锝標(biāo)記的肽的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及包含適于體內(nèi)SPECT或PET成像的放射性標(biāo)記的c-Met結(jié)合肽的锝成像劑。c-Met結(jié)合肽通過螯合劑綴合物標(biāo)記。還公開了藥物組合物、制備所述成像劑和組合物的方法以及使用所述組合物進(jìn)行體內(nèi)成像的方法，尤其是用于癌癥診斷的方法。
【專利說明】锝標(biāo)記的肽
發(fā)明領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及包含適于體內(nèi)SPECT或PET成像的放射性標(biāo)記的c_Met結(jié)合肽的锝成像劑。c-Met結(jié)合肽通過螯合劑綴合物標(biāo)記。還公開了藥物組合物、制備所述成像劑和組合物的方法以及使用所述組合物進(jìn)行體內(nèi)成像的方法，尤其是用于癌癥診斷的方法。
[002] 發(fā)明背景
肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)，亦稱分散因子(SF)，是參與各種生理學(xué)過程例如傷口愈合和血管發(fā)生的生長(zhǎng)因子。HGF與其受體(c-Met)相互作用的高親和力相互作用涉及腫瘤生長(zhǎng)、侵入和轉(zhuǎn)移。
[0003]Knudsen等人對(duì)HGF和c_Met在前列腺癌中的作用進(jìn)行了綜述,其可推論用于成像和治療[Adv.Cancer Res.,91,31-67 (2004)]。用于診斷和治療的標(biāo)記的抗met抗體描述于 WO 03/057155。
[0004]已表明c-Met在許多人類上皮源癌癥中涉及腫瘤生長(zhǎng)、侵入和轉(zhuǎn)移。大多數(shù)癌表達(dá)c-Met，在包括以下的許多癌癥中檢測(cè)出與正常組織相比c-Met表達(dá)升高:肺癌、乳腺癌、結(jié)腸直腸癌、胰腺癌、頭頸癌、胃癌、肝細(xì)胞癌、卵巢癌、腎癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、黑素瘤和多種肉瘤。在結(jié)腸直腸癌(CRC)中，在發(fā)育異常的異常隱窩病灶(該病最早的腫瘤發(fā)生前病變)中檢測(cè)到c-Met過量表達(dá)。在頭頸鱗狀細(xì)胞癌中，據(jù)報(bào)道c-Met在大約80%的原發(fā)腫瘤中表達(dá)或過量表達(dá)。在前列腺癌到骨的轉(zhuǎn)移中，有報(bào)道稱c-Met在超過80%的骨轉(zhuǎn)移中過量表達(dá)。
[0005]在正常條件下，c-Met在上皮細(xì)胞中表達(dá)，并被間充質(zhì)來源的HGF以旁分泌方式激活。正常細(xì)胞中c-Met的活化是一個(gè)瞬變事件，并受嚴(yán)格調(diào)節(jié)。然而，在腫瘤細(xì)胞中，c-Met可以是組成型活性的。在癌中，可通過c-Met擴(kuò)增/過量表達(dá)、激活c-Met突變(例如結(jié)構(gòu)改變)和通過產(chǎn)生自分泌信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)環(huán)獲得自主生長(zhǎng)控制，來實(shí)現(xiàn)異常的c-Met刺激。另外，c-Met受體有缺陷的減量調(diào)節(jié)也促進(jìn)細(xì)胞膜中的異常c-Met表達(dá)。雖然c_Met的過量表達(dá)是HGF依賴性的(自分泌/旁分泌)，但是由突變引起的結(jié)構(gòu)變化是HGF非依賴性的(例如胞外域喪失)。
[0006]WO 2004/078778公開了結(jié)合c_Met或包含c_Met和HGF的絡(luò)合物的多肽或多聚體肽構(gòu)建體。描述了大約10種不同的結(jié)構(gòu)類別的肽。WO 2004/078778公開了這些肽可用可檢測(cè)標(biāo)記進(jìn)行標(biāo)記用于體外和體內(nèi)應(yīng)用，或可用藥物標(biāo)記用于治療應(yīng)用。可檢測(cè)標(biāo)記可以是酶、熒光化合物、光學(xué)染料、順磁金屬離子、超聲造影劑或放射性核素。W02004/078778的優(yōu)選標(biāo)記被描述為放射性的或順磁的，最優(yōu)選包括被金屬螯合劑螯合的金屬。W02004/078778描述其中的放射性核素可選自:18F、1241、1251、1311、1231、77Br、76Br、99nTC、51Cr、67Ga、68Ga、47SC、167Tm^141Ce,111In,168Yb,175Yb,140La,90Y,88Y,153Sm,166Ho,165Dy,166Dy^62Cu,64Cu,67Cu^97Ru,103Ru,186Re, 203Pb,211Bi,212Bi,213Bi,214Bi, 105Rh, 109Pd, 117mSn, 149Pm, 161Tb, 177Lu, 198Au 和 199Au0 WO2004/078778描述(第62頁)用于診斷目的的優(yōu)選的放射性核素為:64Cu、67Ga、68Ga、99mTc和mIn，其中特別優(yōu)選99mTc。
[0007]WO 2004/078778在實(shí)施例14-17中教導(dǎo)延長(zhǎng)c-Met結(jié)合肽的血清停留時(shí)間的方法:與非共價(jià)結(jié)合人血清白蛋白的部分綴合、與PEG綴合、與血清蛋白質(zhì)融合和與馬來酰亞胺綴合。
[0008]WO 2009/016180公開了包含下式I的綴合物的成像劑:
【權(quán)利要求】
1.一種成像劑，其包含C-Met結(jié)合肽的螯合劑綴合物的放射性xTc絡(luò)合物，所述螯合劑綴合物具有下式1:
2.權(quán)利要求1的成像劑，其中Q包含SEQ-2或SEQ-3的氨基酸序列: Ser-Cysa-Xl-Cysc-X2-Gly-Pro-Pro-X3-Phe-Glu-Cysd-Trp-Cysb-Tyr-X4-X5-X6(SEQ-2)；
Ala-Gly-Ser-Cysa-Xl-Cysc-X2-Gly-Pro-Pro-X3-Phe-Glu-Cysd-Trp-Cysb-Tyr-X4-X5-X6-Gly-Thr (SEQ-3)。
3.權(quán)利要求1或2的成像劑，其中X3為Arg。
4.權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)的成像劑，其中A和Ai之一為L(zhǎng)ys( ε -Z3)，且cMBP只包含一個(gè)Lys殘基。
5.權(quán)利要求4的成像劑，其 中cMBP具有下式IIA:
6.權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的成像劑，其中-(A)x-或-(A')y-基團(tuán)包含選自以下的接頭妝:
-Gly-Gly-Gly-Lys- (SEQ-4)、 -Gly-Ser-Gly-Lys- (SEQ-5)或 -Gly-Ser-Gly-Ser-Lys- (SEQ-6), 且Z3基團(tuán)與所述接頭肽的Lys殘基的ε胺基連接。
7.權(quán)利要求6的成像劑，其中cMBP具有氨基酸序列(SEQ-7):
Ala-Gly-Ser-Cysa-Tyr-Cysc-Ser-Gly-Pro-Pro-Arg-Phe-Glu-Cysd-Trp-Cysb-Tyr-Glu-Thr-Glu-Gly-Thr-Gly-Gly-Gly-Lys ο
8.權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)的成像劑，其中所述螯合劑具有下式IIIA:
9.權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)的成像劑，其中xTc為99mTc。
10.權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所定義的式I的螯合劑綴合物。
11.一種制備權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)的成像劑的方法，所述方法包括使權(quán)利要求10的螯合劑綴合物在合適的溶劑中與一定量的權(quán)利要求1或9定義的xTc反應(yīng)。
12.—種放射性藥物組合物，其包含呈適于哺乳動(dòng)物給予的形式的權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)的成像劑以及生物相容性載體。
13.一種用于制備權(quán)利要求12的放射性藥物組合物的試劑盒，其包括呈無菌固體形式的權(quán)利要求10的螯合劑綴合物，使得在用含有無菌的一定量的放射性xTc的生物相容性載體復(fù)溶時(shí)發(fā)生溶解，得到所需的放射性藥物組合物； 其中xTc如權(quán)利要求1或9所定義。
14.一種使人體或動(dòng)物體成像的方法，所述方法包括采用PET或SPECT產(chǎn)生所述機(jī)體的至少一部分的圖像，其中權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)的成像劑或權(quán)利要求12的放射性藥物組合物分布在所述機(jī)體中，其中提前已將所述成像劑或組合物給予所述機(jī)體。
15.權(quán)利要求14的方法，其中所述圖像具有c-Met過量表達(dá)或定位的部位。
16.權(quán)利要求15的方法，其中c-Met過量表達(dá)或定位的部位是癌癥或癌前病變。
17.權(quán)利要求14-16中任一項(xiàng)的方法，所述方法重復(fù)進(jìn)行以監(jiān)測(cè)用藥物或放射治療人體或動(dòng)物體的效果，所述成像在所述治療之前和之后、任選還在所述治療期間形成。
18.權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)的成像劑、權(quán)利要求12的組合物或權(quán)利要求13或14的試劑盒在人體或動(dòng)物體的診斷方法中的用途。
【文檔編號(hào)】A61K51/08GK103547291SQ201280011486
【公開日】2014年1月29日 申請(qǐng)日期:2012年3月2日 優(yōu)先權(quán)日:2011年3月4日
【發(fā)明者】P.B.艾夫森, B.因德雷沃爾, B.牛頓, R.巴拉, E.W.約翰森 申請(qǐng)人:通用電氣健康護(hù)理有限公司