一種利用硅膠色譜技術(shù)制備玉葡萄根活性部位的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及中藥活性部位應(yīng)用領(lǐng)域，具體涉及一種利用硅膠色譜技術(shù)制備玉葡萄根活性部位的方法。該活性部位的制備方法，包括如下步驟：(1)將玉葡萄根用醇提取，得玉葡萄根醇提取物；(2)將得到的玉葡萄根醇提取物上硅膠柱，然后用洗脫劑A進(jìn)行除雜；(3)再用洗脫機(jī)B進(jìn)行洗脫，收集洗脫部位，濃縮、干燥得玉葡萄根活性部位。本發(fā)明制備得到的玉葡萄根活性部位具有很好的解酒效果，不僅尋找到了玉葡萄根的新用途，而且還利用中藥現(xiàn)代化手段從玉葡萄根中尋找到了解酒活性部位，可用于生產(chǎn)新的解酒藥物。另外，該玉葡萄根活性部位的制備方法簡單，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
【專利說明】一種利用硅膠色譜技術(shù)制備玉葡萄根活性部位的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及中藥提取物【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種利用硅膠色譜技術(shù)制備玉葡萄根活性部位的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]酒文化在我國具有數(shù)千年的歷史，現(xiàn)在的大多數(shù)社交活動及日常生活中離不開飲酒。但飲酒過量會引起頭痛眩暈、惡心嘔吐、記憶力減退、甚至不清等現(xiàn)象。飲酒過過量也會給家庭和社會帶來不良影響，如酒后破壞公物、擾亂社會治安、酒后駕駛導(dǎo)致嚴(yán)重交通事故等。另外經(jīng)常醉酒還會引發(fā)脂肪肝、酒精性肝炎、肝硬化等疾病。因此，開發(fā)一種解酒藥品或食品具有十分重要的意義。
[0003]解酒又稱“醒酒”，是指使人從醉酒的狀態(tài)中醒過來，恢復(fù)意識或回復(fù)自制力。通常不是自然清醒，而是采用某種方式快速解酒，起到節(jié)約時間的目的、減小乙醇對人體危害的目的。中藥解酒是一種很好的方法，中國古籍中記載了葛花、枳犋子、紫葛花、人參、桑葚等植物具有很好的解酒效果?，F(xiàn)有的解酒中藥多以中藥組合物形式存在，需要多種中藥混合在一起，雖然很多組合物具有很好的解酒效果，但是使用的還是中國傳統(tǒng)的中藥用藥方法。沒有將中藥使用現(xiàn)代化手段進(jìn)行開發(fā)，即很少有以某種中藥為基礎(chǔ)開發(fā)其中的解酒有效部位的研究。由于中國擁有成千上萬種中藥材，目前醫(yī)藥古籍里記載的具有解酒效果的中藥材是屈指可數(shù)的 ，因此，另外尋找到一種具有解酒作用的中藥材不是件容易的事。又由于每種中藥材中又含有成千上萬種化學(xué)成分，即使醫(yī)藥古籍中記載了某藥材具有解酒作用，要進(jìn)一步對其進(jìn)行中藥現(xiàn)代化開發(fā)尋找其中的有效部位也需要進(jìn)行大量的工作。
[0004]玉葡萄根為葡萄科蛇葡萄屬三裂蛇葡萄(Ampelopsis de lavayana Planch.)的根，本品為云南較常用的中草藥。別名金剛散。玉葡萄根為云南地區(qū)民間使用的草藥，能了解到的使用歷史約一百余年。本品具有祛風(fēng)除濕，舒筋活絡(luò)，消腫鎮(zhèn)痛之功，用于跌打損傷等。是“金品”痛舒膠囊、腫痛氣霧劑等系列藥品使用的藥材之一。曾收載于《中國藥典》(1977年版)、《云南省藥品標(biāo)準(zhǔn)》(1996年版)。到目前為止，并未有報道稱玉葡萄根中含有解酒或護(hù)肝作用的有效部位，醫(yī)藥古籍中也為提到玉葡萄根具有解酒作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是，為了克服現(xiàn)有技術(shù)中中藥來源的具有解酒作用的活性部位的開發(fā)不足，提供一種利用硅膠色譜技術(shù)制備玉葡萄根活性部位的方法。
[0006]本發(fā)明所要解決的上述問題，通過以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn):
一種從玉葡萄根中制備活性部位的方法，所述活性部位具有解酒或護(hù)肝作用的，包括如下步驟:
(1)將玉葡萄根用醇提取，得玉葡萄根醇提取物；
(2)將得到的玉葡萄根醇提取物上硅膠柱，然后用洗脫劑A進(jìn)行除雜；
(3)再用洗脫劑B進(jìn)行洗脫，收集洗脫部位，濃縮、干燥得玉葡萄根活性部位；步驟(2)所述的洗脫劑A為由環(huán)己烷和乙酸乙酯組成的混合洗脫劑，其中環(huán)己烷/乙酸乙酯的體積比為92~94:8~6;
步驟(3)所述的洗脫劑B為由環(huán)己烷和乙酸乙酯組成的混合洗脫劑，其中環(huán)己烷/乙酸乙酯的體積比為85~88:15~12 ；
步驟(1)中所述的醇為甲或乙醇。
[0007]作為一種優(yōu)選方案，步驟(2)所述的洗脫劑A為由環(huán)己烷和乙酸乙酯組成的混合洗脫劑，其中環(huán)己烷/乙酸乙酯的體積比為93:7 ;步驟(3)所述的洗脫劑B為由環(huán)己烷和乙酸乙酯組成的混合洗脫劑，其中環(huán)己烷/乙酸乙酯的體積比為86:14。
[0008]作為一種進(jìn)一步優(yōu)選方案，步驟(2)中洗脫劑A的用量為柱體積的31倍；步驟
(3)所述的洗脫劑B的用量為柱體積的31倍。
[0009]作為一種優(yōu)選方案，，步驟(2)中硅膠柱中使用的硅膠為200-300目的硅膠，用量為玉葡萄根醇提取物質(zhì)量的10-50倍。
[0010]作為一種優(yōu)選方案，所述制備方法，包括如下步驟:
(1)將玉葡萄根用95%乙醇提取，將提取液濃縮干燥、得玉葡萄根醇提取物；
(2)將得到的玉葡萄根醇提取物上裝有200-300目硅膠的硅膠柱，然后用洗脫劑A進(jìn)行除雜；
(3)再用洗脫劑B進(jìn)行洗脫，收集洗脫部位，濃縮、干燥得玉葡萄根活性部位；
步驟(2)中所述的硅膠，其用量為玉葡萄根醇提取物質(zhì)量的20-30倍；
步驟(2)所述的洗脫劑A為由環(huán)己`烷和乙酸乙酯組成的混合洗脫劑，其中環(huán)己烷/乙酸乙酯的體積比為92~94:8~6;
步驟(2)中洗脫劑A的用量為柱體積的31倍；
步驟(3)所述的洗脫劑B為由環(huán)己烷和乙酸乙酯組成的混合洗脫劑，其中環(huán)己烷/乙酸乙酯的體積比為85~88:15~12 ；
步驟(3)所述的洗脫劑B的用量為柱體積的31倍。
[0011]作為一種最優(yōu)選方案，所述制備方法，，包括如下步驟:
(1)將玉葡萄根用95%乙醇提取，將提取液濃縮干燥、得玉葡萄根醇提取物；
(2)將得到的玉葡萄根醇提取物上裝有200-300目硅膠的硅膠柱，然后用洗脫劑A進(jìn)行除雜；
(3)再用洗脫劑B進(jìn)行洗脫，收集洗脫部位，濃縮、干燥得玉葡萄根活性部位；
步驟(2)中所述的硅膠，其用量為玉葡萄根醇提取物質(zhì)量的20倍；
步驟(2)所述的洗脫劑A為由環(huán)己烷和乙酸乙酯組成的混合洗脫劑，其中環(huán)己烷/乙酸乙酯的體積比為93:7;
步驟(2)中洗脫劑A的用量為柱體積的5倍；
步驟(3)所述的洗脫劑B為由環(huán)己烷和乙酸乙酯組成的混合洗脫劑，其中環(huán)己烷/乙酸乙酯的體積比為86:14;
步驟(3)所述的洗脫劑B的用量為柱體積的5倍。
[0012]上述柱體積等于硅膠柱中填料硅膠所占的體積。
[0013]作為一種優(yōu)選方案，步驟(1)中的提取方法為:甲醇或乙醇用量與玉葡萄根的用量比為0.5~1.0L: 100g，加熱回流提取，提取次數(shù)為I~3次，時間為0.5~2h，提取溫度為80~95°C，提取后將提取液濃縮干燥，得玉葡萄根提取物。
[0014]作為一種優(yōu)選方案，所述玉葡萄根為葡萄科蛇葡萄屬三裂蛇葡萄(Ampelopsisde lavayana Planch.)的根。一種由上述制備方法制備得到的玉葡萄根活性部位。
[0015]上述玉葡萄根活性部位在制備具有解酒或護(hù)肝作用的藥物或食品中的應(yīng)用。
[0016]上述玉葡萄根活性部位在制備增強(qiáng)乙醇脫氫酶活性或降低血液中丙二醛含量的藥物中的應(yīng)用。
[0017]作為一種優(yōu)選方案，所述的藥物含有治療有效量的玉葡萄根提取物和藥學(xué)上可接受的載體。
[0018]作為一種優(yōu)選方案，所述的食品為保健品食品或飲料。
[0019]所 述的解酒藥物制成片劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、乳膏劑、口服液、針劑或粉針劑。
[0020]本發(fā)明制備得到的玉葡萄根活性部位具有很好的解酒效果，不僅尋找到了玉葡萄根的新用途，而且還利用中藥現(xiàn)代化手段從玉葡萄根中尋找到了解酒活性部位，僅需很少的用量即可達(dá)到很好的解酒效果，可用于生產(chǎn)新的解酒藥物。進(jìn)一步研究表明，本發(fā)明制備得到的玉葡萄根活性部位能夠顯著的增強(qiáng)ADH (乙醇脫氫酶)的活性和降低血液中MDA (丙二醛)含量作用，具有很好的解酒護(hù)肝效果。另外，該玉葡萄根活性部位的制備方法簡單，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
【具體實(shí)施方式】
[0021]以下結(jié)合具體實(shí)施例來進(jìn)一步解釋本發(fā)明，但實(shí)施例對本發(fā)明不做任何形式的限定。
[0022]實(shí)施例1玉葡萄根活性部位的制備
(1)將IKg干燥的玉葡萄根用12L體積分?jǐn)?shù)為95%的乙醇加熱回流提取2次，每次lh，將提取液合并濃縮干燥，得玉葡萄根乙醇提取物50g ；
(2)將得到的玉葡萄根醇提取物，上裝有200-300目1000g硅膠的硅膠柱，柱體積(硅膠填料所占的體積)約2.5升；
(3)用12.5升的環(huán)己烷/乙酸乙酯(體積比為93:7)進(jìn)行洗脫除雜；
(4)用12.5升的環(huán)己烷/乙酸乙酯(體積比為86:14)進(jìn)行洗脫，收集洗脫液、濃縮干燥即得玉葡萄根活性部位。
[0023]實(shí)施例2玉葡萄根活性部位的制備
(1)將IKg干燥的玉葡萄根用12L體積分?jǐn)?shù)為95%的乙醇加熱回流提取2次，每次lh，將提取液合并濃縮干燥，得玉葡萄根乙醇提取物47g ；
(2)將得到的玉葡萄根醇提取物，上裝有200-300目1000g硅膠的硅膠柱，柱體積(硅膠填料所占的體積)約2.5升；
(3)用12.5升的環(huán)己烷/乙酸乙酯(體積比為92:8)進(jìn)行洗脫除雜；
(4)用12.5升的環(huán)己烷/乙酸乙酯(體積比為88:12)進(jìn)行洗脫，收集洗脫液、濃縮干燥即得玉葡萄根活性部位。
[0024]實(shí)施例3玉葡萄根活性部位的制備
(I)將IKg干燥的玉葡萄根用12L體積分?jǐn)?shù)為95%的乙醇加熱回流提取2次，每次lh，將提取液合并濃縮干燥，得玉葡萄根乙醇提取物55g ；(2)將得到的玉葡萄根醇提取物，上裝有200-300目1000g硅膠的硅膠柱，柱體積(硅膠填料所占的體積)約2.5升；
(3)用12.5升的環(huán)己烷/乙酸乙酯(體積比為94:6)進(jìn)行洗脫除雜；
(4)用12.5升的環(huán)己烷/乙酸乙酯(體積比為85:15)進(jìn)行洗脫，收集洗脫液、濃縮干燥即得玉葡萄根活性部位。
[0025]實(shí)施例4玉葡萄根活性部位的制備
(1)將IKg干燥的玉葡萄根用12L體積分?jǐn)?shù)為95%的乙醇加熱回流提取2次，每次lh，將提取液合并濃縮干燥，得玉葡萄根乙醇提取物50g ；
(2)將得到的玉葡萄根醇提取物，上裝有200-300目2500g硅膠的硅膠柱，柱體積(硅膠填料所占的體積)約6升；
(3)用50升的環(huán)己烷/乙酸乙酯(體積比為93:7)進(jìn)行洗脫除雜；
(4)用20升的環(huán)己烷/乙酸乙酯(體積比為86:14)進(jìn)行洗脫，收集洗脫液、濃縮干燥即得玉葡萄根活性部位。
[0026]實(shí)施例5玉葡萄根活性部位的制備
(1)將IKg干燥的玉葡萄根用12L體積分?jǐn)?shù)為95%的乙醇加熱回流提取2次，每次lh，將提取液合并濃縮干燥，得玉葡萄根乙醇提取物43g ；
(2)將得到的玉葡萄根醇提取物，上裝有200-300目500g硅膠的硅膠柱，柱體積(硅膠填料所占的體積)約1.2升；
(3)用4升的環(huán)己烷/乙酸乙酯(體積比為93:7)進(jìn)行洗脫除雜；
(4)用10升的環(huán)己烷/乙酸乙酯(體積比為86:14)進(jìn)行洗脫，收集洗脫液、濃縮干燥即得玉葡萄根活性部位。
[0027]實(shí)施例6小鼠醉酒實(shí)驗(yàn)
取昆明種小白鼠120只，雌雄兼用，體重18~20g，隨機(jī)分為6組，每組20只，設(shè)給予實(shí)施例I~5玉葡萄根活性部位的給藥組5組(取實(shí)施例1~5制備得到的玉葡萄根活性部位分別用水溶解備用)和不給藥的對照組I組。各組每天灌胃給酒(53度白酒)0.4ml/只，對照組每天給酒前30min，灌胃給水0.4ml，各給藥組每天給酒前30min，灌胃給藥0.4ml，連續(xù)進(jìn)行30天。并分別在第2、5、10、15、20天時對小鼠進(jìn)行翻正反射實(shí)驗(yàn)，觀察給酒精后Ih內(nèi)小鼠出現(xiàn)翻正反射消失的只數(shù)，翻正反射消失可認(rèn)為動物醉酒，進(jìn)行每次翻正反射實(shí)驗(yàn)時每只小鼠實(shí)驗(yàn)5次，觀測結(jié)果，計(jì)算其醉倒率。
【權(quán)利要求】
1.一種利用硅膠色譜技術(shù)制備玉葡萄根活性部位的方法，其特征在于，所述活性部位具有解酒或護(hù)肝作用，包括如下步驟: (1)將玉葡萄根用醇提取，得玉葡萄根醇提取物； (2)將得到的玉葡萄根醇提取物上硅膠柱，然后用洗脫劑A進(jìn)行除雜； (3)再用洗脫劑B進(jìn)行洗脫，收集洗脫部位，濃縮、干燥得玉葡萄根活性部位； 步驟(2)所述的洗脫劑A為由環(huán)己烷和乙酸乙酯組成的混合洗脫劑，其中環(huán)己烷/乙酸乙酯的體積比為92~94:8~6; 步驟(3)所述的洗脫劑B為由環(huán)己烷和乙酸乙酯組成的混合洗脫劑，其中環(huán)己烷/乙酸乙酯的體積比為85~88:15~12 ； 步驟(1)中所述的醇為甲醇或乙醇。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)所述的洗脫劑A為由環(huán)己烷和乙酸乙酯組成的混合洗脫劑，其中環(huán)己烷/乙酸乙酯的體積比為93:7 ;步驟(3)所述的洗脫劑B為由環(huán)己烷和乙酸乙酯組成的混合洗脫劑，其中環(huán)己烷/乙酸乙酯的體積比為86:14。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)中洗脫劑A的用量為柱體積的31倍；步驟(3)所述的洗脫劑B的用量為柱體積的31倍。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)中硅膠柱中使用的硅膠為200^300目的硅膠，用量為玉葡萄根醇提取物質(zhì)量的10-50倍。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，包括如下步驟: (1)將玉葡萄根用95%乙醇提取，將提取液濃縮干燥，得玉葡萄根醇提取物； (2)將得到的玉葡萄根醇提取物上裝有200-300目硅膠的硅膠柱，然后用洗脫劑A進(jìn)行除雜； (3)再用洗脫劑B進(jìn)行洗脫，收集洗脫部位，濃縮、干燥得玉葡萄根活性部位； 步驟(2)中所述的硅膠，其用量為玉葡萄根醇提取物質(zhì)量的20-30倍； 步驟(2)所述的洗脫劑A為由環(huán)己烷和乙酸乙酯組成的混合洗脫劑，其中環(huán)己烷/乙酸乙酯的體積比為92~94:8~6; 步驟(2)中洗脫劑A的用量為柱體積的31倍； 步驟(3)所述的洗脫劑B為由環(huán)己烷和乙酸乙酯組成的混合洗脫劑，其中環(huán)己烷/乙酸乙酯的體積比為85~88:15~12 ； 步驟(3)所述的洗脫劑B的用量為柱體積的31倍。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，包括如下步驟: (1)將玉葡萄根用95%乙醇提取，將提取液濃縮干燥、得玉葡萄根醇提取物； (2)將得到的玉葡萄根醇提取物上裝有200-300目硅膠的硅膠柱，然后用洗脫劑A進(jìn)行除雜； (3)再用洗脫劑B進(jìn)行洗脫，收集洗脫部位，濃縮、干燥得玉葡萄根活性部位； 步驟(2)中所述的硅膠，其用量為玉葡萄根醇提取物質(zhì)量的20倍； 步驟(2)所述的洗脫劑A為由環(huán)己烷和乙酸乙酯組成的混合洗脫劑，其中環(huán)己烷/乙酸乙酯的體積比為93:7; 步驟(2)中洗脫劑A的用量為柱體積的5倍；步驟(3)所述的洗脫劑B為由環(huán)己烷和乙酸乙酯組成的混合洗脫劑，其中環(huán)己烷/乙酸乙酯的體積比為86:14; 步驟(3)所述的洗脫劑B的用量為柱體積的5倍。
7.根據(jù)權(quán)利要求1飛任一項(xiàng)制備方法，其特征在于，所述的玉葡萄根為葡萄科蛇葡萄屬 三裂蛇葡萄(Ampelopsis delavayana Planch.)的根。
8.一種由權(quán)利要求廣5任一項(xiàng)制備方法制備得到的玉葡萄根活性部位。
9.權(quán)利要求8所述的玉葡萄根活性部位在制備具有解酒或護(hù)肝作用的藥物或食品中的應(yīng)用。
10.權(quán)利要求8所述的玉葡萄根活性部位在制備增強(qiáng)乙醇脫氫酶活性或降低血液中丙二醛含量的藥 物中的應(yīng)用。
【文檔編號】A61K125/00GK103610844SQ201310609657
【公開日】2014年3月5日 申請日期:2013年11月27日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月27日
【發(fā)明者】楊葉風(fēng), 唐大洲, 鄧國邦, 李慕揚(yáng) 申請人:廣州派騰知識產(chǎn)權(quán)服務(wù)有限公司