疾病的治療方法
【專利說明】疾病的治療方法
[0001] 相關(guān)申請的奪叉參考
[0002] 本發(fā)明要求2012年12月19日提交的臨時申請61/739, 524的優(yōu)先權(quán)，并且在此 將其全部公開內(nèi)容引入作為參考。 發(fā)明領(lǐng)域
[0003] 本發(fā)明涉及抑制血管通透性過高（vascular hyperpermeability)以及由其導(dǎo)致 的水腫和其它不良作用的方法。本發(fā)明還涉及調(diào)節(jié)內(nèi)皮細胞的細胞骨架的方法。本發(fā)明的 方法包括根據(jù)動物的體脂含量向該動物給藥達那唑（達那唑）化合物。
【背景技術(shù)】
[0004] 血管內(nèi)皮位于所有血管內(nèi)部。其作為血液與組織和器官的界面。內(nèi)皮形成半滲透 屏障，其保持血液隔室的完整性，但是允許水、離子、小分子、大分子和細胞以經(jīng)調(diào)節(jié)的方式 通過。該過程的失調(diào)將導(dǎo)致血管滲漏到皮下組織中。滲漏到組織中的液體會引起水腫，其 在多種疾病中可以引起嚴(yán)重且危及生命的后果。因此，非常需要用于減少水腫，尤其是在水 腫的最早期階段減少水腫，以及生理學(xué)上恢復(fù)內(nèi)皮屏障的方法。
[0005] 內(nèi)皮是控制分子從血液到組織實質(zhì)交換的重要看門人。其在很大程度上控制具 體的血管床到血源性分子（blood-borne molecule)的滲透。內(nèi)皮細胞屏障的通透性和 選擇性主要取決于不同血管床內(nèi)的微脈管系統(tǒng)內(nèi)的內(nèi)皮的結(jié)構(gòu)和類型。不同器官的微血 管床內(nèi)的內(nèi)皮細胞顯示出結(jié)構(gòu)上的分化，其可以被分成三個主要的形態(tài)學(xué)類型：竇狀型 (sinusoidal)、開窗型（fenestrated)和連續(xù)型。
[0006] 竇狀內(nèi)皮（也稱為"不連續(xù)內(nèi)皮"）具有大的細胞間和細胞內(nèi)間隙（gap)并且無基 底膜，其使得分子從毛細血管腔到組織及從組織到毛細血管腔的分子運輸受到最小限度地 限制。在肝臟、脾臟和骨髓中發(fā)現(xiàn)了竇狀內(nèi)皮。
[0007] 開窗內(nèi)皮（fenestrated endothelium)的特征在于存在大量60~80nm直徑的被 稱為窗的圓形的跨細胞的開口。在需要小分子快速交換的組織和器官中發(fā)現(xiàn)開窗內(nèi)皮，包 括腎臟（腎小球、腎小管周圍毛細血管和上行直小血管（ascending vasa recta))、胰腺、腎 上腺、內(nèi)分泌腺和腸。這些窗被細小的膈覆蓋，除了在發(fā)育成熟的、健康的腎小球中的那些。 參考 Ichimura 等人，J. Am. Soc. N印hrol.，19:1463-1471 (2008)。
[0008] 連續(xù)性內(nèi)皮不含有窗或大的間隙。相反地，連續(xù)性內(nèi)皮的特征在于未被中斷的內(nèi) 皮細胞單層。體內(nèi)的大部分內(nèi)皮為連續(xù)性內(nèi)皮，且連續(xù)性內(nèi)皮被發(fā)現(xiàn)位于或包圍腦（血腦 屏障）、膈、十二指腸、脂肪、心臟、腎臟的一些區(qū)域（乳突微脈管系統(tǒng)、下行直小血管）、大血 管、肺部、腸系膜、神經(jīng)、視網(wǎng)膜（血視網(wǎng)膜屏障）、骨骼肌、睪丸和身體的其它組織和器官。
[0009] 連續(xù)性內(nèi)皮中的內(nèi)皮運輸隨細胞旁途徑和跨細胞的途徑出現(xiàn)被認為是一種常識。 細胞旁途徑是在內(nèi)皮細胞之間，通過內(nèi)皮細胞間連接（IEJ)的途徑。在未受干擾的連續(xù)性 內(nèi)皮中，通過擴散和對流來實現(xiàn)水、離子和小分子的細胞旁途徑運輸。大量水（最多40%) 也通過被稱為水通道的水-運輸膜通道跨細胞地跨越內(nèi)皮細胞屏障。大量刺激可以破壞 IEJ組織，從而打開內(nèi)皮屏障中的間隙。這些細胞間間隙的形成允許液體、離子、大分子（例 如蛋白質(zhì)）和其它血漿成分以不受限制的方式通過內(nèi)皮細胞之間。這種細胞旁途徑-引起 的通透性過高產(chǎn)生水腫和其它不良作用，其能夠最終導(dǎo)致組織和器官的損害。
[0010] 跨細胞途徑負責(zé)大分子跨過內(nèi)皮細胞的主動轉(zhuǎn)運，所述大分子例如白蛋白和其 它血漿蛋白質(zhì)，該過程被稱作"轉(zhuǎn)胞吞作用"。大分子的運輸出現(xiàn)在被稱作為細胞膜穴樣 凹陷的小泡中。幾乎所有的連續(xù)性內(nèi)皮具有豐富的細胞膜穴樣凹陷，除了位于腦和睪丸 中的連續(xù)性內(nèi)皮具有很少的細胞膜穴樣凹陷。轉(zhuǎn)胞吞作用是多步過程，其涉及連續(xù)的來 自質(zhì)膜的細胞膜穴樣凹陷芽殖和裂變和跨細胞的易位，以及隨后的與相對質(zhì)膜（opposite plasmalemma)的對接和融合，在此細胞膜穴樣凹陷通過胞吐作用向間質(zhì)中釋放它們的成 分。在正常的生理學(xué)條件下，轉(zhuǎn)胞吞作用是選擇性的并且受到了嚴(yán)密的調(diào)控。
[0011] 對于跨細胞途徑的本質(zhì)重要性的認識正在逐步深入。血漿蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)胞吞作用， 尤其是白蛋白（其代表65%的血漿蛋白質(zhì)）的轉(zhuǎn)胞吞作用受到格外的關(guān)注因為其具有調(diào)節(jié) 經(jīng)血管的血液滲透壓梯度的能力?？梢哉J識到，隨著增加的白蛋白和其它血漿蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn) 胞吞作用高于基礎(chǔ)水平，會增加它們的組織蛋白質(zhì)濃度，隨后會導(dǎo)致水跨過內(nèi)皮屏障移動， 從而產(chǎn)生水腫。
[0012] 通過轉(zhuǎn)胞吞作用也會運輸?shù)兔芏戎鞍祝↙DL)跨過內(nèi)皮細胞。在高脂血癥中，已 經(jīng)通過檢測LDL轉(zhuǎn)胞吞作用的顯著增加來作為動脈粥樣硬化形成的初期事件。LDL在內(nèi)皮 下空間聚集，并陷入在擴張的基底膜（basal lamina)和細胞外基質(zhì)中。在高脂血癥中內(nèi)皮 下脂蛋白聚集，隨后的一連串事件會導(dǎo)致粥樣斑塊的形成。已有報道稱晚期的粥樣硬化病 變有時會伴隨IEJ的打開以及LDL和白蛋白大量不受控制的通過。
[0013] 血管并發(fā)癥是糖尿病的標(biāo)志。在大血管水平，動脈粥樣硬化過程的加速往往表現(xiàn) 為疾病。關(guān)于微血管病，視網(wǎng)膜、腎小球以及神經(jīng)的微脈管系統(tǒng)的變化導(dǎo)致最多種的臨床并 發(fā)癥，但是，隨著研宄數(shù)量的持續(xù)增加，顯示糖尿病也會影響其它器官的微脈管系統(tǒng)，例如 腸系膜、皮膚、骨骼肌、心臟、腦、以及肺部，導(dǎo)致另外的臨床并發(fā)癥。在所有這些血管床中， 血管通透性的改變可能代表了糖尿病內(nèi)皮功能障礙的特點。
[0014] 在連續(xù)性內(nèi)皮中，在糖尿病的早期，對于血漿大分子的毛細管的通透性過高被解 釋為跨內(nèi)皮的囊泡運輸?shù)膹娀?，由增強轉(zhuǎn)胞吞作用引起）而不是IEJ的脫穩(wěn)定化。此 外，已有報道稱糖尿病患者的內(nèi)皮細胞包括腦的那些內(nèi)皮細胞，含有與正常相比數(shù)量增加 的細胞膜穴樣凹陷，以及糖化的蛋白質(zhì)、尤其是糖化的白蛋白，其會被內(nèi)皮細胞吸收，并且 以比它們天然形式明顯更快的速度進行胞轉(zhuǎn)作用。此外，增強的大分子轉(zhuǎn)胞吞作用是會持 續(xù)到超過糖尿病早期階段的過程，并且如果不對該疾病進行治療，可能是導(dǎo)致糖尿病患者 組織和器官水腫的原因。該水腫隨后導(dǎo)致組織和器官的損害。在高血壓中也已經(jīng)報道了大 分子跨細胞運輸?shù)念愃频脑黾印?br>[0015] 細胞旁途徑-引起的通透性過高也是糖尿病和糖尿病血管并發(fā)癥的原因。細胞旁 途徑的IEJ包括粘著連接（AJ)和緊密連接（TJ)。糖尿病改變在AJ和TJ兩者中的特定蛋 白質(zhì)的含量、磷酸化和定位，從而促進增加的內(nèi)皮屏障通透性。
[0016] 為了支持上述討論以及獲得更多的信息，參考Frank等人，Cell Tissue Res. ,335:41-47(2009) ;Simionescu 等人，Cell Tissue Res. ,335:27-40(2009); van den Berg 等人，J. Cyst. Fibros. ,7(6): 515-519 (2008) ;Viazzi 等人，Hypertens. Res.，31:873-879(2008) ;Antonetti 等人，第 14 章，第 340-342 頁，in Diabetic Retinopathy (由 Elia J.Duh 編輯，Humana Press，2008) ;Felinski 等人，Current Eye Research，30:949-957(2005) ;Pascariu 等人，Journal of Histochemistry&Cytoch emistry，52(1):65_76 (2004) ;Bouchard 等人，Diabetologia，45:1017-1025 (2002); Arshi 等人，Laboratory Investigation，80 (8) : 1171-1184 (2000) ;Vinores 等人， Documenta Ophthalmologica,97:217-228 (1999) ；0omen 等人，European Journal of Clinical Investigation，29:1035-1040(1999) ;Vinores 等人，Pathol. Res. Pract.， 194:497-505(1998) ;Antonetti 等人，Diabetes，47:1953-1959(1998); Popov 等人，Acta Diabetol.，34:285-293(1997) ;Yamaji 等人，Circulation Research，72:947-957 (1993) ;Vinores 等人，Histochemical Journal，25:648_663(1993); Beals 等人，Microvascular Research，45:11-19 (1993) ;Caldwell 等人，Investigative Ophthalmol. Visual Sci.，33 (5):16101619 (1992)〇
[0017] 通過轉(zhuǎn)胞吞作用和細胞旁途徑，也會發(fā)生開窗內(nèi)皮中的內(nèi)皮運輸。此外，借由窗發(fā) 生內(nèi)皮運輸。開窗內(nèi)皮對于水和小親水溶解物具有顯著高的通透性，這是因為窗的存在。
[0018] 窗可能會或可能不會被膈所覆蓋。具有帶膈的窗（diaphragmed fenestrae)的內(nèi) 皮的位置包括內(nèi)分泌組織（例如胰島和腎上腺皮質(zhì)）、胃腸粘膜以及腎臟的腎小管周圍毛 細血管。具有帶膈的窗的開窗內(nèi)皮的血漿蛋白質(zhì)的通透性不會超過連續(xù)性內(nèi)皮的血漿蛋白 質(zhì)的通透性。
[0019] 具有不帶膈的窗的內(nèi)皮的位置包括腎的腎小球。血管小球的開窗內(nèi)皮被延伸到窗 內(nèi)的多糖包被覆蓋（形成所謂的"篩型塞子（seive plug)"）以及被更為松散關(guān)聯(lián)的糖蛋 白的內(nèi)皮細胞表面層覆蓋。功能的選擇通透性研究的數(shù)學(xué)分析已經(jīng)確定血管小球的內(nèi)皮細 胞多糖包被（包括存在于窗中的），以及與其關(guān)聯(lián)的表面層占據(jù)循環(huán)中血漿白蛋白的最多 95%的固位（retention) 〇
[0020] 已經(jīng)發(fā)現(xiàn)血管小球內(nèi)皮中的窗的損失與一些疾病中的蛋白尿相關(guān)，這些疾病包括 糖尿病性腎病、移植腎腎小球病、先兆子癇、糖尿病、腎功能衰竭、環(huán)孢霉素A腎病、血清性 腎炎以及Thy-1腎炎。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)肌動蛋白重排，以及尤其是張力絲（stress fiber)的解聚 對于窗的形成和保持是重要的。
[0021] 為了支持上述關(guān)于開窗內(nèi)皮的討論以及獲得額外的信息，參考Satchell 等人，Am. J.Physiol.Renal Physiol.，296:F947_F956(2009) ;Haraldsson 等人， Curr.Opin.Nephrol.Hypertens.，18:331-335 (2009) ;Ichimura 等人，J. Am. Soc. Nephrol., 19:1463-1471 (2008) ；Ballermann? Nephron Physiol., 106:19-25 (2007)； Toyoda 等人，Diabetes，56:2155-2160(2007) ;Stan， "Endothelial Structures Involved In Vascular Permeability，"，679-688 頁，Endothelial Biomedicine (編 輯，Aird，Cambridge University 出 片反，Cambridge，2007) ； Simionescu 和 Antohe， "Functional Ultrastructure of the Vascular Endothelium:Changes in Various Pathologies，"42-69 頁，The Vascular Endothelium I(編輯，Moncada 和 Higgs ，Springer-Verlag，Berlin，2006)〇
[0022] 通過轉(zhuǎn)胞吞作用，發(fā)生竇狀內(nèi)皮中的內(nèi)皮運輸，且通過細胞間間隙（內(nèi)皮之間的 狹縫）和細胞內(nèi)間隙（窗）。用肌動蛋白絲_斷裂藥物治療竇狀內(nèi)皮可以引起間隙數(shù)量 的顯著和快速的增加，表明為對肌動蛋白細胞骨架內(nèi)的內(nèi)皮的孔隙率的調(diào)節(jié)。已經(jīng)報道了 其它改變細胞骨架的藥物會改變窗的直徑。因此，窗-關(guān)聯(lián)的細胞骨架可能會控制在竇 狀內(nèi)皮中內(nèi)皮過濾的重要功能。在肝臟中，窗的減少（defenestration)(窗的損失）導(dǎo) 致內(nèi)皮通透性的降低，其與一些疾病和病癥的發(fā)病相關(guān)，這些疾病和病癥包括老化、動脈 粥樣硬化生成、動脈粥樣硬化、肝硬化、纖維化、肝衰竭、原發(fā)性肝癌和轉(zhuǎn)移性肝癌。為了 支持上述討論以及獲得更多的信息，參考Yokomori，Med. Mo 1. Morpho 1.，41:1-4(2008); Stan, "Endothelial Structures Involved In Vascular Permeability, " 679-688 頁， Endothelial Biomedicine (編輯，Aird, Cambridge University 出版，Cambridge, 2007)； DeLeve, "The Hepatic Sinusoidal Endothelial Cell, "1226-1238 頁，Endothelial Biomedicine (編輯，Aird, Cambridge University 出版，Cambridge, 2007) ;Pries 和 Kuebler，"Normal Endothelium, "1-40 頁，The Vascular Endothelium I(編輯， Moncada 和 Higgs，Springer-Verlag, Berlin, 2006) ;Simionescu 和 Antohe, "Functional Ultrastructure of the Vascular Endothelium:Changes in Various Pathologies, "42-69 頁，The Vascular Endothelium I(編輯，Moncada 和 Higgs, Springe r-Verlag，Berlin, 2006) ;Braet 和 Wisse，Comparative Hepatology, 1:1-17(2002) ;Kanai 等人，Anat.Rec.，244:175-181 (1996) ;Kempka 等人，Exp. Cell Res. ,176:38-48(1988); Kishimoto 等人，Am. J. Anat.，178:241-249 (1987)。
[0023] 糖尿病性視網(wǎng)膜病是最常見的糖尿病性眼疾病，并且是美國成年人失明的誘導(dǎo)原 因(National Eye Institute factsheet, 2009 年，www.nei.nih.gov/health/diabetic/retinopathy, asp)。在2000年，世界衛(wèi)生組織公布，在美國糖尿病的患病率據(jù)報道為 17, 702, 000例。該報告還指出，截止到2030年，該患病率預(yù)計將上升至30, 312, 000例 (Wild，2004)。糖尿病性視網(wǎng)膜病是在視網(wǎng)膜脈管系統(tǒng)中進行性和蓄積性的變化，其包括微 動脈瘤、視網(wǎng)膜內(nèi)出血和滲出物、血管迂曲、視網(wǎng)膜內(nèi)微血管異常（IRMA)和視網(wǎng)膜前新血 管化形成（Boyd,等人 Canadian Diabetes Association Clinical Practice Guidelines Expert Committee 2008, S134-139)。視網(wǎng)膜前新血管化形成可導(dǎo)致玻璃體出血、視網(wǎng) 膜脫離、纖維化和永久性視力喪失。糖尿病性視網(wǎng)膜病還包括糖尿病性黃斑水腫（DME)， 其為液體外滲，涉及并威脅中央視力。糖尿病中大多數(shù)視力喪失是由于DME(Moss,等 人，Ophthalmology 1998 ;105:998_1003)。血管通透性增加和水腫在這一過程的早期發(fā) 生。在視網(wǎng)膜組織永久性被破壞之前，有效地治療血管通透性和水腫可逆轉(zhuǎn)或減緩糖尿病 的這些并發(fā)癥（Gardner, et al. Current Diabetes Reports 2008;8:263-269 ;Sander，et al. Invest Ophthalmol Vis. Sci. 2007;48:3983-3987;和 Antonetti,等人 Diabetes 2006 ;55:2401-2411)。
[0024] 對于有臨床意義的糖尿病性黃斑水腫（CSME)的主要治療包括視網(wǎng)膜激光光凝 術(shù)和玻璃體內(nèi)雷珠單抗。對滲漏區(qū)域的視網(wǎng)膜激光光凝術(shù)可減少50%的中度視力喪失 (30%至15% )并減緩疾病進程。但是，激光治療受限于：在一些情況下的療效缺乏、程序 性不適、需要重復(fù)治療和有燒蝕視網(wǎng)膜損害的風(fēng)險，包括中心凹燒傷和傷疤，其可隨時間 增加（American Academy of Ophthalmology Preferred PracticePattern?,Diabetic Retinopathy, 2008 ;Maeshima, et al. Retina. 2004 ;24:507-511)。在 2012 年 7 月 30 日，玻 璃體內(nèi)雷珠單抗(LUCENTIS?)被批準(zhǔn)用于治療DME。這個注射到眼睛的抗血管內(nèi)皮生長 因子（VEGF)療法被證明是有效的，但出于以下原因無法給藥至一些患者：有免疫反應(yīng)、青 光眼、局部眼刺激的風(fēng)險或眼內(nèi)炎的發(fā)展，其可能造成完全視力喪失。此外，重復(fù)數(shù)月的過 程的高治療花費對于很多患者而言很難負擔(dān)。
[0025]除了常規(guī)措施，例如控制血糖、高血壓和血脂，目前尚無有效地口服藥物來治療糖 尿病性視網(wǎng)膜病，尤其是DME。對新型藥物療法存在顯著未滿足的臨床需求，所述新型藥物 療法可有效地治療糖尿病性視網(wǎng)膜病和DME (Ryan，等人Am. J. Health Syst Pharm. 2007; 64(17Suppl, 12):S15-21)〇

【發(fā)明內(nèi)容】

[0026] 本發(fā)明的一個實施方案涉及在有此需要的動物中抑制血管通透性過高的方法，包 括確定該動物體脂含量并根據(jù)該動物的體脂含量給藥該動物血管通透性過高抑制量的達 那唑化合物。本發(fā)明的另一實施方案涉及在有此需要的動物中抑制血管通透性過高的方 法，包括給藥該動物血管通透性過高抑制量的達那唑化合物，其中所述量對應(yīng)于該動物的 體脂含量。
[0027] 在一個方面，確定步驟包括計算該動物的體質(zhì)指數(shù)（BMI)。
[0028] 在另一方面，所述達那唑化合物可口服給藥。在另一方面，所述達那唑化合物可以 約0. 5mg/BMI單位/天至約1. Omg/BMI單位/天的量給藥。在另一方面，達那挫化合物可 每天給藥兩次。在另一方面，當(dāng)該動物的BMI小于26時，達那挫化合物的量為約2mg/天至 約15mg/天。還在另一方面，該動物的BMI小于26時，達那挫化合物的量為約5mg/天。在 另一方面，當(dāng)該動物的BMI為26至35時，則達那唑化合物的量為約2mg/天至約15mg/天。 在一個方面，當(dāng)該動物的BMI為26至35時，達那唑化合物的量為約10mg/天。仍在另一方 面，當(dāng)該動物的BMI大于35時，達那挫化合物的量為約5mg/天至約45mg/天。又在另一方 面，當(dāng)該動物的BMI大于35時，達那唑化合物的量為約15mg/天。
[0029] 在其他方面，所述動物由于存在由血管通透性過高介導(dǎo)的疾病或病癥，因此需要 達那唑化合物。達那唑化合物的給藥可在診斷出該疾病或病癥后立即開始。在各個方面， 該疾病或病癥可為糖尿病、動脈粥樣硬化、高血壓、急性肺損傷、急性呼吸窘迫綜合征、老 年性黃斑退化癥、腦部水腫、脈絡(luò)膜水腫、脈絡(luò)膜炎、冠狀動脈微血管病變、腦微血管病變、 Eals病、損傷引起的水腫、與高血壓有關(guān)的水腫、腎小球血管滲漏、失血性休克、歐文加斯綜 合征、缺血、黃斑水腫、腎炎、腎病、腎病性水腫、腎病綜合征、神經(jīng)病、水腫導(dǎo)致的器官衰竭、 先兆子癇、肺水腫、肺動脈高壓、腎衰竭、視網(wǎng)膜水腫、視網(wǎng)膜出血、視網(wǎng)膜靜脈閉塞、視網(wǎng)膜 炎、視網(wǎng)膜病變、無癥狀性腦梗死、系統(tǒng)性炎癥反應(yīng)綜合征、移植腎腎小球病、葡萄膜炎、血 管滲漏綜合征、玻璃體出血或Von Hippie Lindau病。在優(yōu)選的方面，該疾病或病癥可為黃 斑水腫、神經(jīng)病、視網(wǎng)膜病變或糖尿病的血管并發(fā)癥。
[0030] 血管并發(fā)癥可以是水腫、內(nèi)皮下間隙的低密度脂蛋白的蓄積、加速的動脈粥樣硬 化、腦血管壁加速老化、心肌水腫、心肌纖維化、舒張期功能障礙、糖尿病心肌病、糖尿病母 親的胎兒的肺發(fā)育滯后、一個或多個肺部生理參數(shù)的變化、感染易感性增加、腸系膜中的血 管增生、糖尿病性神經(jīng)病、糖尿病性黃斑水腫、糖尿病性腎病、糖尿病性視網(wǎng)膜病以及皮膚 發(fā)紅、變色、干燥和潰瘍。在優(yōu)選的方面，所述血管并發(fā)癥可以是水腫、糖尿病心肌病、糖尿 病性神經(jīng)病、糖尿病性黃斑水腫、糖尿病性視網(wǎng)膜病、非增殖性糖尿病性視網(wǎng)膜病或糖尿病 性腎病。
[0031] 在各個方面，由于該動物具有一個或多個由血管通透性過高介導(dǎo)的疾病或病癥的 早期跡象或傾向于發(fā)展成由血管通透性過高介導(dǎo)的疾病或病癥，則該動物需要達那唑化合 物。在一個方面，所述疾病或病癥是糖尿病、高血壓或動脈粥樣硬化。
[0032] 在一個方面，所述血管通透性過高可以是見于腦、隔膜、十二指腸肌肉組織、脂肪、 心臟、腎臟、大血管、肺、腸系膜、神經(jīng)、視網(wǎng)膜、骨骼肌、皮膚或睪丸或其周圍的連續(xù)內(nèi)皮的 血管通透性過高。在一個方面，所述連續(xù)內(nèi)皮可見于腦、心臟、肺、神經(jīng)或視網(wǎng)膜，或在其周 圍。
[0033] 仍在另一方面，所述血管通透性過高是見于腎、胰腺、腎上腺、內(nèi)分泌腺體或腸或 其周圍的開窗內(nèi)皮的血管滲透性過高。在一個方面，所述開窗內(nèi)皮見于腎臟中。
[0034] 本發(fā)明的達那唑化合物可為達那唑。
[0035] 本發(fā)明的達那唑化合物可為延時釋放制劑。在一個方面，所述延時釋放制劑包含 選自以下的成分：脂質(zhì)體和多糖。
[0036] 本發(fā)明的動物可以是人。
[0037] 本發(fā)明的另一實施方案涉及調(diào)節(jié)動物內(nèi)皮細胞的細胞骨架的方法，其包括確定該 動物的體重；并根據(jù)該動物的體重向其給藥血管通透性過高抑制量的達那唑化合物。在一 個方面，確定的步驟包括計算該動物的體質(zhì)指數(shù)（BMI)。在另一方面，該細胞骨架的調(diào)節(jié)包 括抑制肌動蛋白張力絲（stress fiber)的形成。仍在另一方面，所述細胞骨架的調(diào)節(jié)包括 導(dǎo)致、增加或延長皮質(zhì)肌動蛋白環(huán)的形成。又在另一方面，細胞骨架的調(diào)節(jié)包括RhoA的抑 制。
【附圖說明】
[0038] 圖1顯示了跨內(nèi)皮細胞單層的HRP通透性降低的變化百分比。達那唑的劑量響應(yīng) 對處理了 24小時的細胞的HRP通透性有影響。數(shù)據(jù)表示為平均值+SEM，其是通過3個單獨 的試驗，一式三份進行計算的。* = P值〈.05,與載體相比。
[0039] 圖2顯示了達那唑的TEER響應(yīng)：0. 1 ym的達那唑與載體相比的暫時響應(yīng)。TEER 測量了跨生長于transwell植入物上的內(nèi)皮細胞單層。越高的電阻說明了越高的屏障完整 性。
[0040] 圖3A-3H顯示了纖絲狀肌動蛋白皮質(zhì)重排和達那唑。視網(wǎng)膜內(nèi)皮細胞用連接鬼筆 毒環(huán)肽的羅丹明染色。處理后，將細胞固定3小時（凝血酶暴露僅15分鐘）。治療組：載體 對照（圖3A)，0? 1 y m達那唑（圖3B)，1 y m達那唑（圖3C)，10 y m達那唑（圖3D)，100ng/ ml TNF- a (圖 3E)，TNF- a +〇? 1 y m 達那唑（圖 3F)，0? lU/mL 凝血酶（圖 3G)和凝血酶 + y m 達那唑（圖3H)。