生物相容性磁性稀土納米顆粒、其制備及磁共振成像應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及具有兩個(gè)以上能夠與納米顆粒結(jié)合的絡(luò)合基團(tuán)的生物相容性配體修飾的生物相容性磁性稀土納米顆粒、其制備方法及磁共振成像及磁共振/光學(xué)成像應(yīng)用。本發(fā)明所采用的技術(shù)方法具有工藝簡(jiǎn)單、操作簡(jiǎn)便的特點(diǎn)。采用該技術(shù)制備的磁性納米顆粒粒徑均一可控、結(jié)晶度高、生物相容性好，并可通過(guò)摻雜不同稀土元素使納米顆粒具有熒光或上轉(zhuǎn)換熒光性質(zhì)。最重要的是，所得到的磁性納米顆粒樣品在生理緩沖液中表現(xiàn)出良好的膠體穩(wěn)定性，長(zhǎng)期放置后依然保持高的水相分散性和磁學(xué)性質(zhì)，因此，采用該技術(shù)方法制備的生物相容性磁性納米顆粒適于規(guī)模化和商業(yè)化生產(chǎn)，在磁共振成像領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景和市場(chǎng)前景。
【專利說(shuō)明】生物相容性磁性稀土納米顆粒、其制備及磁共振成像應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于材料化學(xué)、納米科學(xué)及其生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，特別涉及利用高溫反應(yīng)法和“配體置換”法制備高結(jié)晶度、能在生理緩沖液中高度溶解并穩(wěn)定分散的生物相容性磁性稀土納米顆粒。
【背景技術(shù)】
[0002]磁性稀土納米顆粒在核磁共振造影(MRI)、細(xì)胞分離與標(biāo)記以及靶向藥物載體等生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用前景。然而，納米顆粒的磁響應(yīng)特性、生物相容性以及在生理?xiàng)l件下的穩(wěn)定性一直制約著磁性納米顆粒在上述領(lǐng)域中的應(yīng)用。
[0003]目前，磁性納米顆粒的化學(xué)制備方法主要包括:共沉淀法、高溫反應(yīng)法、微乳液法、超聲化學(xué)法等。其中高溫反應(yīng)法包括高溫?zé)岱纸夥案邷貜?fù)分解反應(yīng)法，其特點(diǎn)是在非水體系中進(jìn)行制備反應(yīng)，同時(shí)反應(yīng)溫度高于水的常壓沸點(diǎn)溫度。共沉淀法制備得到的納米顆粒尺寸分布寬，產(chǎn)物組成不夠明確；微乳液法制備的納米顆粒結(jié)晶度差，磁響應(yīng)弱；超聲化學(xué)法在納米顆粒的尺寸和形貌控制方面較差。近年來(lái)興起的高溫反應(yīng)法則克服了上述制備方法的缺點(diǎn)。由于高溫反應(yīng)法采用較高的反應(yīng)溫度，有利于控制納米顆粒的成核和生長(zhǎng)過(guò)程，因此所得到的納米顆粒結(jié)晶度高，尺寸分布窄。然而，高溫反應(yīng)法制備納米顆粒一般要采用帶有長(zhǎng)烷基鏈的飽和脂肪酸和/或胺分子以及不飽和脂肪酸和/或胺(如:油酸、油胺)作穩(wěn)定劑。這種修飾使得到的納米顆粒一般只能溶解或分散在非極性或弱極性的有機(jī)介質(zhì)中，因此，不能在單顆粒尺度上被用于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。通過(guò)后期配體置換可以使表面具有疏水結(jié)構(gòu)的納米顆粒具有水溶性，同時(shí)在納米顆粒表面引入活性功能基團(tuán)，使納米顆粒表面可以共價(jià)耦聯(lián)上具有生 物靶向的生物分子，如抗體、受體、核酸和多肽等，并且通過(guò)改變與納米顆粒結(jié)合的配位基團(tuán)的種類和數(shù)量有望提高納米顆粒在生理緩沖液中的分散性和膠體穩(wěn)定性。
[0004]稀土納米顆粒特殊的磁學(xué)性質(zhì)及光學(xué)性質(zhì)使其在生物分析及生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域展示出廣闊的應(yīng)用前景。最近，稀土納米顆粒的制備已經(jīng)取了一系列的研究成果(Nature 2008，463，1323 ；Adv.Mater.2008，20，4765 ；Chem.Mater.2009，21，717 ；Chem.Mater.2011，23，3714)，然而這些納米顆粒不能直接作為磁共振造影劑及分子影像探針。為了進(jìn)一步將其應(yīng)用于生物分析領(lǐng)域如磁共振造影、腫瘤標(biāo)記和成像，生物體內(nèi)造影成像等領(lǐng)域，納米顆粒不僅需要具有生物相容性，同時(shí)還需要在生理緩沖液中表現(xiàn)出穩(wěn)定分散特性。而磁共振分子影像探針的構(gòu)建還需要納米顆粒表面具有可反應(yīng)基團(tuán)以便進(jìn)一步共價(jià)耦聯(lián)生物靶向分子如抗體，受體，核酸和多肽等。目前文獻(xiàn)報(bào)道的水溶性稀土納米顆粒，由于其表面配體與納米顆粒配位能力不足，結(jié)合力差，因此在生理緩沖液中膠體穩(wěn)定性不高，易發(fā)生聚集和沉淀。因此無(wú)法用于構(gòu)建適于生物體內(nèi)應(yīng)用的分子影像探針。而本發(fā)明涉及的生物相容性稀土納米顆粒在生理緩沖液中能夠高度溶解并穩(wěn)定分散，不僅適用于生物體內(nèi)外應(yīng)用，而且還可以通過(guò)耦聯(lián)生物靶向分子構(gòu)建分子探針，并在生物體內(nèi)實(shí)現(xiàn)對(duì)病灶區(qū)域的靶向磁共振及光學(xué)成像。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明是通過(guò)高溫反應(yīng)制備出結(jié)晶度高，粒度分布窄，粒徑尺寸可調(diào)的磁性稀土納米顆?；虼判?熒光稀土納米顆粒；再通過(guò)利用含有兩個(gè)以上絡(luò)合基團(tuán)的生物相容性配體(雙齒或多齒配體)進(jìn)行配體交換，制備在生理緩沖液中能夠高度溶解并穩(wěn)定分散的稀土納米顆粒；選用生物相容性高分子的鏈段上一端具有所述的兩個(gè)以上的絡(luò)合基團(tuán)，另一端具有一個(gè)以上能夠與生物分子共價(jià)耦聯(lián)的基團(tuán)進(jìn)行配體交換，得到具有表面活性功能基團(tuán)的生物相容性稀土納米顆粒；通過(guò)表面活性功能基團(tuán)與生物分子的耦聯(lián)制備具有靶向性的納米顆粒，從而實(shí)現(xiàn)以下發(fā)明目的:
[0006]本發(fā)明的目的之一是提供一種表面為雙齒或多齒生物相容性配體修飾的磁性稀土納米顆粒及兼具磁性和熒光的稀土納米顆粒。
[0007]本發(fā)明的目的之二是提供的生物相容性磁性稀土納米顆粒干粉樣品長(zhǎng)期保存后仍能完全溶于水及生理緩沖液中，形成穩(wěn)定膠體溶液。
[0008]本發(fā)明的目的之三是提供的生物相容性磁性稀土納米顆粒在生理緩沖液中具有高度穩(wěn)定性。
[0009]本發(fā)明的目的之四在于提供的生物相容性磁性稀土納米顆粒，其表面聚合物修飾層所攜帶的功能基團(tuán)可直接被用于磁性稀土納米顆粒與生物分子的共價(jià)耦聯(lián)。
[0010]本發(fā)明的目的之五是提供的生物相容性磁性稀土納米顆粒，其尺寸可以通過(guò)反應(yīng)條件進(jìn)行調(diào)控。
[0011]本發(fā)明的目的之六是提供一種在生理緩沖液中高度溶解并穩(wěn)定分散的生物相容性稀土納米顆粒的“配體置換”制備方法。
[0012]本發(fā)明的目的之七是提供一種以生物相容性磁性稀土納米顆粒作為造影劑或分子影像探針應(yīng)用于磁共振成像診斷及磁共振/光學(xué)成像。
[0013]本發(fā)明的一個(gè)方面涉及一種生物相容性磁性稀土納米顆粒，所述生物相容性磁性稀土納米顆粒的表面修飾有生物相容性高分子，所述生物相容性高分子的高分子鏈段上帶有兩個(gè)以上能夠與稀土納米顆粒結(jié)合的絡(luò)合基團(tuán)，其中生物相容性高分子占生物相容性磁性納米顆粒的質(zhì)量百分含量是2~90%。
[0014]本發(fā)明的生物相容性稀土納米顆粒在生理緩沖液中能夠高度溶解并穩(wěn)定分散，一般具有順磁性，稀土納米顆粒的粒徑是I~200納米，粒子尺寸的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于10%，在磁性納米顆粒表面修飾有生物相容性高分子。
[0015]修飾在表面上的生物相容性高分子占生物相容性磁性納米顆粒的質(zhì)量百分含量是2~90 %，優(yōu)選10~80 %，更優(yōu)選20~70 %，以獲得具有良好的生物相容性的磁性納米顆粒。
[0016]所述的生物相容性高分子的分子量在200~20000，優(yōu)選600~6000 ;主要選自線型、支化的聚乙二醇(PEG)，也包括線型、支化的聚乙二醇與聚丙烯酸(PAA)、聚甲基丙烯酸(PMA)、聚乙烯胺(PEI)、聚丙氨酸、聚賴氨酸、聚亮氨酸、聚谷氨酸、聚天冬氨酸或聚乳酸(PLA)形成的嵌段共聚物中的至少一種。
[0017]所述的生物相容性高分子的鏈段上帶有兩個(gè)以上能夠與稀土納米顆粒結(jié)合的絡(luò)合基團(tuán)，這些基團(tuán)選自由磷酸基團(tuán)、羧基、胺基、羥基和巰基組成的組。[0018]所述的生物相容性高分子除在高分子鏈段上帶有兩個(gè)以上能夠與稀土納米顆粒結(jié)合的絡(luò)合基團(tuán)外，還可以在高分子鏈段的另一端具有一個(gè)以上能夠與生物分子共價(jià)耦聯(lián)的基團(tuán)。所述的生物相容性高分子的鏈段上所帶有的一個(gè)以上能夠直接實(shí)現(xiàn)與生物分子進(jìn)行共價(jià)耦聯(lián)的基團(tuán)選自由羧基、胺基、馬來(lái)酰亞胺基、呋喃基、巰基、生物素和親和素基團(tuán)組成的組。
[0019]所述的磁性納米顆粒主要是釓的無(wú)機(jī)化合物顆粒，也包括鐠、釹、钷、釤、銪、鋱、鏑、欽、鉺及銩的化合物顆粒。例如氧化物顆粒、氟化物顆粒及氟化物復(fù)鹽顆粒。
[0020]本發(fā)明的生物相容性磁性納米顆粒的干粉樣品溶于生理緩沖液時(shí)的溶解度為0.lg/L~60g/L,且所得溶液放置半年后仍無(wú)沉淀析出。
[0021]本發(fā)明所述生理緩沖液包括磷酸鹽緩沖生理鹽水(PBS)、無(wú)菌磷酸生理緩沖液(D-PBS)、Hank’ s 平衡鹽溶液(HBSS)或 Earle’ s 平衡鹽溶液(EBSS)。
[0022]本發(fā)明所述磁性納米顆粒表面攜帶有在溫和條件下可進(jìn)一步反應(yīng)的馬來(lái)酰亞胺基、巰基、羧基或胺基。利用該功能基團(tuán)可將本發(fā)明所述的生物相容性磁性納米顆粒與生物分子進(jìn)行共價(jià)耦聯(lián)。
[0023]本發(fā)明所述的生物分子包括抗體、氨基酸、多肽、蛋白、生物素、親和素、核酸的胺基衍生物或羧基衍生物等。
[0024]相比于采用含有單一絡(luò)合基團(tuán)的生物相容性分子配體(單齒配體)修飾的水溶性稀土納米顆粒，本發(fā)明的含有兩個(gè)以上絡(luò)合基團(tuán)的生物相容性分子配體(雙齒或多齒配體)修飾的磁性稀土納米顆粒結(jié)晶度高、生理緩沖液中能夠高度溶解并穩(wěn)定分散，而且具有生物相容性和靶向性，從而克服了單齒配體修飾的稀土納米顆粒在生理緩沖液中納米顆粒膠體穩(wěn)定性不高、無(wú)生物靶向性等不足。
[0025]本發(fā)明的第二方面涉及制備本發(fā)明的生物相容性磁性稀土納米顆粒的方法。
[0026]本發(fā)明的生物相容性磁性稀土納米顆粒的制備方法包括以下步驟:
[0027](1)采用高溫反應(yīng)法，利用高沸點(diǎn)非極性溶劑作為反應(yīng)介質(zhì)，得到磁性稀土納米顆粒;
[0028](2)將上述磁性稀土納米顆粒與含有兩個(gè)以上能夠與稀土納米顆粒結(jié)合的絡(luò)合基團(tuán)及任選的一個(gè)以上能夠與生物分子共價(jià)耦聯(lián)的基團(tuán)的生物相容性高分子進(jìn)行配體交換反應(yīng)，從而獲得所述生物相容性磁性稀土納米顆粒。
[0029]具體而言，本發(fā)明的在生理緩沖液中能夠高度溶解并穩(wěn)定分散的生物相容性磁性納米顆粒的制備方法是采用納米顆粒成核與生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)可控的高溫反應(yīng)法和與含有雙齒或多齒配體的絡(luò)合基團(tuán)和功能基團(tuán)的生物相容性配體的“配體置換”法，包括以下步驟:
[0030](I)在反應(yīng)容器中將有機(jī)金屬化合物或無(wú)機(jī)金屬鹽化合物前驅(qū)體(如氯化釓等)溶于高沸點(diǎn)混合溶劑(如油酸/十八烯混合溶劑)中形成混合反應(yīng)溶液，其中，反應(yīng)液中有機(jī)金屬化合物或無(wú)機(jī)金屬鹽化合物的濃度為0.001mol/L~0.2mol/L,優(yōu)選濃度為0.01~0.lmol/L;配位溶劑(如油酸等)的質(zhì)量百分含量為0.4%~80%，優(yōu)選4%~40% ;向混合溶液中加入含有氟化物(如氟化銨)的溶液，形成納米晶核；
[0031](2)通入惰性氣體排除反應(yīng)體系中的氧氣，將步驟(1)的反應(yīng)液加熱反應(yīng)，得到粒度分布窄、粒徑尺寸可控的納米顆粒；反應(yīng)溫度控制在120~350°C，優(yōu)選180~330°C ;反應(yīng)時(shí)間為0.2~50小時(shí)，優(yōu)選0.5~25小時(shí)；[0032](3)將步驟(2)中的反應(yīng)液冷卻至室溫，加入體積為反應(yīng)液體積I~20倍的有機(jī)溶劑(乙醚、石油醚、甲醇、乙醇、丙酮或它們的混合物等)沉淀出納米顆粒，并用同樣的有機(jī)溶劑洗滌納米顆粒3~5次，通過(guò)離心分離得到納米顆粒；
[0033](4)將步驟(3)所得納米顆粒溶液用有機(jī)溶劑(二氯甲烷、三氯甲烷、四氫呋喃、二甲亞砜或它們的混合物等)溶解，納米顆粒的濃度為0.001mol/L~0.2mol/L，優(yōu)選濃度為0.01~0.lmol/L，將含有生物相容性高分子的有機(jī)溶液(溶劑為二氯甲烷、三氯甲烷、四氫呋喃、二甲亞砜或它們的混合物等)反應(yīng)I~100小時(shí)，優(yōu)選2~40小時(shí)；真空干燥后即可得到易于存儲(chǔ)和運(yùn)輸?shù)纳锵嗳菪源判约{米顆粒干粉；
[0034](5)將步驟(4)所得生物相容性納米顆粒溶液用有機(jī)溶劑(環(huán)己烷、正己烷、石油醚、乙醚或它們的混合物等)沉淀，并用同樣的有機(jī)溶劑洗滌納米顆粒3~5次，真空干燥后即可得到易于存儲(chǔ)和運(yùn)輸?shù)纳锵嗳菪皂槾判约{米顆粒干粉；
[0035](6)將步驟(5)所得生物相容性磁性納米顆粒干粉樣品溶于生理緩沖液中得到穩(wěn)定的膠體溶液。
[0036]所述的高沸點(diǎn)非極性溶劑的沸點(diǎn)為160_370°C，包括苯醚、二芐基醚、1-十八烯、
三辛基膦、三辛胺、油胺和油酸；
[0037]所述的有機(jī)金屬化合物包括稀土元素(包括鐠、釹、钷、衫、銪、禮、鋪、鏑、欽、鉺及銩)的乙酰丙酮鹽、醋酸鹽、 草酸鹽及檸檬酸鹽。
[0038]所述的無(wú)機(jī)金屬鹽化合物包括稀土元素(包括鐠、釹、钷、釤、銪、釓、鋱、鏑、欽、鉺及銩)的水合及無(wú)水氯化鹽、硝酸鹽和硫酸鹽。
[0039]所述的生物相容性高分子的分子量在200~20000，優(yōu)選600~6000 ;主要選自線型、支化的聚乙二醇，也包括線型、支化的聚乙二醇與聚丙烯酸、聚甲基丙烯酸、聚乙烯胺、聚丙氨酸、聚賴氨酸、聚亮氨酸、聚谷氨酸、聚天冬氨酸或聚乳酸形成的嵌段共聚物中的一種。上述生物相容性高分子的結(jié)構(gòu)特征是在高分子鏈段上帶有兩個(gè)及以上絡(luò)合基團(tuán)，絡(luò)合基團(tuán)為羧基、胺基、羥基、巰基及磷酸基團(tuán)；并含有一個(gè)及以上活性功能基團(tuán)，活性功能基團(tuán)為呋喃基、馬來(lái)酰亞胺基、巰基、羥基、羧基或胺基基團(tuán)。
[0040]本發(fā)明可通過(guò)改變反應(yīng)條件，包括溶劑種類與比例、反應(yīng)前驅(qū)體比例等制備得到球形、圓盤狀或六方柱狀等不同形狀的納米顆粒。
[0041]本發(fā)明可通過(guò)改變反應(yīng)條件，包括金屬前驅(qū)體的濃度、反應(yīng)時(shí)間、生物相容性高分子的分子量和濃度，以及采用種子誘導(dǎo)生長(zhǎng)的方法制備得到不同粒徑的納米顆粒。
[0042]本發(fā)明的第三方面涉及本發(fā)明的生物相容性磁性稀土納米顆粒在磁共振及磁共振/光學(xué)成像中的應(yīng)用。
[0043]本發(fā)明所描述的生物相容性磁性納米顆粒與生物分子的共價(jià)耦聯(lián)，可采用常規(guī)方法，如:
[0044](I)將表面帶有羧基的生物相容性磁性納米顆?；蛏锓肿尤苡趐H值為5.0~
6.5的生理緩沖液中配成溶液，然后向該溶液中加入EDC ^HCl (1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽)和Sulfo-NHS (N-羥基硫代琥珀酰亞胺)將羧基進(jìn)行活化，混勻，室溫下反應(yīng)10~20min ；
[0045](2)向步驟(1)的反應(yīng)液中加入表面帶有氨基，pH值為7.5~8.0的生物分子或生物相容性磁性納米顆粒的生理緩沖溶液，使反應(yīng)液的PH值高于7.0，混勻，室溫下反應(yīng)2~4h0
[0046]或采用“點(diǎn)擊化學(xué)”方法，如:
[0047](I)將抗體與還原劑(NaBH4, TCEP等)室溫共孵育15~45min，將抗體中二硫鍵部分還原為疏基；
[0048](2)將表面修飾有活性功能基團(tuán)(如馬來(lái)酰亞胺基)的納米顆粒與部分還原后的抗體共孵育20~60min，使抗體與納米粒子耦聯(lián)，高速離心方法收集抗體標(biāo)記的納米顆粒，將抗體-納米粒子耦聯(lián)物重新分散于生理緩沖溶液中。
[0049]所述的生物分子包括抗體、氨基酸、多肽、蛋白、生物素、親和素、核酸及核酸衍生物等。
[0050]本發(fā)明所述的生物相容性磁性納米顆粒的磁學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，摩爾弛豫率高，且與生物分子的耦聯(lián)物具有高度的生物學(xué)活性，在臨床診斷及生物標(biāo)記和分析檢測(cè)領(lǐng)域具有巨大的應(yīng)用價(jià)值。
[0051]本發(fā)明利用生物相容性磁性稀土納米顆粒構(gòu)建磁共振成像造影劑及分子影像探針的技術(shù)方法具有工藝簡(jiǎn)單、操作簡(jiǎn)便、生物相容性好及摩爾弛豫率高的特點(diǎn)，即通過(guò)高溫反應(yīng)和“配體置換”反應(yīng)所制備生物相容性磁性稀土納米顆粒結(jié)晶度高、粒度分布窄、尺寸可調(diào)、在生理緩沖液中高度溶解并穩(wěn)定分散，且表面帶有功能基團(tuán)，可進(jìn)一步進(jìn)行生物耦聯(lián)。顆粒干粉樣品良好的溶解性為存儲(chǔ)和運(yùn)輸提供了巨大的方便，適于規(guī)模化和商業(yè)化生產(chǎn)，具有廣闊的應(yīng)用前景和市場(chǎng)前景。
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0052]圖1.本發(fā)明實(shí)施例1所得NaGdF4納米顆粒的透射電鏡照片(A)及其粒徑分布柱狀圖⑶。
[0053]圖2.本發(fā)明實(shí)施例1所得NaGdF4納米顆粒的電子衍射照片。
[0054]圖3.本發(fā)明實(shí)施例2所得NaGdF4納米顆粒的透射電鏡照片(A)及其粒徑分布柱狀圖⑶。
[0055]圖4.本發(fā)明實(shí)施例3所得NaGdF4納米顆粒的透射電鏡照片(A)及其粒徑分布柱狀圖⑶。
[0056]圖5.本發(fā)明實(shí)施例15所得NaGdF4: Yb/Er納米顆粒的上轉(zhuǎn)換熒光發(fā)射光譜㈧和照片⑶。
[0057]圖6.本發(fā)明實(shí)施例20所得樣品的透射電鏡照片。
[0058]圖7.本發(fā)明實(shí)施例26所得耦聯(lián)物及其對(duì)照的紫外吸收(A)和熒光光譜圖(B)。
[0059]圖8.本發(fā)明實(shí)施例28所得生物相容性NaGdF4納米顆粒Tl加權(quán)像磁共振成像圖。
[0060]圖9.本發(fā)明實(shí)施例28所得生物相容性NaGdF4納米顆粒摩爾弛豫率。
[0061]圖10.本發(fā)明實(shí)施例29NaGdF4-EGFR_FITC耦聯(lián)物與人表皮癌細(xì)胞特異性結(jié)合的熒光顯微照片(A)及陰性對(duì)照細(xì)胞的熒光顯微照片(B)。
【具體實(shí)施方式】
[0062]以下實(shí) 施例用以舉例說(shuō)明本發(fā)明，以便于本領(lǐng)域技術(shù)人員更好地理解和實(shí)施本發(fā)明。但是，應(yīng)理解的是，這些實(shí)施例不以任何方式限制本發(fā)明的范圍。[0063]實(shí)施例1
[0064]將0.742g六水合氯化釓、6mL油酸溶解于30mL十八烯中，然后將上述溶液轉(zhuǎn)入IOOmL的三口燒瓶中，真空加熱脫水(90°C )5小時(shí)，反應(yīng)液冷卻至室溫。將0.45g氫氧化鈉和0.6g氟化銨溶于IOmL甲醇中，加入上述反應(yīng)液中。通入氮?dú)饧訜岬?50°C反應(yīng)IOh后停止反應(yīng)。待反應(yīng)液冷卻至室溫后，用乙醇沉淀出NaGdF4納米顆粒并洗滌三次，離心分離得到納米顆粒。將所得晶體溶于甲苯中，利用透射電鏡(TEM)表征，附圖1為NaGdF4順磁性納米顆粒的透射電鏡照片(A)及其粒徑分布柱狀圖(B)。由電鏡照片可知，生物相容性磁性納米顆粒為球形粒子，平均粒徑為19.8納米，粒徑相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為10%，單分散性好。附圖2中的電子衍射照片表明納米顆粒結(jié)晶度高。
[0065]實(shí)施例2
[0066]將0.742g六水合氯化釓、6mL油酸溶解于30mL十八烯中，然后將上述溶液轉(zhuǎn)入IOOmL的三口燒瓶中，真空加熱脫水(90°C) 5小時(shí)，反應(yīng)液冷卻至室溫。將0.45g氫氧化鈉和0.6g氟化銨溶于IOmL甲醇中，加入上述反應(yīng)液中。通入氮?dú)饧訜岬?80°C反應(yīng)IOh后停止反應(yīng)。其余操作均同實(shí)施例1，所得NaGdF4納米顆粒平均粒徑為14.8納米。附圖3為NaGdF4順磁性納米顆粒的透射電鏡照片(A)及其粒徑分布柱狀圖(B)。
[0067]實(shí)施例3
[0068]將0.742g六水合氯化釓、6mL油酸溶解于30mL十八烯中，然后將上述溶液轉(zhuǎn)入IOOmL的三口燒瓶中，真空加熱脫水(90°C )5小時(shí)，反應(yīng)液冷卻至室溫。將0.45g氫氧化鈉和0.6g氟化銨溶于IOmL甲醇中，加入上述反應(yīng)液中。通入氮?dú)饧訜岬?50°C反應(yīng)IOh后停止反應(yīng)。其余操作均同實(shí) 施例1，所得NaGdF4納米顆粒平均粒徑為5.4納米。附圖4為NaGdF4順磁性納米顆粒的透射電鏡照片(A)及其粒徑分布柱狀圖(B)。
[0069]實(shí)施例4
[0070]將0.768g六水合氯化釓、4mL油胺及12mL油酸溶解于30mL十八烯中，然后將上述溶液轉(zhuǎn)入IOOmL的三口燒瓶中，真空加熱脫水(90°C )5小時(shí)，反應(yīng)液冷卻至室溫。將0.45g氫氧化鈉和0.6g氟化銨溶于IOmL甲醇中，加入上述反應(yīng)液中。通入氮?dú)饧訜岬?70°C反應(yīng)IOh后停止反應(yīng)。其余操作均同實(shí)施例1，所得NaGdF4納米顆粒平均粒徑為11.8納米。
[0071]實(shí)施例5
[0072]將0.723g六水合氯化鐠、4mL油酸溶解于30mL十八烯中，然后將上述溶液轉(zhuǎn)入IOOmL的三口燒瓶中，真空加熱脫水(90°C )5小時(shí)，反應(yīng)液冷卻至室溫。將0.45g氫氧化鈉和0.6g氟化銨溶于IOmL甲醇中，加入上述反應(yīng)液中。通入氮?dú)饧訜岬?70°C反應(yīng)IOh后停止反應(yīng)。其余操作均同實(shí)施例1，所得NaPrF4納米顆粒平均粒徑為13.5納米。
[0073]實(shí)施例6
[0074]將0.728g六水合氯化釹、4mL油酸溶解于30mL十八烯中，然后將上述溶液轉(zhuǎn)入IOOmL的三口燒瓶中，真空加熱脫水(90°C )5小時(shí)，反應(yīng)液冷卻至室溫。將0.45g氫氧化鈉和0.6g氟化銨溶于IOmL甲醇中，加入上述反應(yīng)液中。通入氮?dú)饧訜岬?70°C反應(yīng)IOh后停止反應(yīng)。其余操作均同實(shí)施例1，所得NaNdF4納米顆粒平均粒徑為14.7納米。
[0075]實(shí)施例7
[0076]將0.734g六水合氯化钷、6mL油酸溶解于30mL十八烯中，然后將上述溶液轉(zhuǎn)入IOOmL的三口燒瓶中，真空加熱脫水(90°C )5小時(shí)，反應(yīng)液冷卻至室溫。將0.45g氫氧化鈉和0.6g氟化銨溶于IOmL甲醇中，加入上述反應(yīng)液中。通入氮?dú)饧訜岬?70°C反應(yīng)IOh后停止反應(yīng)。其余操作均同實(shí)施例1，所得NaPmF4納米顆粒平均粒徑為12.8納米。
[0077]實(shí)施例8
[0078]將0.740g六水合氯化釤、6mL油酸溶解于30mL十八烯中，然后將上述溶液轉(zhuǎn)入IOOmL的三口燒瓶中，真空加熱脫水(90°C )5小時(shí)，反應(yīng)液冷卻至室溫。將0.45g氫氧化鈉和0.6g氟化銨溶于IOmL甲醇中，加入上述反應(yīng)液中。通入氮?dú)饧訜岬?70°C反應(yīng)IOh后停止反應(yīng)。其余操作均同實(shí)施例1，所得NaSmF4納米顆粒平均粒徑為15.9納米。
[0079]實(shí)施例9
[0080]將0.744g六水合氯化銪、6mL油酸溶解于30mL十八烯中，然后將上述溶液轉(zhuǎn)入IOOmL的三口燒瓶中，真空加熱脫水(90°C )5小時(shí)，反應(yīng)液冷卻至室溫。將0.45g氫氧化鈉和0.6g氟化銨溶于IOmL甲醇中，加入上述反應(yīng)液中。通入氮?dú)饧訜岬?70°C反應(yīng)IOh后停止反應(yīng)。其余操作均同實(shí)施例1，所得NaEuF4納米顆粒平均粒徑為15.2納米。
[0081]實(shí)施例10
[0082]將0.758g六水合氯化鋱、8mL油酸溶解于30mL十八烯中，然后將上述溶液轉(zhuǎn)入IOOmL的三口燒瓶中，真空加熱脫水(90°C )5小時(shí)，反應(yīng)液冷卻至室溫。將0.45g氫氧化鈉和0.6g氟化銨溶于IOmL甲醇中，加入上述反應(yīng)液中。通入氮?dú)饧訜岬?70°C反應(yīng)IOh后停止反應(yīng)。其余操作均同實(shí)施例1 ，所得NaTbF4納米顆粒平均粒徑為17.4納米。
[0083]實(shí)施例11
[0084]將0.758g六水合氯化鏑、8mL油酸溶解于30mL十八烯中，然后將上述溶液轉(zhuǎn)入IOOmL的三口燒瓶中，真空加熱脫水(90°C )5小時(shí)，反應(yīng)液冷卻至室溫。將0.45g氫氧化鈉和0.6g氟化銨溶于IOmL甲醇中，加入上述反應(yīng)液中。通入氮?dú)饧訜岬?40°C反應(yīng)IOh后停止反應(yīng)。其余操作均同實(shí)施例1，所得NaDyF4納米顆粒平均粒徑為13.1納米。
[0085]實(shí)施例12
[0086]將0.758g六水合氯化欽、8mL油酸溶解于30mL十八烯中，然后將上述溶液轉(zhuǎn)入IOOmL的三口燒瓶中，真空加熱脫水(90°C )5小時(shí)，反應(yīng)液冷卻至室溫。將0.45g氫氧化鈉和0.6g氟化銨溶于IOmL甲醇中，加入上述反應(yīng)液中。通入氮?dú)饧訜岬?70°C反應(yīng)IOh后停止反應(yīng)。其余操作均同實(shí)施例1，所得NaHoF4納米顆粒平均粒徑為16.2納米。
[0087]實(shí)施例13
[0088]將0.764g六水合氯化鉺、8mL油酸溶解于30mL十八烯中，然后將上述溶液轉(zhuǎn)入IOOmL的三口燒瓶中，真空加熱脫水(90°C )5小時(shí)，反應(yīng)液冷卻至室溫。將0.45g氫氧化鈉和0.6g氟化銨溶于IOmL甲醇中，加入上述反應(yīng)液中。通入氮?dú)饧訜岬?70°C反應(yīng)IOh后停止反應(yīng)。其余操作均同實(shí)施例1，所得NaErF4納米顆粒平均粒徑為14.3納米。
[0089]實(shí)施例14
[0090]將0.780g六水合氯化銩、8mL油酸溶解于30mL十八烯中，然后將上述溶液轉(zhuǎn)入IOOmL的三口燒瓶中，真空加熱脫水(90°C )5小時(shí)，反應(yīng)液冷卻至室溫。將0.45g氫氧化鈉和0.6g氟化銨溶于IOmL甲醇中，加入上述反應(yīng)液中。通入氮?dú)饧訜岬?70°C反應(yīng)IOh后停止反應(yīng)。其余操作均同實(shí)施例1，所得NaTmF4納米顆粒平均粒徑為15.9納米。
[0091]實(shí)施例15
[0092]將0.682g六水合氯化禮、0.157g六水合氯化鐿、0.044g六水合氯化鉺、8mL油酸溶解于30mL十八烯中，然后將上述溶液轉(zhuǎn)入IOOmL的三口燒瓶中，真空加熱脫水(90°C )5小時(shí)，反應(yīng)液冷卻至室溫。將0.45g氫氧化鈉和0.6g氟化銨溶于IOmL甲醇中，加入上述反應(yīng)液中。通入氮?dú)饧訜岬?700C反應(yīng)IOh后停止反應(yīng)。其余操作均同實(shí)施例1，所得NaGdF4: Yb/Er納米顆粒平均粒徑為18.4納米,具有上轉(zhuǎn)換突光性質(zhì)，980nm近紅外激光激發(fā)下納米顆粒的上轉(zhuǎn)換熒光發(fā)射峰在524nm，541nm和656nm，如圖5所示。
[0093]實(shí)施例16
[0094]將0.496g三氟乙酸釓、0.136g三氟乙酸鈉、8mL油酸及8mL油胺溶解于20mL十八烯中，然后將上述溶液轉(zhuǎn)入IOOmL的三口燒瓶中，通入氮?dú)獬?0分鐘，加熱到280°C反應(yīng)Sh后停止反應(yīng)。其余操作均同實(shí)施例1，所得NaGdF4納米顆粒平均粒徑為12.1納米。[0095]實(shí)施例17
[0096]將0.501g三氟乙酸鏑、0.136g三氟乙酸鈉、IOmL油酸及IOmL油胺溶解于20mL十八烯中，然后將上述溶液轉(zhuǎn)入IOOmL的三口燒瓶中，通入氮?dú)獬?0分鐘，加熱到280°C反應(yīng)8h后停止反應(yīng)。其余操作均同實(shí)施例1，所得NaDyF4納米顆粒平均粒徑為13.7納米。
[0097]實(shí)施例18
[0098]將0.496g三氟乙酸釓、8mL油酸及8mL油胺溶解于20mL十八烯中，然后將上述溶液轉(zhuǎn)入IOOmL的三口燒瓶中，通入氮?dú)獬?0分鐘，加熱到280°C反應(yīng)8h后停止反應(yīng)。其余操作均同實(shí)施例1，所得GdF3納米顆粒平均粒徑為9.6納米。
[0099]實(shí)施例19
[0100]將0.501g三氟乙酸鏑、IOmL油酸及IOmL油胺溶解于20mL十八烯中，然后將上述溶液轉(zhuǎn)入IOOmL的三口燒瓶中，通入氮?dú)獬?0分鐘，加熱到280°C反應(yīng)8h后停止反應(yīng)。其余操作均同實(shí)施例1，所得DyF3納米顆粒平均粒徑為8.9納米。
[0101]實(shí)施例20
[0102]將ImL實(shí)施例1中得到的質(zhì)量百分濃度為I %的NaGdF4納米顆粒四氫呋喃溶液加入5mL質(zhì)量百分濃度為1%的雙齒磷酸-PEG2000(PEG2000-dp，由北京萬(wàn)德高科技發(fā)展有限公司生產(chǎn))四氫呋喃溶液中,攪拌反應(yīng)4小時(shí)。用環(huán)己烷沉淀出生物相容性NaGdF4納米顆粒并洗滌三次，離心分離得到納米顆粒。配體交換后，NaGdF4納米顆粒核磁共振實(shí)驗(yàn)顯示，油酸特征信號(hào)消失，PEG特征信號(hào)出現(xiàn)，表明雙齒-PEG配體將NaGdF4納米顆粒表面油酸配體完全取代。
[0103]將所得粒子溶于去離子水中，透析24小時(shí)，將所得溶液用丙酮進(jìn)行沉淀和洗滌，真空干燥后即可得到易于存儲(chǔ)和運(yùn)輸?shù)母煞?。將干粉分別溶于去離子水和0.01M PBS (磷酸鹽緩沖生理鹽水，pH = 7.4)中配成5g/L的溶液利用透射電鏡和激光光散射表征，附圖6為生物相容性NaGdF4納米顆粒的透射電鏡照片。由電鏡照片和光散射結(jié)果可知，生物相容性NaGdF4納米顆粒的在去離子水和生物緩沖液中具有高度的分散性。長(zhǎng)期光散射跟蹤表征，表明雙齒磷酸-PEG包被的生物相容性NaGdF4納米顆粒具有長(zhǎng)期膠體穩(wěn)定性。熱失重實(shí)驗(yàn)表明，所得生物相容性納米顆粒表面修飾的生物相容性高分子的質(zhì)量百分含量約為50%。
[0104]實(shí)施例21
[0105]將ImL實(shí)施例1中得到的質(zhì)量百分濃度為I %的NaDyF4納米顆粒四氫呋喃溶液，加入5mL質(zhì)量百分濃度為1%的四齒磷酸-PEG2000(PEG2000-tp，由北京萬(wàn)德高科技發(fā)展有限公司生產(chǎn))四氫呋喃溶液中，攪拌反應(yīng)4小時(shí)。其余操作均同實(shí)施例20。所得四齒磷酸-PEG2000包被的生物相容性NaGdF4納米顆粒具有水相分散性和膠體穩(wěn)定性。
[0106]實(shí)施例22
[0107]將ImL實(shí)施例15中得到的質(zhì)量百分濃度為1%的NaGdF4:Yb/Er納米顆粒四氫呋喃溶液，加入5mL質(zhì)量百分濃度為1%的雙齒磷酸-PEG2000四氫呋喃溶液中，攪拌反應(yīng)4小時(shí)。其余操作均同實(shí)施例20。所得雙齒磷酸-PEG2000包被的生物相容性NaGdF4: Yb/Er納米顆粒具有水相分散性和膠體穩(wěn)定性。
[0108]實(shí)施例23
[0109]將ImL實(shí)施例1中得到的質(zhì)量百分濃度為I %的NaGdF4納米顆粒四氫呋喃溶液，加入5mL質(zhì)量百分濃度為I %的磷酸-PEG-馬來(lái)酰亞胺(Mal-PEG2000_dp，由北京萬(wàn)德高科技發(fā)展有限公司生產(chǎn))的四氫呋喃溶液中，攪拌反應(yīng)4小時(shí)。其余操作均同實(shí)施例20。所得磷酸-PEG-馬來(lái)酰亞胺包被的生物相容性NaGdF4納米顆粒具有水相分散性和膠體穩(wěn)定性。
[0110]實(shí)施例24
[0111]將ImL實(shí)施例1中得到的質(zhì)量百分濃度為I %的NaGdF4納米顆粒四氫呋喃溶液，加入5mL質(zhì)量百分濃度為I %的磷酸-PEG-羧酸(H00C-PEG2000_dp，由北京萬(wàn)德高科技發(fā)展有限公司生產(chǎn))的四氫呋喃溶液中，攪拌反應(yīng)4小時(shí)。其余操作均同實(shí)施例20。所得磷酸-PEG-羧酸包被的生物相容性NaGdF4納米顆粒具有水相分散性和膠體穩(wěn)定性。
[0112]實(shí)施例25
[0113]將ImL實(shí)施例1中得到的質(zhì)量百分濃度為I %的NaGdF4納米顆粒四氫呋喃溶液，加入IOmL質(zhì)量百分濃度為I %的分子量為1800的聚丙烯酸(PAA)四氫呋喃溶液中，攪拌反應(yīng)8小時(shí)。其余操作均同實(shí)施例20。所得PAA包被的生物相容性NaGdF4納米顆粒具有水相分散性和膠體穩(wěn)定性。
[0114]實(shí)施例26
[0115]將ImL實(shí)施例1中得到的質(zhì)量百分濃度為I %的NaGdF4納米顆粒四氫呋喃溶液，加入IOmL質(zhì)量百分濃度為I %的嵌段共聚物PAA-PEG (PAA-b-PEG2000，由北京萬(wàn)德高科技發(fā)展有限公司生產(chǎn))四氫呋喃溶液中，攪拌反應(yīng)8小時(shí)。其余操作均同實(shí)施例20。所得PAA-PEG包被的生物相容性NaGdF4納米顆粒具有水相分散性和膠體穩(wěn)定性。
[0116]實(shí)施例27
[0117]0.5mL 2mg/mL 的突光素(FITC)標(biāo)記抗 EGFR(Epidermal growthfactorreceptor,表皮生長(zhǎng)因子受體)單克隆抗體的PBS (pH = 7.0)溶液中加入0.1mL 10mg/mL的三(2-羧乙基)膦鹽酸鹽(TCEP)的PBS (pH = 7.0)溶液，室溫孵育30分鐘，超濾離心除去TCEP。將實(shí)施例13中真空干燥后得到的NaGdF4干粉樣品溶于0.01M Tris (pH = 7.2)中配成5g/L的溶液，按照納米顆粒與抗體優(yōu)選比例1: 10，加入TCEP部分還原的EGFR抗體溶液，室溫下反應(yīng)30分鐘。對(duì)照實(shí)驗(yàn)即生物相容性NaGdF4磁性納米顆粒與抗體的混合實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)條件與上述耦聯(lián)反應(yīng)相比，采用未還原的EGFR抗體，其余實(shí)驗(yàn)條件完全相同。反應(yīng)結(jié)束后，耦聯(lián)產(chǎn)物和對(duì)照實(shí)驗(yàn)樣品進(jìn)行離心洗滌純化，最后分散于緩沖液中。附圖7為耦聯(lián)物及其對(duì)照物的紫外-可見(jiàn)吸收(A)及熒光光譜(B)表征。通過(guò)對(duì)比發(fā)現(xiàn)，耦聯(lián)物的熒光分子的吸收和發(fā)射信號(hào)明顯，而對(duì)照物無(wú)明顯吸收及熒光信號(hào)，因此可以推斷耦聯(lián)物中抗體與生物相容性NaGdF4納米顆粒通過(guò)共價(jià)鍵耦聯(lián)，且納米顆?？狗翘禺愋晕侥芰?qiáng)。[0118]實(shí)施例28
[0119]將實(shí)施例24中真空干燥后得到的生物相容性NaGdF4干粉樣品溶于0.01M PBS (pH=6.5)中配成5g/L的溶液，取該溶液0.5mL，加入2 μ MEDC.HCl (1-(3- 二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽)和5 μ M SulfO-NHS (N-羥基硫代琥珀酰亞胺)，室溫下反應(yīng)15min 后,加入 0.5mL 2mg/mL 的抗 EGFR(Epidermal growth factor receptor,表皮生長(zhǎng)因子受體)單克隆抗體的PBS (pH = 8.0)溶液，室溫反應(yīng)4h。對(duì)照實(shí)驗(yàn)即生物相容性NaGdF4磁性納米顆粒與抗體的混合，與上述耦聯(lián)反應(yīng)相比，除了不加EDC -HCl和Sulfo-NHS之外，其余實(shí)驗(yàn)條件完全相同。反應(yīng)結(jié)束后，耦聯(lián)產(chǎn)物和對(duì)照實(shí)驗(yàn)樣品進(jìn)行離心洗滌純化，最后分散于緩沖液中。
[0120]實(shí)施例29
[0121]將實(shí)施例20中真空干燥后得到的生物相容性NaGdF4納米顆粒干粉樣品溶于去離子水中，配制釓離子濃度依次為0.01,0.05,0.1,0.5和ImM的溶液，利用3T醫(yī)用磁共振成像設(shè)備檢測(cè)納米晶磁共振信號(hào)增強(qiáng)效果。附圖8為納米顆粒Tl加權(quán)磁共振成像照片，附圖9為納米顆粒摩爾弛豫率擬合，線性擬合所得實(shí)施例20所得生物相容性NaGdF4納米顆粒的縱向摩爾弛豫率為8.78mM_1.s'[0122]實(shí)施例30
[0123]將實(shí)施例22中真空干燥后得到的生物相容性NaGdF4納米顆粒納米顆粒干粉樣品溶于去離子水中，配制釓離子濃度依次為0.01、0.05,0.1、0.5和ImM的溶液，利用3T醫(yī)用磁共振成像設(shè)備檢測(cè)納米晶磁共振信號(hào)增強(qiáng)效果。線性擬合所得實(shí)施例20所得生物相容性NaGdF4納米顆粒的縱向摩爾弛豫率為6.5ImM^1.s'
[0124]實(shí)施例31
[0125]將實(shí)施例27中得到NaGdF4納米顆粒與FITC標(biāo)記EGFR抗體耦聯(lián)物溶于0.01MPBS (pH = 7.2)，與EGFR高表達(dá)的A431細(xì)胞(人表皮癌細(xì)胞)37°C共孵育45分鐘。對(duì)照實(shí)驗(yàn)采用EGFR低表達(dá)的A435細(xì)胞(人乳腺癌細(xì)胞)，其余實(shí)驗(yàn)條件完全相同。與細(xì)胞結(jié)合完畢后，移去耦聯(lián)物溶液，用0.0IM(pH = 7.2)洗滌細(xì)胞3次，利用熒光顯微鏡觀察耦聯(lián)物與細(xì)胞的特異性結(jié)合。附圖10為耦聯(lián)物與A431細(xì)胞結(jié)合的熒光顯微照片(A)和陰性對(duì)照細(xì)胞的熒光顯微照片(B)。
【權(quán)利要求】
1.一種生物相容性磁性稀土納米顆粒,所述生物相容性磁性稀土納米顆粒的表面修飾有生物相容性高分子，所述生物相容性高分子的高分子鏈段上帶有兩個(gè)以上能夠與稀土納米顆粒結(jié)合的絡(luò)合基團(tuán)，其中生物相容性高分子占生物相容性磁性納米顆粒的質(zhì)量百分含量是2~90%。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物相容性磁性稀土納米顆粒，其中所述的生物相容性高分子的鏈段上一端具有所述的兩個(gè)以上的絡(luò)合基團(tuán)，另一端具有一個(gè)以上能夠與生物分子共價(jià)耦聯(lián)的基團(tuán)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的生物相容性磁性稀土納米顆粒，其中所述的生物相容性磁性納米顆粒的干粉樣品可溶解于水及生理緩沖液中，溶解度為0.lg/L~60g/L，且所得溶液放置半年后無(wú)沉淀析出。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的生物相容性磁性稀土納米顆粒，其中所述的稀土納米顆粒選自鐠、釹、钷、釤、銪、釓、鋱、鏑、欽、鉺及銩的氧化物顆粒、氟化物顆粒及氟化物復(fù)鹽顆粒；納米顆粒的粒徑是I~200納米。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的生物相容性磁性稀土納米顆粒，其中所述的生物相容性高分子的分子量為200~20000，是選自線型、支化的聚乙二醇，線型、支化的聚乙二醇與聚丙烯酸、聚甲基丙烯酸、聚乙烯胺、聚丙氨酸、聚賴氨酸、聚亮氨酸、聚谷氨酸、聚天冬氨酸或聚乳酸形成的嵌段共聚物中的至少一種。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的生物相容性磁性稀土納米顆粒，其中所述的絡(luò)合基團(tuán)選自由磷酸基團(tuán)、羧基、胺基、羥基和巰基組成的組。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的生物相容性磁性稀土納米顆粒，其中所述的能夠與生物分子共價(jià)耦聯(lián)的基團(tuán)選自由馬來(lái)酰亞胺基、羧基、胺基、呋喃基、巰基、生物素和親和素基團(tuán)組成的組。`
8.一種根據(jù)權(quán)利要求1~7任一項(xiàng)所述的生物相容性磁性稀土納米顆粒的制備方法，包括以下步驟: (1)采用高溫反應(yīng)法，以稀土元素的有機(jī)金屬化合物或無(wú)機(jī)金屬鹽化合物為原料，在高沸點(diǎn)非極性溶劑中反應(yīng)得到磁性稀土納米顆粒； (2)將上述磁性稀土納米顆粒與含有兩個(gè)以上能夠與稀土納米顆粒結(jié)合的絡(luò)合基團(tuán)及任選的一個(gè)以上能夠與生物分子共價(jià)耦聯(lián)的基團(tuán)的生物相容性高分子進(jìn)行配體交換反應(yīng)，從而獲得所述生物相容性磁性稀土納米顆粒。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中所述的配體交換反應(yīng)在磁性稀土納米顆粒的有機(jī)溶液中進(jìn)行。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中高溫反應(yīng)溫度為120~350°C。
11.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中所述的高沸點(diǎn)非極性溶劑的沸點(diǎn)為160~370。。。
12.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中所述的高沸點(diǎn)非極性溶劑是苯醚、二芐基醚、1-十八烯、三辛基膦、三辛胺、油胺和油酸中的至少一種。
13.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中所述的有機(jī)金屬化合物是稀土元素(包括鐠、釹、钷、釤、銪、釓、鋱、鏑、欽、鉺及銩)的乙酰丙酮鹽、醋酸鹽、草酸鹽或檸檬酸鹽，所述的無(wú)機(jī)金屬鹽化合物是稀土元素(包括鐠、釹、钷、釤、銪、釓、鋱、鏑、欽、鉺及銩)的水合及無(wú)水氯化鹽、硝酸鹽或硫酸鹽。
14. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中高溫反應(yīng)在帶有C4-C24烷基鏈的飽和脂肪酸和/或胺及不飽和脂肪酸和/或胺存在下進(jìn)行。
15.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的生物相容性磁性稀土納米顆粒在磁共振及磁共振/光學(xué)成像中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】A61K49/18GK103623436SQ201210302026
【公開(kāi)日】2014年3月12日 申請(qǐng)日期:2012年8月22日 優(yōu)先權(quán)日:2012年8月22日
【發(fā)明者】侯毅, 高振宇 申請(qǐng)人:北京萬(wàn)德高科技發(fā)展有限公司