同位素標記的二蒽酮類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及藥物領域，特別是涉及抗腫瘤藥物領域，更為具體的說是涉及一種抗腫瘤藥物。本發(fā)明的目的在于提供一種全新的抗腫瘤藥物，創(chuàng)造性地發(fā)現了同位素標記的二蒽酮類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應用。本發(fā)明所公開的化合物作為腫瘤靶向載體，通過放射性同位素標記后，可以在病變處選擇性聚集。且選擇性高、靶向性好，副反應小，腫瘤治療效果顯著。
【專利說明】同位素標記的二蒽酮類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應用
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及藥物領域，特別是涉及抗腫瘤藥物領域，更為具體的說是涉及同位素標記的二蒽酮類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應用。
【背景技術】
[0002]腫瘤正嚴重威脅著人類健康，尋找有效的抗腫瘤藥物與方法是世界醫(yī)學界的重要研究課題。近年來，盡管人類在腫瘤治療方面如手術、化療、放療取得了一些進展。但是由于現有的化療藥物和放療方法的選擇性不高，殺傷腫瘤細胞的同時也損害了體內的正常細胞，導致患者在治療中常出現較明顯的毒副反應，所以尋找一種對腫瘤細胞選擇性高、殺傷作用強，但對正常組織副作用小的抗腫瘤藥物非常有意義。
[0003]放射性同位素標記的化合物可以利用其放射性核素所發(fā)出的射線在病變部位高度選擇性聚集，利用對病變部位的照射，在局部產生足夠的電離輻射生物學效應，從而達到抑制或者破壞病變組織的目的。
[0004]為了減少對周圍組織的破壞，就必須保證這一放射性核素選擇性地聚集，也就是說為了更好地確保副反應小，減少對自身組織的傷害，就必須要提高藥物對腫瘤組織的選擇性。
[0005]同位素標記金絲桃素、原金絲桃素也曾作為腫瘤靶向藥物研究，但是，經研究發(fā)現金絲桃素和原金絲桃素分別為萘并二蒽酮、苯并二蒽酮類化合物，其空間結構為類平面，易于形成自聚體，降低其靶向性和治療效果，導致同位素標記的金絲桃素、原金絲桃素長時間滯留正常器官及網狀內皮系統(tǒng)，引起患者長期的正常器官的損傷和骨髓抑制反應，造成患者難以控制的感染。

【發(fā)明內容】

[0006]本發(fā)明的目的在于提供一種全新的抗腫瘤藥物，創(chuàng)造性地發(fā)現了同位素標記的二蒽酮類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應用。
[0007]所述的二蒽酮類化合物具有式I所示的結構通式，
[0008]其中:
[0009]更為優(yōu)選地，本發(fā)明進一步公開了所述二蒽酮類化合物優(yōu)選為番瀉苷A及其苷元、番瀉苷B及其苷元、番瀉苷C及其苷元、番瀉苷D及其苷元、番瀉苷E及其苷元、掌葉大黃二蒽酮A、掌葉大黃二蒽酮B、掌葉大黃二蒽酮C中的任意一種或者幾種；
[0010]同時，本發(fā)明還進一步公開了優(yōu)選的同位素標記方式為32P、47Sc、64Cu、67Cu、89Sr、90Y^105Rh,111Ag^117Sn,149Pm,153Sm,166Ho,177Lu,1311,186Re,188Re,211Bi,212Bi,213Bi,214Bi,211At 標記。
[0011]二蒽酮類化合物為兩分子蒽酮脫去I分子氫后，通過Cltl-Cltl’單鍵偶聯而成，具有高度立體的化學結構，完全不同于萘并二蒽酮、苯并二蒽酮類化合物的類平面結構，在作為腫瘤靶向載體的應用中具有萘并二蒽酮、苯并二蒽酮類化合物不能實現的高選擇性、高靶向性以及高血漿清除率。通過放射性同位素標記后，可以在病變處選擇性聚集，具有顯著的腫瘤治療效果。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0012]圖1為實施例5中番瀉苷A、番瀉苷元A與對照組、金絲桃素及原金絲桃素對腫瘤治療效果的對比圖；
[0013]圖2為實施例5中番瀉苷B、番瀉苷元B與對照組、金絲桃素及原金絲桃素對腫瘤治療效果的對比圖；
[0014]圖3為實施例5中番瀉苷C、番瀉苷元C與對照組、金絲桃素及原金絲桃素對腫瘤治療效果的對比圖；
[0015]圖4為實施例5中番瀉苷D、番瀉苷元D與對照組、金絲桃素及原金絲桃素對腫瘤治療效果的對比圖；
[0016]圖5為實施例5中番瀉苷E、番瀉苷元E與對照組、金絲桃素及原金絲桃素對腫瘤治療效果的對比圖；
[0017]圖6為實施例5中掌葉大黃二蒽酮A、掌葉大黃二蒽酮B、掌葉大黃二蒽酮C與對照組、金絲桃素及原金絲桃素對腫瘤治療效果的對比圖。
【具體實施方式】
[0018]本發(fā)明實施例部分所使用的材料，除非特別說明，其他均為市售產品。
[0019]實施例組I樣品的配制
[0020]實施例1-1131I標記的金絲桃素的制備
[0021]稱取1.0mg粉末狀的金絲桃素，溶于2.0ml DMSO中，振蕩搖勻，得0.5mg / ml金絲桃素DMSO溶液。將濃度為0.5mg/ml的金絲桃素DMSO溶液400 U I加入到制備好1dogen含量為40ii g的涂管中，加入IOOiU ^ 200 u Ci NamI溶液，振蕩搖勻，20-25°C反應60min左右，將反應液取出終止反應，測量標記率，標記率大于90%,表明標記成功。標記率測量方法:反應液用紙層析法測定標記率，Whatman濾紙作為載體，0.1mxI / L HCl作為流動相展開。標記物采用紙層析法測量標記率，游離的131I分布在在溶劑前沿，而131I標記金絲桃素保留在原點。
[0022]實施例1-21311標記的原金絲桃素的制備
[0023]稱取1.0mg粉末狀的原金絲桃素，溶于2.0ml DMSO中，振蕩搖勻，得0.5mg/ml原金絲桃素DMSO溶液。將濃度為0.5mg / ml的原金絲桃素DMSO溶液400 U I加入到制備好1dogen含量為40 u g的涂管中，加入100 U I的200 u Ci Na131I溶液，振蕩搖勻，20-25°C反應60min左右,將反應液取出終止反應,測量標記率,標記率大于90%,表明標記成功。標記率測量方法:反應液用紙層析法測定標記率，Whatman濾紙作為載體，0.1mol / L HCl作為流動相展開。標記物采用紙層析法測量標記率，游離的mI分布在在溶劑前沿，而131I標記原金絲桃素保留在原點。
[0024]實施例l-3mI標記的番瀉苷A的制備
[0025]稱取2.0mg粉末狀的番瀉苷A，溶于1.0ml DMSO中，振蕩搖勻，得2.0mg/ml番瀉苷ADMSO溶液。將濃度為2.0mg/ml的番瀉苷A DMSO溶液400 加入到制備好1dogen含量為40 ii g的涂管中，加入100 u I的200 u CINa131I溶液，振蕩搖勻水浴鍋中45°C加熱，反應90min左右,將反應液取出終止反應,測量標記率,標記率大于90%,表明標記成功。標記率測量方法:反應液用紙層析法測定標記率，Whatman濾紙作為載體，0.1mol / L HCl作為流動相展開。標記物采用紙層析法測量標記率，游離的mI分布在在溶劑前沿，而131I標記番}與昔A保留在原點。
[0026]實施例1-41311標記的番瀉苷元A的制備
[0027]稱取2.0mg粉末狀的番瀉苷元A，溶于1.0ml DMSO中，振蕩搖勻，得2.0mg/ml番瀉苷元A DMSO溶液。將濃度為2.0mg/ml的番瀉苷元A DMSO溶液400 U I加入到制備好1dogen含量為40ii g的涂管中，加入100 U I的200 y Cl Na131I溶液，振蕩搖勻水浴鍋中45°C加熱,反應90min左右,將反應液取出終止反應,測量標記率,標記率大于90%,表明標記成功。
[0028]標記率測量方法:反應液用紙層析法測定標記率，Whatman濾紙作為載體，
0.1mol / L HCl作為流動相展開。標記物采用紙層析法測量標記率，游離的131I分布在在溶劑前沿，而mI標記番瀉苷元A保留在原點。
[0029]實施例1-51311標記的番瀉苷B的制備
[0030]稱取1.2mg粉末狀的番瀉苷B，溶于1.0ml DMSO中，振蕩搖勻，得1.2mg/ml番瀉苷B DMSO溶液。將濃度為1.2mg / ml的番瀉苷B DMSO溶液400 加入到制備好1dogen含量為40ii g的涂管中，加入IOOiU ^ 200 u Ci NamI溶液，振蕩搖勻，20-25°C反應60min左右，將反應液取出終止反應，測量標記率，標記率大于90%,表明標記成功。標記率測量方法:反應液用紙層析法測定標記率，Whatman濾紙作為載體，0.1mol / L HCl作為流動相展開。標記物采用紙層析法測量標記率，游離的131I分布在在溶劑前沿，而mI標記番瀉苷B保留在原點。
[0031]實施例1-61311標記的番瀉苷元B的制備
[0032]稱取1.0mg粉末狀的番瀉苷元B，溶于1.0ml DMSO中，振蕩搖勻，得1.0mg / ml番瀉苷元B DMSO溶液。將濃度為1.0mg/ml的番瀉苷元B DMSO溶液400 U I加入到制備好1dogen含量為40 ii g的涂管中，加入100 ill W 200 u Ci NamI溶液，振蕩搖勻，20_25°C反應60min左右,將反應液取出終止反應,測量標記率,標記率大于90%,表明標記成功。標記率測量方法:反應液用紙層析法測定標記率，Whatman濾紙作為載體，0.1mol / L HCl作為流動相展開。標記物采用紙層析法測量標記率，游離的mI分布在在溶劑前沿，而131I標記番灣苷元B保留在原點。
[0033]實施例1-71311標記的番瀉苷C的制備
[0034]稱取1.1mg粉末狀的番瀉苷C，溶于1.0ml DMSO中，振蕩搖勻，得1.lmg/ml番瀉苷C DMSO溶液。將濃度為1.1mg / ml的番瀉苷C DMSO溶液400 yl加入到制備好1dogen含量為40ii g的涂管中，加入IOOiU ^ 200 u Ci NamI溶液，振蕩搖勻，20-25°C反應60min左右，將反應液取出終止反應，測量標記率，標記率大于90%,表明標記成功。標記率測量方法:反應液用紙層析法 測定標記率，Whatman濾紙作為載體，0.1mol / L HCl作為流動相展開。標記物采用紙層析法測量標記率，游離的131I分布在在溶劑前沿，而mI標記番瀉苷C保留在原點。
[0035]實施例1-S131I標記的番瀉苷元C的制備[0036]稱取1.0mg粉末狀的番瀉苷元C，溶于2.0ml DMSO中，振蕩搖勻，得0.5mg / ml番瀉苷元C DMSO溶液。將濃度為0.5mg/ml的番瀉苷元C DMSO溶液400 U I加入到制備好1dogen含量為40 ii g的涂管中，加入100 ill W 200 u Ci NamI溶液，振蕩搖勻，20_25°C反應60min左右,將反應液取出終止反應,測量標記率,標記率大于90%,表明標記成功。標記率測量方法:反應液用紙層析法測定標記率，Whatman濾紙作為載體，0.1mol / L HCl作為流動相展開。標記物采用紙層析法測量標記率，游離的mI分布在在溶劑前沿，而131I標記番^與昔兀C保留在原點。
[0037]實施例1-91311標記的番瀉苷D的制備
[0038]稱取1.4mg粉末狀的番瀉苷D，溶于2.0ml DMSO中，振蕩搖勻，得0.7mg / ml番瀉苷D DMSO溶液。將濃度為0.7mg/ml的番瀉苷D DMSO溶液400 U I加入到制備好1dogen含量為40 u g的涂管中，加入IOOu I的200 u GiNa131I溶液，振蕩搖勻，20_25°C反應60min左右，將反應液取出終止反應，測量標記率，標記率大于90%,表明標記成功。標記率測量方法:反應液用紙層析法測定標記率，Whatman濾紙作為載體，0.1mol / LHCl作為流動相展開。標記物采用紙層析法測量標記率，游離的131I分布在在溶劑前沿，而mI標記番瀉苷D保留在原點。
[0039]實施例1-1O131I標記的番瀉苷元D的制備
[0040]稱 取1.1mg粉末狀的番瀉苷元D，溶于1.0ml DMSO中，振蕩搖勻，得1.lmg/ml番瀉苷元D DMSO溶液。將濃度為1.lmg/ml的番瀉苷元D DMSO溶液400 U I加入到制備好1dogen含量為40 ii g的涂管中，加入100 ill W 200 u Ci NamI溶液，振蕩搖勻，20_25°C反應60min左右,將反應液取出終止反應,測量標記率,標記率大于90%,表明標記成功。標記率測量方法:反應液用紙層析法測定標記率，Whatman濾紙作為載體，0.1mol / L HCl作為流動相展開。標記物采用紙層析法測量標記率，游離的mI分布在在溶劑前沿，而131I標記番灣苷元D保留在原點。
[0041]實施例1-1l131I標記的番瀉苷E的制備
[0042]稱取1.2mg粉末狀的番瀉苷E，溶于2.0ml DMSO中，振蕩搖勻，得0.6mg/ml番瀉苷E DMSO溶液。將濃度為0.6mg/ml的番瀉苷E DMSO溶液400 U I加入到制備好1dogen含量為40ii g的涂管中，加入IOOiU ^ 200 u Ci NamI溶液，振蕩搖勻，20-25°C反應60min左右，將反應液取出終止反應，測量標記率，標記率大于90%,表明標記成功。標記率測量方法:反應液用紙層析法測定標記率，Whatman濾紙作為載體，0.1mol / L HCl作為流動相展開。標記物采用紙層析法測量標記率，游離的131I分布在在溶劑前沿，而mI標記番瀉苷E保留在原點。
[0043]實施例1-121311標記的番瀉苷元E的制備
[0044]稱取1.0mg粉末狀的番瀉苷元E，溶于1.0ml DMSO中，振蕩搖勻，得1.0mg/ml番瀉苷元E DMSO溶液。將濃度為1.0mg/ml的番瀉苷元E DMSO溶液400 U I加入到制備好1dogen含量為40 ii g的涂管中，加入100 ill W 200 u Ci NamI溶液，振蕩搖勻，20_25°C反應60min左右,將反應液取出終止反應,測量標記率,標記率大于90%,表明標記成功。標記率測量方法:反應液用紙層析法測定標記率，Whatman濾紙作為載體，0.1mol / L HCl作為流動相展開。標記物采用紙層析法測量標記率，游離的mI分布在在溶劑前沿，而131I標記番灣苷元E保留在原點。[0045]實施例l-13131I標記的掌葉大黃二蒽酮A的制備
[0046]稱取1.0mg粉末狀的掌葉大黃二蒽酮A，溶于1.0ml DMSO中，振蕩搖勻，得1.0mg/ml掌葉大黃二蒽酮A DMSO溶液。將濃度為1.0mg/ml的掌葉大黃二蒽酮A DMSO溶液400iμ加入到制備好1dogen含量為40 μg的涂管中，加入100 μ I的200 μ Ci Na131I溶液，振蕩搖勻，20-25°C反應60min左右,將反應液取出終止反應,測量標記率,標記率大于90%,表明標記成功。標記率測量方法:反應液用紙層析法測定標記率，Whatman濾紙作為載體，
0.1mol / L HCl作為流動相展開。標記物采用紙層析法測量標記率，游離的131I分布在在溶劑前沿，而131I標記掌葉大黃二蒽酮A保留在原點。
[0047]實施例1-14131i標記的掌葉大黃二蒽酮B的制備
[0048]稱取1.0mg粉末狀的掌葉大黃二蒽酮B，溶于1.0ml DMSO中，振蕩搖勻，得1.0mg/ml掌葉大黃二蒽酮B DMSO溶液。將濃度為1.0mg/ml的掌葉大黃二蒽酮B DMSO溶液400iμ加入到制備好1dogen含量為40 μg的涂管中，加入100 μ I的200 μ Ci Na131I溶液，振蕩搖勻，20_25°C反應60min左右，將反應液取出終止反應,測量標記率,標記率大于90%,表明標記成功。標記率測量方法:反應液用紙層析法測定標記率，Whatman濾紙作為載體，
0.1mol / L HCl作為流動相展開。標記物采用紙層析法測量標記率，游離的131I分布在在溶劑前沿，而131I標記掌葉大黃二蒽酮B保留在原點。
[0049]實施例1-151311標記的掌葉大黃二蒽酮C的制備
[0050]稱取1.5mg粉末狀的掌葉大黃二蒽酮C，溶于1.0ml DMSO中，振蕩搖勻，得1.5mg/m1掌葉大黃二蒽酮C DMSO溶液。將濃度為1.5mg/ml的掌葉大黃二蒽酮C DMSO溶液400加入到制備好1dogen含量為40 μg的涂管中，加入100 μ I的200 μ Ci Na131I溶液，振蕩搖勻水浴鍋中45°C加熱，反應90min左右,將反應液取出終止反應,測量標記率,標記率大于90%,表明標記成功。標記率測量方法:反應液用紙層析法測定標記率，Whatman濾紙作為載體，0.1mol / L HCl作為流動相展開。標記物采用紙層析法測量標記率，游離的131I分布在在溶劑前沿，而131I標記掌葉大黃二蒽酮C保留在原點。
[0051 ] 以上標記過程中，番瀉苷A及其苷元、番瀉苷B及其苷元、番瀉苷C及其苷元、番瀉苷D及其苷元、番瀉苷E及其苷元、掌葉大黃二蒽酮A、掌葉大黃二蒽酮B、掌葉大黃二蒽酮C均為現有化合物，可以通過直接購買或者按照現有制備公開文獻中的方法獲取。
[0052]實施例2溶解度實驗
[0053]固-液平衡裝置測定金絲桃素在混合溶劑(其中DMS0、PEG400、丙二醇、生理鹽水的比例為1:1:1:2)中的溶解度
[0054]在平衡管中放入過量的金絲桃素，然后加入一定量的混合溶劑(其中DMSO、PEG400、丙二醇、生理鹽水的比例為1:1:1:2)，橡皮塞封閉，先超聲一段時間后再放入固液平衡裝置中，磁子攪拌。水浴恒溫(25°C )，精度0.01K。攪拌60小時后，避光靜置48小時。
[0055]取樣分析:從玻璃管中取上層清液放入5ml離心管中，以4000r / min的轉速離心15min，取上清液進行HPLC分析，然后根據標準曲線計算溶解度，溶解度為1.31mg / ml。
[0056]色譜條件:2695泵，2475突光檢測器,色譜柱:C18 (250mmX4.6mm, 5 μ m),流動相:甲醇:0.06mmol / L磷酸緩沖液,柱溫:30°C,流速:1.0ml / min。
[0057]按照實施例2中的方式，分別對原金絲桃素、番瀉苷A、番瀉苷元A、番瀉苷B、番瀉苷元B、番瀉苷C、番瀉苷元C、番瀉苷D、番瀉苷元D、番瀉苷E、番瀉苷元E、掌葉大黃二蒽酮A、掌葉大黃二蒽酮B、掌葉大黃二蒽酮C進行溶解度測定實驗。實驗結果見表1。
[0058]表1金絲桃素、原金絲桃素、番瀉苷A、番瀉苷元A番瀉苷B、番瀉苷元B、番瀉苷C、番瀉苷元C、番瀉苷D、番瀉苷元D、番瀉苷E、番瀉苷元E、掌葉大黃二蒽酮A、掌葉大黃二蒽酮B、掌葉大黃二蒽酮C的溶解度
[0059]
【權利要求】
1.同位素標記的二蒽酮類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應用。
2.根據權利要求1所述的應用，其特征是所述二蒽酮類化合物為通式I所示的化合物，
3.根據權利要求1所述的應用，其特征是所述二蒽酮類化合物為番瀉苷A及其苷元、番瀉苷B及其苷元、番瀉苷C及其苷元、番瀉苷D及其苷元、番瀉苷E及其苷元、掌葉大黃二蒽酮A、掌葉大黃二蒽酮B、掌葉大黃二蒽酮C中的任意一種或者幾種。
4.根據權利要求1所述的應用，其特征是:所述同位素標記為32P、47Sc、64Cu、67Cu、89Sr、90Y^105Rh,111Ag^117Sn,149Pm,153Sm,166Ho,177Lu,1311,186Re,188Re,211Bi,212Bi,213Bi,214Bi,211At 標記。`
【文檔編號】A61P35/00GK103585647SQ201310606546
【公開日】2014年2月19日 申請日期:2013年11月27日 優(yōu)先權日:2013年11月27日
【發(fā)明者】張健, 倪以成, 孫自平, 高萌, 蔣翠花, 李玥, 江驍, 姚楠, 黃德健 申請人:江蘇省中醫(yī)藥研究院