專利名稱：卟啉類光敏劑與抗癌藥二聯(lián)體的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種光敏劑與抗癌藥二聯(lián)體的制備方法。
背景技術(shù)：
卟啉類化合物是所有生物體維持生物活性所必需的物質(zhì)。其分子中包含一個(gè)高度共軛的雜原子大環(huán)，還可能帶有亞鐵或鎂等中心金屬原子。22 n電子體系的存在使它們產(chǎn)生長(zhǎng)波吸收。因此，P卜啉引起了世界各國(guó)研究人員的重視以期將其應(yīng)用于醫(yī)用光敏劑。卟啉因?yàn)槠渥陨淼奶厥饨Y(jié)構(gòu)而具有特殊的性能即與腫瘤細(xì)胞有特殊的親和力，它可以在癌細(xì)胞附近大量富集，在醫(yī)學(xué)研究中可用于癌癥的檢測(cè)和治療。卟啉用于癌細(xì)胞檢測(cè)是因?yàn)檫策梢愿患诎┘?xì)胞上，因其熒光和電子吸收功能，可以準(zhǔn)確檢測(cè)出癌細(xì)胞的大小和具體位置。卟啉之所以具有抗癌能力，是因?yàn)槠渥鳛橐环N獨(dú)特的光敏劑所具有的光動(dòng)力誘導(dǎo)效應(yīng)，即葉啉可以選擇性的在腫瘤細(xì)胞上富集，當(dāng)使用一定波長(zhǎng)的光照射腫瘤區(qū)時(shí)，葉啉作為光敏劑會(huì)誘發(fā)生物組織附近產(chǎn)生具有活性的單線態(tài)氧( 02)，這些單線態(tài)氧會(huì)與生物分子中對(duì)氧化作用敏感的基團(tuán)相互作用，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞因氧化失活死亡以達(dá)到治療的目的。這種光動(dòng)力療法應(yīng)用范圍很廣，例如將卟啉與四價(jià)的抗流感藥扎納米韋連接，發(fā)現(xiàn)兩者組成的系列化合物的抗流感性能是扎納米韋單體的十到一百倍，原因是卟啉光動(dòng)力效應(yīng)所釋放的單線態(tài)氧具有殺滅病毒的作用。對(duì)膀胱癌，食道癌，腦癌，肺癌，腹腔癌，乳腺癌，前列腺癌和皮膚癌治療中得到了廣泛應(yīng)用，但是卟啉類光敏劑在光照下不能將癌細(xì)胞全部殺死，因此對(duì)卟啉類光敏劑進(jìn)行修飾以提高其抗癌能力引起了研究人員的廣泛重視。10-羥基喜樹(shù)堿(HCPT)是天然產(chǎn)物喜樹(shù)堿的衍生物之一，該分子為五環(huán)結(jié)構(gòu)，分子結(jié)構(gòu)是高度不飽和態(tài)，五環(huán)之間有連續(xù)的共軛系統(tǒng)。目前已經(jīng)顯示出卓越的抗癌作用和良好的臨床應(yīng)用前景。喜樹(shù)堿類藥物目前唯一針對(duì)拓?fù)洚悩?gòu)酶I(T0P0 I)產(chǎn)生抑制作用的抗癌藥，HCPT的抗癌機(jī)理與喜樹(shù)堿相同，但其對(duì)TOPO I的抑制作用比喜樹(shù)堿更強(qiáng)。HCPT與DNA-TOPO I結(jié)合后對(duì)該二元復(fù)合物的穩(wěn)定作用的機(jī)理還不是完全清楚，目前普遍的解釋為復(fù)制碰壁模型，即HCPT與DNA-TOPO I形成的三元復(fù)合物可以與復(fù)制酶發(fā)生相互作用，造成雙股的損傷，導(dǎo)致DNA高級(jí)復(fù)制叉與該復(fù)合物“碰壁”，造成不可修復(fù)的雙鏈缺口，從而抑制DNA的合成，而且在多種腫瘤細(xì)胞中拓?fù)洚悩?gòu)酶I的含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于正常細(xì)胞，HCPT通過(guò)阻斷拓樸異構(gòu)酶I的合成，就可以阻止癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，誘導(dǎo)癌細(xì)胞死亡。在緩沖介質(zhì)中，HCPT的內(nèi)酯環(huán)與開(kāi)環(huán)羧酸鹽之間存在動(dòng)態(tài)平衡。PH < 5時(shí)，以內(nèi)酯環(huán)形式為主；pH > 7. 5時(shí)，以開(kāi)環(huán)的羧酸鹽形式為主，而在抗癌活性上開(kāi)環(huán)的羧酸鹽只有其內(nèi)酯環(huán)形式的十分之一。在臨床上HCPT主要用于胃癌、食道癌、結(jié)腸癌、肝癌等；對(duì)口腔癌、頭頸部癌、及膀胱癌也有較 好療效；對(duì)肺癌、白血病、銀屑病及血吸蟲(chóng)病引起的肝脾腫大的治療也有一定效果。但因?yàn)樗苄圆蛔愫蛢?nèi)酯環(huán)結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定等缺陷，使得臨床上使用HCPT時(shí)要加大劑量，從而引起惡心，嘔吐等毒副作用。如何提高HCPT的靶向性和抗癌能力一直是該藥物研究的重點(diǎn)
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明解決了卟啉類光敏劑在光照下不能將癌細(xì)胞全部殺死和抗癌藥靶向性不足而導(dǎo)致抗癌能力降低，進(jìn)而產(chǎn)生毒副作用的技術(shù)問(wèn)題，提供了一種卟啉類光敏劑與抗癌藥二聯(lián)體的制備方法。本發(fā)明卟啉類光敏劑與抗癌藥二聯(lián)體的制備方法如下一、在250ml兩口燒瓶中加入10 IOOmg卩卜啉類光敏劑、2 5g無(wú)水碳酸鉀和20 40mlN，N-二甲基甲酰胺，將兩口燒瓶固定在裝有冰鹽水的攪拌器上，放入磁子攪拌5 10分鐘，然后用滴液漏斗30 40分鐘內(nèi)滴加I 5ml的氯乙酰氯，繼續(xù)反應(yīng)8 10小時(shí)，然后用砂芯漏斗除去產(chǎn)物中的碳酸鉀，用飽和食鹽水和二氯甲烷各50 IOOml分液，取分液漏斗下層溶液，所得下層溶液繼續(xù)用飽和食鹽水萃取3 5次，每次IOOml，萃取結(jié)束 后使用無(wú)水硫酸鈉干燥24 48小時(shí)，再用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干溶劑，然后以二氯甲烷為淋洗液經(jīng)柱色譜分離，得到中間體；二、在250ml兩口燒瓶中加入50mg IOOmg中間體，I 3g無(wú)水碳酸鉀，110 250mg抗癌藥和50 400ml N，N_ 二甲基甲酰胺，在避光條件下將燒瓶固定在攪拌器上，放入磁子攪拌，反應(yīng)15 24小時(shí)后停止反應(yīng)，使用砂芯漏斗除去產(chǎn)物中的碳酸鉀，然后使用飽和食鹽水和乙酸乙酯各50 IOOml分液，取分液漏斗中上層溶液，所得上層溶液繼續(xù)用飽和食鹽水萃取3 5次,每次50 100ml,萃取結(jié)束后使用無(wú)水硫酸鈉干燥24 48小時(shí)，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干溶劑，用二氯甲烷與甲醇按照10 4 I的體積比作為淋洗液，經(jīng)柱色譜分離得到卟啉類光敏劑與抗癌藥二聯(lián)體。由于卟啉及其金屬絡(luò)合物對(duì)癌細(xì)胞具有特殊的親和性，本發(fā)明將光敏劑四羥基苯基卟啉與抗癌藥制備成二聯(lián)體，利用卟啉對(duì)癌細(xì)胞的親和性能夠提高抗癌藥的靶向性，而抗癌藥的抗癌效果又彌補(bǔ)了卟啉類光敏劑抗癌能力不足的缺陷。在光照和暗光條件下，兩種不同的抗癌機(jī)理將發(fā)揮協(xié)同作用，實(shí)現(xiàn)兩種化合物抗癌作用的優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)，在同等量的使用條件下降低毒副作用，提高抗癌能力。


圖I是具體實(shí)施方式
十的實(shí)驗(yàn)一中所得中間體的質(zhì)譜圖；圖2是具體實(shí)施方式
十的實(shí)驗(yàn)一中所得中間體的紫外吸收光譜圖；圖3是具體實(shí)施方式
十的實(shí)驗(yàn)一中所得中間體的核磁氫譜圖；圖4是具體實(shí)施方式
十的實(shí)驗(yàn)一中所得中間體的紅外光譜圖；圖5是具體實(shí)施方式
十的實(shí)驗(yàn)一中所得四對(duì)羥基苯基卟啉-10羥基喜樹(shù)堿二聯(lián)體的紅外光譜圖；圖6是具體實(shí)施方式
十的實(shí)驗(yàn)一中所得四對(duì)羥基苯基卟啉-10羥基喜樹(shù)堿二聯(lián)體的質(zhì)譜圖；圖7是具體實(shí)施方式
十的實(shí)驗(yàn)一中所得四對(duì)羥基苯基卟啉-10羥基喜樹(shù)堿二聯(lián)體的紫外吸收光譜圖。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明技術(shù)方案不局限于以下所列舉具體實(shí)施方式
，還包括各具體實(shí)施方式
間的任意組合。
具體實(shí)施方式
一本實(shí)施方式卟啉類光敏劑與抗癌藥二聯(lián)體的制備方法如下一、在250ml兩口燒瓶中加入10 IOOmg卩卜啉類光敏劑、2 5g無(wú)水碳酸鉀和20 40mlN，N-二甲基甲酰胺，將兩口燒瓶固定在裝有冰鹽水的攪拌器上，放入磁子攪拌5 10分鐘，然后用滴液漏斗30 40分鐘內(nèi)滴加I 5ml的氯乙酰氯，繼續(xù)反應(yīng)8 10小時(shí)，然后用砂芯漏斗除去產(chǎn)物中的碳酸鉀，用飽和食鹽水和二氯甲烷各50 IOOml分液，取分液漏斗下層溶液，所得下層溶液繼續(xù)用飽和食鹽水萃取3 5次，每次IOOml，萃取結(jié)束后使用無(wú)水硫酸鈉干燥24 48小時(shí)，再用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干溶劑，然后以二氯甲烷為淋洗液經(jīng)柱色譜分離，得到紅棕色中間體(產(chǎn)率45 51% );二、在250ml兩口燒瓶中加入50mg IOOmg中間體，I 3g無(wú)水碳酸鉀，110 250mg抗癌藥和50 400ml N，N_ 二甲基甲酰胺，在避光條件下將燒瓶固定在攪拌器上，放入磁子攪拌，反應(yīng)15 24小時(shí)后停止反應(yīng)，使用砂芯漏斗除去產(chǎn)物中的碳酸鉀，然后使用飽和食鹽水和乙酸乙酯各50 IOOml分液，取分液漏斗中上層溶液，所得上層溶液繼續(xù)用飽和食鹽水萃取3 5次,每次50 100ml,萃取結(jié)束后使用無(wú)水硫酸鈉干燥24 48小時(shí)，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干溶劑，用二氯甲烷與甲醇按照10 4 I的體積比作為淋洗液，經(jīng)柱色譜分離得到卟啉類光敏劑與抗癌藥二聯(lián)體(20 30% )。
具體實(shí)施方式
二 本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一不同的是步驟一中所述的卟啉類光敏劑是四對(duì)輕基苯基B卜啉。其它與具體實(shí)施方式
一相同。
具體實(shí)施方式
三本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一或二之一不同的是步驟二中所述的抗癌藥是10-羥基喜樹(shù)堿、紫杉醇、阿霉素、5-氟尿嘧啶或甲氨蝶吟。其它與具體實(shí)施方式
一或二之一相同。本實(shí)施方式中10-羥基喜樹(shù)堿的結(jié)構(gòu)式如下
權(quán)利要求
1.卟啉類光敏劑與抗癌藥二聯(lián)體的制備方法，其特征在于卟啉類光敏劑與抗癌藥二聯(lián)體的制備方法如下 一、在250ml兩口燒瓶中加入10 IOOmg卟啉類光敏劑、2 5g無(wú)水碳酸鉀和20 40mlN, N- 二甲基甲酰胺，將兩口燒瓶固定在裝有冰鹽水的攪拌器上，放入磁子攪拌5 10分鐘，然后用滴液漏斗30 40分鐘內(nèi)滴加I 5ml的氯乙酰氯，繼續(xù)反應(yīng)8 10小時(shí)，然后用砂芯漏斗除去產(chǎn)物中的碳酸鉀，用飽和食鹽水和二氯甲烷各50 IOOml分液，取分液漏斗下層溶液，所得下層溶液繼續(xù)用飽和食鹽水萃取3 5次，每次IOOml，萃取結(jié)束后使用無(wú)水硫酸鈉干燥24 48小時(shí)，再用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干溶劑，然后以二氯甲烷為淋洗液經(jīng)柱色譜分離，得到中間體； 二、在250ml兩口燒瓶中加入50mg IOOmg中間體，I 3g無(wú)水碳酸鉀，110 250mg抗癌藥和50 400ml N，N- 二甲基甲酰胺，在避光條件下將燒瓶固定在攪拌器上，放入磁子攪拌，反應(yīng)15 24小時(shí)后停止反應(yīng)，使用砂芯漏斗除去產(chǎn)物中的碳酸鉀，然后使用飽和食鹽水和乙酸乙酯各50 IOOml分液，取分液漏斗中上層溶液，所得上層溶液繼續(xù)用飽和食鹽水萃取3 5次,每次50 100ml,萃取結(jié)束后使用無(wú)水硫酸鈉干燥24 48小時(shí),用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干溶劑，用二氯甲烷與甲醇按照10 4 I的體積比作為淋洗液，經(jīng)柱色譜分離得到卟啉類光敏劑與抗癌藥二聯(lián)體。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述卟啉類光敏劑與抗癌藥二聯(lián)體的制備方法，其特征在于步驟一中所述的卟啉類光敏劑是四對(duì)羥基苯基卟啉。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述卟啉類光敏劑與抗癌藥二聯(lián)體的制備方法，其特征在于步驟二中所述的抗癌藥是10-羥基喜樹(shù)堿、紫杉醇、阿霉素、5-氟尿嘧啶或甲氨蝶吟。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述卟啉類光敏劑與抗癌藥二聯(lián)體的制備方法，其特征在于步驟一中在250ml兩口燒瓶中加入50mg卟啉類光敏劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述卟啉類光敏劑與抗癌藥二聯(lián)體的制備方法，其特征在于步驟一中在250ml兩口燒瓶中加入3g無(wú)水碳酸鉀。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述卟啉類光敏劑與抗癌藥二聯(lián)體的制備方法，其特征在于步驟一中在250ml兩口燒瓶中加入30ml N，N- 二甲基甲酰胺。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述卟啉類光敏劑與抗癌藥二聯(lián)體的制備方法，其特征在于步驟二中在250ml兩口燒瓶中加入60mg 90mg中間體,2g無(wú)水碳酸鉀，120 240mg抗癌藥和60 90ml N，N-二甲基甲酰胺。
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述卟啉類光敏劑與抗癌藥二聯(lián)體的制備方法，其特征在于步驟二中在250ml兩口燒瓶中加入70mg 80mg中間體,2g無(wú)水碳酸鉀，130 220mg抗癌藥和70 80ml N，N-二甲基甲酰胺。
9.根據(jù)權(quán)利要求3所述卟啉類光敏劑與抗癌藥二聯(lián)體的制備方法，其特征在于步驟二中在250ml兩口燒瓶中加入75mg中間體,2g無(wú)水碳酸鉀,200mg抗癌藥和75ml N, N-二甲基甲酰胺。
10.根據(jù)權(quán)利要求3所述卟啉類光敏劑與抗癌藥二聯(lián)體的制備方法，其特征在于步驟二中用二氯甲烷與甲醇按照10 3的體積比作為淋洗液。
全文摘要
卟啉類光敏劑與抗癌藥二聯(lián)體的制備方法，它涉及一種二聯(lián)體的制備方法。本發(fā)明解決了卟啉類光敏劑在光照下不能將癌細(xì)胞全部殺死和抗癌藥靶向性不足而產(chǎn)生毒副作用的技術(shù)問(wèn)題。本發(fā)明方法如下一、制備中間體；二、制備卟啉類光敏劑與抗癌藥二聯(lián)體。由于卟啉及其金屬絡(luò)合物對(duì)癌細(xì)胞具有特殊的親和性，本發(fā)明將光敏劑四對(duì)羥基苯基卟啉與抗癌藥制備成二聯(lián)體，利用卟啉對(duì)癌細(xì)胞的親和性能夠提高抗癌藥的靶向性，提高其抗癌能力并降低其毒副作用；而抗癌藥的抗癌效果又彌補(bǔ)了卟啉類光敏劑抗癌能力不足的缺陷。在光照和暗光條件下，兩種不同的抗癌機(jī)理將發(fā)揮協(xié)同作用，實(shí)現(xiàn)兩種化合物抗癌作用的優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)，在同等量的使用條件下降低毒副作用，提高抗癌能力。
文檔編號(hào)A61K31/409GK102617610SQ20121009269
公開(kāi)日2012年8月1日 申請(qǐng)日期2012年3月31日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月31日
發(fā)明者郭喜明, 郭斌, 陳業(yè)宏 申請(qǐng)人:哈爾濱工業(yè)大學(xué)