專利名稱：藿香油在制備治療陰道炎的藥物中的用途的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及藿香油的新用途，屬醫(yī)藥衛(wèi)生領域。
背景技術：
陰道炎是陰道粘膜及粘膜下結締組織的炎癥，是婦科門診的常見疾病。正常健康婦女，由于解剖學及生物化學特點，陰道對病原體的侵入有自然防御功能，當陰道的自然防御功能遭到破壞，則病原體易于侵入，導致陰道炎癥。目前，對陰道炎的治療以抗感染、抗炎為主，同時輔以物理治療，常用的治療方法有藥用陰道沖洗、局部放藥、口服用藥等。常見的陰道炎有細菌性陰道炎、念珠菌性陰道炎、滴蟲性陰道炎、老年性陰道炎。細菌性陰道炎，是陰道內正常菌群失調所致的一種混合感染，是陰道內有大量的細菌、伴有陰道分泌物性質改變的一組癥候群，主要癥狀為陰道分泌物增多，呈稀薄均質狀或稀糊狀，為灰白色或灰黃色，有魚腥臭味，性交后加重，可伴有輕度外陰瘙癢或燒灼感，有的人可發(fā)生下腹部疼痛、性交困難或尿痛。治療細菌性陰道炎的常見藥物為四環(huán)素等抗生素和磺甲硝咪唑等廣譜抗細菌化藥。念珠菌性陰道炎，是由念珠菌感染引起的陰道炎，主要致病菌為白色念珠菌。念珠菌為酵母菌，是條件致病性真菌，其致病性是相對的，是否發(fā)病取決于人體免疫力的高低及感染菌的數(shù)量、毒力。在正常機體中，其數(shù)量少，呈卵圓形，與機體處于共生狀態(tài)，不引起疾病。當機體在機體某些生理、病理因素影響下，機體抵抗力或免疫力降低時，平衡狀態(tài)被破壞，念珠菌由酵母相轉為菌絲相，在局部大量生長繁殖，引起陰道炎。表現(xiàn)為白帶增多，夕卜陰、陰道瘙癢、灼燒感，小便疼痛，外陰周圍常發(fā)紅、水腫，表皮變化多種多樣；可發(fā)生很淺的水皰丘疹，成群出現(xiàn)；亦可形成濕疹狀糜爛，局限于外陰或向周圍擴展至會陰、肛門周圍及股生殖皺裝，直至大腿內偵彳、外表，完全類似急性或亞急性濕疹；陰唇及陰蒂附近黏膜增厚，互相接觸的皮膚表面潮紅糜爛；個別可引起微小的白色膿皰，嚴重時發(fā)生潰瘍、外陰疼痛及局部淋巴結腫大。治療念珠菌性陰道炎的常見藥物為制霉菌素等抗生素和氟康唑、伊曲康唑等廣譜抗真菌化藥。滴蟲陰道炎(trichomonas vaginitis)是常見的陰道炎，由陰道毛滴蟲所引起。臨床上以白帶增多、質稀有泡沫、穢臭，陰道瘙癢為主要表現(xiàn)。檢查時可見陰道粘膜充血，嚴重者有散在的出血斑點，后穹窿有多量白帶，呈灰黃色、黃白色稀薄液體或為黃綠色膿性分泌物，常呈泡沫狀。常見治療藥物為甲硝唑等滅蟲化藥。老年性陰道炎常見于絕經(jīng)后的老年婦女，因卵巢功能衰退，雌激素水平降低，陰道壁萎縮，粘膜變薄，上皮細胞內糖原含量減少，陰道內PH值上升，局部抵抗力降低，致病菌容易入侵繁殖并且引起炎癥。主要癥狀為陰道分泌物增多及外陰瘙癢、灼熱感。檢查見陰道呈老年性改變，上皮萎縮，皺襞消失，上皮變平滑、菲薄。陰道粘膜充血，有小出血點，有時見淺表潰瘍，若潰瘍面與對側粘連，陰道檢查時粘連可被分開而引起出血，粘連嚴重時可造成陰道狹窄甚至閉鎖，炎癥分泌物引流不暢可形成陰道積膿甚或宮腔積膿。補充少量雌激素是老年性陰道炎的治療原則，可使陰道黏膜增厚，增強抵抗力。
目前，常用治療陰道炎的藥物大多為抗生素和廣譜抗菌藥物，副作用大，且廣泛使用會產生耐藥。中藥來源廣泛，毒性小，藥效長，因此，從中草藥中尋求治療陰道炎的新藥非
常必要。廣藿香Pogostemon cablin (Blanco) Benth.為唇形科多年生草本植物，又名枝香，原產菲律賓，現(xiàn)廣泛分布在中國、印度、日本、印度尼西亞、馬來西亞、馬達加斯加、巴西、巴拉圭和俄羅斯等，廣藿香油為唇形科多年生草本植物廣藿香Pogostemon cabl in (Blanco)Benth.的葉子、枝桿及根部經(jīng)水蒸氣蒸餾所得或者經(jīng)發(fā)酵處理的干葉提油。藿香Agastacherugosa(Fisch. Et Mey. )0. Ktze.為唇形科植物,含有揮發(fā)油，功效同廣藿香。 廣藿香油主要含有廣藿香醇及廣藿香酮(總量占40%以上)，具有抗炎、抗過敏、提高免疫、抗菌、鎮(zhèn)痛、抗痙攣、抗氧化、止吐等作用，藿香油主要含甲基胡椒酚(占80%以上)，具有抗菌、解痙、鎮(zhèn)靜及升高白細胞的作用(劉亮峰等，“廣藿香油及藿香油的研究概況”，中國中醫(yī)藥信息雜志2009年2月第16卷第2期)。其中，關于廣藿香油和藿香油體外抗菌的文獻報道較多，如，莫小路等，“廣藿香精油對植物病原真菌的抑菌活性研究”，中藥材2004年11月第27卷第11期報道了廣藿香油對13種植物病原真菌均有不同程度的抑制作用，其中，對檀香多毛孢、番茄早疫病菌、核盤菌的抑制作用較強；莫小路等，“兩種廣藿香油的抗菌作用研究”，中國現(xiàn)代中藥2011年9月第13卷第9期公開了廣藿香油可抑制大腸桿菌、表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、普通變形桿菌、枯草芽孢桿菌、綠膿桿菌、糞腸球菌8種細菌，以及產黃青霉、黑曲霉和白色念珠菌3種真菌；楊得坡等，“藿香和廣藿香揮發(fā)油的抗皮膚細菌活性與化學成分的研究”，微生物學雜志1998年12月第18卷第4期公開了藿香和廣藿香揮發(fā)油對16種皮膚細菌的體外抑制作用，如干燥棒桿菌、固著微球菌等；“藿香和廣藿香揮發(fā)油對皮膚癬菌和條件治病真菌的抑制作用”，中國藥學雜志2000年I月第35卷第I期報道了藿香油和廣藿香油對紅色癬菌等皮膚癬菌以及煙曲霉等霉菌有抑制作用；張廣文等，“廣藿香精油化學成分分析及其抗菌活性(II)”，中草藥2002年第33卷第3期公開了廣藿香油對黑曲霉、黃曲霉等致病真菌以及大腸桿菌等細菌的抗菌作用?，F(xiàn)有關于廣藿香油和藿香油抗菌抑菌的研究多集中于植物致病菌和皮膚病菌，主要目的在于提供抗菌外用新藥。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的在于提供藿香油的新用途，以及以藿香油為活性成分的藥物組合物。首先，本發(fā)明提供了藿香油在制備治療陰道炎的藥物中的用途。其中，所述藥物是治療念珠菌性陰道炎或者滴蟲性陰道炎的藥物。優(yōu)選地，所述藥物是治療白色念珠菌引起的念珠菌性陰道炎。其中，所述的藿香油來源于廣藿香Pogostemon cabl in (Blanco) Benth.或藿香Agastache rugosa(Fisch. Et Mey. )0. Ktze.提取的揮發(fā)油。其中，所述的藿香油來源于廣藿香Pogostemon cablin(Blanco)Benth 提取的揮發(fā)油，該揮發(fā)油中含百秋李醇不得低于26. 0% w/w。其中，所述的藿香油是由以下方法制備得到的取廣藿香Pogostemoncablin (Blanco) Benth.或藿香 Agastache rugosa (Fisch. Et Mey. ) 0. Ktze.的全草，粉碎成粗粉，加水，浸泡，采用水蒸氣蒸餾法提取，即得藿香油。本發(fā)明還提供了一種治療陰道炎的藥物組合物，它是以藿香油為活性成分，加上藥學上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的藥劑。其中，所述的藥劑是外用制劑、口服制劑或注射制劑。優(yōu)選地，所述外用制劑為洗齊U、栓劑、涂膜劑或搽劑。其中，所述制劑中藿香油的含量為0. 1% 100% w/w。本發(fā)明藿香油具有治療陰道炎的作用，尤其是對念珠菌性陰道炎和滴蟲性陰道炎具有確切的療效，具有良好的臨床應用前景。顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內容，按照本領域的普通技術知識和慣用手段，在不脫離 本發(fā)明上述基本技術思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。 以下通過實施例形式的具體實施方式
，對本發(fā)明的上述內容再作進一步的詳細說明。但不應將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實例。凡基于本發(fā)明上述內容所實現(xiàn)的技術均屬于本發(fā)明的范圍。


圖I本發(fā)明藥物對陰道毛滴蟲超微結構的影響。圖A為未經(jīng)任何藥物作用的陰道毛滴蟲的正常超微結構，其中I為細胞核，2為粗面內質網(wǎng)，3為過氫化酶體，4為鞭毛橫斷面；圖B至圖H為藥物作用后陰道毛滴蟲的超微結構變化，a :空泡，b :自噬泡，c :核周隙增寬，d :粗面內質網(wǎng)擴張，e :染色質積聚，f :核糖體消失，g :核膜消失，細胞核逐漸崩解，h :核固縮，i :細胞器崩解，j :胞膜損壞，胞漿漏出，蟲體死亡。
具體實施例方式實施例I本發(fā)明藿香油的制備取廣藿香Pogostemon cablin (Blanco) Benth.全草，粉碎過 20-40 目篩，加入10-14倍重量的蒸餾水，浸泡1-5小時后，采用水蒸氣蒸餾法提取2-6小時，即得本發(fā)明藿香油，其中含百秋李醇(C15H26O)不得低于26.0%。實施例2本發(fā)明藿香油的制備取藿香Agastache rugosa (Fisch. Et Mey. ) 0. Ktze.全草，粉碎過 20-40 目篩，力口A 10-14倍重量的蒸餾水，浸泡1-5小時后，采用水蒸氣蒸餾法提取2-6小時，即得本發(fā)明
藿香油。本發(fā)明藿香油也可按照藥典(2005年版)附錄XD揮發(fā)油測定法提取，還可采用有機溶劑提取、超臨界CO2萃取等現(xiàn)有技術進行提取，或者通過購買市售產品獲得。以下通過藥效試驗證明本發(fā)明的有益效果實驗例I本發(fā)明藿香油治療念珠菌性陰道炎的活性I、材料及儀器I. I實驗菌株①標準株白色念珠菌標準株(ATCC14053)，來自美國臨床實驗室菌種保藏中心；白色念珠菌標準株(CICC32819)和白色念珠菌標準株(CICC31284)，購自中國工業(yè)微生物
菌種保藏管理中心。
②臨床分離株14株白色念珠菌，于2011年9月至12月期間分離于四川省婦幼保健院婦科門診患者陰道分泌物，并經(jīng)BIO-KONT公司的KC-16鑒定板條與藥敏紙片鑒定為白色念珠菌。I. 2 藥物試驗藥物本發(fā)明藿香油(按照實施例I的方法制備)。陽性藥物克霉唑陰道片(濟南利民制藥有限公司，批號1108148)，潔爾陰洗液(四川恩威制藥有限公司，批號:1107102)。I. 3實驗動物小鼠(SPF級)[成都中醫(yī)藥大學實驗動物研究中心，生產許可證號SCXK (川)2008-11，使用合格證號=SCXK (川)2008-049]。
I. 4培養(yǎng)基、試劑及耗材沙氏瓊脂培養(yǎng)基(每升含氯霉素0. lg，廣東環(huán)凱微生物科技有限公司)。苯甲酸雌二醇注射液(天津金耀氨基酸有限公司，批號1007061)，一次性無菌培養(yǎng)皿(江蘇康健生物有限公司)等。I. 5主要儀器多點接種儀(日本佐久間制作所，SAKUMA MIT-P型)，實驗室用高壓滅菌器(SANYO，MLS-3780型)，C02INCUBATOR (SANYO, M0C-15A)，節(jié)能凈化工作臺(成都新光非蘭特凈化工程有限公司)。2、實驗方法2. I本發(fā)明藥物治療念珠菌性陰道炎的體內活性2. I. I小鼠念珠菌性陰道炎模型的建立受試菌活化將白色念珠菌標準株CICC32819接種于沙氏瓊脂培養(yǎng)基，37 °C培養(yǎng)48h，活化后備用。模型制備通過預實驗對影響模型建立的各項因素進行優(yōu)化，確定念珠菌性陰道炎模型的建立方法。在正式實驗中，選取SPF昆明小鼠70只，體重(20±2)g，其中60只在感染前6d開始，每只小鼠隔日背部皮下注射lmg/ml苯甲酸雌二醇油劑0. 1ml，并于最后I次注射后接種白色念珠菌I. 5 X IO7CFU/只，24h后重復感染I次。并于最后I次感染后48h和72h分別取陰道分泌物進行涂片鏡檢，觀察菌絲及芽生孢子生成情況，同時接種于沙氏瓊脂平板上，觀察菌株的生長情況；并觀察陰道分泌物等變化。在最后I次感染48h后用接種環(huán)取小鼠陰道分泌物接種于沙氏瓊脂平板上培養(yǎng)24tT48h，觀察平板上白色念珠菌的菌落生長情況，顯微鏡觀察菌絲生長情況。若在平板中生長有典型的白色念珠菌，顯微鏡下觀察到菌絲及芽生孢子，說明念珠菌性陰道炎模型小鼠制備成功。2. I. 2實驗分組待小鼠造模成功后，每只小鼠用0. Iml無菌生理鹽水進行陰道沖洗，將沖洗液進行菌落計數(shù)，根據(jù)小鼠陰道菌落計數(shù)結果將小鼠隨機分為6組，包括本發(fā)明藥物高、中、低三個劑量組，陽性藥物克霉唑組和潔爾陰組，模型組，每組10只。另以10只不感染白色念珠菌的小鼠作為空白對照。其中各組小鼠陰道內感染白色念珠菌的情況分析見表I。表I :各組小鼠陰道感染白色念珠菌的情況分析
權利要求
1.藿香油在制備治療陰道炎的藥物中的用途。
2.根據(jù)權利要求I所述的用途，其特征在于所述藥物是治療念珠菌性陰道炎或者滴蟲性陰道炎的藥物。
3.根據(jù)權利要求2所述的用途，其特征在于所述藥物是治療白色念珠菌引起的念珠菌性陰道炎。
4.根據(jù)權利要求r3任意一項所述的用途，其特征在于所述的藿香油來源于廣藿香Pogostemon cablin (Blanco) Benth.或藿香Agastache rugosa(Fisch. Et Mey. ) 0. Ktze.提取的揮發(fā)油。
5.根據(jù)權利要求r3任意一項所述的用途，其特征在于所述的藿香油來源于廣藿香Pogostemon cabl in (Blanco) Benth.提取的揮發(fā)油，該揮發(fā)油中含百秋李醇不得低于26. 0% w/w。
6.根據(jù)權利要求f3任意一項所述的用途，其特征在于所述的藿香油是由以下方法制備得到的取廣藿香Pogostemon cabl in (Blanco) Benth.或藿香Agastacherugosa(Fisch. Et Mey. )0. Ktze.的全草,粉碎成粗粉,加水,浸泡,采用水蒸氣蒸懼法提取，即得藿香油。
7.一種治療陰道炎的藥物組合物，其特征在于它是以藿香油為活性成分，加上藥學上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的藥劑。
8.根據(jù)權利要求7所述的藥物組合物，其特征在于所述的藥劑是外用制劑、口服制劑或注射制劑。
9.根據(jù)權利要求8所述的藥物組合物，其特征在于所述外用制劑為洗劑、栓劑、涂膜劑或搽劑。
10.根據(jù)權利要求7所述的藥物組合物，其特征在于所述制劑中藿香油的含量為.0.I 100% w/w。
全文摘要
本發(fā)明公開了藿香油在制備治療陰道炎的藥物中的用途。本發(fā)明還公開了一種治療陰道炎的藥物組合物，它是以藿香油為活性成分，加上藥學上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的藥劑。藿香油治療陰道炎的療效顯著，有較強的實際應用價值。
文檔編號A61P31/04GK102743432SQ20121023156
公開日2012年10月24日 申請日期2012年7月5日 優(yōu)先權日2012年7月5日
發(fā)明者代敏, 彭成, 彭穎, 林大勝, 王天祥, 王蓬勃 申請人:成都中醫(yī)藥大學, 成都華神集團股份有限公司