專利名稱：一種丹參軟膠囊的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種含有丹參提取物的軟膠囊的制備方法，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
丹參又名赤參，紫丹參，紅根等。其有效成分主要包括兩類脂溶性非醌色素類化合物，如丹參酮II A、丹參酮II B、隱丹參酮及其異構(gòu)體和水溶性酚酸類成分，如丹酚酸B、原兒茶醛、丹參素等。其中丹參酮II A能增加冠脈血流量，改善缺氧后引起的心肌代謝紊亂，從而提高心肌耐缺氧的能力；能顯著延長小鼠耐缺氧時間，減輕缺氧引起的心肌損傷，同時，改善心肌收縮力，促進(jìn)心肌再生；還具有顯著保護(hù)紅細(xì)胞膜的作用。對動物心肌梗塞有縮小梗塞面積的效應(yīng)。而丹參酚酸類成分具有明顯的抗氧化作用，抑制血小板聚集，及抑制血栓形成的作用，并能延長缺氧條件下動物的存活時間。另外，丹酚酸類成分對心肌缺血再灌注損傷具有預(yù)防作用并對動脈粥樣硬化具有防治作用。因此，丹參提取物所制成的制劑 被廣泛應(yīng)用于心腦血管疾病的治療和預(yù)防領(lǐng)域。丹參酮II A等脂溶性成分在水溶液中溶解度差，以脂溶性成分為主要成分之一的丹參固體制劑如丹參片、丹參硬膠囊在口服后，丹參酮II A的溶出差，導(dǎo)致吸收不充分或吸收時間延長，生物利用度低，影響了丹參制劑的療效。本發(fā)明提供了一種丹參軟膠囊制劑的制備方法，將丹參提取物與甘油、聚乙二醇400充分混合，使丹參酮II A等脂溶性成分溶解于液態(tài)基質(zhì)中，起到了一定的增溶作用。當(dāng)軟膠囊殼在體內(nèi)崩解后，有效成分以液體狀態(tài)直接釋放，提高了丹參脂溶性成分的生物利用度。隨著中藥提取技術(shù)的不斷發(fā)展，追求高含量有效成分的提取物已成為中藥制劑過程中的主要目的之一。提取丹參水溶性成分的方法很多，傳統(tǒng)方法(如《中國藥典》2010年版一部丹參總酚酸提取物項下)為丹參藥材加水煎煮后直接進(jìn)行濃縮，減壓干燥即得，所得提取物中含丹酚酸B不少于5%。丹參水溶性成分中，丹酚酸B為主要有效成分，而丹酚酸B的穩(wěn)定性很差，隨著水提液的放置、濃縮和干燥過程，酚酸類成分會分解和氧化破壞，造成提取物中丹酚酸B含量很低。申請?zhí)?00610113897. 4公開了一種丹參有效部位標(biāo)準(zhǔn)提取物的制備方法，將水煎煮提取的水溶性丹酚酸類成分以乙酸乙酯純化，所得提取物中丹酚酸B含量不小于35%。然而，乙酸乙酯作為一種化工用試劑，吸入后可致麻醉作用，導(dǎo)致急性肺水腫，肝、腎損害，誤服者可產(chǎn)生惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉等癥狀，在藥品生產(chǎn)中應(yīng)對其進(jìn)行有機(jī)溶劑殘留量的嚴(yán)格控制，以確保患者用藥安全。申請?zhí)?00610200604. 6公開了一種中藥丹參的提取物及其制備方法，不僅使用乙酸乙酯萃取，還在提取液中加入了 Ca2+，Mg2+，Al3+，Zn2+，Ba2+，Cu2+等重金屬離子使丹酚酸鹽沉淀。雖然所得提取物中總丹參酚酸類成分占總固體量的60%-80%，然而其提取物存在重金屬限量可能超標(biāo)的風(fēng)險，所得提取物不宜用于制備藥品供患者使用。申請?zhí)?00610170981. X公開的一種從丹參提取物中分離純化丹酚酸B的方法。將丹參飲片粉碎、醇提、抽濾后的濾液減壓濃縮得濃縮液，加水，用堿調(diào)pH值至7. 5，用乙醚萃取；水相用酸調(diào)節(jié)pH值至3，再用乙醚萃取，回收溶劑后得到丹參粗提物，再應(yīng)用PH區(qū)帶逆流色譜法分離制備高純度的丹酚酸B。工藝中涉及抽濾、兩次調(diào)節(jié)pH值、兩次乙醚萃取，以及相應(yīng)的濃縮工作，處理步驟繁雜，造成收率降低。而乙醚沸點低、易燃且其蒸氣存在麻醉作用，回收過程中亦存在安全隱患。另外，區(qū)帶逆流色譜法目前還停留在實驗室階段，其上樣 量相對較小，單次制備量一般在百毫克以下，無法滿足產(chǎn)業(yè)化需要，難以廣泛應(yīng)用。申請?zhí)?00510037786公開了一種丹參提取物、其制備方法、藥物制劑及檢測方法，采用水加溫提取丹參藥材，調(diào)節(jié)PH后過濾提取液，過大孔樹脂柱、水洗后50%-95%乙醇洗脫、洗脫液回收乙醇至盡、干燥后所得提取物制備丹參制劑。其制備的提取物含有丹參素28%-38%、原兒茶醛9%-18%，丹酚酸B 29%_38%。從有效成分含量的角度分析，該方法簡便安全，所得提取物含量高，適合產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，是一個具有實際應(yīng)用價值的發(fā)明。然而，該發(fā)明所制備的丹參制劑中不含有丹參有效成分群之一的脂溶性成分，而且沒有注重制備過程中丹酚酸B的穩(wěn)定性問題。由于丹酚酸B是由3分子丹參素和I分子咖啡酸縮合形成的化合物，丹酚酸B在分解過程中會生成丹參素，造成丹參素含量增加，所得提取物中，丹參素與丹酚酸B的含量相當(dāng)。本發(fā)明提供的軟膠囊制備方法中，提供一種制備丹參水溶性成分提取物的方法，采用大孔樹脂分離技術(shù)，乙醇溶液洗脫后濃縮，噴霧干燥，得到的提取物中，總丹參酚酸類成分占總固體量的60%以上，其中主要酚酸類成分丹酚酸B的含量在45%-60%之間，丹參素含量控制在10%-20%之間。在提高丹參總酚酸收率的同時，控制丹參素的含量，使主要有效成分丹酚酸B的比例顯著提高。安全有效、低毒環(huán)保，能夠滿足工業(yè)化生產(chǎn)需要，具有廣泛且實際的應(yīng)用價值。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種丹參軟膠囊的制備方法，包括如下步驟
(1)將丹參藥材放入提取罐中，加乙醇溶液溫浸，收集提取液，回收乙醇后濃縮、干燥，得含丹參脂溶性成分的丹參酮提取物；
(2)藥渣加水溫浸，收集提取液，放冷，備用；
(3)步驟(2)所得的提取液直接經(jīng)大孔樹脂上柱、洗脫、收集洗脫液濃縮、干燥，得含丹參水溶性成分的丹參總酚酸提取物，其中丹酚酸B的含量在45% 60%之間，丹參素含量在10% 20%之間；
(4)將步驟(I)、(3)所得的提取物加入適當(dāng)輔料預(yù)混合，用膠體磨進(jìn)一步混勻，得藥液備用;
(5)取明膠、甘油、水，加入適當(dāng)輔料，置容器中加熱溶解，混勻，脫氣后得囊皮溶液；
(6)取上述藥液和囊皮溶液，用軟膠囊生產(chǎn)設(shè)備壓制成型，干燥、拋光后即得。本發(fā)明所述一種丹參軟膠囊的制備方法步驟(I)中，使用乙醇溶液的濃度為80% 95%，優(yōu)選85% 90%，使用量為藥材用量的5 15倍，優(yōu)選8 10倍，溫浸的次數(shù)為I 3次，優(yōu)選2次。本發(fā)明所述一種丹參軟膠囊的制備方法步驟(2)中，使用水的量為藥材用量的5 15倍，優(yōu)選6 8倍，溫浸的次數(shù)為I 3次，優(yōu)選2次。本發(fā)明所述一種丹參軟膠囊的制備方法步驟(I)和(2)中，溫浸的溫度為65°C 90°C，優(yōu)選75°C，溫浸的時間為O. 5 2. 5小時，優(yōu)選I I. 5小時。本發(fā)明所述一種丹參軟膠囊的制備方法步驟(3)中大孔樹脂選用HPD-100、HPD-400、HPD-600、D-001、D-101，AB-8，優(yōu)選 D-IOl0
本發(fā)明所述一種丹參軟膠囊的制備方法步驟(3)中大孔樹脂的使用量按照丹參藥材(Kg):大孔樹脂(L)為I : I. O 1:2. O為宜，優(yōu)選I : 1.5 I : 1.7。本發(fā)明所述一種丹參軟膠囊的制備方法步驟(3)中所用洗脫液為有機(jī)醇，優(yōu)選乙醇，濃度為20% 50%，優(yōu)選30% 40% ;洗脫液體積為1-3BV，優(yōu)選I. 5-2BV ;流速為O. 5樹脂床體積/小時(BV/h) 2樹脂床體積/小時(BV/h)，優(yōu)選O. 8 I. 2樹脂床體積/小時(BV/h)。本發(fā)明所述一種丹參軟膠囊的制備方法步驟(3)中所述干燥為減壓干燥、噴霧干燥、微波干燥，優(yōu)選噴霧干燥和微波干燥。 本發(fā)明所述一種丹參軟膠囊的制備方法步驟(4)中所述適當(dāng)輔料為適當(dāng)?shù)南♂寗⒅鷳引RU、穩(wěn)定劑、防腐劑等，其中提取物與輔料的比例為40 200 100 500 20 50。本發(fā)明所述一種丹參軟膠囊的制備方法步驟(5)中所述明膠、甘油、水的比例為
O.9 I. 2 O. 3 O. 5 O. 9 I. 5，所述適當(dāng)輔料包括遮光劑、食用色素等。作為丹參中有效成分群之一的丹參脂溶性成分(丹參酮I，丹參酮II A，隱丹參酮等)在水溶液中幾乎不溶，傳統(tǒng)丹參相關(guān)制劑如片劑、硬膠囊劑、滴丸劑中丹參脂溶性成分以固體的形式存在，其有效成分難以溶出，導(dǎo)致有效成分吸收不充分或吸收時間延長，生物利用度低，進(jìn)而影響了丹參制劑的療效。本發(fā)明提供的軟膠囊制劑，改變了丹參酮II八等脂溶性成分在制劑中的存在狀態(tài)，由傳統(tǒng)的固體狀態(tài)變?yōu)槿芙庠谲浤z囊基質(zhì)中的溶液狀態(tài)，克服了傳統(tǒng)固體丹參制劑脂溶性成分溶出困難的現(xiàn)狀，改善了丹參酮II A等脂溶性成分的溶出度，提高了丹參酮II A等脂溶性成分的生物利用度，從而提高了丹參制劑的療效。另一方面，本發(fā)明中使用大孔樹脂法分離得到丹參水溶性成分的丹參總酚酸提取物，在純化過程中，避免了現(xiàn)有技術(shù)使用不可食用的有機(jī)試劑(如乙醚、乙酸乙酯等)、金屬離子等試劑時可能產(chǎn)生的安全性問題，同時克服了逆流色譜等技術(shù)存在的上樣量低、單次制備量小、無法放大生產(chǎn)等缺點。在發(fā)明過程中，考察了調(diào)節(jié)PH值對丹參酚酸類成分純化程度的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，適當(dāng)調(diào)節(jié)PH值可以使部分非酚酸類成分沉淀而被過濾除去，使獲得的提取物中總酚酸含量提高。然而，調(diào)節(jié)PH值后，需要將提取液放置一段時間，待沉淀完全后過濾除去雜質(zhì)。在工業(yè)化大生產(chǎn)時，這一步驟需要I個工作日才能完成，使得整個純化過程延長，造成丹酚酸B由于在溶液中放置時間加長而分解增加，得到的提取物中丹參素比例增大，丹酚酸B的總收率降低。因此，本發(fā)明采用丹參水提液直接上柱的方法，盡量縮短純化過程，以提高丹酚酸B的總收率。在發(fā)明過程中還發(fā)現(xiàn)，10%-95%的乙醇溶液均可以將丹參酚酸類成分有效洗脫。其中，使用I 2BV的60%以上的高濃度乙醇既可以將丹酚酸B等酚酸性成分洗脫完全。然而，由于洗脫液中乙醇濃度較高，洗脫能力強(qiáng)，使得大量吸附性較強(qiáng)的非酚酸性成分被同時洗脫，造成所得提取物雜質(zhì)較多，提取物總收率可達(dá)10%(提取物/生藥材X 100%)以上，然而總酚酸含量不高(僅能達(dá)到30%或更低)，而且采用高濃度的乙醇增加了生產(chǎn)成本，并存在安全隱患，不利于產(chǎn)業(yè)化。使用10% 20%的低濃度乙醇可以很好地將吸附性較差的酚酸性成分洗脫，吸附性較強(qiáng)的非酚酸性成分由于被樹脂柱保留而除去，提取物總收率可以降至3% (提取物/生藥材X100%)以下，得到的提取物中，總酚酸含量很高(可達(dá)80%以上)。然而，由于洗脫能力較小，使得采用低濃度乙醇洗脫時，需要增加洗脫液的用量(增加至3BV以上)才能將酚酸類成分洗脫完全。在最佳流速一定的條件下，相對延長了洗脫時間，延長了生產(chǎn)周期，使丹酚酸B分解增加，造成所得提取物中，丹參素含量較高，丹酚酸B收率降低。本發(fā)明采用I. 5 2BV的30% 40%的乙醇作為洗脫液，在除去非酚酸性雜質(zhì)的同時，縮短了洗脫時間，在減少丹酚酸B分解的同時縮短了生產(chǎn)周期并兼顧生產(chǎn)成本。與現(xiàn)有技術(shù)比較，純化程度高，酚酸性成分放置在溶液中的時間短，在分離過程中最大限度的保護(hù)了酚酸類成分。本發(fā)明所得丹參總酚酸提取物中總丹參酚酸類成分占總固體量的60%以上，其中主要有效成分丹酚酸B的含量可達(dá)45%以上。本發(fā)明所適宜的生產(chǎn)批量，折合成生藥量可達(dá)IOOkg 2000kg/批，單次可生產(chǎn)軟膠囊成品10 200萬粒，完全可以滿足產(chǎn)業(yè)化需求。該工藝所使用的溶劑乙醇為食品、藥品行業(yè)常用溶劑，安全低毒，沒有重金屬限量超標(biāo)、有機(jī)溶劑殘留量超標(biāo)的風(fēng)險，適合作為生產(chǎn)藥品和保健品的工藝，供廣大患者使用。
具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例來進(jìn)一步描述本發(fā)明，但這些實施例僅是范例性的，并不對本發(fā)明的范圍構(gòu)成任何限制。
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實施例I丹參中丹參酮提取物和總酚酸提取物制備。取丹參飲片200kg，加入85%乙醇溶液2000L，80°C下溫浸I. 5小時，收集提取液，回收乙醇后濃縮、干燥，得含丹參酮II A的丹參酮提取物；藥渣加水1600L，80°C下溫浸I小時，收集提取液，放冷，直接經(jīng)大孔樹脂D-IOl (300L)上柱，用水洗至流出液無顏色后，使用20%乙醇溶液(700L)以1.0 BV/h的流速洗脫，收集洗脫液，揮盡乙醇后進(jìn)行噴霧干燥，得到含丹酚酸B的丹參總酚酸提取物。高效液相色譜法測定丹參酮提取物中丹參酮II A含量為8. 7%。丹參總分酸提取物收率I. 2%，紫外分光光度法測定丹參總酚酸含量為86%，高效液相色譜方法丹酚酸B含量為49%。丹參素含量為23%。實施例2丹參中丹參酮提取物和總酚酸提取物制備。取丹參飲片200kg，加入85%乙醇溶液1600L，75°C下溫浸2次，每次I小時，收集提取液，回收乙醇后濃縮、干燥，得含丹參酮II A的丹參酮提取物；藥渣加水2000L，75°C下溫浸2次，每次I小時，收集提取液合并，放冷，直接經(jīng)大孔樹脂D-IOl (340L)上柱，用水洗至流出液無顏色后，使用30%乙醇溶液(550L)以I. 2 BV/h的流速洗脫，收集洗脫液，揮盡乙醇后進(jìn)行噴霧干燥，得到含丹酚酸B的丹參總酚酸提取物。高效液相色譜法測定丹參酮提取物中丹參酮II A含量為9. 6%。丹參總分酸提取物收率3. 3%，紫外分光光度法測定丹參總酚酸含量為69%，高效液相色譜方法丹酚酸B含量為52%。丹參素含量為14%。實施例3丹參中丹參酮提取物和總酚酸提取物制備。取丹參飲片500kg，加入90%乙醇溶液4500L，75°C下溫浸2次，每次I. 5小時，收集提取液合并，回收乙醇后濃縮、干燥，得含丹參酮II A的丹參酮提取物；藥渣加水3000L，75°C下溫浸2次，每次I小時，收集提取液合并，適當(dāng)濃縮后放冷，經(jīng)大孔樹脂D-IOl(SOOL)上柱，用水洗至流出液無顏色后，使用40%乙醇溶液(1000L)以I. 2 BV/h的流速洗脫，收集洗脫液，揮盡乙醇后進(jìn)行微波干燥，得到含丹酚酸B的丹參總酚酸提取物。高效液相色譜法測定丹參酮提取物中丹參酮II A含量為10. 8%。丹參總分酸提取物收率2. 8%，紫外分光光度法測定丹參總酚酸含量為75%，高效液相色譜方法丹酚酸B含量為63%。丹參素含量為8. 1%。實施例4丹參軟膠囊的制備。取實施例I或?qū)嵤├?或?qū)嵤├?中得到丹參酮提取物和丹參總酚酸提取物合并，按照提取物PEG400 :甘油=50:425:25的比例，加入PEG400和甘油混合，置膠體磨中混勻后得藥液備用。取明膠、甘油、水(I: O. 3:1. I )，加入占明膠比例O. 5%的二氧化鈦作為遮光劑，置于溶膠罐中加熱溶解，脫氣后得囊皮溶液，取上述藥液和囊皮溶液，用軟膠囊生產(chǎn)設(shè)備壓制成軟膠囊，干燥、拋光后即得。實施例5丹參軟膠囊的制備。取實施例I或?qū)嵤├?或?qū)嵤├?中得到丹參酮提取物和丹參總酚酸提取物合并，按照提取物PEG400 :甘油=100:375:25的比例，加入PEG400和甘油混合，置膠體磨中 混勻后得藥液備用。取明膠、甘油、水(1:0. 3:1. 1)，加入占明膠比例O. 5%的二氧化鈦作為遮光劑，以及占明膠比例O. 01%的焦糖色天然色素，置于溶膠罐中加熱溶解，脫氣后得囊皮溶液，取上述藥液和囊皮溶液，用軟膠囊生產(chǎn)設(shè)備壓制成軟膠囊，干燥、拋光后即得。
權(quán)利要求
1.一種丹參軟膠囊的制備方法，包括如下步驟 (1)將丹參藥材放入提取罐中，加乙醇溶液溫浸，收集提取液，回收乙醇后濃縮、干燥，得含丹參脂溶性成分的丹參酮提取物； (2)藥渣加水溫浸，收集提取液，放冷，備用； (3)步驟(2)所得的提取液直接經(jīng)大孔樹脂上柱、洗脫、收集洗脫液濃縮、干燥，得含丹參水溶性成分的丹參總酚酸提取物，其中丹酚酸B的含量在45% 60%之間，丹參素含量在10% 20%之間； (4)將步驟(I)、(3)所得的提取物加入適當(dāng)輔料預(yù)混合，用膠體磨進(jìn)一步混勻，得藥液備用; (5)取明膠、甘油、水，加入適當(dāng)輔料，置容器中加熱溶解，混勻，脫氣后得囊皮溶液； (6)取上述藥液和囊皮溶液，用軟膠囊生產(chǎn)設(shè)備壓制成型，干燥、拋光后即得。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述丹參軟膠囊的制備方法步驟(I)中，使用乙醇溶液的濃度為80% 95%，優(yōu)選85% 90%，使用量為藥材用量的5 15倍，優(yōu)選8 10倍，溫浸的次數(shù)為I 3次，優(yōu)選2次。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述丹參軟膠囊的制備方法步驟(2)中，使用水的量為藥材用量的5 15倍，優(yōu)選6 8倍，溫浸的次數(shù)為I 3次，優(yōu)選2次。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述丹參軟膠囊的制備方法步驟(I)和(2)中，溫浸的溫度為65°C 90°C，優(yōu)選75°C，溫浸的時間為O. 5 2. 5小時，優(yōu)選I I. 5小時。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述丹參軟膠囊的制備方法步驟(3)中大孔樹脂選用HPD-100、HPD-400、HPD-600、D-001、D-101，AB-8，優(yōu)選 D-IOl0
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述丹參軟膠囊的制備方法步驟(3)中大孔樹脂的使用量按照丹參藥材(Kg):大孔樹脂(L)為I : 1.0 I : 2. O為宜，優(yōu)選I : 1.5 I : 1.7。
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述丹參軟膠囊的制備方法步驟(3)中所用洗脫液為有機(jī)醇，優(yōu)選乙醇，濃度為20% 50%，優(yōu)選30% 40%，洗脫液體積為1-3BV，優(yōu)選I. 5-2BV ;流速為O. 5樹脂床體積/小時(BV/h) 2樹脂床體積/小時(BV/h)，優(yōu)選O. 8 I. 2樹脂床體積/小時(BV/h)。
8.根據(jù)權(quán)利要求I所述丹參軟膠囊的制備方法步驟(3)中所述干燥為常規(guī)方法干燥，優(yōu)選噴霧干燥。
9.根據(jù)權(quán)利要求I所述丹參軟膠囊的制備方法步驟(4)中所述適當(dāng)輔料為適當(dāng)?shù)南♂寗⒅鷳引RU、穩(wěn)定劑、防腐劑等，其中提取物與輔料的比例為40 200 100 500 20 50。
10.根據(jù)權(quán)利要求I所述丹參軟膠囊的制備方法步驟(5)中所述明膠、甘油、水的比例為O. 9 I. 2 O. 3 O. 5 O. 9 I. 5，所述適當(dāng)輔料包括遮光劑、食用色素等。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種丹參軟膠囊制劑的制備方法，將丹參提取物與甘油、聚乙二醇400充分混合，使丹參酮ⅡA等脂溶性成分溶解于液態(tài)基質(zhì)中，起到了一定的增溶作用，提高了丹參脂溶性成分的生物利用度。在本發(fā)明的制備過程中，提供了一種制備丹參水溶性成分提取物的方法，采用大孔樹脂分離技術(shù)，乙醇溶液洗脫后濃縮，噴霧干燥，得到的提取物中，總丹參酚酸類成分占總固體量的60%以上，其中主要酚酸類成分丹酚酸B的含量在45%～60%之間，丹參素含量控制在10%～20%之間。在提高丹參總酚酸收率的同時，控制丹參素的含量，使主要有效成分丹酚酸B的比例顯著提高。安全有效、低毒環(huán)保，能夠滿足工業(yè)化生產(chǎn)需要，具有廣泛且實際的應(yīng)用價值。
文檔編號A61P9/10GK102772487SQ20121026955
公開日2012年11月14日 申請日期2012年8月1日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月1日
發(fā)明者劉曉吉, 戴凌松, 房麗娜, 王艷 申請人:遼寧盛生醫(yī)藥集團(tuán)有限公司