藻類的培養(yǎng)方法與含有藻酸的組合物的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明的目的是提供工業(yè)上高效地培養(yǎng)具有藻酸產(chǎn)生能力的藻類的方法，以及工業(yè)上有利的制備含有藻酸的組合物的方法。根據(jù)本發(fā)明的藻類的培養(yǎng)方法，其包括將屬于擬小球藻屬(Parachlorella)且具有藻酸產(chǎn)生能力的藻類進(jìn)行異養(yǎng)(Heterotrophic)培養(yǎng)的步驟。另外，根據(jù)本發(fā)明的含有藻酸的組合物的制備方法，其包括從根據(jù)所述培養(yǎng)方法所得到的藻類的培養(yǎng)物中取得含有藻酸的組合物的步驟。
【專利說(shuō)明】藻類的培養(yǎng)方法與含有藻酸的組合物的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及屬于擬小球藻屬(Parachlorella),并且具有藻酸產(chǎn)生能力的藻類的培養(yǎng)方法。另外，本發(fā)明涉及工業(yè)上有利的制備含有藻酸的組合物的方法。進(jìn)一步地本發(fā)明涉及:從根據(jù)該制備方法所得到的含有藻酸的組合物中得到的藻體干燥物、包含該含有藻酸的組合物的污泥減少劑、有害物質(zhì)吸附劑、飼料、食品和醫(yī)藥品。
【背景技術(shù)】
[0002]藻酸是褐藻類或一部分紅藻的細(xì)胞間及細(xì)胞壁中所含有的粘性多糖類，是2種糖醛酸(Uronic acid)，即D-甘露糖醛酸與L-古洛糖醛酸以各種比例進(jìn)行結(jié)合的多糖醛酸苷(Polyuronides)多糖。藻酸或其鹽，作為增稠穩(wěn)定劑、膠凝劑，不僅廣泛利用于食品添加物、醫(yī)藥品、化妝品、牙科用材料等，并且由于其為食物纖維中的一種，因而作為功能性食品也受到注目。進(jìn)一步地，已報(bào)道藻酸中特別是被稱作藻酸低聚物的低分子量藻酸具有各種生理活性(非專利文獻(xiàn)I)。
[0003]現(xiàn)有技術(shù)中，藻酸或其鹽是通過(guò)從海帶、裙帶菜等褐藻類中進(jìn)行提取、精制來(lái)進(jìn)行工業(yè)制備的。但是，在以上述等褐藻類為原料的制法中，存在原料的穩(wěn)定供給的問題。另外，作為藻酸低聚物的制法，已知的有以從褐藻類中得到的高分子量的藻酸為原料，使具有藻酸分解能力的酶或者細(xì)菌進(jìn)行作用從而使其低分子量化的方法(專利文獻(xiàn)1、2);在加壓下對(duì)該高分子量的藻酸進(jìn)行熱處理后使其低分子量化的方法(專利文獻(xiàn)3、4)等。但是，前者的方法由于使用酶或者細(xì)菌，不僅需要花費(fèi)龐大的成本，而且需要在低濃度的水溶液中長(zhǎng)時(shí)間進(jìn)行反應(yīng)，因此不利于工業(yè)化。此外，后者的加壓熱處理法也需要昂貴的壓力容器，也存在設(shè)備上的問題。
[0004]最近，公開了具有藻酸、特別是具有較低分子量藻酸產(chǎn)生能力的新型擬小球藻屬(Parachlorella)的藻類，通過(guò)培養(yǎng)該藻類，從其培養(yǎng)液中取得藻酸的方法(專利文獻(xiàn)5)。進(jìn)一步地，也公開了使用含有該藻酸的藻類的藻體干燥物減少污泥方法(專利文獻(xiàn)6)。在上述專利文獻(xiàn)中，記載了該新型藻類的光要求性，實(shí)際上，所公開的該藻類的培養(yǎng)方法中，每一個(gè)都是利用該藻類的光合性能的自養(yǎng)培養(yǎng)。
[0005]藻類通常都可以利用其光合性能進(jìn)行自養(yǎng)培養(yǎng)。自養(yǎng)培養(yǎng)可以利用日光等自然光，具有不需要對(duì)培養(yǎng)基添加碳源、能量源等優(yōu)點(diǎn)。另一方面，根據(jù)天氣、季節(jié)等，光的照射量會(huì)產(chǎn)生變化，另外在設(shè)備方面也存在培養(yǎng)液容易受到微生物等污染的問題。為了解決上述的問題，雖然也有在完全封閉體系中用電照明等人工光進(jìn)行照射培養(yǎng)的方法，但這不僅需要昂貴的設(shè)備，還需要大量的電能。
[0006]現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)
[0007]專利文獻(xiàn)
[0008]專利文獻(xiàn)1:日本特開平2-303468號(hào)公報(bào)
[0009]專利文獻(xiàn)2:日本特開平5-15387號(hào)公報(bào)
[0010]專利文獻(xiàn)3:日本特開平6-7093號(hào)公報(bào)[0011]專利文獻(xiàn)4:日本特開2006-320320號(hào)公報(bào)
[0012]專利文獻(xiàn)5:W02010_024367號(hào)公報(bào)
[0013]專利文獻(xiàn)6:日本專利第4573187號(hào)公報(bào)
[0014]非專利文獻(xiàn)
[0015]非專利文獻(xiàn)1:日本食品化學(xué)學(xué)會(huì)志17卷27-35頁(yè)(2010年)

【發(fā)明內(nèi)容】

[0016]發(fā)明要解決的問題
[0017]鑒于上述狀況，本發(fā)明的要解決的問題是提供工業(yè)上且有效地培養(yǎng)具有藻酸產(chǎn)生能力的藻類的方法。進(jìn)一步地，要解決的問題是提供含有藻酸的組合物的工業(yè)上有利的制法。
[0018]解決問題的手段
[0019]本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，現(xiàn)有技術(shù)中對(duì)具有藻酸產(chǎn)生能力的屬于擬小球藻屬(Parachlorella)的藻類只知道需要光的自養(yǎng)性培養(yǎng)方法。意外地，異養(yǎng)地培養(yǎng)可以以高效率進(jìn)行培養(yǎng)，進(jìn)一步地，進(jìn)行異養(yǎng)性培養(yǎng)的該藻類的培養(yǎng)物還比自養(yǎng)培養(yǎng)時(shí)蓄積更大量的藻酸，進(jìn)而完成了本發(fā)明。
[0020]本發(fā)明如以下所示。
[0021][I]藻類的培養(yǎng)方法，其特征為包括將屬于擬小球藻屬(Parachlorella)且具有藻酸產(chǎn)生能力的藻類進(jìn)行異 養(yǎng)培養(yǎng)的步驟。
[0022][2]根據(jù)上述[I]所述的方法，其中，屬于擬小球藻屬(Parachlorella)的藻類為Parachlorella sp.Binos FERM BP-10969。
[0023][3]根據(jù)上述[I]或[2]所述的方法，其中，在平均照度為小于700LUX的暗黑條件
下培養(yǎng)藻類。
[0024][4]根據(jù)上述[I]~[3]中任一項(xiàng)所述的方法，其中，用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)藻類，并且，相對(duì)于培養(yǎng)開始時(shí)的該液體培養(yǎng)基量1L，該液體培養(yǎng)基中的有機(jī)化合物的總使用量換算為碳原子的重量為2.5g以上。
[0025][5]含有藻酸的組合物的制備方法，其包括從根據(jù)上述[I]~[4]中任一項(xiàng)所述的方法得到的藻類的培養(yǎng)物中取得含有藻酸的組合物的步驟。
[0026][6]藻體干燥物，其為將根據(jù)上述[5]所述的制備方法所得到的含有藻酸的組合物進(jìn)行干燥后的物質(zhì)而得，且每Ikg中的藻酸含量為40g以上。
[0027][7]污泥減少劑，其中含有根據(jù)上述[5]所述的制備方法得到的含有藻酸的組合物。
[0028][8]有害物質(zhì)吸附劑，其中含有根據(jù)上述[5]所述的制備方法得到的含有藻酸的組合物。
[0029][9]飼料，其含有根據(jù)上述[5]所述的制備方法得到的含有藻酸的組合物。
[0030][10]食品，其含有根據(jù)上述[5]所述的制備方法得到的含有藻酸的組合物。
[0031][11]藥品，其含有根據(jù)上述[5]所述的制備方法所得到的含有藻酸的組合物。
[0032]發(fā)明效果
[0033]根據(jù)本發(fā)明，在培 養(yǎng)中不供給光，而使用通用的微生物培養(yǎng)槽，使具有藻酸產(chǎn)生能力的藻類高效地增殖成為可能，進(jìn)一步地，可以提供工業(yè)化的且高效地制備含有藻酸的組合物的方法。用本發(fā)明的方法得到的含有藻酸的組合物，含有大量藻酸，且作為污泥減少劑、有害物質(zhì)吸附劑、飼料、食品或者醫(yī)藥品的原料是有用的。
【具體實(shí)施方式】
[0034]本發(fā)明的藻類的培養(yǎng)方法，其包括將具有藻酸產(chǎn)生能力的藻類進(jìn)行異養(yǎng)培養(yǎng)的步驟。
[0035]本發(fā)明中所使用的藻類為具有藻酸產(chǎn)生能力，且屬于擬小球藻屬(Parachlorella)的藻類。
[0036]擬小球藻屬(Parachlorella)藻類曾經(jīng)被分類為共球藻綱(Trebouxiophyceae)的小球藻屬，但根據(jù)利用了 18S rDNA和16S rDNA的分子系統(tǒng)發(fā)生學(xué)的解析，其形成了屬于共球藻綱且和其它小球藻屬藻類相區(qū)別的組，因此其作為與小球藻屬藻類不同的獨(dú)立屬而被認(rèn)可。
[0037]作為屬于擬小球藻屬(Parachlorella)的藻類，列舉例如Parachlorellasp.binos、凱氏擬小球藻屬(Parachlorella kessleri)、拜氏擬小球藻屬(Parachlorellabeijerinckii)等藻類，但不限定于此，即使對(duì)于生物學(xué)上種類未經(jīng)鑒別的藻類，只要其屬于擬小球藻屬(Parachlorella)或其親緣屬且具有藻酸產(chǎn)生能力，都可以在本發(fā)明中使用。
[0038]在此，屬于擬小球藻屬(Parachlorella)的親緣的藻類，是指在根據(jù)利用了 18SrDNA和16S rDNA的分子系統(tǒng)發(fā)生學(xué)的解析所得到的分子系統(tǒng)樹中，屬于擬小球藻屬(Parachlorella)的相鄰屬的藻類。即，只要其為具有藻酸產(chǎn)生能力且被分類為擬新月藻屬(Closteriopsis)、雙月藻屬(Dicloster)、海水小球藻屬(Marinichlorella)的藻類，都可以在本發(fā)明中使用。`
[0039]另外，在本發(fā)明使用的藻類可以是能夠進(jìn)行異養(yǎng)培養(yǎng)藻類，但這一點(diǎn)目前為止不為人所知。即，具有光合性能，即使目前為止其為自養(yǎng)培養(yǎng)的藻類，但只要可以進(jìn)行異養(yǎng)培養(yǎng)且具有藻酸產(chǎn)生能力，都可以在本發(fā)明中使用。
[0040]通常，擬小球藻屬(Parachlorella)藻類可以通過(guò)以下方式獲得:從野外采取的淡水樣品中，使用通常的培養(yǎng)基通過(guò)傳代培養(yǎng)分離藻類的群落，最終通過(guò)分子系統(tǒng)發(fā)生學(xué)進(jìn)行解析從而確定種屬。
[0041]本發(fā)明中所使用的藻類具有產(chǎn)生藻酸的能力。藻酸可以為從擬小球藻屬(Parachlorella)藻類向細(xì)胞外分泌的藻酸，也可以為細(xì)胞內(nèi)所蓄積的藻酸。在從擬小球藻屬(Parachlorella)藻類的培養(yǎng)液或該培養(yǎng)液的均漿中檢出藻酸的情況下，即判斷該擬小球藻屬(Parachlorella)藻類為具有藻酸產(chǎn)生能力的藻類。
[0042]藻酸為D-甘露糖醛酸與L-古洛糖醛酸任意進(jìn)行聚合的物質(zhì)。通常，其聚合度，即構(gòu)成藻酸的單糖單元的數(shù)量為80以上，1100以下左右，分子量為15000以上，200000以下左右。但是，在本發(fā)明中，更低分子量的所謂藻酸低聚物也視為含有藻酸的物質(zhì)。藻酸低聚物的聚合度為3以上，10以下左右，分子量為500以上，2000以下左右。
[0043]在本發(fā)明中，所謂藻酸，不僅包括游離的藻酸也包括其鹽(鈉鹽、鈣鹽、鎂鹽、鉀鹽、銨鹽等)。根據(jù)本發(fā)明的培養(yǎng)方法生產(chǎn)的藻酸可以利用例如間萘二酚顯色反應(yīng)法(食品衛(wèi)生學(xué)雜志第39卷5號(hào)297頁(yè)(1998年))進(jìn)行定量。另外，在本發(fā)明中，作為藻酸的定量值，以換算為藻酸鈉量的量來(lái)表示。
[0044]作為本發(fā)明中所使用的藻類，優(yōu)選具體例可以列舉Parachlorella sp.binosFERM BP-10969株。FERM BP-10969株保藏在下述保藏機(jī)構(gòu)。
[0045](i)保藏機(jī)構(gòu)的名稱和地址
[0046]名稱:獨(dú)立行政法人產(chǎn)業(yè)技術(shù)綜合研究所專利生物保藏中心
[0047]地址:日本國(guó)茨城縣筑波市I 丁目I番地I中央第6
[0048](ii)保藏日:2008年2月28日
[0049](iii)保藏號(hào):FERM P-21513
[0050](iv)國(guó)際保藏號(hào):FERM BP-10969
[0051](V)從國(guó)內(nèi)保藏到國(guó)際保藏的移交日:2008年5月23日
[0052]作為本發(fā)明中的具有藻酸產(chǎn)生能力且屬于擬小球藻屬(Parachlorella)的藻類，除了上述Parachlorella sp.binos FERM BP-10969株以外,還可以適當(dāng)?shù)乩闷渥儺愔昊螂s交株。
[0053]本發(fā)明中可以使用的FERM BP-10969株的變異株，是指表現(xiàn)出一些變異的FERMBP-10969株，但保持藻酸產(chǎn)生能力的株。另外，本發(fā)明中可以使用的FERM BP-10969株的雜交株，是指與FERM BP-1`0969株在分類上是同種，且為親緣關(guān)系比較遠(yuǎn)的株與FERMBP-10969株進(jìn)行交配而得到的，并保持藻酸產(chǎn)生能力的株。
[0054]需要說(shuō)明的是，與通常的小球藻屬藻類相比，F(xiàn)ERM BP-10969株含有每干燥重量2倍以上的葉綠素，光合能力非常高，因此一直以來(lái)，當(dāng)然是進(jìn)行自養(yǎng)培養(yǎng)。但是本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，通過(guò)對(duì)FERM BP-10969株特意地進(jìn)行異養(yǎng)培養(yǎng)，可以極有效地產(chǎn)生藻酸。
[0055]在本發(fā)明中，所謂進(jìn)行異養(yǎng)培養(yǎng)，是指在黑暗條件下，使用含有作為能量源和/或碳源有機(jī)化合物的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。但是，在培養(yǎng)基中含有作為能量源和/或碳源利用充分量的有機(jī)化合物，不需要光和作用的條件下，則可以在明亮條件下進(jìn)行培養(yǎng)。
[0056]本發(fā)明中的所謂黑暗條件下，是指不對(duì)培養(yǎng)液照射對(duì)于藻類細(xì)胞的增殖所必須量的光的條件。具體而言，培養(yǎng)液中的平均照度為低于700LuX，優(yōu)選低于300LuX，更優(yōu)選為低于IOOLux,進(jìn)一步優(yōu)選為低于IOLux,再進(jìn)一步優(yōu)選為低于ILux以下的條件。另外，也可以通過(guò)利用通常所使用的避光手段、或使用異養(yǎng)培養(yǎng)中通常所使用的培養(yǎng)槽，在實(shí)質(zhì)上滿足上述平均照度的條件下實(shí)施培養(yǎng)。需要說(shuō)明的是，由于培養(yǎng)基以及增殖的藻類細(xì)胞使光衰減，因此培養(yǎng)液中的照度根據(jù)光源的距離、藻類細(xì)胞的密度等而變化，培養(yǎng)液中的平均照度可以通過(guò)例如對(duì)放置在與培養(yǎng)中同樣環(huán)境中的培養(yǎng)液中的多個(gè)位置的照度進(jìn)行測(cè)定，并以其平均值來(lái)計(jì)算。照度的測(cè)定，優(yōu)選通過(guò)至少包括培養(yǎng)基的表面與最深處的2個(gè)以上位置，且12個(gè)以下位置來(lái)進(jìn)行測(cè)定。
[0057]在本發(fā)明中，在異養(yǎng)培養(yǎng)具有藻酸產(chǎn)生能力的藻類時(shí)，作為能量源和/或碳源所使用的有機(jī)化合物只要為使該藻類可以進(jìn)行同化作用的有機(jī)化合物即可，沒有特別限定，列舉例如葡萄糖、半乳糖、鹿糖、木糖、麥芽糖、纖維二糖、海藻糖、乳糖、甘露醇、各種低聚糖、淀粉等碳水化合物類；甲醇、乙醇、甘油、乙二醇、丙二醇等醇類；檸檬酸、琥珀酸、蘋果酸、富馬酸、丁酸、丙酸、乙酸等有機(jī)酸類；谷氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、甘氨酸、脯氨酸、賴氨酸、丙氨酸、亮氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、組氨酸、蛋氨酸、絲氨酸、色氨酸、蘇氨酸、蛋氨酸等氨基酸類；其他植物油脂或脂肪酸等油脂類等。上述等有機(jī)化合物，可以單獨(dú)使用也可以任意組合使用。另外，上述等的有機(jī)化合物不需要一定使用經(jīng)精制后的物質(zhì)，糖蜜、乳清、淀粉水解物等未精制原料也可以作為能量源和/或碳源來(lái)使用。
[0058]在本發(fā)明中，對(duì)具有藻酸產(chǎn)生能力的藻類進(jìn)行異養(yǎng)培養(yǎng)時(shí)，作為能量源和/或碳源，向培養(yǎng)基添加的有機(jī)化合物的總量(在培養(yǎng)中對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行補(bǔ)加或流加時(shí)為其合計(jì)量)，只要其為可以進(jìn)行異養(yǎng)培養(yǎng)的量即可，沒有特別限制，但換算為該有機(jī)化合物中所含有的碳原子的重量，相對(duì)于培養(yǎng)開始時(shí)刻的IL的培養(yǎng)基液量，有機(jī)化合物的總量例如為2.5g以上，優(yōu)選3g以上，更優(yōu)選5g以上，進(jìn)一步優(yōu)選Sg以上，進(jìn)一步更優(yōu)選IOg以上，特別優(yōu)選50g以上。
[0059]在本發(fā)明中，對(duì)具有藻酸產(chǎn)生能力的藻類進(jìn)行異養(yǎng)培養(yǎng)時(shí)所使用的培養(yǎng)基，只要其可以使具有藻酸產(chǎn)生能力的藻類進(jìn)行異養(yǎng)增殖，則沒有特別限制。但除了作為能量源和/或碳源所使用的上述有機(jī)化合物以外，也可以為例如由氮源、磷源、礦物質(zhì)類等構(gòu)成的物質(zhì)，進(jìn)一步可包含維生素類或消泡劑、pH調(diào)節(jié)劑等。作為上述氮源，例如可列舉氨和其鹽、尿素、硝酸和其鹽、氨基酸類等。作為上述磷源，例如可列舉磷酸和其鹽、多聚磷酸等。作為上述礦物質(zhì)類，可列舉例如錳、鋅、銅、鈉、鉀、鐵、鈣和鑰等金屬的鹽，還有硼酸等。作為上述維生素類，例如可列舉維生素々、81、82、86、812、(:、0 3、1(、煙酸、泛酸、葉酸、生物素以及上述物質(zhì)的前體或衍生物。氮源、磷源、礦物質(zhì)類、維生素類以及其他的培養(yǎng)基成分不需要一定使用經(jīng)精制后的物質(zhì)，也可以利用例如酵母提取物、蛋白胨等天然成分。另外，上述成分可以任意組合使用。
[0060]在本發(fā)明中，具有藻酸產(chǎn)生能力的藻類的異養(yǎng)培養(yǎng)，可以通過(guò)在加入包含上述成為能量源和/或碳源的有機(jī)化合物、氮源、礦物質(zhì)類、維生素類、以及其它成分的培養(yǎng)基的容器中，對(duì)具有藻酸產(chǎn)生能力的藻類進(jìn)行接種，優(yōu)選地一邊通氣和/或攪拌一邊培養(yǎng)來(lái)實(shí)施。培養(yǎng)溫度優(yōu)選10°C~50°C的范圍，更優(yōu)選20°C~40°C的范圍，進(jìn)一步優(yōu)選25°C~30°C的范圍。在培養(yǎng)溫度為小于10°C或者超過(guò)50°C的條件下，具有藻酸產(chǎn)生能力的藻類的增殖速度顯著降低，因此，作為工業(yè)化培養(yǎng)不適合。培養(yǎng)中的PH優(yōu)選3.0~10.0的范圍，更優(yōu)選4.0~9.0的范圍，進(jìn)一步優(yōu)選5.0~8.0的范圍。在培養(yǎng)中的pH為小于3.0，或pH超過(guò)10.0的條件下，具有藻酸產(chǎn)生能力的藻類的增殖速度顯著降低，因此，作為工業(yè)化培養(yǎng)不適合。
[0061 ] 在本發(fā)明中，對(duì)具有藻酸產(chǎn)生能力的藻類進(jìn)行異養(yǎng)培養(yǎng)時(shí)所用的上述培養(yǎng)基的成分，可以在培養(yǎng)開始前一次性添加，也可以在培養(yǎng)中分批和/或連續(xù)地進(jìn)行添加。然而，為了提高培養(yǎng)液中的藻類細(xì)胞密度，需要大量的作為能量源和/或碳源的有機(jī)化合物，優(yōu)選分批和/或連續(xù)地進(jìn)行添加。此時(shí)，培養(yǎng)液中的作為能量源和/或碳源而使用的有機(jī)化合物的濃度，換算為該有機(jī)化合物中所包含的碳原子的重量，優(yōu)選維持在32g/L以下，更優(yōu)選為16g/L以下，進(jìn)一步優(yōu)選為8g/L以下，更進(jìn)一步優(yōu)選為4g/L以下。
[0062]按照本發(fā)明的方法所得到的具有藻酸產(chǎn)生能力的藻類的培養(yǎng)液，根據(jù)需要，也可以繼續(xù)用不含有作為能量源和/或碳源的有機(jī)化合物的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。此時(shí)，在黑暗條件或在明亮條件任一條件下都可以進(jìn)行。經(jīng)過(guò)該2階段培養(yǎng)的培養(yǎng)物，特別地，可以適宜用作污泥減少劑或者有害物質(zhì)吸附劑的原料。[0063]另外，為了確保本發(fā)明中所用的藻類的量，可以對(duì)該藻類進(jìn)行前培養(yǎng)。相關(guān)的前培養(yǎng)在黑暗條件或在明亮條件任一條件下都可以進(jìn)行。
[0064]根據(jù)本發(fā)明的培養(yǎng)方法，與現(xiàn)有的自養(yǎng)培養(yǎng)法相比，可以大幅提高每份培養(yǎng)液的藻體產(chǎn)量，也可以提高藻酸的產(chǎn)量。按照本發(fā)明的方法所得到的具有藻酸產(chǎn)生能力的藻類培養(yǎng)液，在培養(yǎng)結(jié)束時(shí)，每IL培養(yǎng)液能夠含有的藻體干燥物優(yōu)選2g以上,更優(yōu)選3g以上，進(jìn)一步優(yōu)選5g以上,進(jìn)一步更優(yōu)選IOg以上,特別優(yōu)選50g以上。[0065]需要說(shuō)明的是，培養(yǎng)液中的藻體干燥物濃度，例如可以用以下的方法進(jìn)行測(cè)定。采集一定量的培養(yǎng)液，進(jìn)行離心分離且去除培養(yǎng)上清液。用與培養(yǎng)液等量的水將得到的藻體再混懸，再次進(jìn)行離心分離后去除洗滌液。經(jīng)水洗的藻體干燥至恒重，計(jì)算重量。干燥藻體的恒重重量除以采集了的培養(yǎng)液量，從而計(jì)算出藻體干燥物濃度。
[0066]此外，令人驚訝的是，根據(jù)本發(fā)明的培養(yǎng)方法，也可以提高每份藻體的藻酸生產(chǎn)性能。根據(jù)本發(fā)明的培養(yǎng)方法，每Ikg藻體干燥物的生產(chǎn)性能換算為藻酸鈉量通常為40g以上，優(yōu)選50g以上，更優(yōu)選100g以上，特別優(yōu)選150g以上。
[0067]根據(jù)本發(fā)明的培養(yǎng)方法，上述每份培養(yǎng)液的藻體產(chǎn)量的提高與每份藻體的藻酸生產(chǎn)性能的提高是相輔相成的，與現(xiàn)有的自養(yǎng)培養(yǎng)法相比，顯著地提高了每份培養(yǎng)液的藻酸生產(chǎn)性能。在本發(fā)明的培養(yǎng)方法中，在培養(yǎng)結(jié)束時(shí)，每IL培養(yǎng)液可以蓄積的藻酸，換算為藻酸鈉量?jī)?yōu)選為IOmg以上，更優(yōu)選IOOmg以上,進(jìn)一步優(yōu)選500mg以上,進(jìn)一步更優(yōu)選1000mg以上，特別優(yōu)選5000mg以上。
[0068]另外，本發(fā)明還包括含有藻酸的組合物的制備方法，其特征在于，從通過(guò)上述本發(fā)明的培養(yǎng)方法得到的培養(yǎng)物制得含有藻酸的組合物的步驟。換言之，對(duì)屬于擬小球藻屬(Parachlorella)且具有藻酸產(chǎn)生能力的藻類進(jìn)行異養(yǎng)培養(yǎng)，利用所得到的培養(yǎng)物來(lái)制備含有藻酸的組合物的方法都屬于本發(fā)明的范疇。
[0069]本發(fā)明中的含有藻酸的組合物，只要其為含有藻酸和/或其鹽的組合物即可，沒有特別限制，可以是除了藻酸以外還含有來(lái)自藻類的成分、以及藻體或其破碎物等的組合物，也可以是去除藻體等后含有高純度藻酸本身的組合物。即，作為用本發(fā)明的制備方法得到的含有藻酸的組合物，以下任意物質(zhì)都符合:例如培養(yǎng)具有藻酸產(chǎn)生能力的藻類而得到的培養(yǎng)液其本身、從該培養(yǎng)液中得到的藻體、提高了培養(yǎng)液中的藻體濃度的濃縮培養(yǎng)液、和/或從該培養(yǎng)液中去除藻體后的培養(yǎng)上清等。另外，根據(jù)需要通過(guò)對(duì)該培養(yǎng)液、藻體、濃縮培養(yǎng)液和/或培養(yǎng)上清進(jìn)行干燥、純化等處理，提高了藻酸和/或其鹽的含有量，該處理物也包含在通過(guò)本發(fā)明的制備方法所得到的含有藻酸的組合物中。需要說(shuō)明的是，作為后述的污泥減少劑或有害物質(zhì)吸附劑利用含有藻酸的組合物時(shí)，作為含有藻酸的組合物，優(yōu)選除了藻酸以外還含有藻體或其破碎物等的組合物。
[0070]在本發(fā)明中，從對(duì)具有藻酸產(chǎn)生能力的藻類進(jìn)行異養(yǎng)培養(yǎng)所得到的培養(yǎng)物中取得含有藻酸的組合物的方法并沒有特別限制，例如通過(guò)用上述本發(fā)明的培養(yǎng)方法進(jìn)行培養(yǎng)，從而得到含有藻酸的培養(yǎng)液，通過(guò)對(duì)該培養(yǎng)液實(shí)施離心分離、過(guò)濾等操作可以分別分離出含有藻酸的培養(yǎng)上清液、濃縮培養(yǎng)液、和/或藻體。根據(jù)需要，也可以對(duì)上述等的培養(yǎng)液、培養(yǎng)上清液、濃縮培養(yǎng)液、和/或藻體通過(guò)冷凍干燥、噴霧干燥、轉(zhuǎn)鼓式干燥、減壓干燥等手法進(jìn)行干燥。進(jìn)一步地，通過(guò)單獨(dú)或者組合使用公知的手法，可以從培養(yǎng)液、培養(yǎng)上清液、濃縮培養(yǎng)液、藻體、和/或上述等的干燥物中，制備更高濃度的含有藻酸的組合物。例如可以使用下列方法:向培養(yǎng)上清液中添加硫酸等酸，通過(guò)離心分離、過(guò)濾等手法分取不溶解的藻酸的方法；向培養(yǎng)上清液添加氯化鈣等金屬鹽，通過(guò)離心分離、過(guò)濾等手法分取凝膠化的藻酸的方法；向培養(yǎng)上清液中添加乙醇、丙酮、異丙醇等水溶性有機(jī)溶劑，通過(guò)離心分離、過(guò)濾等手法分取不溶解的藻酸的方法等。另外，例如通過(guò)用碳酸鈉水溶液等堿性水溶液對(duì)藻體進(jìn)行洗滌和/或提取，并用離心分離、過(guò)濾等手法去除不溶物，可以從藻體中分取到藻酸鈉等藻酸鹽。進(jìn)一步地，例如，對(duì)經(jīng)分取的藻酸鹽的水溶液進(jìn)行與前述培養(yǎng)上清液相同的處理，可以制備更高濃度的含有藻酸的組合物。
[0071]進(jìn)一步地，本發(fā)明也涉及含有通過(guò)上述本發(fā)明的制備方法所得到的含有藻酸的組合物的污泥減少劑或有害物質(zhì)吸附劑。
[0072]在本發(fā)明中，所謂污泥減少劑是指組合物，其在通過(guò)活性污泥法對(duì)有機(jī)排水的處理中，通過(guò)向活性污泥添加的操作，具有降低最終產(chǎn)生的剩余污泥量效果。
[0073]根據(jù)本發(fā)明的污泥減少劑的使用條件可以適宜進(jìn)行調(diào)整，例如，相對(duì)于I噸污泥，本發(fā)明的污泥減少劑換算為干燥狀態(tài)可以以20g以上、200g以下左右進(jìn)行添加。在添加后，為了確保充分的溶液含氧量可以對(duì)混合物進(jìn)行攪拌或鼓泡。處理溫度可以為常溫。處理時(shí)間根據(jù)應(yīng)處理的污泥的量等，可以設(shè)為10小時(shí)以上、10日以下。
[0074]所謂有害物質(zhì)吸附劑，是指通過(guò)使其與污染物接觸從而吸附污染物中的有害物質(zhì)，之后，通過(guò)從污染物中進(jìn)行分離，去除污染物中一部分或者全部的有害物質(zhì)而使用的組合物。作為有害物質(zhì)，可以列舉例如銫-137、銫-134、鍶-89、鍶-90、鍶-91、碘-131、碘-133等放射性元素；鉛、銅、鎘、砷等重金屬類；含有上述的化合物等，但并不限定于此。本發(fā)明的有害物質(zhì)吸附劑的使用條件，可以按照上述污泥減少劑的使用條件來(lái)調(diào)整。
`[0075]在本發(fā)明中，制備包含有含有藻酸的組合物的污泥減少劑或有害物質(zhì)吸附劑的方法并沒有特別限制，例如對(duì)通過(guò)本發(fā)明的培養(yǎng)方法得到的培養(yǎng)物，根據(jù)需要進(jìn)一步在不含有作為能量源和/或碳源的有機(jī)化合物的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，之后通過(guò)濃縮、干燥，得到按照本發(fā)明的制備方法的含有藻酸的組合物，可以將上述組合物直接利用或者適宜進(jìn)行加工后再利用。`
[0076]另外，本發(fā)明也涉及包含有按照上述本發(fā)明的制備方法得到的含有藻酸的組合物的飼料、食品或藥品。
[0077]在本發(fā)明中，所謂食品，是指人類以營(yíng)養(yǎng)素的攝取、喜好為目的而攝取的物質(zhì)，除了日常飲食的通常食品以外，還包括營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充食品，例如營(yíng)養(yǎng)輔助劑或特定保健用食品等，還包括食品添加物等。
[0078]本發(fā)明中的所謂飼料，是指除人類以外的生物以營(yíng)養(yǎng)元素的攝取為主要目的而攝取的物質(zhì)。例如指給予魚類、甲殼類、貝類等水產(chǎn)動(dòng)物；雞、鵪鶉、鴨等家禽類；牛、豬、羊等畜產(chǎn)動(dòng)物；狗、貓等玩賞動(dòng)物等的飼料、飼料添加物、或者營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充食品等，但并不限定于此。
[0079]本發(fā)明中的所謂醫(yī)藥品，是指用于預(yù)防或者治療人或其他動(dòng)物的疾病、癥狀的物
品O
[0080]按照本發(fā)明的制備方法而得到的含有藻酸的組合物，可以適宜加工成粉末劑、片劑、膠囊劑等，或通過(guò)與食品原料、飼料原料混合，用作上述等的飼料、食品、醫(yī)藥品。本發(fā)明的包含有含有藻酸的組合物的飼料、食品或醫(yī)藥品利用藻酸的物理性質(zhì)可以用于對(duì)食品、藥劑增加粘性或增稠感，或作為含有食物纖維的組合物進(jìn)行利用，此外，也可以以高血壓的預(yù)防/治療、血液中膽固醇的抑制作用或血糖值的上升抑制作用、消除便秘、動(dòng)脈硬化的預(yù)防/治療等為目的而進(jìn)行利用。進(jìn)一步地，對(duì)由于攝取藻酸而產(chǎn)生鍶的體外排泄作用進(jìn)行利用，從而可以作為鍶-89、鍶-90、鍶-91等放射性鍶的體內(nèi)殘留防止劑而進(jìn)行利用。
[0081]本申請(qǐng)基于2011年9月9日所申請(qǐng)的第2011-197212號(hào)日本專利申請(qǐng)，要求優(yōu)先權(quán)的利益。2011年9月9日所申請(qǐng)的第2011-197212號(hào)日本專利申請(qǐng)的說(shuō)明書的全部?jī)?nèi)容，為參考援用于本發(fā)明。
[0082]實(shí)施例
[0083]以下，通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行更詳細(xì)說(shuō)明。需要說(shuō)明的是，在本實(shí)施例中，培養(yǎng)液的藻體干燥物含量以及藻酸濃度，沒有特別說(shuō)明時(shí)，如下測(cè)定。
[0084]培養(yǎng)液的藻體干燥物含量
[0085]對(duì)一定量的培養(yǎng)液以3000XG進(jìn)行離心分離后去除上清液。接著，用5mL水將沉淀的藻體再混懸，同樣進(jìn)行離心分離后去除上清液。進(jìn)一步地，使水洗后的藻體在110°C干燥8小時(shí)使其恒重后進(jìn)行稱量，計(jì)算出每IL培養(yǎng)液中所含有的藻體干燥物的重量。
[0086]培養(yǎng)液中的藻酸濃素
[0087]用水將培養(yǎng)液進(jìn)行適度稀釋，取該稀釋培養(yǎng)液ImL加入銅-鹽酸試劑2mL及間萘二酚試劑lmL，在沸騰水浴中加熱65分鐘。該銅-鹽酸試劑為向40mL濃鹽酸中加入2.5%硫酸銅水溶液ImL及9mL水配制而成。另外，該間萘二酚試劑為將1，3- 二羥基萘IOOmg用25mL水進(jìn)行溶解配制而成。將上述培養(yǎng)液在冰水混合液中冷卻，加入4mL乙酸丁酯進(jìn)行攪拌后，進(jìn)行離心分離。乙酸`丁酯層用孔徑0.45 μ m的過(guò)濾器(Cosmonice Filter S ；NACALAITESQUE株式會(huì)社生產(chǎn))過(guò)濾，在566nm下進(jìn)行比色定量。使用以藻酸鈉300~400cP (和光純藥工業(yè)株式會(huì)社生產(chǎn))作為標(biāo)準(zhǔn)品制成的標(biāo)準(zhǔn)曲線，將樣品中的藻酸濃度換算為藻酸鈉來(lái)計(jì)算。
[0088]實(shí)施例1
[0089]將由葡萄糖20g/L、磷酸二氫鉀lg/L、七水合硫酸鎂lg/L、氯化鈣0.01g/L、尿素2g/L、七水合硫酸鐵5mg/L、ArnonJ s A5溶液lmL/L(Arnon，s A5溶液的組成:硼酸2.86g/L、四水合氯化錳1.81g/L、四水合硫酸銅0.08g/L、七水合硫酸鋅0.22g/L、四水合鑰酸銨0.17lg/L)所組成的培養(yǎng)基(pH6.5) IOOmL放入搖瓶中殺菌后，接種Parachlorellasp.binos FERM BP-10969，用鋁箔避光后，在30°C振蕩培養(yǎng)72小時(shí)。培養(yǎng)結(jié)束后，測(cè)定該培養(yǎng)液的藻體干燥物含量為9.0g/L。另外，測(cè)定該培養(yǎng)液中的藻酸濃度時(shí)，換算為藻酸鈉為
0.52g/L。即，每Ikg藻體干燥物的藻酸產(chǎn)量為58g。
[0090]實(shí)施例2
[0091]將與實(shí)施例1相同組成的培養(yǎng)基IOOmL放入搖瓶中殺菌后，接種Parachlorellasp.binos FERM BP-10969，用鋁箔避光后，在暗處、30°C振蕩72小時(shí)，進(jìn)行前培養(yǎng)。接著，將由葡萄糖10g/L、磷酸二氫鉀1.5g/L、七水合硫酸鎂1.5g/L、氯化鈣20mg/L、尿素3.5g/L、七水合硫酸鐵10mg/L、檸檬酸0.lg/L、Arnon’ s A5溶液(Arnon，s A5溶液的組成與實(shí)施例1相同)lmL/L、Adekanol LG109 (株式會(huì)社ADEKA生產(chǎn))0.lg/L所組成的培養(yǎng)基2000mL放入5L容量的發(fā)酵罐殺菌后，接種上述前培養(yǎng)液200mL，用鋁箔避光后，在內(nèi)溫30°C、通氣量2L/分、攪拌數(shù)450rpm、pH6~7下培養(yǎng)143小時(shí)。使用30% (w/w)的氫氧化鈉水溶液控制pH下限，使用15% (w/w)的硫酸水溶液控制pH上限。另外，從培養(yǎng)開始的23小時(shí)后開始，將經(jīng)殺菌的流加用培養(yǎng)基流加到培養(yǎng)液中。適宜調(diào)節(jié)流加用培養(yǎng)基的添加速度，以使培養(yǎng)液中的葡萄糖濃度不超過(guò)20g/L，到培養(yǎng)結(jié)束后共計(jì)添加了 560mL培養(yǎng)液。流加用培養(yǎng)基的組成是:葡萄糖570g/L、磷酸二氫鉀20g/L、七水合硫酸鎂12g/L、氯化鈣1.25g/L、尿素42g/L、七水合硫酸鐵700mg/L、Arnon’ s A5溶液10mL/L、梓檬酸4.5g/L。
[0092]培養(yǎng)結(jié)束后，測(cè)定該培養(yǎng)液的藻體干燥物含量為54.3g/L。另外，測(cè)定該培養(yǎng)液中的藻酸濃度時(shí)，換算為藻酸鈉為3.4g/L。即，每Ikg藻體干燥物的藻酸產(chǎn)量為63g。
[0093]實(shí)施例3
[0094]將由葡萄糖lllmM(20g/L)、硝酸鉀50mM、磷酸二氫鉀9.2mM、磷酸氫二鉀0.57mM、硫酸續(xù) 10mM、氯化鈉 31mM、EDTA0.14mM、硫酸鐵 0.llmM、Arnon’ s A5 溶液(Arnon，s A5溶液的組成與實(shí)施例1相同)lmL/L所組成的培養(yǎng)基IOOmL放入搖瓶進(jìn)行殺菌后，接種Parachlorella sp.binos FERM BP-10969，用鋁箔避光后，在30°C振蕩培養(yǎng)72小時(shí)。離心分離該培養(yǎng)液，去除上清液后，加入無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基(硝酸鉀2.5mM、磷酸二氫鉀1.3mM、硫酸鎂 0.3mM、氯化鈉 0.43mM、氯化鈣 0.23mM、磷酸二氫銨 1.7mM、氯化鐵 0.047mM、Arnon’ s A5溶液2mL/L) IOOmL進(jìn)行再混懸，進(jìn)一步在30°C振蕩16小時(shí)。培養(yǎng)結(jié)束后，測(cè)定該培養(yǎng)液的藻體干燥物含量為3.5g/L。另外，測(cè)定該培養(yǎng)液中的藻酸濃度時(shí)，換算為藻酸鈉為0.Hg/L0 即，每Ikg藻體干燥物的藻酸產(chǎn)量為40g。
[0095]比較例1:自養(yǎng)培養(yǎng)
[0096]將由硝酸鉀2.5g/L、磷酸二氫鉀17.5g/L、七水合硫酸鎂7.5g/L、氯化鈣2.5g/L、氯化鈉 2.5g/L、磷 酸二氫銨 20g/L、氯化鐵 6.5mg/L、Arnon’ s A5 溶液 2mL/L(Arnon，s A5溶液的組成與實(shí)施例1相同)所組成的培養(yǎng)基(PH6.5) 1000mL加入燒瓶進(jìn)行殺菌后，接種Parachlorella sp.binos FERM BP-10969，在約 7000Lux 的照度下，于 25°C振蕩培養(yǎng) 9 天。培養(yǎng)結(jié)束后，測(cè)定該培養(yǎng)液的藻體干燥物含量為67mg/L。另外，測(cè)定該培養(yǎng)液中的藻酸濃度時(shí)，換算為藻酸鈉為2.3mg/L。即，每Ikg藻體干燥物的藻酸產(chǎn)量為34g。
[0097]實(shí)施例4
[0098]將由葡萄糖20g/L、磷酸二氫鉀lg/L、七水合硫酸鎂lg/L、氯化鈣0.01g/L、尿素2g/L、七水合硫酸鐵5mg/L、Arnon’ s A5溶液lmL/L (Arnon，s A5溶液的組成:硼酸
2.86g/L、四水合氯化錳1.81g/L、四水合硫酸銅0.08g/L、七水合硫酸鋅0.22g/L、四水合鑰酸銨0.17lg/L)所組成的培養(yǎng)基(pH6.5)400mL放入2L容量的搖瓶進(jìn)行殺菌后，接種Parachlorella sp.binos FERM BP-10969，用鋁箔避光后，在30°C振蕩培養(yǎng)48小時(shí)，得到前培養(yǎng)液。
[0099]將由酵母提取液3g/L、磷酸二氫鉀11.5g/L、七水合硫酸鎂7.5g/L、氯化鈣0.65g/L、檸檬酸2.4g/L、七水合硫酸鐵0.36g/L、Arnon’ s A5溶液lmL/L (Arnon，s A5溶液的組成:硼酸2.86g/L、四水合氯化錳1.81g/L、四水合硫酸銅0.08g/L、七水合硫酸鋅0.22g/L、四水合鑰酸銨0.17lg/L)所組成的培養(yǎng)基(pH6.0) 10L，放入30L容量的發(fā)酵罐中進(jìn)行蒸煮殺菌。對(duì)該溶液接種上述前培養(yǎng)液，在通氣量18 L /分、30°C、pH6.0的條件下培養(yǎng)120小時(shí)。在培養(yǎng)中，連續(xù)地添加經(jīng)殺菌的55重量％葡萄糖水溶液合計(jì)5.4kg，調(diào)整攪拌數(shù)以使培養(yǎng)液的溶解氧濃度為0.1ppm以上。另外,使用25重量％的氨水對(duì)培養(yǎng)液的pH進(jìn)行調(diào)整。
[0100]培養(yǎng)結(jié)束后，測(cè)定該培養(yǎng)液的藻體干燥物含量時(shí)為93.0g/Lo另外，測(cè)定該培養(yǎng)液中的藻酸濃度時(shí)，換算為藻酸鈉為15.8g/L。即，每Ikg藻體干燥物的藻酸產(chǎn)量為170g。
[0101]實(shí)施例5
[0102]對(duì)實(shí)施例2中得到的Parachlorella sp.binos FERM BP-10969的培養(yǎng)液進(jìn)行冷凍干燥、噴霧干燥或轉(zhuǎn)鼓式干燥，得到含有藻酸的組合物。冷凍干燥使用冷凍干燥機(jī)FD-1型(東京理化器械株式會(huì)社)，噴霧干燥使用Mini SprayDryer B-290型(Buchi公司)、轉(zhuǎn)鼓式干燥使用Double drum型干燥機(jī)(Φ 400 X L500mm ;Katsuragi工業(yè)株式會(huì)社)分別實(shí)施。對(duì)得到的干燥物中的藻酸含量進(jìn)行測(cè)定的結(jié)果是，冷凍干燥品為16.4重量％，噴霧干燥品為15.7重量％,轉(zhuǎn)鼓式干燥品為15.2重量％。
[0103]比較例2:自養(yǎng)培養(yǎng)
[0104]將由磷酸二氫鉀175mg/L、磷酸二氫銨200mg/L、七水合硫酸鎂75mg/L、氯化鈣25mg/L、氯化鈉25mg/L、硝酸鉀250mg/L、七水合硫酸鐵5mg/L、Arnon’ s A5溶液ImL/L (ArnonJ s A5溶液的組成:硼酸2.86g/L、四水合氯化猛1.81g/L、四水合硫酸銅0.08g/L、七水合硫酸鋅0.22g/L、四水合鑰酸銨0.17lg/L)所組成的培養(yǎng)基(pH7.0)500mL放入IL容量的三角燒瓶中，接種Parachlorella sp.binos FERM BP-10969后，在約7000Lux的照度、25°C，利用二氧化碳進(jìn)行鼓泡從而進(jìn)行培養(yǎng)10天。培養(yǎng)結(jié)束后，測(cè)定該培養(yǎng)液的藻體干燥物含量時(shí)為850mg/L。另外,測(cè)定該培養(yǎng)液中的藻酸濃度時(shí),換算為藻酸鈉為26.lmg/L。即，每Ikg藻體干燥物的藻酸產(chǎn)量為31g。
[0105]根據(jù)以上實(shí)施例和參考例的結(jié)果，與具有藻酸產(chǎn)生能力的屬于擬小球藻屬(Parachlorella)的藻類進(jìn)行自養(yǎng)培養(yǎng)時(shí)進(jìn)行比較，可知通過(guò)異養(yǎng)培養(yǎng)具有藻酸產(chǎn)生能力的屬于擬小球藻屬 的藻類，其每份培養(yǎng)容積的藻酸的產(chǎn)量大大地提高了。另外，同時(shí)也可知，相對(duì)于培養(yǎng)中所生產(chǎn)的藻體干燥物重量，藻酸的產(chǎn)量也提高了。
【權(quán)利要求】
1.藻類的培養(yǎng)方法，其包括將屬于擬小球藻屬(Parachlorella)且具有藻酸產(chǎn)生能力的藻類進(jìn)行異養(yǎng)培養(yǎng)的步驟。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，屬于擬小球藻屬(Parachlorella)的藻類為Parachlorella sp.Binos FERM BP-10969。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其中，在平均照度小于700LUX的黑暗條件下培養(yǎng)藻類。
4.根據(jù)權(quán)利要求1~3中任一項(xiàng)所述的方法，其中，用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)藻類，并且，相對(duì)于培養(yǎng)開始時(shí)的該液體培養(yǎng)基量1L，該液體培養(yǎng)基中的有機(jī)化合物的總使用量換算為碳原子的重量為2.5g以上。
5.含有藻酸的組合物的制備方法，其包括從根據(jù)權(quán)利要求1~4中任一項(xiàng)所述的方法得到的藻類的培養(yǎng)物中取得含有藻酸的組合物的步驟。
6.藻體干燥物，其為將根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法得到的含有藻酸的組合物進(jìn)行干燥而得，且每Ikg中的藻酸含量為40g以上。
7.污泥減少劑，其含有根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法得到的含有藻酸的組合物。
8.有害物質(zhì)吸附劑，其含有根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法得到的含有藻酸的組合物。
9.飼料，其含有根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法得到的含有藻酸的組合物。
10.食品，其含有根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法得到的含有藻酸的組合物。
11.藥品，其含有根據(jù)權(quán)利要求5`所述的制備方法得到的含有藻酸的組合物。
【文檔編號(hào)】A61P9/12GK103827288SQ201280043904
【公開日】2014年5月28日 申請(qǐng)日期:2012年9月6日 優(yōu)先權(quán)日:2011年9月9日
【發(fā)明者】木崎憲之, 古田武, 毛利拓, 田岡直明 申請(qǐng)人:株式會(huì)社鐘化