一種十?dāng)?shù)樟提取物的制備方法和應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種十?dāng)?shù)樟提取物的制備方法和應(yīng)用，其步驟：A、將凍存于-78－-82℃冰箱的新鮮烏干達(dá)十?dāng)?shù)樟樹皮取出，用研磨儀粉碎至60—100目；B、稱取藥材粗粉，過70-90目篩，按10倍量體積分別加入甲醇、正己烷、乙酸乙酯、乙醇和正丁醇各200mL，38－42℃條件下超聲處理28－32min；C、提取液10000r/min離心28－32min得上清液，每種溶劑分別重復(fù)提取2－4次，合并上清液，44－46℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)揮去有機(jī)溶劑得濃縮浸膏，D、乙醇提取物經(jīng)凍干或噴霧干燥，得到一種烏干達(dá)十?dāng)?shù)樟提取物。方法易行，操作簡便，以植物園引種的烏干達(dá)十?dāng)?shù)樟新鮮樹皮為原料，經(jīng)簡單粉碎后通過溶劑超聲提取，離心、除雜，濃縮和干燥等步驟，提取制備出了具有很強(qiáng)抑菌活性的十?dāng)?shù)樟提取物。
【專利說明】一種十?dāng)?shù)樟提取物的制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于民族藥物領(lǐng)域，更具體涉及一種十?dāng)?shù)樟提取物的制備方法，同時涉及一種十?dāng)?shù)樟提取物在治療或預(yù)防口腔疾病藥物中的用途。
【背景技術(shù)】
[0002]口腔常見疾病如齲齒、牙齦炎、牙周炎、牙齦膿腫、牙齒松動等都與口腔致病菌密切相關(guān)?？谇恢幸坏┏霈F(xiàn)微小傷口，致病菌還可隨著血液循環(huán)到達(dá)身體其它地方，引起關(guān)節(jié)炎、心內(nèi)膜炎等疾病；且因其發(fā)病部位一口腔頜面部與頭部各器官關(guān)系密切，一旦發(fā)病病情常較急重，控制不佳極易引起全身并發(fā)癥。使用化學(xué)漱口液是預(yù)防和治療口腔疾病的重要手段，目前臨床常用的化學(xué)漱口液雖有較好的抑菌作用，但也存在口感不佳及藥物不良反應(yīng)，嚴(yán)重者甚至可引起口腔黏膜剝脫(吳飛華等，2006 )。
[0003]烏干達(dá)十?dāng)?shù)樟(Warburgia ugandensis)為白桂皮目，白桂皮科,十?dāng)?shù)樟屬植物，廣泛分布于非洲的熱帶及亞熱帶地區(qū)。在非洲當(dāng)?shù)?，W.ugandensis是一種重要的傳統(tǒng)藥物，其樹皮及根常用于治療牙痛、胃痛、肌肉痛、便秘、腹瀉、瘧疾、傷口潰爛等(Kokwaro etal., 2009) ο已有研究表明，W.ugandensis中含有豐富的倍半職烯類化合物,并具有顯著的抗細(xì)菌、抗真菌、抗?jié)?、滅螺、抗利什曼蟲、昆蟲拒食等活性(Opiyo et al.，2011)。目前國內(nèi)尚無烏干達(dá)十?dāng)?shù)樟抑菌活性提取物的制備及其表征方法的報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是在于提供了一種十?dāng)?shù)樟提取物的制備方法，方法易行，操作簡便，以植物園引種的烏干達(dá)十?dāng)?shù)樟新鮮樹皮為原料，經(jīng)簡單粉碎后通過溶劑超聲提取，離心、除雜，濃縮和干燥等步驟，提取制備出了具有很強(qiáng)抑菌活性的十?dāng)?shù)樟提取物。
[0005]本發(fā)明的另一個目的是在于提供了一種十?dāng)?shù)樟提取物在治療或預(yù)防口腔疾病藥物中的應(yīng)用。其優(yōu)點在于無毒副作用、不刺激口腔黏膜，不產(chǎn)生耐藥性，屬于發(fā)展前景較好的口腔清潔抗菌劑。
[0006]為了實現(xiàn)上述的目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)措施:
[0007]非洲特有藥用植物-烏干達(dá)十?dāng)?shù)樟(Warburgia ugandensis)抗口腔致病菌活
性成分的提取、分離、制備、表征及其應(yīng)用。以鮮烏干達(dá)十?dāng)?shù)樟樹皮為原料，在不同溫度、不同溶劑和不同提取方法下對其中的抗菌活性成分進(jìn)行提取，結(jié)果表明在40°C條件下，以乙醇、正己烷等為提取溶劑，料液比10:1，超聲處理30min提取效果最佳?？咕钚詼y試表明，按上述方法的乙醇等混合 溶劑提取物活性最高，對枯草芽孢桿菌(B.subtilis)、埃希氏大腸桿菌(E.coli)和金黃色葡萄球菌(S.aureus)抑菌圈直徑分別為19、14、19mm，與陽性對照慶大霉素相當(dāng)；對變異鏈球菌(Streptococcus mutans)、放線伴生菌(Actinobacillusactinomycetemcomitans)、牙銀口卜啉單胞菌(Porphyromonas gingivalis)、白念珠菌(Canidia albicans)、粘(性)放線菌(Actinomyces viscosus)、放線菌內(nèi)氏放線菌(Actinomyces naeslundii)、具核梭桿菌(Fusobacterium nucleatum)等常見口腔致病菌的MIC值為3.5-16mg/mL之間，與陽性對照甲硝唑接近。利用LC-ES1-MSn的對其提取物進(jìn)行分析，結(jié)果表明主要為drimane型倍半萜類成分。烏干達(dá)十?dāng)?shù)樟樹皮提取物具有良好的抑菌作用，且無毒性、不刺激口腔黏膜，不產(chǎn)生耐藥性，屬于發(fā)展前景較好的口腔清潔抗菌劑。
[0008]一種十?dāng)?shù)樟提取物的制備方法，其步驟是:
[0009]A、將凍存于-78 - _82°C冰箱的新鮮烏干達(dá)十?dāng)?shù)樟樹皮取出，用研磨儀粉碎至60—100 目。
[0010]B、稱取藥材粗粉，過70-90目篩，按10倍量(m/V)體積分別加入甲醇、正己烷、乙酸乙酯、乙醇和正丁醇各200mL，38 — 42°C條件下超聲處理28 — 32min，獲得一種提取液。
[0011]C、將提取液10000r/min離心28 — 32min得上清液。每種溶劑(甲醇、正己烷、乙
酸乙酯、乙醇和正丁醇等)分別重復(fù)提取2 - 4次，合并上清液，44 - 46°C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)揮去有機(jī)溶劑得濃縮浸膏。
[0012]D、乙醇提取物經(jīng)凍干或噴霧干燥，得到一種烏干達(dá)十?dāng)?shù)樟提取物。
[0013]一種烏干達(dá)十?dāng)?shù)樟提取物，它由多種drimane型倍半萜類化合物組成，其中已鑒
定活性成分為一種十?dāng)?shù)樟提取物的結(jié)構(gòu)式如下:
【權(quán)利要求】
1.一種十?dāng)?shù)樟提取物的制備方法，其步驟是:A、將凍存于-78- _82°C冰箱的新鮮烏干達(dá)十?dāng)?shù)樟樹皮取出，用研磨儀粉碎至60 —100目； B、稱取藥材粗粉，過70-90目篩，按10倍量體積分別加入甲醇、正己烷、乙酸乙酯、乙醇和正丁醇各200mL，38 — 42°C條件下超聲處理28 — 32min ； C、提取液10000r/min離心28— 32min得上清液，每種溶劑分別重復(fù)提取2 — 4次，合并上清液，44 - 46°C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)揮去有機(jī)溶劑得濃縮浸膏， D、乙醇提取物經(jīng)凍干或噴霧干燥，得到一種烏干達(dá)十?dāng)?shù)樟提取物。
2.權(quán)利要求1所述的一種烏干達(dá)十?dāng)?shù)樟提取物，其特征在于:十?dāng)?shù)樟提取物的結(jié)構(gòu)式如下:
3.權(quán)利要求1所述的一種十?dāng)?shù)樟提取物在治療或預(yù)防口腔疾病藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號】A61P1/02GK103550107SQ201310570931
【公開日】2014年2月5日 申請日期:2013年11月13日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月13日
【發(fā)明者】郭明全, 王青鋒, 朱洺志, 劉源振 申請人:中國科學(xué)院武漢植物園