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一種純中藥治療副豬嗜血桿菌病的注射劑的制作方法

文檔序號:849363閱讀:711來源:國知局
專利名稱:一種純中藥治療副豬嗜血桿菌病的注射劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及獸醫(yī)用藥品,具體的說是一種純中藥治療副豬嗜血桿菌病的注射劑。
背景技術(shù)
生態(tài)豬生產(chǎn)是我國畜牧業(yè)發(fā)展的一個主要產(chǎn)業(yè)之一,也是我國畜牧產(chǎn)品出口創(chuàng)匯的一個主要支柱,是在增加國民收入和提高人民生活水平方面、加快農(nóng)牧業(yè)發(fā)展、調(diào)整農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)化結(jié)構(gòu)等方面的重要目標。近幾年來,在我國政府、科研部門和大型生態(tài)豬生產(chǎn)企業(yè)共同努力下,我國畜牧業(yè)發(fā)展迅速,特別是河北、山東等省畜牧業(yè)生產(chǎn)態(tài)勢良好,然而副豬嗜血桿菌病有趨于嚴重的態(tài)勢,已經(jīng)在全球范圍內(nèi)影響著養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展,給養(yǎng)豬業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟損失。副豬嗜血桿菌病是以多發(fā)性漿膜炎、關(guān)節(jié)炎和高死亡率為特征的傳染病, 嚴重危害仔豬和青年豬的健康,影響豬生產(chǎn)的各個階段。該病目前呈世界性分布,已成為影響?zhàn)B豬業(yè)的典型的細菌性傳染病,在養(yǎng)豬業(yè)發(fā)達國家均有此病的流行和發(fā)生。近年來, 我國的數(shù)個省、地區(qū)都有該病發(fā)生和流行的報道。副豬嗜血桿菌主要存在于豬的呼吸道, 主要危害2-4周齡的豬,通常見于5-8周齡,特別是斷奶前后和保育期仔豬多發(fā),發(fā)病率達 10% -15%,有時可高達40%,嚴重時仔豬病死率達50% -90%,成年豬病死率可達20% ; 母豬病死率達30% -40%。發(fā)病率一般在10% -15%,嚴重時可達70% -80%,死亡率可達50% -80%不等。該病作為繼發(fā)性病原菌,在藍耳病病毒、圓環(huán)病毒II型、偽狂犬病病毒及流感病毒等感染后繼發(fā)感染,甚至與傳染性胸膜炎放線桿菌、巴氏桿菌、鏈球菌等混合感染,使病情復(fù)雜化,死亡率增加,經(jīng)濟損失更大,給我國養(yǎng)豬業(yè)造成了嚴重的經(jīng)濟損失。發(fā)病原因各種應(yīng)激可誘發(fā)此病,如氣溫突變、空氣嚴重污染等;免疫抑制病的存在,如圓環(huán)病毒病、藍耳?。挥娠暳现忻咕舅匾鹭i群免疫力低下而導(dǎo)致此病發(fā)生。臨床癥狀發(fā)熱40°C -42. 5°C,食欲下降,厭食,反應(yīng)遲鈍,呼吸困難,咳嗽,腹式呼吸,關(guān)節(jié)腫脹,跛行甚至癱瘓,背毛粗亂,蒼白貧血,眼瞼周圍皮下水腫,眼結(jié)膜變紅,耳部皮下,腹部皮下水腫,耳尖發(fā)紫,耳朵四肢內(nèi)側(cè)發(fā)紺,背部毛孔有針尖樣出血,兩后腿之間腹部皮膚有大量藍紫色斑點。病理變化主要肉眼病變有胸膜、腹膜、心包膜、關(guān)節(jié)的漿膜,甚至腦膜出現(xiàn)纖維素性炎癥,表現(xiàn)在單個或多個漿膜表面出現(xiàn)漿液性或化膿性的纖維蛋白滲出物,呈淡黃色蛋皮樣或條索狀的偽膜覆蓋在漿膜和關(guān)節(jié)表面。腕關(guān)節(jié)和跗關(guān)節(jié)出現(xiàn)病變頻率高,腦膜病變較少見。全身淋巴結(jié)腫大,切面呈一致的灰白色。臨床診斷根據(jù)本病的流行病學(xué)、臨診癥狀和病理變化特點可以做出初步診斷, 確診須進行病原的分離培養(yǎng)和鑒定。采取治療前發(fā)病急性期病豬的漿膜表面滲出物或血液,接種到巧克力瓊脂培養(yǎng)基或用羊、馬或牛鮮血瓊脂并與葡萄球菌做交叉畫線接種,培養(yǎng) M 48h。副豬嗜血桿菌在葡萄球菌菌落周圍生長良好,呈衛(wèi)星現(xiàn)象。然后取可疑菌落進行生化鑒定和血清型定型。副豬嗜血桿菌病的特點為1)血清型多樣。副豬嗜血桿菌可分為15種血清型,由于血清型多樣,而且各血清型之間交叉免疫力差,為副豬嗜血桿菌病的疫苗預(yù)防帶來很大的困難?;媚退幮援a(chǎn)生快。副豬嗜血桿菌,可能是當前豬場所有致病菌中耐藥性產(chǎn)生速度快的一種細菌。從多年防治副豬嗜血桿菌病的經(jīng)驗看,一種敏感的抗生素,使用半年后就開始耐藥,一年后完全失效。3)對豬場危害大。由于感染或潛伏感染副豬嗜血桿菌的病豬,容易造成免疫失敗,因而導(dǎo)致其他疾病在豬場混合感染流行,使豬場疾病復(fù)雜化。目前國家采用抗生素來防控,隔離病豬時,用敏感的抗菌素進行治療,口服抗菌素進行全群性藥物預(yù)防,5%鹽酸頭孢噻呋混懸液肌內(nèi)注射,0. 05ml/kg,每天2次,連用3天。 鹽酸林可霉素注射液肌內(nèi)注射,0. lml/kg,每天2次,連用3天?;前烽g甲氧嘧啶鈉注射液, 肌內(nèi)注射,0. lml/kg,每天2次,連用3天。采取抗生素拌料的方式對整個豬群治療,發(fā)病豬大劑量肌注抗生素,大多數(shù)血清型的豬副嗜血桿菌對頭孢菌素、氟苯尼考、林可霉素、氟甲砜、慶大、壯觀霉素、磺胺及喹諾酮類等藥物敏感,對四環(huán)素、氨基苷類有一定抵抗力,具有很強的耐藥性,且發(fā)病時常伴隨有其他病毒和細菌性疾病。該病原對以上所用的化學(xué)藥品較敏感,但毒副作用大,有不同程度的致癌致畸,抗生素殘留超標。生態(tài)豬出口在海關(guān)檢疫時而受阻,導(dǎo)致了生態(tài)豬出口難的現(xiàn)狀,制約了生態(tài)豬產(chǎn)業(yè)健康穩(wěn)定發(fā)展,尤其是加入WTO 以后,外國政府往往以此為借口拒絕進口中國的生態(tài)豬產(chǎn)品,并且大量不符合出口標準的產(chǎn)品轉(zhuǎn)入國內(nèi)消化,對我國人民的身體健康造成了潛在危害。農(nóng)業(yè)部已制定出《無公害食品-豬肉》的行業(yè)標準(NY5(^9_2001),規(guī)定了無公害豬肉的感官指標、理化指標、微生物指標等。2011年3月曝光的“瘦肉精”事件就能體現(xiàn)出人們對無公害豬肉的呼吁越來越高,化學(xué)藥品有毒副作用,對人的身體有極大危害。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就是提供一種療效好、療程短、用量少、成本低、殘留少的治療副豬嗜血桿菌病的純中藥制劑注射劑。為解決上述技術(shù)問題,本發(fā)明采取的技術(shù)方案是一種純中藥治療副豬嗜血桿菌病的注射劑,由下述重量份的中藥材經(jīng)水提醇沉法提取而制成注射液或者凍干粉針桅子4-10份、黃連3-9份、黃芪3-9份、玄參洲份。優(yōu)選的,桅子6-8重量份、黃連5-7重量份、黃芪5-7重量份、玄參4_6重量份。更優(yōu)選的,桅子7重量份、黃連6重量份、黃芪6重量份、玄參5重量份。本發(fā)明還提供了一種治療副豬嗜血桿菌病的中藥注射劑的制備方法,其按照下述步驟進行將桅子、黃連、黃芪、玄參加水合并煎煮,濾過,用乙醇沉淀,濾過,濾液回收乙醇后,然后按照常規(guī)方法制成注射液或者采用冷凍干燥的方法將其制成干粉注射制劑。上述技術(shù)方案是根據(jù)豬的生理特性及病患豬的病原分離、血清學(xué)調(diào)查和中獸醫(yī)理論,從擬訂的中藥組方、單味中藥或中藥有效成分,進行體內(nèi)、體外防治試驗,篩選出的最佳組方。本發(fā)明治療副豬嗜血桿菌病的方解如下桅子味苦,性寒,歸心、肺、三焦經(jīng)。本品苦寒泄降,又能瀉三焦火,涼血清心熱。 既能清氣分熱,又能清血分熱,并能消腫活絡(luò)的作用,治關(guān)節(jié)腫痛。黃連味苦寒;入心、肝、膽、胃、大腸經(jīng)。性寒,味甚苦,功能瀉心火,解熱毒,為清熱解毒的要藥。試驗表明黃連對副豬嗜血桿菌、痢疾桿菌、傷寒桿菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、 葡萄球菌、溶血性鏈球菌、肺炎雙球菌、結(jié)核桿菌等均有較強的抗菌作用,黃連煎液尤對副豬嗜血桿菌較敏感。黃芪現(xiàn)代研究,黃芪能促進機體產(chǎn)生抗病毒干擾素,調(diào)節(jié)機體免疫功能,促進抗體形成,抑制病毒蛋白的合成,從而具有使機體速效而廣譜抗病毒感染的作用。玄參苦、咸、寒,入肺、胃、腎經(jīng)。咸寒質(zhì)潤多液,滋陰降火,解毒、利咽,涼血消腫, 養(yǎng)陰生津。方義本方重用桅子為君藥。桅子苦寒清降,能清瀉三焦火邪、瀉心火而除煩,為治熱病心煩、躁擾不寧之要藥,屬清熱涼血藥。本方中黃連為臣藥,清熱燥濕,瀉火解毒。對副豬嗜血桿菌、痢疾桿菌、傷寒桿菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、葡萄球菌、溶血性鏈球菌、肺炎雙球菌、結(jié)核桿菌等均有較強的抗菌作用,黃連煎液尤對副豬嗜血桿菌較敏感。本方中黃芪為佐藥,能治熱毒、解瘟疫、消痰利氣,益氣固表、斂汗固脫、托瘡生肌、利水消腫之功效。本方中玄參為使藥,清熱涼血,瀉火解毒,滋陰,溫邪入營,內(nèi)陷心包,溫毒發(fā)斑,熱病傷陰、舌絳煩渴、津傷便秘、骨蒸勞嗽、目赤、咽痛、瘰疬、白喉、癰腫瘡毒。諸藥合用,共奏清熱解毒、抗菌、 抗病毒,止咳平喘,涼血解毒,消腫活絡(luò),對于治療多發(fā)性漿膜炎和關(guān)節(jié)炎、殺滅副豬嗜血桿菌達到控制病毒與多種細菌混合與繼發(fā)感染的目的,做到殺細菌、抗病毒、減少應(yīng)激與提高免疫力,協(xié)作增效。經(jīng)過幾年的試驗,經(jīng)過對河北、山東、河南三省不同規(guī)模的豬場暴發(fā)的診斷為副豬嗜血桿菌病的病例,經(jīng)病原分離鑒定及體內(nèi)外藥敏試驗,篩選出最佳配伍方案,其抗病毒、抗細菌并發(fā)副豬嗜血桿菌病的防治優(yōu)于大多數(shù)抗生素和抗病毒藥物。毒性試驗將本發(fā)明治療副豬嗜血桿菌病的注射劑給40只小白鼠,注射2mL藥液每千克,相當豬用量的20倍,觀察期間動物飲食正常,未見動物死亡,注射后,活動有所減少,但動物生存狀態(tài)良好,他后恢復(fù)正常,說明用該藥是安全的。采用上述技術(shù)方案產(chǎn)生的有益效果在于1)本發(fā)明為純中藥制劑,不含任何抗生素、化學(xué)激素等,無殘留、無毒副作用,安全性高,為綠色環(huán)保型制劑;幻經(jīng)批量試驗證明 本發(fā)明藥物可治療副豬嗜血桿菌病,且治愈率高達91 %,可替代同類化藥,可防治副豬嗜血桿菌病,且肉質(zhì)無毒害。本發(fā)明治療副豬嗜血桿菌病的純中藥制劑,商品名為“嗜血康注射液”。使用該發(fā)明藥治愈率91. 3 %,效果明顯。
具體實施例方式實施例1將桅子、黃連、黃芪、玄參切片后,準備稱取。稱取桅子350g、黃連300g、黃芪300g、 玄參250g,加水煎煮二次,第一次池,第二次lh,合并煎液,濾過;濾液濃縮至600ml,加乙醇,使含醇量分別達60 %,70 %,80 %,共沉淀三次,每次冷藏靜置Mh,濾過,回收乙醇,加注射用水至900ml,用4%氫氧化鈉溶液調(diào)PH值至7. 5,靜置48h,濾過,濾液加入3ml聚山梨酯80,煮沸,濾過;濾液加注射用水至1000ml,濾過,灌封,滅菌,即得。本實施例制備的產(chǎn)品為棕黃色至棕紅色澄明液體。下面對本實施例所制備的產(chǎn)品進行鑒別和有效成分測定。一、鑒別(1)取本品20ml,加乙醇60ml,搖勻,靜置M小時,濾過,濾液揮去乙醇,用乙醚振搖提取2次,每次15ml,棄去乙醚液,水層用乙酸乙酯振搖提取3次QOml,15ml, 10ml),合并提取液,蒸干,殘渣加甲醇Iml使溶解,作為供試品溶液。另取桅子苷對照品,加甲醇制成每Iml含Img的溶液,作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各5 μ 1,分別點于同一硅膠G薄層板上,以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水(6 4 0.5 0.5)為展開齊U,展開,取出,晾干,噴以10%硫酸乙醇溶液,在105°C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中,在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點。(《中華人民共和國藥典》)(2)取本品20ml,加甲醇10ml,超聲處理30分鐘,濾過,取濾液作為供試品溶液。另取黃連對照藥材150mg,同法制成對照藥材溶液。再取鹽酸小檗堿對照品,加甲醇制成每Iml含0. 5mg的溶液,作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗,吸取上述三種溶液各 μ ,分別點于同一硅膠G薄層板上,以甲苯-異丙醇-乙酸乙酯-甲醇-濃氨試液 (6 1.5 3 1.5 0.5)為展開劑,置氨蒸氣飽和的展開缸內(nèi),展開,取出,晾干,置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中,在于對照藥材色譜和對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同的黃色熒光斑點。(《中華人民共和國藥典》)測得本實施例pH值為5. 5-7. 5。二、含量測定(1)桅子苷照高效液相色譜法(《中華人民共和國藥典》)測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以乙腈-水 (12 88)為流動相;檢測波長為238nm。理論板數(shù)桅子苷峰計算應(yīng)不低于1500。對照品溶液的制備去桅子苷對照品適量,精密稱定,加甲醇制成每Iml含0. Img的溶液,即得。供試品溶液的制備精密量取本品5ml,置50ml量瓶中,加稀乙醇至刻度,搖勻,離心,取上清液,即得。測定法分別精密吸取對照品溶液10 μ 1與供試品溶液5 10 μ 1,注入液相色譜儀,測定,即得。本品每Iml含桅子以桅子苷(C17H24Oltl)計,不得少于0. 8mg。(2)黃芪苷照高效液相色譜法(《中華人民共和國藥典》)測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以乙腈-水 (35 6 為流動相;用蒸發(fā)光散射檢測器檢測。理論板數(shù)按黃芪甲苷峰計算應(yīng)不低于 3000。對照品溶液的制備取黃芪苷對照品適量,精密稱定,加甲醇制成每Iml含0. 5mg的溶液,即得。供試品溶液的制備精密量取本品20ml,用水飽和的正丁醇振搖提取4次,每次 20ml,分取正丁醇提取液,用氨試液洗滌2次,每次15ml,棄去氨試液,正丁醇液蒸干,殘渣用甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,即得。測定法精密吸取對照品溶液5μ 1與20μ 1、供試品溶液20 μ 1,注入液相色譜儀, 測定,用外標兩點法對數(shù)方程計算,即得。本品每Iml含黃芪以黃芪苷(C41H68O14)計,不得少于60 μ g。本實施產(chǎn)品功效清熱解毒,瀉火燥濕,抗病毒、抗細菌、清熱解毒、養(yǎng)陰生津、瀉火除煩、消腫活絡(luò)、增強機體免疫功能,促進康復(fù),防止繼發(fā)感染其他疾病,治愈率達91 %,安全,毒副作用小,無抗藥性,可用以替代同類化藥,促進康復(fù),療效確切。主要用于抑制和抵抗由副豬嗜血桿菌病的高燒不退、精神不振、咳嗽、多發(fā)性漿膜炎、關(guān)節(jié)炎、食欲減退、身體
出血等病。本實施例的用法與用量肌注一次量豬按每千克體重0. 05-0. lmL,一日2次,連
用3天。本實施例IOmL/支,每mL含原生藥1. 2g。貯臧方法密封,避光,置陰涼處。本實施例產(chǎn)品與其它抗生素類藥物在治療副豬嗜血桿菌病的的試驗比對1)本實施例產(chǎn)品按每千克體重0. 05-0. lmL,每天2次,連續(xù)肌注3天;2)頭孢噻呋組每20千克體重使用Iml,每天2次,連續(xù)肌注3天;3)鹽酸林可霉素組每10千克體重使用1ml,每天2次,連續(xù)肌注3天;4)磺胺嘧啶組每10千克體重使用1ml,每天2次,連續(xù)肌注3天;5)對照組不使用任何藥物,按照與其他組相同的方法飼養(yǎng)管理。試驗期間試驗用陽性豬統(tǒng)一飼養(yǎng)管理。判定標準臨床癥狀消失,飲食恢復(fù)正常。治療效果比較
權(quán)利要求
1.一種純中藥治療副豬嗜血桿菌病的注射液,其特征在于由下述重量份的中藥材經(jīng)水提醇沉法提取而成桅子4-10份、黃連3-9份、黃芪3-9份、玄參2-8份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的純中藥治療副豬嗜血桿菌病的注射劑,其特征在于桅子6-8 重量份、黃連5-7重量份、黃芪5-7重量份、玄參4-6重量份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的純中藥治療副豬嗜血桿菌病的注射劑,其特征在于桅子7重量份、黃連6重量份、黃芪6重量份、玄參5重量份。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療副豬嗜血桿菌病的中藥注射劑的制備方法,其特征在于按照下述步驟進行將桅子、黃連、黃芪、玄參加水合并煎煮,濾過,用乙醇沉淀,濾過,濾液回收乙醇后,然后按照常規(guī)方法制成注射液或者采用冷凍干燥的方法將其制成干粉注射制劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種純中藥治療副豬嗜血桿菌病的注射劑,由下述重量份的中藥材經(jīng)水提醇沉法提取而成梔子4-10份、黃連3-9份、黃芪3-9份、玄參2-8份。本發(fā)明經(jīng)多次實驗確定了上述中藥材及其組分含量,具有良好的藥物協(xié)同增效作用。對引起副豬嗜血桿菌病的病毒有強大的殺滅作用,并能迅速增強豬的機體免疫力,防止繼發(fā)感染及其他疾病,治愈率達91%,安全,毒副作用小,無抗藥性,可用以替代同類化藥,促進康復(fù)、清熱解毒、養(yǎng)陰生津、瀉火除煩、消腫活絡(luò)、療效確切。
文檔編號A61P31/04GK102512537SQ20121000345
公開日2012年6月27日 申請日期2012年1月9日 優(yōu)先權(quán)日2012年1月9日
發(fā)明者吳浩, 孫泰然, 王振海, 趙志敏 申請人:吳浩, 孫泰然, 王振海, 趙志敏
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