心血管療法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明提供了包含B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑的化合物和組合物、及其使用方法，用于治療或預(yù)防心血管疾病、病癥和病況。
【專(zhuān)利說(shuō)明】心血管療法【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及用于治療、預(yù)防和減輕心血管疾病、病癥和病況作用的藥物、組合物和方法，以及包含這種化合物和組合物的物品和試劑盒。
【背景技術(shù)】
[0002]以下包括可用于理解本發(fā)明的信息。并非承認(rèn)此處具體或含蓄引用的任何信息、出版物或文件是現(xiàn)有技術(shù)，或?qū)τ谡诿枋龌蛞蟊Ｗo(hù)的發(fā)明是必不可少的。此處提到的所有出版物和專(zhuān)利其整個(gè)并入此處作為參考。
[0003]心臟病包括缺血性心臟病、心肌梗塞和其它急性冠狀動(dòng)脈綜合征、以及心力衰竭，心臟病是全世界主要的健康問(wèn)題。
[0004]例如，應(yīng)當(dāng)理解，心肌梗塞是那些患有心臟病的個(gè)體中重要的死亡緣由。心肌梗塞(MI)或急性心肌梗塞(AMI)，俗稱(chēng)心臟發(fā)作，是供應(yīng)到心臟一部分的血液中斷，引起心臟細(xì)胞死亡。這最通常是因?yàn)椋嗳醯膭?dòng)脈粥樣硬化斑塊破裂之后，冠狀動(dòng)脈的堵塞(阻斷)，其中斑塊是脂質(zhì)和白血細(xì)胞(特別是巨噬細(xì)胞)在動(dòng)脈壁上不穩(wěn)定的聚集。所導(dǎo)致的缺血和氧不足，如果足夠長(zhǎng)時(shí)間不作處理的話，可造成心臟肌肉組織即心肌的損傷或壞死(梗塞)。急性心肌梗塞的典型癥狀包括突發(fā)的胸痛(通常放射至左臂或頸部的左側(cè))、氣短、惡心、嘔吐、心悸、出汗和焦慮。然而，約四分之一的心肌梗塞是“沉默”的，即，沒(méi)有胸痛或其它癥狀。對(duì)疑似急性心肌梗塞的即 刻治療包括氧氣、阿司匹林和舌下服硝酸甘油。ST段抬高的MI (STEMI，有時(shí)也被稱(chēng)為透壁性心肌梗塞、或Q波心肌梗塞)的大多數(shù)情況用溶栓或經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入(PCI)進(jìn)行治療。NSTEMI (非ST段抬高的心肌梗塞，有時(shí)也被稱(chēng)為非透壁心肌梗塞、或者非Q波心肌梗塞)采用藥物進(jìn)行管理，雖然在住院期間通常進(jìn)行PCI。心臟發(fā)作是導(dǎo)致全球男性和女性死亡的主要原因。
[0005]心力衰竭(HF)，通常被稱(chēng)為充血性心力衰竭(CHF)，是一種臨床綜合征，其特征為由于心泵功能受損以至于全身性灌注不足，不能滿足身體的代謝需要，即一般被定義為心臟無(wú)法提供足夠的血流以滿足身體的需要。心力衰竭是一種常見(jiàn)的、昂貴的、致殘的(disabling)且潛在致命的疾病。McMurray JJ, Pfeffer MA(2005) “Heart failure”.Lancet365 (9474): 1877-89。在發(fā)達(dá)國(guó)家，大約2%的成年人患心力衰竭，而在那些65歲以上的人中，這增加至6-10%。Id目前，據(jù)估計(jì)超過(guò)500萬(wàn)美國(guó)人患有心力衰竭，約人群的2%。美國(guó)心臟協(xié)會(huì) Heart Disease and Stroke Statistics - 2008 更新。Dallas:美國(guó)心臟協(xié)會(huì),2008.http://circ.aha journal s.0rg?；加蠬F的人以及與HF相關(guān)的財(cái)政負(fù)擔(dān)是巨大的。每年約100萬(wàn)患有心力衰竭的患者住院,另有200萬(wàn)患者次級(jí)診斷(secondary diagnosis)為心力衰竭。這些患者中有三分之一由于復(fù)發(fā)性代償不全(recurrent decompensation)而在90天內(nèi)再次入院治療。心力衰竭的常見(jiàn)原因包括心肌梗塞和其它形式的缺血性心臟病、高血壓、心臟瓣膜病和心肌病。McMurray JJ, Pfeffer MA(2005) “Heart failure”.Lancet365(9474):1877-89。
[0006]心力衰竭可進(jìn)一步細(xì)分為收縮性或舒張性心力衰竭。在收縮性心力衰竭中，心肌收縮性降低，而在舒張性心力衰竭中，心臟舒張(relaxation)受損并且心室充盈異常。心力衰竭的最常見(jiàn)原因是左心室(LV)收縮功能障礙(約60%的患者)。在此類(lèi)別中，大多數(shù)情況是末期冠狀動(dòng)脈疾病的結(jié)果，或者是有心肌梗塞病史、或者有慢性灌注不足(underperfused)但心肌仍存活(viable)。在許多患者中，這兩個(gè)過(guò)程同時(shí)存在。LV收縮性功能障礙的其它常見(jiàn)原因包括特發(fā)性擴(kuò)張型心肌病、心臟瓣膜病、高血壓性心臟病、毒素誘導(dǎo)的心肌病(如阿霉素、赫賽汀、酒精)以及先天性心臟病。心力衰竭也可由右心室梗塞、肺動(dòng)脈高壓、慢性重度三尖瓣關(guān)閉不全或致心律失常型右心室發(fā)育不良(Arrhythmogenicright ventricular dysplasia)發(fā)展而來(lái)。心力衰竭一個(gè)較不常見(jiàn)的原因是甲狀腺功能允進(jìn)、動(dòng)靜脈內(nèi)瘺(arteriovenous fistulae)、佩吉特氏病、妊娠或嚴(yán)重的慢性貧血引起的高輸出量衰竭。LV舒張性功能障礙(舒張受損)通常與慢性高血壓或缺血性心臟病有關(guān)。其它原因包括限制性、浸潤(rùn)性和肥厚性心肌病。心包縮窄或心臟壓塞(cardiac tamponade)可導(dǎo)致右心室充盈不足。處于發(fā)展為心力衰竭的高風(fēng)險(xiǎn)患者是有高血壓、冠狀動(dòng)脈疾病、糖尿病、心肌病家族史、用心臟毒素以及肥胖的那些。心力衰竭是一種常見(jiàn)綜合征，尤其在年長(zhǎng)的成人中。盡管越來(lái)越多的患者因再灌注療法從急性心肌梗塞中存活，大多數(shù)至少有一些殘留的LV收縮性功能障礙，這可導(dǎo)致心力衰竭。目前，心力衰竭不能治愈。盡管治療(如藥物和生活方式的改變)可以幫助人們活得更長(zhǎng)，更積極地生活，研究人員繼續(xù)尋找新的方法來(lái)治療心力衰竭及其并發(fā)癥。
[0007]胸痛是一種非特異性癥狀，可以是心臟的原因，并且術(shù)語(yǔ)心絞痛通常是指推測(cè)的心肌缺血所引起的疼痛綜合征。術(shù)語(yǔ)不穩(wěn)定型心絞痛最早用來(lái)表示心肌梗塞和穩(wěn)定型心絞痛的更慢性狀態(tài)之間的中間狀態(tài)。早期術(shù)語(yǔ)，梗塞前心絞痛，表示干預(yù)以減輕心肌梗塞或死亡風(fēng)險(xiǎn)的臨床意圖?；加羞@種病況的患者，也已經(jīng)根據(jù)他們的表現(xiàn)、診斷測(cè)試結(jié)果或隨著時(shí)間的過(guò)程被分類(lèi)；這些類(lèi)別包括新發(fā)作的心絞痛、惡化型心絞痛(acceleratingangina)、靜息心絞痛、早期梗塞后心絞痛(early postinfarct angina)和早期血管再生后(postrevascularization)心絞痛。不穩(wěn)定型心絞痛被認(rèn)為是急性冠狀動(dòng)脈綜合征,其中沒(méi)有釋放心肌壞死的酶和生物標(biāo)志物。盡管不穩(wěn)定型心絞痛的病因和定義可以是廣泛的，破裂的動(dòng)脈粥樣硬化斑塊和血栓覆蓋之間的相互關(guān)系存在于不穩(wěn)定型心絞痛的許多情況，隨之而來(lái)的是血液動(dòng)力學(xué)不足或微栓塞(microembolization)。這區(qū)別于穩(wěn)定型心絞痛,穩(wěn)定型心絞痛中典型的根本原因是固定的冠狀動(dòng)脈狹窄，伴有血流受損和緩慢、漸進(jìn)的斑塊生長(zhǎng)，從而允許偶然形成側(cè)支血流。
[0008] “急性冠狀動(dòng)脈綜合征”(ACS)已經(jīng)應(yīng)用到一組缺血性心臟損傷所導(dǎo)致的冠狀動(dòng)脈疾病。ACS包括已經(jīng)患有MI的患者或處于發(fā)展為MI高風(fēng)險(xiǎn)的患者。呈現(xiàn)在內(nèi)科醫(yī)生面前的ACS患者涉及多種病況,這涵蓋了一個(gè)連續(xù)體(continuum),其中包括不穩(wěn)定型心絞痛、STEMI, NSTEMI和透壁性(Q波)MI。ACS也包括心肌缺血，并且被認(rèn)為主要由在一個(gè)或多個(gè)冠狀動(dòng)脈中的血栓沉積以及生長(zhǎng)所致，導(dǎo)致動(dòng)脈的部分或完全堵塞，并且經(jīng)常涉及斑塊破裂，導(dǎo)致缺血性損傷。ACS也可以由冠狀血管痙攣或增加的心肌需求而促成。綜述參見(jiàn)，例如Davies, Clin.Cardiol.20 (Supp.1): 1217 (1997)。缺血性損傷后的發(fā)病率和死亡率突顯出ACS的嚴(yán)重程度。例如，工作人員估計(jì)ACS出現(xiàn)的四到六周內(nèi)，死亡或繼發(fā)MI的風(fēng)險(xiǎn)是8-14%,以及 MI 或頑固性缺血的死亡比是 15-25%。Theroux 和 Fuster, Circulation97:11951206 (1998)?？紤]到在美國(guó)因急性MI死亡的總數(shù)約為600，000,就可以理解本領(lǐng)域中對(duì)ACS治療管理信息的檢索已非常廣泛。
[0009]B型利尿鈉肽(BNP或BNP-32)是一種32個(gè)氨基酸的神經(jīng)激素，其在心室心肌中合成并釋放到循環(huán)中以響應(yīng)心室舒張和壓力負(fù)荷。CHR患者當(dāng)中BNP的血漿濃度升高，并且與左心室功能障礙程度和CHF癥狀的嚴(yán)重程度成比例地增加。綜述參見(jiàn)，例如Wiese等人，Circulationl02:30749 (2000);Yasue 等人，Circulation90:195203(1994);Yoshimura 等人，Circulation87:4649 (1993) ; Stein 和 Levin, Am.Heart J.135:91423 (1998);以及Omland等人，Heart76:2327 (1996)。BNP的前體被合成為134個(gè)氨基酸的前體分子稱(chēng)為“前體BNP原(pre pro BNP)",它被切割成一個(gè)包含氨基酸1_26的信號(hào)肽和由氨基酸27-134組成的一個(gè)108個(gè)氨基酸的分子，稱(chēng)作“BNP原(pro BNP)”。BNP原被蛋白水解加工成一個(gè)76個(gè)氨基酸的N端肽(氨基酸1-76)，稱(chēng)為“NT BNP原”，以及32個(gè)氨基酸的成熟激素，稱(chēng)為BNP或BNP32(氨基酸77-108)。已經(jīng)報(bào)道NT BNP原、BNP-32以及前體BNP原可以在人血漿中循環(huán)。參見(jiàn)，例如，Tateyama 等人,Biochem.Biophys.Res.Commun.185:7607 (1992) ; Hunt等人，Biochem.Biophys.Res.Commun.214:117583 (1995)。
[0010]2001年8月，hBNP (天然肽)被FDA批準(zhǔn)，商品名為Natrecor (奈西立肽(nesiritide))用于治療急性充血性心力衰竭。在十二年來(lái)，Natrecor是第一個(gè)被批準(zhǔn)用于治療CHF的藥物。在靜息或輕微活動(dòng)時(shí)具有呼吸困難的急性代償不全或晚期CHF患者中，通過(guò)靜脈持續(xù)輸注48小時(shí)的時(shí)間進(jìn)行施用。由于藥物昂貴，需要住院，Natrecor只用于最急性的情況。此外，內(nèi)肽酶降解以及利尿鈉肽清除受體(NPR-C)介導(dǎo)的內(nèi)化，導(dǎo)致這些蛋白在體內(nèi)半衰期相當(dāng)短，限制了 BNP的治療性用途。例如，BNP的血漿半衰期估計(jì)為約20分鐘(Potter等人，Endocrine Reviews27 (I): 42-72 (2006)),這些肽以往的治療施用限于耗時(shí)的靜脈輸注，通常在醫(yī)院或其它醫(yī)療護(hù)理機(jī)構(gòu)。
[0011]本領(lǐng)域中仍然需要新的療法，用于治療患有或處于發(fā)展為心血管疾病、病癥和病況風(fēng)險(xiǎn)的患者，包括缺血性心臟病、急性冠狀動(dòng)脈綜合征和心力衰竭。特別需要新的療法，其覆蓋缺血和/或氧化應(yīng)激(Stress)相關(guān)的心血管疾病、病癥和病況的整個(gè)范圍?；诹钊梭@訝的發(fā)現(xiàn)，此處描述并要求了這樣的療法，例如發(fā)現(xiàn)表明BNP的信號(hào)肽片段是新的心臟保護(hù)和治療劑。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0012]此處描述并要求的本發(fā)明具有很多特征和實(shí)施方式，包括但不限于在本
【發(fā)明內(nèi)容】
中所述或描述或引用的那些。并非旨在包括一切，且此處描述并要求的本發(fā)明并不限于或受限于本
【發(fā)明內(nèi)容】
中確定的特征或?qū)嵤┓绞?，包括這些僅是為了說(shuō)明的目的，而不是限制。
[0013]在一個(gè)方面中，此處提供的本發(fā)明包括化合物?；衔镉糜谥委熜难芗膊?。在另一方面中，本發(fā)明包括包含或基本上由一種或多種這種化合物組成的組合物。
[0014]本發(fā)明的化合物，在非限制性優(yōu)選實(shí)施方式中是分離的或基本上是純的，包含如下肽:LHLAFLGGRS (SEQ.1D.NO:1)、LHLAFLGGR (SEQ.1D.NO:2)、LHLAFLGG (SEQ.1D.N0:3)、LHLAFLG (SEQ.1D.NO:4)、LHLAFL (SEQ.1D.NO:5)和 LHLAF (SEQ.1D.NO:6)、LHLA (SEQ.1D.NO:7),LHL (SEQ.1D.N0:8)、LH (SEQ.1D.N0:9)。在以上如 SEQ.1D.NO: 1-9 所示的肽中，任一個(gè)或多個(gè)亮氨酸(L)可被取代為異亮氨酸(I)、D-亮氨酸或D-異亮氨酸、或叔-亮氨酸、正亮氨酸、L-別-異亮氨酸、D-別-異亮氨酸、D-叔-亮氨酸和D-正亮氨酸，和/或組氨酸可被取代為具有或經(jīng)制備而具有以咪唑環(huán)結(jié)尾的側(cè)鏈的任何非天然存在的氨基酸，所有這些是SEQ.1D.NO: 1-9的類(lèi)似物。
[0015]本發(fā)明的化合物，在非限制性優(yōu)選實(shí)施方式中是分離的或基本上是純的，還包含根據(jù)下式I的肽:
[0016]L H X1X2X3X4X5X6X7X8
[0017]其中X1 是正亮氨酸、lie、Val、Met、Ala、Phe 或 Gly ；X2 是 Val、Leu、He 或 Gly ；X3 是 Leu、Val、lie、Ala、Tyr 或 Gly ；X4 是正亮氨酸、lie、Val、Met、Ala、Phe 或 Gly ；X5 是Pro、Ala、Arg 或 Ser ；X6 是 Pro、Ala、Arg 或 Ser ；X7 是 Arg、Gin、Asn 或 Gly ；以及 X8 是 Thr或 Gly。
[0018]本發(fā)明的化合物，在非限制性優(yōu)選實(shí)施方式中是分離的或基本上是純的，還包含根據(jù)下式II的肽:
[0019]L H X1X2X3X4X5X6X7
[0020]其中X1 是正亮氨酸、Ile、Val、Met、Ala、Phe 或 Gly ；X2 是 Val、Leu、Ile 或 Gly ；X3是 Leu、Val、Ile、Ala、Tyr 或 Gly ；X4 是正亮氨酸、Ile、Val、Met、Ala、Phe 或 Gly ；X5 是 Pro、Ala、Arg 或 Ser ；X6 是 Pro、Ala、Arg 或 Ser ；以及 X7 是 Arg、Gin、Asn 或 Gly ;倘若
[0021]當(dāng)X1是正亮氨酸、Ile、Val、Met、Ala、Phe或Gly時(shí)，X2也可以是Ala，X3也可以是Phe, X4也可以是Leu, X5也可以是Gly, X6也可以是Gly,以及X7也可以是Arg ；
[0022]當(dāng)X2是Val、Leu或Ile或Gly時(shí)，X1也可以是Leu，X3也可以是Phe，X4也可以是Leu, X5也可以是Gly, X6也可以是Gly,以及X7也可以是Arg ；
[0023]當(dāng)X3 是 Leu、Val、Ile、Ala、Tyr 或 Gly 時(shí),X1 也可以是 Leu, X2 也可以是 Ala, X4 也可以是Leu, X5也可以是Gly, X6也可以是Gly,以及X7也可以是Arg ；
[0024]當(dāng)X4是正亮氨酸、Ile、Val、Met、Ala、Phe或Gly時(shí)，X1也可以是Leu，X2也可以是Ala, X3也可以是Phe, X5也可以是Gly, X6也可以是Gly,以及X7也可以是Arg ；
[0025]當(dāng)X5是Pro、Ala、Arg或Ser時(shí)，X1也可以是Leu, X2也可以是Ala, X3也可以是Phe, X4也可以是Leu, X6也可以是Gly,以及X7也可以是Arg ；
[0026]當(dāng)X6是Pro、Ala、Arg或Ser時(shí)，X1也可以是Leu, X2也可以是Ala, X3也可以是Phe, X4也可以是Leu, X5也可以是Gly,以及X7也可以是Arg ；
[0027]當(dāng)X7是Lys、Gin、Asn或Gly時(shí)，X1也可以是Leu, X2也可以是Ala, X3也可以是Phe, X4也可以是Leu, X5也可以是Gly,以及X6也可以是Gly。
[0028]本發(fā)明的化合物，在非限制性優(yōu)選實(shí)施方式中是分離的或基本上是純的，還包含根據(jù)下式III的肽:
[0029]L H X1X2X3X4X5X6
[0030]其中X1 是正亮氨酸、Ile、Val、Met、Ala、Phe 或 Gly ；X2 是 Val、Leu、Ile 或 Gly ；X3是 Leu、Val、Ile、Ala、Tyr 或 Gly ；X4 是正亮氨酸、Ile、Val、Met、Ala、Phe 或 Gly ；X5 是 Pro、Ala、Arg 或 Ser ；以及 X6 是 Pro、Ala、Arg 或 Ser ;倘若
[0031]當(dāng)X1是正亮氨酸、Ile、Val、Met、Ala、Phe或Gly時(shí)，X2也可以是Ala，X3也可以是Phe, X4也可以是Leu, X5也可以是Gly, X6也可以是Gly,以及X7也可以是Arg ；
[0032]當(dāng)X2是Val、Leu或Ile或Gly時(shí)，X1也可以是Leu，X3也可以是Phe，X4也可以是Leu, X5也可以是Gly, X6也可以是Gly,以及X7也可以是Arg ；[0033]當(dāng)X3 是 Leu、Val、Ile、Ala、Tyr 或 Gly 時(shí)，X1 也可以是 Leu，X2 也可以是 Ala，X4 也可以是Leu, X5也可以是Gly, X6也可以是Gly,以及X7也可以是Arg ；
[0034]當(dāng)X4是正亮氨酸、Ile、Val、Met、Ala、Phe或Gly時(shí)，X1也可以是Leu，X2也可以是Ala, X3也可以是Phe, X5也可以是Gly, X6也可以是Gly,以及X7也可以是Arg ；
[0035]當(dāng)X5是Pro、Ala、Arg或Ser時(shí)，X1也可以是Leu, X2也可以是Ala, X3也可以是Phe, X4也可以是Leu, X6也可以是Gly,以及X7也可以是Arg ；
[0036]當(dāng)X6是Pro、Ala、Arg或Ser時(shí)，X1也可以是Leu, X2也可以是Ala, X3也可以是Phe, X4也可以是Leu, X5也可以是Gly,以及X7也可以是Arg。
[0037]本發(fā)明的化合物，在非限制性優(yōu)選實(shí)施方式中是分離的或基本上是純的，還包含根據(jù)下式IV的肽:
[0038]L H X1X2X3X4X5
[0039]其中X1 是正亮氨酸、Ile、Val、Met、Ala、Phe 或 Gly ；X2 是 Val、Leu、Ile 或 Gly ；X3是 Leu、Val、lie、Ala、Tyr 或 Gly ；X4 是正亮氨酸、lie、Val、Met、Ala、Phe 或 Gly ；以及 X5是 Pro、Ala、Arg 或 Ser ;倘若
[0040]當(dāng)X1是正亮氨酸、Ile、Val、Met、Ala、Phe或Gly時(shí)，X2也可以是Ala，X3也可以是Phe, X4也可以是Leu, X5也可以是Gly, X6也可以是Gly,以及X7也可以是Arg ；
[0041]當(dāng)X2是Val、Leu或Ile或Gly時(shí)，X1也可以是Leu，X3也可以是Phe，X4也可以是Leu, X5也可以是Gly, X6也可以是Gly,以及X7也可以是Arg ；
[0042]當(dāng)X3 是 Leu、Val、Ile、Ala、Tyr 或 Gly 時(shí),X1 也可以是 Leu, X2 也可以是 Ala, X4 也可以是Leu, X5也可以是Gly, X6也可以是Gly,以及X7也可以是Arg ；
[0043]當(dāng)X4是正亮氨酸、Ile、Val、Met、Ala、Phe或Gly時(shí)，X1也可以是Leu，X2也可以是Ala, X3也可以是Phe, X5也可以是Gly, X6也可以是Gly,以及X7也可以是Arg ；
[0044]當(dāng)X5是Pro、Ala、Arg或Ser時(shí)，X1也可以是Leu, X2也可以是Ala, X3也可以是Phe, X4也可以是Leu, X6也可以是Gly,以及X7也可以是Arg。
[0045]本發(fā)明的化合物，在非限制性優(yōu)選實(shí)施方式中是分離的或基本上是純的，還包含根據(jù)下式V的肽:
[0046]L H X1X2X3X4
[0047]其中Xl 是正亮氨酸、lie、Val、Met、Ala、Phe 或 Gly ；X2 是 Val、Leu、Ile 或 Gly ；X3是 Leu、Val、lie、Ala、Tyr 或 Gly ；以及 X4 是正亮氨酸、lie、Val、Met、Ala、Phe 或 Gly ;倘
若
[0048]當(dāng)X1是正亮氨酸、Ile、Val、Met、Ala、Phe或Gly時(shí)，X2也可以是Ala，X3也可以是Phe, X4也可以是Leu, X5也可以是Gly, X6也可以是Gly,以及X7也可以是Arg ；
[0049]當(dāng)X2是Val、Leu或Ile或Gly時(shí)，X1也可以是Leu，X3也可以是Phe，X4也可以是Leu, X5也可以是Gly, X6也可以是Gly,以及X7也可以是Arg ；
[0050]當(dāng)X3 是 Leu、Val、Ile、Ala、Tyr 或 Gly 時(shí),X1 也可以是 Leu, X2 也可以是 Ala, X4 也可以是Leu, X5也可以是Gly, X6也可以是Gly,以及X7也可以是Arg ；
[0051]當(dāng)X4是正亮氨酸、Ile、Val、Met、Ala、Phe或Gly時(shí)，X1也可以是Leu，X2也可以是Ala, X3也可以是Phe, X5也可以是Gly, X6也可以是Gly,以及X7也可以是Arg。 [0052]本發(fā)明的化合物，在非限制性優(yōu)選實(shí)施方式中是分離的或基本上是純的，還包含根據(jù)下式VI的肽:
[0053]L H X1X2X3
[0054]其中X1 是正亮氨酸、lie、Val、Met、Ala、Phe 或 Gly ；X2 是 Val、Leu、Ile 或 Gly ；以及 X3 是 Leu、Val、lie、Ala、Tyr 或 Gly ;倘若
[0055]當(dāng)X1是正亮氨酸、lie、Val、Met、Ala、Phe或Gly時(shí)；X2也可以是Ala,以及X3也可以是Phe ；
[0056]當(dāng)X2是Val、Leu或Ile或Gly時(shí)，X1也可以是Leu,以及X3也可以是Phe ；以及
[0057]當(dāng)X3 是 Leu、Val、Ile、Ala、Tyr 或 Gly 時(shí),X1 也可以是 Leu,以及 X2 也可以是 Ala。
[0058]本發(fā)明的化合物，在非限制性優(yōu)選實(shí)施方式中是分離的或基本上是純的，還包含根據(jù)下式VII的肽:
[0059]L H X1X2
[0060]其中X1 是正亮氨酸、lie、Val、Met、Ala、Phe 或 Gly ；以及 X2 是 Val、Leu、Ile 或Gly ;倘若
[0061]當(dāng)X1是正亮氨酸、lie、Val、Met、Ala、Phe或Gly時(shí)，X2也可以是Ala ；以及；
[0062]當(dāng)X2 是 Val、Leu 或 Ile 或 Gly 時(shí)，X1 也可以是 Leu。
[0063]本發(fā)明的化合物，在非限制性優(yōu)選實(shí)施方式中是分離的或基本上是純的，還包含根據(jù)下式VIII的肽:
[0064]L H X1
[0065]其中X1 是正亮氨酸、lie、Val、Met、Ala、Phe 或 Gly。
[0066]這些化合物的活性類(lèi)似物和保守變體包括在本發(fā)明范圍內(nèi)，包括其截短，優(yōu)選C端截短。此外，例如，在式1-VIII中所示的肽中，任一個(gè)或多個(gè)亮氨酸(L)可被取代為異亮氨酸(I)、D-亮氨酸或D-異亮氨酸、或叔-亮氨酸、正亮氨酸、L-別-異亮氨酸、D-別-異亮氨酸、D-叔-亮氨酸和D-正亮氨酸，和/或組氨酸可被取代為具有或經(jīng)制備而具有以咪唑環(huán)結(jié)尾的側(cè)鏈的任何非天然存在的氨基酸，所有這些也是其類(lèi)似物。
[0067]在一個(gè)非限制性實(shí)施方式中，本發(fā)明范圍內(nèi)的肽(包括SEQ.1D.NO: 1-9和式1-VIII中的序列)的一個(gè)或多個(gè)氨基酸是L或D構(gòu)型。在其它實(shí)施方式中，在本發(fā)明范圍內(nèi)的肽的一個(gè)或多個(gè)氨基酸是天然存在的非遺傳編碼的氨基酸。在其它實(shí)施方式中，在本發(fā)明范圍內(nèi)肽的一個(gè)或多個(gè)氨基酸是氨基酸類(lèi)似物或合成氨基酸。
[0068]在另一個(gè)非限制性實(shí)施方式中，本發(fā)明范圍內(nèi)的肽(包括SEQ.1D.NO: 1-9和式1-VIII中的序列)的N端亮氨酸(或異亮氨酸D-亮氨酸、D-異亮氨酸、叔-亮氨酸、正亮氨酸、L-別-異亮氨酸、D-別-異亮氨酸、D-叔-亮氨酸和D-正亮氨酸)可以經(jīng)修飾而含有甲?；柞；幕鶊F(tuán)、羧酸酯(優(yōu)選醛酯，如羧乙基、羧甲基等)、或包含羧酸酯的基團(tuán)。此處優(yōu)選用甲?；?、羧乙基以及羧甲基進(jìn)行的修飾。
[0069]在另一實(shí)施方式中，本發(fā)明范圍內(nèi)的化合物(包括SEQ.1D.NO:1-9和式1-VIII中的序列)中一個(gè)或多個(gè)氨基酸，主要基于氨基酸側(cè)鏈化學(xué)和物理性質(zhì)，被取代為來(lái)自相似氨基酸類(lèi)別或亞類(lèi)的另一氨基酸。例如，一個(gè)或多個(gè)親水性或極性氨基酸可以取代為另一親水性或極性氨基酸。同樣地，一個(gè)或多個(gè)疏水性或非極性氨基酸可取代為另一疏水性或非極性氨基酸。在進(jìn)行這種取代時(shí)，極性氨基酸可以進(jìn)一步細(xì)分成具有酸性、堿性或親水性側(cè)鏈的氨基酸，以及非極性氨基酸可以進(jìn)一步細(xì)分成具有芳香族或疏水性側(cè)鏈的氨基酸。此外，非極性氨基酸可以進(jìn)一步細(xì)分以包括脂肪族氨基酸。
[0070]經(jīng)修飾以改善其生物藥學(xué)特性的本發(fā)明的化合物也包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。在具體的實(shí)施方式中，例如本發(fā)明的化合物經(jīng)過(guò)修飾以提供增加的穩(wěn)定性、增加的對(duì)蛋白水解失活的抗性、降低至不存在的免疫原性、延長(zhǎng)的循環(huán)壽命(包括改變的血清半衰期和改變的治療半衰期)、和低毒性。本發(fā)明的化合物的修飾形式包括前藥形式，在此處其它地方描述了其代表性實(shí)例?？梢孕揎棻景l(fā)明的化合物的方法也包括例如通過(guò)聚乙二醇化、通過(guò)化學(xué)衍生化、以及通過(guò)與肽或脂質(zhì)進(jìn)行融合或綴合。修飾的化合物包括修飾的B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑，包括例如修飾的BNPsp (17-26) (SEQ ID NO:1)及其修飾的類(lèi)似物、變體(如，保守的變體)和截短形式。其它實(shí)施方式包括選自經(jīng)修飾的SEQ.1D.NO:2至9的肽、以及經(jīng)修飾的根據(jù)式1、式I1、式II1、式IV、式V、式V1、式VII和/或式VIII的肽，及其經(jīng)修飾的活性類(lèi)似物、變體(如，保守的變體)和截短形式。
[0071]其它實(shí)施方式包括本發(fā)明的化合物的擬肽。
[0072]本發(fā)明還包括包含或基本上由B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑和藥學(xué)上可接受的載體組成的藥物組合物。在一個(gè)實(shí)施方式中，藥物組合物包含或基本上由BNPsp (17-26) (SEQID NO:1)組成。在另一個(gè)實(shí)施方式中，所述藥物組合物包含或基本上由選自SEQ.1D.NO:2至9的序列組成。在另一個(gè)實(shí)施方式中，所述藥物組合物包含或基本上由選自式1、式I1、式II1、式IV、式V、式V1、式VII和/或式VIII的序列組成。包含這些化合物的一種或多種活性類(lèi)似物和保守變體(包括其截短，優(yōu)選C端截短)的藥物組合物包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明包括藥物組合物，所述藥物組合物包含或基本上由B型利尿鈉信號(hào)肽片段或其治療活性類(lèi)似物或變體或截短組成。
[0073]在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明包括藥物組合物，所述藥物組合物包含或基本上由本發(fā)明的化合物組成，本發(fā)明的化合物包括經(jīng)修飾以改善其生物藥學(xué)特性的類(lèi)似物、變體、截短等。在某些實(shí)施方式中，例如，本發(fā)明的化合物經(jīng)修飾以提供增加的穩(wěn)定性、增加的對(duì)蛋白水解失活的抗性、降低至不存在的免疫原性、延長(zhǎng)的半衰期或循環(huán)壽命和低毒性?？梢孕揎棻景l(fā)明的化合物的方法包括例如通過(guò)聚乙二醇化、通過(guò)化學(xué)衍生化、以及通過(guò)與肽或脂質(zhì)進(jìn)行融合或綴合。
[0074]本發(fā)明包括藥物組合物，所述藥物組合物包含一種或多種藥學(xué)上可接受的B型利尿鈉信號(hào)肽劑，其用于治療心血管疾病，例如急性冠狀動(dòng)脈綜合征、心力衰竭、缺血性心臟病等以及至少部分特征在于缺血和/或氧化應(yīng)激的相關(guān)心血管疾病、病癥和病況，以及相關(guān)的病癥和病況。在此處某些優(yōu)選的B型利尿鈉信號(hào)肽劑被確定為SEQ.1D.NO:1至9。BNPsp (17-26) (SEQ ID NO:1)是最優(yōu)選的。其它B型利尿鈉信號(hào)肽劑在式1、式I1、式
II1、式IV、式V、式V1、式VII和式VIII范圍內(nèi)。其它實(shí)施方式包括上述的活性類(lèi)似物、變體(例如保守的變體)和截短，以及藥學(xué)上可接受的載體。因此，本發(fā)明包括適于或經(jīng)調(diào)整而適于治療受試者的心血管疾病、病癥或病況的形式的藥物組合物。在一個(gè)實(shí)施方式中，心血管疾病、病癥或病況與缺血和/或氧化應(yīng)激相關(guān)。在某些實(shí)施方式中，心血管疾病、病癥或病況是急性冠狀動(dòng)脈綜合征。例如，急性冠狀動(dòng)脈綜合征選自ST段抬高心肌梗塞、非ST段抬高心肌梗塞和不穩(wěn)定型心絞痛。在其它實(shí)施方式中，心血管疾病、病癥或病況是缺血性心臟病。在其它實(shí)施方式中，心血管疾病、病癥或病況是心力衰竭(任何形式)。例如，心力衰竭可以是收縮性或舒張性心力衰竭。左心室收縮性功能障礙可導(dǎo)致心力衰竭。心力衰竭也可能是右心室梗塞、肺動(dòng)脈高壓、慢性重度三尖瓣關(guān)閉不全或致心律失常型右心室發(fā)育不良的結(jié)果。心力衰竭也可能是LV舒張性功能障礙的結(jié)果。在另一實(shí)施方式中，心血管疾病、病癥或病況是缺血性心臟病。
[0075]在一個(gè)方面中，本發(fā)明包括用于在受試者中預(yù)防和/或治療心血管疾病如急性冠狀動(dòng)脈綜合征、心力衰竭、缺血性心臟病等，以及涉及缺血和/或氧化應(yīng)激的相關(guān)心血管疾病、病癥或病況，以及相關(guān)的病癥和病況的藥物組合物，包括胃腸外遞送形式和制劑，以及其它遞送形式，包括通過(guò)輸注、注射和滴注的遞送形式，以及延遲的、緩慢的、延長(zhǎng)的或控釋的組合物、裝置和基質(zhì)(matrices)，包含或基本上由治療有效量的B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑和藥學(xué)上可接受的載體組成，B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑可以是單獨(dú)的、或與另一種心血管治療劑組合。在某些優(yōu)選實(shí)施方式中，所述藥物組合物經(jīng)過(guò)配制用于靜脈內(nèi)施用，包括通過(guò)輸注或作為推注。用于其它施用途徑的其它制劑也在本發(fā)明范圍之內(nèi)，包括例如用于鼻、肺、頰、直腸、經(jīng)皮和口服遞送的制劑。
[0076]在另一個(gè)方面中，本發(fā)明的組合物包含約0.01至約100毫克，約100至約500毫克，或約500至約1000毫克或更多的本發(fā)明的化合物，例如B型利尿鈉信號(hào)肽片段或B型利尿鈉信號(hào)肽片段類(lèi)似物，所述信號(hào)肽片段或其類(lèi)似物包括一個(gè)或多個(gè)SEQ.1D.NO: 1-9以及根據(jù)式I至VIII的肽。在此處中描述了其它劑量并包括范圍為至少約100納克的劑量，包括例如至少約200納克、600納克、2000納克、6000納克和至少約10，000納克或以上的劑量。劑量濃度包括至少約0.1摩爾每升，包括例如至少約0.3、1.0,3.0和10.0納摩爾/L的濃度。劑量濃度還包括0.1納摩爾/L、0.3納摩爾/LU.0納摩爾/L、3.0納摩爾/L和10.0納摩爾/L的濃度。這些劑量濃度相當(dāng)于0.1,0.3、1、3、11 μ g/L，且可施用的重量劑量為 0.4、1.0、4.0、10和39微克/1^ ( μ g/kg)。范圍從 0.1 至 5.0 μ g/kg 以及從 0.1 至
10.0 μ g/kg的其它劑量也在本發(fā)明范圍內(nèi)。此外，約0.4、1.0、4.0、10和39 μ g/kg的劑量在本發(fā)明范圍內(nèi)。至少約0.4、1.0、4.0、10和39 μ g/kg的劑量也在本發(fā)明范圍內(nèi)?？梢宰鳛閱我换蚨啻蝿┝刻峁┻@些組合物和量。
[0077]本發(fā)明還包括治療受試者的方法，所述受試者患有或處于發(fā)展為心血管疾病、病癥或病況的風(fēng)險(xiǎn)，方法包括向所述受試者施用治療有效量的一種或多種此處所述的化合物或藥物組合物。在一個(gè)非限制性的實(shí)施方式中，心血管疾病、病癥或病況和缺血和/或氧化應(yīng)激相關(guān)。在一個(gè)實(shí)施方式中，心血管疾病、病癥或病況是急性冠狀動(dòng)脈綜合征，例如，ST段抬高心肌梗塞、非ST段抬高心肌梗塞或不穩(wěn)定型心絞痛。在另一個(gè)實(shí)施方式中，心血管疾病、病癥或病況是心力衰竭。在其它實(shí)施方式中，心血管疾病、病癥或病況是缺血性心臟病。在另一個(gè)實(shí)施方式中，心血管疾病、病癥或病況是穩(wěn)定型心絞痛。
[0078] 本發(fā)明包括治療受試者的方法，所述受試者患有或處于發(fā)展為心血管疾病、病癥或病況的風(fēng)險(xiǎn)，方法包括治療有效量的B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑和藥學(xué)上可接受的載體。在一個(gè)實(shí)施方式中，藥物組合物中的B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑是BNPsp (17-26) (SEQ IDNO:1)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，藥物組合物中的B型利尿鈉信號(hào)肽片段包含或基本上由選自SEQ.1D.NO:2至9的序列組成。在另一個(gè)實(shí)施方式中，藥物組合物中的B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑包含或基本上由選自式1、式I1、式II1、式IV、式V、式V1、式VII或式VIII的序列組成。B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑也包括此處所述B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑的活性類(lèi)似物、變體、截短和修飾的形式。[0079]在另一方面中，本發(fā)明包括通過(guò)提高受試者中B型利尿鈉信號(hào)肽片段的活性，在受試者中治療和/或預(yù)防與缺血和/或氧化應(yīng)激相關(guān)的心血管疾病、病癥或病況的方法。這可以通過(guò)例如向受試者施用組合物而實(shí)現(xiàn)，所述組合物包含治療有效量的B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑，例如B型利尿鈉信號(hào)肽片段或B型利尿鈉信號(hào)肽片段，這包括包含或基本上由選自SEQ.1D.NO: 1-9的序列組成的BNPsp片段，或包含或基本上由根據(jù)式I到VIII任一個(gè)的肽組成的肽，或其類(lèi)似物、變體、截短或修飾。在某些實(shí)施方式中，例如以單一或分開(kāi)的劑量或通過(guò)持續(xù)輸注，每天施用約0.01至約100、500或1000納克或毫克或更多(例如，至少約100納克或毫克，至少約500納克或毫克，或至少約1000納克或毫克)的BNPsp片段或B型利尿鈉信號(hào)肽片段類(lèi)似物，例如包含或基本上由選自SEQ.1D.NO: 1-9的序列組成的BNPsp片段，或包含或基本上由根據(jù)式I到VIII任一個(gè)的肽組成的肽。
[0080]在另一個(gè)方面中，本發(fā)明包括治療患者的方法，所述患者患有任何原因引起的胸痛，包括急性冠狀動(dòng)脈綜合征，方法包括向患者施用治療有效量的B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑，其中所述患者未患有Q波MI或STEMI。在該方法的某些實(shí)施方式中，患者患有不穩(wěn)定型心絞痛。在該方法的另一實(shí)施方式中，患者患有非Q波心肌壞死。在此方法的另一個(gè)實(shí)施方式中，患者具有不大于0.4ng/ml的血液肌鈣蛋白I水平。在此方法的另一個(gè)實(shí)施方式中，患者具有不大于0.lng/ml的血液肌鈣蛋白T水平。在此方法的另一個(gè)實(shí)施方式中，患者不具有升高的血液肌酸激酶。在此方法的另一個(gè)實(shí)施方式中，患者沒(méi)有ST段抬高。在此方法的另一個(gè)實(shí)施方式中，患者不表現(xiàn)出病理性的Q波。在該方法的另一個(gè)實(shí)施方式中，患者表現(xiàn)出以下癥狀中的一種或多種:持續(xù)時(shí)間大于15分鐘的胸痛、靜息時(shí)胸痛、或最輕微活動(dòng)后的胸痛，所述胸痛對(duì)舌下硝酸鹽響應(yīng)不良。
[0081]在一個(gè)實(shí)施方式中，以單劑量施用B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑。在另一個(gè)實(shí)施方式中，以一個(gè)以上的劑量施用B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑。在又一個(gè)實(shí)施方式中，持續(xù)一段時(shí)間，例如預(yù)定的時(shí)間段，持續(xù)施用B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑。在又一個(gè)實(shí)施方式中，B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑，同葡萄糖或鉀鹽或其組合共施用。
[0082]在另一個(gè)方面中，本發(fā)明包括治療患者的方法，包括向個(gè)體施用治療有效量的B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑，其中是 在以下一種或多種癥狀的發(fā)作之后施用:持續(xù)時(shí)間大于15分鐘的胸痛、靜息時(shí)胸痛、或最輕微活動(dòng)后的胸痛、惡心、氣短、心悸或眩暈。在其它實(shí)施方式中，癥狀發(fā)作前患者未患有Q波MI或STEMI ;患者患有不穩(wěn)定型心絞痛；患者患有非Q波心肌壞死；患者具有不大于0.4ng/ml的血液肌鈣蛋白I水平；患者具有不大于0.lng/ml的血液肌鈣蛋白T水平；患者不具有升高的血液肌酸激酶心肌同工酶；患者沒(méi)有ST段抬高；患者不表現(xiàn)出病理性的Q波；在一種或多種癥狀發(fā)作和患者遭受Q波MI或STEMI的時(shí)間之間進(jìn)行施用。在另一個(gè)實(shí)施方式中，方法還包括在患者遭受Q波MI或STEMI期間持續(xù)施用B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑的步驟。在另一實(shí)施方式中，方法還包括在患者遭受Q波MI或STEMI之后持續(xù)施用B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑的步驟。在此方法的其它實(shí)施方式中，患者患有缺血性心臟病、或處于發(fā)展為缺血性心臟病的風(fēng)險(xiǎn)。在方法的另一個(gè)實(shí)施方式中，患者具有下列一種或多種心臟異常:充血性心力衰竭、由于二尖瓣關(guān)閉不全導(dǎo)致的心臟雜音惡化、或心臟傳導(dǎo)障礙的跡象。在其它實(shí)施方式中，患者具有正常的ECG。在該方法的另一個(gè)實(shí)施方式中，患者患有穩(wěn)定型心絞痛。在方法的其它實(shí)施方式中，以單劑量、或一個(gè)以上的劑量、或持續(xù)施用B型利尿鈉信號(hào)肽 片段劑。在該方法其它實(shí)施方式中，B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑，同葡萄糖或鉀鹽或其組合共施用。
[0083]本發(fā)明還包括治療患有穩(wěn)定型心絞痛患者的方法，包括施用B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑。在進(jìn)一步的實(shí)施方式中，持續(xù)一段時(shí)間，包括預(yù)定的時(shí)間段，持續(xù)施用。
[0084]本發(fā)明還提供用于在有需要的患者上進(jìn)行血管成形術(shù)的方法，包括在血管成形術(shù)操作過(guò)程中向患者施用B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑。在進(jìn)一步的實(shí)施方式中，所述方法包括或進(jìn)一步包括在血管成形術(shù)操作前向患者施用B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑。在進(jìn)一步的實(shí)施方式中，所述方法包括或進(jìn)一步包括在血管成形術(shù)操作后向患者施用B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑。在其它實(shí)施方式中，在血管成形術(shù)操作之前、期間和/或之后，以任何組合，向患者施用B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑。
[0085]本發(fā)明還包括用于治療患有的方法，所述患者患有缺血性心臟病、或處于發(fā)展為缺血性心臟病風(fēng)險(xiǎn)的患者，包括表現(xiàn)出以下一種或多種癥狀的患者:惡心、氣短、心悸或頭暈，并且其中患者不表現(xiàn)出胸痛，方法包括向患者施用治療有效量的B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑，其中所述患者未患Q波MI或STEMI。在該方法的另一個(gè)實(shí)施方式中，患者具有正常的ECG。
[0086]本發(fā)明還提供用于在第一次心臟窘迫(distress)癥狀之后延長(zhǎng)溶栓療法有效時(shí)間的方法，包括在以下一種或多種癥狀發(fā)作后施用治療有效量的B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑:持續(xù)時(shí)間大于15分鐘的胸痛、靜息時(shí)胸痛、最輕微活動(dòng)后的胸痛、惡心、氣短、心悸或眩暈。
[0087]在另一個(gè)方面中,被治療的受試者是哺乳動(dòng)物,優(yōu)選人。其它哺乳動(dòng)物包括家養(yǎng)動(dòng)物和農(nóng)場(chǎng)動(dòng)物，以及動(dòng)物園、運(yùn)動(dòng)或?qū)櫸飫?dòng)物，如狗、馬和貓。
[0088]本發(fā)明還包括含有包裝材料的制品，其中包裝材料包含一種或多種此處所述的化合物或藥物組合物。然后發(fā)明還包括含有包裝材料的制品，其中包裝材料包含一種或多種此處所述的化合物或藥物組合物，連同用于在受試者中或上預(yù)防和/或治療心血管疾病、病癥或病況的使用說(shuō)明書(shū)。在一個(gè)實(shí)施方式中，說(shuō)明書(shū)中提到的心血管疾病、病癥或病況與缺血和/或氧化應(yīng)激相關(guān)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，說(shuō)明書(shū)中提到的心血管疾病、病癥或病況是缺血性心臟病。在一個(gè)實(shí)施方式中，說(shuō)明書(shū)中提到的心血管疾病、病癥或病況是急性冠狀動(dòng)脈綜合征，例如不穩(wěn)定型心絞痛、STEMI和/或NSTEMI。在另一個(gè)實(shí)施方式中，說(shuō)明書(shū)中提到的心血管疾病、病癥或病況是心力衰竭(任何形式)。說(shuō)明書(shū)可以是電子的和/或與網(wǎng)站相關(guān)聯(lián)。
[0089]本發(fā)明還包括制備用于預(yù)防或治療一種或多種此處所述心血管疾病、病癥或病況的藥物的方法，包括例如急性冠狀動(dòng)脈綜合征、心力衰竭等，方法包括將治療有效量的此處所述化合物如B型利尿鈉信號(hào)肽片段或B型利尿鈉信號(hào)肽片段類(lèi)似物或變體，以及藥學(xué)上可接受的載體合并到一起。在一個(gè)實(shí)施方式中，B型利尿鈉信號(hào)肽片段包含選自SEQ.1D.NO:1至9的序列。在另一個(gè)實(shí)施方式中，B型利尿鈉信號(hào)肽片段類(lèi)似物是選自式1-VI11中一種或多種的化合物。在一個(gè)實(shí)施方式中，藥物配制成用于腸胃外施用。
[0090]本發(fā)明的組合物和方法用于預(yù)防和/或治療心血管疾病，例如急性冠狀動(dòng)脈綜合征、心力衰竭、缺血性心臟病等，以及涉及缺血和/或氧化應(yīng)激的相關(guān)心血管疾病、病癥和病況，本發(fā)明的組合物和方法還包括B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑同一種或多種其它心血管治療劑的先后或者組合(例如物理組合，作為組合制劑而提供)施用。此類(lèi)其它心血管治療劑包括硝酸鹽、β -阻斷劑、鈣通道阻斷劑(特別用于穩(wěn)定或不穩(wěn)定型心絞痛，但也用于β -阻斷劑情況下的心力衰竭)、利尿劑、血管擴(kuò)張劑、正性肌力藥(positive inotropes)、ACE抑制劑和醛固酮拮抗劑如安體舒通(特別用于心力衰竭)、血液稀釋療法(如阿斯匹林、肝素、華法林)和硝酸甘油(特別用于MI)。
[0091]本發(fā)明的組合物和方法用于預(yù)防和/或治療心血管疾病，例如急性冠狀動(dòng)脈綜合征、心力衰竭、缺血性心臟病等，以及涉及缺血和/或氧化應(yīng)激的相關(guān)心血管疾病、病癥和病況，本發(fā)明的組合物和方法還包括B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑同一種或多種抗血栓溶解療法(例如鏈激酶抑制劑、抗血小板療法如，例如氯吡格雷)的先后或者組合(例如物理組合，作為組合制劑而提供)施用。
[0092]本發(fā)明的組合物和方法用于預(yù)防和/或治療心血管疾病，例如急性冠狀動(dòng)脈綜合征、心力衰竭、缺血性心臟病等，以及涉及缺血和/或氧化應(yīng)激的相關(guān)心血管疾病、病癥和病況，本發(fā)明的組合物和方法還包括B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑同B型利尿鈉肽包括例如奈西立肽(是B型利尿鈉肽的一種重組形式)的先后或者組合(例如物理組合，作為組合制劑而提供)施用。
[0093]在用于預(yù)防和/或治療心血管疾病，例如急性冠狀動(dòng)脈綜合征、心力衰竭、缺血性心臟病等，以及涉及缺血和/或氧化應(yīng)激的相關(guān)心血管疾病、病癥和病況的本發(fā)明的某些方法和組合物(包括藥物組合物、制劑、制品和試劑盒)中，使用或提供亞治療有效量的B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑以及一種或多種其它心血管治療劑用于組合施用(分開(kāi)地、或作為組合制劑聯(lián)合地)以提供治療有效的組合作用。
[0094]因此，可以理解，公開(kāi)了用于治療心血管疾病，例如急性冠狀動(dòng)脈綜合征、心力衰竭、缺血性心臟病等，以及涉及缺血和/或氧化應(yīng)激的相關(guān)心血管疾病、病癥和病況的本發(fā)明的組合物和方法，本發(fā)明的組合物和方法采用B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑(包括其活性類(lèi)似物)以及另一種心血管治療劑。B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑，例如可選自BNPsp(17-26)(SEQID NO:I),BNPsp (17-25) (SEQ ID NO:2)、BNPsp (17-24) (SEQ ID NO:3)、BNPsp (17-23)(SEQ ID NO:4), BNPsp (17-22) (SEQ ID NO:5)、BNPsp (17-21) (SEQ ID NO:6)、BNPsp(17-20) (SEQ.1D.NO:7),BNPsp (17-19) (SEQ.1D.NO:8)和 BNPsp (17-18) (SEQ.1D.NO:9)，及其活性類(lèi)似物。在另一個(gè)實(shí)施方式中，B型利尿鈉信號(hào)肽劑可選自根據(jù)式1、式I1、式II1、式IV、式V、式V1、式VII和式VIII任一個(gè)的序列、及其活性類(lèi)似物。任選地，心血管劑例如選自包含如下或基本上由如下組成的組:硝酸鹽、β -阻斷劑、鈣通道阻斷劑、利尿劑，血管擴(kuò)張劑、正性肌力藥、ACE抑制劑、醛固酮拮抗劑、硝酸甘油、血液稀釋劑、抗血栓溶解劑和B型利尿鈉肽。
[0095]此處所提供的使用一種或多種此處所述的化合物或藥物組合物對(duì)受試者的治療可以包括它們的同時(shí)、分開(kāi)、先后或持續(xù)施用。
[0096]用于預(yù)防和/或治療心血管疾病，例如急性冠狀動(dòng)脈綜合征、心力衰竭、缺血性心臟病等，以及涉及缺血和/或氧化應(yīng)激的相關(guān)心血管疾病、病癥和病況的藥物組合物，還以組合制劑的形式提供，例如作為兩種或多種B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑的混合物。
[0097] 術(shù)語(yǔ)“組合制劑”不僅包括化合物的物理組合，還包括作為“試劑盒組件”提供的化合物， 從這種意義上說(shuō)，如上所定義的組合伙伴(partner)可以獨(dú)立地給藥(dosed)、或采用不同量的組合伙伴(a)以及(b)的不同固定組合施用，即同時(shí)、分開(kāi)或先后施用。然后，試劑盒的組件可以，例如同時(shí)施用或按時(shí)間順序交錯(cuò)施用，所述交錯(cuò)施用即試劑盒組件中的任何組件在不同的時(shí)間點(diǎn)以相等或不等的時(shí)間間隔施用。
[0098]在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明包括試劑盒，所述試劑盒包含一種或多種劑量的B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑，試劑盒包含一個(gè)或多個(gè)注射器、遞送計(jì)量劑量的“筆式”注射器、無(wú)針注射器、液體制劑、用于重新配制的凍干粉和無(wú)菌液體、干粉吸入劑、含片和舌下片。
[0099]在一個(gè)實(shí)施方式中，施用組合制劑，其中向受試者施用兩種或多種分開(kāi)的組合物，其中第一組合物包含治療有效量的B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑，第二組合物包含治療有效量的另一種心血管治療劑。在另一個(gè)實(shí)施方式中，施用第三組合物，其包含B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑或另一種心血管治療劑。
[0100]因此，用于預(yù)防和/或治療心血管疾病，例如急性冠狀動(dòng)脈綜合征、心力衰竭、缺血性心臟病等，以及涉及缺血和/或氧化應(yīng)激的相關(guān)心血管疾病、病癥和病況的藥物組合物，被提供用于組合、同時(shí)、先后分開(kāi)或持續(xù)施用。在一個(gè)實(shí)施方式中，在和另一心血管治療劑相同或大約相同的時(shí)間施用包含或基本上由B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑組成的組合物。在一個(gè)實(shí)施方式中，在另一心血管治療劑的至少約三十分鐘內(nèi)施用包含B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑的組合物。在一個(gè)實(shí)施方式中，在另一心血管治療劑的至少約I小時(shí)內(nèi)施用包含B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑的組合物。在一個(gè)實(shí)施方式中，在另一心血管治療劑的至少約2-12或12-24小時(shí)內(nèi)施用包含B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑的組合物。在一個(gè)實(shí)施方式中，在另一心血管治療劑的至少約24-48小時(shí)內(nèi)施用包含B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑的組合物。在另一個(gè)實(shí)施方式中，B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑和另一心血管治療劑在彼此的約1-8小時(shí)內(nèi)、在彼此的約I天內(nèi)、或在彼此的約I周內(nèi)施用。
[0101]在另一個(gè)方面中，本發(fā)明包括用于單獨(dú)地或與另一心血管治療劑組合地，配制成延遲釋放制劑、緩慢釋放制劑、延長(zhǎng)釋放制劑、控釋制劑和/或重復(fù)操作制劑，向患有或處于發(fā)展為心血管疾病例如急性冠狀動(dòng)脈綜合征、心力衰竭、缺血性心臟病等，以及涉及缺血和/或氧化應(yīng)激的相關(guān)心血管疾病、病癥和病況風(fēng)險(xiǎn)或相關(guān)病癥或病況的受試者，施用治療有效量的B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑的方法。
[0102]在某些其它方面中，本發(fā)明還涉及使用這種組合物來(lái)治療患有或處于心血管疾病例如急性冠狀動(dòng)脈綜合征、心力衰竭、缺血性心臟病等，以及涉及缺血和/或氧化應(yīng)激的相關(guān)心血管疾病、病癥和病況、和相關(guān)病癥和病況風(fēng)險(xiǎn)的受試者的方法。
[0103]在其它方面中，本發(fā)明包括用于預(yù)防和/或治療患有或疑似患有或易感于、或處于任何特征全部或部分在于心絞痛的疾病、病癥和/或病況風(fēng)險(xiǎn)的受試者的方法和組合物。
[0104]根據(jù)一個(gè)方面中，本發(fā)明涉及阻止或降低或緩解心血管疾病例如急性冠狀動(dòng)脈綜合征、心力衰竭、缺血性心臟病等，以及涉及缺血和/或氧化應(yīng)激的相關(guān)心血管疾病、病癥和病況的癥狀的方法。
[0105]在另一個(gè)方面中，本發(fā)明提供預(yù)防和/或治療心血管疾病例如急性冠狀動(dòng)脈綜合征、心力衰竭、缺血性心臟病等， 以及涉及缺血和/或氧化應(yīng)激的相關(guān)心血管疾病、病癥和病況的方法，其包括向有需要的受試者，單獨(dú)地或與另一心血管治療劑一起組合地，施用包含治療有效量的B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑的組合物，其中所述第一劑選自BNPsp (17-26)(SEQ ID NO:1)、BNPsp (17-25) (SEQ ID NO:2)、BNPsp (17-24) (SEQ ID NO:3)、BNPsp(17-23) (SEQ ID NO:4)、BNPsp (17-22) (SEQ ID NO:5)、BNPsp (17-21) (SEQ ID NO:6)、BNPsp (17-20) (SEQ.1D.NO:7),BNPsp (17-19) (SEQ.1D.NO:8)和 BNPsp (17-18) (SEQ.1D.NO:9),以及根據(jù)式1、式I1、式II1、式IV、式V、式V1、式VII和式VIII任一個(gè)的序列、及其活性類(lèi)似物，其中第二心血管劑選自包含如下或基本上由如下組成的組:硝酸鹽、β -阻斷劑、鈣通道阻斷劑、利尿劑，血管擴(kuò)張劑、正性肌力藥、ACE抑制劑、醛固酮拮抗劑、硝酸甘油、血液稀釋劑、抗血栓溶解劑和B型利尿鈉肽。
[0106]本發(fā)明的方法包括先后或同時(shí)施用此處所述的第一劑和第二劑，按照比其單獨(dú)施用時(shí)(即當(dāng)它們不組合施用時(shí))所用的量或劑量更少的量或劑量，提供試劑任一個(gè)或兩者。所施用的試劑更少的量通常是從單獨(dú)施用時(shí)試劑量的約二十分之一至約十分之一，并且可以是單獨(dú)施用時(shí)約八分之一的量、約六分之一的量、約五分之一的量、約四分之一的量、約
三分之一的量和約一半的量。
[0107]在另一個(gè)方面中，本發(fā)明包括包含容器的制品，其中容器含有治療有效量的B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑如，例如 BNPsp (17-26) (SEQ ID NO: I), BNPsp (17-25) (SEQ ID NO:2),BNPsp (17-24) (SEQ ID NO:3),BNPsp (17-23) (SEQ ID NO:4),BNPsp (17-22) (SEQID NO:5),BNPsp (17-21) (SEQ ID NO:6),BNPsp (17-20) (SEQ.1D.NO:7),BNPsp (17-19)(SEQ.1D.NO:8)和 BNPsp (17-18) (SEQ.1D.NO:9),以及選自式 1、式 I1、式 II1、式 IV、式V、式V1、式VII和式VIII任一個(gè)的化合物、及其活性類(lèi)似物，與第二心血管劑一起或物理組合，如一種或多種硝酸鹽、β -阻斷劑、鈣通道阻斷劑、利尿劑，血管擴(kuò)張劑、正性肌力藥、ACE抑制劑、醛固酮拮抗劑、硝酸甘油、血液稀釋劑、抗血栓溶解劑和/或B型利尿鈉肽，以及使用說(shuō)明書(shū)，包括此處所述的治療受試者的用途。
[0108]本發(fā)明包括包含包裝材料的制品，包裝材料包含一種或多種如此處所述的劑型，其中該包裝材料有標(biāo)簽，標(biāo)簽表明劑型可用于患有或疑似患有或易患任何此處描述或引用的疾病、病癥和/或病況，包括急性冠狀動(dòng)脈綜合征、缺血性心臟病、心絞痛和心力衰竭。
[0109]本發(fā)明包括制備用 于預(yù)防和/或治療心血管疾病例如急性冠狀動(dòng)脈綜合征、心力衰竭、缺血性心臟病等，以及涉及缺血和/或氧化應(yīng)激的相關(guān)心血管疾病、病癥和病況的藥物的方法，方法包括將一定量的B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑和藥學(xué)上可接受的載體以及一種或多種其它心血管劑合并到一起，用于預(yù)防和/或治療心血管疾病例如急性冠狀動(dòng)脈綜合征、心力衰竭、缺血性心臟病等，以及涉及缺血和/或氧化應(yīng)激的相關(guān)心血管疾病、病癥和病況。
[0110]本發(fā)明包括這樣的方法，其包括治療有效量的B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑在制備用于預(yù)防和/或治療心血管疾病如急性冠狀動(dòng)脈綜合征、心力衰竭、缺血性心臟病等，以及涉及缺血和/或氧化應(yīng)激的相關(guān)心血管疾病、病癥或病況，以及相關(guān)疾病和病癥的劑型中的用途。這種劑型包括，例如口服遞送形式和制劑，以及其它遞送形式，包括用于通過(guò)輸注、注射和滴注的遞送的形式，并且組合物和裝置包括例如緩慢釋放、延長(zhǎng)釋放和延遲釋放的組合物、儲(chǔ)庫(kù)劑型(depot)和基質(zhì)。這樣的劑型包括此處所公開(kāi)的用于治療受試者的那些。
[0111]在某些其它方面中，本發(fā)明提供用于預(yù)防和/或治療心血管疾病如急性冠狀動(dòng)脈綜合征、心力衰竭、缺血性心臟病等，以及涉及缺血和/或氧化應(yīng)激的相關(guān)心血管疾病、病癥或病況，以及相關(guān)疾病和病癥的包含B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑連同使用說(shuō)明書(shū)的包裝，其中B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑單 獨(dú)或與一種或多種其它心血管治療劑組合。[0112]在其它方面中，本發(fā)明提供一種或多種此處所述的化合物和組合物在制備藥物中的用途。在其它方面中，本發(fā)明提供一種或多種此處所述的化合物和組合物在制備用于治療一種或多種此處所述的疾病、病癥和病況的藥物中的用途。在其它方面中，本發(fā)明提供一種或多種此處所述和要求的化合物、組合物和藥物在治療受試者的一種或多種此處所述的疾病、病癥和病況中的用途。
[0113]下面提供本發(fā)明的這些和其它方面，其不限于或受限于本
【發(fā)明內(nèi)容】
中的信息。
【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0114]本申請(qǐng)包含至少一個(gè)以顏色表示的圖。根據(jù)要求并支付必要的費(fèi)用提供本申請(qǐng)帶有顏色附圖的拷貝。下面提供每個(gè)圖的簡(jiǎn)要概述。
[0115]圖1表示在缺血再灌注損傷的分離大鼠心臟模型中施用人BNPsp (17-26)的有益效果。圖1 (A)顯示,如通過(guò)發(fā)展壓(developed pressure)所評(píng)價(jià)的,在40分鐘的缺血期之前(前)或之后(IDR)施用0.3nMol和InMol人BNPsp (17-26)改善左心室的收縮功能。這些作用在0.3nMoI前和InMol IDR時(shí)最明顯。圖1 (B)表明血管反應(yīng)性，在和圖1A相同的心臟中通過(guò)灌注壓所評(píng)價(jià)的。通過(guò)前或IDR用BNPsp (17-26)治療有益地降低了缺血后再灌注期的灌注壓。圖1 (C)顯示由于人BNPsp (17-26)的IDR施用導(dǎo)致的再灌注期間肌鈣蛋白I (一種心臟細(xì)胞壞死的生物標(biāo)志物)釋放的顯著減少。圖1 (D)顯示在與圖1C中所述相同樣本中再灌注肌紅蛋白水平的共同改進(jìn)。
[0116]圖2顯示在正常健康的羊中對(duì)人BNPsp (17-26)施用的體內(nèi)耐受以及對(duì)人BNPsp(17-26)施用缺乏血液動(dòng)力學(xué)影響。圖2 (A)顯示當(dāng)以10ng/kg/min和100kg/ng/min給定恒定的輸注人BNPsp (17-26)時(shí)，和對(duì)照輸注(生理鹽水)相比，羊I中缺乏心輸出量響應(yīng)。這樣的響應(yīng)是良好的耐受劑的指示。圖2 (B)顯示當(dāng)施用和圖2A相同的BNPsp (17-26)劑量時(shí)，羊2中同樣缺乏心輸出量響應(yīng)。
[0117]圖3顯示在使用合成的人BNPsp (17-26)和對(duì)照緩沖液預(yù)處理的分離心臟中，歸一化的收縮功能(發(fā)展壓)。劑量和組的大小如圖所示。
[0118]圖4顯示在使用合成的人BNPsp (17-26)和對(duì)照緩沖液預(yù)處理的分離心臟中，歸一化的血管功能(灌注壓)。劑量和組的大小如所示。
[0119]圖5顯示在使用合成的人BNPsp (17-26)和對(duì)照緩沖液預(yù)處理的心臟中，肌鈣蛋白I的累積釋放(AUC)。劑量和組的大小如各圖3和4所示。*=P〈0.01相對(duì)于對(duì)照。
[0120]圖6顯示缺血后再灌注期間給予BNPsp( 17-26)，分離的心臟中的發(fā)展壓。劑量和樣本的大小如所示。
[0121]圖7顯示缺血后再灌注期間給予BNPsp917_26)，分離的心臟中的灌注壓(上圖)和累積的肌鈣蛋白釋放(下圖)。
[0122]圖8顯示蘇木精和伊紅(HE)染色，表明在對(duì)照心臟中，相較于BNPsp (17_26)治療的心臟，更大程度的心肌細(xì)胞腫脹和肌原纖維排列紊亂。
[0123]圖9顯示左心室游離壁(free wall)心肌細(xì)胞玻片的半胱天冬酶_3染色。棕色著色來(lái)表示半胱天冬酶-3活性。再灌注時(shí)用lnmol/L BNPsp (17-26)輸注的心臟幾乎不存在著色，并且在用0.3nmol/L BNPsp (17-26)預(yù)處理的心臟中與對(duì)照相比顯著降低。
[0124]圖10顯示用BNPsp (17-26)輸注的心臟中TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞的顯著降低。在用BNPsp (17-26)輸注的所有心臟中TUNEL陽(yáng)性核(紅棕色著色)顯著降低。
[0125]圖11顯示在4只正常的羊中以100和1000ug/kg.min輸注人BNPsp (17-26)，對(duì)靜脈壓、心率、平均動(dòng)脈壓或心輸出量沒(méi)有影響。對(duì)于激素和腎的指標(biāo)(indices)發(fā)現(xiàn)相似的結(jié)果。
[0126]圖12顯示在經(jīng)歷心肌缺血的羊和接受人BNPsp (17_26)的羊中，累積的肌鈣蛋白I釋放。與對(duì)照組相比，治療的羊具有顯著更低的累積肌鈣蛋白I釋放(P〈0.01)。
[0127]圖13顯示流經(jīng)缺血分離的大鼠心臟或在經(jīng)歷心臟冠狀動(dòng)脈結(jié)扎(ligation)的羊體內(nèi)的蛋白水解切割的人BNPsp (18-26)的洗脫譜。由向下的箭頭表示的，比合成的人BNPsp (17-26)早四個(gè)餾分的洗脫位置(餾分34)。
[0128]圖14顯示在接受了 0.3nmol/L改變的BNPsp序列的分離的灌注大鼠心臟中的發(fā)展壓(每組n=3)。
【具體實(shí)施方式】
[0129]實(shí)施本發(fā)明可包括或采用各種常規(guī)分子生物學(xué)(包括重組技術(shù))、微生物、細(xì)胞生物學(xué)、生化、核酸化學(xué)、和免疫學(xué)的技術(shù)，屬于本領(lǐng)域技術(shù)范圍內(nèi)。這種技術(shù)在文獻(xiàn)中有充分的闡述，包括但不限于，僅通過(guò)實(shí)例Molecular Cloning:A Laboratory Manual第二版(Sambrook 等人 1989)以及 Molecular Cloning:A Laboratory Manual 第 3 版(Sambrook和 Russel, 2001),此處合并以及各自稱(chēng)作 “Sambrook” ；01igonucleotide Synthesis (Μ.J.Gait, ed.，1984) ; Animal Cell Culture (R.1.Freshney, ed., 1987) ; Handbook ofExperimental Immunology(D.M.ffeir&C.C.Blackwell, eds.);Gene Transfer Vectors forMammalian Cells(J.M.Miller&M.P.Calos, eds., 1987);Current Protocols in MolecularBiology (F.M.Ausubel 等人 eds., 1987,包括 2001 年以來(lái)的增訂本);PCR: The PolymeraseChain Reaction, (Mullis 等人 eds., 1994);Current Protocols in Immunology(J.E.Coligan 等人 eds., 1991) ;The Immunoassay Handbook (D.Wild,ed., StocktonPress NY, 1994) ; Bioconjugate Techniques (Greg T.Hermanson, ed., AcademicPress, 1996) ;Methods of Immunological Analysis(R.Masseyeff, ff.H.Albert 和N.A.Staines, eds.，Weinheim:VCH Verlags gesellschaft mbH, 1993), Harlow 和Lane(1988)Antibodies, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Publications, NewYork,以及 Harlow 和 Lane (1999) Using Antibodies: A Laboratory Manual Cold SpringHarbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY (此處合并以及各自稱(chēng)作 Harlow和 Lane)，Beaucage 等人 eds.，Current Protocols in Nucleic Acid Chemistry Johnffiley&Sons, Inc., New York, 2000);以及Agrawal, ed., Protocols for Oligonucleotidesand Analogs, Synthesis and Properties Humana Press Inc., New Jersey, 1993)。
[0130] 應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明不限于此處所述的具體方法、規(guī)程、構(gòu)建體和試劑，這些可以發(fā)生變化。還應(yīng)當(dāng)理解，此處所用的術(shù)語(yǔ)僅用于描述特定實(shí)施方法的目的，而不意圖限制本發(fā)明的范圍，其僅由所附權(quán)利要求所限定。如此處和所附權(quán)利要求中所用，除非上下文另有明確說(shuō)明，單數(shù)形式“一”、“一個(gè)”和“該”包括復(fù)數(shù)參考。因此，例如，提及“B型利尿鈉信號(hào)肽片段”時(shí)是指一個(gè)或多個(gè)這樣的肽，并包括目前已知的或以后開(kāi)發(fā)出來(lái)的其等同物。除非另有定義，此處所用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語(yǔ)具有與本發(fā)明所屬領(lǐng)域普通技術(shù)人員通常所理解的相同的含義。雖然任何類(lèi)似或等同于此處描述的方法、裝置和材料可用于實(shí)施或測(cè)試本發(fā)明，優(yōu)選當(dāng)前描述的方法、裝置和材料。意圖提及此處所公開(kāi)的數(shù)字范圍(例如I至12)，還將范圍內(nèi)的所有相關(guān)數(shù)字(例如，1、1.1、2、3、3.9、4、5、6、6.5、7、8、9.5、10、11和12)以及范圍內(nèi)的任何有理數(shù)范圍(例如2至8、1.5至5.5和3.1至4.7)并入，因此，此處所明確公開(kāi)的所有范圍的所有子范圍得以明確公開(kāi)。這些僅僅是具體意圖的示例，所列舉的最低值和最高值之間的數(shù)值的所有可能組合應(yīng)被認(rèn)為在本申請(qǐng)中以類(lèi)似的方式被明確地陳述。當(dāng)此處使用時(shí)，以下術(shù)語(yǔ)具有以下涵義。
[0131]此處提供的化合物(例如肽和蛋白)中所用的氨基酸可以是遺傳編碼的氨基酸、天然存在的非遺傳編碼的氨基酸或合成的氨基酸。上述任何L和D對(duì)映體可用于化合物中。下列縮寫(xiě)此處可用于下列遺傳編碼的氨基酸(及其殘基):丙氨酸(Ala，A);精氨酸(Arg，R)；天冬酰胺(Asn，N);天冬氨酸(Asp，D);半胱氨酸(Cys，C);甘氨酸(Gly，G);谷氨酸(Glu，E);谷氨酰胺(Gln，Q);組氨酸(His，H);異亮氨酸(He，I);亮氨酸(Leu，L);賴(lài)氨酸(Lys、K)；甲硫氨酸(Met, Μ);苯丙氨酸(Phe, F);脯氨酸(Pro, P);絲氨酸(Ser, S);蘇氨酸(Thr，T);色氨酸(Trp、W);酪氨酸(Tyr、Y);以及纈氨酸(Val，V)。[0132]不是遺傳編碼的并且可以存在于本發(fā)明活性化合物中某些常見(jiàn)氨基酸，包括但不限于丙氨酸(b-Ala)和其它ω-氨基酸如3_氨基丙酸(Dap)、2，3_ 二氨基丙酸(Dpr，Z)、4_氨基丁酸等；α -氨基異丁酸(Aib); ε -氨基己酸(Aha); δ -氨基戊酸(Ava);甲基甘氨酸(MeGly);鳥(niǎo)氨酸(Orn);瓜氨酸(CU);叔丁胺(t_BuA) ；t- 丁基甘氨酸(t_BuG) ；N-甲基異亮氨酸(MeIle);苯基甘氨酸(Phg);環(huán)己基丙氨酸(Cha);正亮氨酸(Nle，J) ;2_萘基丙氨酸(2-Nal) ;4_氯苯丙氨酸(Phe (4-C1)) ;2_氟苯丙氨酸(Phe (2-F)) ;3_氟苯丙氨酸(Phe (3-F)) ;4_氟苯丙氨酸(Phe (4_F));青霉胺(Pen) ;1，2，3，4_四氫異喹啉_3_羧酸(Tic) ;β-2-噻吩基丙氨酸(Thi);甲硫氨酸亞砜(MSO);高精氨酸(hArg);N-乙?；?lài)氨酸(AcLys)；2, 3- 二氨基丁酸(Dab);2, 3_ 二氨基丁酸(Dbu);對(duì)-氨基苯丙氨酸(Phe CpNH2));N-甲基纈氨酸化^&1);高半胱氨酸(1^78) ；3-苯并噻唑-2-基-丙氨酸(BztAla，B)和高絲氨酸(hSer)。其它考慮的氨基酸類(lèi)似物包括磷酸絲氨酸、磷酸蘇氨酸、磷酸酪氨酸、羥脯氨酸、Y-羧基谷氨酸、馬尿酸、八氫吲哚-2-羧酸、抑胃酶氨酸(statine)、α-甲基-丙氨酸、對(duì)-苯甲?；?苯基丙氨酸、炔丙基甘氨酸、和肌氨酸。包括在本發(fā)明范圍之內(nèi)的肽可以具有任何上述L或D構(gòu)型氨基酸，或此處描述或本領(lǐng)域中已知的(無(wú)論是目前還是將來(lái))同時(shí)保留生物學(xué)活性的任何其它氨基酸。
[0133]可以彼此取代的氨基酸通常屬于相似的類(lèi)或子類(lèi)中。如本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的，主要依賴(lài)于氨基酸側(cè)鏈的化學(xué)和物理性質(zhì)，氨基酸可被分到不同的類(lèi)中。例如，一些氨基酸通常被認(rèn)為是親水性或極性氨基酸，其它被認(rèn)為是疏水性或非極性氨基酸。極性氨基酸包括具有酸性、堿性或親水性側(cè)鏈的氨基酸，非極性氨基酸包括具有芳香族或疏水性側(cè)鏈的氨基酸。非極性氨基酸可以進(jìn)一步細(xì)分為，包括除其他之外的脂肪族氨基酸。此處所用氨基酸的類(lèi)的定義如下:
[0134]“非極性氨基酸”是指，具有生理pH下不帶電荷的側(cè)鏈的氨基酸，這不是極性的并且一般被水溶液排斥。遺傳編碼的疏水性氨基酸的實(shí)例包括Ala、lie、Leu、Met、Trp, Tyr和Val。非遺傳編碼的非極性氨基酸的實(shí)例包括t-BuA、Cha和Nle。
[0135]“芳香氨基酸”是指具有含至少一個(gè)環(huán)的側(cè)鏈的非極性氨基酸，其中環(huán)具有共軛π電子體系(芳香基團(tuán))。芳香基團(tuán)可以進(jìn)一步被取代基所取代，如烷基、烯基，炔基、羥基、磺?；?、硝基和氨基基團(tuán)，以及其它。遺傳編碼的芳香氨基酸的實(shí)例包括苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸。通常遇到的非遺傳編碼的芳香氨基酸包括苯基甘氨酸、2-萘基丙氨酸、β -2-噻吩丙氨酸、3-苯并噻唑-2-基-丙氨酸、I, 2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸、4-氯苯丙氨酸、2-氟苯丙氨酸、3_氟苯丙氨酸和4-氟苯丙氨酸。
[0136]“脂肪族氨基酸”指具有飽和或不飽和的直鏈、支鏈或環(huán)狀烴側(cè)鏈的非極性氨基酸。遺傳編碼的脂肪族氨基酸的實(shí)例包括Ala、Leu、Val和He。非編碼的脂肪族氨基酸的實(shí)例包括Nle。
[0137]“極性氨基酸”是指這樣的親水性氨基酸，其具有在生理pH下帶電或不帶電的側(cè)鏈，且側(cè)鏈具有這樣的鍵，在鍵當(dāng)中兩個(gè)原子共有的一對(duì)電子更靠近其中一個(gè)原子。極性氨基酸通常是親水性的，這意味著它們具有含有被水溶液吸引的側(cè)鏈的氨基酸。遺傳編碼的極性氨基酸的實(shí)例包括天冬酰胺、半胱氨酸、谷氨酰胺、賴(lài)氨酸和絲氨酸。非遺傳編碼的極性氨基酸的實(shí)例包括瓜氨酸、高半胱氨酸、N-乙酰賴(lài)氨酸和甲硫氨酸亞砜。
[0138]“酸性氨基酸”指具有小于7的側(cè)鏈pK值的親水性氨基酸。酸性氨基酸通常具有在生理pH下由于喪失氫離子而帶負(fù)電的側(cè)鏈。遺傳編碼的酸性氨基酸的實(shí)例包括天冬氨酸(天冬氨酸)和谷氨酸(谷氨酸)。
[0139]“堿性氨基酸”指具有大于7的側(cè)鏈pK值的親水性氨基酸。堿性氨基酸通常具有在生理pH下由于結(jié)合水合氫離子而帶正電的側(cè)鏈。遺傳編碼的堿性氨基酸的實(shí)例包括精氨酸、賴(lài)氨酸和組氨酸。非遺傳編碼的堿性氨基酸的實(shí)例包括鳥(niǎo)氨酸、2，3- 二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸和高精氨酸。
[0140]“可電離的氨基酸”是指這樣一種氨基酸，其在生理pH下可以帶電。這樣可電離的氨基酸包括酸性和堿性氨基酸，例如，D-天冬氨酸、D-谷氨酸、D-組氨酸、D-精氨酸、D-賴(lài)氨酸、D-羥基賴(lài)氨酸、D-鳥(niǎo)氨酸、L-天冬氨酸、L-谷氨酸、L-組氨酸、L-精氨酸、L-賴(lài)氨酸、L-羥基賴(lài)氨酸或L-鳥(niǎo)氨酸。
[0141]正如本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解的，上述分類(lèi)不是絕對(duì)的。一些氨基酸表現(xiàn)出一個(gè)以上的特征屬性，并且因此可被包含在一個(gè)以上的類(lèi)別中。例如，酪氨酸同時(shí)具有非極性芳香環(huán)和極性羥基。因此，酪氨酸具有可以被描述為是非極性、芳香和極性的幾個(gè)特征。然而，非極性環(huán)占主導(dǎo)，因此酪氨酸被普遍認(rèn)為是非極性的。同樣地，除了能夠形成二硫鍵，半胱氨酸也具有非極性特征。因此，雖然沒(méi)有嚴(yán)格劃分為疏水性或非極性氨基酸，在許多情況下，半胱氨酸可用于給肽賦予疏水性或非極性。
[0142]在一些實(shí)施方式中，在本發(fā)明涵蓋的極性氨基酸包括，例如精氨酸、天冬酰胺，天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、組氨酸、高半胱氨酸、賴(lài)氨酸、羥基賴(lài)氨酸、鳥(niǎo)氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、和結(jié)構(gòu)相關(guān)的氨基酸。在一個(gè)實(shí)施方式中，極性氨基酸是可電離的氨基酸如精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、組氨酸、羥基賴(lài)氨酸、賴(lài)氨酸、或鳥(niǎo)氨酸。
[0143]可利用的極性或非極性氨基酸殘基的實(shí)例包括，例如丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、酪氨酸等。
[0144]如此處所用“心血管疾病”是任何涉及或者至少部分特征在于氧化應(yīng)激和/或缺血的心血管疾病、病癥或病況。
[0145]在生理期間，分子經(jīng)歷涉及還原和氧化反應(yīng)的化學(xué)變化。有未配對(duì)電子的分子可以與能夠提供一個(gè)電子的分子結(jié)合。提供電子被稱(chēng)為氧化，而獲得電子被稱(chēng)為還原。還原和氧化可使被還原的分子不穩(wěn)定，并使其自由地與其它分子反應(yīng)而導(dǎo)致細(xì)胞和亞細(xì)胞組分(如細(xì)胞膜，蛋白和DNA)的損害。如此處所用“氧化應(yīng)激”是指過(guò)度產(chǎn)生導(dǎo)致氧化應(yīng)激/氮化(nitrosative)應(yīng)激的活性氧物質(zhì)(ROS),這一過(guò)程是細(xì)胞損傷的重要介導(dǎo)(mediator)。氧化還原失衡的重要方面是觸發(fā)一些信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路活性(包括轉(zhuǎn)錄因子活性)，例如，這一過(guò)程是缺血/再灌注損傷相關(guān)的心血管疾病所特有的?；钚匝跷镔|(zhì)可以來(lái)自多種來(lái)源，例如一氧化氮(NO)合酶(N0S)、黃嘌呤氧化酶(X0)、環(huán)加氧酶、煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NAD(P) H)氧化酶同種型和金屬催化反應(yīng)。這些包括自由基如超氧陰離子(02_)、羥基自由基(H0.)、脂質(zhì)自由基(R00_)和一氧化氮(NO)。其它活性氧物質(zhì)，例如過(guò)氧化氫(H2O2)、過(guò)氧化亞硝酸鹽(0N00-)和次氯酸(H0C1)，雖然不是自由基，但具有促使氧化應(yīng)激的氧化作用。
[0146]“缺血”是當(dāng)血流和氧在身體的特定部位減少時(shí)所發(fā)生的情況。當(dāng)針對(duì)的身體部分是心臟時(shí)，這種情況命名為心肌缺血。缺血性心臟病是涵蓋動(dòng)脈狹窄所導(dǎo)致的心臟問(wèn)題的一個(gè)術(shù)語(yǔ)。動(dòng)脈變窄時(shí)，更少的血和氧氣到達(dá)心臟肌肉。這也被稱(chēng)為冠狀動(dòng)脈疾病和冠心病，并可能最終導(dǎo)致心臟發(fā)作。缺血往往會(huì)造成胸部疼痛或稱(chēng)為心絞痛的不適。有心絞痛的人可能還有未確診的無(wú)癥狀的缺血期。
[0147]心血管疾病包括，例如心力衰竭(包括充血性心力衰竭和此處其它地方所指出的其它形式的心力衰竭)和急性冠狀動(dòng)脈綜合征(包括Q波M1、STEM1、非Q波M1、NSTEMI和不穩(wěn)定型心絞痛)及缺血性心臟病。心血管疾病還包括涉及心臟或血管中B型利尿鈉肽在臨床相關(guān)時(shí)間表中升高的疾病、病癥和病況。心血管疾病還包括涉及心臟或血管中心肌鈣蛋白1、肌鈣蛋白T、肌酸激酶-MB、A型和/或B型利尿鈉信號(hào)肽或信號(hào)肽片段、尿酸、C-反應(yīng)蛋白和/或骨保護(hù)素中的一種或多種在臨床相關(guān)時(shí)間表中出現(xiàn)提高的水平的疾病、病癥和病況。其它心血管疾病包括非Q波心臟壞死。
[0148]如此處所用，患有“不穩(wěn)定型心絞痛”的患者表示有以下一種或多種癥狀和體征的患者:(I)ST段壓低，如ECG測(cè)量的；(2)輕度升高的肌鈣蛋白T水平，不超過(guò)0.lng/ml ;或
(3)輕度升高的肌鈣蛋白I水平不超過(guò)0.4ng/ml。與Q波MI相比，CK-MB和LDH水平通常不會(huì)在不穩(wěn)定型心絞痛期間升高。此外，不同于Q波MI，不穩(wěn)定型心絞痛患者通常沒(méi)有ST段抬高或任何病理性Q波。最后，不穩(wěn)定型心絞痛可僅僅基于胸痛進(jìn)行診斷，通常胸痛持續(xù)超過(guò)15分鐘、靜息時(shí)胸痛、或最輕微活動(dòng)后的胸痛，所述胸痛對(duì)舌下硝酸鹽響應(yīng)不良?；蛘撸词箾](méi)有胸痛，如果以前診斷為缺血性心臟病或者被認(rèn)為處于發(fā)展為缺血性心臟病高風(fēng)險(xiǎn)的患者以及伴有惡心、氣短、心悸或頭暈的患者可診斷為不穩(wěn)定型心絞痛。此外，本領(lǐng)域技術(shù)人員將會(huì)理解不穩(wěn)定型心絞痛的診斷是醫(yī)學(xué)判斷之一。
[0149]如此處所用，“缺血性心臟病”表示由于冠狀動(dòng)脈的血流減少導(dǎo)致的對(duì)心臟組織的氧氣供應(yīng)減少所致的心臟組織疾病。通常情況下，供給心臟的血管被部分或完全堵塞導(dǎo)致這種血流減少。缺血性心臟病的診斷可基于存在舌下含服硝酸鹽可以緩解的運(yùn)動(dòng)所引起的慢性、穩(wěn)定型心絞痛(也被稱(chēng)為“勞力型心絞痛”)。缺血性心臟病的診斷也可以基于與缺血性心臟病一致的ECG讀取，比如呈現(xiàn)ST段偏離(deviation)和/或T波倒置。
[0150]如此處所用“B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑”在一個(gè)方面中是指來(lái)自任何物種(包括鼠、牛、羊、豬、馬、禽且優(yōu)選人的)、以天然序列或遺傳工程改造的形式、來(lái)自任何來(lái)源(無(wú)論是天然的、合成的或重組產(chǎn)生 的)、具有一種或多種此處描述的生物或治療活性的B型利尿鈉信號(hào)肽的片段。術(shù)語(yǔ)“B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑”還包括藥學(xué)上可接受的鹽和前藥、以及鹽的前藥、多晶型、水合物、溶劑化物、生物活性片段、天然存在的任何B型利尿鈉信號(hào)肽片段的生物活性變體和立體異構(gòu)體、以及任何天然存在的B型利尿鈉信號(hào)肽片段的激動(dòng)劑和模擬變體及其活性類(lèi)似物(例如，含有例如保持生物活性的特定刪除或其它修飾肽)和多肽融合體。在氨基端、羧基端或二者包含額外氨基酸的融合體包括在術(shù)語(yǔ)“B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑”內(nèi)。優(yōu)選，在B型利尿鈉信號(hào)肽片段或其它B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑(包括，例如，B型利尿鈉信號(hào)肽片段的變體和類(lèi)似物)的羧基端包括額外氨基酸的融合體。示例性B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑包括 BNPsp (17-26) (SEQ ID NO:1)、BNPsp (17-25) (SEQ ID NO:2)、BNPsp (17-24) (SEQ ID NO:3),BNPsp (17-23) (SEQ ID NO:4),BNPsp (17-22) (SEQ IDNO:5)、BNPsp (17-21) (SEQ ID NO:6)、BNPsp (17-20) (SEQ.1D.NO:7)、BNPsp (17-19)(SEQ.1D.NO:8)和BNPsp (17-18) (SEQ.1D.NO:9)。其它B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑包括根據(jù)式1、式I1、式II1、式IV、式V、式V1、式VII和式VIII肽任一個(gè)的肽。
[0151]本領(lǐng)域熟知肽的修飾，例如，通過(guò)聚合物綴合或糖基化的肽的修飾。術(shù)語(yǔ)“B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑”包括修飾的肽，其包括綴合至聚合物例如PEG的肽，并且可以包括一個(gè)或多個(gè)半胱氨酸、賴(lài)氨酸或其它殘基的額外衍生化。此外，B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑可包含接頭或聚合物，其中接頭或聚合物所綴合的氨基酸可以是根據(jù)本發(fā)明的非天然氨基酸，或者利用本領(lǐng)域已知技術(shù)(例如偶聯(lián)至賴(lài)氨酸或半胱氨酸)被綴合至天然編碼的氨基酸。
[0152]參考本發(fā)明的化合物，例如SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9或例如在式1、式I1、式II1、式IV、式V、式V1、式VII和式VIII中所定義的其它肽，此處所述的氨基酸的取代、刪除、修飾或添加，意圖還涉及融合體、變體、片段、綴合物等中對(duì)應(yīng)位置上的取代、刪除、修飾或添加。
[0153]術(shù)語(yǔ)“B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑”也包括相連的同二聚體、異二聚體、同多聚體和異多聚體，其包括但不限于通過(guò)非天然編碼的氨基酸側(cè)鏈直接連接至相同或不同非天然編碼的氨基酸側(cè)鏈、或連接至天然編碼的氨基酸側(cè)鏈、或間接通過(guò)接頭所連接的那些。示例性的接頭包括小的有機(jī)化物、各種長(zhǎng)度的水溶性聚合物，比如聚(乙二醇)或葡聚糖或各種長(zhǎng)度的多肽。
[0154]術(shù)語(yǔ)“接頭”在此處用于指通常由于化學(xué)反應(yīng)所導(dǎo)致的形成的基團(tuán)或鍵，通常是共價(jià)鍵。水解穩(wěn)定的鍵表示該鍵在水中實(shí)質(zhì)上是穩(wěn)定的，在有用的Ph值下和水不反應(yīng)，包括但不限于生理?xiàng)l件下在延長(zhǎng)的時(shí)期下，或許甚至無(wú)限長(zhǎng)的時(shí)間。水解不穩(wěn)定或可降解的鍵是指在水或水溶液(包括例如血液)中可降解的鍵。酶促不穩(wěn)定或可降解的鍵是指通過(guò)一種或多種酶可降解的鍵。如本領(lǐng)域理解的，PEG和相關(guān)聚合物可在聚合物的主鏈中或在聚合物主鏈和一個(gè)或多個(gè)聚合物分子的末端官能團(tuán)之間的接頭基團(tuán)中包括可降解的鍵。例如，PEG羧酸或活性PEG羧酸與生物活性劑上的醇基發(fā)生反應(yīng)形成的酯鍵，通常在生理?xiàng)l件下經(jīng)水解以釋放試劑。其它水解可降解的鍵包括但不限于碳酸酯鍵；由胺和醛反應(yīng)產(chǎn)生的亞胺鍵；通過(guò)醇與磷酸基團(tuán)反應(yīng)而形成的磷酸酯鍵；作為酰肼和醛的反應(yīng)產(chǎn)物的腙鍵；作為醛和醇的反應(yīng)產(chǎn)物的縮醛鍵；作為甲酸鹽與醇的反應(yīng)產(chǎn)物的原酸酯鍵；位于包括但不限于聚合物(如PEG)末端的氨基和肽的羧基形成的肽鍵；以及位于包括但不限于聚合物末端的亞磷酰胺基團(tuán)和寡核苷酸5’羥基形成的寡核苷酸鍵。
[0155]此處所用術(shù)語(yǔ)“活性 ”、“生物活性”或“生物活性劑”是指能夠影響生物系統(tǒng)、通路、分子或生物體相關(guān)相互作用的任何物理或生物化學(xué)性質(zhì)的任何物質(zhì)，包括但不限于病毒、細(xì)菌、噬菌體、轉(zhuǎn)座子、朊病毒、昆蟲(chóng)、真菌、植物、動(dòng)物和人類(lèi)。特別地，如此處所用，生物活性分子包括但不限于預(yù)期用于在人或其它動(dòng)物中治愈、緩解、治療或預(yù)防心血管疾病，或者增強(qiáng)人或動(dòng)物身體或精神健康狀況的任何物質(zhì)。
[0156]如此處所用術(shù)語(yǔ)“水溶性聚合物”是指可溶于水溶劑的任何聚合物。水溶性聚合物和B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑(例如B型利尿鈉信號(hào)肽片段)的鍵可導(dǎo)致變化，包括但不限于，相對(duì)于未修飾的形式，增加或調(diào)節(jié)血清半衰期、或增加或調(diào)節(jié)治療半衰期、調(diào)節(jié)免疫原性、調(diào)節(jié)物理結(jié)合特征如聚集和多聚體的形成、改變的受體結(jié)合、以及改變的受體二聚化或多聚化。水溶性聚合物可具有或可不具有其自身的生物活性，并且可以用作接頭用于將B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑如B型利尿鈉信號(hào)肽片段附著至其它物質(zhì)，包括但不限于一個(gè)或多個(gè)B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑，如B型利尿鈉信號(hào)肽片段，或一個(gè)或多個(gè)生物活性分子。合適的聚合物包括但不限于聚乙二醇、聚乙二醇丙醛、單Cl-Cio烷氧基或其芳氧基衍生物(描述于美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5，252，714)、單甲氧基-聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、聚氨基酸、二乙烯基醚馬來(lái)酸酐、N- (2-羥丙基)-甲基丙烯酰胺、葡聚糖、葡聚糖衍生物(包括葡聚糖硫酸酯)、聚丙二醇、聚環(huán)氧丙烷/環(huán)氧乙烷共聚物、聚氧乙烯化多元醇、肝素、肝素片段、多糖、寡糖、聚糖、纖維素和纖維素衍生物(包括但不限于甲基纖維素和羧甲基纖維素)、淀粉和淀粉衍生物、多肽、聚亞烷基二醇(polyalkylene glycol)及其衍生物、聚亞烷基二醇及其衍生物的共聚物、聚乙烯基乙基醚和α_β-聚[(2-羥乙基)-DL-天冬酰胺等，或它們的混合物。這樣的水溶性聚合物的實(shí)例包括但不限于聚乙二醇和血清白蛋白。
[0157]如此處所用，術(shù)語(yǔ)“聚亞烷基二醇”或“聚(烯醇)(poly(alkene glycol))”是指聚乙二醇(聚(乙二醇))、聚丙二醇、聚丁二醇以及它們的衍生物。術(shù)語(yǔ)“聚亞烷基二醇”和/或“聚乙二醇”包括直鏈和支鏈聚合物，平均分子量在0.1kDa至IOOkDa或更大之間。其它示例性實(shí)施方式列于例如商業(yè)供應(yīng)商目錄中，如Shearwater Corporation的目錄“Polyethylene Glycol and Derivatives for Biomedical Applications” (2001)。
[0158]如此處所用，術(shù)語(yǔ)“改變的血清半衰期”是指修飾的B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑如B型利尿鈉信號(hào)肽片段，相對(duì)于其未修飾的形式，增加的循環(huán)半衰期。通過(guò)在B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑如B型利尿鈉信號(hào)肽片段施用后，采取不同時(shí)間點(diǎn)的血液樣本測(cè)量血清半衰期，并確定分子在各樣本中的濃度。血清濃度與時(shí)間的相關(guān)性允許計(jì)算血清半衰期。理想地，增加的血清半衰期是至少約2倍，但更少的增加可能是有用的，例如使得能夠獲得令人滿意的給藥方案或避免毒性作用。在一些實(shí)施方式中，所述增加是至少約3倍，至少約5倍，或至少約10-倍或更多。
[0159]如此處所用，術(shù)語(yǔ)“改變的治療半衰期”是指治療有效量的修飾的B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑如B型利尿鈉信號(hào)肽片段，相對(duì)于其未修飾的形式的半衰期增加。通過(guò)測(cè)量施用后不同時(shí)間點(diǎn)分子的藥代動(dòng)力學(xué)和/或藥效學(xué)性質(zhì)測(cè)量治療半衰期。理想地，增加的治療半衰期使得能夠獲得特別有利的給藥方案、特別有利的總劑量、或避免不期望的作用。在一些實(shí)施方式中，增加的能力、增加或減少的修飾分子對(duì)其靶的結(jié)合，增加或減少的酶(如蛋白酶)對(duì)分子的降解、或者未修飾的分子的另一參數(shù)或作用機(jī)制的增加或減少的，導(dǎo)致了增加的治療半衰期。
[0160]當(dāng)應(yīng)用于肽時(shí)，術(shù)語(yǔ)“分離的”是指肽不含有至少一些在天然狀態(tài)下與其相關(guān)的細(xì)胞的或其它生物組分，或者肽已被濃縮到超過(guò)其在體內(nèi)或體外生產(chǎn)的濃度的水平。它可以是均勻的或基本均勻的狀態(tài)。分離的物質(zhì)可以是干燥或半干燥狀態(tài)，或在溶液中包括但不限于水溶液。它可以是另外包含藥學(xué)上可接受的載體和/或賦形劑的藥物組合物的組分。通常使用分析化學(xué)技術(shù)(例如，如聚丙烯酰胺凝膠電泳或高效液相色譜法)確定純度和同質(zhì)性。
[0161]“基本上純的(substantially pure)”是指總的B型利尿鈉信號(hào)肽劑(例如BNPsp(17-26)(SEQ ID NO:1))相對(duì)于總蛋白的純度程度，其中至少70%的B型利尿鈉信號(hào)肽劑，更優(yōu)選至少80%，甚至更優(yōu)選提高到至少90%、95%或99%。特別優(yōu)選的純度為至少95%。“實(shí)質(zhì)上純的(essentially pure)”是指該組合物對(duì)于預(yù)期的B型利尿鈉信號(hào)肽劑而言是至少90%或更純。存在于制劑中主要物質(zhì)的肽也基本上是純化的。
[0162]如此處所用術(shù)語(yǔ)“有效量”是指將一定程度減輕一種或多種待治療的疾病、病況和病癥的癥狀所施用的B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑的量。此處所述的含有B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑的組合物可施用用于預(yù)防、增強(qiáng)和/或治療性治療。
[0163]如此處所用“受試者”是指任何哺乳動(dòng)物，包括人、家養(yǎng)和農(nóng)場(chǎng)動(dòng)物、及動(dòng)物園、運(yùn)動(dòng)或?qū)櫸飫?dòng)物，如狗、馬、貓、羊、豬、牛等。此處優(yōu)選的哺乳動(dòng)物是人，包括成人、兒童以及老年人。優(yōu)選的運(yùn)動(dòng)動(dòng)物是馬和狗。優(yōu)選的寵物動(dòng)物是狗和貓。
[0164]如此處所用“預(yù)防”是指全部或部分預(yù)防、改善或控制、減少、減輕、或降低、或延緩
或停止。
[0165]如此處所用，在提及本發(fā)明的化合物或組合物時(shí)，“治療有效量”是指足以誘導(dǎo)期望的生物、藥物、或治療結(jié)果的量。結(jié)果可以是一種或多種疾病或病癥或病況的體征、癥狀或原因的減輕，或者生物系統(tǒng)任何其它期望的改變。在本發(fā)明中，結(jié)果將涉及治療、預(yù)防和/或減少一種或多種心血管病癥的癥狀，包括例如急性冠狀動(dòng)脈綜合征、心力衰竭、缺血性心臟病和心絞痛，以及任何涉及缺血和/或氧化應(yīng)激的心血管病癥、疾病或病況。
[0166]如此處所用，術(shù)語(yǔ)“治”和“治療”是指治療性處理和預(yù)防性或防范性措施。
[0167]“類(lèi)似物”或“肽類(lèi)似物”是指性質(zhì)類(lèi)似于模板肽的性質(zhì)的化合物，并且可以是非肽類(lèi)藥物。“擬肽”(也稱(chēng)為“模擬肽”)包括基于肽的化合物，也包括這種基于非肽的化合物如肽類(lèi)似物。在結(jié)構(gòu)上和治療有用的肽相似的擬肽，可以用來(lái)產(chǎn)生等價(jià)的或增強(qiáng)的治療或預(yù)防作用。通常，擬肽和范例(paradigm)多肽(即具有生物或藥理功能或活性的多肽)在結(jié)構(gòu)上相同或類(lèi)似，且還可以使得一個(gè)或多個(gè)肽鍵任選地被選自如下的鍵取代:例如-CH2NH-、-CH2S-、-CH2-CH2-、-CH=CH-(順式和反式)、-C0CH2-、_CH (OH) CH2-和-CH2S0-。模擬物可以完全由天然氨基酸、或氨基酸的非天然類(lèi)似物組成、或是部分天然肽氨基酸與部分氨基酸的非天然類(lèi)似物的嵌合分子組成。模擬物也可包括任何量的天然氨基酸保守性取代，只要這樣的取代基本上也不改變模擬物的活性。
[0168]一般而言，術(shù)語(yǔ)“肽”是指兩個(gè)或多個(gè)單獨(dú)的氨基酸(不論是否是天然存在的)通過(guò)肽鍵連接的任何聚合物，其在當(dāng)結(jié)合到一個(gè)氨基酸(或氨基酸殘基)α -碳的羧酸基團(tuán)的羧基碳原子開(kāi)始共價(jià)結(jié)合到氨基基團(tuán)的氨基氮原子時(shí)發(fā)生，其中氨基基團(tuán)結(jié)合到相鄰氨基酸α_碳上。這些肽結(jié)合鍵，以及包含它們的原子(即α-碳原子、羧基碳原子(及其取代的氧原子)、和氨基氮原子(及 其取代的氫原子))形成蛋白的“多肽骨架”。此外，如此出所用，術(shù)語(yǔ)“多肽”和“肽”可以互換使用。相似地，蛋白片段、類(lèi)似物、衍生物和變體此處可稱(chēng)為“肽”或“肽劑”。術(shù)語(yǔ)肽的“片段”是指包含少于肽的所有氨基酸殘基的多肽。
[0169]如此處所用，“同時(shí)”用于表示一種或多種本發(fā)明的試劑同時(shí)間地施用，而術(shù)語(yǔ)“組合”用于表示，如果不是同時(shí)或物理上的組合施用，那么其在時(shí)間表內(nèi)“先后”施用，且兩者均可用于發(fā)揮治療上的作用。因此“先后”施用允許施用一種試劑后，在若干分鐘(例如1、2、3、4、5、10、15、20、25、30分鐘)或小時(shí)、天、周或月內(nèi)施用另一種試劑，只要B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑和另一種心血管治療劑例如同時(shí)以有效量存在。組分施用之間的時(shí)間延遲將隨著組分的具體性質(zhì)、之間的相互作用及其各自的半衰期而變化。
[0170]B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑
[0171]此處所述的本發(fā)明的B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑能夠調(diào)節(jié)心血管疾病的一種或多種癥狀。優(yōu)選，心血管疾病是急性冠狀動(dòng)脈綜合征，但是如此處所述也意圖涉及其它。
[0172]本發(fā)明的化合物，在非限制性優(yōu)選實(shí)施方式中是分離的或基本上純的，包括如下肽:
【權(quán)利要求】
1.一種用于預(yù)防和/或治療心血管疾病的藥物組合物，其包含治療有效量的B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑和藥學(xué)上可接受的載體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中所述B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑是BNPsp(17-26) (SEQ ID NO:1)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中所述B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑包含選自SEQ.1D.NO:2 至 9 的序列。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中所述組合物適于腸胃外施用。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中所述腸胃外施用是輸注。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中所述組合物適于緩慢、延遲或控釋施用。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中所述心血管疾病是急性冠狀動(dòng)脈綜合征。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中所述心血管疾病是心力衰竭或缺血性心臟病。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中所述B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑包含B型利尿鈉信號(hào)肽片段類(lèi)似物。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中所述B型利尿鈉信號(hào)肽片段劑包含肽，所述肽選自根據(jù)式1-VIII中任一個(gè)的肽。
11.一種基 本上純的肽，其具有氨基酸序列:
L H X1X2X3X4X5X6X7X8 其中 X1 是正亮氨酸、lie、Val、Met、Ala、Phe 或 Gly ；X2 是 Val、Leu、He 或 Gly ；X3 是Leu、Val、lie、Ala、Tyr 或 Gly ；X4 是正亮氨酸、lie、Val、Met、Ala、Phe 或 Gly ；X5 是 Pro、Ala、Arg 或 Ser ；X6 是 Pro、Ala、Arg 或 Ser ；X7 是 Gin、Asn 或 Gly ；以及 X8 是 Ser、Thr 或Gly。
12.—種基本上純的肽，其具有氨基酸序列:
L H X1X2X3X4X5X6X7 其中 X1 是正亮氨酸、lie、Val、Met、Ala、Phe 或 Gly ；X2 是 Val、Leu、He 或 Gly ；X3 是Leu、Val、lie、Ala、Tyr 或 Gly ；X4 是正亮氨酸、lie、Val、Met、Ala、Phe 或 Gly ；X5 是 Pro、Ala、Arg 或 Ser ；X6 是 Pro、Ala、Arg 或 Ser ；以及 X7 是 Arg、Gin、Asn 或 Gly ;倘若 當(dāng)X1是正亮氨酸、Ile、Val、Met、Ala、Phe或Gly時(shí),X2也可以是Ala，X3也可以是Phe，X4也可以是Leu, X5也可以是Gly, X6也可以是Gly,以及X7也可以是Arg ； 當(dāng)X2是Val、Leu或Ile或Gly時(shí),X1也可以是Leu, X3也可以是Phe, X4也可以是Leu,X5也可以是Gly, X6也可以是Gly,以及X7也可以是Arg ； 當(dāng)X3是Leu、Val、lie、Ala、Tyr或Gly時(shí)，X1也可以是Leu, X2也可以是Ala, X4也可以是Leu, X5也可以是Gly, X6也可以是Gly,以及X7也可以是Arg ； 當(dāng)X4是正亮氨酸、lie、Val、Met、Ala、Phe或Gly時(shí),X1也可以是Leu, X2也可以是Ala,X3也可以是Phe, X5也可以是Gly, X6也可以是Gly,以及X7也可以是Arg ； 當(dāng)X5是Pro、Ala、Arg或Ser時(shí)，X1也可以是Leu, X2也可以是Ala, X3也可以是Phe, X4也可以是Leu, X6也可以是Gly,以及X7也可以是Arg ； 當(dāng)X6是Pro、Ala、Arg或Ser時(shí)，X1也可以是Leu, X2也可以是Ala, X3也可以是Phe, X4也可以是Leu, X5也可以是Gly,以及X7也可以是Arg ；當(dāng)X7是Lys、Gln、Asn或Gly時(shí)，X1也可以是Leu, X2也可以是Ala，X3也可以是Phe, X4也可以是Leu，X5也可以是Gly，以及X6也可以是Gly。
13.—種基本上純的肽，其具有氨基酸序列:
L H X1X2X3X4X5X6 其中 X1 是正亮氨酸、He、Val、Met、Ala、Phe 或 Gly ；X2 是 Val、Leu、He 或 Gly ；X3 是Leu、Val、lie、Ala、Tyr 或 Gly ；X4 是正亮氨酸、lie、Val、Met、Ala、Phe 或 Gly ；X5 是 Pro、Ala、Arg 或 Ser ；以及 X6 是 Pro、Ala、Arg 或 Ser ;倘若 當(dāng)X1是正亮氨酸、Ile、Val、Met、Ala、Phe或Gly時(shí)，X2也可以是Ala，X3也可以是Phe，X4也可以是Leu，X5也可以是Gly，X6也可以是Gly，以及X7也可以是Arg ； 當(dāng)X2是Val、Leu或Ile或Gly時(shí)，X1也可以是Leu，X3也可以是Phe，X4也可以是Leu，X5也可以是Gly，X6也可以是Gly，以及X7也可以是Arg ； 當(dāng)X3是Leu、Val、lie、Ala、Tyr或Gly時(shí)，X1也可以是Leu，X2也可以是Ala，X4也可以是Leu，X5也可以是Gly，X6也可以是Gly，以及X7也可以是Arg ； 當(dāng)X4是正亮氨酸、Ile、Val、Met、Ala、Phe或Gly時(shí)，X1也可以是LeuiX2也可以是Ala，X3也可以是Phe，X5也可以是Gly，X6也可以是Gly，以及X7也可以是Arg ； 當(dāng)X5是Pro、Ala、Arg或Ser時(shí)，X1也可以是Leu, X2也可以是Ala，X3也可以是Phe, X4也可以是Leu，X6也可以是Gly，以及X7也可以是Arg ； 當(dāng)X6是Pro、Ala、Arg或Ser時(shí)，X1也可以是Leu, X2也可以是Ala，X3也可以是Phe, X4也可以是Leu，X5也可以是Gly，以及X7也可`以是Arg。
14.一種基本上純的肽，其具有氨基酸序列:
L H X1X2X3X4X5 其中 X1 是正亮氨酸、He、Val、Met、Ala、Phe 或 Gly ；X2 是 Val、Leu、He 或 Gly ；X3 是Leu、Val、lie、Ala、Tyr 或 Gly ；X4 是正亮氨酸、lie、Val、Met、Ala、Phe 或 Gly ；以及 X5 是Pro、Ala、Arg 或 Ser ;倘若 當(dāng)X1是正亮氨酸、Ile、Val、Met、Ala、Phe或Gly時(shí)，X2也可以是Ala，X3也可以是Phe，X4也可以是Leu，X5也可以是Gly，X6也可以是Gly，以及X7也可以是Arg ； 當(dāng)X2是Val、Leu或Ile或Gly時(shí)，X1也可以是Leu，X3也可以是Phe，X4也可以是Leu，X5也可以是Gly，X6也可以是Gly，以及X7也可以是Arg ； 當(dāng)X3是Leu、Val、lie、Ala、Tyr或Gly時(shí)，X1也可以是Leu，X2也可以是Ala，X4也可以是Leu，X5也可以是Gly，X6也可以是Gly，以及X7也可以是Arg ； 當(dāng)X4是正亮氨酸、Ile、Val、Met、Ala、Phe或Gly時(shí)，X1也可以是LeuiX2也可以是Ala，X3也可以是Phe，X5也可以是Gly，X6也可以是Gly，以及X7也可以是Arg ； 當(dāng)X5是Pro、Ala、Arg或Ser時(shí)，X1也可以是Leu, X2也可以是Ala，X3也可以是Phe, X4也可以是Leu，X6也可以是Gly，以及X7也可以是Arg。
15.—種基本上純的肽，其具有氨基酸序列:
L H X1X2X3X4其中 X1 是正亮氨酸、He、Val、Met、Ala、Phe 或 Gly ；X2 是 Val、Leu、He 或 Gly ；X3 是Leu、Val、lie、Ala、Tyr 或 Gly ；以及 X4 是正亮氨酸、lie、Val、Met、Ala、Phe 或 Gly ;倘若當(dāng)X1是正亮氨酸、Ile、Val、Met、Ala、Phe或Gly時(shí)，X2也可以是Ala，X3也可以是Phe，X4也可以是Leu, X5也可以是Gly, X6也可以是Gly,以及X7也可以是Arg ； 當(dāng)X2是Val、Leu或Ile或Gly時(shí),X1也可以是Leu, X3也可以是Phe, X4也可以是Leu,X5也可以是Gly, X6也可以是Gly,以及X7也可以是Arg ； 當(dāng)X3是Leu、Val、lie、Ala、Tyr或Gly時(shí)，X1也可以是Leu, X2也可以是Ala, X4也可以是Leu, X5也可以是Gly, X6也可以是Gly,以及X7也可以是Arg ； 當(dāng)X4是正亮氨酸、lie、Val、Met、Ala、Phe或Gly時(shí),X1也可以是Leu, X2也可以是Ala,X3也可以是Phe, X5也可以是Gly, X6也可以是Gly,以及X7也可以是Arg。
16.一種基本上純的肽，其具有氨基酸序列:
L H X1X2X3 其中 X1 是正亮氨酸、lie、Val、Met、Ala、Phe 或 Gly ；X2 是 Val、Leu、Ile 或 Gly ；以及 X3是 Leu、Val、lie、Ala、Tyr 或 Gly ;倘若 當(dāng)X1是正亮氨酸、He、Val、Met、Ala、Phe或Gly時(shí)，X2也可以是Ala，以及X3也可以是 Phe ； 當(dāng)X2是Val、Leu或Ile或Gly時(shí)，X1也可以是Leu,以及X3也可以是Phe ；以及 當(dāng)X3是Leu、Val、lie、Ala、Tyr或Gly時(shí)，X1也可以是Leu,以及X2也可以是Ala。
17.—種基本上純的肽，其具有氨基酸序列:
L H X1X2
其中 X1 是正亮氨酸、lie、Val、Met、Ala、Phe 或 Gly ；以及 X2 是 Val、Leu、Ile 或 Gly ；倘若 當(dāng)X1是正亮氨酸、lie、Val、Met、Ala、Phe或Gly時(shí)，X2也可以是Ala ；以及； 當(dāng)X2是Val、Leu或Ile或Gly時(shí)，X1也可以是Leu。
18.一種基本上純的妝，其具有氣基酸序列:
L H X1 其中 X1 是正亮氨酸、lie、Val、Met、Ala、Phe 或 Gly。
19.一種治療患有或處于發(fā)展為心血管疾病的受試者的方法，所述方法包括提高所述受試者中B型利尿鈉信號(hào)肽片段的活性。
20.根據(jù)權(quán)利要求19所述的方法，其中所述方法包括向受試者施用包含治療有效量的B型利尿鈉信號(hào)肽片段或B型利尿鈉信號(hào)肽片段類(lèi)似物的組合物。
21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中所述B型利尿鈉信號(hào)肽片段包含選自SEQ.1D.NO:1至9的序列。
22.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中所述B型利尿鈉信號(hào)肽片段類(lèi)似物包含根據(jù)權(quán)利要求11-17或18中任一項(xiàng)的式的序列。
23.根據(jù)權(quán)利要求19所述的方法，其中心血管疾病是選自ST段抬高心肌梗塞、非ST段抬高心肌梗塞和不穩(wěn)定型心絞痛的急性冠狀動(dòng)脈綜合征。
24.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中組合物包含約0.01至約100毫克所述B型利尿鈉信號(hào)肽片段或B型利尿鈉信號(hào)肽片段類(lèi)似物。
25.一種治療患有或處于發(fā)展為急性冠狀動(dòng)脈綜合征的受試者的方法，所述方法包括向受試者施用包含B型利尿鈉信號(hào)肽片段或B型利尿鈉信號(hào)肽片段類(lèi)似物的組合物。
26.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中所述B型利尿鈉信號(hào)肽片段包含選自SEQ.ID.NO:1至9的序列。
27.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中所述B型利尿鈉信號(hào)肽片段類(lèi)似物包含根據(jù)權(quán)利要求11-17或18中任一項(xiàng)的式的序列。
28.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中組合物包含約0.01至約100毫克所述B型利尿鈉信號(hào)肽片段或B型利尿鈉信號(hào)肽片段類(lèi)似物。
29.根據(jù)權(quán)利要求19或權(quán)利要求25所述的方法，其中所述受試者是哺乳動(dòng)物。
30.根據(jù)權(quán)利要求19或權(quán)利要求25所述的方法，其中所述哺乳動(dòng)物是人。
31.一種包含包裝材料的制品，其中包裝材料包含根據(jù)權(quán)利要求1-9或10任一項(xiàng)所述的藥物組合物，連同用于在受試者中或受試者上預(yù)防和/或治療心血管疾病的使用說(shuō)明書(shū)。
32.—種制備用于預(yù)防或治療心血管疾病或急性冠狀動(dòng)脈綜合征的藥物的方法，所述方法包括將治療有效量的B型利尿鈉信號(hào)肽片段或B型利尿鈉信號(hào)肽片段類(lèi)似物以及藥學(xué)上可接受的載體合并到一起。
33.根據(jù)權(quán)利要求32所述的方法，其中所述B型利尿鈉信號(hào)肽片段包含選自SEQ.1D.NO:1至9的序列。
34.根據(jù)權(quán) 利要求32所述的方法，其中所述B型利尿鈉信號(hào)肽片段類(lèi)似物包含根據(jù)權(quán)利要求11-17或18中任一項(xiàng)的式的序列。
35.根據(jù)權(quán)利要求32所述的方法，其中所述藥物配制成用于腸胃外施用。
36.根據(jù)權(quán)利要求32所述的方法，其中所述藥物配制成用于通過(guò)輸注施用。
37.根據(jù)權(quán)利要求32所述的方法，其中所述藥物配制成用于緩慢、延遲或控釋施用。
【文檔編號(hào)】A61K9/20GK103889438SQ201280050843
【公開(kāi)日】2014年6月25日 申請(qǐng)日期:2012年8月17日 優(yōu)先權(quán)日:2011年8月18日
【發(fā)明者】C·J·彭伯頓, A·M·理查德, C·J·查爾斯, M·西里瓦德納 申請(qǐng)人:奧塔哥創(chuàng)新有限公司