專(zhuān)利名稱(chēng)：干酪乳桿菌和銀杏葉提取物在制備防治高脂血癥藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及的是干酪乳桿菌干酪亞種和銀杏葉提取物在制備預(yù)防和治療高脂血癥中藥物的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
進(jìn)入21世紀(jì)人們生活水平有了顯著提高，與此同時(shí)一些與生活方式相關(guān)性疾病開(kāi)始成為威脅人類(lèi)健康的首要原因。在我國(guó)心腦血管疾病的死亡率已經(jīng)上升到第二位。高血脂癥即血清總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白的增高，是引起心腦血管疾病的一個(gè)主要原因。大量的流行病學(xué)調(diào)查和研究均表明，高血脂癥是當(dāng)今社會(huì)常見(jiàn)的一種疾病，近年來(lái)，它的發(fā)病率在逐漸的上升，已被稱(chēng)為“人類(lèi)健康的三大殺手之一”，對(duì)人的健康所造成的傷害非常大。高血脂除可以導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化、誘發(fā)冠心病、腦中風(fēng)、心肌梗塞等疾病外，還會(huì)誘發(fā)高血壓、高血糖、脂肪肝、胰腺炎、眼底出血等嚴(yán)重的疾病，對(duì)人體的危害十分嚴(yán)重，極大地影響到患者的生活質(zhì)量。

因此，研究開(kāi)發(fā)能夠降低高血脂的保健藥品對(duì)預(yù)防疾病保護(hù)人民身體健康有重要的意義。然而，在高血脂癥新型保健食品開(kāi)發(fā)及新藥研究中，常見(jiàn)的降脂藥物雖對(duì)血脂調(diào)節(jié)較強(qiáng)，但副作用也較明顯，在治療疾病的同時(shí)也留下不少后遺癥，研制既安全有效又綠色環(huán)保無(wú)毒副作用的降脂藥物成為當(dāng)前醫(yī)學(xué)研究中一個(gè)重要課題。乳酸菌作為微生態(tài)制劑，具有減少血清中的膽固醇含量，降低心血管疾病發(fā)病率的功效。此外還刺激機(jī)體免疫功能，改善宿主機(jī)體的各種生理功能，達(dá)到防病治病，促進(jìn)生長(zhǎng)的目的，被認(rèn)為是一種具有多重降血脂作用的微生物。此外，乳酸菌還有抑制NPClLl蛋白、影響自主交感神經(jīng)活動(dòng)、促進(jìn)脂肪組織的生熱作用和改善肝臟NKT細(xì)胞衰竭等新的機(jī)制。人體臨床試驗(yàn)分析也表明，口服乳酸菌可以對(duì)總膽固醇水平和LDL膽固醇水平產(chǎn)生有益作用。研究顯示，初級(jí)膽汁酸作為膽固醇的一個(gè)重要產(chǎn)物，可被乳酸菌所產(chǎn)生的膽鹽水解酶分解成游離膽汁酸和氨基酸，難溶的游離膽汁酸鹽隨著糞便排出，減少對(duì)膽汁酸的重吸收，增加膽固醇向膽鹽的轉(zhuǎn)化，從而降低膽固醇水平。研究發(fā)現(xiàn)，銀杏葉是一種具有多種藥理功能的中藥，含有黃酮類(lèi)、酚類(lèi)、萜類(lèi)以及氨基酸類(lèi)等多種化學(xué)成分。從銀杏葉中提取的有效活性成分主要有2類(lèi)活性物質(zhì)，分別是銀杏萜內(nèi)酯類(lèi)化合物和黃酮類(lèi)化合物，是一種天然的自由基清除劑，具有抗氧化、抗菌消炎以及改善缺血心肌功能等生理功效，其藥用價(jià)值十分突出。EGb (銀杏葉提取物)可明顯提升高密度脂蛋白含量，抑制PAF，降低血液黏度以及血漿膽固醇與血纖蛋白原的合成，改善血漿磷脂和膽固醇的比例。試驗(yàn)報(bào)道，銀杏黃酮能促進(jìn)脂肪細(xì)胞的脂解作用。另有報(bào)道，給SD大鼠飼喂高脂飼料IOd后，加喂EGb，18d后與對(duì)照組相比，SD大鼠血清中膽固醇含量極顯著降低，甘油三酯也顯著降低，說(shuō)明EGb具有明顯降低血脂的作用。隨著對(duì)藥物危害的認(rèn)識(shí)，中草藥以其無(wú)毒害副作用受到青昧。大量研究表明，中藥對(duì)益生菌的增殖有促進(jìn)作用，將有益菌與中藥聯(lián)合應(yīng)用，不僅具有無(wú)毒、無(wú)害和無(wú)污染的特點(diǎn)，而且還可通過(guò)相互的促進(jìn)作用加強(qiáng)療效。目前，已有大量研究表明，乳酸菌及銀杏葉提取物均有降低小鼠血脂的作用。但是尚未見(jiàn)兩者的比較及聯(lián)合作用的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足提供一種干酪乳桿菌和銀杏葉提取物在制備防治高脂血癥藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的技術(shù)方案如下:干酪乳桿菌和銀杏葉提取物在制備防治高脂血癥藥物中的應(yīng)用，干酪乳桿菌與銀杏葉提取物協(xié)同，具有調(diào)血脂降血脂、促進(jìn)膽固醇代謝、控制體重的作用，用于預(yù)防和治療聞脂血癥。將體重為20±lg的小鼠隨機(jī)分成5組，分別為:空白對(duì)照組、高脂對(duì)照組、干酪乳桿菌組、銀杏葉組和混合組，除空白對(duì)照組外，其他4組給予高脂飼料，每周稱(chēng)I次體重，建立肥胖模型，試驗(yàn)期為30天。測(cè)定各組小鼠體重及血清中總膽固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、丙二醛(MDA)含量及谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)和過(guò)氧化氫酶(CAT)等的活性。結(jié)果干酪乳桿菌與銀杏葉提取物協(xié)同作用明顯降低了肥胖小鼠體質(zhì)量、TC、TG和MDA ；TC和TG降解率分別達(dá)到24.48%和20.93%，小鼠體重較高脂組降低了 13.22%，MDA的含量降低了 5.98%。小鼠血清中HDL-C有明顯的升高，提升率高達(dá)167.85%。小鼠體內(nèi)GSH-PX活力提高了 13.14%，CAT、S0D等酶活力分別降低了 49.02%、
3.13%。干酪乳桿菌與銀杏葉提取物協(xié)同作用，具有降血脂、促進(jìn)膽固醇代謝、控制體重的作用，可用于預(yù)防和治療高脂血癥。
具體實(shí)施方式
以下結(jié)合具體實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。I材料與方法1.1 材料銀杏葉有效成分提取物(購(gòu)于四川同泰植物化工有限公司)，干酪乳桿菌Kl菌株(干酪乳桿菌干酪亞種購(gòu)買(mǎi)于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(地址:中國(guó)北京市海淀區(qū)中關(guān)村北一條13號(hào)，中國(guó)科學(xué)院微生物研究所)，編號(hào)為:CGMCC1.2435)，實(shí)驗(yàn)小白鼠60只(四川農(nóng)業(yè)大學(xué)龍鼠家園雌性小鼠60只，體重19 21g)，MRS培養(yǎng)基(蛋白胨10g，牛肉膏5g，酵母膏粉4g，葡萄糖20g，吐溫-801ml，磷酸氫二鉀2g，乙酸鈉5g，檸檬酸三銨0.2g，磷酸鎂O, 2g，硫酸錳0.05g)，灌胃針。1.2儀器設(shè)備全自動(dòng)生化分析儀GS200 (深圳市錦瑞電子有限公司)，AL204電子天平(梅特勒-托利多儀器有限公司)。1.3 方法1.3.1灌胃乳酸菌菌液的制備將干酪乳桿菌Kl菌株涂布于MRS固體培養(yǎng)基上,37°C靜置培養(yǎng)24h。挑取單一菌落接種MRS液體培養(yǎng)基，37°C培養(yǎng)32 36h后備用。在無(wú)菌操作的條件下，取ImL培養(yǎng)后的菌液加入裝有99mL無(wú)菌生理鹽水的錐形瓶中，用漩渦振蕩器振蕩lOmin，使試樣混合均勻，即成10_2稀釋液，然后無(wú)菌IO倍稀釋?zhuān)謩e從10_5、10_6、IO-7三個(gè)稀釋度試管中取0.1mL稀釋液，涂布接種于MRS瓊脂平板中，每個(gè)稀釋度3塊平皿。37°C厭氧培養(yǎng)至長(zhǎng)出菌落后進(jìn)行平板計(jì)數(shù)。在灌胃前，樣品均以PBS溶液制成IO8Cfu / mL懸液,臨用時(shí)新鮮配制。1.3.2銀杏葉提取物溶液的配置銀杏葉提取物(EGb，含24%黃酮苷，6%銀杏內(nèi)酯)加溫配成37 °C水溶液，以100mg/kg體重的黃酮量灌胃小鼠，配成濃度為41.7mg/mL的銀杏溶液(含銀杏葉提取物
0.4178/1^體重)。1.3.3高脂飼料的制備高脂飼料配方:膽固醇2%、膽酸鈉0.5%、丙硫氧嘧啶0.2%、蔗糖5%、豬油10%、基礎(chǔ)飼料82.3%o1.3.4動(dòng)物飼喂及血清樣品的制備將健康的小鼠60只在干燥、清潔、通風(fēng)良好的環(huán)境中飼養(yǎng)，溫度控制在24土 1°C，預(yù)飼一周基礎(chǔ)飼料后，將小鼠隨機(jī)分成5組，試驗(yàn)分組及處理見(jiàn)表I。表I動(dòng)物分組及處理
權(quán)利要求
1.干酪乳桿菌和銀杏葉提取物在制備防治高脂血癥藥物中的應(yīng)用，其特征在于，干酪乳桿菌與銀杏葉提取物協(xié)同，具有降血脂、促進(jìn)膽固醇代謝、控制體重的作用，用于預(yù)防和治療1 脂血癥。`
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了干酪乳桿菌和銀杏葉提取物在制備防治高脂血癥藥物中的應(yīng)用，干酪乳桿菌與銀杏葉提取物協(xié)同作用明顯降低了肥胖小鼠體質(zhì)量、TC、TG和MDA；TC和TG降解率分別提高24.48％和20.93％，小鼠體重較高脂組降低了13.22％，MDA的含量降低了5.98％。小鼠血清中HDL-C有明顯的升高，提升率高達(dá)167.85％。小鼠體內(nèi)GSH-PX提高了13.14％，CAT、SOD等酶的活力分別下降49.02％、3.13％。干酪乳桿菌與銀杏葉提取物協(xié)同作用，具有降血脂、促進(jìn)膽固醇代謝、控制體重的作用，可用于預(yù)防和治療高脂血癥。
文檔編號(hào)A61K36/16GK103222990SQ20131014826
公開(kāi)日2013年7月31日 申請(qǐng)日期2013年4月25日 優(yōu)先權(quán)日2013年4月25日
發(fā)明者曾東, 倪學(xué)勤, 溫嘯, 辛金鴿, 曾燕, 賀大方, 張丹, 丁艷東, 李利杰 申請(qǐng)人:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)