專(zhuān)利名稱(chēng)：一種治療阿爾茨海默病的中藥組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療阿爾茨海默病的中藥組合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
目前，全世界65歲以上人群中老年期癡呆患病率為10%，80歲以上可達(dá)20 %。在發(fā)達(dá)國(guó)家中該病在死亡原因中名列第四位，僅次于心臟病、阿爾茨海默病和中風(fēng)。此病已列入老年醫(yī)學(xué)和老年精神病學(xué)的重要課題。老年期癡呆的病理改變?yōu)榇竽X皮質(zhì)萎縮，皮質(zhì)神經(jīng)減少，大腦皮質(zhì)和海馬中大量神經(jīng)元纖維纏結(jié)和老年斑。臨床上是以在意識(shí)清晰狀態(tài)下出現(xiàn)的認(rèn)識(shí)、思維、情感、人格、行為和語(yǔ)言等高級(jí)神經(jīng)機(jī)能的全面衰退為特征，典型癥狀表現(xiàn)為癡呆、失言和語(yǔ)言障礙等。老年癡呆癥由于病因復(fù)雜、多因異質(zhì)的病因?qū)W特點(diǎn)，西醫(yī)尚無(wú)有效的治療方法。阿爾茨海默病(Alzheimer disease，AD)，又叫老年性癡呆，是一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)變性病，起病隱襲，病程呈慢性進(jìn)行性，是老年期癡呆最常見(jiàn)的一種類(lèi)型。AD的主要表現(xiàn)為漸進(jìn)性記憶障礙、認(rèn)知功能障礙、人格改變及語(yǔ)言障礙等神經(jīng)精神癥狀，嚴(yán)重影響社交、職業(yè)與生活功能。AD的病因及發(fā)病機(jī)制尚未闡明，特征性病理改變?yōu)棣碌矸蹣拥鞍壮练e形成的細(xì)胞外老年斑和tau蛋白過(guò)度磷酸化形成的神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)神經(jīng)原纖維纏結(jié)，以及神經(jīng)元丟失伴膠質(zhì)細(xì)胞增生等?，F(xiàn)在市場(chǎng)上治療藥物主要有膽堿酯酶抑制劑(ChEIs)、谷氨酸受體拮抗劑(NMDAR拮抗劑)、抑制A β形成和沉積的藥物、鈣離子拮抗劑、清除自由基劑及抗氧化性藥物、雌激素等，上述藥物主要以化學(xué)藥為主，但化學(xué)藥都有藥效局限性和一定的毒副作用，使其臨床應(yīng)用受到一定限制。因此，國(guó)內(nèi)外學(xué)者把目光轉(zhuǎn)向了中草藥。目前以中藥為主治療老年癡呆疾病的藥物有很多，如CN101129608A公開(kāi)了一種治療阿爾茨海默病的膠囊，含有人參、當(dāng)歸、首烏、三七、枸杞子等十味中藥，劑型為膠囊；CN102028910B公開(kāi)了一種治療老年癡呆的中藥制劑及其制備方法，包括甘草、僵蠶、大黃、紅花、薄荷、蟬蛻、姜黃、黃連等i^一味中藥，為藥汁濃縮所得的粘稠液體；CN101637590B公開(kāi)了一種治療老年癡 呆癥的中藥，包括茯神、石菖蒲、遠(yuǎn)志、蜈蚣、益智、桃仁、大黃、玄明粉、桂枝、龍骨、山茱萸等十五味中藥，其主要?jiǎng)┬蜑槊弁琛Ｉ鲜鏊幬镏饕且灾兴幗M合物為主，中西相結(jié)合的產(chǎn)品較為少見(jiàn)。中醫(yī)是以治本為主，西醫(yī)以治標(biāo)為主，將傳統(tǒng)的中醫(yī)中藥知識(shí)和方法與西醫(yī)西藥的知識(shí)和方法結(jié)合起來(lái)，如用西醫(yī)理論和方法對(duì)傳統(tǒng)方劑的作用加以說(shuō)明，即中西醫(yī)結(jié)合，體現(xiàn)了標(biāo)本兼治的優(yōu)點(diǎn)。中西醫(yī)結(jié)合工作，在我國(guó)不僅在臨床醫(yī)療和預(yù)防保健等方面廣泛開(kāi)展，而且涌現(xiàn)出一批優(yōu)秀的研究成果。在臨床中，用中西醫(yī)結(jié)合診治常見(jiàn)病、多發(fā)病、難治病已較普遍。大量事實(shí)說(shuō)明，用中西醫(yī)結(jié)合治療某些疾病有明顯的療效。本發(fā)明人根據(jù)多年來(lái)對(duì)中藥藥性藥理的研究和臨床觀察，結(jié)合中西藥的藥性原理，進(jìn)行分量比重配伍，嚴(yán)格遵照現(xiàn)代中藥制藥方法，得到本發(fā)明的治療阿爾茨海默病的中藥組合物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種治療阿爾茨海默病的中藥組合物。
本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供這種治療阿爾茨海默病的中藥組合物的制備方法。本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的:一種治療阿爾茨海默病的中藥組合物，其特征在于:主要由下列重量份的中藥組成:人參I 40份，當(dāng)歸5 30份，黃精5 30份，黃芪5 30份，首烏5 30份，菟絲子5 40份，三七I 20份，肉桂5 30份，枸杞子5 30份，熟地5 30份，川鄂山茱萸5 30份，懷山藥5 30份，紫河車(chē)5 30份，遠(yuǎn)志5 30份，澤瀉5 30份，石菖蒲5 30份，褪黑素2 30份，全蝎提取物2 30份，蜈蚣提取物2 30份，雙氫青蒿素2 30份。 進(jìn)一步的，本發(fā)明所用原料重量份數(shù)可以采用為:人參20 30份，當(dāng)歸10 20份，黃精10 20份，黃芪10 20份，首烏10 20份，菟絲子20 30份，三七10 15份，肉桂10 20份，枸杞子10 20份，熟地10 20份，川鄂山茱萸10 20份，懷山藥10 20份，紫河車(chē)10 20份，遠(yuǎn)志10 20份，澤瀉10 20份，石菖蒲10 20份，褪黑素10 20份，全蝎提取物10 20份，蜈蚣提取物10 20份,雙氫青蒿素10 20份。更進(jìn)一步的，本發(fā)明所用原料重量份數(shù)可以采用為:人參25份，當(dāng)歸15份，黃精15份，黃芪15份，首烏15份，菟絲子25份，三七13份，肉桂15份，枸杞子15份，熟地15份，川鄂山茱萸15份，懷山藥15份，紫河車(chē)15份，遠(yuǎn)志15份，澤瀉15份，石菖蒲15份，褪黑素15份，全蝎提取物15份，蜈蚣提取物15份，雙氫
青蒿素15份。本發(fā)明中藥組合物的制劑為片劑、顆粒劑、膠囊劑、丸劑、散劑、煎膏劑、糖漿劑、口服液。優(yōu)選本發(fā)明中藥組合物的制劑為片劑、顆粒劑或膠囊劑。上述治療阿爾茨海默病的中藥組合物的制備方法主要包括以下步驟:(I)將紫河車(chē)在60 65°C低溫干燥，粉碎成細(xì)粉備用；(2)將人參、當(dāng)歸、黃苗、三七、肉桂、川鄂山茱萸粉碎成細(xì)粉備用；(3)對(duì)石菖蒲進(jìn)行蒸餾提取揮發(fā)油后收集揮發(fā)油，備用；(4)石菖蒲提取揮發(fā)油后的殘?jiān)c黃精、首烏、菟絲子、枸杞子、熟地、懷山藥、遠(yuǎn)志、澤瀉加入6 8倍量水煎煮2 3次，每次2 3h，分別煎煮進(jìn)行過(guò)濾，合并三次濾液，減壓濃縮成稠膏，加入人參、當(dāng)歸、黃芪、三七、肉桂、川鄂山茱萸細(xì)粉以及全蝎提取物、蜈蚣提取物和雙氫青蒿素，混勻，烘干，粉碎成細(xì)粉，與紫河車(chē)細(xì)粉、褪黑素混勻后噴入用乙醇溶解的石菖蒲揮發(fā)油，并按照常規(guī)技術(shù)加入常規(guī)輔料制成所需制劑劑型。所述片劑的制備方法為:在步驟(I) (4)的基礎(chǔ)上，加入0.3% 1%的硬脂酸鎂壓片，即得片劑。所述顆粒劑的制備方法為:在步驟(I) (4)的基礎(chǔ)上，加入8% 15%的淀粉制粒，即得顆粒劑。所述沖劑的制備方法為:在步驟(I) (4)的基礎(chǔ)上，過(guò)60目篩，消毒滅菌，并按常規(guī)方法灌裝膠囊，即得膠囊劑。本發(fā)明所述中藥組合物在制備治療阿爾茨海默病的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明所述治療阿爾茨海默病的中藥組合物中:人參和三七有良好的抗衰老、抗疲勞、提高人體的免疫力、調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)和興奮造血系統(tǒng)功能等作用，其中含有的人參皂苷Rbl和Rgl有促智與抗老年性癡呆的作用。人參及其莖葉、果實(shí)有效成分對(duì)記憶的獲得、回憶、鞏固、再現(xiàn)都有不同程度的易化作用，對(duì)多種化學(xué)藥物造成的記憶獲得、鞏固和再現(xiàn)障礙均有顯著改善作用。Rbl促進(jìn)記憶的獲得、鞏固和再現(xiàn)，Rgl則主要改善記憶的獲得和再現(xiàn)全過(guò)程。人參常用于治療各種類(lèi)型的老年癡呆，尤其適用于心脾氣血兩虛癥，或兼肺氣虧虛、神疲乏力、虛咳喘促、自汗暴脫等癥。當(dāng)歸的化學(xué)成分主要有多糖類(lèi)、苯酞類(lèi)、香豆素類(lèi)、黃酮類(lèi)、揮發(fā)油類(lèi)化合物及其他成分，其中的水溶性成分含有阿魏酸、當(dāng)歸多糖等，揮發(fā)油中主要含藁本內(nèi)酯、丁烯基苯酞等40多種有效成分。阿魏酸衍生物阿魏酸鈉有提高抗氧化酶活性、清除自由基、減輕膜脂質(zhì)過(guò)氧化的作用；苯酞類(lèi)中的蒿本內(nèi)酯有減輕氧化應(yīng)激性損傷而發(fā)揮抗細(xì)胞凋亡作用，從而保護(hù)腦組織的缺血再灌注損傷；揮發(fā)油中的丁基苯酞具有改善缺血腦組織的能量代謝、保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞、改善腦微循環(huán)和腦血流、抑制細(xì)胞內(nèi)鈣超載、抗氧自由基、改善記憶障礙等作用；黃酮類(lèi)化合物可以通過(guò)抗氧自由基，保護(hù)腦缺血再灌注損傷。黃精補(bǔ)脾益氣，滋腎填精，養(yǎng)心安神等功效，還有提聞超氧化物歧化酶(SOD)、抗氧化、防治動(dòng)脈硬化、預(yù)防心腦血管疾病作用等，常用于治療老年癡呆心脾兩虛，肝腎不足，筋骨軟弱，食少口干等癥。黃芪可擴(kuò)張血管，抑制血小板聚集，降低血液粘度，改善血液循環(huán)和腦的灌流量，有免疫增強(qiáng)和免疫調(diào)節(jié)作用。黃芪中含有的鋅等微量元素對(duì)防治老年癡呆有一定作用。首烏含有蔥醒類(lèi)的大黃素、大黃酚、大黃酸、大黃素甲醚、大黃酚蔥酮、淀粉、粗脂肪、卵磷脂，鋅、錳、銅、鐵等多種微量元素。所含卵磷脂是構(gòu)成神經(jīng)組織，特別是腦脊髓的主要成分，同時(shí)也是血細(xì)胞及其他細(xì)胞膜的重要原料，對(duì)I NGF受體有明顯增強(qiáng)作用，并能促進(jìn)血細(xì)胞的生成，且能增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力，減少自由基對(duì)機(jī)體的損害而起到抗衰老的作用。因衰老是老年癡呆發(fā) 病率提高的一個(gè)重要因素，延緩衰老可延緩癡呆發(fā)病率和發(fā)病年齡。菟絲子的化學(xué)成分主要包括黃酮類(lèi)、多糖類(lèi)、生物堿類(lèi)、萜類(lèi)、留體類(lèi)、揮發(fā)油以及木質(zhì)素等化合物，其中，菟絲子多糖可以清除自由基或者抑制體內(nèi)自由基的產(chǎn)生，以及抗脂質(zhì)過(guò)氧化，具有抗衰老作用。菟絲子是通過(guò)延長(zhǎng)細(xì)胞生存期，調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能，改善機(jī)體代謝，改善內(nèi)臟機(jī)能以及提高應(yīng)急能力而實(shí)現(xiàn)抗衰老作用的。肉桂有助于改善較弱和低效胰島素(胰島素不耐受)，幫助其正常處理糖份，有助于防止老年癡呆癥的發(fā)生。枸杞子含胡蘿卜素、維生素B1、維生素B2、維生素C、煙酸，鈣、磷、鐵，亞油酸等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)；枸杞多糖為其主要活性成分之一，具有促進(jìn)免疫的作用；甜菜堿、玉蜀黍黃素及玉蜀黍黃素而棕櫚酸、腦甙脂類(lèi)、枸杞素等均有一定的生理活性，對(duì)四氯化碳引起的肝損害有保護(hù)作用。枸杞子有降血糖、降血脂、降膽固醇、耐缺氧、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌激素、提高人體免疫功能的作用，常用于治療老年癡呆肝腎虧虛癥，兼有虛勞咳嗽、心煩消渴等癥。熟地所含的環(huán)烯萜苷類(lèi)的主要組成部分梓醇不僅能夠降低糖尿病模型動(dòng)物的血糖，還能使降低的腦內(nèi)M2受體明顯增加，明顯升高衰老的轉(zhuǎn)M2受體基因CHO細(xì)胞系的M2受體密度，改善學(xué)習(xí)記憶功能；還能提高淀粉樣β蛋白(Αβ )片段誘導(dǎo)PC12細(xì)胞的存活率，降低細(xì)胞凋亡率。熟地所含的熟地黃多糖可改善造血功能，同時(shí)對(duì)免疫系統(tǒng)有較好改善和刺激作用；所含的地黃低聚糖可促進(jìn)脂肪源性間充質(zhì)干細(xì)胞增殖，對(duì)Glu引起的海馬神經(jīng)元損傷具有保護(hù)作用以增強(qiáng)學(xué)習(xí)記憶能力。川鄂山茱萸具有補(bǔ)肝益腎、收斂固脫的作用，所含的熊果酸可促進(jìn)免疫；沒(méi)食子酸和沒(méi)食子酸甲酯具有抗氧化作用；Vc、VE和Se等有清除自由基和抗衰老作用。懷山藥含有豐富的氨基酸、蛋白質(zhì)和微量元素以及多糖、總黃酮、山藥堿、皂苷、多巴胺等生物活性物質(zhì)，可健脾止瀉、補(bǔ)肺益腎、延緩衰老，其含有的山藥多糖和黃酮類(lèi)化合物具有增強(qiáng)免疫、抗衰老、抗氧化、抗阿爾茨海默病、降血糖、抗突變等多種藥理作用。紫河車(chē)含有多種抗體、干擾素、激素、紅細(xì)胞生成素及微量元素等，具有提高免疫力、增強(qiáng)耐缺氧能力、抗氧化、抗衰老等多種作用。遠(yuǎn)志富含皂苷類(lèi)、寡糖酯類(lèi)等化合物，具有抗氧化衰老、抗誘變、抗癌、益智、鎮(zhèn)靜助眠、抗驚厥等作用，所含的三萜式皂苷單體可提高腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的水平，改善學(xué)習(xí)記憶，有利于治療阿爾茨海默病。澤瀉含有多種四環(huán)三萜、倍半萜、二萜化合物、暖磷脂、膽堿、糠醛等，可以清濕熱、補(bǔ)陰益氣、增強(qiáng)免疫力、降血脂、降血糖和抗動(dòng)脈粥樣硬化等。澤瀉熱水提取物對(duì)膽堿乙?；D(zhuǎn)移酶有激活作用，因此認(rèn)為對(duì)治療阿爾茨海默病有一定的作用。石菖蒲是常用的醒腦開(kāi)竅藥，其揮發(fā)油含的β 細(xì)辛醚、α 細(xì)辛醚等，具有益智健腦、保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞、抗衰老、降血脂、化濕開(kāi)脾、鎮(zhèn)靜抗驚厥等作用，常用于治療阿爾茨海默病。褪黑素是一種吲哚類(lèi)激素，在人體內(nèi)調(diào)節(jié)著晝夜節(jié)律、睡眠、內(nèi)分泌、免疫等多種重要生理功能。褪黑素的分泌減少是導(dǎo)致衰老過(guò)程出現(xiàn)的主要原因之一，補(bǔ)充褪黑素可通過(guò)矯正生物鐘功能、增強(qiáng)免疫功能、抗氧化、抗應(yīng)激和調(diào)整內(nèi)分泌等多方面發(fā)揮作用，從而延緩衰老。全蝎提取物含有抗凝蛋白、抗癲癇肽、鎮(zhèn)痛肽、抗阿爾茨海默病肽等，具有熄風(fēng)鎮(zhèn)痙、攻毒散結(jié)、通絡(luò)止痛之功效，在鎮(zhèn)痛、抗凝、抗阿爾茨海默病、抗癲癇、提高機(jī)體免疫系統(tǒng)等方面發(fā)揮了重要作用。蜈蚣提取物在抗驚厥、抗阿爾茨海默病、抗炎鎮(zhèn)痛、抗衰老、抗心肌缺血、抗菌和促進(jìn)消化、增強(qiáng)免疫功能等方面具有活性。雙氫青蒿素是青蒿素類(lèi)藥物中活性較強(qiáng)的衍生物，具有過(guò)氧化橋，不僅具有抗瘧活性還具有抗阿爾茨海默病、抗病毒、免疫調(diào)節(jié)等其他藥理作用。以下為本發(fā)明中藥組合物治療阿爾茨海默病的藥理學(xué)試驗(yàn)例和典型臨床實(shí)驗(yàn)例:1.本發(fā)明中藥組合物對(duì)老年認(rèn)知障礙大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響1.1 材料1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和分組選用Wistar清潔級(jí)老年大鼠20只，22 24月齡，雌雄各半，體重360 650g ；Wistar清潔級(jí)青年大鼠10只，9 10周齡，雌雄各半，體重180 220g。動(dòng)物適應(yīng)性飼養(yǎng)I周后，用Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)篩選認(rèn)知障礙即學(xué)習(xí)記憶減退的老年大鼠10只，學(xué)習(xí)記憶正常的老年大鼠10只，青年大鼠10只。
1.1.2實(shí)驗(yàn)藥物和試劑本發(fā)明實(shí)施例1所得中藥組合物，即為下述“本發(fā)明中藥”;陽(yáng)性對(duì)照藥物選用鹽酸多奈哌齊，5mg/片，使用時(shí)粉碎，用雙蒸水溶解。1.2實(shí)驗(yàn)方法1.2.1老年癡呆大鼠的篩選及實(shí)驗(yàn)分組以青年組大鼠平均尋臺(tái)時(shí)間加2倍標(biāo)準(zhǔn)差為下限，加I倍標(biāo)準(zhǔn)差為上限，將老年大鼠分為學(xué)習(xí)記憶減退組和學(xué)習(xí)記憶正常組。Morris水迷宮定位實(shí)驗(yàn)訓(xùn)練時(shí)，水迷宮水深50cm，水溫24 26°C，動(dòng)物入池位置分別為站臺(tái)所在象限的相對(duì)及相鄰象限，將大鼠與該象限邊緣中央頭朝池壁入水。若大鼠站在平臺(tái)上3s后不再滑落，實(shí)驗(yàn)中止并記錄其抵達(dá)站臺(tái)所用時(shí)間及所游距離，并讓其在平臺(tái)上停留10s。180s未找到平臺(tái)者，將其引至平臺(tái)，放置30s，引導(dǎo)其學(xué)習(xí)記憶。測(cè)試大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力連續(xù)4d，每天測(cè)試I次。第5天正式實(shí)試驗(yàn)，錄像系統(tǒng)自動(dòng)記錄大鼠的活動(dòng)情況，并計(jì)算找到平臺(tái)的平均時(shí)間和平均游泳路程，同時(shí)確定大鼠搜索策略，評(píng)價(jià)動(dòng)物的學(xué)習(xí)記憶情況。以青年大鼠10只作為青年對(duì)照組(A組)，以同月齡正常老年大鼠10只作為老年正常組(B組)。根據(jù)SPSS統(tǒng)計(jì)軟件產(chǎn)生的隨機(jī)數(shù)字將老年癡呆大鼠隨機(jī)分為:老年認(rèn)知障礙組(C組)、鹽酸多奈哌齊組(4.5mg/kg/d) (D組)、本發(fā)明中藥低劑量組(6.84g生藥/kg/d) (E組)和本發(fā)明中藥高劑量組(13.68g生藥/kg/d) (F組)，每組10只。老年正常組(B組)和老年認(rèn)知障礙組(C組)給以等體積蒸餾水灌胃，均每日I次，連續(xù)8周。1.2.2認(rèn)知障礙大鼠相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)1.2.2.1病理組織制備及形態(tài)檢測(cè)取血后，在冰磚 上將大鼠斷頭快速取腦分離海馬，用預(yù)冷4°C的含多聚甲醛4%的固定液(PBS配制，pH=7.4)進(jìn)行灌注固定，做石蠟切片蘇木精 伊紅染色，光鏡下觀察大鼠海馬病理形態(tài)結(jié)構(gòu)變化。1.2.2.2海馬免疫組織化學(xué)測(cè)定 根據(jù)SABC法試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。隨機(jī)取5只大鼠的腦組織切片，常規(guī)脫蠟，封閉內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,10%正常山羊血清封閉。滴加一抗(I: 100)，抗內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Αβ相關(guān)結(jié)合蛋白多克隆抗體，370C孵育Ih，PBS溶液沖洗；滴加二抗生物素化山羊抗小鼠IgG，室溫20min，PBS溶液沖洗；滴加SABC復(fù)合物，室溫20敏，PBS溶液沖洗；DAB H2O2顯色，蘇木素輕度復(fù)染；乙醇脫水、透明、中性膠封片，選取同批染色切片進(jìn)行顯微鏡觀察。每張切片隨機(jī)選取3個(gè)不同視野，每組共計(jì)15個(gè)視野，以胞漿染成棕褐色為陽(yáng)性細(xì)胞標(biāo)志，以陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)表示結(jié)果，結(jié)果表示為視野陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)的平均值。1.2.2.3脂質(zhì)代謝及血管內(nèi)皮相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)，TC采用CHOD PAP酶比色法測(cè)定，TG采用GPO PAP酶比色法測(cè)定，HDL C和LDL C采用直接測(cè)定法測(cè)定。1.2.2.4炎性因子及氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)10%海馬組織勻衆(zhòng),每組5只,冰浴下超聲波破碎制成10%勻衆(zhòng),離心3000r/min,4°C，IOmin,取上清液進(jìn)行檢測(cè)。1.2.2.5細(xì)胞凋亡指標(biāo)測(cè)定
凋亡細(xì)胞計(jì)數(shù)，將取材的新鮮腦組織分離海馬組織，用PBS液漂洗，冰浴下超聲波破碎制成10%勻漿，加入適量0.5% TritonX 100裂解組織后，收集細(xì)胞懸液，IOOOr/min、4°C下低速離心lOmin，棄上清液。細(xì)胞用0.lmmol/L磷酸鹽緩沖液(pH=7.4)洗2次并懸浮之，加入終濃度為50mg/L的RNAseA，混懸液200 μ I放入3ml75%冰乙醇溶液中混勻；離心，棄上清，4ml PBS溶液混勻，經(jīng)尼龍網(wǎng)過(guò)濾；放入2ml75%冰乙醇溶液中，封口，待測(cè)。采用流式細(xì)胞檢測(cè)細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡，氬離子激發(fā)光波長(zhǎng)為488nm，測(cè)定各期細(xì)胞DNA含量、凋亡峰，并計(jì)算凋亡細(xì)胞百分率。應(yīng)用EXP0TM32軟件進(jìn)行細(xì)胞凋亡分析，應(yīng)用Phoenix Multicycle 5.0進(jìn)行細(xì)胞周期分析。1.2.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理所得數(shù)據(jù)以均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差( ±#)表示，采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，組間數(shù)據(jù)比較用單因素方差分析，當(dāng)各組方差齊時(shí)用LSD法進(jìn)行檢驗(yàn)，當(dāng)各組方差不齊時(shí)用Dunnett’ sC法進(jìn)行檢驗(yàn)，以P < 0.05為差異有顯著性意義。1.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.3.1藥物對(duì)老年認(rèn)知障礙大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響與老年認(rèn)知障礙組大鼠(C組)比較，鹽酸多奈哌齊組(D組)、本發(fā)明中藥高劑量組(F組)大鼠在尋臺(tái)路線長(zhǎng)度、尋臺(tái)時(shí)間及尋臺(tái)次數(shù)均有顯著減少或提高(P < 0.05)，表明本發(fā)明中藥配伍有明顯改善老年認(rèn)知障礙大鼠學(xué)習(xí)記憶功能的作用，結(jié)果見(jiàn)表I。表I藥物對(duì)老年認(rèn)知障礙大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響G±J0
權(quán)利要求
1.一種治療阿爾茨海默病的中藥組合物，其特征在于:主要由下列重量份的中藥制成: 人參I 40份，當(dāng)歸5 30份，黃精5 30份，黃芪5 30份，首烏5 30份，菟絲子5 40份，三七I 20份，肉桂5 30份，枸杞子5 30份，熟地5 30份，川鄂山茱萸5 30份，懷山藥5 30份，紫河車(chē)5 30份，遠(yuǎn)志5 30份，澤瀉5 30份，石菖蒲5 30份，褪黑素2 30份，全蝎提取物2 30份，蜈蚣提取物2 30份，雙氫青蒿素2 30份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療阿爾茨海默病的中藥組合物，其特征在于:所用中藥的重量份數(shù)是: 人參20 30份，當(dāng)歸10 20份，黃精10 20份，黃芪10 20份，首烏10 20份，菟絲子20 30份，三七10 15份，肉桂10 20份，枸杞子10 20份，熟地10 20份，川鄂山茱萸10 20份，懷山 藥10 20份，紫河車(chē)10 20份，遠(yuǎn)志10 20份，澤瀉10 20份，石菖蒲10 20份，褪黑素10 20份，全蝎提取物10 20份，蜈蚣提取物10 20份，雙氫青蒿素10 20份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療阿爾茨海默病的中藥組合物，其特征在于:所用中藥的重量份數(shù)是: 人參25份，當(dāng)歸15份，黃精15份，黃芪15份，首烏15份，菟絲子25份，三七13份，肉桂15份，枸杞子15份，熟地15份，川鄂山茱萸15份，懷山藥15份，紫河車(chē)15份，遠(yuǎn)志15份，澤瀉15份，石菖蒲15份，褪黑素15份，全蝎提取物15份，蜈蚣提取物15份，雙氫青蒿素15份。
4.根據(jù)權(quán)利要求1 3任一所述的治療阿爾茨海默病的中藥組合物，其特征在于:所述制劑為片劑、顆粒劑、膠囊劑、丸劑、散劑、煎膏劑、糖漿劑、口服液。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的治療阿爾茨海默病的中藥組合物，其特征在于:所述制劑為片劑、顆粒劑或膠囊劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求1 3任一所述的治療阿爾茨海默病的中藥組合物的制備方法，其特征在于:主要包括以下步驟: (I)將紫河車(chē)在60 65°C低溫干燥，粉碎成細(xì)粉備用； (2 )將人參、當(dāng)歸、黃苗、三七、肉桂、川鄂山茱萸粉碎成細(xì)粉備用； (3)對(duì)石菖蒲進(jìn)行蒸餾提取揮發(fā)油后收集揮發(fā)油，備用； (4)石菖蒲提取揮發(fā)油后的殘?jiān)c黃精、首烏、菟絲子、枸杞子、熟地、懷山藥、遠(yuǎn)志、澤瀉加入6 8倍量水煎煮2 3次，每次2 3h，分別煎煮進(jìn)行過(guò)濾，合并三次濾液,減壓濃縮成稠膏，加入人參、當(dāng)歸、黃芪、三七、肉桂、川鄂山茱萸細(xì)粉以及全蝎提取物、蜈蚣提取物和雙氫青蒿素，混勻，烘干，粉碎成細(xì)粉，與紫河車(chē)細(xì)粉、褪黑素混勻后噴入用乙醇溶解的石菖蒲揮發(fā)油，并按照常規(guī)技術(shù)加入常規(guī)輔料制成所需制劑劑型。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的治療阿爾茨海默病的中藥組合物的制備方法，其特征在于:在步驟(I) (4)的基礎(chǔ)上，加入0.3% 1%的硬脂酸鎂壓片，即得片劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的治療阿爾茨海默病的中藥組合物的制備方法，其特征在于:在步驟(I) (4)的基礎(chǔ)上，加入8% 15%的淀粉制粒，即得顆粒劑。
9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的治療阿爾茨海默病的中藥組合物的制備方法，其特征在于:在步驟(I) (4)的基礎(chǔ)上，過(guò)60目篩，消毒滅菌，并按常規(guī)方法灌裝膠囊，即得膠囊劑。
10.權(quán)利要求1 3任一 所述的中藥組合物在制備治療阿爾茨海默病的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種治療阿爾茨海默病的中藥組合物及其制備方法，主要由下列中藥制成人參、當(dāng)歸、黃精、黃芪、首烏、菟絲子、三七、肉桂、枸杞子、熟地、川鄂山茱萸、懷山藥等；其制備方法主要包括以下步驟(1)將紫河車(chē)在60～65℃低溫干燥，粉碎成細(xì)粉備用；(2)將人參、當(dāng)歸、黃芪、三七、肉桂、川鄂山茱萸粉碎成細(xì)粉備用；(3)對(duì)石菖蒲進(jìn)行蒸餾提取揮發(fā)油后收集揮發(fā)油，備用；(4)石菖蒲提取揮發(fā)油后的殘?jiān)c黃精、首烏等煎煮2～3次，合并三次煎煮液，濾過(guò)，濾液減壓濃縮成稠膏等。本發(fā)明中藥配伍合理，對(duì)阿爾茨海默癥有良好的治療效果，有效率在96％以上；制備方法科學(xué)有效，避免了藥物相克或者產(chǎn)生毒副作用，能充分發(fā)揮各中藥的作用。
文檔編號(hào)A61K35/64GK103071048SQ20131005095
公開(kāi)日2013年5月1日 申請(qǐng)日期2013年2月7日 優(yōu)先權(quán)日2013年2月7日
發(fā)明者張芝庭, 張濤濤 申請(qǐng)人:貴州神奇投資有限公司