土木香總內酯的制備方法
【專利摘要】一種土木香總內酯的優(yōu)化提純制備工藝，采用乙醇溶液加熱回流提取得到醇浸膏，再將醇浸膏進行一次硅膠柱層析即得到純度大于90%的土木香總內酯精制品，本發(fā)明具有純度高、提取效率高、工藝簡單、成本低廉等優(yōu)點。
【專利說明】土木香總內酯的制備方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及的是一種生物醫(yī)藥【技術領域】的方法，具體是一種制備具有治療腸易激綜合癥(IBS)作用的土木香總內酯的簡便方法。
【背景技術】
[0002]土木香為菊科旋覆花屬植物土木香Inula helenium L.的干燥根,為一常用中藥，具有健脾和胃、調氣解郁、止痛安胎的功效。土木香總內酯(主要成分為異土木香內酯、土木香內酯)是其健脾和胃功效的有效成分，用于治療IBS有顯著療效。
[0003]
異土木香內酯土木香內酯
[0004]然而，土木香化學成分復雜，含有揮發(fā)油、脂肪油、菊糖、香豆素等多種成分。因此，如何從土木香中高純度的土木香總內酯具有重要意義。
[0005]《中國實驗方劑學雜志》于2012年6月(18卷第12期)，38-40頁，名稱為“正交試驗法優(yōu)化土木香根中土木香內酯和異土木香內酯的提取工藝”公開了一種從土木香分離土木香內酯和異土木香內酯的方法，即:土木香用15倍量65%乙醇超聲提取2次，每次30min。這種方法需要采用超聲提取，而超聲提取不適合工廠大規(guī)模生產；同時這種提取方法不能保證提取物的純度與提取率，不利于大量制備高純度的提取物。
[0006]經過對現有技術的檢索發(fā)現，中國專利文獻號CN102526150，
【公開日】2012_07_04，公開了一種土木香總倍半萜內酯 提取物的制備方法，通過將土木香的干燥根粉碎，經極性有機溶劑提取，提取液加1-3%活性炭脫色，濾過，減壓回收試劑，濃縮至含醇量低于10%，用非極性有機溶劑萃取后得到土木香總內酯，再經聚酰胺樹脂柱層析分離，收集所需成分，得到土木香總倍半萜內酯提取物。但該技術工藝繁瑣，成本較高，不便于進行大規(guī)模生產。
[0007]中國專利文獻號CN103251666，
【公開日】2013-08-21，公開了一種土木香總倍半萜內酯的制備方法，該方法包括(I) 土木香藥材原料用60~90%乙醇回流提取、濃縮，(2)濃縮液通過大孔吸附樹脂富集等步驟制得。該技術用乙醇水溶液進行提取，經大孔吸附樹脂柱富集后即可得到主要成分土木香內酯和異土木香內酯含量之和為60%-90%的土木香總倍半萜內酯，收率2.5%，極大地提高了中藥中有效成分的提取效率。但該技術工藝不穩(wěn)定，不能確保提取出高純度的土木香倍半萜內酯，并且成本較高。
【發(fā)明內容】

[0008]本發(fā)明針對現有技術存在的上述不足，提出一種土木香總內酯的制備方法，該方法具有純度高、提取效率高、工藝簡單、成本低廉等優(yōu)點。
[0009]本發(fā)明是通過以下技術方案實現:本發(fā)明采用乙醇溶液加熱回流提取得到醇浸膏，再將醇浸膏進行一次硅膠柱層析即得到純度大于90%的土木香總內酯精制品，本發(fā)明具體步驟如下:
[0010]I)先將土木香藥材干燥后粉碎成粗粉并用乙醇溶液浸泡；
[0011]2)將浸泡后的藥材加熱回流并回收溶劑，即得土木香醇浸膏；
[0012]3)將土木香醇浸膏進行硅膠柱層析并回收洗脫液以便反復利用；
[0013]4)收集經硅膠柱層析后所得中的溶劑，并將其中溶質減壓干燥后得到純度大于90%以上的總內酷精制品。
[0014]所述的土木香藥材采用干燥的土木香根部。
[0015]所述的浸泡是指:采用濃度為70~95% (v/v)乙醇溶液浸泡6~24h，其用量為8~12倍量(v/w)。
[0016]所述的加熱回流過程中采用70-95% (v/v)的乙醇溶液回流I~3小時。
[0017]所述的硅膠柱層析是 指:采用100-200目粒徑的硅膠，其用量為:土木香醇浸膏:硅膠1:2~1:3 (w/w);色譜柱徑高比為1:2~1:5 ;洗脫劑組成為:石油醚:丙酮(100:2~100:4，v/v);洗脫劑用量為:每克藥材使用IOmL~14mL洗脫劑。
技術效果
[0018]與現有技術相比，本發(fā)明技術效果包括:
[0019]I)通過采用乙醇溶液加熱回流提取得到醇浸膏，再將土木香醇浸膏進行硅膠柱后即得精制土木香總內酯。采用上述方法制備土木香總內酯，純度高，內酯的含量以異土木香內酯、土木香內酯計算在90%以上；工藝簡便，成本低廉；提取率高，可達65%以上。
[0020]2)采用95%乙醇回流提取，去除了糖類等水溶性雜質；經濟快捷，同時提高了提取的效率。
[0021]3)采用硅膠柱層析方法進行純化，采用石油醚-丙酮進行洗脫，除去了油酯、香豆素等脂溶性雜質的干擾；同時，石油醚-丙酮又可回收使用，節(jié)約了成本。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0022]圖1為精制土木香總內酯的Agilentl290UPLC圖譜；
[0023]圖中:1為異土木香內酯；2為土木香內酯，采用的色譜柱為Eclipse Plus C18(1.8 μ m, 2.l*50mm);流動相:乙腈:水(40:60, v/v),流速 0.6mL/min ;檢測波長 210nm。
【具體實施方式】
[0024]下面對本發(fā)明的實施例作詳細說明，本實施例在以本發(fā)明技術方案為前提下進行實施，給出了詳細的實施方式和具體的操作過程，但本發(fā)明的保護范圍不限于下述的實施例。
實施例1
[0025]本實施例是在以下實施條件和技術要求條件下實施的:[0026]I)干燥的土木香根650g，粉碎成粗粉，加入5200mL70%乙醇，浸泡6h。
[0027]2)將步驟I)中的藥材與溶劑，加熱回流3h，回收溶劑，即得土木香醇浸膏156.65g，經UPLC檢測，純度(以異土木香內酯、土木香內酯含量之和計算)為8.17%。
[0028]3)將步驟2)中醇浸膏，進行硅膠柱層析，采用100— 200目粒徑的硅膠，上樣量為樣品:硅膠I:2 (w/w)，徑高比為1:2，石油醚:丙酮(100:2，V/V)9100mL洗脫，收集洗脫液。
[0029]4)將步驟3)中洗脫液，回收溶劑，減壓干燥至恒重，得到總內酯精制品11.13g。經UPLC檢測，其純度(以異土木香內酯、土木香內酯含量之和計算)為91.44%ο
實施例2
[0030]本實施例是在以下實施條件和技術要求條件下實施的:
[0031]I)干燥的土木香根653g，粉碎成粗粉，加入7836mL85%乙醇，浸泡15h。
[0032]2)將步驟I)中的藥材與溶劑，加熱回流2h，回收溶劑，即得土木香醇浸膏162.34g J^UPLC檢測，其純度(以異土木香內酯、土木香內酯含量之和計算)為7.16%。
[0033]3)將步驟2)中醇浸膏，進行硅膠柱層析，采用100— 200目粒徑的硅膠，上樣量為樣品:硅膠1:2.5 (w/w)，徑高比為1:3.5，石油醚:丙酮(100:3，v/v) 7836mL洗脫劑，收集洗脫液。
[0034]4)將步驟3)中洗脫液，回收溶劑，減壓干燥至恒重，得到總內酯精制品11.1Sgo經UPLC檢測，其純度(以異土木香內酯、土木香內酯含量之和計算)為92.15%。 實施例3
[0035]本實施例是在以下實施條件和技術要求條件下實施的:
[0036]I)干燥的土木香根650.8g，粉碎成粗粉，加入7809.6mL95%乙醇，浸泡24h。
[0037]2)將步驟I)中的藥材與溶劑，加熱回流lh，回收溶劑，即得土木香醇浸膏158.86g J^UPLC檢測，其純度(以異土木香內酯、土木香內酯含量之和計算)為7.94%。
[0038]3)將步驟2)中醇浸膏，進行硅膠柱層析，采用100— 200目粒徑的硅膠，上樣量為樣品:硅膠I:3 (w/w),徑高比為1:5，石油醚:丙酮(100:4, v/v),6508mL洗脫，收集洗脫液。
[0039]4)將步驟3)中洗脫液，回收溶劑，減壓干燥至恒重，得總內酯精制品11.16g。經UPLC檢測，其純度(以異土木香內酯、土木香內酯含量之和計算)為92.12%。
【權利要求】
1.一種土木香總內酯的優(yōu)化提純制備工藝，其特征在于，采用乙醇溶液加熱回流提取得到醇浸膏，再將醇浸膏進行一次硅膠柱層析即得到純度大于90%的土木香總內酯精制品O
2.根據權利要求1所述的方法，其特征是，所述方法的具體步驟如下: 1)先將土木香藥材干燥后粉碎成粗粉并用乙醇溶液浸泡； 2)將浸泡后的藥材加熱回流并回收溶劑，即得土木香醇浸膏； 3)將土木香醇浸膏進行硅膠柱層析并收集洗脫液； 4)收集經硅膠柱層析后所得中的溶劑，并將其中溶質減壓干燥后得到純度大于90%以上的總內酷精制品。
3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征是，所述的土木香藥材采用干燥的土木香根部。
4.根據權利要求2所述的方法，其特征是，所述的浸泡是指:采用濃度為70~95%(v/V)乙醇溶液浸泡6~24h，其用量為8~12倍量(v/w)。
5.根據權利要求1或2所述的方法，其特征是，所述的加熱回流過程中采用70-95%(v/V)的乙醇溶液回流I~3小時。
6.根據權利要求1或2所述的方法，其特征是，所述的硅膠柱層析是指:采用100-200目粒徑的硅膠，其用量為:土木香醇浸膏:硅膠1:2~1:3 (w/w);色譜柱徑高比為1:2~.1:5 ;洗脫劑組成為:石油醚:丙酮(100:2~100:4，v/v);洗脫劑用量為:每克藥材使用.1OmL~14mL洗脫劑。
【文檔編號】A61K125/00GK103494854SQ201310478897
【公開日】2014年1月8日 申請日期:2013年10月14日 優(yōu)先權日:2013年10月14日
【發(fā)明者】李曉波, 王夢月, 張樂 申請人:上海交通大學