Ν0:1ο
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述乳清蛋白以納米粒形式存在，并且所述納米粒負(fù)載有EGF，形成負(fù)載有EGF的乳清蛋白納米粒，其中各組分的質(zhì)量百分比如下:
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的組合物，其中所述溶劑為蒸餾水或NaCl溶液，優(yōu)選為IOmMNaCl溶液。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的組合物，其中所述脫水劑為甲醇、乙醇或丙酮中的任一種，優(yōu)選為乙醇，更優(yōu)選為95%的乙醇。
8.按照權(quán)利要求5所述的組合物，其中所述交聯(lián)劑為戊二醛、甲基聚乙烯-右旋糖苷中的任一種，優(yōu)選為戍二醒。
9.一種制備權(quán)利要求5的負(fù)載有EGF的乳清蛋白納米粒的方法，所述方法包括下述步驟: (1)精密稱取處方量的乳清蛋白，溶解于溶劑中； (2)精密稱取EGF加入步驟⑴獲得的乳清蛋白溶液中，室溫?cái)嚢柘乱?.5ml/min的速率持續(xù)加入脫水劑，再加入交聯(lián)劑，25°C交聯(lián)固化12h ； (3)減壓濃縮除去乙醇，得到乳清蛋白納米粒-EGF膠體溶液； (4)將步驟(3)得到的乳清蛋白納米粒-EGF膠體溶液經(jīng)超速冷凍離心I~3h，得到的沉淀物即為所述負(fù)載有EGF的乳清蛋白納米粒組合物。
10.一種制備權(quán)利要求5的負(fù)載有EGF的乳清蛋白納米粒的方法，所述方法包括下述步驟: (1)將EGF母液與預(yù)熱到40°C的乳清蛋白溶液混合后，快速加入I~50U/g轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶并漩渦震蕩使其分散均勻， (2)將步驟(1)的混合液加入到盛有預(yù)熱到40°C的大豆油的錐形瓶中，然后在40°C在攪拌下反應(yīng)60~240min，待混合物液滴在酶的作用下轉(zhuǎn)化為凝膠顆粒后離心，收集微膠囊顆粒形式的沉淀物并用林格氏試劑清洗兩次，再次離心，重新收集膠體顆粒形式的沉淀物，得到所述負(fù)載有EGF的乳清蛋白納米粒。
11.一種抗衰嫩膚系列化妝品，其包含權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的組合物。
【文檔編號(hào)】A61K8/64GK103705395SQ201410004016
【公開日】2014年4月9日 申請(qǐng)日期:2014年1月3日 優(yōu)先權(quán)日:2014年1月3日
【發(fā)明者】黃亞東, 王麗杰, 項(xiàng)琪, 貝煜 申請(qǐng)人:廣州瑾洋化妝品有限公司, 廣州暨南大學(xué)醫(yī)藥生物技術(shù)研究開發(fā)中心