專利名稱：用于編程免疫應答的脂肪組合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及用于改善生命后期中免疫應答的具有特定脂肪組成的嬰兒營養(yǎng)組合物。
背景技術：
生命最初數(shù)周或數(shù)月中的嬰兒喂養(yǎng)習慣影響其生命后期中對疾病的易感性。母乳喂養(yǎng)是優(yōu)選的喂養(yǎng)嬰兒的方法，因為其具有很多健康益處，尤其是免疫相關的益處。許多研究已經(jīng)證明，與非母乳喂養(yǎng)的嬰兒相比，母乳喂養(yǎng)的嬰兒具有增強的疫苗接種應答。此外，許多研究已經(jīng)表明母乳喂養(yǎng)的抗感染保護性效應。母乳喂養(yǎng)不僅降低了嬰兒期期間感染的風險，而且還降低了終止母乳喂養(yǎng)后幾年中的感染風險。已經(jīng)證明，母乳喂養(yǎng)的這類長期保護性效應可在生命后期中提供保護作用抵御腹 寫、中耳炎、呼吸道感染和B型流感嗜血桿菌(Haemophilus influenza)感染。雖然并不清楚母乳中的哪個組分提供這些生命后期的有益健康效應，但是兩種必需脂肪酸亞油酸(LA)和α -亞麻酸(ALA)的作用以及長鏈多不飽和脂肪酸(LC_P UFA)的作用已經(jīng)受到很多的關注。并不是所有嬰兒都是母乳喂養(yǎng)的。因此，提供可給予人乳的有益功能例如免疫相關的益處(包括長期益處)的嬰兒配方是一個持續(xù)的目標。W02008/056983公開了包含益生菌、益生元(prebiotics)和至少一種多不飽和脂肪酸(PUFA)的組合物作為用于預防兒童呼吸系統(tǒng)疾病的食物或治療性組合物的用途。W02007/04 6699公開了包含LC-PUFA和核苷酸的組合物用于在通過剖腹產(chǎn)分娩的兒童中預防感染的用途。US2010/136134公開了包含LC-PUFA的組合物用于在嬰兒尤其是年齡為0_2歲的嬰兒中預防炎性障礙例如炎癥或變態(tài)反應的用途。Gibson et al., 2009, Br J NutrlOl: 1706-1713 證明了，用益生菌和 LC-PUFA補充嬰兒配方對7月齡的嬰兒中疫苗接種應答沒有影響。Venuta et al.，1996，J Int Med Res24:325-330 證明了，在接受LA和 ALA作為膳食補充物的年齡為36-49個月的兒童中復發(fā)性呼吸道感染較少。Ben et al.，2004，Chin Med J 117:1268-1270 表明，以 LC_PUFA、LA 和少量的 ALA補充嬰兒配方對年齡最大為6個月的兒童中呼吸道感染和腸道感染的發(fā)病率沒有影響。Bazinet et al., 2004 Tmmunol Lett 95:86-90 報導了在以結核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis)免疫的小豬中，與喂食標準市售豬飼料的小豬相比，通過在母乳期間和斷奶后消費的富含ALA的膳食增強了 DTH反應。在仍對小豬喂食富含ALA的膳食的時候，測量所述DTH反應，從而確定直接的膳食效應。上文提到的組合物中沒有一個被描述為可編程(program)免疫系統(tǒng)以及在不再消費所述嬰兒營養(yǎng)物的生命后期具有抗感染的長期保護性效應。Das, 2004 Med Sci Monit, 10(5): HY19-25 提出圍產(chǎn)期補充 ω-3 和 ω-6 長鏈多不飽和脂肪酸(PUFA)可在成人生活中預防各種疾病的發(fā)生。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明人在嚙齒動物模型中發(fā)現(xiàn)，在生命早期通過哺育母乳給予嬰兒相對富含α -亞麻酸(ALA)和含較少亞油酸(LA)且具有低的LA/ALA比的膳食出人意料地在該后代的生命后期中增強了疫苗接種應答(輔助性T細胞I介導的免疫應答)，表明生命后期中較好的免疫應答，例如生命后期中增強的對抗感染的抗性或抵御感染的預防性效應。出乎意料地，所述膳食不僅在生命后期中增加疫苗接種應答(輔助性T細胞I介導的免疫應答)，而且還在生命后期中減少變應性應答(輔助性T細胞2免疫應答)，表明在生命后期中對所述免疫系統(tǒng)(Thl應答和Th2應答)的整體積極效應。因為已知母體膳食中ω-3脂肪酸和ω-6脂肪酸的含量可反映于母乳組成中，本發(fā)現(xiàn)可用于設計嬰兒營養(yǎng)組合物。因此，本發(fā)明涉及具有高ALA和低LA/ALA比的脂質(zhì)級分的嬰兒營養(yǎng)組合物。所述嬰兒組合物可有利地用于增強疫苗接種應答和/或用于預防感染，其中在嬰兒期的生命早期給予所述組合物，并且所述有利效應發(fā)生在生命后期，優(yōu)選兒童期和/或青春期。
具體實施例方式本發(fā)明涉及用于在年齡為36個月以上的人受試者中增強疫苗接種應答的方法，所述方法包括當所述人受試者的年齡為36個月以下時，給予所述人受試者脂質(zhì)組分或包含脂質(zhì)組分的組合物，其中所述脂質(zhì)組分包含以總脂肪酸計低于50重量％的亞油酸(LA)并包含以總脂肪酸計至少2重量％的α -亞麻酸(ALA)，并且其中所述LA與ALA的重量比是1-7.5。換言之，本發(fā)明涉及脂質(zhì)組分或包含脂質(zhì)組分的組合物用于制備用于在年齡為36個月以上的人受試者中增 強疫苗接種應答的營養(yǎng)組合物的用途，其中當所述人受試者的年齡為36個月以下時，給予所述人受試者所述營養(yǎng)組合物，所述脂質(zhì)組分包含以總脂肪酸計低于50重量％的亞油酸(LA)并包含以總脂肪酸計至少2重量％的α -亞麻酸(ALA)，并且其中所述LA與ALA的重量比是1-7.5。本發(fā)明還可表述為脂質(zhì)組分或包含脂質(zhì)組分的組合物用于在年齡為36個月以上的人受試者中增強疫苗接種應答，其中當所述人受試者的年齡為36個月以下時，給予所述人受試者所述組合物，所述脂質(zhì)組分包含以總脂肪酸計低于50重量％的亞油酸(LA)并包含以總脂肪酸計至少2重量％的α-亞麻酸(ALA)，并且其中所述LA與ALA的重量比是1-7.5。優(yōu)選地，所述組合物是營養(yǎng)組合物。本發(fā)明還涉及用于在年齡為36個月以上的人受試者中增強疫苗接種應答的方法，所述方法包括當所述人受試者的年齡為36個月以下時，給予所述人受試者營養(yǎng)組合物，其中所述營養(yǎng)組合物包含脂質(zhì)組分、蛋白質(zhì)組分、可消化的碳水化合物組分，其中所述脂質(zhì)組分提供總熱量的35%-55%，所述蛋白質(zhì)組分提供總熱量的5%-15%，所述可消化的碳水化合物提供總熱量的30%-60%，并且其中所述脂質(zhì)組分包含以總脂肪酸計低于50重量％的亞油酸(LA)并包含以總脂肪酸計至少2重量％的α -亞麻酸(ALA)，其中所述LA與ALA的重量比是1-7.5。
換言之，本發(fā)明涉及包含脂質(zhì)組分、蛋白質(zhì)組分和可消化的碳水化合物組分的組合物用于制備用于在年齡為36個月以上的人受試者中增強疫苗接種應答的營養(yǎng)組合物的用途，其中當所述人受試者的年齡為36個月以下時，給予所述人受試者所述營養(yǎng)組合物，其中所述脂質(zhì)組分提供總熱量的35%-55%，所述蛋白質(zhì)組分提供總熱量的5%-15%，所述可消化的碳水化合物組分提供總熱量的30%-60%，并且其中所述脂質(zhì)組分包含以總脂肪酸計低于50重量％的亞油酸(LA)并包含以總脂肪酸計至少2重量％的α -亞麻酸(ALA)，其中所述LA與ALA的重量比是1-7.5。本發(fā)明還可表述為包含脂質(zhì)組分、蛋白質(zhì)組分和可消化的碳水化合物組分的組合物用于在年齡為36個月以上的人受試者中增強疫苗接種應答，當所述人受試者的年齡為36個月以下時，給予所述人受試者所述組合物，其中所述脂質(zhì)組分提供總熱量的35%-55%，所述蛋白質(zhì)組分提供總熱量的5%-15%，所述可消化的碳水化合物組分提供總熱量的30%-60%，并且其中所述脂質(zhì)組分包含以總脂肪酸計少于50重量％的亞油酸(LA)并包含以總脂肪酸計至少2重量％的α -亞麻酸(ALA)，其中所述LA與ALA的重量比是1_7.5。優(yōu)選地，所述組合物是營養(yǎng)組合物。增強的疫苗接種應答表明增強的對抗感染的抗性或抵御感染的預防性效應。本發(fā)明還涉及用于在年齡為36個月以上的人受試者中預防感染的方法，所述方法包括當所述人受試者的年齡為36個月以下時，給予所述人受試者脂質(zhì)組分或包含脂質(zhì)組分的組合物，其中所述脂質(zhì)組分包含以總脂肪酸計低于50重量％的亞油酸(LA)并包含以總脂肪酸計至少2重量％的α -亞麻酸(ALA)，并且其中所述LA與ALA的重量比是1-7.5。換言之，本發(fā) 明涉及脂質(zhì)組分或包含脂質(zhì)組分的組合物用于制備用于在年齡為36個月以上的人受試者中預防感染的營養(yǎng)組合物的用途，其中當所述人受試者的年齡為36個月以下時，給予所述人受試者所述營養(yǎng)組合物，所述脂質(zhì)組分包含以總脂肪酸計低于50重量％的亞油酸(LA)并包含以總脂肪酸計至少2重量％的α -亞麻酸(ALA)，并且其中所述LA與ALA的重量比是1-7.5。本發(fā)明還可表述為脂質(zhì)組分或包含脂質(zhì)組分的組合物用于在年齡為36個月以上的人受試者中預防感染，其中當所述人受試者的年齡為36個月以下時，給予所述人受試者所述組合物，所述脂質(zhì)組分包含以總脂肪酸計低于50重量％的亞油酸(LA)并包含以總脂肪酸計至少2重量％的α-亞麻酸(ALA)，并且其中所述LA與ALA的重量比是1-7.5。優(yōu)選地，所述組合物是營養(yǎng)組合物。本發(fā)明還涉及用于在年齡為36個月以上的人受試者中預防感染的方法，所述方法包括當所述人受試者的年齡為36個月以下時，給予所述人受試者營養(yǎng)組合物，其中所述營養(yǎng)組合物包含脂質(zhì)組分、蛋白質(zhì)組分、可消化的碳水化合物組分，其中所述脂質(zhì)組分提供總熱量的35%-55%，所述蛋白質(zhì)組分提供總熱量的5%-15%，所述可消化的碳水化合物提供總熱量的30%-60%，并且其中所述脂質(zhì)組分包含以總脂肪酸計少于50重量％的亞油酸(LA)并包含以總脂肪酸計至少2重量％的α -亞麻酸(ALA)，其中所述LA與ALA的重量比是1-7.5。換言之，本發(fā)明涉及包含脂質(zhì)組分、蛋白質(zhì)組分和可消化的碳水化合物組分的組合物用于制備用于在年齡為36個月以上的人受試者中預防感染的營養(yǎng)組合物的用途，其中當所述人受試者的年齡為36個月以下時，給予所述人受試者所述營養(yǎng)組合物，其中所述脂質(zhì)組分提供總熱量的35%-55%，所述蛋白質(zhì)組分提供總熱量的5%-15%，所述可消化的碳水化合物組分提供總熱量的30%-60%，并且其中所述脂質(zhì)組分包含以總脂肪酸計低于50重量％的亞油酸(LA)并包含以總脂肪酸計至少2重量％的α -亞麻酸(ALA)，其中所述LA與ALA的重量比是1-7.5。本發(fā)明還可表述為包含脂質(zhì)組分、蛋白質(zhì)組分和可消化的碳水化合物組分的組合物用于在年齡為36個月以上的人受試者中預防感染，當所述人受試者的年齡為36個月以下時，給予所述人受試者所述組合物，其中所述脂質(zhì)組分提供總熱量的35%-55%，所述蛋白質(zhì)組分提供總熱量的5%-15%，所述可消化的碳水化合物組分提供總熱量的30%-60%，并且其中所述脂質(zhì)組分包含以總脂肪酸計低于50重量％的亞油酸(LA)并包含以總脂肪酸計至少2重量％的α -亞麻酸(ALA),其中所述LA與ALA的重量比是1-7.5。優(yōu)選地,所述組合物是營養(yǎng)組合物。優(yōu)選地，本發(fā)明的方法或用途是用于增強疫苗接種應答和用于預防感染。脂質(zhì)組分

ω-3 (稱為ω-3、η3或η-3)脂肪酸是在η-3位共同具有末端碳-碳雙鍵(即從所述脂肪酸的甲基端開始的第三個鍵)的不飽和脂肪酸。在ω-6 (稱為ω-6、η6或η-6)脂肪酸中，所述末端碳-碳雙鍵在η-6位上。在營養(yǎng)上重要的ω-3脂肪酸包括α -亞麻酸(八1^，18:3113)、二十碳五烯酸化 4，20:5113)和二十二碳六烯酸(DHA，22: 6η3)。多不飽和脂肪酸(PUFA)亞油酸(LA，18:2η6，ω-6脂肪酸)和α -亞麻酸(ALA，18:3η3, ω-3脂肪酸)是僅有的兩種人體不能從其他底物中合成的脂肪酸，并因此被稱為必需脂肪酸。它們必須在膳食中存在。它們形成產(chǎn)生更長和更不飽和的脂肪酸(也被稱長鏈多不飽和脂肪酸，在脂肪酸鏈中包含至少20個碳原子且具有2個或多個不飽和的鍵)的起始點。co-3ALA可被轉(zhuǎn)化成EPA (20:5n3)，EPA可被進一步轉(zhuǎn)化成DPA (二十二碳五烯酸，22: 5n3 )，DPA可被進一步轉(zhuǎn)化成DHA( 22: 6n3 )。ω -6LA可被轉(zhuǎn)化成花生四烯酸(ΑΑ，20: 4η6，ω-6脂肪酸)。本發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，當在產(chǎn)后給予嬰兒具有低LA/ALA比且高ALA的特定組合物時，所述組合物對所述嬰兒的免疫應答具有出乎意料的長期效應。具體地，給予具有(i)1-7.5之間的LA/ALA比和(ii )高ALA含量(> 2重量％，以總脂肪酸計)的營養(yǎng)組合物導致在生命后期增強的免疫應答，這通過增加的Tl應答被觀察到。該發(fā)現(xiàn)使得可開發(fā)最佳嬰兒營養(yǎng)組合物用于改善所述嬰兒生命后期的免疫應答。本發(fā)明組合物包含脂質(zhì)。ALA應該以足以增強生命后期Thl應答的量存在。因此，本發(fā)明組合物優(yōu)選地包含以總脂肪酸計至少2重量％的ALA，更優(yōu)選至少3重量％的ALA，甚至更優(yōu)選至少4重量％的ALA。本發(fā)明組合物優(yōu)選地包含以總脂肪酸計低于50重量％的ALA。以所述組合物的總干重計，本發(fā)明組合物優(yōu)選地包含以總干重計至少0.50重量％的ALA,更優(yōu)選至少0.75重量％的ALA，甚至更優(yōu)選至少I重量％的ALA。本發(fā)明組合物優(yōu)選地包含以所述組合物的總干重計低于13重量％的ALA。當為液體形式例如是即飲配方時，所述ALA含量優(yōu)選地為至少70mg ALA/1OOml所述液體組合物,更優(yōu)選至少IOOmg ALA/1OOml所述液體組合物，甚至更優(yōu)選至少140mg ALA/1OOml所述液體組合物。本發(fā)明組合物優(yōu)選地包含低于1750mg ALA/1OOml所述液體組合物。LA應以足夠的量存在以促進健康的成長和發(fā)育。因此所述組合物包含以總脂肪酸計低于50重量％的LA，優(yōu)選低于40重量％的LA，更優(yōu)選低于35重量％的LA，最優(yōu)選低于25重量％的LA。所述組合物優(yōu)選地包含以總脂肪酸計至少2重量％的LA。以所述組合物的總干重計，本發(fā)明組合物包含以總干重計低于13重量％的LA，優(yōu)選低于10.5重量％的LA,更優(yōu)選低于9重量％的LA,最優(yōu)選低于6.5重量％的LA。所述組合物優(yōu)選地包含以總干重計低于0.5重量％的LA。當為液體形式例如是即飲配方時，所述LA含量是低于1750mgLA/100ml所述液體組合物,優(yōu)選低于1400mg LA/1OOml所述液體組合物,更優(yōu)選低于1225mg LA/100ml所述液體組合物,最優(yōu)選低于875mg LA/100ml所述液體組合物。所述組合物優(yōu)選地包含至少70mg LA/1OOml所述液體組合物。應該很好地平衡所述LA/ALA重量比以改善生命后期的免疫應答，且同時確保正常的生長和發(fā)育。本發(fā)明組合物具有1-7.5，優(yōu)選1-6，更優(yōu)選2-6，甚至更優(yōu)選3-6，甚至更優(yōu)選4-5.5，最優(yōu)選4-5的LA/ALA重量比。所述脂質(zhì)組分優(yōu)選地包含以總脂肪酸計低于40重量％的LA且LA/ALA比是2-6。因為花生四烯酸(AA)在嬰兒神經(jīng)發(fā)育中起重要的作用，本發(fā)明組合物優(yōu)選地包含AA。以總脂肪酸計,所述AA含量優(yōu)選地為至少0.02重量％,更優(yōu)選至少0.05重量％,更優(yōu)選至少0.1重量％，甚至更優(yōu)選至少0.2重量％。由于AA (—種ω -6LC-PUFA)可能會抵消本發(fā)明組合物中低LA含量和低LA/ALA比對免疫系統(tǒng)的“編程”效應，所以所述AA含量優(yōu)選地為以總脂肪 酸計不超過5重量％，更優(yōu)選不超過I重量％，更優(yōu)選不超過0.5重量％，甚至更優(yōu)選不超過0.25重量％，最優(yōu)選不超過0.05重量％。以所述組合物的總干重計，本發(fā)明組合物優(yōu)選地包含以總干重計至少0.005重量％的ΑΑ，更優(yōu)選至少0.01重量％的ΑΑ，更優(yōu)選至少0.025重量％的ΑΑ，甚至更優(yōu)選至少0.05重量％的ΑΑ。本發(fā)明組合物優(yōu)選地包含以所述組合物的總干重計低于1.3重量％的ΑΑ，更優(yōu)選低于0.30重量％的ΑΑ，更優(yōu)選低于0.15重量％的ΑΑ，甚至更優(yōu)選低于0.07重量％的ΑΑ，最優(yōu)選低于0.015重量％的ΑΑ。當為液體形式例如是即飲配方時，所述AA含量優(yōu)選地為至少0.70mg AA/100ml所述液體組合物，優(yōu)選至少1.75mg AA/1OOml所述液體組合物,更優(yōu)選至少3.50mg AA/1OOml所述液體組合物，甚至更優(yōu)選至少7mg AA/100ml所述液體組合物。本發(fā)明組合物優(yōu)選地包含低于175mg AA/1OOml所述液體組合物,更優(yōu)選低于35mgAA/100ml所述液體組合物,更優(yōu)選低于
17.5mg AA/100ml所述液體組合物,甚至更優(yōu)選低于9mg M/100ml所述液體組合物,最優(yōu)選低于2mg AA/1OOml所述液體組合物。所述LC-PUFA、LA和/或ALA可作為游離脂肪酸形式、以甘油三酯、以甘油二酯形式、以單甘油酯形式、以磷脂的形式提供或以上述一種或多種的混合物的形式提供。優(yōu)選地，本發(fā)明組合物包含甘油三酯和/或磷脂形式的PUFA。本發(fā)明組合物具有1-6，更優(yōu)選2-6，甚至更優(yōu)選2-5的ω -6/ ω -3PUFA重量比。本發(fā)明組合物優(yōu)選地包含至少一種、優(yōu)選至少兩種選自以下的脂質(zhì)來源:亞麻子油(亞麻籽油)、菜子油(rape seed oil,包括菜籽油(colza oil)、低芥酸菜子油(lowerucic acid rape seed oil)和芥花桿油(canola oil))、鼠尾草油(salvia oil)、紫蘇子油(perilla oil)、馬齒覓油(purslane oil)、越橘油(lingonberry oil)、沙棘油(seabuckthorn oil)、大麻油(hemp oil)、高油酸向日葵油(high oleic sunflower oil)、高油酸紅花油(high oleic safflower oil)、橄欖油、海洋油(marine oil)、微生物油(microbial oil )、紅醋栗桿油(black currant seed oil)、藍薊油(echium oil)、乳脂、椰子油和棕櫚仁油。本發(fā)明的組合物優(yōu)選地包含至少一種、優(yōu)選至少兩種選自以下的脂質(zhì)來源:亞麻子油、菜子油、椰子油、高油酸向日葵油、奶油制酌油(butter oil)和海洋油。本發(fā)明組合物包含提供總熱量的35%_55%、優(yōu)選提供總熱量的40%_50%的脂質(zhì)組分。當為液體形式例如是即食配方時，所述組合物優(yōu)選地包含2.1-6.5 g脂肪/100ml，更優(yōu)選地3.0-4.0g脂肪/100ml。以干重計，本發(fā)明組合物優(yōu)選地包含12.5-40重量％，更優(yōu)選19-30重量％的脂肪。本發(fā)明使用的術語“脂質(zhì)”或“脂質(zhì)組分”是指游離脂肪酸、甘油三酯、甘油二酯、單甘油酯、磷脂、固醇和糖脂的總和。營養(yǎng)纟目合物蛋白質(zhì)組分本發(fā)明組合物包含蛋白質(zhì)組分。用于營養(yǎng)制品中的蛋白質(zhì)優(yōu)選地選自非人動物蛋白(優(yōu)選乳蛋白質(zhì))、植物蛋白質(zhì)(優(yōu)選大 蛋白質(zhì)和/或水稻蛋白質(zhì))、游尚氣基酸和它們的混合物。本發(fā)明組合物優(yōu)選地包含酪蛋白、乳清、水解的酪蛋白和/或水解的乳清蛋白。優(yōu)選地，所述蛋白質(zhì)組分包括完整的蛋白質(zhì)，更優(yōu)選完整的牛乳清蛋白和/或完整的牛酪蛋白。在一個實施方案中，所述蛋白優(yōu)選地選自水解的牛奶蛋白、水解的乳清蛋白和水解的酪蛋白。本發(fā)明組合物優(yōu)選地包含酸乳清和/或具有降低的糖巨肽(glycomacropeptide)濃度的甜乳清。本發(fā)明組合物優(yōu)選地包含衍生自β_酪蛋白和/或α-乳清蛋白的蛋白質(zhì)。本發(fā)明組合物優(yōu)選地以10:90-90:10、更優(yōu)選20:80-80:20的酪蛋白:乳清重量比包含酪蛋白和乳清。 本發(fā)明組合物包含提供總熱量的5%_15%、優(yōu)選提供總熱量的6%_12%、更優(yōu)選提供總熱量的6%-10%的蛋白質(zhì)。當為液體形式例如是即食液體時,所述組合物每IOOml優(yōu)選地包含0.5-6.0g,更優(yōu)選1.0-3.0g,甚至更優(yōu)選1.0-2.5g蛋白質(zhì)。以干重計,本發(fā)明組合物優(yōu)選地包含以所述總組合物的干重計至少7.0重量％，更優(yōu)選至少8.0重量％，最優(yōu)選至少9重量％或至少10重量％的蛋白質(zhì)。優(yōu)選地，本發(fā)明組合物包含以所述總組合物的干重計至多40重量％，更優(yōu)選至多15重量％，優(yōu)選至多20重量％的蛋白質(zhì)?？筛鶕?jù)凱氏定氮法(Kjeldahl-method)通過測量總氮并對酪蛋白使用6.38的換算因數(shù)，對酪蛋白以外的其他蛋白使用6.25的換算因數(shù)，來計算以本發(fā)明組合物干重計的蛋白質(zhì)重量％。本發(fā)明使用的術語“蛋白質(zhì)”或“蛋白質(zhì)組分”是指蛋白質(zhì)、肽和游離氨基酸的總和。可消化的碳水化合物組分本發(fā)明組合物優(yōu)選地包含提供總熱量的30%_60%、更優(yōu)選提供總熱量的40%_60%、更優(yōu)選提供總熱量的45%-55%的可消化的碳水化合物組分。當為液體形式例如是即食液體時，所述組合物每IOOml優(yōu)選包含3.0-30g,更優(yōu)選6.0_20g，甚至更優(yōu)選7.0-10.0g的可消化的碳水化合物。以干重計，本發(fā)明組合物優(yōu)選地包含20-80重量％，更優(yōu)選40-65重量％的可消化的碳水化合物。優(yōu)選的可消化的碳水化合物來源是乳糖、葡萄糖、蔗糖、果糖、半乳糖、麥芽糖、淀粉和麥芽糖糊精。乳糖是人乳中存在的主要的可消化的碳水化合物。本發(fā)明組合物優(yōu)選地包含乳糖。本發(fā)明組合物優(yōu)選地包含可消化的碳水化合物，其中所述可消化的碳水化合物的至少35重量％、更優(yōu)選至少50重量％、更優(yōu)選至少75重量％、甚至更優(yōu)選至少90重量%、最優(yōu)選至少95重量％是乳糖。以干重計，本發(fā)明組合物優(yōu)選地包含至少25重量％，優(yōu)選至少40重量％的乳糖。
本發(fā)明使用的術語“可消化的碳水化合物”或“可消化的碳水化合物組分”是指可消化的碳水化合物的總和。非消化性寡糖非消化性寡糖存在于人乳中并且其涉及抵御感染的保護以及刺激母乳喂養(yǎng)的嬰兒的免疫系統(tǒng)。因此，本發(fā)明組合物優(yōu)選地包含非消化性寡糖。本發(fā)明組合物優(yōu)選地包含聚合度(DP)為2-250、更優(yōu)選3_60的非消化性寡糖。所述非消化性寡糖優(yōu)選地選自:低聚果糖(FOS)(例如菊粉)、低聚半乳糖(GOS)(例如反式低聚半乳糖或β -低聚半乳糖)、低聚葡萄糖(如龍膽寡糖(gentio-oligosaccharide)、黑曲霉寡糖(nigero-oligosaccharide)和環(huán)糊精寡糖(cyclodextrin-oligosaccharide))、低聚阿拉伯糖、低聚甘露糖(mannan-oligosaccharide)>低聚木糖、低聚巖藻糖、阿拉伯半乳寡糖(arabinogalacto-oligosaccharide)、葡糖甘露寡糖(glucomanno-oligosaccharide)、半乳甘露寡糖(galactomanno-oligosaccharide)、含唾液酸的寡糖和糖醒酸寡糖。本發(fā)明組合物優(yōu)選地包含低聚果糖、低聚半乳糖和/或半乳糖醛酸寡糖(galacturonic acid oligosaccharide),更優(yōu)選低聚半乳糖,最優(yōu)選反式低聚半乳糖。在一個優(yōu)選實施方案中，所述組合物包含反式低聚半乳糖和低聚果糖的混合物。本發(fā)明的組合物優(yōu)選地包含DP為2-10的低聚半乳糖和/或DP為2-60的低聚果糖。所述低聚半乳糖優(yōu)選地選自:反式低聚半乳糖、乳糖-N-四糖(lacto-N-tetraose, LNT)、乳糖-N-新四糖(neo-LNT)、巖藻糖基乳糖(fucosyl-lactose)、巖藻糖基化的LNT和巖藻糖基化的neo-LNT。在一個特別優(yōu)選的實施方案中，所述組合物包含反式低聚半乳糖([半乳糖]n-葡萄糖；其中η是1-60之間的整數(shù)，即2、3、4、5、6、……、59、60;η優(yōu)選地選自 2、3、4、5、6、7、8、9 或 10)。反式低聚半乳糖(TOS)為例如以 Vivinal (Borculo DomoIngredients, Netherlands)的商標出售的。優(yōu)選地,所述反式低聚半乳糖的糖是β _連接的。低聚果糖是非消化性寡糖，其包含DP或者平均DP為2-250、更優(yōu)選10-100的β_連接的果糖單元鏈。低聚果糖包括菊粉、果聚糖和/或混合型的多聚果聚糖(polyfructan)o 一種特別優(yōu)選的低聚果糖是菊粉。適用于所述組合物的低聚果糖也是已
可市購的，例如RaftiHn.t' HP (Orafti)糖醛酸寡糖優(yōu)選地是通過果膠降解得到的。糖醛酸寡糖優(yōu)選半乳糖醛酸寡糖。因此本發(fā)明組合物優(yōu)選地包含DP為2至100的果膠降解產(chǎn)物。所述果膠降解產(chǎn)物優(yōu)選地是用蘋果果膠、甜菜果膠和/或柑橘果膠(citrus pectin)制備。所述組合物優(yōu)選地包含反式低聚半乳糖、低聚果糖和果膠降解產(chǎn)物。反式低聚半乳糖:低聚果糖:果膠降解產(chǎn)物的重量比優(yōu)選地是(20-2):1: (1-3)，更優(yōu)選地是(12-7):1: (1-2)。
GOS, FOS和/或糖醛酸寡糖刺激嬰兒的免疫系統(tǒng)。因此，向本發(fā)明組合物中加入GOS、FOS和/或糖醛酸寡糖，優(yōu)選地加入GOS和F0S，更優(yōu)選地加入GOS、FOS和糖醛酸寡糖將導致對免疫應答的進一步改善效應。所述組合物優(yōu)選地每IOOml包含80mg_2g、更優(yōu)選地每IOOml包含150mg_l.50g、甚至更優(yōu)選地300mg-lg的非消化性寡糖。以干重計，所述組合物優(yōu)選地包含0.25重量％_20重量％、更優(yōu)選0.5重量％-10重量％、甚至更優(yōu)選1.5重量％-7.5重量％的非消化性寡糖。配方本發(fā)明組合物優(yōu)選地特別適于為年齡為36個月或以下的人、特別是年齡為24個月或以下的人受試者、甚至更優(yōu)選年齡為18個月或以下的人受試者、最優(yōu)選年齡為12個月或以下的人受試者提供每日營養(yǎng)需求。因此，所述營養(yǎng)組合物可用于喂食人受試者。本發(fā)明組合物優(yōu)選地經(jīng)腸內(nèi)給予，更優(yōu)選地經(jīng)口給予。本發(fā)明組合物不是人乳。本發(fā)明組合物包含脂質(zhì)組分、蛋白質(zhì)組分和可消化的碳水化合物組分。根據(jù)嬰兒配方和幼兒配方的國際標準，本發(fā)明的組合物優(yōu)選地包含其他級分，例如維生素、礦物質(zhì)、微量兀素和其他微量營養(yǎng)物。本發(fā)明組合物包含脂質(zhì)組分、蛋白質(zhì)組分和可消化的碳水化合物組分，其中所述脂質(zhì)組分提供總熱量的35%_55%，所述蛋白質(zhì)組分提供總熱量的5%_15%，所述可消化的碳水化合物組分提供總熱量的30-60%。本發(fā)明組合物優(yōu)選地包含提供總熱量的40%-50%的脂質(zhì)組分，提供總熱量的6%-12%的蛋白質(zhì)組分和提供總熱量的40%-60%的可消化的碳水化合物組分。總熱量的量由來自蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和可消化的碳水化合物的熱量的總和來確定。本發(fā)明組合物的脂質(zhì)組分優(yōu)選地包含以總脂肪酸計低于40重量％的亞油酸(LA)，并且包含以總脂肪酸計至少3重量％的α -亞麻酸(ALA)。優(yōu)選地，本發(fā)明組合物中所`述亞油酸(LA)與α -亞麻酸(ALA)的重量比是2_6。在本發(fā)明的一個實施方案中，所述脂質(zhì)組分優(yōu)選地提供總熱量的35%_50%、優(yōu)選40%-50%，所述蛋白質(zhì)組分優(yōu)選地提供總熱量的6-12%、優(yōu)選6-10%，所述可消化的碳水化合物組分優(yōu)選地提供總熱量的40%-60%、優(yōu)選45%-55%，其中所述脂質(zhì)組分包含以總脂肪酸計低于40重量％的亞油酸(LA)、優(yōu)選低于35重量％的LA、更優(yōu)選低于25重量％的LA,并且包含至少3重量％的α -亞麻酸(ALA)、優(yōu)選至少4重量％的ALA，其中LA與ALA的重量比是2-6，優(yōu)選3-6，更優(yōu)選4-5.5。為了滿足嬰兒的熱量需求,所述組合物優(yōu)選地包含50-200kcal/100ml液體,更優(yōu)選60-90kcal/100ml液體，甚至更優(yōu)選60-75kcal/100ml液體。這種熱量密度確保水與熱量消耗之間的最佳比例。本發(fā)明組合物的克分子滲透壓濃度優(yōu)選地為150-420m0smOl/l，更優(yōu)選260至320m0smOl/l。這種低的克分子滲透壓濃度旨在減少胃腸應激。所述組合物優(yōu)選地是液體形式。所述液體組合物優(yōu)選地具有(于20°C下在布氏粘度計(Brookfield viscometer)中以100s<的剪切速率測量的)低于35mPa.s,更優(yōu)選低于6mPa.s的粘度。當所述組合物是液體形式時，優(yōu)選的每日給予體積是約80-2500ml,更優(yōu)選每日約200-1200ml。每日喂食的次數(shù)優(yōu)選1_10次，優(yōu)選3-8次。在一個實施方案中，以液體的形式每日給予所述組合物，持續(xù)至少4周、優(yōu)選至少8周、更優(yōu)選至少12周的時間，其中每日給予的總體積為200-1200ml，并且其中每日喂養(yǎng)的次數(shù)為1-10次。所述至少4周或至少8周或至少12周的時間優(yōu)選地是在嬰兒生命的最初24個月中，更優(yōu)選地在生命的最初12個月中，最優(yōu)選在生命的最初6個月中。在一個實施方案中，所述組合物是一種適合用于在以水性溶液(優(yōu)選地以水)復原后制備液體組合物的粉末。所述組合物優(yōu)選地是待用水復原的粉末。應思本發(fā)明人在動物研究中發(fā)現(xiàn)，產(chǎn)后給予包含本發(fā)明脂質(zhì)組分的營養(yǎng)組合物在所述后代中對免疫系統(tǒng)的發(fā)育有長期影響并且對針對免疫疾病的易感性有長期效應。本發(fā)明人已經(jīng)認識到，當產(chǎn)后給予膳食PUFA時，所述PUFA對免疫應答有意想不到的長期效應。因此，在出生后的生命最早期中給予嬰兒本發(fā)明的營養(yǎng)組合物是重要的。生命的最初數(shù)周或數(shù)月被認為是建立嬰兒營養(yǎng)對生命后期疾病發(fā)生的長期“編程”效應的最佳時間。該“編程”效應被正式定義為“在發(fā)育關鍵期或敏感期進行的刺激或損傷可產(chǎn)生對生物體結構或功能的長期效應或終身效應時發(fā)生的效應”(Lucas, A.2000，Am J Clin Nutr，71:602)。該定義中重要的潛在概念是所述編程事件僅在敏感性的特定窗口期間發(fā)生。本發(fā)明人認為，當接受本發(fā)明組合物時嬰兒越小，對在這樣小的嬰兒中仍在發(fā)育的免疫系統(tǒng)的編程效應越有效。在本發(fā)明用途的一個實施方案中，將所述營養(yǎng)組合物有利地給予年齡為36個月或以下，優(yōu)選24個月或以下，更優(yōu)選12個月或以下，最優(yōu)選6個月或以下的人受試者。本發(fā)明人在動物研究中發(fā)現(xiàn)，產(chǎn)后給予包含本發(fā)明脂質(zhì)組分的營養(yǎng)組合物直至出生后第3周可導致在所述后代中進行流行性感冒疫苗接種后增加的Thl應答，所述Thl應答是在出生后11周(對應小鼠的成人期的年齡)測量。重要的是，出生后3周，所述后代的紅細胞的脂肪酸組成反映了母體膳食，而在疫苗接種的時候(出生后7周)，所述后代的紅細胞脂肪酸組成不再反映母本的膳食，表明11周時的疫苗接種應答的差異是真實的編程效應，而不是由于母體膳食的殘余效應。

本發(fā)明尤其旨在增強疫苗接種應答，這類效應在不再給予人受試者所述組合物時在所述人受試者中發(fā)生。所述術語“疫苗接種應答”是指免疫系統(tǒng)對疫苗(即減弱或殺滅的病原體)的應答(免疫應答)。所述術語“疫苗接種”是指免疫接種，通過使用減弱或殺滅的傳染性病原體刺激免疫應答的方法。在本文中，“疫苗接種”還指接種，通過使用沒有減弱的活的病原體刺激免疫應答的方法。本發(fā)明的結合物可適用于支持疫苗接種法，例如，增強疫苗接種法的效應。本發(fā)明的結合物適用于在疫苗接種前，疫苗接種期間和/或疫苗接種后支持疫苗接種應答。尤其可合適地增強對白喉-破傷風、百日咳、脊髓灰質(zhì)炎疫苗、麻疹/流行性腮腺炎/風疹、肺炎球菌結合疫苗、嗜血桿菌B結合疫苗、乙型肝炎、甲型肝炎、水痘和/或流行性感冒的疫苗接種的效應。本發(fā)明組合物被發(fā)現(xiàn)可增強對接種疫苗的DTH應答，這表明增強的Thl應答。增強的Thl應答導致對致病細菌和/或病毒的應答的增強。因此，增強的疫苗接種應答表明對抗感染的抗性增強或表明抵御感染的預防性效應，因此本發(fā)明組合物適用于預防感染。本發(fā)明制劑可有利地用于預防腸道感染和/或呼吸道感染和/或耳部感染和/或尿路感染。本發(fā)明尤其旨在預防感染，這類預防性效應在不再給予人受試者所述組合物時在所述人受試者中發(fā)生。本文中所述術語“感染”是指由病原性微生物侵入身體而引起的疾病或病理狀態(tài)。病原性微生物，也稱為病原體，包括病毒、細菌、真菌、原生動物寄生蟲、肉眼可見蠕蟲(worm)寄生蟲、朊病毒和類病毒。最常見的嬰兒(年齡為0-3歲)感染和兒童(年齡為3-12歲)感染是胃腸道感染，其中有腹瀉、呼吸道感染、耳部感染(中耳炎)和尿路感染。因為已發(fā)現(xiàn)本發(fā)明組合物可增強Thl應答，因此本發(fā)明尤其適用于預防病毒感染，更優(yōu)選由正粘病毒科病毒，特別是流感病毒、皰疹病毒、輪狀病毒、巨細胞病毒、杯狀病毒科、呼吸道合胞體病毒、人免疫缺陷病毒和/或鼻病毒引起的病毒感染。因此，本發(fā)明的用途優(yōu)選地是用于預防病毒感染，更優(yōu)選病毒感染性普通感冒、流感、麻疹，水痘、病毒性腹瀉、病毒性胃腸炎和/或病毒性呼吸道感染。在一個實施方案中，本發(fā)明旨在增強疫苗接種應答和預防感染，這些效應在不再給予人受試者所述組合物時在所述人受試者中發(fā)生。在另一個實施方案中，本發(fā)明旨在增強疫苗接種應答和/或預防感染以及預防變態(tài)反應和/或特應性疾病,例如哮喘和/或特應性皮炎,這些效應在不再給予人受試者所述組合物時在所述人受試者中發(fā)生。在另一個實施方案中，本發(fā)明旨在增強疫苗接種應答和/或預防感染，這些效應發(fā)生在年齡為36個月以上，優(yōu)選年齡為5歲以上，更優(yōu)選年齡為8歲以上的人受試者的生命后期中，其中不再給予所述人受試者所述組合物?！吧笃凇笔侵赋^攝入所述營養(yǎng)組合物的年齡的年齡，優(yōu)選超出所述年齡至少I年，優(yōu)選2年，更優(yōu)選5年。在本說明書及其權利要求中，動詞“包含”及其變化形式用于以其非限制性含義表示包括該詞之后的項目，但也不排除未具體提到的項目。此外，由不定冠詞“一個”或“一種”修飾的元素并不排除存在多于一種所述元素的可能性，除非上下文明確規(guī)定有且僅有一種所述元素。因此，不定冠詞“一個”或“一種” 一般指“至少一種”。
實施例實施例1:母體膳食PUFA對后代疫苗接種應答的編程效應方法:給12周大的C57B1/6小鼠喂食常規(guī)嚙齒動物膳食(對照膳食，AIN93G，參見表I)。一周后，使雌性小鼠進行交配并隨機分至七組中的一組:懷孕期間和哺乳期間均喂食對照膳食(C)，懷孕期間和哺乳期間均喂食高C18:3n-3 ( α -亞麻酸，ALA)膳食(膳食I)(1PL)，或僅哺乳期間喂食高C18:3n-3 ( α -亞麻酸，ALA)膳食(膳食I) (1L)，懷孕期間和哺乳期間均喂食喂食高C18:2n-6 (亞油酸，LA)膳食(膳食2) (2PL)，或僅哺乳期間喂食高C18:2n-6 (亞油酸，LA)膳食(膳食2) (2L)。哺乳期間喂食膳食I和膳食2的母鼠(IL或2L)在分娩前喂食對照膳食。所有的膳食均由20%的酪蛋白、37%的玉米淀粉、13%的麥芽糊精、10%的葡萄糖、5%的Vitacel L600-20 (纖維)、5%的維生素與礦物質(zhì)的混合物，以及10%的脂肪組成。不同膳食的脂肪酸組成列于表I。斷奶時(出生后第三周)，從母鼠和雄性幼鼠采集血樣。喂食幼崽西式膳食(表I)直到本實驗結束。在7周齡和9周齡(分別為斷奶后第 4 周和第 6 周)時,通過皮下(s.c)注射 100 μ I Inf luvac2008/2009 (Solvay PharmaB.V.，ffeesp, The Netherlands)來給雄性小鼠疫苗接種。在第一次疫苗接種(年齡為7周)時從所述幼鼠采取血樣。在11周齡時，通過皮下注射25 μ I Influvac至一只耳朵的耳廓同時注射25μ1 PBS至另一只耳朵來誘導遲發(fā)型超敏應答(DTH)。在抗原激發(fā)前和激發(fā)24小時后，用數(shù)字測微計(Mitutoyo Digimatic293561; Veenendaal, The Netherlands)測量耳厚度(作為輔助性T細胞 度計算出所述DTH應答，針對由皮下注射PBS引起的耳腫脹進行校正。此后，通過腹膜內(nèi)注射lmllO%的尿烷處死小鼠。通過心臟穿剌將血液收集到EDTA管中，并儲存在冰上。為了分析母鼠和幼鼠的紅血細胞(RBC或紅細胞)的脂肪酸組成，將斷奶時、疫苗接種時、實驗結束時釆取的血樣以HOOOrpm離心五分鐘，并除去血漿。用含5mMEDTA的PBS洗滌紅細胞兩次。將它們再懸浮于等體積的PBS-EDTA中，并貯存于_80°C直至進行分析。如現(xiàn)有技術(Bligh，1959)所述提取紅細胞脂質(zhì)，并用HPLC分析脂肪酸組成情況。復！不同膳食的脂肪酸組成(g/100g總脂肪酸)

權利要求
1.一種包含脂質(zhì)組分、蛋白質(zhì)組分和可消化的碳水化合物組分的組合物用于制備用于在年齡為36個月以上的人受試者中增強疫苗接種應答的營養(yǎng)組合物的用途，其中當所述人受試者的年齡為36個月以下時，給予所述人受試者所述營養(yǎng)組合物，其中所述脂質(zhì)組分提供總熱量的35%-55%，所述蛋白質(zhì)組分提供總熱量的5%-15%，所述可消化的碳水化合物組分提供總熱量的30%-60%，其中所述脂質(zhì)組分包含以總脂肪酸計低于50重量％的亞油酸(LA)并包含以總脂肪酸計至少2重量％的α -亞麻酸(ALA)，并且其中LA與ALA的重量比是 1-7.5。
2.一種包含脂質(zhì)組分、蛋白質(zhì)組分和可消化的碳水化合物組分的組合物用于制備用于在年齡為36個月以上 的人受試者中預防感染的營養(yǎng)組合物的用途，其中當所述人受試者的年齡為36個月以下時，給予所述人受試者所述營養(yǎng)組合物，其中所述脂質(zhì)組分提供總熱量的35%-55%，所述蛋白質(zhì)組分提供總熱量的5%-15%，所述可消化的碳水化合物組分提供總熱量的30%-60%，其中所述脂質(zhì)組分包含以總脂肪酸計低于50重量％的亞油酸(LA)并包含以總脂肪酸計至少2重量％的α -亞麻酸(ALA)，并且其中LA與ALA的重量比是1_7.5。
3.權利要求1或2的用途，用于在年齡為5歲或以上，優(yōu)選8歲或以上的人受試者中增強疫苗接種應答或預防感染。
4.前述權利要求任一項的用途，其中所述營養(yǎng)組合物被給予年齡為12個月或以下的嬰兒。
5.前述權利要求任一項的用途，其中所述營養(yǎng)組合物還可用于在所述人受試者的年齡為36個月以上時預防變態(tài)反應和/或特應性疾病。
6.前述權利要求任一項的用途，其中每日給予液體形式的所述組合物，持續(xù)至少4周的時間，其中每日給予的總體積是200ml-1200ml，并且其中每日喂養(yǎng)的次數(shù)為1_10次。
7.前述權利要求任一項的用途，其中所述脂質(zhì)組分提供總熱量的35%-50%，所述蛋白質(zhì)組分提供總熱量的6%-12%，并且所述可消化的碳水化合物組分提供總熱量的40%-60%。
8.前述權利要求任一項的用途，其中所述脂質(zhì)組分包含以總脂肪酸計低于40重量％的亞油酸(LA)以及包含以總脂肪酸計至少3重量％的α -亞麻酸(ALA)。
9.前述權利要求任一項的用途,其中所述亞油酸(LA)與α-亞麻酸(ALA)的重量比是2-6。
10.前述權利要求任一項的用途，其中所述ω-6多不飽和脂肪酸與ω-3多不飽和脂肪酸(PUFA)的重量比是1-6。
11.前述權利要求任一項的用途，其中所述ω-6多不飽和脂肪酸與ω-3多不飽和脂肪酸(PUFA)的重量比是2-5。
12.一種脂質(zhì)組分用于制備用于在年齡為36個月以上的人受試者中增強疫苗接種應答的營養(yǎng)組合物的用途，其中當所述人受試者的年齡為36個月以下時，給予所述人受試者所述營養(yǎng)組合物，所述脂質(zhì)組分包含以總脂肪酸計低于50重量％的亞油酸(LA)并包含以總脂肪酸計至少2重量％的α -亞麻酸(ALA)，并且其中LA與ALA的重量比是1_7.5。
13.一種脂質(zhì)組分用于制備用于在年齡為36個月以上的人受試者中預防感染的營養(yǎng)組合物的用途，其中當所述人受試者的年齡為36個月以下時，給予所述人受試者所述營養(yǎng)組合物，所述脂質(zhì)組分包含以總脂肪酸計低于50重量％的亞油酸(LA)并包含以總脂肪酸計至少2重量％的α -亞麻酸(ALA)，并且其中LA與ALA的重量比是1-7.5。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用于在人受試者的生命后期中增強疫苗接種應答和/或預防感染的方法，所述方法是通過當所述人受試者的年齡為0-36個月時給予所述人受試者具有特定脂肪組成的營養(yǎng)組合物，所述特定脂肪組成具有所限定的亞油酸與α-亞麻酸的重量比。
文檔編號A61P37/00GK103228159SQ201180057203
公開日2013年7月31日 申請日期2011年9月27日 優(yōu)先權日2010年9月28日
發(fā)明者J·加森, N·范威列斯, A·霍根坎普, H·J·M·范德海吉恩 申請人:N·V·努特里奇亞