專利名稱：一種治療萎縮性胃炎的藥物組合物及其制備方法與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物組合物及其制備方法，特別涉及一種治療萎縮性胃炎的藥物組合物及其制備方法，屬于醫(yī)藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
惡性腫瘤是世界第一殺手，因惡性腫瘤死亡的人數(shù)超過因艾滋病、結(jié)核病和瘧疾三者死亡人數(shù)之和。我國因惡性腫瘤死亡的人數(shù)占死亡總數(shù)的22. 32%，預(yù)防癌癥的發(fā)生，降低其死亡率，保證人民健康、節(jié)約衛(wèi)生資源具有重要意義。我國是胃癌發(fā)病率和死亡率最聞的國家之一，是世界平均水平的2倍多。我國姆 年新發(fā)胃癌40萬例，占世界發(fā)病人數(shù)的42%，因此，在我國防治胃癌的任務(wù)十分艱巨。在胃癌發(fā)病過程中，萎縮性胃炎是ー個轉(zhuǎn)折點，從萎縮性胃炎開始，即進入胃癌前疾病階段，處于此階段的病人患胃癌的幾率明顯升高，且病變越嚴重胃癌發(fā)病率越高，進入萎縮性胃炎階段之后，僅僅根除Hp并不能使胃粘膜萎縮逆轉(zhuǎn)，胃癌發(fā)生率依然較高。所以將疾病控制在萎縮性胃炎之前的階段、逆轉(zhuǎn)胃粘膜萎縮，對預(yù)防胃癌的發(fā)生具有非常重要意義。研究結(jié)果顯示，萎縮性胃炎屬于氣陰兩虛證居多，因此，針對氣虛、陰虧、血瘀、熱毒各個病理，針對相關(guān)病機用藥，通過益氣養(yǎng)陰、活血消癥、清熱解毒，使萎縮的腺體恢復(fù)，腸上皮化生和異型增生消退，可以達到防治胃癌的發(fā)生。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種治療萎縮性胃炎的藥物組合物。本發(fā)明的另ー個目的在于提供一種治療萎縮性胃炎的藥物組合物的制備方法。本發(fā)明的目的還在于提供一種治療萎縮性胃炎的藥物組合物的檢測方法。本發(fā)明的目的是通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)的本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成為黨參5(Tl50重量份丹參10(Γ300重量份三七1(Γ50重量份半枝蓮100 300重量份白花蛇舌草200 400重量份烏藥50 200重量份百合20(Γ400重量份莪術(shù)2(Γ100重量份香櫞50 200重量份。本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成優(yōu)選為黨參100重量份丹參200重量份三七30重量份半枝蓮200重量份白花蛇舌草300重量份烏藥100重量份百合300重量份莪術(shù)50重量份香橡100重量份。本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成優(yōu)選為黨參60重量份丹參280重量份ニ七15重量份半枝蓮280重量份白花蛇舌草220重量份烏藥180重量份百合220重量份莪術(shù)90重量份香櫞70重量份。
本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成優(yōu)選為黨參140重量份丹參120重量份ニ七45重量份半枝蓮120重量份白花蛇舌草380重量份烏藥70重量份百合380重量份莪術(shù)30重量份香櫞180重量份。所述百合為蜜百合，按照2010年版《中國藥典》一部第123頁百合項下蜜百合的炮制方法取凈百合，照蜜制法(附錄IID)炒至不粘手。每IOOkg百合，用煉蜜5kg。所述原料藥按常規(guī)エ藝提取，加入常規(guī)輔料，制成臨床上可接受的劑型，包括但不限于顆粒劑、片劑、膠囊劑、散劑、丸劑。本發(fā)明藥物組合物還可以通過如下方法制備
步驟ー按配方比例取莪術(shù)和香櫞，加5 20倍量水，水蒸氣蒸餾提取2 10小時，過濾，收集揮發(fā)油，水提取液和藥渣備用；步驟ニ 取揮發(fā)油，按照重量比揮發(fā)油β —環(huán)糊精為I: Γ16，飽和水溶液法包合l(T50min，冷蔵，抽濾，用水和石油醚分別洗滌f 3次，濾餅，干燥，即得揮發(fā)油β -環(huán)糊精包合物，備用；步驟三按配方比例取三七，加4 14倍30 90%こ醇(W/V)，提取I 3次，每次O. 5 2小時，過濾，合并濾液，得三七提取液；步驟四取步驟ー的水提取液和藥渣，與黨參、丹參、半枝蓮、白花蛇舌草、烏藥、百合混合,加6 20倍量水浸泡O. 5"4h,煎煮f 3次，每次O. 5^2. O小時，過濾，合并濾液，將濾液濃縮至生藥水質(zhì)量/體積比為I:廣5，待冷至室溫，加入こ醇使藥液中醇濃度為40 80%，靜置，離心，取上清液，備用；步驟五取步驟四得到的上清液與步驟三得到的三七醇提液混合均勻，回收溶剤，減壓干燥，即得干浸膏粉；步驟六取步驟五得到的干浸膏粉和步驟ニ得到的揮發(fā)油環(huán)糊精包合物，按照常規(guī)エ藝，加入適當(dāng)輔料，制成臨床上可接受的劑型，包括但不限于顆粒劑、片劑、膠囊劑、散劑、丸剤。本發(fā)明藥物組合物的制備方法優(yōu)選包括如下步驟步驟ー按配方比例取莪術(shù)粉碎為最粗粉，香櫞剪成寬Icm的條狀，加8倍量水，水蒸氣蒸餾提取6小時，過濾，收集揮發(fā)油，水提取液和藥渣備用；步驟ニ 取揮發(fā)油，按照重量比揮發(fā)油β —環(huán)糊精為1:8，50°C下以飽和水溶液法包合20min，低溫5-7°C冷藏24h，抽濾，用少量水和60_90°C的石油醚分別洗滌3次，濾餅于40°C，0. IMPa真空干燥2h，即得揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合物，備用；步驟三按配方比例取三七粉碎為最粗粉，加8重量倍70%こ醇，提取3次，毎次
I.5小時，過濾，合并濾液，得三七提取液；步驟四取步驟ー的藥渣和水提取液，與黨參、丹參、半枝蓮、白花蛇舌草、烏藥、百合混合,加14倍量水浸泡2h，煎煮3次，每次I. O小時，過濾，合并濾液，將濾液在60°C減壓濃縮至生藥水質(zhì)量/體積為1:2，待冷至室溫，加入95%こ醇使藥液中醇濃度達到70%，4-10°C下靜置8小時后，4000r/min離心20min，取上清液，備用；步驟五取步驟四得到的上清液與步驟三得到的三七醇提液混合均勻，回收溶剤，60°C減壓干燥，即得干浸膏粉；
步驟六取步驟五得到的干浸膏粉和步驟ニ得到的揮發(fā)油環(huán)糊精包合物干粉，混合均勻，按浸膏重量比100:100:0. 2加入糊精和甜菊苷，混合均勻后，噴灑90%こ醇適量，揉搓，過20目篩制濕顆粒，60°C干燥，過60目篩整粒，即得。本發(fā)明藥物組合物的制備方法優(yōu)選包括如下步驟步驟ー按配方比例取莪術(shù)和香櫞，加15倍量水，水蒸氣蒸餾提取3小時，過濾，收集揮發(fā)油，水提取液和藥渣備用；步驟ニ 取揮發(fā)油，按照重量比揮發(fā)油β —環(huán)糊精為1:15，飽和水溶液法包合15min,冷蔵，抽濾，用水和石油醚分別洗滌I次，濾餅，干燥，即得揮發(fā)油β _環(huán)糊精包合物，備用;步驟三按配方比例取三七，加12倍40%こ醇(W/V)，提取I次，每次2小時，過濾，合并濾液，得三七提取液；步驟四取步驟ー的水提取液和藥渣，與黨參、丹參、半枝蓮、白花蛇舌草、烏藥、百合混合,加8倍量水浸泡3h，煎煮I次，每次2小時，過濾，合并濾液，將濾液濃縮至生藥水質(zhì)量/體積比為1:4，待冷至室溫，加入こ醇使藥液中醇濃度為50%，靜置，離心，取上清液，備用;步驟五取步驟四得到的上清液與步驟三得到的三七醇提液混合均勻，回收溶剤，減壓干燥，即得干浸膏粉；步驟六取步驟五得到的干浸膏粉和步驟ニ得到的揮發(fā)油環(huán)糊精包合物，按照常規(guī)エ藝，加入適當(dāng)輔料，制成臨床上可接受的劑型，包括但不限于顆粒劑、片劑、膠囊劑、散劑、丸剤。本發(fā)明藥物組合物的制備方法優(yōu)選包括如下步驟步驟ー按配方比例取莪術(shù)和香櫞，加10倍量水，水蒸氣蒸餾提取9小時，過濾，收集揮發(fā)油，水提取液和藥渣備用；步驟ニ取揮發(fā)油，按照重量比揮發(fā)油β —環(huán)糊精為1:5，飽和水溶液法包合40min,冷蔵，抽濾，用水和石油醚分別洗滌2次，濾餅，干燥，即得揮發(fā)油β -環(huán)糊精包合物，備用;步驟三按配方比例取三七，加6倍90%こ醇(W/V)，提取2次，每次I小時，過濾，合并濾液，得三七提取液；步驟四取步驟ー的水提取液和藥渣，與黨參、丹參、半枝蓮、白花蛇舌草、烏藥、百合混合,加19倍量水浸泡lh，煎煮2次，每次O. 5小時，過濾，合并濾液，將濾液濃縮至生藥水質(zhì)量/體積比為1:3，待冷至室溫，加入こ醇使藥液中醇濃度為60%，靜置，離心，取上清液，備用；步驟五取步驟四得到的上清液與步驟三得到的三七醇提液混合均勻，回收溶剤，減壓干燥，即得干浸膏粉；步驟六取步驟五得到的干浸膏粉和步驟ニ得到的揮發(fā)油環(huán)糊精包合物，按照常規(guī)エ藝，加入適當(dāng)輔料，制成臨床上可接受的劑型，包括但不限于顆粒劑、片劑、膠囊劑、散劑、丸剤。本發(fā)明藥物組合物顆粒制劑的質(zhì)量檢測方法為( I)野黃芩苷、丹酚酸B含量測定、
對照品溶液制備稱取適量野黃芩苷對照品置于量瓶中，加甲醇定容，制成濃度為O. 20(T0. 600mg/mL儲備液。精密量取I體積份野黃芩苷儲備加甲醇稀釋25倍，制成濃度為O. 008 0. 024mg/mL野黃芩苷對照品溶液；稱取適量丹酚酸B對照品于量瓶中，加甲醇定容，制成濃度為O. 10(T0. 500mg/mL儲備液。精密量取I體積份丹酚酸B儲備液置加甲醇稀釋2倍，制成濃度為O. 05(T0. 250mg/mL的丹酚酸B對照品溶液；供試品溶液制備本發(fā)明藥物組合物制劑，置于IOmL量瓶中，加甲醇超聲處理l(T40min，待冷卻至室溫后，定容，O. 45 μ m微孔濾膜過濾，得供試品溶液；
陰性樣品溶液分別稱取缺半枝蓮的陰性樣品和缺丹參的陰性樣品，置于IOmL量瓶中，加甲醇超聲處理l(T40min，待冷卻至室溫后，定容，O. 45 μ m微孔濾膜過濾，得半枝蓮陰性樣品溶液和丹參陰性樣品溶液；色譜條件色譜柱C18反相柱；流動相A :甲醇；流動相B :0. 1%磷酸；流速I. OmL/min ;柱溫30°C ;檢測波長280nm、335nm ;梯度洗脫程序為(Tl 7 33分鐘，流動相A為34%"36%"40% ；本發(fā)明藥物組合物制劑野黃芩苷平均含量計為O. 072%，丹酚酸B含量計為
I.50% ；(2)三七皂苷含量測定對照品溶液制備分別稱取三七皂苷Rl對照品、人參皂苷Rgl對照品、人參皂苷Rbl對照品適量，置于容量瓶中，分別加甲醇溶解并定容至刻度，制成濃度為O. 05(T0. 150mg/mL的三七皂苷RU0. 20(T0. 400mg/mL的人參皂苷Rgl和O. 15(Γθ. 550mg/mL的人參皂苷Rbl對照品溶液；供試品溶液制備本發(fā)明藥物組合物制劑，置具塞錐形瓶中，加入10倍量水飽和正丁醇，精密稱重，放置過夜，超聲處理2(T40min，冷卻至室溫，精密稱重，補足減失的水飽和正丁醇，濾過；取續(xù)濾液，置分液漏斗中，用等體積的1%氫氧化鈉溶液洗滌Γ3次，1%氫氧化鈉溶液備用，正丁醇層再用等體積正丁醇飽和水洗滌，合并1%氫氧化鈉溶液和水層，用水飽和正丁醇提取，合并正丁醇液，蒸干，殘渣用甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，過O. 45 μ m微孔濾膜，即得;2. I色譜條件色譜柱C18反相柱；流動相A :水，流動相B :こ腈；柱溫30°C ;流速lmL/min ;梯度洗脫程序為0 8 25 60分鐘，流動相A為20% 20% 33% 60% ；本發(fā)明藥物組合物制劑三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1的含量之和計為
O.30%ο本發(fā)明藥物組合物顆粒制劑的質(zhì)量檢測方法優(yōu)選為含量測定
( I)野黃芩苷、丹酚酸B含量測定對照品溶液制備精密稱取野黃芩苷對照品4. Olmg置IOmL量瓶中，加75%甲醇定容，即得濃度為O. 401mg/mL儲備液。精密量取ImL野黃芩苷儲備液置25mL量瓶中，加75%甲醇定容，即為濃度為O. 016mg/mL野黃芩苷對照品溶液；精密稱取丹酚酸B對照品7. 43mg置25mL量瓶中，加75%甲醇定容，即得濃度為
0.297mg/mL儲備液。精密量取5mL丹酚酸B儲備液置IOmL量瓶中，加甲醇定容，即得濃度為O. 1485mg/mL的丹酚酸B對照品溶液；供試品溶液制備精密稱取本發(fā)明藥物組合物制劑lOOmg，置于IOmL量瓶中，加75%甲醇超聲處理 30min,待冷卻至室溫后,定容,0. 45 μ m微孔濾膜過濾，即得；陰性樣品溶液分別稱取缺半枝蓮的陰性樣品和缺丹參的陰性樣品，同上述方法制成半枝蓮陰性樣品溶液和丹參陰性樣品溶液；色譜條件色譜柱WatersSunFire C18 (4. 6X 150mm, 5 μ m);流動相甲醇-O. 1% 憐酸梯度洗脫；流速1. OmL/min ;柱溫30°C ;檢測波長280nm、335nm ;梯度洗脫程序為梯度洗脫程序為0 17 33分鐘，流動相A為34% 36% 40% ；本發(fā)明藥物組合物制劑野黃芩苷平均含量計為O. 072%，丹酚酸B含量計為
1.50% ；(2)三七皂苷含量測定對照品溶液制備精密稱取三七皂苷Rl對照品適量，加甲醇溶解，制成每ImL含三七皂苷RIO. 105mg，作為三七皂苷Rl對照品溶液。精密稱取人參皂苷Rgl對照品適量，加甲醇溶解，制成每ImL含人參皂苷RglO. 434mg,作為人參皂苷Rgl對照品溶液。精密稱取人參皂苷Rbl對照品適量，加甲醇溶解，制成每ImL含人參皂苷RblO. 358mg，作為人參皂苷Rbl對照品溶液；供試品溶液制備稱取本發(fā)明藥物組合物制劑10g，研細，稱取2g，精密稱定，置50mL具塞錐形瓶中，精密加入水飽和正丁醇20mL，精密稱重，放置過夜，超聲處理30min，冷卻至室溫，精密稱重，補足減失的水飽和正丁醇，濾過，精密量取續(xù)濾液10mL，置分液漏斗中，用1%氫氧化鈉溶液洗滌2次，毎次10mL，1%氫氧化鈉溶液備用，正丁醇層再用正丁醇飽和水IOmL洗滌，合并1%氫氧化鈉溶液和水層，用水飽和正丁醇20mL提取，合并正丁醇液，蒸干，殘渣用甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至5mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，過O. 45 μ m微孔濾膜，即得；2. I色譜條件色譜柱Kromasill00-5C18(250X4. 6mm, 5 μ m)流動相 A :水,流動相 B こ腈；柱溫30°C;流速lmL/min ;梯度洗脫程序為0 8 25 60分鐘，流動相A為20% 20% 33% 60% ；本發(fā)明藥物組合物顆粒制劑三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1的含量之和計為O. 30%ο
本發(fā)明中的藥物組合物，針對萎縮性胃炎的主要病機“氣陰兩虛，瘀毒內(nèi)蘊”采用有效治法，合理配伍君臣佐使；既能明顯緩解臨床癥狀，又能改善胃黏膜萎縮、腸化和異型增生等病理改變；作用機制為增強胃粘膜屏障、調(diào)節(jié)胃腸運動功能和抗腫瘤作用等相結(jié)合；用藥平和，標本兼顧，無毒副作用，適用于長期服用。實驗例I :本發(fā)明藥物組合物治療慢性萎縮性胃炎的藥效研究I材料與方法I. I實驗動物Wistar大鼠250只，雌雄各半，體重(160 180) g，SPF級，購自北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司，許可證號=SCXK (京)2006-0009。I. 2主要試劑MNNG為日本TCI公司產(chǎn)品，購于北京化學(xué)試劑公司； 鹽酸雷尼替丁膠囊為中諾藥業(yè)(石家莊)有限公司生成，批號100902256 ；無水こ醇購于北京化工廠,批號20100901。I. 3造模方法造模原理以化學(xué)致癌劑MNNG作為工具藥造摸，模擬人不當(dāng)攝入硝酸鹽在胃內(nèi)轉(zhuǎn)化為亞硝酸胺等致癌物質(zhì)，作用于胃黏膜，通過損傷DNA誘發(fā)脂質(zhì)過氧化或?qū)е轮|(zhì)過氧化，引起胃黏膜細胞突變和破壞，造成胃黏膜萎縮病變，甚至癌變。具體采用大鼠每日飲用MNNG溶液，同時輔助灌胃雷尼替丁溶液，抑制大鼠胃酸的分泌，加上每周I次高濃度酒精刺激及饑飽失常，共同作用于大鼠，造成大鼠慢性萎縮性胃炎模型。造模方法大鼠按體重隨機分為空白對照組和模型組，飼養(yǎng)于通風(fēng)、光照規(guī)律的動物房里，室溫22 24°C，濕度40% 70%?？瞻讓φ战M每天灌胃蒸餾水lmL/100g大鼠體重，模型組每日飲用120ug/mL MNNG溶液，每日灌胃雷尼替丁溶液O. 03g/kg大鼠體重，每周禁食一次，毎次16小時，禁食第二天灌胃體積分數(shù)50%的こ醇ImL/只，當(dāng)天不再灌胃雷尼替丁溶液，總共造模14周。MNNG用去離子水配成lg/L的儲備液，每三天配一次，于4°C冰箱避光保存，用前以自來水稀釋為120ug/mL濃度的溶液，裝入用黑膠布包裹的避光飲水瓶內(nèi)供模型組大鼠每天自由飲用。藥物治療 第15周開始模型組按體重重新隨機分為模型組、陽性藥摩羅丹組、陽性藥葉酸組、參七消痞顆粒(實施例一制備)高劑量組、參七消痞顆粒中劑量組、參七消痞顆粒低劑量組、參七消痞顆粒原エ藝組?？瞻讓φ战M和模型組每日灌胃蒸餾水，其它各組灌胃給予相應(yīng)的藥lmL/100g大鼠體重，給藥8周。具體分組及給藥劑量見表I :表I藥物治療方法
_mm_給藥劑讀
空白組-
模型組-
D111] 摩羅丹組3.6g/kg
葉酸組2mg/kg
高劑量18g
參七消痞顆粒屮劑m9g生藥'kg—1
低劑34, Sg生藥.kgぅ
實驗期間每周觀察大鼠的體重及進食飲水量。到第22周即大鼠給藥8周后取材，測定相應(yīng)的指標。I. 4第22周取材大鼠禁食16小時，不禁水，こ醚麻酔，開腹結(jié)扎幽門，記錄結(jié)扎時間，縫合腹壁，4小時后IO %水合氯醛麻酔，腹主動脈取血，分離血清、血漿(預(yù)先加入IOffiDTA ニ鈉30ul和抑肽酶30ul，抗凝3mL血)各留ー份，_80°C保存，待檢，結(jié)扎賁門，取胃，測定胃酸、胃蛋白酶活性等指標，沿胃大彎剪開，除去胃容物，生理鹽水沖洗干凈，胃竇部組織條狀取材，用10%中性福爾馬林液固定，蘇木精-伊紅染色作病理檢查及免疫組化。免疫組化目前測了雄鼠的部分指標，包括反映萎縮程度的血清胃泌素GAS (gastrin)指標，反映胃黏膜屏障功能的前列腺素E2 (prostaglandin E2)和mg蛋白/IOOmg組織，以及胃腸激素血管活性腸肽 VIP (vasoactive intestinal peptide)。2 結(jié)果 2. I大鼠一般情況比較造模期間，與空白對照組相比，模型組大鼠毛發(fā)松散，較無光澤，進食、飲水量均減少，體重較輕，具體見表2。如表2所示，從第3周開始模型組大鼠與空白組相比，體重明顯較輕(P〈0. 05)，隨著造模周數(shù)的増加，差異越來越顯著。表2慢性萎縮性胃炎模型建立期間各組大鼠體重變化±權(quán)利要求
1.一種治療萎縮性胃炎的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的原料藥組成為 黨參5(Tl50重量份丹參10(Γ300重量份三七1(Γ50重量份 半枝蓮10(Γ300重量份白花蛇舌草20(Γ400重量份烏藥5(Γ200重量份 百合20(Γ400重量份莪術(shù)2(Γ100重量份香櫞5(Γ200重量份。
2.如權(quán)利要求I所述的治療萎縮性胃炎的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的原料藥組成為 黨參100重量份丹參200重量份三七30重量份 半枝蓮200重量份白花蛇舌草300重量份烏藥100重量份 百合300重量份莪術(shù)50重量份香櫞100重量份； 黨參60重量份丹參280重量份三七15重量份 半枝蓮280重量份白花蛇舌草220重量份烏藥180重量份 百合220重量份莪術(shù)90重量份香櫞70重量份； 或者 黨參140重量份丹參120重量份三七45重量份 半枝蓮120重量份白花蛇舌草380重量份烏藥70重量份 百合380重量份莪術(shù)30重量份香櫞180重量份。
3.如權(quán)利要求1-2任一所述的治療萎縮性胃炎的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的原料藥按常規(guī)エ藝提取，加入常規(guī)輔料，制成臨床上接受的顆粒劑、片劑、膠囊劑、散劑或丸剤。
4.如權(quán)利要求3所述的治療萎縮性胃炎的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的原料藥組成中的百合為蜜百合。
5.如權(quán)利要求1-4任一所述的治療萎縮性胃炎的藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法為 步驟ー按比例取莪術(shù)和香櫞，加5 20倍量水，水蒸氣蒸餾提取2 10小時，過濾，收集揮發(fā)油，水提取液和藥渣備用； 步驟ニ取揮發(fā)油，按照重量比揮發(fā)油環(huán)糊精為1:4 16，飽和水溶液法包合l(T50min，冷蔵，抽濾，用水和石油醚分別洗滌f 3次，濾餅，干燥，即得揮發(fā)油β -環(huán)糊精包合物，備用； 步驟三按比例取三七，加4 14倍3(Γ90%こ醇(W/V)，提取f 3次，每次O. 5^2小時，過濾，合并濾液，得三七提取液； 步驟四取步驟ー的水提取液和藥渣，與黨參、丹參、半枝蓮、白花蛇舌草、烏藥、百合混合，加6 20倍量水浸泡O. 5"4h,煎煮f 3次，每次O. 5^2. O小時，過濾，合并濾液，將濾液濃縮至生藥水質(zhì)量/體積比為I:廣5，待冷至室溫，加入こ醇使藥液中醇濃度為4(Γ80%，靜置，離心，取上清液，備用； 步驟五取步驟四得到的上清液與步驟三得到的三七醇提液混合均勻，回收溶劑，減壓干燥，即得干浸膏粉； 步驟六取步驟五得到的干浸膏粉和步驟ニ得到的揮發(fā)油環(huán)糊精包合物，按照常規(guī)エ藝，加入適當(dāng)輔料，制成顆粒劑、片劑、膠囊劑、散劑或丸剤。
6.如權(quán)利要求5所述的治療萎縮性胃炎的藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法為 步驟ー按比例取莪術(shù)粉碎為最粗粉，香櫞剪成寬Icm的條狀，加8倍量水，水蒸氣蒸餾提取6小時，過濾，收集揮發(fā)油，水提取液和藥渣備用； 步驟ニ 取揮發(fā)油，按照重量比揮發(fā)油β —環(huán)糊精為1:8，50°C下以飽和水溶液法包合20min，低溫5-7°C冷藏24h，抽濾，用少量水和60_90°C的石油醚分別洗滌3次，濾餅于40°C,O. IMPa真空干燥2h，即得揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合物，備用 ； 步驟三按比例取三七粉碎為最粗粉，加8重量倍70%こ醇，提取3次，每次I. 5小吋，過濾，合并濾液，得三七提取液； 步驟四取步驟ー的藥渣和水提取液，與黨參、丹參、半枝蓮、白花蛇舌草、烏藥、百合混合，加14倍量水浸泡2h，煎煮3次，每次I. O小吋，過濾，合并濾液，將濾液在60°C減壓濃縮至生藥水質(zhì)量/體積為1:2，待冷至室溫，加入95%こ醇使藥液中醇濃度達到70%，4-10°C下靜置8小時后，4000r/min離心20min，取上清液，備用； 步驟五取步驟四得到的上清液與步驟三得到的三七醇提液混合均勻，回收溶剤，60°C減壓干燥，即得干浸膏粉； 步驟六取步驟五得到的干浸膏粉和步驟ニ得到的揮發(fā)油環(huán)糊精包合物干粉，混合均勻，按浸膏重量比100:100:0. 2加入糊精和甜菊苷，混合均勻后，噴灑90%こ醇適量，揉搓，過20目篩制濕顆粒，60°C干燥，過60目篩整粒，即得。
7.如權(quán)利要求5所述的治療萎縮性胃炎的藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法為 步驟ー按比例取莪術(shù)和香櫞，加15倍量水，水蒸氣蒸餾提取3小時，過濾，收集揮發(fā)油，水提取液和藥渣備用； 步驟ニ 取揮發(fā)油，按照重量比揮發(fā)油β —環(huán)糊精為1:15，飽和水溶液法包合15min，冷藏，抽濾，用水和石油醚分別洗滌I次，濾餅，干燥，即得揮發(fā)油環(huán)糊精包合物，備用；步驟三按比例取三七，加12倍40%こ醇(W/V)，提取I次，每次2小時，過濾，合并濾液，得ニ七提取液；步驟四取步驟ー的水提取液和藥渣，與黨參、丹參、半枝蓮、白花蛇舌草、烏藥、百合混合，加8倍量水浸泡3h，煎煮I次，每次2小時，過濾，合并濾液，將濾液濃縮至生藥水質(zhì)量/體積比為1:4，待冷至室溫，加入こ醇使藥液中醇濃度為50%，靜置，離心，取上清液，備用；步驟五取步驟四得到的上清液與步驟三得到的三七醇提液混合均勻，回收溶劑，減壓干燥，即得干浸膏粉； 步驟六取步驟五得到的干浸膏粉和步驟ニ得到的揮發(fā)油環(huán)糊精包合物，按照常規(guī)エ藝，加入適當(dāng)輔料，制成顆粒劑、片劑、膠囊劑、散劑或丸劑； 或者 步驟ー按比例取莪術(shù)和香櫞，加10倍量水，水蒸氣蒸餾提取9小時，過濾，收集揮發(fā)油，水提取液和藥渣備用； 步驟ニ 取揮發(fā)油，按照重量比揮發(fā)油β —環(huán)糊精為1:5，飽和水溶液法包合40!^11，冷藏，抽濾，用水和石油醚分別洗滌2次，濾餅，干燥，即得揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合物，備用；步驟三按比例取三七，加6倍90%こ醇(W/V)，提取2次，每次I小吋，過濾，合并濾液，得ニ七提取液； 步驟四取步 驟ー的水提取液和藥渣，與黨參、丹參、半枝蓮、白花蛇舌草、烏藥、百合混合，加19倍量水浸泡lh，煎煮2次，每次O. 5小時，過濾，合并濾液，將濾液濃縮至生藥水質(zhì)量/體積比為1: 3，待冷至室溫，加入こ醇使藥液中醇濃度為60%，靜置，離心，取上清液，備用; 步驟五取步驟四得到的上清液與步驟三得到的三七醇提液混合均勻，回收溶劑，減壓干燥，即得干浸膏粉； 步驟六取步驟五得到的干浸膏粉和步驟ニ得到的揮發(fā)油環(huán)糊精包合物，按照常規(guī)エ藝，加入適當(dāng)輔料，制成顆粒劑、片劑、膠囊劑、散劑或丸剤。
8.如權(quán)利要求1-4任一所述的治療萎縮性胃炎的藥物組合物顆粒制劑的檢測方法，其特征在于該方法為如下含量測定中ー種 (1)野黃芩苷、丹酚酸B含量測定 對照品溶液制備 稱取適量野黃芩苷對照品置于量瓶中，加甲醇定容，制成濃度為O. 20(T0. 600mg/mL儲備液。精密量取I體積份野黃芩苷儲備加甲醇稀釋25倍，制成濃度為O. 008 0. 024mg/mL野黃芩苷對照品溶液； 稱取適量丹酚酸B對照品于量瓶中，加甲醇定容，制成濃度為O. 10(T0. 500mg/mL儲備液。精密量取I體積份丹酚酸B儲備液置加甲醇稀釋2倍，制成濃度為O. 05(T0. 250mg/mL的丹酚酸B對照品溶液； 供試品溶液制備 藥物組合物制劑，置于IOmL量瓶中，加甲醇超聲處理l(T40min，待冷卻至室溫后，定容，O. 45 μ m微孔濾膜過濾，得供試品溶液； 陰性樣品溶液 分別稱取缺半枝蓮的陰性樣品和缺丹參的陰性樣品，置于IOmL量瓶中，加甲醇超聲處理l(T40min，待冷卻至室溫后，定容，O. 45 μ m微孔濾膜過濾，得半枝蓮陰性樣品溶液和丹參陰性樣品溶液； 色譜條件 色譜柱C18反相柱；流動相A :甲醇；流動相B :0. 1%磷酸；流速1. OmL/min ;柱溫300C ;檢測波長280nm、335nm ;梯度洗脫程序為0 17 33分鐘，流動相A為34% 36% 40% ；藥物組合物制劑野黃芩苷平均含量計為O. 072%，丹酚酸B含量計為I. 50% ； (2)三七皂苷含量測定 對照品溶液制備 分別稱取三七皂苷Rl對照品、人參皂苷Rgl對照品、人參皂苷Rbl對照品適量，置于容量瓶中，分別加甲醇溶解并定容至刻度，制成濃度為O. 05(T0. 150mg/mL的三七皂苷R1、O. 20(T0. 400mg/mL的人參皂苷Rgl和O. 15(Γθ. 550mg/mL的人參皂苷Rbl對照品溶液；供試品溶液制備 藥物組合物制劑，置具塞錐形瓶中，加入10倍量水飽和正丁醇，精密稱重，放置過夜，超聲處理2(T40min，冷卻至室溫，精密稱重，補足減失的水飽和正丁醇，濾過；取續(xù)濾液，置分液漏斗中，用等體積的1%氫氧化鈉溶液洗滌3次，1%氫氧化鈉溶液備用，正丁醇層再用等體積正丁醇飽和水洗滌，合并1%氫氧化鈉溶液和水層，用水飽和正丁醇提取，合并正丁醇液，蒸干，殘渣用甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，過O. 45 μ m微孔濾膜，即得； 色譜條件 色譜柱C18反相柱；流動相A :水，流動相B :こ腈；柱溫30°C ;流速lmL/min ;梯度洗脫程序為0 8 25 60分鐘，流動相A為20% 20% 33% 60% ； 藥物組合物制劑三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1的含量之和計為O. 30%。
9.如權(quán)利要求8所述的治療萎縮性胃炎的藥物組合物顆粒制劑的檢測方法，其特征在于該方法為如下含量測定中ー種 (1)野黃芩苷、丹酚酸B含量測定 對照品溶液制備 精密稱取野黃芩苷對照品4. Olmg置IOmL量瓶中，加75%甲醇定容，即得濃度為.O.401mg/mL儲備液。精密量取ImL野黃芩苷儲備液置25mL量瓶中，加75%甲醇定容，即為濃度為O. 016mg/mL野黃芩苷對照品溶液； 精密稱取丹酚酸B對照品7. 43mg置25mL量瓶中，加75%甲醇定容，即得濃度為.O.297mg/mL儲備液。精密量取5mL丹酚酸B儲備液置IOmL量瓶中，加甲醇定容，即得濃度為O. 1485mg/mL的丹酚酸B對照品溶液； 供試品溶液制備 精密稱取藥物組合物制劑lOOmg，置于IOmL量瓶中，加75%甲醇超聲處理30min，待冷卻至室溫后，定容，O. 45 μ m微孔濾膜過濾，即得； 陰性樣品溶液 分別稱取缺半枝蓮的陰性樣品和缺丹參的陰性樣品，同上述方法制成半枝蓮陰性樣品溶液和丹參陰性樣品溶液； 色譜條件 色譜柱Waters SunFire C18 (4. 6 X 150mm, 5 μ m);流動相甲醇-O. 1% 憐酸梯度洗脫；流速1. OmL/min ;柱溫30°C ;檢測波長280nm、335nm ;梯度洗脫程序為梯度洗脫程序為0 17 33分鐘，流動相A為34% 36% 40% ； 藥物組合物制劑野黃芩苷平均含量計為O. 072%，丹酚酸B含量計為I. 50% ； (2)三七皂苷含量測定 對照品溶液制備 精密稱取三七皂苷Rl對照品適量，加甲醇溶解，制成每ImL含三七皂苷RIO. 105mg，作為三七皂苷Rl對照品溶液。精密稱取人參皂苷Rgl對照品適量，加甲醇溶解，制成每ImL含人參皂苷RglO. 434mg,作為人參皂苷Rgl對照品溶液。精密稱取人參皂苷Rbl對照品適量，加甲醇溶解，制成每ImL含人參皂苷RblO. 358mg，作為人參皂苷Rbl對照品溶液；供試品溶液制備 稱取藥物組合物制劑10g，研細，稱取2g,精密稱定，置50mL具塞錐形瓶中，精密加入水飽和正丁醇20mL，精密稱重，放置過夜，超聲處理30min，冷卻至室溫，精密稱重，補足減失的水飽和正丁醇，濾過，精密量取續(xù)濾液10mL，置分液漏斗中，用1%氫氧化鈉溶液洗滌2次，毎次10mL，1%氫氧化鈉溶液備用，正丁醇層再用正丁醇飽和水IOmL洗滌，合并1%氫氧化鈉溶液和水層，用水飽和正丁醇20mL提取，合并正丁醇液，蒸干，殘渣用甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至5mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，過O. 45 μ m微孔濾膜，即得； 色譜條件 色譜柱Kromasi I 100-5C18 (250X4. 6mm,5ym)流動相A :水,流動相B :こ月青;柱溫300C ;流速lmL/min ;梯度洗脫程序為0 8 25 60分鐘，流動相A為20% 20% 33% 60% ；藥物組合物顆粒制劑三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1的含量之和計為O. 30%。
10.如權(quán)利要求1-4任一所述的藥物組合物在制備治療萎縮性胃炎的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開一種治療萎縮性胃炎的藥物組合物及其制備方法與應(yīng)用，本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成為黨參50~150重量份，丹參100~300重量份，三七10~50重量份，半枝蓮100~300重量份，白花蛇舌草200~400重量份，烏藥50~200重量份，百合200~400重量份，莪術(shù)20~100重量份，香櫞50~200重量份。本發(fā)明藥物組合物，針對萎縮性胃炎的主要病機“氣陰兩虛，瘀毒內(nèi)蘊”采用有效治法，合理配伍君臣佐使；既能明顯緩解臨床癥狀，又能改善胃黏膜萎縮、腸化和異型增生等病理改變；作用機制為增強胃粘膜屏障、調(diào)節(jié)胃腸運動功能和抗腫瘤作用等相結(jié)合；用藥平和，標本兼顧，無毒副作用，適用于長期服用。
文檔編號A61P1/04GK102671123SQ201210139249
公開日2012年9月19日 申請日期2012年5月7日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月7日
發(fā)明者劉斌, 史瑞, 周海燕, 姜艷艷, 孫建寧, 李軍祥, 王晶 申請人:北京中醫(yī)藥大學(xué)