具有增強(qiáng)的作用持續(xù)時(shí)間和降低的免疫原性的工程改造的多肽的制作方法
【專利摘要】提供具有特別良好的作用持續(xù)時(shí)間、高效能和/或方便的給藥方案(包括每周一次給藥)的化合物。所述化合物是工程改造的多肽，其包含白蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域與一種或多種生物活性多肽的組合。還提供治療疾病和病癥的藥物組合物和方法，所述疾病和病癥包括脂質(zhì)營養(yǎng)不良、血脂障礙、高血脂、超重、肥胖、下丘腦性閉經(jīng)、阿爾茨海默氏病、瘦蛋白不足、脂肪肝病或糖尿病(包括I型和II型)。可通過本文所述的化合物和方法治療的其它疾病和病癥包括非酒精性脂肪肝炎(NASH)和非酒精性脂肪肝病(NAFLD)、代謝綜合征X和亨廷頓氏病。
【專利說明】具有增強(qiáng)的作用持續(xù)時(shí)間和降低的免疫原性的工程改造的
多肽
[0001]序列表
本申請包含序列表，其通過EFS-Web以ASCII格式提交，并通過引用以其整體予以結(jié)合。所述ASCII副本創(chuàng)建于2012年7月3日，命名為1320USPR.txt，大小為450，377字節(jié)。
[0002]發(fā)明背景
本申請涉及具有良好的作用持續(xù)時(shí)間、高效能和/或方便的給藥方案的化合物以及其使用方法。本文提供了工程改造的多肽，其包含白蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域與生物活性肽的組合。不希望被任何理論所束縛，認(rèn)為因?yàn)楸疚乃龅墓こ谈脑斓亩嚯目山Y(jié)合白蛋白，因此當(dāng)在循環(huán)時(shí)所述化合物可被螯合(例如，結(jié)合到白蛋白)，由于例如腎清除率和/或降解減少而導(dǎo)致作用持續(xù)時(shí)間增力卩?？身槒乃鲋委煹募膊“ㄖ|(zhì)營養(yǎng)不良、血脂障礙、高血脂、超重、肥胖、下丘腦性閉經(jīng)、阿爾茨海默氏病、瘦蛋白不足、脂肪肝病、糖尿病(包括I型和II型)、非酒精性脂肪肝炎(NASH)、非酒精性脂肪肝病(NAFLD)、代謝綜合征X和亨廷頓氏病或其組合。
[0003]仍有需要開發(fā)可用于上文所述代謝疾病、病況和病癥的多肽。因此，本發(fā)明的一個(gè)目標(biāo)是提供可用于治療上述病況的具有延長的半壽期的工程改造的多肽和制備及利用所述多肽的方法。
[0004]本文引用的每個(gè)專利、專利申請和出版物通過引用以其整體結(jié)合到本文中并用于所有目的。
[0005]發(fā)明簡述
提供了具有對白蛋白的結(jié)合親和力和另外治療效用的工程改造的多肽化合物。所述化合物是工程改造的多肽，其包含能夠結(jié)合白蛋白的白蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域(ABD)多肽和激素結(jié)構(gòu)域(HD)多肽，所述HD多肽與ABD共價(jià)連接，可具有生物學(xué)活性并且可誘發(fā)有益的生物學(xué)反應(yīng)。本文所述的ABD或HD多肽中的任一個(gè)可任選在工程改造的多肽中通過接頭L (例如，如本文所述的LI)共價(jià)鍵合。不希望受任何理論的束縛，認(rèn)為因?yàn)楸疚乃龅墓こ谈脑斓亩嚯目山Y(jié)合白蛋白，所述化合物可在受試者中被螯合，導(dǎo)致在受試者中的作用持續(xù)時(shí)間增加。
[0006]在第一方面，提供如本文所述的工程改造的多肽。所述工程改造的多肽包含白蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域多肽(ABD)和激素結(jié)構(gòu)域(HDl)。所述激素結(jié)構(gòu)域包含其為瘦蛋白、瘦蛋白的類似物或其活性片段的多肽。
[0007]在另一方面，提供用于在需要治療的受試者中治療疾病或病癥的方法。所述方法包括將如本文所述的工程改造的多肽給予受試者。
[0008]在仍另一方面，提供藥物組合物，其包含與藥學(xué)上可接受的賦形劑組合的本文所述的工程改造的多肽化合物。
[0009]在仍另一方面，提供編碼工程改造的多肽的多核苷酸和它們的中間體、帶有所述多核苷酸的表達(dá)載體、表達(dá)所述多核苷酸的宿主細(xì)胞和用于它們表達(dá)、合成、翻譯后修飾和分離的手段。[0010]附圖簡述
圖1是可用于本文公開的工程改造的多肽的白蛋白結(jié)合多肽(SEQ ID NO:301-452,SEQID NO:454-463、SEQ ID NO: 500-593)、通過N-端甘氨酸殘基而延長的來自鏈球菌菌株G148的蛋白G的GA3結(jié)構(gòu)域(SEQ ID NO:453)和先前由Jonsson等所述的源自G148-GA3的白蛋白結(jié)合多肽(Protein Eng.Design & Selection, 2008，21:515-527 ;SEQ ID NO:454)的實(shí)例的氨基酸序列列表。
[0011]圖2顯示在Biacore儀器上進(jìn)行的結(jié)合分析的結(jié)果，用于研究白蛋白結(jié)合多肽PEP07912 (SEQ ID NO: 456)與人血清白蛋白的結(jié)合。將三個(gè)不同濃度的純化蛋白(40 nM，粗灰線；10 nM，黑線；2.5 nM，灰線)注入到具有955 RU的固定人血清白蛋白的表面上。
[0012]圖3A-C顯示通過ELISA進(jìn)行的結(jié)合分析的結(jié)果，其用于研究白蛋白結(jié)合多肽PEP07913 (SEQ ID NO:453)、PEP06923 (SEQ ID NO:454)、PEP07271 (SEQ ID NO:455),PEP07912 (SEQ ID NO:457)、PEP07554 (SEQ ID NO:456)、PEP07914 (SEQ ID NO:458),PEP07968 (即，與PEP07911 (SEQ ID N0:459)綴合的D0TA)和PEP07844 (SEQ ID NO:461)與存在于126份單獨(dú)的正常人血清中的IgG分子的結(jié)合，其中A)顯示平均OD值，B)顯示陰性血清的百分比(由OD〈0.15定義)，和C)顯示陽性血清的百分比(由OD >1.0定義)。
[0013]圖4A-C為顯示在CD3+ CD4+細(xì)胞增殖測定法中白蛋白結(jié)合多肽PEP07913 (SEQID NO:453), PEP07912 (SEQ ID NO:457)、PEP07914 (SEQ ID NO:458)和 PEP07968 (即，與PEP07911 (SEQ ID NO:459)綴合的D0TA)的免疫原性評估的圖示。A)顯示，在52個(gè)高加索人供體中，與重組人白蛋白比較，響應(yīng)所述白蛋白結(jié)合多肽的個(gè)體的數(shù)量。B)顯示與含有重組人白蛋白的陰性對照相比，PEP07913、PEP07912、PEP07914和PEP07968的平均刺激指數(shù)(SI)。C)顯示與緩沖液對照相比，對研究中所有蛋白有響應(yīng)的個(gè)體的數(shù)量。
[0014]圖5描述在白蛋白存在下由化合物2產(chǎn)生的瘦蛋白功能活性，如實(shí)施例7所描述。
[0015]圖6A-6B描述如實(shí)施例8所述給予大鼠后，單一給予本文所述的指定工程改造多肽對食物攝取和體重變化的影響(％溶媒-校正)。圖6A:食物攝取。圖6B:體重變化(％溶媒-校正)。
[0016]圖7A-7B描述如實(shí)施例9所述給予大鼠后，單一給予本文所述的指定工程改造多肽對食物攝取和體重變化的影響(％溶媒-校正)。圖7A:食物攝取。圖7B:體重變化(％溶媒-校正)。
[0017]圖8描述如實(shí)施例10所述給予大鼠后，單一給予本文所述的指定工程改造多肽對體重變化的影響(％溶媒-校正)。
[0018]圖9描述如實(shí)施例11所述給予大鼠后，單一給予本文所述的指定工程改造多肽對體重變化的影響(％溶媒-校正)。
[0019]圖10為描述在兩組大鼠中單獨(dú)或組合給予瘦蛋白(125 μ g/kg/天)和胰島淀粉樣多肽(1500 μ g/kg/天)對體重影響的圖:一組為極肥胖大鼠，另一組為熱量限制下降至中等肥胖的范圍。
[0020]圖11為描述單獨(dú)或組合給予化合物64 (120 nmol/kg)和PEG-大鼠胰島淀粉樣多肽(脫-Lysl-[Lys26(mPEG40K)]_ 大鼠胰島淀粉樣多肽(SEQ ID NO: 148) (125 nmol/kg))經(jīng)4周對體重影響的圖。
[0021] 圖12描述如實(shí)施例16所述給予STZ-誘導(dǎo)的TlDM小鼠后，本文所述的指定工程改造多肽對血糖的影響。
[0022]圖13描述如實(shí)施例16所述給予STZ-誘導(dǎo)的TlDM小鼠后，本文所述的指定工程改造多肽對血紅蛋白AlC的影響。
[0023]圖14描述如實(shí)施例16所述給予STZ-誘導(dǎo)的TlDM小鼠后，本文所述的指定工程改造多肽對食物攝取和體重的影響。
[0024]圖15描述如實(shí)施例16所述給予STZ-誘導(dǎo)的TlDM小鼠后，本文所述的指定工程改造多肽(含和不含低劑量的胰島素)對血糖的影響。
[0025]圖16描述如實(shí)施例16所述給予STZ-誘導(dǎo)的TlDM小鼠后，本文所述的指定工程改造多肽(含和不含低劑量的胰島素)對血紅蛋白AlC的影響。
[0026]圖17描述如實(shí)施例16所述給予STZ-誘導(dǎo)的TlDM小鼠后，本文所述的指定工程改造多肽(含和不含低劑量的胰島素)對食物攝取(％溶媒-校正)和體重變化(％溶媒-校正)的影響。
[0027]發(fā)明詳述 1.定義
“肥胖”和“超重”是指體重大于正常預(yù)期的哺乳動物，并且可通過例如身體外觀、本領(lǐng)域已知的體重指數(shù)(BMI)、腰臀圍比率、皮褶厚度、腰圍等確定。疾病控制與預(yù)防中心(CDC)將超重定義為具有25-29.9 BMI的成人；并將肥胖定義為具有30或更高BMI的成人。存在確定肥胖的其他測定法。例如，CDC規(guī)定腰臀圍比率大于1.0的人為超重。
[0028]“瘦體重”是指身體的無脂肪質(zhì)量，即總體重減去身體脂肪重量為瘦體重。瘦體重可通過例如本領(lǐng)域已知的流體靜力學(xué)稱重(hydrostatic weighing)、計(jì)算機(jī)化室(computerized chamber)、雙能X-射線吸收測定法、皮膚測徑器、磁共振成像(MRI)和生物電阻抗分析(BIA)等方法測量。
[0029]“哺乳動物”是指通常具有毛皮或毛發(fā)的溫血動物，其活胎產(chǎn)后代并用乳喂養(yǎng)其后代。哺乳動物包括人類、伴侶動物(例如狗、貓)、農(nóng)畜(例如奶牛、馬、綿羊、豬、山羊)、野生動物等。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述哺乳動物為雌性。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述哺乳動物為女人。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述哺乳動物為貓或狗。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述哺乳動物是糖尿病哺乳動物，例如具有2型糖尿病的人類。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述哺乳動物是肥胖型糖尿病哺乳動物，例如具有2型糖尿病的肥胖哺乳動物。在本文所述方法的背景下，術(shù)語“受試者”是指哺乳動物。
[0030]多肽背景下的“片段”在慣例的化學(xué)意義上在本文是指多肽的一部分。例如，片段可由母體多肽N-端缺失或C-端缺失一個(gè)或多個(gè)殘基產(chǎn)生，和/或片段可由母體多肽內(nèi)部缺失一個(gè)或多個(gè)殘基產(chǎn)生?？贵w背景下的“片段”是指抗體的一部分，其可與生物學(xué)活性分子連接以調(diào)節(jié)在受試者內(nèi)的溶解性、分布等。例如，本文所述的瘦蛋白A200是Fe抗體片段與瘦蛋白的綴合物，如本領(lǐng)域已知。參見例如WO 98/28427和US2007/002084。多肽背景下的術(shù)語“母體”在慣例意義上是指作為修飾(例如插入、缺失和/或取代)前的參照結(jié)構(gòu)的多肽。本文所述的工程改造的多肽背景下的術(shù)語“綴合物”是指組分多肽(例如ABD、HD1等)之間的共價(jià)連接。本文所述的工程改造的多肽背景下的術(shù)語“融合物”是指組分多肽(例如ABD、HD1等)之間通過肽骨架的末端氨基或羧基官能團(tuán)的任一個(gè)或兩者的共價(jià)連接。工程改造的多肽可合成制備或重組制備。通常，融合物使用重組生物技術(shù)制備，然而還可通過本領(lǐng)域已知的化學(xué)合成和綴合方法制備。
[0031]多肽背景下本文所用的“類似物”是指相對于母體化合物，具有氨基酸的插入、缺失和/或取代的化合物。類似物可具有優(yōu)良的穩(wěn)定性、溶解性、功效、半壽期等。在一些實(shí)施方案中，類似物是與母體化合物具有至少50%、例如50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、98%或甚至更高的序列同一性的化合物。
[0032]在比較兩個(gè)或更多個(gè)核酸或多肽序列的背景下，“同一性”、“序列同一性”等是指相同的或具有特定百分比的相同氨基酸殘基或核苷酸(即，當(dāng)在比較窗或指定區(qū)域內(nèi)比較和比對最大一致性時(shí)，在特定區(qū)域內(nèi)約50%同一性、優(yōu)選50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或更高同一性)的兩個(gè)或更多個(gè)序列或亞序列，如使用本領(lǐng)域已知 的序列比較算法例如BLAST或BLAST 2.0所測定。該定義包括具有缺失和/或添加的序列，以及具有取代的序列，以及天然存在的例如多態(tài)性或等位基因變體和人工變體。在優(yōu)選的算法中，如本領(lǐng)域已知的，計(jì)算空位等。對于序列比較，通常一個(gè)序列作為參照序列，測試序列與其比較。當(dāng)使用序列比較算法時(shí)，將測試和參照序列輸入計(jì)算機(jī)，如果必要的話指定亞序列的坐標(biāo)，并指定序列算法程序參數(shù)。優(yōu)選地，可使用默認(rèn)程序參數(shù)，或者可指定備選參數(shù)。然后，基于程序參數(shù)，序列比較算法計(jì)算測試序列相對于參照序列的百分比序列同一性。可例如通過Smith & Waterman, 1981, Adv.App1.Math.2:482 的局部同源性算法,通過 Needleman & Wunsch, 1970, J.Mol.Biol.48:443 的同源性比對算法，通過 Pearson & Lipman, 1988, Proc.Nat，1.Acad.ScL USA 85:2444的類似性檢索方法，通過這些算法(Wisconsin Genetics Software Package, GeneticsComputer Group, 575 Science Dr., Madison, ffis.中的 GAP、BESTFIT、FASTA 和 TFASTA)的計(jì)算機(jī)化執(zhí)行，或通過人工比對和目測進(jìn)行序列比較的最優(yōu)比對。參見例如Protocols in Molecular Biology (Au sub el等編輯，1995年增刊)。適于確定百分比序列同一性和序列類似性的算法的優(yōu)選實(shí)例包括BLAST和BLAST 2.0算法，其描述于Altschul等，1977，Nuc1.Acids Res.25:3389-3402 和 Altschul 等，1990，J.Mol.Biol.215:403-410。如本領(lǐng)域已知，使用BLAST和BLAST 2.0確定本發(fā)明的核酸和蛋白質(zhì)的百分比序列同一性。用于進(jìn)行BLAST分析的軟件是通過國家生物技術(shù)信息中心(NationalCenter for Biotechnology Information)的網(wǎng)站公開可得的。該算法包括首先通過鑒定查詢序列中長度W的短的字碼(word)來確定高得分序列對(HSP)，所述查詢序列當(dāng)與數(shù)據(jù)庫序列中相同長度的字碼進(jìn)行比對時(shí)，匹配或滿足某一正值閾值得分T。將T稱為鄰近字碼得分閾值(Altschul等，履1:)。這些起始的鄰近字碼命中(hit)作為用于開始檢索發(fā)現(xiàn)含有它們的更長HSP的種子。字碼命中在兩個(gè)方向上沿每個(gè)序列延伸，直到累積的比對得分可增加。使用例如用于核苷酸序列的參數(shù)M (對于匹配殘基對的獎分；總是大于0)和N(對于錯(cuò)配殘基的罰分；總是小于0)計(jì)算累積的得分。對于氨基酸序列，使用評分矩陣來計(jì)算累積的得分。在以下情況時(shí)，停止在每個(gè)方向上字碼命中的延伸:累積比對得分從其最大獲取值減少了數(shù)量X ;由于一個(gè)或多個(gè)負(fù)評分殘基比對的積聚，累積得分轉(zhuǎn)為零或零以下；或者到達(dá)任一個(gè)序列的末端。BLAST算法參數(shù)W、T和X決定比對的靈敏度和速度。BLASTN程序(用于核苷酸序列)默認(rèn)使用字長(W)為11，期望值(E)為10，M=5，N=-4，以及雙鏈比較。對于氨基酸序列，BLASTP程序默認(rèn)使用字長為3，期望值(E)為10，和BL0SUM62評分矩陣(參見Henikoff & Henikoff, 1989，Proc.Natl.Acad.Sc1.USA 89:10915)比對(B)為50，期望值(E)為10，M=5, N=-4以及雙鏈比較。
[0033]在數(shù)值背景下術(shù)語“約”是指數(shù)值的+/_ 10%,除非明確另外指明。
[0034]在本文所述的工程改造的多肽的組分的背景下，術(shù)語“肽”和“多肽”是同義的。
[0035]I1.化合物
在第一方面，提供工程改造的多肽化合物，其包含白蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域(ABD)多肽和至少一個(gè)多肽激素結(jié)構(gòu)域(HDl)。術(shù)語“白蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域”、“ABD”等是指能夠結(jié)合本文所述的白蛋白的多肽。術(shù)語“激素結(jié)構(gòu)域”、“激素結(jié)構(gòu)域多肽”等是指能夠在受試者中誘發(fā)生物學(xué)反應(yīng)的多肽。示例性激素結(jié)構(gòu)域包括但不限于瘦蛋白、瘦蛋白類似物或其活性片段，但還可以是瘦蛋白衍生物例如PEG化衍生物。[0036]令人驚訝地發(fā)現(xiàn)，瘦蛋白、瘦蛋白類似物、活性瘦蛋白片段或其瘦蛋白衍生物可與極高親和力的白蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域(ABD)融合(所述ABD源自本文所述的細(xì)菌蛋白的白蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域)，同時(shí)保留足夠的瘦蛋白生物學(xué)活性和具有延長的作用持續(xù)時(shí)間，例如在嚙齒動物中至少3天和甚至5天，其在人受試者中轉(zhuǎn)變?yōu)橹辽買周或更長的持續(xù)時(shí)間。這令人吃驚，部分是因?yàn)樗鯝BD肽未曾廣泛證實(shí)作為治療蛋白載體是一個(gè)穩(wěn)健的平臺，它們相對疏水，其可不利地與所連接的治療肽相互作用，并且對于至少一個(gè)家族的肽激素而言其不能作為載體。例如，大鼠胰島淀粉樣多肽化合物(例如SEQ ID NO: 108)當(dāng)與本文所述的ABD綴合或融合時(shí)，在相同的嚙齒動物模型未顯示出任何明顯的或長效的體內(nèi)活性，其中發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的各種瘦蛋白工程改造多肽構(gòu)建體具有活性和長的作用持續(xù)時(shí)間。
[0037]此外，本文的治療綴合物或融合物化合物令人驚訝地保留了白蛋白結(jié)合親和力和特異性，同時(shí)具有較低的免疫原性和瘦蛋白治療活性。所述化合物令人驚訝地具有活性，盡管在瘦蛋白、瘦蛋白類似物、活性瘦蛋白片段或瘦蛋白衍生物和ABD之間缺少血漿蛋白酶切割位點(diǎn)。更令人驚訝的是，認(rèn)為所述治療化合物即使當(dāng)與白蛋白結(jié)合時(shí)也具有活性。本文所述的ABD化合物提供白蛋白結(jié)合親和力和特異性，同時(shí)具有比之前所述的ABD化合物更低的免疫原性，所述之前所述的ABD化合物基于鏈球菌G蛋白菌株148 (G148)的白蛋白結(jié)合區(qū)并在 Jonsson 等(Protein Eng.Design & Selection, 2008, 21:515-527)中。最近，在鏈球菌G蛋白菌株148 (G148)的白蛋白結(jié)合區(qū)內(nèi)通過實(shí)驗(yàn)鑒定了幾個(gè)T-細(xì)胞和B-細(xì)胞表位(Goetsch等，Clin.Diagn.Lab.1mmunol.10:125-32, 2003)。作者對在疫苗中利用G148的T-細(xì)胞表位感興趣，即利用白蛋白結(jié)合區(qū)的固有免疫刺激特性。Goetsch等另外在G148序列中發(fā)現(xiàn)一個(gè)B-細(xì)胞表位，即免疫后與抗體結(jié)合的區(qū)域。在用于人給予的藥物組合物中，無免疫反應(yīng)是合乎需要的。因此，由于白蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域G148的上述免疫刺激特性，從而不優(yōu)選用于所述組合物中。
[0038]生物學(xué)活性組分。預(yù)期用于本文所述的化合物和方法的生物學(xué)活性化合物組分包括瘦蛋白。術(shù)語“生物學(xué)活性化合物”等在慣常意義上是指化合物例如多肽等，其可誘發(fā)生物學(xué)反應(yīng)。
[0039]瘦蛋白。“瘦蛋白”和“一種瘦蛋白”分別指:瘦蛋白、瘦蛋白活性片段、瘦蛋白類似物和瘦蛋白衍生物；一種瘦蛋白、一種瘦蛋白活性片段、一種瘦蛋白類似物和一種瘦蛋白衍生物。因此，除非另外說明，否則提及“瘦蛋白”是指包括瘦蛋白、瘦蛋白活性片段、瘦蛋白類似物和瘦蛋白衍生物，如本文所公開。同樣地，除非另外說明，提及“一種瘦蛋白”是指包括一種瘦蛋白、一種瘦蛋白活性片段、一種瘦蛋白類似物和一種瘦蛋白衍生物，如本文所公開。在設(shè)計(jì)、制備和利用本文所公開的工程改造多肽中可使用的示例性所述瘦蛋白包括誘發(fā)一種或多種本領(lǐng)域已知的生物學(xué)反應(yīng)(當(dāng)將瘦蛋白給予受試者時(shí)而誘發(fā))的那些(參見例如，公布的美國專利申請?zhí)朥S 2007/0020284和US 2008/0207512，美國專利號 6，309，853 和 US 7，183，254，以及 PCT 公布申請?zhí)?WO 96/005309、WO 98/28427 和 WO2009/064298)，所述生物學(xué)反應(yīng)例如:減少食物攝取、減少體重、減少體重增加、誘導(dǎo)飽食感、減少熱量利用度、減少熱量效率、降低代謝平臺、增加胰島素敏感度、減少高脂血癥、糾正血脂障礙、減少高甘油三酯血癥、改善肥胖、改善超重、改善糖尿病(包括I型糖尿病、II型糖尿病和妊娠期糖尿病)、改善胰島素抵抗、改善與其相關(guān)的脂質(zhì)營養(yǎng)不良病況以及本領(lǐng)域已知的給予瘦蛋白后而誘發(fā)的其它生物學(xué)反應(yīng)(參見例如，公布的美國專利申請?zhí)朥S2007/0020284 和 US 2008/0207512，美國專利號 6，309，853 和 US 7，183，254，以及 PCT 公布申請?zhí)?WO 96/005309、TO 98/28427 和 WO 2009/064298)。
[0040] 適合用于設(shè)計(jì)、制備和利用本文所述的工程改造多肽的示例性瘦蛋白包括但不限于描述于美國專利號 US 5，594，101、US 5，851，995、US 5，691，309、US 5，580，954、US5，554，727、US 5，552，523、US 5，559，208、US 5，756，461、US 6，309，853，公布的美國專利申請?zhí)?US 2007/0020284，以及 PCT 公布申請?zhí)?WO 96/23517,WO 96/005309,WO 98/28427、WO 2004/039832,WO 98/55139,WO 98/12224 和 WO 97/02004 中的化合物，其各自通過引用以其整體結(jié)合到本文中并用于所有目的。在體內(nèi)和體外測定瘦蛋白活性和生物學(xué)反應(yīng)(包括飽食感、食物攝取抑制活性和體重減輕活性)的方法是本領(lǐng)域已知的，在本文中并且還在上述參考文獻(xiàn)和本文引用的其它參考文獻(xiàn)中描述。
[0041 ] 可使用本領(lǐng)域已知的任何瘦蛋白、瘦蛋白類似物、瘦蛋白活性片段或瘦蛋白衍生物，以制備和利用本文全文所公開的工程改造多肽。預(yù)期用于本文所述的工程改造多肽和方法的代表性瘦蛋白、瘦蛋白類似物、瘦蛋白活性片段和瘦蛋白衍生物還包括以下:
成熟鼠瘦蛋白:
VPIQKVQDDTKTLIKTIVTRINDISHT-Xaa-SVSSKQKVTGLDFIPGLHPILTLSKMDQTLAVYQQILTSMPSRNVIQISNDLENLRDLLHVLAFSKSCHLPQASGLETLESLGGVLEASGYSTEVVALSRLQGSLQDMLQQLDLSPGC，其中第28位的Xaa是Q或不存在(SEQ ID NO:1)。
[0042]成熟鼠瘦蛋白I型: VPIQKVQDDTKTLIKTIVTRINDISHTQSVSAKQRVTGLDFIPGLHPILSLSKMDQTLAVYQQVLTSLPSQ
NVLQIANDLENLRDLLHLLAFSKSCSLPQTSGLQKPESLDGVLEASLYSTEVVALSRLQGSLQDILQQLDVSPEC(SEQ ID NO:143)。
[0043]成熟鼠瘦蛋白2型: VPIQKVQDDTKTLIKTIVTRINDISHTSVSAKQRVTGLDFIPGLHPILSLSKMDQTLAVYQQVLTSLPSQNVL
QIANDLENLRDLLHLLAFSKSCSLPQTSGLQKPESLDGVLEASLYSTEVVALSRLQGSLQDILQQLDVSPEC (SEQID NO:144)。
[0044]具有N-端甲硫氨酸的成熟鼠瘦蛋白: MVPIQKVQDDTKTLIKTIVTRINDISHT-Xaa-SVSSKQKVTGLDFIPGLHPILTLSKMDQTLAVYQQILTS
MPSRNVIQISNDLENLRDLLHVLAFSKSCHLPQASGLETLESLGGVLEASGYSTEVVALSRLQGSLQDMLQQLDLSPGC，其中第29位的Xaa為Q或不存在(SEQ ID NO: 2)。
[0045] 具有N-端甲硫氨酸的成熟鼠瘦蛋白I型:MVPIQKVQDDTKTLIKTIVTRINDISHTQSVSAKQRVTGLDFIPGLHPILSLSKMDQTLAVYQQVLTSLPSQNVLQIANDLENLRDLLHLLAFSKSCSLPQTSGLQKPESLDGVLEASLYSTEVVALSRLQGSLQDILQQLDVSPEC(SEQ ID NO:145)。
[0046]具有N-端甲硫氨酸的成熟鼠瘦蛋白2型: MVPIQKVQDDTKTLIKTIVTRINDISHTSVSAKQRVTGLDFIPGLHPILSLSKMDQTLAVYQQVLTSLPSQ
NVLQIANDLENLRDLLHLLAFSKSCSLPQTSGLQKPESLDGVLEASLYSTEVVALSRLQGSLQDILQQLDVSPEC(SEQ ID NO:146)。
[0047]成熟豬瘦蛋白: VPIWRVQDDTKTLIKTIVTRISDISHMQSVSSKQRVTGLDFIPGLHPVLSLSKMDQTLAIYQQILTSLPSR
NVIQISNDLENLRDLLHLLASSKSCPLPQARALETLESLGGVLEASLYSTEVVALSRLQGALQDMLRQLDLSPGC(SEQ ID NO:3)ο[0048]具有N-端甲硫氣酸的成熟豬瘦蛋白: MVPIWRVQDDTKTLIKTIVTRISDISHMQSVSSKQRVTGLDFIPGLHPVLSLSKMDQTLAIYQQILTSLPS
RNVIQISNDLENLRDLLHLLASSKSCPLPQARALETLESLGGVLEASLYSTEVVALSRLQGALQDMLRQLDLSPGC(SEQ ID NO:4)ο
[0049]成熟牛瘦蛋白: VPICKVQDDTKTLIKTIVTRINDISHT-Xaa-SVSSKQRVTGLDFIPGLHPLLSLSKMDQTLAIYQQILTSL
PSRNVVQISNDLENLRDLLHLLAASKSCPLPQVRALESLESLGVVLEASLYSTEVVALSRLQGSLQDMLRQLDLSPGC，其中第28位的Xaa是Q或不存在(SEQ ID NO: 5)。
[0050]具有N-端甲硫氨酸的成熟牛瘦蛋白: MVPICKVQDDTKTLIKTIVTRINDISHT-Xaa-SVSSKQRVTGLDFIPGLHPLLSLSKMDQTLAIYQQILTS
LPSRNVVQISNDLENLRDLLHLLAASKSCPLPQVRALESLESLGVVLEASLYSTEVVALSRLQGSLQDMLRQLDLSPGC，其中第29位的Xaa是Q或不存在(SEQ ID NO:6)。
[0051]未加工的全長人瘦蛋白(即，包含21殘基的N-端信號序列): MHWGTLCGFLffLffPYLFYVQAVPIQKVQDDTKTLIKTIVTRINDISHTQSVSSKQKVTGLDFIPGLHPILTL
SKMDQTLAVYQQILTSMPSRNVIQISNDLENLRDLLHVLAFSKSCHLPWASGLETLDSLGGVLEASGYSTEVVALSRLQGSLQDMLffQLDLSPGC (SEQ ID NO: 7)。
[0052]成熟人瘦蛋白(去除了 N-端21氨基酸的信號序列):
VPIQKVQDDTKTLIKTIVTRINDISH-Xaa-Xaa-SVSSKQKVTGLDFIPGLHPILTLSKMDQTLAVYQQILTSMPSRNVIQISNDLENLRDLLHVLAFSKSCHLPWASGLETLDSLGGVLEASGYSTEVVALSRLQGSLQDMLWQLDLSPGC，其中:第27位的Xaa為T或A ;和第28位的Xaa為Q或不存在(SEQ ID NO:8)。
[0053]具有N-端甲硫氨酸的成熟人瘦蛋白: MVPIQKVQDDTKTLIKTIVTRINDISH-Xaa-Xaa-SVSSKQKVTGLDFIPGLHPILTLSKMDQTLAVYQQI
LTSMPSRNVIQISNDLENLRDLLHVLAFSKSCHLPWASGLETLDSLGGVLEASGYSTEVVALSRLQGSLQDMLWQLDLSPGC，其中:第28位的Xaa為T或A ;和第29位的Xaa是Q或不存在(SEQ ID NO: 9) ?
[0054]成熟恒河猴(rhesus)瘦蛋白: VPIQKVQSDTKTLIKTIVTRINDISHTQSVSSKQRVTGLDFIPGLHPVLTLSQMDQTLAIYQQILINLPSR
NVIQISNDLENLRDLLHLLAFSKSCHLPLASGLETLESL⑶VLEASLYSTEVVALSRLQGSLQDMLWQLDLSPGC(SEQ ID NO:10)。
【權(quán)利要求】
1.工程改造的多肽，包含:白蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域多肽(ABD)和選自瘦蛋白、瘦蛋白類似物或其活性片段的第一肽激素結(jié)構(gòu)域(HDl)， 其中所述ABD包含選自包括以下 的氨基酸序列的氨基酸序列:
(i) LA X3 AK X6 X7 AN XlO ELD X14 YGVSDFYKRLI X26 KAKTVEGVEALK X39 X40 ILX43 X44 LP (SEQ ID NO: 300) 其中彼此獨(dú)立地， X3選自E、S、Q和C ; X6選自E、S和C ; X7選自A和S ; XlO選自A、S和R; X14 選自 A、S、C和 K ; X26選自D和E ; X39選自D和E ; X40選自A和E ; X43選自A和K ; X44選自A、S和E ; 第45位的亮氨酸是存在或不存在的；和 第46位的脯氨酸是存在或不存在的；和 (?)與(i)中定義的序列具有至少95%同一性的氨基酸序列； 條件是X7不是L、E或D ; 或者備選地， 條件是所述氨基酸序列不由在PCT公布的申請?zhí)朩O 2009/016043中定義的下列序列所定義:LAEAK Xa Xb A Xc Xd EL Xe KY GVSD X5 YK X8 X9 I X11 X12 A X14 TVEGV X20 AL X23X24 X25 ILAALP (SEQ ID NO: 679), 其中彼此獨(dú)立地， Xa選自V和E ; Xb選自L、E和D ; X。選自N、L和I ; Xd選自R和K ; Xe選自D和K ;和 X5選自Y和F ; X8選自N、R和S ;
X9 選自 V、1、L、M、F 和 Y ；
X11 選自 N、S、E 和 D ; X12選自R、K和N ; X14選自K和R ; X2。選自 D、N、Q、E、H、S、R和 K; X23選自K、I和T ; X24 選自 A、S、T、G、H、L 和 D ;和X25選自H、E和D。
2.權(quán)利要求1的工程改造的多肽，還包含與所述HDl共價(jià)連接的第一接頭(LI)。
3.權(quán)利要求1或2的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含所述ABD作為N-端部分和所述HDl作為C-端部分。
4.權(quán)利要求1或2的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含所述ABD作為C-端部分和所述HDl作為N-端部分。
5.權(quán)利要求3的工程改造的多肽，其包含結(jié)構(gòu)=ABD-HDl。
6.權(quán)利要求3的工程改造的多肽，其包含結(jié)構(gòu)=ABD-Ll-HDl。
7.權(quán)利要求4的工程改造的多肽，其包含結(jié)構(gòu):HD1-ABD。
8.權(quán)利要求4的工程改造的多肽，其包含結(jié)構(gòu):HD1-L1-ABD。
9.權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是瘦蛋白、瘦蛋白類似物、瘦蛋白活性片段或瘦蛋白衍生物。
10.權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl與選自以下的氨基酸序列具有至少 50% 的同一性:SEQ ID NO: K SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4、SEQID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO: 10、SEQ IDNO:11和 SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQID NO: 17,SEQ ID NO: 18,SEQ ID NO: 19,SEQ ID NO:20,SEQ ID NO:2USEQ ID NO:22,SEQID NO:23、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:28、SEQID NO:29、SEQ ID NO:30、SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO: 143、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:145、SEQ ID NO:146、SEQ ID NO:664, SEQ ID NO:665, SEQ IDNO:666,SEQ ID NO:667,SEQ ID NO:668,SEQ ID NO:669,SEQ ID NO:670,SEQ ID NO:671、SEQ ID NO:672, SEQ ID NO:673, SEQ ID NO:674,SEQ ID NO:675, SEQ ID NO:676,SEQ IDNO:677 和 SEQ ID NO:680。
11.權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl與選自以下的氨基酸序列具有至少 90% 的同一性:SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO: 10、SEQ IDNO:11和 SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQID NO: 17,SEQ ID NO: 18,SEQ ID NO: 19,SEQ ID NO:20,SEQ ID NO:2USEQ ID NO:22,SEQID NO:23、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:28、SEQID NO:29、SEQ ID NO:30、SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO: 143、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:145、SEQ ID NO:146、SEQ ID NO:664, SEQ ID NO:665, SEQ IDNO:666,SEQ ID NO:667,SEQ ID NO:668,SEQ ID NO:669,SEQ ID NO:670,SEQ ID NO:671、SEQ ID NO:672, SEQ ID NO:673, SEQ ID NO:674,SEQ ID NO:675, SEQ ID NO:676,SEQ IDNO:677 和 SEQ ID NO:680。
12.權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl與人瘦蛋白具有至少50%的同一性。
13.權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl與人瘦蛋白具有至少90%的同一性。
14.權(quán)利要求1-13中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl與SEQID NO: 20具有至少50%的同一性。
15.權(quán)利要求1-14中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl與SEQID NO: 20具有至少90%的同一性。
16.權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl與鴨嘴獸瘦蛋白具有至少50%的同一性。
17.權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl與海豹瘦蛋白具有至少50%的同一性。
18.權(quán)利要求1-17中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl具有1-5個(gè)氨基酸修飾，所述修飾獨(dú)立選自插入、缺失、添加和取代中的任一個(gè)或組合。
19.權(quán)利要求1-18 中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl包含選自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO:USEQ ID NO:2,SEQ ID NO:3,SEQ ID NO:4,SEQ ID NO:5,SEQ ID N0:6、SEQ ID NO:7,SEQ ID N0:8、SEQ ID N0:9、SEQ ID NO:10,SEQ ID N0:11、SEQ ID NO:12,SEQID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:18、SEQID NO:19,SEQ ID NO:20,SEQ ID N0:21、SEQ ID NO:22,SEQ ID NO:23,SEQ ID NO:24,SEQID NO:25,SEQ ID NO: 26,SEQ ID NO:27,SEQ ID NO:28,SEQ ID NO:29,SEQ ID NO:30,SEQID N0:31、SEQ ID NO:32,SEQ ID NO:33,SEQ ID NO:143,SEQ ID NO:144,SEQ ID NO:145、SEQ ID NO:146、SEQ ID NO:664、SEQ ID NO:665、SEQ ID NO:666、SEQ ID NO:667、SEQ IDNO:668,SEQ ID NO:669,SEQ ID NO:670,SEQ ID N0:671、SEQ ID NO:672,SEQ ID N0:673、SEQ ID NO:674、SEQ ID NO:675、SEQ ID NO:676、SEQ ID NO:677 和 SEQ ID NO:680。
20.權(quán)利要求1-19中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl包含選自以下的氨基酸序列:SEQ ID N0:USEQ ID NO:2,SEQ ID NO:3,SEQ ID NO:4,SEQ ID NO:5,SEQ ID N0:6、SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:8,SEQ ID N0:9、SEQ ID NO:10,SEQ ID N0:11、SEQ ID NO:12,SEQID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:18、SEQID NO:19,SEQ ID NO:20,SEQ ID N0:21、SEQ ID NO:22,SEQ ID NO:23,SEQ ID NO:24,SEQID NO:25,SEQ ID NO: 26,SEQ ID NO:27,SEQ ID NO:28,SEQ ID NO:29,SEQ ID NO:30,SEQID NO:31,SEQ ID NO:32,SEQ ID NO:33,SEQ ID NO:143,SEQ ID NO:144,SEQ ID NO:145、SEQ ID NO:146、SEQ ID NO:664、SEQ ID NO:665、SEQ ID NO:666、SEQ ID NO:667、SEQ IDNO:668,SEQ ID NO:669,SEQ ID NO:670,SEQ ID N0:671、SEQ ID NO:672,SEQ ID N0:673、SEQ ID NO:674、SEQ ID NO:675、SEQ ID NO:676、SEQ ID NO:677 和 SEQ ID NO:680。
21.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO:1。
22.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID N0:2。
23.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID N0:3。
24.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID N0:4。
25.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID N0:5。
26.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID N0:6。
27.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID N0:7。
28.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID N0:8。
29.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID N0:9。
30.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO: 10。
31.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO: 11。
32.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO: 12。
33.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO: 13。
34.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO: 14。
35.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO: 15。
36.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO: 16。
37.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO: 17。
38.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO: 18。
39.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO: 19。
40.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID N0:20。
41.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO:21。
42.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO:22。
43.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO:23。
44.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO:24。
45.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO:25。
46.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO:26。
47.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO:27。
48.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO:28。
49.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO:29。
50.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID N0:30。
51.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO:31。
52.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO:32。
53.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO:33。
54.權(quán)利要求1-53中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述ABD包含選自包括以下氨基酸序列的氨基酸序列:
(i) LA X3 AK X6 X7 AN XlO ELD X14 YGVSDFYKRLI X26 KAKTVEGVEALK X39 X40 ILX43 X44 LP (SEQ ID NO: 300) 其中彼此獨(dú)立地， X3選自E、S、Q和C ; X6選自E、S和C ; X7選自A和S ; XlO選自A、S和R; X14 選自 A、S、C和 K; X26選自D和E ; X39選自D和E ; X40選自A和E ; X43選自A和K ; X44選自A、S和E ; 第45位的亮氨酸是存在或不存在的；和第46位的脯氨酸是存在或不存在的。
55.權(quán)利要求1-54中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述ABD包含包括以下的氨基酸序列:(ii)與(i)定義的序列具有至少95%同一性的氨基酸序列。
56.權(quán)利要求1-55中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述ABD包含選自包括以下氨基酸序列的氨基酸序列:
(i) LA X3 AK X6 X7 AN XlO ELD X14 YGVSDFYKRLIDKAKTVEGVEALKDA ILAALP (SEQ IDNO: 678)，其中彼此獨(dú)立地，X3選自E、S、Q和C;X6選自E、S和C;X7選自A和S;X10選自A、S和R ；X14選自A、S、C和K ;第45位的亮氨酸是存在或不存在的；和第46位的脯氨酸是存在或不存在的；和 (ii)與⑴所定義的序列具有至少95%同一性的氨基酸序列，條件是X7不是L、E或D ； 或者備選地， 條件是所述氨基酸序列不由在PCT公布申請?zhí)朩O 2009/016043中定義的下列序列所定義:LAEAK Xa Xb A Xc Xd EL Xe KY GVSD X5 YK X8 X9 I X11 X12 A X14 TVEGV X20 AL X23 X24X25 ILAALP (SEQ ID NO: 679)， 其中彼此獨(dú)立地， Xa選自V和E ; Xb選自L、E和D ; X。選自N、L和I ; Xd選自R和K ; Xe選自D和K ;和 X5選自Y和F ; X8選自N、R和S ; X9 選自 V、1、L、M、F 和 Y ；
X11 選自 N、S、E 和 D ; X12選自R、K和N ; X14選自K和R ; X2。選自 D、N、Q、E、H、S、R和 K; X23選自K、I和T ; X24 選自 A、S、T、G、H、L 和 D ;和 X25選自H、E和D。
57.權(quán)利要求1-56中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述ABD包含選自包括以下氨基酸序列的氨基酸序列:
(i) LA X3 AK X6 X7 AN XlO ELD X14 YGVSDF YKRLIDKAKT VEGVEALKDA ILAALP (SEQID NO: 678)，其中彼此獨(dú)立地，X3選自E、S、Q和C ;X6選自E、S和C ;X7選自A和S ；X10選自A、S和R ；X14選自A、S、C和K ;第45位的亮氨酸是存在或不存在的；和第46位的脯氨酸是存在或不存在的。
58.權(quán)利要求1-57中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述ABD包含包括以下的氨基酸序列:(ii)與(i)所定義的序列具有至少95%同一性的氨基酸序列。
59.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中在ABD中X6為E。
60.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中在ABD中X3為S。
61.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中在ABD中X3為E。
62.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中在ABD中X7為A。
63.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽 ，其中在ABD中X14為S。
64.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中在ABD中X14為C。
65.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中在ABD中XlO為A。
66.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中在ABD中XlO為S。
67.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中第46位的脯氨酸是不存在的。
68.權(quán)利要求56-58中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中在ABD中X26為D。
69.權(quán)利要求56-58中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中在ABD中X39為D。
70.權(quán)利要求56-58中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中在ABD中X40為A。
71.權(quán)利要求56-58中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中在ABD中X43為A。
72.權(quán)利要求56-58中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中在ABD中X44為A。
73.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中ABD與白蛋白結(jié)合，使得相互作用的koff值為至多5 X 1(T5 s'
74.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中ABD與白蛋白結(jié)合，使得相互作用的koff值為至多5 X 1(T6 s'
75.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中ABD選自SEQID NO:301-452,455-463 和 500-593 中的任一個(gè)。
76.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中ABD選自以下氨基酸序列:其選自 SEQ ID N0:313、SEQ ID NO:448,SEQ ID NO:463,SEQ ID NO:500,SEQ ID N0:501和 SEQID NO:502中的任一個(gè)。
77.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述ABD還包含位于(i)所定義的序列的N-端和/或C-端上的一個(gè)或多個(gè)另外的氨基酸殘基。
78.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述一個(gè)或多個(gè)另外的氨基酸殘基包括在ABD的N-端上的絲氨酸殘基。
79.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述一個(gè)或多個(gè)另外的氨基酸殘基包括在ABD的N-端上的甘氨酸殘基。
80.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述一個(gè)或多個(gè)另外的氨基酸殘基包括在ABD的N-端上的半胱氨酸殘基。
81.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述一個(gè)或多個(gè)另外的氨基酸殘基包括在ABD的C-端上的甘氨酸殘基。
82.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述一個(gè)或多個(gè)另外的氨基酸殘基包括在ABD的C-端上的半胱氨酸殘基。
83.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中ABD包含選自SEQID NO:445-450和SEQ ID NO:462-463中任一個(gè)的氛基酸序列。
84.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中ABD包含不超過2個(gè)半胱氨酸殘基。
85.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中ABD包含不超過I個(gè)半胱氨酸殘基。
86.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中HDl通過多肽的X14位上的半胱氨酸殘基的疏基與ABD綴合。
87.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述接頭LI是1-30個(gè)氨基酸或小于30個(gè)氨基酸的肽。
88.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述接頭LI選自20個(gè)天然存在的氨基酸。
89.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述接頭LI是通過化學(xué)合成摻入、翻譯后化學(xué)修飾摻入或通過在宿主細(xì)胞中重組表達(dá)而體內(nèi)摻入的非天然氨基酸。
90.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述接頭LI氨基酸選自絲氨酸、甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、谷氨酸、天冬氨酸和賴氨酸。
91.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述接頭LI包含大部分無空間位阻的氨基酸。
92.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述接頭LI包含以下的一種或多種:酸性接頭、堿性接頭和結(jié)構(gòu)基序。
93.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述接頭LI包含多聚甘氨酸、多聚丙氨酸、多聚(Gly-Ala)或多聚(Gly-Ser)。
94.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述接頭LI包含(Gly)3、(Gly)4(SEQ ID NO: 116)或(Gly)5 (SEQ ID NO: 117)的多聚甘氨酸。
95.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述接頭LI包含(Gly)3Lys(Gly)4 (SEQ ID NO: 118)、(Gly)3AsnGlySer (Gly)2 (SEQ ID NO: 119)、(Gly)3Cys(Gly)4 (SEQ ID NO: 120)和 GlyProAsnGlyGly (SEQ ID NO: 121)。
96.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述接頭LI包含Gly和Ala的組八口 ο
97.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述接頭LI包含Gly和Ser的組口 O
98.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述接頭LI包含Gly和Glu的組口 O
99.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述接頭LI包含Gly和Lys的組口 ο
100.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述接頭LI包含選自以下的序列:[Gly-SerJn (SEQ ID NO: 122)、[Gly- Gly- Ser]n (SEQ ID NO: 123)、[Gly-Gly-Gly-Ser]n (SEQ ID NO: 124)和[Gly-Gly-Gly-Gly-SerJn (SEQ ID NO: 125);其中 η 為 1、2、3、4、5、6、7、8、9 或 10。
101.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述接頭LI包含選自以下的序列:[Gly-Glu] n (SEQ ID NO: 126)、[Gly-Gly-Glu] n (SEQ ID NO: 127)、[Gly-Gly-Gly-Glu]n (SEQ ID NO: 128), [Gly-Gly-Gly-Gly-Glu]n (SEQ ID NO: 129)、[Gly-Asp] n (SEQID NO: 130)、[Gly-Gly-Asp] n (SEQ ID NO: 131)、[Gly-Gly-Gly-Aspln (SEQ ID NO:132), [Gly-Gly-Gly-Gly-Aspln (SEQ ID NO: 133);其中 n 為 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10。
102.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述接頭LI包含選自以下的序列:[Gly-Glu] n (SEQ ID NO: 126)、[Gly-Gly-Glu] n (SEQ ID NO: 127)、[Gly-Gly-Gly-Glu]n (SEQ ID NO: 128), [Gly-Gly-Gly-Gly-Glu]n (SEQ ID NO: 129)、[Gly-Asp] n (SEQID NO: 130)、[Gly-Gly-Asp] n (SEQ ID NO: 131)、[Gly-Gly-Gly-Aspln (SEQ ID NO:132), [Gly-Gly-Gly-Gly-Aspln (SEQ ID NO: 133);其中 n 為 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10。
103.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述接頭LI包含選自以下的序列:[Gly-Lys] n (SEQ ID NO: 134)、[Gly-Gly- Lys] n (SEQ ID NO: 135)、[Gly-Gly-Gly-Lys]n (SEQ ID NO: 136), [Gly-Gly-Gly-Gly- Lys]n (SEQ ID NO: 137)、[Gly- Arg] n (SEQID NO: 138)、[Gly-Gly- Arg] n (SEQ ID NO: 139)、[Gly-Gly-Gly- Arg]n (SEQ ID NO:140)、[Gly-Gly-Gly-Gly- Arg]n (SEQ ID NO: 141);其中 n 為 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10。
104.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述接頭LI包含選自以下的序^lJ: [Glu-Ala-Ala-Ala-Lysln (SEQ ID NO: 142)，其中 η 為 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10。
105.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述接頭LI包含選自以下的序列:[Gly-Gly-Glu] 6 (SEQ ID NO: 153), [Gly-Gly-Lys] 6 (SEQ ID NO: 154)、[Glu-Ala-Ala-Ala-Lys]3 (SEQ ID NO: 155)、[Glu-Ala-Ala-Ala_Lys]4 (SEQ ID NO: 156)或[Glu-Ala-Ala-Ala-Ly s]5 (SEQ ID NO: 157)。
106.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述接頭LI包含N-端TG二肽。
107.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述接頭LI包含C-端AS二肽。
108.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述接頭LI包含N-端TG二肽和C-端AS 二肽。
109.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述接頭LI包含選自以下的氨基酸序列:TG-(GGGS)1 (SEQ ID NO: 215)、TG-(GGGS)2 (SEQ ID NO: 216)、TG-(GGGS)3(SEQ ID NO: 217)、TG-(GGGS)4 (SEQ ID NO: 218)、TG-(GGGS)5 (SEQ ID NO: 219)、(GGGS)「AS (SEQ ID NO: 220)、(GGGS)2-AS (SEQ ID NO: 221)、(GGGS)3-AS (SEQ ID NO:222)、(GGGS) 4-AS (SEQ ID NO: 223)、(GGGS)「AS (SEQ ID NO: 224)、TG-(GGGS)「AS (SEQID NO: 225)、TG-(GGGS)2-AS (SEQ ID NO: 226), TG-(GGGS)3-AS (SEQ ID NO: 227)、TG-(GGGS)4-AS (SEQ ID NO: 228)和 TG-(GGGS)5_AS (SEQ ID NO: 229)。
110.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述TG二肽TG和/或所述二肽AS是不存在的，或被一對選自T、A、S和G的氨基酸置換。
111.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述多肽還包含一個(gè)或多個(gè)另外的接頭。
112.前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含選自SEQ ID NO: 594-663和681的氨基酸序列。
113.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 594所示的氨基酸序列。
114.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 595所示的氨基酸序列。
115.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 596所示的氨基酸序列。
116.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 597所示的氨基酸序列。
117.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 598所示的氨基酸序列。
118.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 599所示的氨基酸序列。
119.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 600所示的氨基酸序列。
120.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 601所示的氨基酸序列。
121.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 602所示的氨基酸序列。
122.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 603所示的氨基酸序列。
123.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 604所示的氨基酸序列。
124.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 605所示的氨基酸序列。
125.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 606所示的氨基酸序列。
126.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 607所示的氨基酸序列。
127.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 608所示的氨基酸序列。
128.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 609所示的氨基酸序列。
129.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 610所示的氨基酸序列。
130.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 611所示的氨基酸序列。
131.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 612所示的氨基酸序列。
132.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 613所示的氨基酸序列。
133.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 614所示的氨基酸序列。
134.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 615所示的氨基酸序列。
135.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 616所示的氨基酸序列。
136.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 617所示的氨基酸序列。
137.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 618所示的氨基酸序列。
138.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 619所示的氨基酸序列。
139.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 620所示的氨基酸序列。
140.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 621所示的氨基酸序列。
141.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 622所示的氨基酸序列。
142.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 623所示的氨基酸序列。
143.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 624所示的氨 基酸序列。
144.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 625所示的氨基酸序列。
145.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 626所示的氨基酸序列。
146.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 627所示的氨基酸序列。
147.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 628所示的氨基酸序列。
148.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 629所示的氨基酸序列。
149.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 630所示的氨基酸序列。
150.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 631所示的氨基酸序列。
151.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 632所示的氨基酸序列。
152.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 633所示的氨基酸序列。
153.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 634所示的氨基酸序列。
154.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 635所示的氨基酸序列。
155.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 636所示的氨基酸序列。
156.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 637所示的氨基酸序列。
157.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 638所示的氨基酸序列。
158.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 639所示的氨基酸序列。
159.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 640所示的氨基酸序列。
160.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 641所示的氨基酸序列。
161.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 642所示的氨基酸序列。
162.權(quán)利要求1- 112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 643所示的氨基酸序列。
163.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 644所示的氨基酸序列。
164.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 645所示的氨基酸序列。
165.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 646所示的氨基酸序列。
166.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 647所示的氨基酸序列。
167.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 648所示的氨基酸序列。
168.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 649所示的氨基酸序列。
169.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 650所示的氨基酸序列。
170.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 651所示的氨基酸序列。
171.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 652所示的氨基酸序列。
172.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 653所示的氨基酸序列。
173.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 654所示的氨基酸序列。
174.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 655所不的氨基酸序列。
175.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 656所示的氨基酸序列。
176.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 657所示的氨基酸序列。
177.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 658所示的氨基酸序列。
178.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 659所示的氨基酸序列。
179.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 660所示的氨基酸序列。
180.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 661所示的氨基酸序列。
181.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 662所示的氨基酸序列。
182.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 663所示的氨基酸序列。
183.權(quán)利要求1-112中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述工程改造的多肽包含SEQID NO: 681所示的氨基酸序列。
184.權(quán)利要求1-183中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其對血清白蛋白的親和力具有小于約1(T6 mo I/L的解離常數(shù)。
185.權(quán)利要求1-184中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其對血清白蛋白的親和力具有小于約1(T9 mo I/L的解離常數(shù)。
186.權(quán)利要求1-185中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其對血清白蛋白的親和力具有小于約1(T12 mo I/L的解離常數(shù)。
187.權(quán)利要求1-186中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述多肽的作用持續(xù)時(shí)間為至少I天。
188.權(quán)利要求1-187中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述多肽的作用持續(xù)時(shí)間為至少3天。
189.權(quán)利要求1-188中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述多肽的作用持續(xù)時(shí)間為至少5天。
190.權(quán)利要求1-189中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述多肽在人受試者中的作用持續(xù)時(shí)間為至少5天。
191.用于治療受試者中疾病或病癥的方法，包括以有效治療所述疾病或病癥的量給予有需要的受試者權(quán)利要求1-190中任一項(xiàng)的工程改造的多肽。
192.權(quán)利要求191的方法，其中所述疾病或病癥是脂質(zhì)營養(yǎng)不良、血脂障礙、高血脂、超重、肥胖、下丘腦性閉經(jīng)、阿爾茨海默氏病、瘦蛋白不足、脂肪肝病、糖尿病(包括I型和II型)、非酒精性脂肪肝炎(NASH)、非酒精性脂肪肝病(NAFLD)、代謝綜合征X和亨廷頓氏病。
193.權(quán)利要求191或權(quán)利要求192的方法，其中所述疾病或病癥是脂質(zhì)營養(yǎng)不良、血脂障礙、高血脂、超重、肥胖、下丘腦性閉經(jīng)、阿爾茨海默氏病、瘦蛋白不足、脂肪肝病或糖尿病。
194.權(quán)利要求191-193中任一項(xiàng)的方法，其中所述疾病或病癥是I型糖尿病或II型糖尿病。
195.權(quán)利要求191-193中任一項(xiàng)的方法，其中所述疾病或病癥是肥胖。
196.權(quán)利要求191-193中任一項(xiàng)的方法，其中所述疾病或病癥是脂質(zhì)營養(yǎng)不良或瘦蛋白不足。
197.包含權(quán)利要求1-190中任一項(xiàng)的工程改造的多肽和藥學(xué)上可接受的賦形劑的藥物組合物。
198.權(quán)利要求197的藥物組合物，其中所述藥物組合物是可注射的藥物組合物。
199.權(quán)利要求197-198中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述藥物組合物是持續(xù)釋放或長效的藥物組合物。
200.權(quán)利要求197-199中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述藥物組合物是每天一次的藥物組合物。
201.權(quán)利要求197-199中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述藥物組合物是每周一次的藥物組合物。
202.權(quán)利要求197-201中任一項(xiàng)的藥物組合物，其用于治療受試者中的疾病或病癥。
203.權(quán)利要求197-202中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述疾病或病癥是脂質(zhì)營養(yǎng)不良、血脂障礙、高血脂、超重、肥胖、下丘腦性閉經(jīng)、阿爾茨海默氏病、瘦蛋白不足、脂肪肝病、糖尿病(包括I型和II型)、非酒精性脂肪肝炎(NASH)、非酒精性脂肪肝病(NAFLD)、代謝綜合征X和亨廷頓氏病。
204.權(quán)利要求202或權(quán)利要求203的藥物組合物，其中所述疾病或病癥是脂質(zhì)營養(yǎng)不良、血脂障礙、高血脂、超重、肥胖、下丘腦性閉經(jīng)、阿爾茨海默氏病、瘦蛋白不足、脂肪肝病或糖尿病。
205.權(quán)利要求202-204中任一項(xiàng)的方法，其中所述疾病或病癥是I型糖尿病或II性糖尿病。
206.權(quán)利要求202-204中任一項(xiàng)的方法，其中所述疾病或病癥是肥胖。
207.權(quán)利要求202-204中任一項(xiàng)的方法，其中所述疾病或病癥是脂質(zhì)營養(yǎng)不良或瘦蛋白不足。
208.權(quán)利要求1-18中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl選自: (a)選自以下的瘦蛋白的氨基酸序列1-146:SEQ ID NO: USEQ ID NO: 2,SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO:4,SEQ ID NO:5,SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ IDNO:10,SEQ ID NO:ll、SEQ ID NO:12,SEQ ID NO:13,SEQ ID NO:14,SEQ ID NO:15,SEQ IDNO: 16,SEQ ID NO: 17,SEQ ID NO: 18,SEQ ID NO: 19,SEQ ID NO:20,SEQ ID NO:2USEQ IDNO:22、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ IDNO:28,SEQ ID NO:29,SEQ ID NO:30,SEQ ID NO:3USEQ ID NO:32,SEQ ID NO:33,SEQ IDNO:143、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:145、SEQ ID NO:146、SEQ ID NO:664、SEQ ID NO:665、SEQ ID NO:666、SEQ ID NO:667、SEQ ID NO:668、SEQ ID NO:669、SEQ ID NO:670、SEQ IDN0:671、SEQ ID NO:672, SEQ ID NO:673, SEQ ID NO:674, SEQ ID NO:675, SEQ ID NO:676和SEQ ID N0:677;其中在以下位置的一個(gè)或多個(gè)上不同的氨基酸被取代，且保持相同的編號(甚至在缺少第28位的谷氨?；鶜埢那闆r下):4、32、33、35、50、64、68、71、74、77、78、.89、97、100、102、105、106、107、108、111、118、136、138、142 和 145 ； (b)子部分(a)的氨基酸序列，其中第28位的谷氨?；鶜埢遣淮嬖诘?； (c)子部分(a)或(b)的氨基酸序列，其中在N-端添加甲硫氨?；鶜埢?； (d)由(a)、(b)或(C)的氨基酸序列的片段組成的瘦蛋白，所述氨基酸序列的片段選自: ⑴氨基酸98-146 ； (?)氨基酸1-32 ；
(iii)氨基酸40-116 ；
(iv)氣基酸1_99 和 112_146 ； (V)氨基酸1-99和112-146，其中氨基酸100-111中的一個(gè)或多個(gè)位于氨基酸99和.112之間； (vi)子部分⑴的氨基酸序列，其中氨基酸100、102、105、106、107、108、111、118、136、.138、142和145中的一個(gè)或多個(gè)被另一氨基酸取代； (vii)子部分(ii)的氨基酸序列，其中氨基酸4、8和32中的一個(gè)或多個(gè)被另一氨基酸取代； (viii)子部分(iii)的氨基酸序列，其中氨基酸50、53、60、64、66、67、68、71、74、77、.78、89、97、100、102、105、106、107、108、111和112中的一個(gè)或多個(gè)被另一氨基酸置換； (ix)子部分(iv)的氨基酸序列，其中氨基酸4、8、32、33、35、48、50、53、60、64、66、67、.68、71、74、77、78、89、97、112、118、136、138、142 和 145 中的一個(gè)或多個(gè)被另一氨基酸置換；和 (X)子部分(V)的氨基酸序列，其中氨基酸4、32、33、35、50、64、68、71、74、77、78、89、.97、100、102、105、106、107、108、111、118、136、138、142 和 145 中的一個(gè)或多個(gè)被另一氨基酸置換； (xi)子部分(i)-(x)中任一個(gè)的氨基酸序列，其中在N-端添加甲硫氨酸； (e)子部分(a)至(d)中任一個(gè)的氨基酸序列，其中所述氨基酸序列與化學(xué)部分連接； (f)子部分(e)的氨基酸序列，其中所述化學(xué)部分是水溶性聚合物部分； (g)子部分(f)的氨基酸序列，其中所述水溶性聚合物部分選自:聚乙二醇、乙二醇/丙二醇的共聚物、羧基甲基纖維素、葡聚糖、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚-1，3-二氧戊烷、聚-1，3，6-三噁烷、乙烯/馬來酸酐共聚物、多聚氨基酸同聚物、多聚氨基酸隨機(jī)共聚物、白蛋白、Fe蛋白、聚(η-乙烯吡咯烷酮)聚乙二醇、丙二醇同聚物、聚氧化丙烯/氧化乙烯共聚物、聚氧乙基化多元醇、聚乙烯醇、聚乙二醇丙醛、琥珀酸鹽、苯乙烯、羥乙基淀粉；和 (h)子部分(g)的氨基酸序列，其中所述水溶性聚合物部分是聚乙二醇；和 (i)子部分(g)的氨基酸序列，其中所述水溶性聚合物是選自白蛋白、抗體、Fe蛋白和多聚賴氨酸部分的多聚氨基酸。
209.權(quán)利要求1-18和208中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl包含選自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQID NO:6,SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:8,SEQ ID NO:9, SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ IDNO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ IDNO: 18,SEQ ID NO: 19,SEQ ID NO:20,SEQ ID NO:2USEQ ID NO:22,SEQ ID NO:23,SEQ IDNO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:29、SEQID NO:30、SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:143、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:145、SEQ ID NO:146、SEQ ID NO:664, SEQ ID NO:665, SEQ ID NO:666, SEQ IDNO:667,SEQ ID NO:668,SEQ ID NO:669,SEQ ID NO:670,SEQ ID NO:671、SEQ ID NO:672、SEQ ID NO:673,SEQ ID NO:674,SEQ ID NO:675,SEQ ID NO:676,SEQ ID NO:677和SEQ IDNO:680 ;其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸被取代。
210.權(quán)利要求1-18和209中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl包含選自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQID NO:6,SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8,SEQ ID NO:9,SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ IDNO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ IDNO: 18,SEQ ID NO: 19,SEQ ID NO:20,SEQ ID NO:2USEQ ID NO:22,SEQ ID NO:23,SEQ IDNO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:29、SEQID NO:30、SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:143、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:145、SEQ ID NO:146、SEQ ID NO:664, SEQ ID NO:665, SEQ ID NO:666, SEQ IDNO:667,SEQ ID NO:668,SEQ ID NO:669,SEQ ID NO:670,SEQ ID NO:671、SEQ ID NO:672、SEQ ID NO:673,SEQ ID NO:674,SEQ ID NO:675,SEQ ID NO:676,SEQ ID NO:677和SEQ IDNO:680 ;其中一個(gè)氨基酸被取代。
211.權(quán)利要求1-18和209中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl包含選自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQID NO:6,SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:8,SEQ ID NO:9,SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ IDNO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ IDNO: 18,SEQ ID NO: 19,SEQ ID NO:20,SEQ ID NO:2USEQ ID NO:22,SEQ ID NO:23,SEQ IDNO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:29、SEQID NO:30、SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:143、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:145、SEQ ID NO:146、SEQ ID NO:664, SEQ ID NO:665, SEQ ID NO:666, SEQ IDNO:667,SEQ ID NO:668,SEQ ID NO:669,SEQ ID NO:670,SEQ ID NO:671、SEQ ID NO:672、SEQ ID NO:673,SEQ ID NO:674,SEQ ID NO:675,SEQ ID NO:676,SEQ ID NO:677和SEQ IDNO:680 ;其中兩個(gè)氨基酸被取代。
212.權(quán)利要求1-18和209中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl包含選自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQID NO:6,SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:8,SEQ ID NO:9,SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ IDNO:12,SEQ ID NO:13,SEQ ID NO:14,SEQ ID NO:15,SEQ ID NO:16,SEQ ID NO:17,SEQ IDNO: 18,SEQ ID NO: 19,SEQ ID NO:20,SEQ ID NO:2USEQ ID NO:22,SEQ ID NO:23,SEQ IDNO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:29、SEQID NO:30、SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:143、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:145、SEQ ID NO:146、SEQ ID NO:664, SEQ ID NO:665, SEQ ID NO:666, SEQ IDNO:667,SEQ ID NO:668,SEQ ID NO:669,SEQ ID NO:670,SEQ ID NO:671、SEQ ID NO:672、SEQ ID NO:673,SEQ ID NO:674,SEQ ID NO:675,SEQ ID NO:676,SEQ ID NO:677和SEQ IDNO:680 ;其中三個(gè)氨基酸被取代。
213.權(quán)利要求1-18和209中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl包含選自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQID NO:6,SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8,SEQ ID NO:9,SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ IDNO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ IDNO: 18,SEQ ID NO: 19,SEQ ID NO:20,SEQ ID NO:2USEQ ID NO:22,SEQ ID NO:23,SEQ IDNO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:29、SEQID NO:30、SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:143、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:145、SEQ ID NO:146、SEQ ID NO:664, SEQ ID NO:665, SEQ ID NO:666, SEQ IDNO:667,SEQ ID NO:668,SEQ ID NO:669,SEQ ID NO:670,SEQ ID NO:671、SEQ ID NO:672、SEQ ID NO:673,SEQ ID NO:674,SEQ ID NO:675,SEQ ID NO:676,SEQ ID NO:677和SEQ IDNO:680 ;其中四個(gè)氨基酸被取代。
214.權(quán)利要求1-18和209中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl包含選自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQID NO:6,SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:8,SEQ ID NO:9,SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ IDNO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ IDNO: 18,SEQ ID NO: 19,SEQ ID NO:20,SEQ ID NO:2USEQ ID NO:22,SEQ ID NO:23,SEQ IDNO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:29、SEQID NO:30、SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:143、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:145、SEQ ID NO:146、SEQ ID NO:664, SEQ ID NO:665, SEQ ID NO:666, SEQ IDNO:667,SEQ ID NO:668,SEQ ID NO:669,SEQ ID NO:670,SEQ ID NO:671、SEQ ID NO:672、SEQ ID NO:673,SEQ ID NO:674,SEQ ID NO:675,SEQ ID NO:676,SEQ ID NO:677和SEQ IDNO:680 ;其中五個(gè)氨基酸被取代。
215.權(quán)利要求1-18和209中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl包含選自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQID NO:6,SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:8,SEQ ID NO:9,SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ IDNO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ IDNO: 18,SEQ ID NO: 19,SEQ ID NO:20,SEQ ID NO:2USEQ ID NO:22,SEQ ID NO:23,SEQ IDNO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:29、SEQID NO:30、SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:143、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:145、SEQ ID NO:146、SEQ ID NO:664, SEQ ID NO:665, SEQ ID NO:666, SEQ IDNO:667,SEQ ID NO:668,SEQ ID NO:669,SEQ ID NO:670,SEQ ID NO:671、SEQ ID NO:672、SEQ ID NO:673,SEQ ID NO:674,SEQ ID NO:675,SEQ ID NO:676,SEQ ID NO:677和SEQ IDNO:680 ;其中六個(gè)氨基酸被取代。
216.權(quán)利要求1-18和209中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl包含選自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQID NO:6,SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:9,SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ IDNO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ IDNO: 18,SEQ ID NO: 19,SEQ ID NO:20,SEQ ID NO:2USEQ ID NO:22,SEQ ID NO:23,SEQ IDNO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:29、SEQID NO:30、SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:143、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:145、SEQ ID NO:146、SEQ ID NO:664, SEQ ID NO:665, SEQ ID NO:666, SEQ IDNO:667,SEQ ID NO:668,SEQ ID NO:669,SEQ ID NO:670,SEQ ID NO:671、SEQ ID NO:672、SEQ ID NO:673,SEQ ID NO:674,SEQ ID NO:675,SEQ ID NO:676,SEQ ID NO:677和SEQ IDNO:680 ;其中七個(gè)氨基酸被取代。
217.權(quán)利要求1-18和209中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl包含選自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQID NO:6,SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8,SEQ ID NO:9,SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ IDNO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ IDNO: 18,SEQ ID NO: 19,SEQ ID NO:20,SEQ ID NO:2USEQ ID NO:22,SEQ ID NO:23,SEQ IDNO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:29、SEQID NO:30、SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:143、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:145、SEQ ID NO:146、SEQ ID NO:664, SEQ ID NO:665, SEQ ID NO:666, SEQ IDNO:667,SEQ ID NO:668,SEQ ID NO:669,SEQ ID NO:670,SEQ ID NO:671、SEQ ID NO:672、SEQ ID NO:673,SEQ ID N O:674,SEQ ID NO:675,SEQ ID NO:676,SEQ ID NO:677和SEQ IDNO:680 ;其中八個(gè)氨基酸被取代。
218.權(quán)利要求1-18和209中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl包含選自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQID NO:6,SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:8,SEQ ID NO:9,SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ IDNO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ IDNO: 18,SEQ ID NO: 19,SEQ ID NO:20,SEQ ID NO:2USEQ ID NO:22,SEQ ID NO:23,SEQ IDNO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:29、SEQID NO:30、SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:143、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:145、SEQ ID NO:146、SEQ ID NO:664, SEQ ID NO:665, SEQ ID NO:666, SEQ IDNO:667,SEQ ID NO:668,SEQ ID NO:669,SEQ ID NO:670,SEQ ID NO:671、SEQ ID NO:672、SEQ ID NO:673,SEQ ID NO:674,SEQ ID NO:675,SEQ ID NO:676,SEQ ID NO:677和SEQ IDNO:680 ;其中九個(gè)氨基酸被取代。
219.權(quán)利要求1-18和209中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl包含選自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQID NO:6,SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:8,SEQ ID NO:9,SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ IDNO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ IDNO: 18,SEQ ID NO: 19,SEQ ID NO:20,SEQ ID NO:2USEQ ID NO:22,SEQ ID NO:23,SEQ IDNO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:29、SEQID NO:30、SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:143、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:145、SEQ ID NO:146、SEQ ID NO:664, SEQ ID NO:665, SEQ ID NO:666, SEQ IDNO:667,SEQ ID NO:668,SEQ ID NO:669,SEQ ID NO:670,SEQ ID NO:671、SEQ ID NO:672、SEQ ID NO:673,SEQ ID NO:674,SEQ ID NO:675,SEQ ID NO:676,SEQ ID N0:677和SEQ IDNO:680 ;其中十個(gè)氨基酸被取代。
220.權(quán)利要求1-18和209中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl包含選自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQID NO:6,SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8,SEQ ID NO:9,SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ IDNO:12,SEQ ID NO:13,SEQ ID NO:14,SEQ ID NO:15,SEQ ID NO:16,SEQ ID NO:17,SEQ IDNO: 18,SEQ ID NO: 19,SEQ ID NO:20,SEQ ID NO:2USEQ ID NO:22,SEQ ID NO:23,SEQ IDNO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:29、SEQID NO:30、SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:143、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:145、SEQ ID NO:146、SEQ ID NO:664, SEQ ID NO:665, SEQ ID NO:666, SEQ IDNO:667,SEQ ID NO:668,SEQ ID NO:669,SEQ ID NO:670,SEQ ID NO:671、SEQ ID NO:672、SEQ ID NO:673,SEQ ID NO:674,SEQ ID NO:675,SEQ ID NO:676,SEQ ID NO:677和SEQ IDNO:680 ;其中11個(gè)氨基酸被取代。
221.權(quán)利要求1-18和209中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl包含選自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQID NO:6, SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:8,SEQ ID NO:9,SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ IDNO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ IDNO: 18,SEQ ID NO: 19,SEQ ID NO:20,SEQ ID NO:2USEQ ID NO:22,SEQ ID NO:23,SEQ IDNO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:29、SEQID NO:30、SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:143、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:145、SEQ ID NO:146、SEQ ID NO:664, SEQ ID NO:665, SEQ ID NO:666, SEQ IDNO:667,SEQ ID NO:668,SEQ ID NO:669,SEQ ID NO:670,SEQ ID NO:671、SEQ ID NO:672、SEQ ID NO:673,SEQ ID NO:674,SEQ ID NO:675,SEQ ID NO:676,SEQ ID NO:677和SEQ IDNO:680 ;其中12個(gè)氨基酸被取代。
222.權(quán)利要求1-18和209中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl包含選自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQID NO:6,SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:8,SEQ ID NO:9,SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ IDNO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ IDNO: 18,SEQ ID NO: 19,SEQ ID NO:20,SEQ ID NO:2USEQ ID NO:22,SEQ ID NO:23,SEQ IDNO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:29、SEQID NO:30、SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:143、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:145、SEQ ID NO:146、SEQ ID NO:664, SEQ ID NO:665, SEQ ID NO:666, SEQ IDNO:667,SEQ ID NO:668,SEQ ID NO:669,SEQ ID NO:670,SEQ ID NO:671、SEQ ID NO:672、SEQ ID NO:673,SEQ ID NO:674,SEQ ID NO:675,SEQ ID NO:676,SEQ ID NO:677和SEQ IDNO:680 ;其中13個(gè)氨基酸被取代。
223.權(quán)利要求1-18和209中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl包含選自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQID NO:6,SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:8,SEQ ID NO:9, SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ IDNO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ IDNO: 18,SEQ ID NO: 19,SEQ ID NO:20,SEQ ID NO:2USEQ ID NO:22,SEQ ID NO:23,SEQ IDNO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:29、SEQID NO:30、SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:143、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:145、SEQ ID NO:146、SEQ ID NO:664, SEQ ID NO:665, SEQ ID NO:666, SEQ IDNO:667,SEQ ID NO:668,SEQ ID NO:669,SEQ ID NO:670,SEQ ID NO:671、SEQ ID NO:672、SEQ ID NO:673,SEQ I D NO:674,SEQ ID NO:675,SEQ ID NO:676,SEQ ID NO:677和SEQ IDNO:680 ;其中14個(gè)氨基酸被取代。
224.權(quán)利要求1-18和209中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl包含選自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQID NO:6,SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:8,SEQ ID NO:9,SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ IDNO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ IDNO: 18,SEQ ID NO: 19,SEQ ID NO:20,SEQ ID NO:2USEQ ID NO:22,SEQ ID NO:23,SEQ IDNO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:29、SEQID NO:30、SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:143、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:145、SEQ ID NO:146、SEQ ID NO:664, SEQ ID NO:665, SEQ ID NO:666, SEQ IDNO:667,SEQ ID NO:668,SEQ ID NO:669,SEQ ID NO:670,SEQ ID NO:671、SEQ ID NO:672、SEQ ID NO:673,SEQ ID NO:674,SEQ ID NO:675,SEQ ID NO:676,SEQ ID NO:677和SEQ IDNO:680 ;其中15個(gè)氨基酸被取代。
225.權(quán)利要求1-18和209中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl包含選自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQID NO:6,SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:8,SEQ ID NO:9,SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ IDNO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ IDNO: 18,SEQ ID NO: 19,SEQ ID NO:20,SEQ ID NO:2USEQ ID NO:22,SEQ ID NO:23,SEQ IDNO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:29、SEQID NO:30、SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:143、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:145、SEQ ID NO:146、SEQ ID NO:664, SEQ ID NO:665, SEQ ID NO:666, SEQ IDNO:667,SEQ ID NO:668,SEQ ID NO:669,SEQ ID NO:670,SEQ ID NO:671、SEQ ID NO:672、SEQ ID NO:673,SEQ ID NO:674,SEQ ID NO:675,SEQ ID NO:676,SEQ ID NO:677和SEQ IDNO:680 ;其中16個(gè)氨基酸被取代。
226.權(quán)利要求1-18和209中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl包含選自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQID NO:6,SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:8,SEQ ID NO:9,SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ IDNO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ IDNO: 18,SEQ ID NO: 19,SEQ ID NO:20,SEQ ID NO:2USEQ ID NO:22,SEQ ID NO: 23,SEQ IDNO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:29、SEQID NO:30、SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:143、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:145、SEQ ID NO:146、SEQ ID NO:664, SEQ ID NO:665, SEQ ID NO:666, SEQ IDNO:667,SEQ ID NO:668,SEQ ID NO:669,SEQ ID NO:670,SEQ ID NO:671、SEQ ID NO:672、SEQ ID NO:673,SEQ ID NO:674,SEQ ID NO:675,SEQ ID NO:676,SEQ ID NO:677和SEQ IDNO:680 ;其中17個(gè)氨基酸被取代。
227.權(quán)利要求1-18和209中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl包含選自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQID NO:6,SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:8,SEQ ID NO:9,SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ IDNO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ IDNO: 18,SEQ ID NO: 19,SEQ ID NO:20,SEQ ID NO:2USEQ ID NO:22,SEQ ID NO:23,SEQ IDNO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:29、SEQID NO:30、SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:143、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:145、SEQ ID NO:146、SEQ ID NO:664, SEQ ID NO:665, SEQ ID NO:666, SEQ IDNO:667,SEQ ID NO:668,SEQ ID NO:669,SEQ ID NO:670,SEQ ID NO:671、SEQ ID NO:672、SEQ ID NO:673,SEQ ID NO:674,SEQ ID NO:675,SEQ ID NO:676,SEQ ID NO:677和SEQ IDNO:680 ;其中18個(gè)氨基酸被取代。
228.權(quán)利要求1-18和209中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl包含選自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQID NO:6,SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:8,SEQ ID NO:9,SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ IDNO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ IDNO: 18,SEQ ID NO: 19,SEQ ID NO:20,SEQ ID NO:2USEQ ID NO:22,SEQ ID NO:23,SEQ IDNO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:29、SEQID NO:30、SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:143、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:145、SEQ ID NO:146、SEQ ID NO:664, SEQ ID NO:665, SEQ ID NO:666, SEQ IDNO:667,SEQ ID NO:668,SEQ ID NO:669,SEQ ID NO:670,SEQ ID NO:671、SEQ ID NO:672、SEQ ID NO:673,SEQ ID NO:674,SEQ ID NO:675,SEQ ID NO:676,SEQ ID NO:677和SEQ IDNO:680 ;其中19個(gè)氨基酸被取代。
229.權(quán)利要求1-18和209中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl包含選自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQID NO:6,SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:8,SEQ ID NO:9, SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ IDNO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ IDNO: 18,SEQ ID NO: 19,SEQ ID NO:20,SEQ ID NO:2USEQ ID NO:22,SEQ ID NO:23,SEQ IDNO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:29、SEQID NO:30、SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:143、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:145、SEQ ID NO:146、SEQ ID NO:664, SEQ ID NO:665, SEQ ID NO:666, SEQ IDNO:667,SEQ ID NO:668,SEQ ID NO:669,SEQ ID NO:670,SEQ ID NO:671、SEQ ID NO:672、SEQ ID NO:673,SEQ ID NO:674,SEQ ID NO:675,SEQ ID NO:676,SEQ ID NO:677和SEQ IDNO:680 ;其中20個(gè)氨基酸被取代。
230.權(quán)利要求1-18和209中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl包含選自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQID NO:6,SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:8,SEQ ID NO:9, SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ IDNO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID N O:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ IDNO: 18,SEQ ID NO: 19,SEQ ID NO:20,SEQ ID NO:2USEQ ID NO:22,SEQ ID NO:23,SEQ ID
231.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO: 143。
232.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO: 144。
233.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO: 145。
234.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO: 146。
235.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID N0:664。
236.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO:665。
237.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO:666。
238.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO:667。
239.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO:668。
240.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO:669。
241.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID N0:670。
242.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO:671。
243.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO:672。
244.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO:673。
245.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO:674。
246.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO:675。
247.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO:676。
248.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID NO:677。
249.權(quán)利要求1-20中任一項(xiàng)的工程改造的多肽，其中所述HDl是SEQID N0:680。
250.治療受試者肥胖的方法，包括外周給予治療有效量的至少兩種不同的抗肥胖劑，其中至少一種抗肥胖劑是胰島淀粉樣多肽、胰島淀粉樣多肽類似物、胰島淀粉樣多肽激動劑或胰島淀粉樣多肽衍生物(即，胰島淀粉樣多肽藥劑)，且至少一種抗肥胖劑是包含白蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域多肽(ABD)和選自瘦蛋白、瘦蛋白類似物或其活性片段的第一肽激素結(jié)構(gòu)域(HDl)的工程改造的多肽，其中ABD包括選自SEQ ID NO: 301_452、455_463和500-593的肽的任一個(gè)。
251.減少受試者體重的方法，包括外周給予治療有效量的至少兩種不同的抗肥胖劑，其中至少一種抗肥胖劑是胰島淀粉樣多肽、胰島淀粉樣多肽類似物、胰島淀粉樣多肽激動劑或胰島淀粉樣多肽衍生物(即，胰島淀粉樣多肽藥劑)，且至少一種抗肥胖劑是包含白蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域多肽(ABD)和選自瘦蛋白、瘦蛋白類似物或其活性片段的第一肽激素結(jié)構(gòu)域(HDl)的工程改造的多肽，其中ABD包括選自SEQ ID NO: 301_452、455_463和500-593的肽的任一個(gè)。
252.權(quán)利要求250或251中任一項(xiàng)的方法，其中所述至少一種抗肥胖胰島淀粉樣多肽藥劑是胰島淀粉樣多肽激動劑。
253.權(quán)利要求250-252中任一項(xiàng)的方法，其中所述胰島淀粉樣多肽激動劑包括胰島淀粉樣多肽類似物或衍生物。
254.權(quán)利要求250-253中任一項(xiàng)的方法，其中所述胰島淀粉樣多肽類似物或衍生物包括普蘭林肽。
255.權(quán)利要求250-254中任一項(xiàng)的方法，其中所述胰島淀粉樣多肽類似物或衍生物包括表4中所公開的化合物。
256.權(quán)利要求250-255中任一項(xiàng)的方法，其中所述胰島淀粉樣多肽類似物或衍生物包括脫-Lysl-[Lys26(mPEG40K)]_ 普蘭林肽(SEQ ID NO: 214)。
257.權(quán)利要求250-256中任一項(xiàng)的方法,其中所述HDl包括選自以下的氨基酸序列:
258.權(quán)利要求250-257中任一項(xiàng)的方法，其中所述HDl是SEQID NO: 29。
259.權(quán)利要求250-258中任一項(xiàng)的方法，其中所述工程改造的多肽包括表2中所公開的化合物。
260.權(quán)利要求250-259中任一項(xiàng)的方法，其中所述工程改造的多肽包括選自SEQIDNO: 594-663和681的氛基酸序列。
261.權(quán)利要求250-260中任一項(xiàng)的方法，其中所述工程改造的多肽包括SEQIDNO:595的氨基酸序列。
262.權(quán)利要求250-260中任一項(xiàng)的方法，其中所述工程改造的多肽包括SEQIDNO:657的氨基酸序列。
263.權(quán)利要求250-262中任一項(xiàng)的方法，其中有效量的胰島淀粉樣多肽藥劑和有效量的工程改造的多肽包括這樣的量，其使得當(dāng)將胰島淀粉樣多肽藥劑與工程改造的多肽組合給予所述受試者時(shí)，獲得比當(dāng)單獨(dú)給予任一藥劑時(shí)獲得的體重減輕的量更大量的體重減輕。
264.權(quán)利要求250-263中任一項(xiàng)的方法，其中將所述兩種藥劑同時(shí)給予。
265.權(quán)利要求250-264中任一項(xiàng)的方法，其中將所述兩種藥劑混合在一起。
266.權(quán)利要求250-265中任一項(xiàng)的方法，其中受試者的BMI大于25。
267.權(quán)利要求250-266中任一項(xiàng)的方法，其中受試者的BMI為25-35。
268.權(quán)利要求250-267中任一項(xiàng)的方法，其中受試者的BMI為25-40。
269.權(quán)利要求250-268中任一項(xiàng)的方法，其中受試者的BMI為25-45。
270.權(quán)利要求250-269中任一項(xiàng)的方法，其中受試者的BMI為35-45。
271.權(quán)利要求250-270中任一項(xiàng)的方法，其中受試者的BMI減少至小于30。
272.權(quán)利要求250-271中任一項(xiàng)的方法，其中受試者的BMI減少至小于25。
273.權(quán)利要求250-272中任一項(xiàng)的方法，其中受試者的BMI減少至正常。
274.權(quán)利要求250-273中任一項(xiàng)的方法，其中在治療4周內(nèi)實(shí)現(xiàn)體重減輕。
275.權(quán)利要求250-274中任一項(xiàng)的方法，其中在治療8周內(nèi)實(shí)現(xiàn)體重減輕。
276.權(quán)利要求250-275中任一項(xiàng)的方法，其中在治療12周內(nèi)實(shí)現(xiàn)體重減輕。
277.權(quán)利要求250-276中任一項(xiàng)的方法，其中在治療20周內(nèi)實(shí)現(xiàn)體重減輕。
278.權(quán)利要求250-277中任一項(xiàng)的方法，其中在治療24周內(nèi)實(shí)現(xiàn)體重減輕。
279.權(quán)利要求250-278中任一項(xiàng)的方法，其中受試者是人。
280.權(quán)利要求250-279中任一項(xiàng)的方法，其中受試者是肥胖人。
281.權(quán)利要求250-280中任一項(xiàng)的方法，其中體重減輕減少至少10%。
282.權(quán)利要求250-281中任一項(xiàng)的方法，其中體重減輕減少至少12%。
283.權(quán)利要求250-282中任一項(xiàng)的方法，其中體重減輕減少至少15%。
【文檔編號】A61K38/22GK103957926SQ201280043718
【公開日】2014年7月30日 申請日期:2012年7月3日 優(yōu)先權(quán)日:2011年7月8日
【發(fā)明者】M.埃里克森, D.C.利青格爾, S.S.高希, Z.郭, C.?？瞬祭瓘? J.D.羅思 申請人:安米林藥品有限責(zé)任公司, 阿斯利康制藥有限公司