專利名稱：一種三維仿生電極化梯度孔神經(jīng)導(dǎo)管的構(gòu)建及其制備的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于神經(jīng)導(dǎo)管的構(gòu)建及其制備領(lǐng)域，特別是涉及一種三維仿生電極化梯度孔神經(jīng)導(dǎo)管的構(gòu)建及其制備。
背景技術(shù)：
周圍神經(jīng)缺損是臨床常見疾病，大約2. 8%的創(chuàng)傷患者導(dǎo)致周圍神經(jīng)損傷，并且嚴(yán)重者將終身殘疾。我國每年有幾十萬病例需要神經(jīng)修復(fù)，但修復(fù)效果不盡如人意，故周圍神經(jīng)損傷后的再生和功能恢復(fù)一直是神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域的熱門課題。目前，自體神經(jīng)移植作為周圍神經(jīng)損傷的金標(biāo)準(zhǔn)，是最為經(jīng)典的橋接修復(fù)神經(jīng)缺損的方法，但其并非最理想的方法。除供體來源有限，會(huì)造成供體部位部分功能喪失及永久性神經(jīng)損傷，還受可修復(fù)長度、瘢痕形成等問題的限制。當(dāng)前研究著重于發(fā)展能夠用物理性神經(jīng)再生通過損傷區(qū)的神經(jīng)導(dǎo)管。所 以設(shè)計(jì)具有良好的生物相容性、生物可降解性和力學(xué)性能的神經(jīng)導(dǎo)管是臨床醫(yī)學(xué)的重大需求。理想的神經(jīng)導(dǎo)管材料除應(yīng)具有良好的生物相容性，良好的生物可降解吸收性，良好的可塑性和適宜的力學(xué)性能等外，還應(yīng)具有良好的表面活性和組織誘導(dǎo)性。￠-磷酸三隹丐(^ -tricalci -umphosphate ( ^ -TCP))是一種生物降解和生物吸收型磷酸韓生物活性材料，具有良好的可生物降解性、生物相容性和生物無毒性。且其降解產(chǎn)物顯弱堿性，能部分中和材料降解產(chǎn)生的酸性，并且有研究表明Ca2+在介導(dǎo)軸突生長和遷移方向中起關(guān)鍵作用。聚乳酸(PDLLA)是一種重要的生物可降解聚合物，以其優(yōu)良的生物相容性和生物可吸收性以及良好的力學(xué)性能而被廣泛研究和應(yīng)用于周圍神經(jīng)的損傷與修復(fù)中。透明質(zhì)酸(HA)帶有大量負(fù)電荷，對(duì)成纖維細(xì)胞有排斥作用，可形成化學(xué)屏障。同時(shí)高濃度、高分子量HA具有抑制淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞和成纖維細(xì)胞的遷移，減輕炎癥反應(yīng)，形成免疫屏障的作用。更為重要的是，HA能夠選擇性地刺激成纖維細(xì)胞合成膠原，促進(jìn)膠原纖維以網(wǎng)狀排列方式沉積，從而減少瘢痕的形成。殼聚糖(CHS)是唯一的堿性天然多糖高分子，具有良好的生物可降解性和生物相容性，與生物體的親和性能體現(xiàn)在細(xì)胞水平上，產(chǎn)生抗原的可能性很小，對(duì)受損傷的生物體能誘生特殊細(xì)胞，加快創(chuàng)傷愈合，特別是促進(jìn)愈合張力的增長，還具有消炎、止血、鎮(zhèn)痛和抑菌等性能，能有效防止神經(jīng)再生過程中瘢痕的產(chǎn)生，但其力學(xué)性能較差。神經(jīng)生長因子(NGF)不僅能夠保護(hù)神經(jīng)元、誘導(dǎo)神經(jīng)軸突伸展、促進(jìn)周圍神經(jīng)再生，而且可以參與機(jī)體免疫、造血、炎癥反應(yīng)、生殖等系統(tǒng)功能的調(diào)節(jié)，作為從生物體中提取的一種生物制劑，極具發(fā)展?jié)摿ΑＷ越M裝是指構(gòu)建基元在沒有人為介入的情況下自發(fā)地形成有序結(jié)構(gòu)。目前，將聚合物的自組裝應(yīng)用于制備精細(xì)表面及界面己成為十分活躍的研究方向。逐漸成為研究生物功能、理解生命現(xiàn)象、探索生命起源的一個(gè)極其重要的研究領(lǐng)域。其中，“靜電自組裝”已成為一種日益引起廣大生物材料工作者興趣的新方法。目前，國內(nèi)外研究較多的是用生物可降解材料所構(gòu)建的神經(jīng)導(dǎo)管修復(fù)神經(jīng)損傷。然而，任何單一的可降解材料都無法滿足上述要求，只有充分利用天然高分子的生物活性基元及合成高分子良好的力學(xué)加工性能、便于大批量生產(chǎn)以及成本低等特點(diǎn)，進(jìn)行天然高分子和合成高分子結(jié)構(gòu)雜化和優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)，才能使制備出的周圍神經(jīng)再生導(dǎo)管賦予更多的性能。高滲透、梯度孔三維神經(jīng)導(dǎo)管因可以負(fù)載生長因子和活體細(xì)胞并能引導(dǎo)神經(jīng)纖維定向生長，故在周圍神經(jīng)再生修復(fù)方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。探索尋找更為適宜制備此類神經(jīng)導(dǎo)管材料的研究始終在進(jìn)行中。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種三維仿生電極化梯度孔神經(jīng)導(dǎo)管及其制備方法，該導(dǎo)管具有“人工神經(jīng)” 以及神經(jīng)組織工程支架的雙重作用，有利于負(fù)載生長因子和活體細(xì)胞，并能引導(dǎo)神經(jīng)纖維定向生長，且該神經(jīng)導(dǎo)管具有良好的生物相容性和生物降解性能；其制備方法簡單，無污染。本發(fā)明的一種三維仿生電極化梯度孔神經(jīng)導(dǎo)管是基于細(xì)胞外基質(zhì)材料的仿生分子來設(shè)計(jì)的，它是電極化P-磷酸三鈣/聚乳酸/透明質(zhì)酸/殼聚糖/神經(jīng)生長因子神經(jīng)導(dǎo)管，是以聚乳酸(PDLLA)為基質(zhì)材料，添加電極化￠-磷酸三鈣(P-TCP在外加電場的作用下，使其電極化)，制備均勻分散的電極化P -磷酸三鈣與聚乳酸(電極化P -TCP/PDLLA)芯材；再以靜電自組裝和偶合交聯(lián)技術(shù)將透明質(zhì)酸和殼聚糖以及神經(jīng)生長因子附于芯材表面制備的成分和孔結(jié)構(gòu)雙重梯度的三維仿生電極化梯度孔神經(jīng)導(dǎo)管(記作電極化3-TCP/PDLLA/HA/CHS/NGF 神經(jīng)導(dǎo)管)。所述的神經(jīng)導(dǎo)管長度為10 100mm,內(nèi)徑為I 6mm,壁厚為0. 5 2mm。本發(fā)明的一種三維仿生電極化梯度孔神經(jīng)導(dǎo)管的制備方法，包括如下步驟
(1)將P-磷酸三鈣(P -TCP)粉末(IO-IOOnm)放置在一個(gè)直徑2 8cm，高0. 5 3cm氧化招環(huán)中，在2 IOkvcm-I直流電場作用下,于100 500°C空氣中電極化I 2小時(shí)，得電極化￠-磷酸三鈣，取出備用；
(2)在室溫下，以乙酸乙酯、氯仿、丙酮或三氯甲烷為溶劑，加入聚乳酸(PDLLA)，再加入電極化3 -磷酸三鈣(電極化3-TCP)，制成混合溶液，混合溶液中聚乳酸質(zhì)量濃度為5wt% 20wt%,電極化P -憐酸三I丐質(zhì)量濃度為5wt% 10wt% ；
(3)用磁力攪拌使上述混合液完全分散，再將混合溶液徐徐傾倒入玻璃模具內(nèi)，室溫下，采用溶劑揮發(fā)法揮發(fā)12 48小時(shí)，真空干燥12 48小時(shí)，再從模具上剝離芯材，制成電極化P -磷酸三鈣與聚乳酸(極化P -TCP /PDLLA)芯材；
(4)胺化將步驟(3)制得的電極化￠-磷酸三鈣與聚乳酸芯材，浸入濃度為I 10mg/ml的己二胺-異丙醇、己二胺-正丙醇、乙二胺-異丙醇或者乙二胺-正丙醇溶液中，反應(yīng)I 2小時(shí)，用水充分漂洗去掉未反應(yīng)的己二胺或乙二胺，真空干燥至恒重；
(5)將上述胺化后的電極化￠-磷酸三鈣與聚乳酸芯材依次在濃度為I 10mg/ml的透明質(zhì)酸、I 10mg/ml的殼聚糖溶液中自組裝，使其在室溫下攪拌，組裝完畢，置于I 10mg/ml的神經(jīng)生長因子水溶液中，加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)反應(yīng)，其加入量為電極化￠-磷酸三鈣與聚乳酸芯材總當(dāng)量的I I. 5倍，反應(yīng)完畢后真空冷凍干燥，消毒，即得三維仿生電極化梯度孔神經(jīng)導(dǎo)管。本發(fā)明所用的聚乳酸的分子量為I. OX IO5 3. OX IO5，P -磷酸三鈣粉末的粒徑為IO-IOOnm ;選的有機(jī)溶劑為乙酸乙酯、氯仿、丙酮或三氯甲烷。
本發(fā)明的制備方法步驟(3)中，制得的電極化￠-磷酸三鈣與聚乳酸芯材直徑為L 5 8mm o本發(fā)明的制備方法步驟(5)中，得到的神經(jīng)導(dǎo)管外層管壁孔隙率為65%_75%的三維網(wǎng)絡(luò)狀結(jié)構(gòu)。本發(fā)明的三維仿生電極化梯度孔神經(jīng)導(dǎo)管應(yīng)用于周圍神經(jīng)系統(tǒng)的修復(fù)、誘導(dǎo)周圍神經(jīng)再生以及組織工程中神經(jīng)細(xì)胞的體外培養(yǎng)。電極化0 -TCP的引入可發(fā)揮電刺激誘導(dǎo)神經(jīng)生長作用，PDLLA被廣泛用于神經(jīng)導(dǎo)管的制備，HA屬酸性多糖，是細(xì)胞外基質(zhì)的重要組成部分，CHS是自然界存在的唯一天然堿性多糖，是類細(xì)胞外基質(zhì)成分，NGF是典型的靶源性神經(jīng)營養(yǎng)因子，^ _TCP、PDLLA、HA和CHS的綜合利用可獲得良好力學(xué)性能，故本發(fā)明用這幾種材料制備的神經(jīng)導(dǎo)管具有仿細(xì)胞的微環(huán)境，可達(dá)到成分仿生的目的；利用熱致相分離技術(shù)和糖模板法可獲得定向高通透性、梯度 孔結(jié)構(gòu)，達(dá)到結(jié)構(gòu)仿生的目的。本發(fā)明的有益效果在于
I、本發(fā)明可以誘導(dǎo)再生神經(jīng)定向生長。通過P-TCP組成梯度解決引導(dǎo)再生神經(jīng)軸突定向生長和遷移方向的鈣離子、磷酸根離子適時(shí)、適量供給問題，同時(shí)解決電極化P -TCP的電荷儲(chǔ)存量和保證誘導(dǎo)神經(jīng)再生的有效電流問題；通過偶聯(lián)技術(shù)解決NGF控制釋放問題。2、本發(fā)明構(gòu)建的靜電自組裝多層膜與芯材的裝配以及多層膜內(nèi)部具有良好的穩(wěn)定性。3、本發(fā)明可以通過神經(jīng)導(dǎo)管的定向、梯度孔、高通透性的結(jié)構(gòu)的設(shè)計(jì)與構(gòu)建技術(shù)，實(shí)現(xiàn)神經(jīng)定向再生誘導(dǎo)因子的適時(shí)、適量釋放，解決細(xì)胞和生長因子定向趨附以及結(jié)締組織入侵等難題，為粗大、長段的神經(jīng)缺損提供解決方案。4、本發(fā)明的制備方法簡單，成本低，對(duì)環(huán)境友好，經(jīng)濟(jì)效益高，適于工業(yè)化生產(chǎn)。


圖I :神經(jīng)導(dǎo)管示意圖
圖2 :神經(jīng)導(dǎo)管芯材及其掃描電鏡示意圖
圖中1為0-TCP/PDLLA芯材，2為自組裝層，3為梯度孔層。由圖可見，梯度孔層由兩層不同孔徑的多孔層組成，內(nèi)層為P -TCP/PDLLA多孔結(jié)構(gòu)，外層為CHS/HA多孔結(jié)構(gòu)。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對(duì)本發(fā)明作各種等價(jià)改動(dòng)或修改，這些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書所限定的范圍。實(shí)施例I
三維仿生電極化梯度孔神經(jīng)導(dǎo)管的制備，制備步驟為
(I)將P -磷酸三鈣(P -TCP)粉末(IO-IOOnm)放置在一個(gè)直徑2厘米，高0. 5厘米氧化鋁環(huán)中，在2kvcm-l直流電場作用下，于100°C空氣中電極化I小時(shí)，即得電極化P -TCP,取出備用；
(2)在室溫下，以乙酸乙酯為溶劑，分別加入聚乳酸(PDLLA)和電極化P-TCP，制成質(zhì)量濃度5%的聚乳酸和質(zhì)量濃度5%的電極化3 -TCP混合溶液；
(3)用磁力攪拌使上述混合液完全分散，再將混合溶液徐徐傾倒入玻璃模具內(nèi)，室溫下，采用溶劑揮發(fā)法揮發(fā)12小時(shí)，真空干燥12小時(shí)，再從模具上剝離芯材，制成電極化3 -TCP /PDLLA 芯材；
(4)胺化，將電極化P-TCP /PDLLA芯材浸入lmg/ml的己二胺-異丙醇溶液中，反應(yīng)I小時(shí)，用水充分漂洗去掉未反應(yīng)的己二胺，真空干燥至恒重；(5)將上述胺化后的電極化P-TCP /PDLLA芯材依次在濃度為lmg/ml的HA、lmg/ml的CHS溶液中自組裝，使其在室溫下緩慢攪拌，組裝完畢，置于濃度為lmg/ml的NGF水溶液中，加入I-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)反應(yīng)，其加入量為電極化￠-磷酸三鈣與聚乳酸芯材總當(dāng)量的I倍，反應(yīng)完畢后真空冷凍干燥，消毒，得三維仿生電極化梯度孔神經(jīng)導(dǎo)管。實(shí)施例2
三維仿生電極化梯度孔神經(jīng)導(dǎo)管的制備，制備步驟為
(1)將P-磷酸三鈣(P -TCP)粉末(IO-IOOnm)放置在一個(gè)直徑4厘米，高I. 5厘米氧化鋁環(huán)中，在5kvcm-l直流電場作用下，于200°C空氣中電極化2小時(shí)，即得電極化P -TCP,取出備用；
(2)在室溫下，以氯仿為溶劑，分別加入聚乳酸(PDLLA)和電極化P-TCP，制成質(zhì)量濃度10%的聚乳酸和質(zhì)量濃度6%的電極化P -TCP混合溶液；
(3)用磁力攪拌使上述混合液完全分散，再將混合溶液徐徐傾倒入玻璃模具內(nèi)，室溫下，采用溶劑揮發(fā)法揮發(fā)24小時(shí)，真空干燥24小時(shí)，再從模具上剝離芯材，制成電極化3 -TCP /PDLLA 芯材；
(4)胺化，將電極化P-TCP /PDLLA芯材浸入4mg/ml的己二胺-正丙醇溶液中，反應(yīng)2小時(shí)，用水充分漂洗去掉未反應(yīng)的乙二胺，真空干燥至恒重；
(5)將上述胺化后的P-TCP /PDLLA芯材依次在濃度為4mg/ml的HA、4mg/ml的CHS溶液中自組裝，使其在室溫下緩慢攪拌，組裝完畢，置于4mg/ml的NGF水溶液中，加入I-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)反應(yīng)，其加入量為電極化￠-磷酸三鈣與聚乳酸芯材總當(dāng)量的I. 5倍，反應(yīng)完畢后真空冷凍干燥，消毒，得三維仿生電極化梯度孔神經(jīng)導(dǎo)管。實(shí)施例3
三維仿生電極化梯度孔神經(jīng)導(dǎo)管的制備，制備步驟為
(1)將P-磷酸三鈣(P -TCP)粉末(IO-IOOnm)放置在一個(gè)直徑6厘米，高2厘米氧化鋁環(huán)中，在8kvcm-l直流電場作用下，于300°C空氣中電極化I小時(shí)，即得電極化P -TCP，取出備用；
(2)在室溫下，以丙酮為溶劑，分別加入聚乳酸(PDLLA)和電極化P-TCP，制成質(zhì)量濃度15%的聚乳酸和質(zhì)量濃度8%的電極化P -TCP混合溶液；
(3)用磁力攪拌使上述混合液完全分散，再將混合溶液徐徐傾倒入玻璃模具內(nèi)，室溫下，采用溶劑揮發(fā)法揮發(fā)36小時(shí)，真空干燥36小時(shí)，再從模具上剝離芯材，制成電極化3 -TCP /PDLLA 芯材；
(4)胺化，將電極化P-TCP /PDLLA芯材浸入7mg/ml的乙二胺-異丙醇溶液中，反應(yīng)I小時(shí)，用水充分漂洗去掉未反應(yīng)的乙二胺，真空干燥至恒重；
(5)將上述胺化后的電極化P-TCP /PDLLA芯材依次在濃度為7mg/ml的HA、7mg/ml的CHS溶液中自組裝，使其在室溫下緩慢攪拌，組裝完畢，置于7mg/ml的NGF水溶液中，加入I-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)反應(yīng)，其加入量為電極化￠-磷酸三鈣與聚乳酸芯材總當(dāng)量的I. 15倍，反應(yīng)完畢后真空冷凍干燥，消毒，得三維仿生電極化梯度孔神經(jīng)導(dǎo)管。實(shí)施例4 三維仿生電極化梯度孔神經(jīng)導(dǎo)管的制備，制備步驟為
(1)將P-磷酸三鈣(P -TCP)粉末(IO-IOOnm)放置在一個(gè)直徑8厘米，高3厘米氧化鋁環(huán)中，在IOkvcm-I直流電場作用下，于500°C空氣中電極化2小時(shí)，即得電極化P-TCP，取出備用；
(2)在室溫下，以三氯甲烷為溶劑，分別加入聚乳酸(PDLLA)和電極化P-TCP，制成質(zhì)量濃度20%的聚乳酸和質(zhì)量濃度10%的電極化3 -TCP混合溶液；
(3)用磁力攪拌使上述混合液完全分散，再將混合溶液徐徐傾倒入玻璃模具內(nèi)。室溫下，采用溶劑揮發(fā)法揮發(fā)48小時(shí)，真空干燥48小時(shí)，再從模具上剝離芯材，制成電極化3 -TCP /PDLLA 芯材；
(4)胺化，將電極化P-TCP /PDLLA芯材浸入10mg/ml的乙二胺-正丙醇溶液中，反應(yīng)2小時(shí)，用水充分漂洗去掉未反應(yīng)的乙二胺，真空干燥至恒重；
(5)將上述胺化后的P-TCP/PDLLA芯材依次在濃度為10mg/ml的HA、10mg/ml的CHS溶液中自組裝，使其在室溫下緩慢攪拌，組裝完畢，置于10mg/ml的NGF水溶液中，加入I-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)反應(yīng)，其加入量為電極化￠-磷酸三鈣與聚乳酸芯材總當(dāng)量的I. 3倍，反應(yīng)完畢后真空冷凍干燥，消毒，得三維仿生電極化梯度孔神經(jīng)導(dǎo)管。
權(quán)利要求
1.ー種三維仿生電極化梯度孔神經(jīng)導(dǎo)管，其特征在干它是電極化￠-磷酸三鈣/聚乳酸/透明質(zhì)酸/殼聚糖/神經(jīng)生長因子神經(jīng)導(dǎo)管，是以聚乳酸為基質(zhì)材料，添加電極化 磷酸三鈣，制備均勻分散的電極化￠-磷酸三鈣與聚乳酸芯材；再以靜電自組裝和偶合交聯(lián)技術(shù)將透明質(zhì)酸和殼聚糖以及神經(jīng)生長因子附于芯材表面制備的成分和孔結(jié)構(gòu)雙重梯度的三維仿生電極化梯度孔神經(jīng)導(dǎo)管。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種三維仿生電極化梯度孔神經(jīng)導(dǎo)管，其特征在于所述的神經(jīng)導(dǎo)管長度為10 100mm,內(nèi)徑為I 6mm,壁厚為0. 5 2mm。
3.—種三維仿生電極化梯度孔神經(jīng)導(dǎo)管的制備方法，其特征在于，包括如下步驟 (1)將P-磷酸三I丐納米粒子放置在ー個(gè)直徑2 8cm,高0. 5 3cm氧化招環(huán)中，在2 IOkvcm-I直流電場作用下,于100 500°C空氣中電極化I 2小時(shí),得電極化P -磷酸三鈣，取出備用； (2)在室溫下，以こ酸こ酷、氯仿、丙酮或三氯甲烷為溶劑，加入聚乳酸，再加入電極化^ -磷酸三鈣，制成混合溶液，混合溶液中聚乳酸質(zhì)量濃度為5wt% 20wt%，電極化P -磷酸三鈣質(zhì)量濃度為5wt% 10wt% ； (3)用磁力攪拌使上述混合液完全分散，再將混合溶液徐徐傾倒入玻璃模具內(nèi)，室溫下，采用溶劑揮發(fā)法揮發(fā)12 48小時(shí)，真空干燥12 48小時(shí)，再從模具上剝離芯材，制成電極化P-磷酸三鈣與聚乳酸芯材； (4)胺化將步驟(3)制得的電極化￠-磷酸三鈣與聚乳酸芯材，浸入濃度為I 10mg/ml的己ニ胺-異丙醇、己ニ胺-正丙醇、こニ胺-異丙醇或者こニ胺-正丙醇溶液中，反應(yīng)I 2小時(shí)，用水充分漂洗去掉未反應(yīng)的己ニ胺或こニ胺，真空干燥至恒重； (5)將上述胺化后的電極化￠-磷酸三鈣與聚乳酸芯材依次在濃度為I 10mg/ml的透明質(zhì)酸、I 10mg/ml的殼聚糖溶液中自組裝，使其在室溫下攪拌，組裝完畢，置于I 10mg/ml的神經(jīng)生長因子水溶液中，加入I-(3-ニ甲氨基丙基)-3-こ基碳ニ亞胺鹽酸鹽反應(yīng)，其加入量為電極化P -磷酸三鈣與聚乳酸芯材總當(dāng)量的I I. 5倍，反應(yīng)完畢后真空冷凍干燥，消毒，即得三維仿生電極化梯度孔神經(jīng)導(dǎo)管。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的三維仿生電極化梯度孔神經(jīng)導(dǎo)管的制備方法，其特征在于所用的聚乳酸的分子量為I. OX IO5 3. OX IO5，@ -磷酸三鈣粉末的粒徑為IO-IOOnm ;選的有機(jī)溶劑為こ酸こ酷、氯仿、丙酮或三氯甲烷。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的三維仿生電極化梯度孔神經(jīng)導(dǎo)管的制備方法，其特征在于步驟(3)制得的電極化￠-磷酸三鈣與聚乳酸芯材直徑為1.5 8mm。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的三維仿生電極化梯度孔神經(jīng)導(dǎo)管的制備方法，其特征在于得到的神經(jīng)導(dǎo)管外層管壁孔隙率為65%-75%的三維網(wǎng)絡(luò)狀結(jié)構(gòu)。
7.如權(quán)利要求I所述的ー種三維仿生電極化梯度孔神經(jīng)導(dǎo)管的應(yīng)用，其特征在于應(yīng)用于周圍神經(jīng)系統(tǒng)的修復(fù)、誘導(dǎo)周圍神經(jīng)再生以及組織工程中神經(jīng)細(xì)胞的體外培養(yǎng)。
全文摘要
一種三維仿生電極化梯度孔神經(jīng)導(dǎo)管的構(gòu)建及其制備。該神經(jīng)導(dǎo)管是電極化β-磷酸三鈣/聚乳酸/透明質(zhì)酸/殼聚糖/神經(jīng)生長因子神經(jīng)導(dǎo)管，是以聚乳酸為基質(zhì)材料，添加電極化β-磷酸三鈣，制備均勻分散的電極化β-磷酸三鈣與聚乳酸芯材；再以靜電自組裝和偶合交聯(lián)將透明質(zhì)酸和殼聚糖及神經(jīng)生長因子附于芯材表面制備的成分和孔結(jié)構(gòu)雙重梯度的三維仿生電極化梯度孔神經(jīng)導(dǎo)管，長度10～100mm，內(nèi)徑1～6mm，壁厚0.5～2mm，外層管壁為三維網(wǎng)絡(luò)狀結(jié)構(gòu)。本發(fā)明的神經(jīng)導(dǎo)管應(yīng)用于周圍神經(jīng)系統(tǒng)的修復(fù)、誘導(dǎo)周圍神經(jīng)再生以及組織工程中神經(jīng)細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本發(fā)明的制備方法簡單，成本低，對(duì)環(huán)境友好，經(jīng)濟(jì)效益高，適于工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)A61L27/20GK102727931SQ20121023187
公開日2012年10月17日 申請(qǐng)日期2012年7月6日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月6日
發(fā)明者劉慧 , 張喻, 徐海星, 李映萱, 王玉, 王玲, 許沛虎, 陳慧, 黃志軍, 龍倩 申請(qǐng)人:武漢理工大學(xué)