專利名稱：注射用阿魏酸鈉凍干粉組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，尤其涉及一種注射用阿魏酸鈉凍干粉組合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
心肌缺血再灌注損傷(MRI)是指心肌細(xì)胞因缺血發(fā)生可逆的、可存活的損傷，在缺血糾正時(shí)，這種損傷反而加重，繼而引起細(xì)胞死亡或進(jìn)一步功能障礙。所有器官都能耐受一定時(shí)間的缺血，超過(guò)一定時(shí)間后，則會(huì)發(fā)生再灌注損傷。氧化脂蛋白對(duì)血管內(nèi)皮的入侵，造成血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌一氧化氮(NO)減少，是發(fā)生動(dòng)脈粥樣硬化的重要原因之一。自由基的作用是缺血再灌注損傷的重要發(fā)病學(xué)環(huán)節(jié)。缺血再灌注時(shí)，自由基生成增多，將使膜脂質(zhì)過(guò)氧化增強(qiáng)、蛋白質(zhì)功能抑制、核酸及染色體破壞，因此清除過(guò)多的自由基，可減輕缺血再灌注損傷。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種注射用阿魏酸鈉凍干粉組合物及其制備方法，該復(fù)方制劑有很強(qiáng)的協(xié)同作用，療效迅速，在臨床上能很好的起到對(duì)心肌缺血-再灌注損傷的保護(hù)作用。本發(fā)明的具體技術(shù)方案為一種注射用阿魏酸鈉凍干粉組合物，其特征在于，該組合物的主藥為質(zhì)量百分比
0.1% 99. 9%的阿魏酸鈉和99. 9% 0. 1%的精氨酸。一種以阿魏酸鈉和精氨酸為主藥制備注射用凍干粉針的方法，其特征在于，具體操作步驟為(I)將質(zhì)量百分比為0. 1% 99. 9%的阿魏酸鈉、99. 9% 0. 1%精氨酸，和主藥I 10倍的甘露醇加到注射用水中；(2)攪拌溶解后加入NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值6. 5 7. 5 ;(3)加入0. 1%的活性炭攪拌30分鐘；(4)濾除活性炭，藥液再經(jīng)0. 45 m和0. 22 y m微孔濾膜過(guò)濾；(5)將過(guò)濾后的藥液罐裝，送入冷凍干燥機(jī)中，降溫至_40°C，保溫2小時(shí)后，緩慢升溫至-5V 0°C升華干燥，再升溫至35°C后，保溫3小時(shí)；(6)冷凍干燥結(jié)束，出箱，即得到注射用阿魏酸鈉和精氨酸的凍干粉針。精氨酸(Arg)為氨基酸類藥，參與鳥氨酸循環(huán)，在肝精氨酸酶活力下促進(jìn)氨轉(zhuǎn)化為無(wú)毒的尿素由尿中排出，以降低血氨。主要用于血氨增高引起的肝昏迷及各類肝昏迷忌用谷氨酸鈉的病人。新的藥理研究發(fā)現(xiàn)Arg是氮NO的生理性前提，經(jīng)NO合成酶(NOS)作用后生成NO。NO在體內(nèi)具有多種生理活性作用舒張血管，抗血小板聚集，抗血栓形成和抗血管平滑肌增生等。因而作為合成NO的底物，提供外源性的Arg，通過(guò)Arg-NO通路，促進(jìn)體內(nèi)NO濃度增加，Arg在臨床中能起到對(duì)心肌缺血-再灌注損傷有保護(hù)作用。
阿魏酸鈉(Sodium ferulate,商品名當(dāng)歸素)是阿魏酸(4_輕基3_甲氧基肉桂酸的鈉鹽。阿魏酸普遍存在于當(dāng)歸、川芎、蜂膠、酸棗仁等中藥材中，具有抑制血小板聚集、促進(jìn)血小板解聚、抗血栓形成、解除血管平滑肌痙攣、抗氧化和自由基、提高膜穩(wěn)定性，以及抗炎、鎮(zhèn)痛、抗生育、調(diào)節(jié)免疫功能、利肝保濕等藥理作用。阿魏酸鈉對(duì)家兔心肌缺血-再灌注損傷有保護(hù)作用，能明顯改善左室收縮壓(LVSP)、左室終末舒張壓(LVEDP)、左室內(nèi)壓最大上升和下降速度，使缺血及再灌注狀態(tài)下心臟順應(yīng)性及射血功能得到良好的保護(hù)。研究發(fā)現(xiàn)，阿魏酸鈉可以降低高膽固醇導(dǎo)致的動(dòng)脈粥樣硬化斑塊面積，改善高脂血清導(dǎo)致的內(nèi)皮細(xì)胞損傷，其機(jī)制可能與降低血清甘油三酯水平、增加內(nèi)皮細(xì)胞NO分泌及改變細(xì)胞因子的表達(dá)有關(guān)。所以阿魏酸鈉和精氨酸凍連用能很好的起到對(duì)心肌缺血-再灌注損傷的保護(hù)作用。本發(fā)明用凍干工藝生產(chǎn)注射用阿魏酸鈉和精氨酸的凍干粉針有以下優(yōu)點(diǎn)1)液體加工方便，簡(jiǎn)化了無(wú)菌作業(yè)過(guò)程；2)提高了制劑的穩(wěn)定性；3)無(wú)需經(jīng)過(guò)熱處理就能去除產(chǎn)品中的水分；4)增強(qiáng)了制劑的復(fù)水(溶解)性。
具體實(shí)施例方式為了使本發(fā)明實(shí)現(xiàn)的技術(shù)手段、創(chuàng)作特征、達(dá)成目的與功效易于明白了解，下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。實(shí)施例一、注射用阿魏酸鈉組合物凍干粉針的制備，以1000支計(jì)I.處方
阿魏酸鈉IOOg 精氨酸40g 甘露醇1()%
注射用水2000ml2.制備工藝將處方量的的阿魏酸鈉、精氨酸和甘露醇加到注射用水中，攪拌溶解后加入NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值6. 5 7. 5，加入0. 1%的活性炭攪拌30分鐘，濾除活性炭，藥液再經(jīng)0. 45 y m和0. 22 u m微孔濾膜過(guò)濾，罐裝，送入冷凍干燥機(jī)中，降溫至_40°C，保溫2小時(shí)后，緩慢升溫至-5°C 0°C升華干燥，再升溫至35°C后，保溫3小時(shí)，冷凍干燥結(jié)束，出箱。實(shí)施例二、注射用阿魏酸鈉組合物凍干粉針的制備，以1000支計(jì)I.處方 阿魏酸鈉IOOg
精氨酸bOg
甘露醇IOOg
注射用水2000m L2.制備工藝將處方量的的阿魏酸鈉、精氨酸和甘露醇加到注射用水中，攪拌溶解后加入NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值6. 5 7. 5，加入0. 1%的活性炭攪拌30分鐘，濾除活性炭，藥液再經(jīng)0. 45 y m 至-5°C 0°C升華干燥，再升溫至35°C后，保溫3小時(shí)，冷凍干燥結(jié)束，出箱。實(shí)施例三、注射用阿魏酸鈉組合物凍干粉針的制備，以1000支計(jì)I.處方
阿魏酸鈉IOOg
精氨酸80g
甘露醇IOOg
注射用水2000ml2.制備工藝將處方量的的阿魏酸鈉、精氨酸和甘露醇加到注射用水中，攪拌溶解后加入NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值6. 5 7. 5，加入0. 1%的活性炭攪拌30分鐘，濾除活性炭，藥液再經(jīng)0. 45 y m和0. 22 u m微孔濾膜過(guò)濾，罐裝，送入冷凍干燥機(jī)中，降溫至_40°C，保溫2小時(shí)后，緩慢升溫至-5°C 0°C升華干燥，再升溫至35°C后，保溫3小時(shí)，冷凍干燥結(jié)束，出箱。實(shí)驗(yàn)資料材料與方法I. I研究對(duì)象與分組大白兔40只，健康雄性，體重2. 5 3. 0 kg,應(yīng)用隨機(jī)排列表分成五組正常對(duì)照組、假手術(shù)組、阿魏酸鈉組(實(shí)施例一組，實(shí)施例二組，實(shí)施例三組)，每組8只。阿魏酸鈉組(實(shí)施例一組，實(shí)施例二組，實(shí)施例三組缺血前30 min由兔耳緣靜脈持續(xù)滴注)。1.2動(dòng)物模型的制作以30 g/L戊巴比妥鈉I ml/kg (30 mg/kg)經(jīng)耳緣靜脈注射麻醉，沿胸骨左緣第3 4肋間打開胸腔，縱行切開心包膜，暴露心臟，并將心包膜縫合于胸壁呈吊籃狀，于冠狀動(dòng)脈左回旋支(LCX)遠(yuǎn)端1/3 1/2處進(jìn)行結(jié)扎，建立急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI )模型。240 min后放松結(jié)扎線 120 min,以使冠狀動(dòng)脈再通形成再灌注，即缺血再灌注模型。對(duì)照組及阿魏酸鈉組結(jié)扎240 min，再松解120min，分別建立AMI及再灌注模型。假手術(shù)組冠脈下只穿線，不結(jié)扎，無(wú)AMI，也無(wú)再灌注。1.3模型制作成功判定方法血管結(jié)扎后供血區(qū)心肌顏色由鮮紅轉(zhuǎn)為暗紫，心電圖示ST段弓背向上抬高大于0. 5 mV，局部心肌變成紫紅色并有節(jié)段性運(yùn)動(dòng)不良，證實(shí)閉塞有效，松開結(jié)扎前后ST廬T下降1/2以上，局部心肌變紅，為缺血再灌注模型成功。1.4心肌病理染色及區(qū)域劃分再灌注后，按I ml/kg從左心房注入硫黃素，使復(fù)流區(qū)著色，無(wú)復(fù)流區(qū)不著色；再于原位重新結(jié)扎LCX，從左心房再注入Evan’s藍(lán)，使結(jié)扎區(qū)外著藍(lán)色，結(jié)扎區(qū)不著藍(lán)色。立即取出心臟，沿心臟長(zhǎng)軸分為5 6心肌短軸切片，結(jié)果非結(jié)扎區(qū)心肌呈藍(lán)色，結(jié)扎區(qū)在紫外線(波長(zhǎng)365 nm)下無(wú)復(fù)流區(qū)不顯色，有復(fù)流處顯色。對(duì)切片拍照，計(jì)算出左心室室壁心肌面積、結(jié)扎區(qū)(無(wú)藍(lán)色)心肌面積及無(wú)復(fù)流區(qū)(紫外線下不顯色)面積；同樣依結(jié)扎區(qū)心肌面積/左心室室壁心肌面積計(jì)算出結(jié)扎區(qū)心肌范圍(ligationarea，LA)，依無(wú)復(fù)流區(qū)面積/結(jié)扎區(qū)心肌面積計(jì)算出心肌無(wú)復(fù)流心肌范圍(area of no廬 reflow, ANR)。I. 5血液樣本及心肌組織選擇素(Ps)的采集及測(cè)定三實(shí)驗(yàn)組分別于結(jié)扎前5min、結(jié)扎后240 min、再灌注后120min抽取靜脈血2 ml。注入2 ml放入普通試管中，離心取血清_20°C保存待檢。取各區(qū)域心肌標(biāo)本用40 g/L多聚甲醛固定，石蠟包埋，常規(guī)制片，免疫組化法測(cè)定各區(qū)域心肌組織中的Ps表達(dá)水平。結(jié)果①對(duì)照組和阿魏酸鈉組AMI后240 min、再灌注后120 min的血清IL6均顯著高于假手術(shù)組(P均<0.01);阿魏酸鈉組各時(shí)間點(diǎn)除AMI前血清IL廬6均顯著低于對(duì)照組(P均<0.05)。②Ps免疫組化顯示，對(duì)照組及阿魏酸鈉組中，Ps在復(fù)流區(qū)及無(wú)復(fù)流區(qū)血管內(nèi)皮細(xì)胞有強(qiáng)表達(dá)，明顯強(qiáng)于正常區(qū)及假手術(shù)組(P均< 0. 01);阿魏酸鈉組與對(duì)照組比較，Ps在復(fù)流區(qū)及無(wú)復(fù)流區(qū)表達(dá)均明顯減弱(P均<0.01)。③病理染色分析示，阿魏酸鈉組結(jié)扎區(qū)心肌范圍與對(duì)照組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均> 0. 05)。以上顯示和描述了本發(fā)明的基本原理、主要特征以及本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)。本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該了解，本發(fā)明不受上述實(shí)施例的限制，上述實(shí)施例和說(shuō)明書中描述的只是說(shuō)明本發(fā)明的原理，在不脫離本發(fā)明精神和范圍的前提下，本發(fā)明還會(huì)有各種變化和改進(jìn)，這些 變化和改進(jìn)都落入要求保護(hù)的本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明要求保護(hù)范圍由所附的權(quán)利要求書及其等效物界定。
權(quán)利要求
1.ー種注射用阿魏酸鈉凍干粉組合物，其特征在于，該組合物的主藥為質(zhì)量百分比O. 1% 99. 9%的阿魏酸鈉和99. 9% O. 1%的精氨酸。
2.一種以權(quán)利要求I所述組合物的主藥制備注射用凍干粉針的方法，其特征在于，具體操作步驟為 (1)將質(zhì)量百分比為O.1% 99. 9%的阿魏酸鈉、99. 9% O. 1%精氨酸，和主藥I 10倍的甘露醇加到注射用水中； (2)攪拌溶解后加入NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值6.5 7. 5 ; (3)加入O.1%的活性炭攪拌30分鐘； (4)濾除活性炭，藥液再經(jīng)O.45 μ m和O. 22 μ m微孔濾膜過(guò)濾； (5)將過(guò)濾后的藥液罐裝，送入冷凍干燥機(jī)中，降溫至_40°C，保溫2小時(shí)后，緩慢升溫至-5°C O °C升華干燥，再升溫至35 °C后，保溫3小吋； (6)冷凍干燥結(jié)束，出箱，即得到注射用阿魏酸鈉和精氨酸的凍干粉針。
全文摘要
一種注射用阿魏酸鈉凍干粉組合物及其制備方法，涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，該組合物的主藥為阿魏酸鈉和精氨酸；制備注射用凍干粉針的具體操作步驟為將質(zhì)量百分比為0.1%～99.9%的阿魏酸鈉、99.9%～0.1%精氨酸，和主藥1～10倍的甘露醇加到注射用水中；攪拌溶解后加入NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值6.5～7.5；加入0.1%的活性炭攪拌30分鐘；濾除活性炭，藥液再經(jīng)0.45μm和0.22μm微孔濾膜過(guò)濾；將過(guò)濾后的藥液罐裝，送入冷凍干燥機(jī)中，降溫至-40℃，保溫2小時(shí)后，緩慢升溫至-5℃～0℃升華干燥，再升溫至35℃后，保溫3小時(shí)；冷凍干燥結(jié)束，出箱，即得到注射用阿魏酸鈉和精氨酸的凍干粉針。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)液體加工方便，簡(jiǎn)化了無(wú)菌作業(yè)過(guò)程；提高了制劑的穩(wěn)定性；無(wú)需經(jīng)過(guò)熱處理就能去除產(chǎn)品中的水分；增強(qiáng)了制劑的復(fù)水(溶解)性。
文檔編號(hào)A61P9/10GK102657638SQ20121016994
公開日2012年9月12日 申請(qǐng)日期2012年5月29日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月29日
發(fā)明者汪六一, 汪金燦 申請(qǐng)人:海南衛(wèi)康制藥(潛山)有限公司