專利名稱：一種治療乙型病毒性肝炎的藥物組合物及制備方法和用途的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種治療乙型病毒性肝炎的藥物組合物以及該藥物組合物的用途和制備方法。
背景技術：
乙型病毒性肝炎是常見的病毒性肝炎之一，臨床上主要分為急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎以及重型乙型肝炎等，可經血液、母嬰、破損皮膚及性接觸等方式傳播，也是常見的慢性傳染病。據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)報道，慢性乙型肝炎占全球前十位疾病死因中第7 位，其中30%的乙肝患者最終將發(fā)展到肝硬化和肝癌，僅中國每年就有30萬人死于乙肝病毒感染引起的疾病。目前，多采用核苷類似物及干擾素對乙型肝炎及乙肝病毒攜帶者進行治療。其中，較常使用的核苷類似物有拉米夫定、阿德福韋脂、恩替卡韋、替比夫定、替諾福韋酯等，其總體安全性和耐受性良好，但在臨床應用中會發(fā)生少見、罕見嚴重不良反應，如腎功能不全、肌炎、橫紋肌溶解、乳酸酸中毒等，且一旦停藥，大部分患者乙肝病毒DNA聚合酶參數(shù)反彈，有的比治療前更高。在西藥對乙肝治療效果不佳的情況下，人們開始將目光投向中藥。目前，以中醫(yī)理論為基礎尋找有效治療肝臟疾病的新藥，成為了當前醫(yī)藥人員研究的新方向。

發(fā)明內容
本發(fā)明的技術方案在于提供一種有效治療乙型病毒性肝炎的藥物組合物。本發(fā)明的另一技術方案是提供了該藥物組合物的制備方法和用途。本發(fā)明提供了一種防治乙型病毒性肝炎的藥物組合物，它是由如下重量配比的原料藥制備而成的制劑虎杖1-20份、山豆根1-15份、趕黃草I-M份、黃連1_10份。進一步優(yōu)選地，它是由如下重量配比的原料藥制備而成的制劑虎杖9-15份、山豆根3-6份、趕黃草份、黃連2_5份。更進一步優(yōu)選地，它是由如下重量配比的原料藥制備而成的制劑虎杖12份、山豆根6份、趕黃草12份、黃連2份。本發(fā)明藥物組合物是由虎杖、山豆根、趕黃草、黃連的原料藥粉或有機溶劑提取物為活性成分，加入藥學上可接受的輔料或輔助性成分制備成藥學上常用的制劑。其中，所述的制劑為湯劑、散劑、丸劑、顆粒劑、片劑、膠囊劑、口服液或滴丸。其中，所述的膠囊劑中，每粒含虎杖以大黃素C15HltlO5計，不得少于4. 50mg。本發(fā)明還提供了一種制備所述的藥物組合物的方法，它包括如下步驟(1)取處方量的原料藥，粉碎，藥粉備用；或(2)取處方量的原料藥，加水或有機溶劑提取，提取所得的活性成分備用；(3)取步驟(1)所得的藥粉或步驟( 所得的活性成分，加上藥學上常用的輔料或輔助性成分，制備成藥學上常用的制劑。
其中，所述的制劑為膠囊劑，其制備方法為A、取虎杖1-100份和山豆根1-100份，加6-8倍藥材重量的60% -80%乙醇，回流提取1-3次，每次60-120min，合并醇提取液，濾過，減壓回收乙醇，濃縮，濃縮液備用；B、取趕黃草1-100份，加6-10倍藥材重量水，浸泡30-45min，煎煮1_3次，每次 60-90min，合并提取液，減壓濃縮后，加乙醇至含醇量達60%，醇沉，濾過，減壓回收乙醇，濃縮，濃縮液備用；C、取黃連1-100份，加6-10倍藥材重量水，浸泡30-60min，煎煮1_3次，每次 40-80min,合并黃連提取液，除雜后，濃縮，濃縮液備用；D、合并上述各濃縮液，采用常規(guī)的制粒方法制粒后，裝膠囊，即得。進一步優(yōu)選地，所述的膠囊劑的制備方法為A、取虎杖12份和山豆根6份，加8倍藥材重量的60%乙醇，回流提取3次，每次 120min,合并醇提取液，濾過，在溫度80°C、真空度-0. 08 -0. IMpa下回收乙醇，濃縮至相對密度1. 03 1. 05 (600C )的清膏備用；B、取趕黃草12份，加10倍藥材重量水，浸泡45min，煎煮3次，每次90min，合并趕黃草提取液，在溫度80°C、真空度-0. 08 -0. IMpa下濃縮至相對密度為1. 15-1. 18，加乙醇至含醇量達60%，攪拌，靜置Mh，濾過，在溫度80°C、真空度-0. 08 -0. IMpa下回收乙醇，濃縮至相對密度1. 03 1. 05 (600C )的清膏備用；C、取黃連2份，加8倍藥材重量水，浸泡45min，煎煮3次，每次60分鐘，合并黃連提取液，以轉速為6000r/min離心，在溫度80°C、真空度-0. 08 -0. IMpa下濃縮至相對密度1.03 1.05(60°C)的清膏備用；D、合并上述各清膏，于進風溫度180 200°C、出風溫度為90 100°C條件下噴霧干燥，收集噴干粉，于相對濕度低于60. 5 %，溫度18 22°C的條件下干法制粒(主壓力 4. 5 5. 5Mpa，側壓力0. 25Mpa)，過篩，收集40 60目篩的顆粒，裝膠囊，即得。本發(fā)明還提供了該藥物組合物在制備預防或治療乙型病毒性肝炎的藥物中的用途。本發(fā)明還提供了該藥物組合物在制備保肝、增強免疫或利膽的藥物中的用途。本發(fā)明藥物組合物原料中虎杖，為蓼科Polygonaceae植物虎杖Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc.的干燥根莖和根。微苦，微寒，歸肝、膽、肺經。功能清利濕熱、利膽退黃、活血化瘀，解毒止痛，現(xiàn)代研究認為，其有效成分主要為蒽醌類和二苯乙烯類化合物，具有抗菌、抗氧化、防治心臟病、抗癌、降血脂、降低膽固醇等多種作用。山豆根，為雙子葉植物藥豆科植物越南槐Sophorae Tonkinensis Gagnep.的干燥根及根莖，性味苦，寒。 清熱解毒，利咽消腫，現(xiàn)代研究認為，山豆根含豐富的黃酮、生物堿及皂甙成份，并含有酚性成分及木脂素類成分，具有抗心律失常、抗肝炎、消炎等生理活性。趕黃草，為景天科扯根菜屬植物趕黃草Penthorum chinense Pursh的全草，味甘，性微溫，功能主治利水除濕，祛瘀止痛，用于黃疸，水腫，外用治跌打損傷，現(xiàn)代研究認為，其主要有效成分為槲皮素和沒食子類。黃連，為毛茛科植物黃連Coptis chinensis Franch.三角葉黃連Coptis deltoidea C. Y. Chenget Hsiao或云連Coptis teeta Wall.的干燥根莖，味苦，性寒，清熱燥濕，瀉火解毒，用于濕熱痞滿，嘔吐吞酸，瀉痢，黃疸，高熱神昏，心火亢盛，心煩不寐，血熱吐衄，目赤， 牙痛，消渴，癰腫疔瘡，外治濕疹，濕瘡，耳道流膿，主要含原小檗堿型生物堿，具有廣譜抗生素的作用。本發(fā)明原料組方中以虎杖清熱解毒利濕化瘀為君，輔以山豆根清熱解毒、趕黃草利濕退黃、化瘀解毒，佐以黃連清熱燥濕，瀉火解毒。全方清利濕熱，解毒止痛，散瘀保肝，可以增加細胞內OAS JKR的mRNA水平，增強OAS JKR蛋白水平，具有較好的抗HBV作用。本發(fā)明藥物組合物還可以改善肝損傷，具有明顯的保肝作用；提高膽汁分泌量，具有一定的利膽作用；對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞能力有顯著提高，對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬率、吞噬指數(shù)較對照組有顯著提高；對環(huán)磷酰胺致小鼠溶血素抗體生成低下有明顯的提高作用。


圖1 本發(fā)明藥物組合物對HBeAg(OD)影響(其中，DMSO代表0. 的二甲基亞砜， LAM代表拉米夫定，HH代表本發(fā)明藥物膠囊劑)圖2 本發(fā)明藥物組合物對HBsAg (OD)影響圖3 本發(fā)明藥物組合物對細胞外HBVDNA影響圖4 本發(fā)明藥物組合物對細胞內HBVDNA影響圖5 本發(fā)明藥物組合物對細胞內OAS、PKRmRNA影響圖6 本發(fā)明藥物組合物對細胞內OAS、PKR蛋白影響圖 7 OAS, PKR Western blot 圖
具體實施例方式實施例1本發(fā)明藥物組合物的制備A、取虎杖1333. 3g和山豆根666. 7g，加8倍藥材重量的60%乙醇，回流提取3次， 每次120min，合并醇提取液，濾過，在溫度80°C、真空度-0. 08 -0. IMpa下回收乙醇，濃縮至相對密度1. 03 1. 05 (600C )的清膏備用；B、取趕黃草1333. 3g，加10倍藥材重量水，浸泡45min，煎煮3次，每次90min，合并趕黃草提取液，在溫度80°C、真空度-0. 08 -0. IMpa下濃縮至相對密度為1. 15-1. 18，力口乙醇至含醇量達60%，攪拌，靜置Mh，濾過，在溫度80°C、真空度-0. 08 -0. IMpa下回收乙醇，濃縮至相對密度1. 03 1. 05 (600C )的清膏備用；C、取黃連222. 2g，加8倍藥材重量水，浸泡45min，煎煮3次，每次60分鐘，合并黃連提取液，以轉速為6000r/min離心，在溫度80°C、真空度-0. 08 -0. IMpa下濃縮至相對密度1. 03 1. 05 (600C )的清膏備用；D、合并上述各清膏，于進風溫度180 200°C、出風溫度為90 100°C條件下噴霧干燥，收集噴干粉，于相對濕度低于60. 5 %，溫度18 22°C的條件下干法制粒(主壓力 4. 5 5. 5Mpa,側壓力0. 25Mpa)，過篩，收集40 60目篩的顆粒，裝膠囊，即得1000粒本發(fā)明藥物組合物膠囊劑。實施例2本發(fā)明藥物組合物的制備取實施例1中A、B、C步驟所得的清膏，合并后，濃縮至相對密度1. 1-1. 30 (60°C )， 加入適量的糊精或淀粉制備成顆粒劑；將制備得到的顆粒劑裝膠囊后，即得膠囊劑。實施例3本發(fā)明藥物組合物的制備
取虎杖12g，山豆根6g，趕黃草12g，黃連2g，加水煎煮3次，每次30分鐘，合并水煎液，濾過，濃縮至相對密度1. 1-1. 30 (600C )，加入適量的可溶性淀粉制備成顆粒劑；將制備得到的顆粒劑，再加入適量的硬脂酸鎂，壓片，即得片劑。實施例4本發(fā)明藥物組合物的制備取虎杖lg，山豆根lg，趕黃草lg，黃連100g，加水煎煮1次，60分鐘，水煎液濾過， 濃縮，加入適量乙醇或殼聚糖除雜后，離心除去沉淀，上清液適當濃縮后，加入適量防腐劑及矯味劑，灌裝，制備得到本發(fā)明口服液。實施例5本發(fā)明藥物組合物的制備取虎杖20g，山豆根lg，趕黃草lg，黃連lg，粉碎后，加入適當輔料，泛制丸劑。實施例6本發(fā)明藥物組合物的制備取虎杖lg，山豆根15g，趕黃草20g，黃連10g，加水煎煮后，除雜，即得本發(fā)明藥物組合物湯劑。實施例1-5對本發(fā)明藥物組合物的制備方法，不應理解為是對本發(fā)明保護范圍的限制，凡基于上述技術思想，利用本領域普通技術知識和慣用手段所做的修改、替換、變更均屬于本發(fā)明的范圍。實施例7實施例1膠囊劑的質量標準1、含量測定虎杖為本方的君藥，主含游離蒽醌衍生物大黃素、大黃酚、大黃素甲醚，為抗菌成分。尚含芪三酚、虎杖苷、鞣質和槲皮素等黃酮類化合物，現(xiàn)代藥理研究表明，大黃素等蒽醌類物質具有抗病毒作用，可抑制乙型肝炎抗原陽性。故選擇大黃素作為控制本品的指標成分。大黃素的含量測定方法，已報道的多為高效液相色譜法，本標準參考有關文獻，建立了高效液相色譜法測定本品中大黃素的含量。對大黃素峰的檢測主要為紫外檢測法，其波長為 254nm，試驗中選擇 Agilent Eclipse XDB-Cw柱(5 μ m，150mmX 4. 6mm)進行方法學考查， 以甲醇-0. 磷酸溶液(80 20)和甲醇-0. 磷酸溶液(85 15)等流動相對樣品的分離，結果以流動相比例為甲醇-0.1%磷酸溶液(80 20)時，大黃素峰與鄰峰的分離良好，大黃素峰的理論塔板數(shù)較高。(1)儀器與試藥儀器Agilent 1100型高效液相色譜儀，美國Agilent公司；Agilent色譜工作站；VWD紫外檢測器，美國Agilent公司；Sartorius BP211D電子天平(0. Olmg)，德國；超聲波提取器，中船七院七二六所。試劑高效液相用甲醇為色譜純(美國Fisher公司出品)，水為超純水(自制)， 其它試劑均為分析純。對照品大黃素對照品由中國藥品生物制品檢定所提供(批號110756-200110，供含量測定用)樣品實施例1 制得(批號060801、060802、060803)。(2)色譜條件色譜柱Agilent Eclipse XDB-C18 (5 μ m，150mmX 4. 6mm)；保護柱Agilent ZORBAX XDB-C18(5ym,4mmX4mm)；流動相甲醇-0. 1 %磷酸溶液(80 20)；流速1. Oml/ min ；柱溫30°C ；檢測波長254nm。
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本色譜條件對大黃素的測定陰性無干擾，其保留時間為6. 5分鐘左右，大黃素峰與相鄰峰的分離良好(Rs >1.5),按大黃素峰計算，理論板數(shù)為9000以上，為使定量分析更準確，故在系統(tǒng)適用性試驗中規(guī)定理論板數(shù)不低于6000。(3)線性關系的考查精密稱取大黃素對照品5. 46mg，置50ml量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，得每 Iml含大黃素0. 1092mg的對照品溶液。分別精密吸取上述溶液2、4、6、8、10 μ 1，注入液相色譜儀測定，結果見表1。表1大黃素對照品線性關系考查測定結果
權利要求
1.一種防治乙型病毒性肝炎的藥物組合物，其特征在于它是由如下重量配比的原料藥制備而成的制劑虎杖1-20份、山豆根1-15份、趕黃草I-M份、黃連1-10份。
2.根據(jù)權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于它是由如下重量配比的原料藥制備而成的制劑虎杖9-15份、山豆根3-6份、趕黃草9- 份、黃連2-5份。
3.根據(jù)權利要求2所述的藥物組合物，其特征在于它是由如下重量配比的原料藥制備而成的制劑虎杖12份、山豆根6份、趕黃草12份、黃連2份。
4.根據(jù)權利要求1-3任意一項所述的藥物組合物，其特征在于它是由虎杖、山豆根、趕黃草、黃連的原料藥粉或有機溶劑提取物為活性成分，加入藥學上可接受的輔料或輔助性成分制備成藥學上常用的制劑。
5.根據(jù)權利要求4所述的藥物組合物，其特征在于所述的制劑為湯劑、散劑、丸劑、顆粒劑、片劑、膠囊劑、口服液或滴丸。
6.根據(jù)權利要求5所述的藥物組合物，其特征在于所述的膠囊劑中，每粒含虎杖以大黃素C15HltlO5計，不得少于4. 50mg。
7.一種制備權利要求1-6任意一項所述的藥物組合物的方法，它包括如下步驟(1)取處方量的原料藥，粉碎，藥粉備用；或(2)取處方量的原料藥，加水或有機溶劑提取，提取所得的活性成分備用；(3)取步驟(1)所得的藥粉或步驟( 所得的活性成分，加上藥學上常用的輔料或輔助性成分，制備成藥學上常用的制劑。
8.根據(jù)權利要求7所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于所述的制劑為膠囊劑，其制備方法為A、取虎杖1-100份和山豆根1-100份，加6-8倍藥材重量的60%-80%乙醇，回流提取1-3次，每次60-120min，合并醇提取液，濾過，減壓回收乙醇，濃縮，濃縮液備用；B、取趕黃草1-100份，加6-10倍藥材重量水，浸泡30-45min，煎煮1_3次，每次60-90min，合并提取液，減壓濃縮后，加乙醇至含醇量達60%，醇沉，濾過，減壓回收乙醇，濃縮，濃縮液備用；C、取黃連1-100份，加6-10倍藥材重量水，浸泡30-60min，煎煮1_3次，每次40_80min，合并黃連提取液，除雜后，濃縮，濃縮液備用；D、合并上述各濃縮液，采用常規(guī)的制粒方法制粒，裝膠囊，即得。
9.根據(jù)權利要求8所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于所述的膠囊劑的制備方法為A、取虎杖12份和山豆根6份，加8倍藥材重量的60%乙醇，回流提取3次，每次120min,合并醇提取液，濾過，在溫度80°C、真空度-0. 08 -0. IMpa下回收乙醇，濃縮至相對密度1. 03 1. 05 (600C )的清膏備用；B、取趕黃草12份，加10倍藥材重量水，浸泡45min，煎煮3次，每次90min，合并趕黃草提取液，在溫度80°C、真空度-0. 08 -0. IMpa下濃縮至相對密度為1. 15-1. 18，加乙醇至含醇量達60%，攪拌，靜置Mh，濾過，在溫度80°C、真空度-0. 08 -0. IMpa下回收乙醇，濃縮至相對密度1. 03 1. 05 (600C )的清膏備用；C、取黃連2份，加8倍藥材重量水，浸泡45min，煎煮3次，每次60分鐘，合并黃連提取液，以轉速為6000r/min離心，在溫度80°C、真空度-0. 08 -0. IMpa下濃縮至相對密度1.03 1.05(60°C )的清膏備用；D、合并上述各清膏，于進風溫度180 200°C、出風溫度為90 100°C條件下噴霧干燥，收集噴干粉，于相對濕度低于60. 5%，溫度18 22°C的條件下干法制粒，主壓力4. 5 5. 5Mpa，側壓力0. 25Mpa，過篩，收集40 60目篩的顆粒，裝膠囊，即得。
10.權利要求1-8任意一項所述的藥物組合物在制備保肝、增強免疫或利膽、預防或治療乙型病毒性肝炎的藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種防治乙型病毒性肝炎的藥物組合物，它是由如下重量配比的原料藥制備而成的制劑虎杖1-20份、山豆根1-15份、趕黃草1-24份、黃連1-10份。本發(fā)明還提供了上述藥物組合物的制備方法及用途。本發(fā)明藥物組合物可以增加細胞內OAS、PKR的mRNA水平，增強OAS、PKR蛋白水平，具有較好的抗HBV作用；還可以改善肝損傷，具有明顯的保肝作用；提高膽汁分泌量，具有一定的利膽作用；對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞能力有顯著提高，對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬率、吞噬指數(shù)較對照組有顯著提高；對環(huán)磷酰胺致小鼠溶血素抗體生成低下有明顯的改善作用。
文檔編號A61P31/20GK102552452SQ20121003070
公開日2012年7月11日 申請日期2012年2月10日 優(yōu)先權日2011年2月15日
發(fā)明者馮建安, 周麗娟, 廖志航, 張嵩, 曹定知, 李希, 楊煬, 謝守德, 陳東輝, 陳開國, 黃嫣 申請人:四川省中醫(yī)藥科學院