局部用的維生素d口腔補(bǔ)充組合物的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本申請(qǐng)的主題涉及在治療口腔炎癥中使用的局部用的(topical)維生素D 口腔補(bǔ)充組合物。
【背景技術(shù)】
[0002]最近的研宄已表明，人類牙齦上皮細(xì)胞(GEC)產(chǎn)生的肽，如防御素(defensins)和導(dǎo)管素(cathelicidin)LL-37，這兩者都是抗菌的并且調(diào)制固有免疫應(yīng)答。參見:Diamond,G等人，2008年，“在口腔和肺中保持防御蛋白:相似性和差異性”(“Hold defensepeptides in the oral cavity and the lung: similarities and differences,，，)，牙科研宄雜志(T.Dent.Res.),第87卷:915-927頁(yè)。研宄還表明這些抗菌肽在細(xì)菌性牙周疾病的預(yù)防和控制中至關(guān)重要。具體地說，在牙周病原菌伴放線桿菌(Aggregaitbacterac tinomyce temcomi tans)存在時(shí)，這些肽已被證明會(huì)引發(fā)增加免疫應(yīng)答和表現(xiàn)出抗菌活性。還已證實(shí)，在輔助性治療存在時(shí)如維生素D補(bǔ)充劑即維生素D3[l，25 (0H)2D3]和它的前體以及衍生物，負(fù)責(zé)產(chǎn)生這些抗菌肽的基因可以被上調(diào)(up-regulated)或誘導(dǎo)產(chǎn)生保護(hù)劑的表達(dá)提高。參見:McMahone，L等人，2011年6月，“在牙齦上皮細(xì)胞中維生素D調(diào)制誘導(dǎo)的固有免疫，，(“Vitamin D-mediated induct1n of innate immunity in gingivalepithelial cel I s.”)，傳染與免瘡雜去(Tnfect.TmMin.),笛 79 卷 6 期:2250-7 頁(yè)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明提供了用于治療口腔炎癥的局部用維生素D 口腔補(bǔ)充組合物。滿足本發(fā)明目的合適的維生素D包括:
維生素D，
在1，3，和25號(hào)碳位置具有羥基的維生素D化合物，
I α，25- 二羥基維生素03的酯類，
1，25-二羥基維生素隊(duì)的酯類，
1，25 (OH) 2D3，1，25 (OH) 2D3的類似物，
骨化三醇、25 (OH)D^ 25 (OH)D 3的類似物以及它們的組合。
[0004]維生素D補(bǔ)充劑與口腔粘膜穿透吸收促進(jìn)劑一起被包含在無水乳劑中。
[0005]本發(fā)明提供的用于治療口腔炎癥的局部用維生素D補(bǔ)充組合物包括:
可溶于唾液的無水乳劑載體；
達(dá)到有效水平的維生素D補(bǔ)充劑；和透口腔粘膜吸收促進(jìn)劑；其中:
當(dāng)應(yīng)用至口腔黏膜時(shí)，所述組合物形成附著于所述口腔黏膜上的可溶于唾液的粘膜粘附凝膠；
當(dāng)所述可溶于唾液的黏膜粘附凝膠持續(xù)性地暴露在唾液流體時(shí)，所述黏膜粘附凝膠逐漸溶解，以控制所述維生素D補(bǔ)充劑和所述透口腔粘膜吸收促進(jìn)劑釋放到所述口腔黏膜；和
當(dāng)與所述口腔黏膜接觸時(shí)，所述維生素D補(bǔ)充劑和透口腔粘膜吸收促進(jìn)劑被動(dòng)擴(kuò)散透過所述口腔黏膜:
(a)調(diào)制維生素D在體內(nèi)的利用度和免疫應(yīng)答；
(b)維持循環(huán)的維生素D在充足的水平；和 (C)最小化尚血1?的風(fēng)險(xiǎn)。
[0006]本發(fā)明的維生素D補(bǔ)充組合物，當(dāng)以無水乳劑組合物的形式局部地應(yīng)用在口腔黏膜上時(shí)，形成附著于口腔黏膜上的凝膠。這些凝膠在唾液存在下逐漸溶解，釋放維生素D和透口腔粘膜吸收促進(jìn)劑，這兩者的組合物使維生素D有效地被動(dòng)擴(kuò)散透過黏膜。
[0007]初期的牙周炎癥、牙齦炎被認(rèn)為是由牙齒結(jié)構(gòu)的常規(guī)部位的細(xì)菌生物膜存在下釋放的內(nèi)毒素所引起的炎癥反應(yīng)。如果不進(jìn)行治療，這種狀況經(jīng)常發(fā)展到更嚴(yán)重的病理狀況而被稱為牙周炎。研宄認(rèn)為，頻繁使用本發(fā)明的維生素D局部用補(bǔ)充組合物通過形成的粘膜粘附凝膠而提供保護(hù)，粘膜粘附凝膠在發(fā)炎部位持續(xù)性地釋放維生素D組合物；由此誘導(dǎo)維生素D的被動(dòng)擴(kuò)散到黏膜內(nèi)，這個(gè)過程相應(yīng)地提高了抗菌肽的產(chǎn)量并且激發(fā)了公認(rèn)的治療免疫調(diào)制應(yīng)答。
[0008]維生素D補(bǔ)充劑的擴(kuò)散維持體內(nèi)循環(huán)的維生素D在充足的水平，并且調(diào)制維生素D在體內(nèi)的利用度和免疫應(yīng)答，同時(shí)最小化高血鈣的風(fēng)險(xiǎn)。
[0009]本發(fā)明的組合物中的維生素D在維護(hù)牙周健康中的作用
牙周疾病是由口腔細(xì)菌種群引起的，這些細(xì)菌引發(fā)局部炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致探診出血，牙周附屬物的流失以及骨骼和牙齒的損傷。它們與人體的系統(tǒng)狀況是相關(guān)的，包括心臟疾病、糖尿病、肥胖癥和代謝綜合征。牙周疾病與這些系統(tǒng)狀況之間的聯(lián)系似乎是由于輕微的炎癥負(fù)荷使得它們通過共同的病理生理機(jī)制而聯(lián)系起來?？梢栽O(shè)想，局部分泌的細(xì)胞因子和牙周致病菌可以進(jìn)入血液，進(jìn)而造成身體其它部位的損害，并且已出現(xiàn)了一些這種炎癥負(fù)荷的證據(jù)。
[0010]腫瘤壞死因子α (TNF-α )和白細(xì)胞介素-6 (IL-6)是引起和維持系統(tǒng)性炎癥的關(guān)鍵細(xì)胞因子，其與牙周炎的發(fā)展和嚴(yán)重性密切相關(guān)。此外，牙周炎患者相比于牙周健康的個(gè)體，觀察到這些細(xì)胞因子的血清水平較高。
[0011]瘦蛋白、脂聯(lián)素和抵抗素主要是由脂肪組織分泌的脂肪細(xì)胞因子，但是還由單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，并能直接影響炎癥。
[0012]參見:Teles等人，牙周病學(xué)雜志(.Tournal of Per1dontology) , 2011 年。
[0013]維生素D在骨的生長(zhǎng)和維護(hù)中具有重要作用，這可能對(duì)維護(hù)牙周健康是有益的。最近，有研宄認(rèn)為，其不是通過對(duì)骨代謝的影響而是通過抗炎機(jī)制，向牙周疾病、牙質(zhì)流失和牙齦炎癥施加正面影響。因此，通過局部用的、輔助性維生素D補(bǔ)充組合物維持充足的維生素D的血清值，這可能在牙周疾病的預(yù)防和治療中非常重要。
[0014]維生素D在鈣穩(wěn)態(tài)、骨生長(zhǎng)和維護(hù)中具有重要的作用。已證明抗原誘導(dǎo)T細(xì)胞增殖的抑制和細(xì)胞因子的產(chǎn)生，能夠作為免疫調(diào)制劑。
[0015]最近，已經(jīng)有人提出維生素D還具有抗炎性能。通過分析6700個(gè)樣本(參見:Dietrich等人，美國(guó)臨床營(yíng)養(yǎng)學(xué)雜志(Am.T.Clin.Nutr.)，2005年，第82卷:575-580頁(yè))，發(fā)現(xiàn)在血清維生素D最高的五分之一的個(gè)體中表現(xiàn)出顯著地出血較少、較低的平均牙周袋深度和臨床附著物的流失、較少的牙齒缺失數(shù)量和BMI數(shù)值。還已經(jīng)提出，維生素D(和鈣)補(bǔ)充劑可能對(duì)牙周健康產(chǎn)生積極的影響，特別是對(duì)探診出血、牙齦指數(shù)和H)。
[0016]參見:Garcia等人，牙周病學(xué)雜志(丄Per1dontol.),第82卷:25-32頁(yè):和Miley 等人，牙周病學(xué)雜志(T.Per1dontol.),2009年,第 80卷:1433-1439頁(yè)。
[0017]有趣的是，維生素D受體的多態(tài)性與廣泛性侵襲性牙周炎(GAGP)(參見:Park等人，臨床牙周病學(xué)雜志(T.Clin.Per1dontol.) 2006年，第33卷:524-528頁(yè))和重度慢性牙周炎相關(guān)(參見:Wang等人，牙周病學(xué)雜志(T.Per1dontol.)，2009年，第80卷:603至608頁(yè))。在表現(xiàn)出探診出血較少、較低平均H)值、CAL和牙齒缺失數(shù)量以及較低水平致病菌的個(gè)體中，檢測(cè)到循環(huán)的維生素D的水平最高。此外，原先設(shè)想的維生素D的抗炎作用，通過其與脂聯(lián)蛋白的正相關(guān)性以及與IL-6和瘦蛋白的負(fù)相關(guān)性而被證實(shí)。
[0018]維生素D的活性形式，即1，25- 二羥基維生素D3[l，25 (OH) 2D3]，是一種調(diào)制鈣與骨代謝的開環(huán)留類化合物激素，控制細(xì)胞增殖和分化并發(fā)揮免疫調(diào)制活性。這些范圍內(nèi)的功能臨床上已被開發(fā)，用于治療各種各樣的狀況，從繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)到骨質(zhì)疏松、自身免疫性疾病如牛皮癬。最近，在理解1，25 (OH) 2D3功能的新進(jìn)展和在免疫調(diào)制性能的機(jī)制中的新觀點(diǎn)表明，這種激素在口腔炎癥的治療中有更廣泛的應(yīng)用性。
[0019]維生素D3的二羥基化的生物活性形式也被稱為骨化三醇，在鈣穩(wěn)態(tài)和骨代謝中是一種核心激素，但還具有一些其它的功能和顯著的強(qiáng)力免疫調(diào)制性能，這對(duì)于輔助性、局部用的補(bǔ)充劑是有吸引力的。
[0020]美國(guó)專利號(hào)5952317討論了骨化三醇衍生物及其使用。通過改變或修飾可水解的基團(tuán)，經(jīng)過對(duì)骨化三醇的調(diào)制實(shí)現(xiàn)維生素D在體內(nèi)隨著時(shí)間變化的控制釋放。在結(jié)構(gòu)上，具有理想的生物特性的改進(jìn)的維生素D化合物的關(guān)鍵特征是:它們是25-二羥基維生素D3的衍生物，或25- 二羥基維生素D衍生物的類似物，其中可水解基團(tuán)連接在25號(hào)碳的羥基上并且可選擇性地連接至分子中存在的任何其它的羥基。依賴于各種各樣的結(jié)構(gòu)上的因素，例如附加基團(tuán)的類型、大小、結(jié)構(gòu)復(fù)雜性，這些衍生物被認(rèn)為在體內(nèi)以不同的速率水解成25- 二羥基維生素D3或形成25- 二羥基維生素D3類似物，從而提供了生物活性維生素D化合物(如1，25- 二羥基維生素D3或其類似物)在體內(nèi)的“緩慢釋放”。這些化合物在體內(nèi)的“緩慢釋放”活性曲線可以通過使用衍生物的混合物(如1，25-二羥基維生素D3的不同衍生物或1，25- 二羥基維生素類似物的不同衍生物的混合物)或使用一種或多種維生素D衍生物連同1，25 (OH) 2D3衍生出的化學(xué)修飾性分子組成的混合物而進(jìn)一步調(diào)節(jié)。為獲得所期望性能的類似物，已經(jīng)對(duì)整個(gè)分子進(jìn)行了修飾。超過1000種不同的維生素D類似物已經(jīng)在世界范圍內(nèi)合成出來。所有這些類似物落入本發(fā)明所討論和要求保護(hù)的維生素D中。
[0021]維生素D受體(VDR)是用于類固醇激素和類維生素A酸的核受體超家族的一個(gè)成員。將VDR用作為1，25 (OH) 2D3激活的轉(zhuǎn)錄因子，其最終影響RNA聚合酶介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄的速率。VDRs不僅僅在通常涉及鈣和骨代謝的細(xì)胞中存在，而且還存在于其它類型的細(xì)胞，如免疫系統(tǒng)的細(xì)胞。參見:Chantal Mathieu和Luc