具有抗黃病毒的抗病毒活性的組合物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種預防或治療人類或動物中黃病毒感染或由其所產(chǎn)生的疾病的具有抗病毒活性的組合物，其特征在于該組合物中包含槲皮素、其類似物或其衍生物。該組合物可進一步包含醫(yī)藥上可接受的載劑。所述抗病毒活性可包括對病毒附著于宿主細胞的抑制及細胞內(nèi)病毒復制的抑制。黃病毒可包含登革熱病毒1型、登革熱病毒2型、登革熱病毒3型及登革熱病毒4型。
【專利說明】具有抗黃病毒的抗病毒活性的組合物 【背景技術】 【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種具有抗病毒活性的組合物，更具體而言，涉及一種具有抗黃病毒 (flavivirus)病的抗病毒活性的組合物，所述組合物包含類黃酮槲皮素（quercetin)。
[0002] 相關技術描述
[0003] 登革熱病毒（DENV)是黃病毒科（Flaviviridae)的黃病毒屬（flavivirus)的 一員。此病毒為一種重要的人類病原，其引起廣泛的臨床病癥，范圍包含潛伏或輕度發(fā)熱 感染、自限性登革熱（self-limited dengue fever(DF))至嚴重的出血性登革熱（dengue hemorrhagic fever (DHF))及登革熱休克癥候群（dengue shock syndrome (DSS))。有四種 登革熱病毒的基因型，DENV-1、DENV-2、DENV-3、及DENV-4。所有四種病毒引起無不同臨床 表現(xiàn)的相似疾病。此病毒是通過二種蚊蟲傳染至人類，即埃及斑蚊（Aedesaegypti)及白線 斑蚊（Aedesalbopictus)。
[0004] 登革熱于世界上的大多數(shù)熱帶和亞熱帶地區(qū)中流行，并會造成許多死亡。它快速 蔓延到世界上許多其他地區(qū)并每年威脅至少250萬人。目前并無可用于此疾病的有效疫苗 或抗病毒藥物。由于開發(fā)登革熱疫苗是困難和復雜的，發(fā)現(xiàn)或開發(fā)出一種有效的抗病毒劑 至關重要。
[0005] 植物和衍生自植物的化合物仍然是新抗病毒藥物的發(fā)現(xiàn)和發(fā)展的一個重要來源。 這是因為一般而言植物提供了許多有益的，可作為抗病毒藥物的潛在天然化合物，且可能 具有低的副作用。
[0006] US專利6, 638, 514B1公開了一種減毒的登革熱病毒的疫苗組合物。所引述的先前 技術提供刺激個體的免疫系統(tǒng)以誘發(fā)對抗所有四種登革熱病毒血清型的方法，通過投予經(jīng) 減毒的dengue-1、dengue-2、dengue-3、及dengue-4病毒。如引述先前技術所介紹的組合 物為一種疫苗組合物，其有發(fā)展出副作用及疫苗抗病毒較無效的可能性。因此，有需要尋求 一種替代方案，其通過使用具有抗病毒活性的天然化合物且適用于預防或治療黃病毒感染 或疾病。
[0007] US專利7, 473, 424B2公開了一種抗登革熱病毒抗體，包括編碼至少一種抗登革熱 病毒抗體的經(jīng)單離核酸、載體、宿主細胞、轉(zhuǎn)基因動物或植物、及制造其使用此等的方法，包 括治療組合物、方法、及裝置。然而，已有需要尋找天然化合物作為抗體使用的替代以治療 黃病毒病，包括但未限于登革熱病毒。
[0008] US專利申請案No. 2010/0331337A1公開了一種含有槲皮素（quercetin)、維生素 B3、維生素 C、及葉酸的組合物，用以增進生理或精神表現(xiàn)或治療各種疾病或失調(diào)。此各種疾 病并不包括黃病毒感染或疾病。因此，含有槲皮素的組合物用以治療黃病毒感染或由其所 產(chǎn)生的疾病是具有潛力的。
[0009] US專利申請案No. 2008/0026076A1公開了一種含有槲皮素的營養(yǎng)補充劑用以增 進心血管健康。其并未揭示槲皮素于治療黃病毒病的用途。因此，在所屬【技術領域】中有改 進具有槲皮素及可能的醫(yī)藥上可接受的載劑的組合物的需求，其中所述組合物的目的是用 于治療黃病毒病，包括登革熱病毒。
[0010]因此，可見于先前技術中存有提供預防或治療人類或動物中黃病毒感染或由其所 產(chǎn)生的疾病的組合物的需求。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0011] 本發(fā)明的目的是提供一種具有抗黃病毒的抗病毒活性的組合物。
[0012] 本發(fā)明的另一目的是提供一種含有槲皮素的組合物，所述槲皮素是一種衍生自植 物的化合物，具有抗黃病毒的抗病毒活性。
[0013] 本發(fā)明的又一目的是提供一種具有抗登革熱病毒的抗病毒活性的組合物，其含有 作為主要活性組份的槲皮素及醫(yī)藥上可接受的載劑。
[0014] 因此，以上目的可通過本發(fā)明的下列技術手段而完成。本發(fā)明是關于一種于人類 或動物中預防或治療黃病毒感染或由其所產(chǎn)生的疾病的具有抗病毒活性的組合物，其特征 在于所述組合物中含有槲皮素、其類似物或其衍生物。此組合物可進一步含有一種醫(yī)藥上 可接受的載劑。黃病毒可包含登革熱病毒，包括登革熱病毒1型、登革熱病毒2型、登革熱 病毒3型及登革熱病毒4型。 【專利附圖】

【附圖說明】
[0015] 為了更容易了解本發(fā)明的特征，將由下列詳細說明以及本發(fā)明的較佳具體例的圖 式來進一步說明，其中：
[0016] 圖1是槲皮素的化學結構式。
[0017] 圖2顯示槲皮素于Vero細胞的細胞毒性效果圖。
[0018] 圖3(a)顯示使用病灶形成單位減數(shù)法（FFURA)計算的槲皮素抗DENV-2復制的抗 病毒性的圖，槲皮素是于病毒吸附后被加到細胞中。
[0019] 圖3(b)顯示使用實時熒光定量PCR技術（qRT-PCR)測定的槲皮素抗DENV-2復制 的抗病毒性的圖，槲皮素是于病毒吸附后被加到細胞中。
[0020] 圖4(a)顯示使用病灶形成單位減數(shù)法（FFURA)計算的連續(xù)以槲皮素處理的抗 DENV-2復制的抗病毒效果的圖，槲皮素是于感染前5小時被加到細胞中且于感染4日期間 連續(xù)存在。
[0021] 圖4(b)顯示使用實時熒光定量PCR技術（qRT-PCR)測定的連續(xù)以槲皮素處理的 抗DENV-2復制的抗病毒效果的圖，槲皮素是于感染前5小時被加到細胞中且于感染4日期 間連續(xù)存在。
[0022] 圖5 (a)顯示使用病灶形成單位減數(shù)法（FFURA)計算的槲皮素抗DENV-2的抗吸附 活性的圖。槲皮素是于感染期間同時被添加至細胞中。
[0023] 圖5 (b)顯示使用qRT-PCR定量的槲皮素抗DENV-2的抗吸附活性及各別 DENV-2RNA復制數(shù)的圖。槲皮素是于感染期間同時被添加至細胞中。
[0024] 圖6(a)顯示未以槲皮素處理登革熱病毒感染細胞的病灶大小的照片。
[0025] 圖6 (b)顯示以槲皮素處理DENV感染細胞的病灶大小減小的照片。 【具體實施方式】
[0026] 依據(jù)要求，本發(fā)明的詳細具體例揭示于本文；然而，應了解所揭示的具體例僅為發(fā) 明的示范，其可以各種形式被體現(xiàn)。因此，本文揭示的特定結構及功能上的細節(jié)不被解釋為 限制而僅作為權利要求的基礎。應了解圖式及其詳細說明并未被意圖用來限制本發(fā)明為所 揭示的特定形式，相反地，本發(fā)明涵括落入添附的權利要求所定義的本發(fā)明范疇的所有變 體、相等物、及替換物。如本申請案全文所使用，"可"一詞是用于允許的意義（即，意指具 有潛力），而非強迫的意義（即，意指必須）。相似地，〃包括〃、〃包含〃及〃含〃意指包括， 但未限于。又，〃一 〃或〃一種〃意指〃至少一個"且〃復數(shù)〃一詞意指一或多個，除非另 有陳述。于使用技術詞語的縮寫時，意指此項【技術領域】中已知的通常被接受的意義。為了 容易參照，當引述圖式的共通的相同或相似特征時，全部圖式使用共通的標號?，F(xiàn)參照圖1 以描述本發(fā)明。
[0027] 本發(fā)明涉及一種用于預防或治療人類或動物中黃病毒感染或其所產(chǎn)生的疾病的 具有抗病毒活性的組合物，其特征為此組合物包含槲皮素、其類似物或其衍生物。如本文使 用的"其類似物或其衍生物"一詞亦包括槲皮素的鹽類、溶劑化物、水合物、前藥、及包括互 變異構物及立體異構物的異構物。
[0028] 在本發(fā)明的一優(yōu)選的實施例中，所述槲皮素的濃度范圍為約0. 1至100重量％。
[0029] 在本發(fā)明的一優(yōu)選的實施例中，所述組合物的有效濃度范圍為29 μ g/ ml (28. 9 μ g/ml) - 35 μ g/ml (35. 7 μ g/ml)的槲皮素。
[0030] 在本發(fā)明的一優(yōu)選的實施例中，所述組合物以一醫(yī)藥上可接受的載劑調(diào)配。
[0031] 在本發(fā)明的一優(yōu)選的實施例中，所述具有抗病毒活性的組合物的有效濃度為 35. 7 μ g/ml的槲皮素。
[0032] 在本發(fā)明的一優(yōu)選的實施例中，抗病毒活性是對病毒復制的抑制及減少。
[0033] 在本發(fā)明的一優(yōu)選的實施例中，黃病毒是選自包含登革熱病毒1型、登革熱病毒2 型、登革熱病毒3型、及登革熱病毒4型的群組。
[0034] 在本發(fā)明的一優(yōu)選的實施例中，所述組合物是用于登革熱病毒2型的預防或治 療。
[0035] 在本發(fā)明，槲皮素可獲自化學合成或自植物萃取。
[0036] 所屬領域技術人員于本發(fā)明的目的可企圖修飾槲皮素的結構。通過加入、移除或 取代槲皮素化合物中的基團，此種修飾是可能的。通過于一或多個位置的酯化、水解、皂化、 取代、及任何化學修飾的方式，所述槲皮素可被加以修飾。
[0037] 圖1顯示槲皮素的化學式結構[2-(3, 4-二羥基苯基）-3, 5, 7-三羥基-4H-1-苯 并吡喃-4-酮]。
[0038] 槲皮素化合物
[0039]
【權利要求】
1. 一種預防或治療人類或動物中黃病毒感染或由其所產(chǎn)生的疾病的具有抗病毒活性 的組合物，其特征在于，所述組合物包含槲皮素、其類似物或其衍生物。
2. 根據(jù)權利要求1所述的組合物，其中所述槲皮素的濃度范圍為0. 1至100重量％。
3. 根據(jù)權利要求1所述的組合物，其中所述組合物的有效濃度范圍為29 μ g/ ml (28. 9 μ g/ml) - 35 μ g/ml (35. 7 μ g/ml)的槲皮素。
4. 根據(jù)權利要求1所述的組合物，其以醫(yī)藥上可接受的載劑調(diào)配此組合物。
5. 根據(jù)權利要求1所述的組合物，其中具有抗病毒活性的所述組合物的有效濃度為 35. 7 μ g/ml的槲皮素。
6. 根據(jù)權利要求1所述的組合物，其中黃病毒包含登革熱病毒。
7. 根據(jù)權利要求1所述的組合物，其中所述組合物是用于登革熱病毒感染的預防或治 療。
【文檔編號】A61K31/351GK104203228SQ201380018575
【公開日】2014年12月10日 申請日期:2013年1月31日 優(yōu)先權日:2012年3月30日
【發(fā)明者】沙札利·阿布·貝克爾 申請人:馬來亞大學