專利名稱：一種復方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥領域，涉及ー種外用抗真菌藥聯(lián)苯芐唑的復方配方，以及將該復方制備成ー種新劑型的方法，具體地說是ー種透明穩(wěn)定的水包油型復方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑及其制備方法。
背景技術：
聯(lián)苯芐唑(Bifonazole)為咪唑類抗真菌藥，其抗菌機制為雙重抑制真菌細胞膜麥角固醇合成，除與其他咪唑類藥物一祥作用于P450-Ha去甲基外，還作用于羥甲基麩氨酸輔酶A還原酶，具有廣譜抗真菌作用，對90%的致病真菌有抑制作用。對皮膚真菌 (例如毛癬菌屬、小抱子菌屬)、酵母菌(例如念球菌屬、瓶形酵母菌、光滑球擬酵母菌)、霉菌 (例如曲霉屬)、絲狀菌、秕糠狀鱗斑霉菌，微小棒狀桿菌等有效，適用于淺表皮膚真菌感染， 如手足癬、體癬、股癬、花斑癬、皮膚念球菌病等。聯(lián)苯芐唑現(xiàn)有乳膏劑、栓劑、溶液、凝膠劑等，聯(lián)苯芐唑化學性質穩(wěn)定，脂溶性好，在水中幾乎不溶。把聯(lián)苯芐唑制成局部外用劑型，對治療部位具有針對性，能夠提高局部藥物的濃度。以往的技術都是將其溶于脂溶性半固體基質，制成乳膏劑；或是分散于凝膠基質中制成凝膠劑，所制備的凝膠劑吸水后不穩(wěn)定，易析出藥物。無論是乳膏劑還是凝膠劑，都存在一個透皮吸收效率不高的問題，導致治療時間長，治療效果受到影響。丙酸氯倍他索(Clobetasol Propionate)是目前臨床應用的高效外用皮質類固醇中藥效較強的ー種，具有抗炎、抗過敏、抗增生、免疫抑制作、抗瘙癢和毛細血管收縮作用， 其抗炎作用約為氫化可的松的112. 5倍，倍他米松磷酸鈉的2. 3倍，氟輕松的18. 7倍。臨床上用于治療銀屑病、濕疹、足部干裂、斑狀禿發(fā)、神經(jīng)性皮炎、掌跖膿皰病等皮膚疾病。本品不溶于水，臨床上常制成乳膏劑使用，因此透皮吸收效率有限，無疑延長了治療時間。由于丙酸氯倍他索不宜長期使用，長期用藥可能引起皮質功能亢進癥，因此大大限制了其在臨床上的應用，一種能增加丙酸氯倍他索透皮吸收效率的劑型就顯得極為重要。肉桂醛(Cirmamaldehyde)是ー種醛類有機化合物，為黃色黏稠狀液體，大量存在于肉桂等植物體內，現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，肉桂醛對真菌有顯著療效，對22種條件致病性真菌進行肉桂醛抗真菌作用研究表明肉桂醛是抗真菌的活性物質，主要是通過破壞真菌細胞壁， 使藥物滲入真菌細胞內，破壞細胞器而起到殺菌作用。對大腸桿菌、枯草桿菌及金黃色葡萄菌、白色葡萄球菌、志賀氏痢疾桿菌、傷寒和副傷寒甲桿菌、肺炎球菌、產(chǎn)氣桿菌、變形桿菌、 炭疽桿菌、腸炎沙門氏菌，霍亂弧菌等有抑制作用。且對革蘭氏陽性菌殺菌效果顯著，可用于治療多種因細菌感染引起的疾病。最小抑制濃度(MIC)為0. 02—0. 07ul/ml，對深部致病真菌，MIC為0. 1-0. 3ul/ml。對人體無毒或低毒，而對微生物的繁殖能起到較強的抑制作用，對黃曲霉、黑曲霉、橘青霉、串珠鐮刀菌、交鏈孢霉、白地霉、酵母，均有強烈的抑菌效果。 目前鮮有將肉桂醛添加于外用抗真菌感染藥物的報道，肉桂醛不溶于水，限制了將其制成外用藥物的透皮吸收率。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術的問題與缺陷，提供ー種溶解性好、透皮吸收效率高、生物利用度高、殺菌抑菌效果好、止癢迅速、物理性質穩(wěn)定的復方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑。實現(xiàn)上述發(fā)明目的的技術方法是ー種復方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑，由下列組分的原料制成表面活性劑30% 40%、助表面活性劑3% 14%、油相5% 10%、聯(lián)苯芐唑0. 8% 2%、丙酸氯倍他索0. 02% 0. 1%、肉桂醛0. 01% 0. 2%、余量為去離子水，上述原料的質量百分比之和為100%。制備本發(fā)明藥物的配方優(yōu)選質量百分比范圍是表面活性劑30% 36%、助表面活性劑5% 12%、油相6% 9%、聯(lián)苯芐唑0. 8% 1. 5%、丙酸氯倍他索0. 02% 0. 05%、肉桂醛0. 03% 0. 1%、余量為去離子水，上述原料的質量百分比之和為100%。制備本發(fā)明藥物的配方最佳質量百分比是表面活性劑32%、助表面活性劑9. 5%、 油相7. 42%、聯(lián)苯芐唑1%、丙酸氯倍他索0. 03%、肉桂醛0. 05%、余量為去離子水，上述原料的質量百分比之和為100%。所述的表面活性劑是EL-40、RH-40、吐溫-80和泊洛沙姆188中的ー種或幾種的混合物。所述的助表面活性劑是無水乙醇、1，2-丙ニ醇、丙三醇和聚乙ニ醇-400中的一種或幾種的混合物，本發(fā)明無助表面活性劑也能形成澄清透明，穩(wěn)定性好的納米乳。所述的油相為乙酸丁酷、肉豆蔻酸異丙酷、杏仁油、小麥胚芽油、三乙酸甘油酯和乙酸乙酯的ー種或幾種的混合物。本發(fā)明首次將聯(lián)苯芐唑、丙酸氯倍他索、肉桂醛聯(lián)合使用治療真菌感染導致的各種疾病。聯(lián)苯芐唑具有廣譜的抗真菌效果，主要通過抑制真菌細胞膜麥角固醇合成達到抑菌效果；肉桂醛破壞真菌細胞壁，使藥物滲入真菌細胞內，破壞細胞器而起到殺菌作用；兩者聯(lián)合使用后，不僅對真菌具有雙重殺菌效果，通過破壞細胞壁，使聯(lián)苯芐唑更容易滲透到細胞質中，成倍的増加了抗菌的效果。真菌感染時常伴有嚴重的炎癥反應，本發(fā)明通過添加強效抗炎藥丙酸氯倍他索，阻止了嚴重炎癥反應的發(fā)生，減輕了患者的痛苦，縮短了療程。 本發(fā)明復方藥物的治療效果不僅限于殺真菌和抗炎癥，所含有效成分肉桂醛對于常見的并發(fā)細菌感染也具有很好的治療效果，丙酸氯倍他索與肉桂醛兼有止癢的作用，對螨蟲的感染也具有一定的療效。本發(fā)明在采用聯(lián)苯芐唑、丙酸氯倍他索、肉桂醛的復方的基礎上，將這三種有效成分同時制成納米乳，同時增強了三種藥物的透皮吸收率與生物利用度。這并不是將三個單獨成分的納米乳的簡單混合，要考慮到整個體系的穩(wěn)定性、三個成分的最佳配比、所用溶劑的相溶性等問題。經(jīng)過一系列探索與試驗，制備成本發(fā)明ー種透明、穩(wěn)定、療效好的復方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑。本發(fā)明還有ー個目的是提供上述復方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑的制備方法，其特征在干，包括以下步驟
(1)稱取配方比例的表面活性剤、助表面活性剤、油相、聯(lián)苯芐唑、丙酸氯倍他索、肉桂醛、去離子水，備用；
(2)將表面活性劑與助表面活性劑混勻，然后加入油相，混勻；
(3)加入聯(lián)苯芐唑，混勻；(4)加入丙酸氯倍他索，混勻；
(5)加入肉桂醛，混勻；
(6)室溫下緩慢加入去離子水，且邊加去離子水邊攪拌，直至形成澄清透明、無色或微黃色、粘度小且流動性好的液體，即得。本發(fā)明的一種復方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑適用于治療淺表皮膚真菌感染(如手足癬，體、股癬，花斑癬，皮膚念珠菌病等)以及真菌性甲溝炎和念珠性外陰陰道炎，對外耳炎、 細菌性皮膚感染也有效。用法外用，涂搽于洗浄的患處，早晩各1次，癥狀消失后應繼續(xù)用藥5 10天，以防復發(fā)。本發(fā)明經(jīng)透射電子顯微鏡檢測，液滴直徑分布在1 100 nm之間，外觀為黃色或無色透明液體，具有很好的穩(wěn)定性
1.經(jīng)時穩(wěn)定性
經(jīng)時穩(wěn)定性是指納米乳在室溫自然變化條件下貯藏時，外觀隨時間延長而發(fā)生變化的程度。該復方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑持久透明，未發(fā)現(xiàn)渾濁或沉淀，說明其經(jīng)時穩(wěn)定性好。2.熱貯穩(wěn)定性
將該復方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑置于試管，密封，置于37°C恒溫水浴箱中儲存14天，該液貯存后外觀透明。3.抗冷凍穩(wěn)定性
將該復方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑于_4°C保存一周，取出后恢復至室溫。該復方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑在_4°C時成固體，恢復至室溫后其恢復至透明，且放置一周后仍透明，說明該納米乳狀液抗冷凍性好。4.加速穩(wěn)定性
將該復方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑置于試管中，密封，于15000 r/min離心20 min，未分層， 仍澄清透明。本發(fā)明的一種復方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑與現(xiàn)有技術相比，具有以下優(yōu)點
1)本發(fā)明復方納米乳滴粒徑小于100nm，藥物脂溶性高，藥物借助載體極易透過真菌、 細菌的細胞壁，能直接在菌體內發(fā)揮抗菌或殺菌功能，極大的提高了聯(lián)苯芐唑、肉桂醛、丙酸氯倍他索的藥效，縮短了起效時間，從而減少了藥物的攝入量；
2)本發(fā)明由納米乳包裹的三種有效成分具有緩釋作用，不僅起效快，且藥物作用持續(xù)時間長；
3)針對真菌感染發(fā)病的特點，本發(fā)明同時具有殺真菌、殺細菌、抗炎、止癢、鎮(zhèn)痛、抑菌的多重作用，極大的減輕了患者的痛苦；
4)將本品涂抹于皮膚吸收迅速，輕輕拍打后可吸收完全，看不出涂藥痕跡；
5)無油膩感，無悶濕感，不會污染衣物，有淡淡類似桂皮的清香氣味；
6)熱力學穩(wěn)定性好，貯存穩(wěn)定性高，外觀澄清透明，藥物不會析出，感官品質高；
7)制備エ藝簡單，適合規(guī)?；a(chǎn)。
具體實施例方式以下通過藥效學試驗和對比試驗來進一步闡述本發(fā)明所述藥物的有益效果。(所用納米乳配方為制備本發(fā)明藥物的配方最佳質量百分比表面活性劑32%、助表面活性劑 9. 5%、油相7. 42%、聯(lián)苯芐唑1%、丙酸氯倍他索0. 03%、肉桂醛0. 05%、去離子水50%)。試驗例1家兔皮膚給藥毒性試驗
參考經(jīng)皮膚給藥的毒性試驗及評價標準試驗方法取家兔對只(體重2.0士0.5 kg)隨機分為4組，分別為I完整皮膚用藥組、II完整皮膚對照組、III破損皮膚用藥組、IV破損皮膚對照組，每組6只，雌雄各半。給藥前24h用電推剪在背部脫毛，脫毛面積約150 cm2。破損皮膚組先用75%酒精消毒，然后用無菌刀片在背部脫毛區(qū)劃“井”字，以滲血為度。I、III 組家兔在脫毛區(qū)分別涂抹本發(fā)明ー種復方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑，II、IV組家兔在脫毛區(qū)分別涂抹生理鹽水形成空白對照，早晩各一次。給藥后連續(xù)觀察14d，每天觀察兩次，每日觀察動物的皮膚毛發(fā)、飲食、ニ便、呼吸、眼和黏膜的變化、精神狀態(tài)，四肢活動及死亡情況。如遇死亡，應及時進行尸檢和肉眼觀察，當肉眼可見病變吋，應進行病理組織學檢查。結果顯示 各組家兔皮毛光澤正常，對家兔的飲食、ニ便、呼吸、眼和黏膜變化。精神狀態(tài)，四肢活動均未造成任何影響，破損皮膚家兔均在給藥后第2d開始結痂，7d左右脫痂痊愈，在觀察期14d 內未出現(xiàn)急性毒性反應，無一只家兔死亡。結果表明本發(fā)明ー種復方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑經(jīng)皮膚給藥安全無毒。試驗例2豚鼠體外抗真菌試驗
取100只豚鼠(體重250士50 g)，試驗前一天用電推剪在雙側背部脫毛，脫毛面積為 5X5cm2，用無菌砂紙在脫毛區(qū)中央磨損皮膚2X2cm2，重度滲血。將4種常見皮膚感染真菌 (紅色毛癬菌、犬小孢子菌、石膏樣毛癬菌、白色念珠菌)108CFU/ml菌懸液20μ1涂于皮膚擦傷區(qū)，于第7天，選感染明顯(局部紅腫、滲出、皮膚出現(xiàn)鱗片樣改變)、局部取樣檢測為陽性的豚鼠84只，隨機分為7組，每組12只，雌雄各半。I組為本發(fā)明復方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑組；II組復方聯(lián)苯芐唑乙醇溶液組(其中聯(lián)苯芐唑、丙酸氯倍他索、肉桂醛的含量與I組相同);III組單方聯(lián)苯芐唑納米乳組(聯(lián)苯芐唑含量與本發(fā)明相同，自制);IV組單方丙酸氯倍他索納米乳組(丙酸氯倍他索含量與本發(fā)明相同，自制)；V組單方肉桂醛納米乳組(肉桂醛含量與本發(fā)明相同，自制)；VI組市售聯(lián)苯芐唑乳膏組。各組分別取5 mg/kg該組藥物涂抹于患處，每日2次，連續(xù)14天，每周觀察記錄病情。ΥΠ組僅涂抹生理鹽水做陽性對照。每周觀察有無瘙癢、紅斑、丘疹、水皰、鱗屑、角化、浸漬等臨床癥狀。按照臨床和實驗室觀察指標在治療前和14天后分別進行評價。作療效評價時1) 皮損完全消退或僅遺留色素斑，癢感消失，真菌鏡檢陰性為痊愈；2)皮損消退> 60%，癢感明顯減輕，真菌鏡檢陰性為顯效；3)將痊愈病例與顯效病例合計為有效病例，計為有效；4) 皮損消退209Γ60%，癢感較輕，真菌鏡檢陽性為好轉；5)皮損消退< 20%或繼續(xù)加重，癢感同前或加劇，真菌鏡檢陽性為無效。試驗結果見表1。表1 一種復方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑用于豚鼠體外抗真菌療效對比試驗
權利要求
1.一種復方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑，其特征在干，由下述質量百分比的原料制成 表面活性劑30% 40%、助表面活性劑3% 14%、油相5% 10%、聯(lián)苯節(jié)唑0. 8% 2%、丙酸氯倍他索0. 02% 0. 1%、肉桂醛0. 01% 0. 2%、余量為去離子水，上述原料的質量百分比之和為100% ；所述的表面活性劑是EL-40、RH-40、吐溫-80和泊洛沙姆188中的ー種或幾種的混合物；所述的助表面活性劑是無水乙醇、1，2-丙ニ醇、丙三醇和聚乙ニ醇-400中的一種或幾種的混合物，本發(fā)明無助表面活性劑也能形成澄清透明，穩(wěn)定性好的納米乳；所述的油相為乙酸丁酷、肉豆蔻酸異丙酷、杏仁油、小麥胚芽油、三乙酸甘油酯和乙酸乙酷的ー種或幾種的混合物。
2.根據(jù)權利要求1所述的復方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑，其特征在干，由下述質量百分比的原料制成表面活性劑30% 36%、助表面活性劑5% 12%、油相6% 9%、聯(lián)苯節(jié)唑0. 8% 1. 5%、 丙酸氯倍他索0. 02% 0. 05%、肉桂醛0. 03% 0. 1%、余量為去離子水，上述原料的質量百分比之和為100%。
3.根據(jù)權利要求1所述的復方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑，其特征在干，由下列組分的原料制成表面活性劑32%、助表面活性劑9. 5%、油相7. 42%、聯(lián)苯芐唑1%、丙酸氯倍他索0. 03%、肉桂醛0. 05%、余量為去離子水，上述原料的質量百分比之和為100%。
4.根據(jù)權利要求1所述的ー種復方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑，其特征在干，該納米乳的粒徑為1 nm 100 nm。
5.權利要求1所述的復方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑的制備方法，其特征在干，包括以下步驟(1)稱取配方比例的表面活性剤、助表面活性剤、油相、聯(lián)苯芐唑、丙酸氯倍他索、肉桂醛、去離子水，備用；(2)將表面活性劑與助表面活性劑混勻，然后加入油相，混勻；(3)加入聯(lián)苯芐唑，混勻；(4)加入丙酸氯倍他索，混勻；(5)加入肉桂醛，混勻；(6)室溫下緩慢加入去離子水，且邊加去離子水邊攪拌，直至形成澄清透明、無色或微黃色、粘度小且流動性好的液體，即得。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種復方聯(lián)苯芐唑納米乳噴劑，該納米乳的粒徑為1nm～100nm，由下述質量百分比的原料制成表面活性劑30%～40%、助表面活性劑3%～14%、油相5%～10%、聯(lián)苯芐唑0.8%～2%、丙酸氯倍他索0.02%～0.1%、肉桂醛0.01%～0.2%、余量為去離子水，上述原料的質量百分比之和為100%。本發(fā)明具有殺真菌、殺細菌、抗細菌、抗真菌、消炎、止癢等多種作用，治療淺表皮膚真菌感染以及真菌性甲溝炎和念珠性外陰陰道炎，對外耳炎、細菌性皮膚感染也有效。本發(fā)明制備的復方納米乳，顯著提高了三種藥物的活性，殺菌止癢效果迅速，不易復發(fā)，制備簡單，在醫(yī)藥領域有廣闊的市場前景。
文檔編號A61K31/4174GK102526070SQ20121000090
公開日2012年7月4日 申請日期2012年1月4日 優(yōu)先權日2012年1月4日
發(fā)明者周瑩, 歐陽五慶, 歐陽伸雨 申請人:西北農(nóng)林科技大學