裝置和方法
【專利摘要】一種裝置，包含外罩和細(xì)胞塊材料，其中外罩有一個(gè)第一末端，該第一末端適于通過(guò)氣密配合接合取樣工具，細(xì)胞塊材料的至少一部分位于外罩內(nèi)，以使得在使用中細(xì)胞塊材料和取樣工具處于流體連接，且細(xì)胞塊材料從外罩的第一末端伸出，以使得在使用中細(xì)胞塊材料延伸到取樣工具內(nèi)。
【專利說(shuō)明】裝置和方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及裝置、細(xì)胞塊試樣、獲得細(xì)胞塊試樣的方法、以及同時(shí)獲得細(xì)針抽吸 (FNA)和多個(gè)細(xì)胞塊試樣的方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 在醫(yī)學(xué)診斷期間，經(jīng)常有必要分析從病人取得的細(xì)胞試樣，例如為了診斷腫瘤。這 樣的診斷方法通常使用細(xì)胞學(xué)檢查或組織學(xué)檢查來(lái)執(zhí)行。細(xì)胞學(xué)檢查涉及：涂片或以其他 方式將細(xì)胞的液體試樣沉積到載玻片上，且然后在顯微鏡下檢查細(xì)胞。組織學(xué)檢查涉及：取 得固體組織試樣，固定該試樣，加工該試樣，切取一個(gè)非常薄的部分到載玻片上，且然后在 顯微鏡下檢查該部分。
[0003] -種從病人取得細(xì)胞試樣用于細(xì)胞學(xué)檢查的方法是細(xì)針抽吸（FNA)。FNA是一種 診斷流程，通常用于勘測(cè)腫塊或團(tuán)塊，諸如在對(duì)乳腺癌和甲狀腺癌的診斷中。在這項(xiàng)技術(shù) 中，借助于具有空心的細(xì)針諸如皮下針頭，從病變處抽吸單個(gè)細(xì)胞和小細(xì)胞復(fù)形。針頭被導(dǎo) 入病變處并攪動(dòng)以分離病變處的細(xì)胞。在皮下組織和外部大氣壓之間有相應(yīng)地從高到低的 壓力差，通過(guò)注射器吸取可使該壓力差變大。由于癌細(xì)胞之間比健康細(xì)胞之間更低的粘附 力水平，可增大試樣中癌細(xì)胞濃度。取得細(xì)胞試樣之后，通過(guò)例如將細(xì)胞噴射到載玻片上來(lái) 檢查細(xì)胞材料，在載玻片上將細(xì)胞涂片、固定、染色并用顯微鏡對(duì)細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞學(xué)檢查。
[0004] 用于分析細(xì)胞的某些診斷技術(shù)最好是對(duì)細(xì)胞塊實(shí)行。細(xì)胞塊是被制成固體的液體 細(xì)胞學(xué)試樣。細(xì)胞塊通常從FNA標(biāo)本制備，或者從漿液狀流體標(biāo)本如胸膜流體（來(lái)自肺周 圍的胸膜腔）或腹水流體（來(lái)自腹部器官周圍的腔）制備。
[0005] 由液體細(xì)胞試樣制備細(xì)胞塊的已知方法包括，將濃縮細(xì)胞的顆粒（pellet) 包裹到薄紙里，或向細(xì)胞的液體濃縮物中加入不同的固化材料如瓊脂和凝血酶。 HistoGel (Thermo Scientific,拉夫堡，英國(guó)）是一種市場(chǎng)上可買到的細(xì)胞塊固化劑，其 中主要成分是羥乙基瓊脂糖。將這些固化劑作為液體加入到試樣中，然后任由固化。上述 已知方法描述在 Koss 的 "diagnostic cytology and its histopathologic bases"，第 2卷，Leopold G.Koss，Lippincott Williams&Wilkins，2006 年，第 1590-1592 頁(yè)，且在 US 5, 137, 710 中描述。
[0006] 固化后細(xì)胞塊可被固定并經(jīng)過(guò)石蠟加工。石蠟加工是一種廣泛用于制備用于顯微 鏡檢查的有機(jī)組織試樣的技術(shù)。有機(jī)組織試樣通常含有水，且此技術(shù)涉及用石蠟代替水。實(shí) 現(xiàn)用石蠟代替水通常通過(guò)首先用一種親水性有機(jī)溶劑如乙醇代替水。這種有機(jī)溶劑之后通 過(guò)多個(gè)步驟被代替，這些步驟通常涉及伴隨著熱的液態(tài)石蠟（熔點(diǎn)在從47°C到64°C的范圍 內(nèi)）使用二甲苯。一旦材料經(jīng)石蠟加工后冷卻，可以把材料切片成很薄的切片，通常約3微 米厚，不會(huì)造成材料破碎，因?yàn)槭瀻椭谓M織的結(jié)構(gòu)。這項(xiàng)技術(shù)的概覽在"The science of laboratory diagnosis" 給出，David Burnett，John Crocker, John ffiley&Sons, 2005 年，第7-11頁(yè)。
[0007] Mayall F. G.等人于 2011 年在 J. Clin. Pathol 第 64 卷第 818-819 頁(yè)描述了一種 使用明膠海綿由漿液流體標(biāo)本制造細(xì)胞學(xué)細(xì)胞塊，這涉及在通用的容器中將漿液流體離心 旋轉(zhuǎn)，使用移液器去除上清液，以在容器底部處留置細(xì)胞沉積物，且將這些細(xì)胞吸收到一塊 明膠海綿上，然后用乙醇或甲醛固化。漿液流體試樣通常不是通過(guò)FNA技術(shù)獲得，而是通過(guò) 插入導(dǎo)液管到胸膜腔或腹腔中。
[0008] 細(xì)胞塊切片允許研宄試樣的更多的形態(tài)學(xué)細(xì)節(jié)，例如，異常組織的架構(gòu)或細(xì)胞的 細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核的微細(xì)節(jié)。另外，細(xì)胞塊切片允許對(duì)輔助的診斷測(cè)試諸如免疫組織化學(xué)和 原位雜交進(jìn)行評(píng)估。例如，經(jīng)常需要細(xì)胞塊免疫組織化學(xué)和其他分子研宄，以將最初通過(guò) FNA細(xì)胞學(xué)診斷的腫瘤的特征完全表征。這些分子探查變得越來(lái)越重要，因?yàn)樗鼈兇_定對(duì)腫 瘤的治療。例如，藥物曲妥珠單抗（赫賽汀，Hereeptin? )對(duì)于治療乳腺癌有效，但只在 癌細(xì)胞表現(xiàn)出人類表皮生長(zhǎng)因子受體2 (HER2)的擴(kuò)增時(shí)有效。在計(jì)劃治療之前，必須使用 免疫組織化學(xué)和原位雜交對(duì)癌細(xì)胞進(jìn)行關(guān)于HER2擴(kuò)增的測(cè)試，且此測(cè)試最好是使用細(xì)胞 塊材料而不是細(xì)胞涂片材料完成。
[0009] 因此，在需要組織病理學(xué)檢查或分子研宄的那些情況下，經(jīng)常有必要從一個(gè)病人 身上取出兩個(gè)分立的細(xì)胞試樣：用于細(xì)胞病理學(xué)檢查的FNA試樣，且然后或是用于制備成 細(xì)胞塊的另一個(gè)FNA試樣、或是活組織檢查。活組織檢查可以是開放性活組織檢查（通常 需要全身麻醉和入院），也可以是芯活檢（core biopsy)。芯活檢往往可以不經(jīng)全身麻醉或 入院而執(zhí)行，但FNA比芯活檢有一些顯著的優(yōu)點(diǎn)。用來(lái)獲得細(xì)胞塊的芯活檢儀器直徑比FNA 針頭大幾倍；用在芯活檢中的針頭直徑最大達(dá)3. 2_，相反，F(xiàn)NA取樣中最經(jīng)常使用的針具 有的外徑從0. 4_到0. 8_。值得注意的是，取樣針頭直徑的增加和并發(fā)癥的風(fēng)險(xiǎn)增加有 關(guān)，并發(fā)癥如針道種植，局部出血和感染。此外，芯活檢比FNA痛苦得多，并且芯活檢需要局 部麻醉。FNA往往無(wú)需任何麻醉就可實(shí)行。
[0010] 本發(fā)明的目的之一是提供一種系統(tǒng)，其使得在FNA過(guò)程中，在收集FNA試樣的相同 時(shí)間（也就是同時(shí)）收集細(xì)胞塊試樣成為可能。這可在可得的試樣有限時(shí)提高診斷的精確 度，因?yàn)檫@樣試樣材料幾乎沒(méi)有浪費(fèi)。這也免除了使用大直徑芯活檢針頭的需要，也減少了 諸如針道種植、局部出血和感染等并發(fā)癥的風(fēng)險(xiǎn)，使得病人的不舒適是有限的。這也減少了 取樣過(guò)程的時(shí)間，并因此減輕對(duì)病人的壓力，且提高診斷流程的效率。
[0011] 本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種獲得細(xì)胞塊試樣的改進(jìn)方法，其可以提高可用于 獲取細(xì)胞塊試樣的簡(jiǎn)易度和速度。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0012] 根據(jù)本發(fā)明的第一方面，提供一種包括外罩和細(xì)胞塊材料的裝置，其中外罩有一 個(gè)第一末端，適于通過(guò)氣密配合與取樣工具接合，細(xì)胞塊材料的至少一部分位于外罩內(nèi)， 以使得在使用中細(xì)胞塊材料與取樣工具處于流體連接，且細(xì)胞塊材料從外罩的第一末端伸 出，以使得在使用中細(xì)胞塊材料延伸到取樣工具里。
[0013] 細(xì)胞塊材料是一種用于形成細(xì)胞塊的吸收劑材料。它優(yōu)選是一種在固體基質(zhì)中包 含腔的物質(zhì)。它在形式上可以是開孔泡沫，纖維材料或粉末。對(duì)于粉末的情況，細(xì)胞塊材料 被形成以摹擬固體，例如通過(guò)提供薄膜材料以對(duì)粉末包裹和塑形。
[0014] 細(xì)胞塊材料能夠?qū)⒎枪腆w材料吸收到它的腔，非固體材料例如液體或半液體的體 液和/或組織試樣。
[0015] 細(xì)胞塊材料是這樣類型的材料，它可用來(lái)為顯微鏡檢驗(yàn)和分子探查制造高質(zhì)量切 片，通常通過(guò)石蠟加工形成塊體（block)。為了細(xì)胞塊材料成功地進(jìn)行石蠟加工，且為了制 造出高質(zhì)量切片，需要石蠟不僅能夠滲透入細(xì)胞塊材料中的腔，而且能夠滲透入細(xì)胞塊材 料中的腔壁的固體基質(zhì)。如果這未達(dá)成，則切片易于破碎和解體。在一種實(shí)施方案中，細(xì)胞 塊材料因此應(yīng)該能夠吸收石蠟到它的固體基質(zhì)中。
[0016] 對(duì)于石蠟加工，為使石蠟滲入細(xì)胞塊材料的固體基質(zhì)中，希望在加工開始時(shí)有液 體例如水存在于細(xì)胞塊材料的固體基質(zhì)中。之后加工過(guò)程將石蠟吸取到細(xì)胞塊材料的固體 基質(zhì)中。在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞塊材料因此應(yīng)該也能夠吸收水到它的固體基質(zhì)中。另外， 在石蠟加工期間，細(xì)胞塊材料不應(yīng)崩塌、溶解或熔化。以這些方式，細(xì)胞塊材料理想地、接近 地摹擬器官組織的特性。因此，細(xì)胞塊材料優(yōu)選具有在大約64°C以上的熔點(diǎn)。細(xì)胞塊材料 也應(yīng)對(duì)石蠟加工中使用的溶劑有抗性；如上所解釋的，這些溶劑可包括例如水、親水的有機(jī) 溶劑（如乙醇）和/或二甲苯。
[0017] 取樣工具可以是經(jīng)由可將細(xì)胞試樣吸取到裝置外罩內(nèi)的任何工具。實(shí)施例包括 針、移液吸頭和管。
[0018] 外罩有一個(gè)第一末端，適于接合取樣工具。取決于取樣工具的選擇，該取樣工具可 以有一個(gè)特定的部件，該部件適于接合外罩的第一末端。例如，第一末端可適于接合針頭接 口（needle hub)，這個(gè)針頭接口可形成針頭的一部分。如可用于醫(yī)療和/或外科手術(shù)裝置 的針頭通常包括針頭接口和針軸。在使用中，通常通過(guò)針軸將細(xì)胞試樣吸取到針頭接口中。
[0019] 在外罩的第一末端適于接合針頭接口情況下，第一末端因此適于接合針頭。第一 末端也可適于接合另一裝置，如內(nèi)窺鏡或管，這種裝置可有助于提取組織或流體試樣。
[0020] 術(shù)語(yǔ)"流體連接"，作為在使用中細(xì)胞塊材料和取樣工具之間（例如，細(xì)胞塊材料 和針頭接口之間）的流體連接，暗示著細(xì)胞塊材料以這樣的方式定位：在使用中，進(jìn)入取樣 工具的流體（例如，從針軸進(jìn)入針頭接口的流體）進(jìn)入并與細(xì)胞塊材料接觸。當(dāng)裝置在負(fù) 壓力（例如，拉動(dòng)附接在裝置上的注射器產(chǎn)生的負(fù)壓力）下在使用中，任何從取樣工具（例 如針頭）進(jìn)入裝置的空氣將流動(dòng)經(jīng)過(guò)例如針頭接口并進(jìn)入細(xì)胞塊材料。類似地，在負(fù)壓力 下經(jīng)過(guò)取樣工具（例如針頭）進(jìn)入裝置的任何其它非固體材料，例如液體或半液體的體液 和/或組織試樣，將流過(guò)例如針頭接口并且進(jìn)入細(xì)胞塊材料。
[0021] 細(xì)胞塊材料從外罩的第一末端伸出，以使得在使用中細(xì)胞塊材料延伸進(jìn)入取樣工 具中，例如進(jìn)入針頭接口。對(duì)于針頭的情況，這允許細(xì)胞塊材料從裝置外罩延伸，以與座落 于針軸內(nèi)部的針軸末端相緊鄰或相接觸，這意味著從針軸冒出的任何試樣可被細(xì)胞塊材料 吸收，且因此幾乎沒(méi)有浪費(fèi)試樣材料。
[0022] 根據(jù)本發(fā)明的第一方面的裝置，允許在實(shí)行FNA的同時(shí)直接收集細(xì)胞塊試樣。在 正常的FNA操作中，當(dāng)把試樣噴出到載玻片上以供細(xì)胞涂片分析時(shí)，通常有大量的試樣遺 留在針頭的接口中。本發(fā)明的裝置通過(guò)能夠在針頭接口處捕獲來(lái)自針頭的溢流，在FNA過(guò) 程期間收集這種材料。因此，本發(fā)明的裝置允許在實(shí)行FNA的同時(shí)，以很少的額外努力和很 少降低甚至沒(méi)有降低的FNA細(xì)胞涂片試樣的質(zhì)量收集細(xì)胞塊試樣。就常規(guī)的組織學(xué)標(biāo)本來(lái) 說(shuō)，可在獲得的細(xì)胞塊上進(jìn)行免疫組織化學(xué)和其他的分子探查。在單次過(guò)程中，在同一 FNA 嘗試中，可同時(shí)收集足夠的細(xì)胞學(xué)涂片標(biāo)本和細(xì)胞塊標(biāo)本。
[0023] 如果從患者（subject)直接獲得細(xì)胞試樣，本發(fā)明的裝置可允許以增強(qiáng)解釋準(zhǔn)確 性的方式將試樣收集到細(xì)胞塊材料內(nèi)。例如，收集FNA試樣的標(biāo)準(zhǔn)方法會(huì)導(dǎo)致在過(guò)程的不 同階段收集到的所有材料混合在一起；通常地，在過(guò)程初期可能會(huì)獲得高質(zhì)量診斷細(xì)胞試 樣，但隨著取樣的進(jìn)行，試樣愈加變得被出血污染。一個(gè)這樣的例子是甲狀腺膠樣囊腫的穿 刺：過(guò)程早期可獲得清澈的膠樣流體，但隨后流體變得出血。使用標(biāo)準(zhǔn)方法，出血將在檢驗(yàn) 時(shí)遍及整個(gè)試樣混合，造成誤導(dǎo)的印象一一整個(gè)試樣都是出血的。然而，當(dāng)使用根據(jù)本發(fā)明 的第一方面的裝置時(shí)，試樣可被留置在細(xì)胞塊材料里，以使得早的試樣離取樣工具最遠(yuǎn)，而 晚的試樣離取樣工具最近。
[0024] 在根據(jù)本發(fā)明的第一方面的裝置中的細(xì)胞塊材料也可用作局部過(guò)濾器。較大的顆 ?？梢蚤_始停留在最靠近取樣工具的細(xì)胞塊材料中，而較小的顆粒和流體更進(jìn)一步滲入細(xì) 胞塊材料內(nèi)。在細(xì)胞塊材料中將細(xì)胞按尺寸分開對(duì)于診斷的目的可以是有用的，因?yàn)樗?例如提供關(guān)于一種類型腫瘤的信息。
[0025] 在一個(gè)實(shí)施方案中，外罩的第一末端適于接合針頭接口。這導(dǎo)致了包含外罩和細(xì) 胞塊材料的裝置，其中外罩有一個(gè)第一末端，該第一末端適于通過(guò)氣密配合來(lái)接合針頭接 口，細(xì)胞塊材料的至少一部分位于外罩內(nèi)，以使得，在使用中細(xì)胞塊材料與針頭接口處于流 體連接，且細(xì)胞塊材料從外罩的第一末端伸出，以使得在使用中細(xì)胞塊材料延伸到針頭接 口中。
[0026] 在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞塊材料是一種聚合物材料。
[0027] 在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞塊材料是一種開孔泡沫。這種泡沫是在固體基質(zhì)內(nèi)含有 互連的細(xì)胞或腔（氣孔）的物質(zhì)。在一個(gè)實(shí)施方案中，腔具有的氣孔尺寸為最高達(dá)Imm或 0. 5mm。在一個(gè)實(shí)施方案中，腔具有的氣孔尺寸為至少0. 1mm。在一個(gè)實(shí)施方案中，腔具有的 氣孔尺寸為0. Imm至1mm，或0. Imm至0. 5mm。
[0028] 在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞塊材料是一種合成材料，例如，合成泡沫。合適的合成泡 沫可提供很多勝過(guò)生物泡沫的優(yōu)點(diǎn)，例如幾乎沒(méi)有攜帶朊病毒的風(fēng)險(xiǎn)，更容易無(wú)菌化，避免 與豬和牛的衍生產(chǎn)品相關(guān)的傳統(tǒng)和文化的問(wèn)題，更容易作為醫(yī)療裝置獲得許可，不包含污 染性的擾亂試樣分析的動(dòng)物DNA，更便宜，更結(jié)實(shí)，干燥時(shí)更堅(jiān)硬且易機(jī)械加工，有更高的變 形溫度和更高的熔化溫度，有更快的芯吸作用（即更強(qiáng)的親液性）和/或是以不同種類的 氣孔尺寸容易獲得的。
[0029] 在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞塊材料的固體基質(zhì)由聚乙烯醇（PVA)、纖維素乙酸酯、甲 基纖維素或羥甲基纖維素，或它們的任意組合構(gòu)成。在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞塊材料的固體 基質(zhì)由聚乙烯醇（PVA)構(gòu)成。在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞塊材料的固體基質(zhì)由纖維素乙酸酯 構(gòu)成。在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞塊材料的固體基質(zhì)由甲基纖維素構(gòu)成。在一個(gè)實(shí)施方案中， 細(xì)胞塊材料的固體基質(zhì)由羥甲基纖維素構(gòu)成。
[0030] 在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞塊材料選自纖維素海綿和PVA泡沫。
[0031] 在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞塊材料是纖維素海綿。纖維素海綿由纖維素乙酸酯制成。
[0032] 在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞塊材料是PVA泡沫。除了以上概述的合成泡沫的優(yōu)點(diǎn)之 夕卜，PVA泡沫有一些使其對(duì)于石蠟加工為理想的獨(dú)特性質(zhì)，例如對(duì)有機(jī)溶劑有抗性這一事 實(shí)。另外，盡管PVA泡沫在未加工狀態(tài)是一種堅(jiān)硬材料，令人驚奇地發(fā)現(xiàn)，在石蠟加工時(shí)， PVA泡沫允許石蠟滲透到PVA泡沫固體基質(zhì)內(nèi)，允許平滑地切片而不破碎。不限制于理論， 這被認(rèn)為是由于它的親水特性，允許它吸收水到其固體基質(zhì)中。如上所述，通過(guò)首先用親 水的有機(jī)溶劑如乙醇代替水，然后通過(guò)通常涉及伴隨著熱的液體石蠟使用二甲苯的多個(gè)步 驟，用石蠟代替這種有機(jī)溶劑?？傊?，因此，PVA泡沫的允許水滲透它的固體基質(zhì)的特性被 認(rèn)為在石蠟加工中也允許石蠟滲透到泡沫的固體基質(zhì)內(nèi)。
[0033] 在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞塊材料是一種天然材料，例如，天然海綿或明膠。在一個(gè) 實(shí)施方案中，細(xì)胞塊材料是天然海綿。在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞塊材料的固體基質(zhì)由明膠制 成。在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞塊材料是明膠海綿。
[0034] 在一個(gè)實(shí)施方案中，外罩的第一末端適于通過(guò)過(guò)盈配合接合取樣工具（即針頭接 □ )O
[0035] 在一個(gè)實(shí)施方案中，外罩的第一末端適于通過(guò)魯爾接頭（Luer taper)接合取樣工 具（即針頭接口）。魯爾接頭是一種流體裝配的通用的標(biāo)準(zhǔn)化的系統(tǒng)，用于在一個(gè)裝置上的 凸形部件和與其相匹配的在另一個(gè)裝置上的凹形部件之間建立密封連接。有兩種不同的魯 爾接頭連接方式：魯爾滑鎖（Luer-Sl ip?)和魯爾旋鎖(Luer-Lok?)。在一個(gè)實(shí)施方 案中，第一末端適于通過(guò)魯爾滑鎖連接接合取樣工具（即針頭接口）。在一個(gè)實(shí)施方案中， 第一末端適于通過(guò)魯爾旋鎖連接接合取樣工具（即針頭接口）。
[0036] 在一個(gè)實(shí)施方案中，外罩有一個(gè)第二末端，該第二末端適于通過(guò)氣密配合接合注 射器噴嘴。這使得能夠?qū)⒃撗b置配合在針頭和注射器之間。因此，通過(guò)使用拉動(dòng)注射器提 供的負(fù)壓力，能將細(xì)胞試樣吸取到細(xì)胞塊材料內(nèi)。其它的抽吸或提取技術(shù)對(duì)技術(shù)人員來(lái)說(shuō) 是廣為人知的。
[0037] 在一個(gè)實(shí)施方案中，外罩的第二末端適于通過(guò)過(guò)盈配合接合注射器噴嘴。
[0038] 在一個(gè)實(shí)施方案中，外罩的第二末端適于通過(guò)魯爾接頭接合注射器噴嘴。在一個(gè) 實(shí)施方案中，外罩的第二末端適于通過(guò)魯爾滑鎖連接接合針頭接口。在一個(gè)實(shí)施方案中，夕卜 罩的第二末端適于通過(guò)魯爾旋鎖連接接合針頭接口。
[0039] 在一個(gè)實(shí)施方案中，外罩是一個(gè)環(huán)狀地圍繞或基本環(huán)狀地圍繞細(xì)胞塊材料的管狀 外罩。
[0040] 在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞塊材料在外罩內(nèi)可滑動(dòng)，以使得在使用中當(dāng)取樣工具 (即針頭接口）連接到所述裝置上時(shí)，細(xì)胞塊材料能夠進(jìn)一步滑入外罩內(nèi)。在取樣工具是針 頭的情況下，因?yàn)獒橆^接口位于所述裝置上，在來(lái)自針頭接口和在針頭接口中冒出的針軸 的壓力下，初始伸出的細(xì)胞塊材料進(jìn)一步滑入外罩內(nèi)。因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)針頭接口進(jìn)入不同的深度， 本實(shí)施方式允許所述裝置容易地用于不同深度的針頭接口，同時(shí)在針頭接口已連接到所述 裝置上后仍然導(dǎo)致在細(xì)胞塊材料和針軸之間的緊鄰或接觸。
[0041] 在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞塊材料被塑形為基本圓柱體狀，并且，在隨同針頭使用 中，圓柱體的縱向軸線在大致與附接到針頭接口的針軸的縱向軸線相同的方向上延伸。泡 沫圓柱體的遠(yuǎn)端，可以是例如尖削的或錐形的，在隨同針頭使用中自裝置外罩的第一末端 延伸，并伸出到針頭接口內(nèi)。尖削的或錐形的末端在隨同針頭使用中可和針頭接口內(nèi)部的 針軸相接觸。尖削的或錐形的末端可改善細(xì)胞塊材料的起到像燈芯一樣的作用的能力，以 允許試樣被細(xì)胞塊材料從針軸抽吸出且進(jìn)入細(xì)胞塊材料中。
[0042] 根據(jù)本發(fā)明的第二方面提供了一種根據(jù)本發(fā)明的第一方面的裝置，用于在同時(shí)獲 得FNA和細(xì)胞塊試樣的方法中使用。
[0043] 根據(jù)本發(fā)明的第三方面提供了一種細(xì)胞塊試樣，包括試樣細(xì)胞，石蠟和合成開孔 泡沫。
[0044] 在一個(gè)實(shí)施方案中，合成開孔泡沫是一種聚合物材料。
[0045] 開孔泡沫是一種固體基質(zhì)中包含了互聯(lián)的細(xì)胞或腔（氣孔）的物質(zhì)。在一個(gè)實(shí)施 方案中，腔具有的氣孔尺寸為最高達(dá)Imm或〇.5mm。在一個(gè)實(shí)施方案中，腔具有的氣孔尺寸 至少為〇? 1mm。在一個(gè)實(shí)施方案中，腔具有的氣孔尺寸為〇? Imm至1mm，或〇? Imm至〇? 5mm〇
[0046] 在一個(gè)實(shí)施方案中，合成開孔泡沫的固體基質(zhì)由聚乙烯醇（PVA)、纖維素乙酸酯、 甲基纖維素或羥甲基纖維素，或它們的任意組合構(gòu)成。在一個(gè)實(shí)施方案中，合成開孔泡沫的 固體基質(zhì)由聚乙烯醇（PVA)構(gòu)成。在一個(gè)實(shí)施方案中，合成開孔泡沫的固體基質(zhì)由纖維素 乙酸酯構(gòu)成。在一個(gè)實(shí)施方案中，合成開孔泡沫的固體基質(zhì)由甲基纖維素構(gòu)成。在一個(gè)實(shí) 施方案中，合成開孔泡沫的固體基質(zhì)由羥甲基纖維素構(gòu)成。
[0047] 在一個(gè)實(shí)施方案中，合成開孔泡選自纖維素海綿和PVA泡沫。在一個(gè)實(shí)施方案中， 合成開孔泡沫是纖維素海綿。纖維素海綿由纖維素乙酸酯制成。在一個(gè)實(shí)施方案中，合成 開孔泡沫是一種PVA泡沫。
[0048] 在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞試樣包括潛在的疾病組織中的待檢腫瘤細(xì)胞或其他細(xì) 胞。
[0049] 在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞試樣可獲得自體液，例如，血液，唾液，尿液，腦脊髓液，羊 膜液，淋巴液，胸膜液或腹水液。
[0050] 在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞試樣可獲得自患者。
[0051] 根據(jù)本發(fā)明的第四方面提供了一種獲得細(xì)胞塊試樣的方法，包括步驟（i)吸收非 固體細(xì)胞試樣到固體細(xì)胞塊材料中，以獲得細(xì)胞塊試樣，其中細(xì)胞塊材料不是明膠海綿。
[0052] 在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞塊材料是一種聚合物材料。
[0053] 在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞塊材料是一種開孔泡沫。開孔泡沫是一種固體基質(zhì)中包 含了互聯(lián)的細(xì)胞或腔（氣孔）的材料。在一個(gè)實(shí)施方案中，腔具有的氣孔尺寸為最高達(dá)Imm 或0.5mm。在一個(gè)實(shí)施方案中，腔具有的氣孔尺寸至少為0.1mm。在一個(gè)實(shí)施方案中，腔具 有的氣孔尺寸為〇. Imm至1臟，或〇. Imm至〇. 5mm。
[0054] 在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞塊材料是一種合成材料，例如，合成泡沫。如上所述，合適 的合成泡沫可提供很多勝過(guò)生物泡沫的優(yōu)點(diǎn)，例如幾乎沒(méi)有攜帶朊病毒的風(fēng)險(xiǎn)，更容易無(wú) 菌化，避免與豬和牛的衍生產(chǎn)品相關(guān)的傳統(tǒng)和文化的問(wèn)題，更容易作為醫(yī)療裝置獲得許可， 不包含污染性的擾亂試樣分析的動(dòng)物DNA，更便宜，更結(jié)實(shí)，干燥時(shí)更堅(jiān)硬且易加工，有更高 的變形溫度和更高的熔化溫度，有更快的芯吸作用（即更強(qiáng)的親液性）和/或以不同種類 的氣孔尺寸容易獲得。
[0055] 在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞塊材料的固體基質(zhì)由聚乙烯醇（PVA)、纖維素乙酸酯、甲 基纖維素或羥甲基纖維素，或它們的任意組合構(gòu)成。在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞塊材料的固體 基質(zhì)由聚乙烯醇（PVA)構(gòu)成。在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞塊材料的固體基質(zhì)由纖維素乙酸酯 構(gòu)成。在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞塊材料的固體基質(zhì)由甲基纖維素構(gòu)成。在一個(gè)實(shí)施方案中， 細(xì)胞塊材料的固體基質(zhì)由羥甲基纖維素構(gòu)成。
[0056] 在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞塊材料選自纖維素海綿和PVA泡沫。
[0057] 在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞塊材料是纖維素海綿。纖維素海綿由纖維素乙酸酯制成。
[0058] 在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞塊材料是PVA泡沫。除了以上概述的合成泡沫的優(yōu)點(diǎn)之 夕卜，PVA泡沫有一些使其對(duì)于石蠟加工為理想的獨(dú)特性質(zhì)，例如對(duì)有機(jī)溶劑有抗性這一事 實(shí)。另外，盡管在未加工狀態(tài)是一種堅(jiān)硬材料，但驚奇地發(fā)現(xiàn)，在石蠟加工過(guò)程中，PVA泡沫 允許石蠟滲透到PVA泡沫固體基質(zhì)內(nèi)，允許平滑地切片而不破碎。不限制于理論，這被認(rèn)為 是由于PVA泡沫的親水特性，允許它吸收水到其固體基質(zhì)中。如上所述，通過(guò)首先用親水的 有機(jī)溶劑如乙醇代替水，然后通過(guò)通常涉及伴隨著熱的液體石蠟使用二甲苯的多個(gè)步驟， 用石蠟代替這種有機(jī)溶劑。總之，因此，PVA泡沫允許水滲透它的固體基質(zhì)的特性被認(rèn)為是 在石賭加工中也允許石賭滲透到泡沫的固體基質(zhì)內(nèi)。
[0059] 在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞塊材料是一種天然材料。在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞塊材料 是天然海綿。
[0060] 根據(jù)本發(fā)明的第四方面的方法的步驟（i)，非固體細(xì)胞試樣被吸收進(jìn)固體細(xì)胞塊 材料以獲得細(xì)胞塊試樣。這可用不同的方式得到。
[0061] 在一個(gè)實(shí)施方案中，通過(guò)從表面提升非固體細(xì)胞試樣，將該細(xì)胞試樣吸收到固體 細(xì)胞塊材料中。在一個(gè)實(shí)施方案中，表面是一種非生命的表面，例如顯微鏡載玻片。
[0062] 在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞塊材料存在于注射器內(nèi)部。
[0063] 在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞塊材料形成根據(jù)本發(fā)明的第一方面的裝置的部件。
[0064] 在一個(gè)實(shí)施方案中，非固體細(xì)胞試樣位于容器內(nèi)，固體細(xì)胞塊材料被加入到容器 內(nèi)。
[0065] 在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞試樣包括潛在的疾病組織中的待檢腫瘤細(xì)胞或其他細(xì) 胞。
[0066] 在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞試樣可獲得自體液，例如，血液，唾液，尿液，腦脊髓液，羊 膜液，淋巴液，胸膜液或腹水液。
[0067] 在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞試樣可獲得自患者。在一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的第 四方面的方法，還也包括從患者獲得細(xì)胞試樣的步驟。在一個(gè)可選的實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā) 明的第四方面的方法，不包括從病人獲得細(xì)胞試樣的步驟。
[0068] 細(xì)胞試樣可從患者獲得，例如通過(guò)細(xì)針抽吸（FNA)，例如對(duì)表皮腫塊或團(tuán)塊的 FNA，或細(xì)胞試樣可例如通過(guò)取得血液試樣或唾液來(lái)獲得。另外，細(xì)胞試樣可例如獲得自通 過(guò)從排泄標(biāo)本（voided specimen)或者在膀胱鏡檢查（尿路內(nèi)窺鏡檢查）期間收集的尿 液；獲得自通過(guò)穿刺抽吸（腰椎穿刺）的腦脊髓液；獲得自通過(guò)穿刺抽吸的羊膜液；獲得自 通過(guò)胸腔穿刺抽吸的胸膜液；或獲得自通過(guò)腹腔穿刺抽吸的腹水液。
[0069] 在一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的第四方面的方法，還包括步驟（ii)通過(guò)固定和 石蠟加工，加工細(xì)胞塊試樣。
[0070] 根據(jù)本發(fā)明的第五方面提供一種方法，同時(shí)獲得FNA和細(xì)胞塊試樣，包括步驟： (i)附接裝置到針頭上，其中裝置包括外罩和細(xì)胞塊材料，外罩有一個(gè)第一末端，該第一末 端適于通過(guò)氣密配合接合針頭接口，細(xì)胞塊材料的至少一部分位于外罩內(nèi)，以使得在使用 中細(xì)胞塊材料與針頭接口處于流體連接。
[0071] 在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞塊材料從外罩的第一末端伸出，以使得在使用中細(xì)胞塊 材料延伸到針頭接口內(nèi)。
[0072] 在一個(gè)實(shí)施方案中，裝置是根據(jù)本發(fā)明的第一方面的裝置。
[0073] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的第五方面的方法還包括步驟：（ii)通過(guò)針頭從患者 收集細(xì)胞，在此步驟期間，從針頭的溢出細(xì)胞被吸收到細(xì)胞塊材料內(nèi)。
[0074] 在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞為潛在的疾病組織中的待檢腫瘤細(xì)胞或其他細(xì)胞。
[0075] 概觀本說(shuō)明書的描述和聲明，術(shù)語(yǔ)"包括"和"含有"和這些詞的變形，例如"包含" 和"包含有"，意為"包括但不限制于"，并不排除其他基團(tuán)、添加物、部件、成分或步驟。而且， 除非上下文另有要求，單數(shù)的形式涵蓋復(fù)數(shù)：尤其是，在使用不定冠詞處，說(shuō)明書應(yīng)理解為 考慮單數(shù)和復(fù)數(shù)，除非上下文另有要求。
[0076] 本發(fā)明每個(gè)方面的優(yōu)選特征可被描述為和任何其他方面有聯(lián)系。本發(fā)明的其他特 征將從隨后的例子中變得顯而易見。一般來(lái)講，本發(fā)明擴(kuò)充至本發(fā)明公開的特征（包括任 何從屬的權(quán)利要求和附圖）的任何新穎的單個(gè)特征，或任何新穎特征的組合。這樣，描述的 特征，成分，表征，復(fù)合物，化學(xué)基團(tuán)或根和本發(fā)明的特定方面，實(shí)施方式或?qū)嵤├焕斫鉃?對(duì)這里描述的任何其他方面，實(shí)施方案或?qū)嵤├瑯涌蛇m用，除非和其矛盾。另外，如無(wú)說(shuō) 明，這里公開的任何特征可由實(shí)現(xiàn)相同或類似目的的可選特征代替。
[0077] 當(dāng)作為特性引用上限和下限時(shí)，同樣暗示了由任意上限和任意下限的結(jié)合而定義 的一系列值。

【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0078] 參考附圖，將進(jìn)一步描述本發(fā)明的實(shí)施方案，其中：
[0079] 圖1示出根據(jù)本發(fā)明的第一方面的裝置的一個(gè)實(shí)施方案的概略截面?zhèn)纫暿疽鈭D。
[0080] 圖2示出了圖1所示裝置概略截面?zhèn)纫暿疽鈭D，其中泡沫柱體被移動(dòng)至外罩。
[0081] 圖3示出了一個(gè)針頭的概略截面?zhèn)纫暿疽鈭D，包括一個(gè)針軸和一個(gè)針頭接口。
[0082] 圖4示出了包含圖3所示針頭、圖1所示裝置的實(shí)施方案和包括注射器噴嘴的注 射器遠(yuǎn)端部分的組件的概略側(cè)視剖面圖。
[0083] 圖5示出了包含針頭、本發(fā)明裝置的實(shí)施方案和注射器的組件的立體圖。
[0084] 圖6示出了圖5組件的部分放大立體圖，包括了針頭、本發(fā)明裝置的實(shí)施方案和包 含注射器噴嘴的注射器的遠(yuǎn)端部分。
[0085] 圖7示出了經(jīng)固定并從外罩中拉出的泡沫柱體。
[0086] 圖8示出了細(xì)胞塊切片，在經(jīng)過(guò)石蠟加工和切片后制備于圖7的泡沫柱體。
[0087] 圖9為顯微鏡圖片，示出了圖8所示細(xì)胞塊切片中泡沫基質(zhì)腔中的細(xì)胞。
[0088] 圖10為顯微鏡圖片，示出了在對(duì)細(xì)胞角蛋白7進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色之后，圖8 所示細(xì)胞塊切片中泡沫基質(zhì)腔中的細(xì)胞。
[0089] 圖1、2和4至6所示的裝置1包括一個(gè)PVA泡沫2的柱體，其被夾持在管狀外罩 3內(nèi)。在所示實(shí)施方案中，柱體的遠(yuǎn)端6具有圓錐形形狀。
[0090] 如圖3所示，標(biāo)準(zhǔn)針頭10包含一個(gè)針頭接口 11和一個(gè)針軸12.
[0091] 如圖1、2和4-6所示，裝置1有一個(gè)帶第一末端4的外罩3,該第一末端適于通過(guò) 魯爾接頭接合針頭接口 11。外罩3有一個(gè)第二末端5,其適于通過(guò)魯爾接頭接合注射器噴 嘴21。
[0092] PVA泡沫2從外罩3的第一末端4伸出，以使得當(dāng)和針頭10組裝時(shí)，PVA泡沫2延 伸到針頭接口 11內(nèi)。泡沫2在外罩3內(nèi)可滑動(dòng)，以使得在使用中當(dāng)把針頭接口 11連接到 裝置1時(shí)，泡沫2能夠進(jìn)一步滑動(dòng)至外罩3。圖2示出了泡沫2比圖1更進(jìn)一步被移動(dòng)至裝 置1的情況。
[0093] 在使用中，如圖4-6所示，通過(guò)連接針頭接口 11到外罩的第一末端4上，針頭10附 接到裝置1。泡沫2從外罩3伸出到針頭接口 11內(nèi)。附接針頭10時(shí)，泡沫2可滑回外罩3 內(nèi)，導(dǎo)致泡沫2的尖端延伸到針頭接口 11的頂端內(nèi)。泡沫2和針頭接口 11處于流體連接， 以使得任何進(jìn)入針頭接口 11的流體可以和泡沫2接觸。泡沫2可以與延伸通過(guò)針頭接口 11的針軸12的近端直接接觸。泡沫柱體2的軸線在和針軸12附接針頭接口 11的基本相 同的方向上延伸。
[0094] 如果使用注射器抽吸技術(shù)，外罩3的第二末端5連接到注射器20上。圖4-6示出 了包含針頭10、裝置1和注射器20的組件。
[0095] 在FNA操作過(guò)程中，試樣材料流上針軸12,并且，如果收集到足夠體積，試樣材料 會(huì)進(jìn)入與之建立接觸的針頭接口 11內(nèi)并被吸收到PVA泡沫2的尖端內(nèi)。當(dāng)完成FNA取樣 時(shí)，從附接的注射器20用常規(guī)方法通過(guò)空氣壓力，將標(biāo)本從針頭10噴出到載玻片上來(lái)做涂 片。在此噴出過(guò)程中，空氣經(jīng)過(guò)泡沫2,這會(huì)使得泡沫2中的一些試樣回流到針頭10中，但 一些仍留置在泡沫2中。然后裝置1從針頭10和注射器20分離。之后裝置1放置于甲醛 標(biāo)本盆中并送去組織病理學(xué)檢查?？蛇x地，由注射器20施加空氣壓力前，裝置1可去掉，以 使得泡沫2中的試樣不會(huì)排出。在那情況下，涂片的全部試樣得自于針頭10中的液體。
[0096] PVA泡沫2在固定之前或之后從外罩3去除。圖7示出了在被固定并從外罩去除 之后的泡沫柱體2。之后通過(guò)常規(guī)組織試樣石蠟加工和切片來(lái)制備固定的PVA泡沫，制成如 圖8所示的細(xì)胞塊切片。
[0097] 切片可被染色，例如蘇木素和伊紅，且然后進(jìn)行顯微鏡檢查，可看到泡沫基質(zhì)腔中 的細(xì)胞，如圖9所示。免疫組織化學(xué)和其他的分子探查可對(duì)于常規(guī)組織學(xué)標(biāo)本實(shí)行。例如， 圖10示出了對(duì)細(xì)胞角蛋白7免疫組織化學(xué)染色后的腺癌細(xì)胞；細(xì)胞呈強(qiáng)烈的陽(yáng)性。細(xì)胞角 蛋白7在乳癌、肺癌、胃癌和胰腺癌上呈典型的陽(yáng)性。
[0098] 通過(guò)相同F(xiàn)NA嘗試可收集足夠的細(xì)胞學(xué)涂片試樣和細(xì)胞塊試樣。如果高質(zhì)量DNA 的保存是優(yōu)先的，那么承接試樣的泡沫芯部分可用外科手術(shù)刀被切成兩部分，一部分冷凍 以供DNA研宄，其余的經(jīng)甲醛固定和石蠟加工。
【權(quán)利要求】
1. 一種裝置，包括外罩和細(xì)胞塊材料，其中： 所述外罩具有一個(gè)第一末端，該第一末端適于通過(guò)氣密配合與取樣工具接合； 所述細(xì)胞塊材料的至少一部分位于所述外罩內(nèi)，以使得在使用中所述細(xì)胞塊材料和所 述取樣工具處于流體連接，以及 所述細(xì)胞塊材料從所述外罩的第一末端伸出，以使得在使用中所述細(xì)胞塊材料延伸到 所述取樣工具中。
2. 權(quán)利要求1所述的裝置，其中所述第一末端適于接合針頭接口。
3. 權(quán)利要求1或2所述的裝置，其中所述細(xì)胞塊材料是一種聚合物材料。
4. 權(quán)利要求1至3中任一所述的裝置，其中所述細(xì)胞塊材料是一種開孔泡沫。
5. 權(quán)利要求1至4中任一所述的裝置，其中所述細(xì)胞塊材料是一種合成材料。
6. 權(quán)利要求5所述的裝置，其中所述細(xì)胞塊材料選自于纖維素海綿和PVA泡沫。
7. 前述權(quán)利要求中任一所述的裝置，其中所述細(xì)胞塊材料能夠在所述外罩內(nèi)滑動(dòng)，以 使得在使用中當(dāng)所述取樣工具被連接到所述裝置時(shí)，所述細(xì)胞塊材料能夠更進(jìn)一步地滑動(dòng) 到外罩內(nèi)。
8. -種細(xì)胞塊試樣，包括細(xì)胞試樣、石蠟和合成開孔泡沫。
9. 一種獲得細(xì)胞塊試樣的方法，包括步驟： (i) 吸收非固體細(xì)胞試樣到固體細(xì)胞塊材料中，以獲得細(xì)胞塊試樣， 其中所述細(xì)胞塊材料不是明膠海綿。
10. 權(quán)利要求9所述的方法，其中所述細(xì)胞塊材料是一種聚合物材料。
11. 權(quán)利要求9或10所述的方法，其中所述細(xì)胞塊材料是一種開孔泡沫。
12. 權(quán)利要求9至11中任一所述的方法，其中所述細(xì)胞塊材料是一種合成材料。
13. 權(quán)利要求12所述的方法，其中所述細(xì)胞塊材料選自于纖維素海綿和PVA泡沫。
14. 權(quán)利要求9至13中任一所述的方法，其中通過(guò)從表面提升非固體細(xì)胞試樣，來(lái)將該 非固體細(xì)胞試樣吸收到所述固體細(xì)胞塊材料中。
15. 權(quán)利要求9至14中任一所述的方法，其中所述細(xì)胞塊材料存在于注射器內(nèi)。
16. 權(quán)利要求9至14中任一所述的方法，其中所述細(xì)胞塊材料形成根據(jù)權(quán)利要求1至 7中任一所述的裝置的部件。
17. 權(quán)利要求9至13中任一所述的方法，其中所述非固體細(xì)胞試樣位于容器內(nèi)，且所述 固體細(xì)胞塊材料被加入到所述容器內(nèi)。
18. 權(quán)利要求9至17中任一所述的方法，其中所述細(xì)胞試樣包括潛在的疾病組織中的 待檢腫瘤細(xì)胞或其他細(xì)胞。
19. 權(quán)利要求9至18中任一所述的方法，還包括步驟： (ii) 通過(guò)固定和石蠟加工，來(lái)加工所述細(xì)胞塊試樣。
20. -種同時(shí)獲得FNA和細(xì)胞塊試樣的方法，包括步驟： (i)將一個(gè)裝置附接到針頭，其中所述裝置包括外罩和細(xì)胞塊材料，所述外罩具有一個(gè) 第一末端，所述第一末端適于通過(guò)氣密配合與針頭接口接合，所述細(xì)胞塊材料的至少一部 分位于所述外罩內(nèi)，以使得在使用中所述細(xì)胞塊材料和所述針頭接口處于流體連接。
【文檔編號(hào)】A61B10/00GK104487003SQ201380022184
【公開日】2015年4月1日 申請(qǐng)日期:2013年2月27日 優(yōu)先權(quán)日:2012年2月27日
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