專利名稱：：癌癥診斷和成像的制作方法癌癥診斷和成像
背景技術(shù)：
：常規(guī)癌癥成像是不準(zhǔn)確和不精確的。典型地，患者具有注射至其循環(huán)系統(tǒng)中的標(biāo)記物或其他化學(xué)化合物，等待約I小時(shí)并然后利用正電子發(fā)射斷層攝影術(shù)(PET)成像。該I小時(shí)期限非常短，并且可能不能代表全部數(shù)量的癌細(xì)胞的一般活性。常規(guī)癌癥成像不準(zhǔn)確和不精確的原因部分在于成像標(biāo)記物的代謝攝取具有細(xì)胞循環(huán)特異性作用機(jī)制。更具體地，成像標(biāo)記物的攝取是靶細(xì)胞所在的周期部分的功能。在任何指定的一小時(shí)(標(biāo)記物施用和成像之間的典型等待時(shí)間)中，待成像癌細(xì)胞可以處于細(xì)胞周期的任一階段并可以以不同的速率和數(shù)量攝入和攝取所述標(biāo)記物。這種存在于遍及患者的所有癌細(xì)胞之間的差別可以導(dǎo)致令人誤解的結(jié)果和不正確的診斷。細(xì)胞周期是發(fā)生在細(xì)胞中的一系列事件，其引起細(xì)胞的分裂和復(fù)制。在真核細(xì)胞中，所述周期可以分為兩個(gè)時(shí)期，即間期和有絲分裂期。通過細(xì)胞周期的這兩個(gè)時(shí)期被稱為增殖。在間期過程中，細(xì)胞生長、積累有絲分裂所需的營養(yǎng)并復(fù)制其DNA。在有絲分裂期過程中，細(xì)胞自身分裂為兩個(gè)不同的子細(xì)胞。間期包括三個(gè)不同的時(shí)期，Gapl(G1)期、S期和Gap2(G2)期；而有絲分裂期包括兩個(gè)步驟。G1期包括細(xì)胞尺寸的增大，細(xì)胞生物合成活性的增加和合成后繼步驟中DNA復(fù)制所需的酶。S期包括DNA合成的開始和所有染色體的復(fù)制。G2期持續(xù)直至細(xì)胞進(jìn)入有絲分裂期并包括蛋白質(zhì)合成，包括生成用于有絲分裂劑的微管。有絲分裂期包括細(xì)胞染色體在兩個(gè)子細(xì)胞之間分配的步驟和原始細(xì)胞胞質(zhì)分開形成兩個(gè)不同子細(xì)胞的胞質(zhì)分裂步驟。細(xì)胞周期還包括靜止期，典型地稱為K。不同時(shí)期之間的界限，例如G1和S期之間的界限稱為細(xì)胞周期檢查點(diǎn)(checkpoint)。細(xì)胞周期的進(jìn)程可以受到抑制，由此特定的細(xì)胞在進(jìn)發(fā)至下一個(gè)時(shí)期前，在一個(gè)時(shí)刻，一個(gè)細(xì)胞檢查點(diǎn)處終止該周期。細(xì)胞周期檢查點(diǎn)位于細(xì)胞周期的不同時(shí)期之間，其中兩個(gè)檢查點(diǎn)處于匕和S期(G/S)之間的分界處和G2和M期之間的分界處。細(xì)胞周期抑制劑可以終止細(xì)胞轉(zhuǎn)入下一時(shí)期的進(jìn)程，例如細(xì)胞可以在h/S細(xì)胞周期檢查點(diǎn)受到抑制，這迫使該細(xì)胞保持在G1期，直至除去抑制劑。在個(gè)體中的任何特定癌細(xì)胞群體或腫瘤中，細(xì)胞周期的長度是可變的。該可變性歸因于Gtl的G1中經(jīng)歷的不同時(shí)期，而從S期開始至M期結(jié)束的時(shí)間長度相對(duì)恒定。利用傳統(tǒng)標(biāo)記物的成像依賴增加的標(biāo)記物的攝取，這歸因于癌細(xì)胞的增加的代謝活性。這種增加的攝取在癌細(xì)胞一旦處于S期而非其他細(xì)胞周期階段時(shí)最明顯。如果大部分待成像癌細(xì)胞在施用和成像之間的典型的一小時(shí)時(shí)間間隔過程中不處于S期，則成像結(jié)果可能不代表癌細(xì)胞的真實(shí)濃度和位置。需要一種處理，以在G1A細(xì)胞周期檢查點(diǎn)處停止臨床相關(guān)部分的細(xì)胞的細(xì)胞周期，從而使得成像標(biāo)記物的功效可以得到提高。發(fā)明概述本發(fā)明提供一種用于對(duì)哺乳動(dòng)物中的疾病或病癥進(jìn)行成像的方法，其包括以下步驟施用治療有效量的細(xì)胞周期抑制劑從而在G1和S期之間的細(xì)胞周期檢查點(diǎn)處有效終止真核細(xì)胞的增殖，停止施用所述細(xì)胞周期抑制劑一段時(shí)期，將標(biāo)記物施用于所述哺乳動(dòng)物并對(duì)所述哺乳動(dòng)物進(jìn)行成像。圖I是細(xì)胞周期的圖示。外環(huán)包括間期(I)和有絲分裂期(M)階段，其中有絲分裂期的持續(xù)時(shí)間相對(duì)于其他時(shí)期被夸大。內(nèi)環(huán)包括Gapl(G1)、Gap2(G2)和合成(S)期。GapO(G0)或靜止期未顯示。圖2是若干化學(xué)試劑抑制鈣流入的能力與相同化學(xué)試劑抑制細(xì)胞增殖的能力進(jìn)行比較的圖示。圖3是細(xì)胞周期和若干鈣通道阻斷劑對(duì)細(xì)胞周期進(jìn)程所具有的影響的圖示。圖4是測(cè)量米貝拉地爾(mibefradil)對(duì)細(xì)胞周期影響的數(shù)據(jù)的圖示。圖5是測(cè)量米貝拉地爾對(duì)細(xì)胞周期影響的數(shù)據(jù)的圖示。圖6是測(cè)量施用米貝拉地爾后成像標(biāo)記物攝取的數(shù)據(jù)的圖示。圖7是測(cè)量施用米貝拉地爾后成像標(biāo)記物攝取的數(shù)據(jù)的圖示。定義在描述和要求本發(fā)明中，根據(jù)下文所述的定義使用以下術(shù)語。如本文中所使用地，術(shù)語“藥用載體、賦形劑或稀釋劑”包括任何標(biāo)準(zhǔn)藥用載體，諸如磷酸鹽緩沖溶液、水、乳化劑諸如油/水或水/油乳化劑、和多種類型的潤濕劑。該術(shù)語還包括由美國聯(lián)邦政府管理機(jī)構(gòu)批準(zhǔn)的或美國藥典中列出的用于動(dòng)物包括人的任何試劑。術(shù)語“治療有效量”意指改善、減弱、減少或消除特定疾病或病癥或防止或延遲特定疾病或病癥發(fā)作的本發(fā)明的化合物的量。通過“哺乳動(dòng)物”，其意指所有哺乳動(dòng)物，包括，例如，靈長類動(dòng)物諸如人和猴。本文中包括的其他哺乳動(dòng)物實(shí)例是兔、狗、貓、牛、山羊、綿羊、小鼠、大鼠和馬。優(yōu)選地，哺乳動(dòng)物是女人或男人。表述“癌變前病癥(pre-cancerouscondition)”指這樣的生長,它不是惡性的但如果不治療可能變?yōu)閻盒缘??！鞍┳兦安“Y”也被本領(lǐng)域普通技術(shù)人員稱為“惡變前病癥”。本領(lǐng)域技術(shù)人員理解“T型鈣通道阻斷劑”也稱為“T型鈣通道抑制劑”。發(fā)明詳述用于對(duì)哺乳動(dòng)物中的疾病或病癥進(jìn)行成像的方法包括若干步驟。該方法可以為了許多原因而進(jìn)行，包括診斷可疑的疾病或病癥，篩選多種治療的效果和監(jiān)測(cè)治療進(jìn)程?；谟伤龇椒ㄉ傻膱D像，衛(wèi)生保健管理者可以更容易地確定診斷，治療效果和當(dāng)前治療進(jìn)程。所述方法可以用于成像多種疾病或病癥，包括不穩(wěn)定型心絞痛(unstableangina)、高血壓(hypertension)、癲癇(epilepsy)、神經(jīng)性疼痛(neuropathicpain)、癲癇小發(fā)作(petitmalseizure)、失神發(fā)作(absenceseizure)、年齡相關(guān)性黃斑變性(agerelatedmaculardegeneration)、癌癥和癌變前病癥。在其他實(shí)施方案中，該方法可以用于成像腫瘤和癌變前腫瘤。在用于對(duì)疾病或病癥進(jìn)行成像的方法中，首先以治療有效量施用細(xì)胞周期抑制劑從而在G1和S期(G/S)之間的細(xì)胞周期檢查點(diǎn)處終止真核細(xì)胞增殖。細(xì)胞周期的不同長度主要由G1期中經(jīng)歷的時(shí)間決定。3、62和11期的長度相對(duì)恒定。因此，處于群體中的任何特定細(xì)胞將處于G1期一段時(shí)間，然后該細(xì)胞進(jìn)入細(xì)胞周期的S期。為了終止細(xì)胞周期以使其不繼續(xù)通過細(xì)胞周期檢查點(diǎn)，可以施用細(xì)胞周期抑制劑。施用細(xì)胞周期抑制劑導(dǎo)致群體中非同步增殖的癌細(xì)胞在它們通過細(xì)胞周期時(shí)在G/S累積，這是因?yàn)樗鼈兝^續(xù)到達(dá)S期的能力受到細(xì)胞周期抑制劑的阻止。對(duì)于細(xì)胞通過細(xì)胞周期檢查點(diǎn)由G1期到達(dá)S期，該細(xì)胞需要胞外鈣流入從而觸發(fā)該進(jìn)程所必需的生化級(jí)聯(lián)。從胞外培養(yǎng)基中除去鈣阻斷各細(xì)胞的細(xì)胞周期轉(zhuǎn)換。因此，各細(xì)胞在存在胞外鈣時(shí)盡可能長地保持在G1期，但在無鈣條件下，在到達(dá)匕#時(shí)變?yōu)楸绘i定在原地，由此在G1A同步細(xì)胞。丐流入到細(xì)胞對(duì)于增殖和細(xì)胞周期的轉(zhuǎn)化是必需的。這進(jìn)一步記述在以下實(shí)施例I中。施用細(xì)胞周期抑制劑增加處于G1A的細(xì)胞的百分比。為了利用G/S處細(xì)胞的增力口，向哺乳動(dòng)物施用細(xì)胞周期抑制劑持續(xù)一段時(shí)間，然后進(jìn)行成像。這段時(shí)期可以是約I天至約10天(包括端點(diǎn))。在另一個(gè)實(shí)施方案中，這段時(shí)期可以是約5天至約7天(包括端點(diǎn))。盡管這些實(shí)施方案的上限是10天和7天，但是細(xì)胞周期抑制劑可以施用更長的時(shí)期。細(xì)胞周期抑制劑的劑量在哺乳動(dòng)物血漿中形成約IUM至約10iiM的濃度。細(xì)胞周期抑制劑可以經(jīng)由若干途徑，包括腸胃外、靜脈內(nèi)、肌肉、腹膜內(nèi)、鞘內(nèi)、栓齊U、經(jīng)皮、局部或口服施用?？诜┯眉?xì)胞周期抑制劑是最優(yōu)選的。口服施用可以作為一個(gè)劑量單位(典型地連同藥用載體的藥丸或膠囊)來施用。細(xì)胞周期抑制劑可以是若干細(xì)胞周期抑制劑中的一種或多種。例如，米貝拉地爾、依福地平(efonidipine)、乙琥胺(ethosuxamide)、TTL-1177(專利化合物，記述在參考文獻(xiàn)Gray,L.S.,Perez-Reyes,E.,Gomora,J.C.,Haverstick,D.M.,Shattock,M.，McLatchie,L.，Harper,J.，Brooks,G.，Heady,T.，和MacDonald,T.L.(2004)CellCalcium(細(xì)胞鈣)36,489-497中)和鎳。這些細(xì)胞周期抑制劑抑制胞外鈣流入至細(xì)胞內(nèi)，這是許多生命細(xì)胞過程的關(guān)鍵。這些過程所必需的鈣來自經(jīng)由鈣通道流入的胞外環(huán)境。鈣通道基于序列分析、生物物理特征和藥理學(xué)靈敏性而分組為若干家族。其中包括T型鈣通道家族。這些鈣通道在血壓、心律和細(xì)胞增殖的調(diào)節(jié)中有所涉及。研究還提示T型鈣通道可以在年齡相關(guān)性黃斑變性中起重要作用。至少一種藥理學(xué)試劑，米貝拉地爾，由于抑制T通道的功能，已經(jīng)被證明是臨床有效的。鈣進(jìn)入的抑制劑有效用于治療高血壓、心律失常(cardiacarrhythmia)和臨床有害性細(xì)胞增殖。T型鈣通道存在于細(xì)胞、細(xì)胞系和具體地，癌細(xì)胞系中。特別地，T型鈣通道的Cav3.2同種型已經(jīng)在日本女性中顯示出與正常的鄰近乳腺組織相比在乳腺癌組織中異常表達(dá)，如參考文獻(xiàn)Asaga,S.，Ueda,M.，Jinno,H.，Kikuchi,K.，Itano,0.，Ikeda,T.,和Kitajima,M.(2006)AnticancerRes(抗癌研究)26,35-42中討論的。細(xì)胞周期抑制劑在細(xì)胞周期檢查點(diǎn)處(包括G1A)有效地終止真核細(xì)胞的增殖，這在下文的實(shí)施例2-4中進(jìn)一步解釋。施用細(xì)胞周期抑制劑后，施用成像標(biāo)記物，其目標(biāo)是在細(xì)胞周期的S期中被攝取。首次施用細(xì)胞周期抑制劑和成像標(biāo)記物之間的時(shí)期容許細(xì)胞在細(xì)胞周期的G/S累積。該方法增加了處于S期的細(xì)胞的百分比，由此增加了進(jìn)入那些細(xì)胞的成像標(biāo)記物的攝取。施用細(xì)胞周期抑制劑后，存在一段不添加細(xì)胞周期抑制劑的時(shí)期。這段時(shí)期可以是約30分鐘至約72小時(shí)。這段時(shí)期容許在G/S累積的細(xì)胞進(jìn)入細(xì)胞周期的S期。約5%至約25%的細(xì)胞將在G1A累積。S期中細(xì)胞數(shù)量的增加使得隨后施用的成像標(biāo)記物的劑量更有效，原因在于大百分比的細(xì)胞將攝取每一劑中的成像標(biāo)記物。在不添加細(xì)胞周期抑制劑的時(shí)期之后，施用在S期將要被細(xì)胞攝取或吸收的成像標(biāo)記物。具體的成像標(biāo)記物將通過本領(lǐng)域中技術(shù)人員的臨床經(jīng)驗(yàn)來指定，不同疾病使用不同成像標(biāo)記物來成像。與單獨(dú)使用時(shí)的成像標(biāo)記物相比，相同劑量的成像標(biāo)記物更容易且更特異地被攝取。被攝取的成像標(biāo)記物的增加在下文中的實(shí)施例5中進(jìn)一步描述。癌細(xì)胞可以通過施用結(jié)合T型鈣通道或T型鈣通道輔助蛋白的物質(zhì)而定位于活體內(nèi)。然后藥物在體內(nèi)的位置可以通過使用從體外可檢測(cè)的物質(zhì)對(duì)其進(jìn)行標(biāo)記來確定。例如，放射性原子可以通過在體外進(jìn)行測(cè)量而在體內(nèi)定位，并且這樣的用于該目的的原子的實(shí)例包括99mTc、1251、1311、18F、11C、13N、150、3H、68Ga、67Ga和16F等。許多可能的成像標(biāo)記物的一些實(shí)例包括IlC甲硫氨酸、2-脫氧-2-(18F)氟-D-葡萄糖(FDG)、含氚FDG(3H_FDG)和氟化脫氧胸苷諸如[18F]-3'-氟-3'-脫氧-L-胸苷)。另外，例如，氘可以利用核磁共振(NMR)進(jìn)行類似的定位，并且利用光學(xué)技術(shù)定位多種染料、熒光以及非熒光。另外，一種或多種成像標(biāo)記物可以在對(duì)哺乳動(dòng)物進(jìn)行成像前，組合并施用于哺乳動(dòng)物。施用細(xì)胞周期抑制劑及隨后終止該施用容許更大百分比的細(xì)胞處于細(xì)胞周期的特定時(shí)期。在細(xì)胞周期的不同時(shí)期中，多種細(xì)胞代謝活動(dòng)進(jìn)行到不同程度。通過改變細(xì)胞周期特定時(shí)期中癌細(xì)胞的比例，改變的比例將展示該時(shí)期最典型的代謝活動(dòng)。成像標(biāo)記物的一個(gè)實(shí)例是FDG，它累積在這樣的細(xì)胞中，所述細(xì)胞為了其所處的特定代謝狀態(tài)而需要這種能量源。因此由體外對(duì)FDG進(jìn)行成像將定位通過改變處于最需要葡萄糖的細(xì)胞周期部分中的細(xì)胞的分?jǐn)?shù)而響應(yīng)T型鈣通道活性試劑的那些癌細(xì)胞。因?yàn)?，作為?shí)例，癌細(xì)胞與非癌細(xì)胞相比，優(yōu)先表達(dá)T型鈣通道功能，所以癌細(xì)胞會(huì)優(yōu)先受到T型鈣靶向試劑的影響并被檢測(cè)。成像標(biāo)記物施用于哺乳動(dòng)物后，對(duì)哺乳動(dòng)物成像。成像標(biāo)記物可以以任何合適的劑量，例如，約IOOmBq至約600mBq來施用?？梢岳萌魏魏线m的成像設(shè)備,例如能夠采集磁共振圖像(MRI)、正電子發(fā)射斷層照片(PET掃描)或計(jì)算機(jī)斷層照片(CT掃描)的設(shè)備來對(duì)哺乳動(dòng)物成像。通過合適的成像設(shè)備收集的圖像應(yīng)該比獲自未使用細(xì)胞周期抑制劑預(yù)處理的哺乳動(dòng)物的圖像更靈敏。施用細(xì)胞周期抑制劑后進(jìn)行的掃描將會(huì)更靈敏，因?yàn)榕c未施用細(xì)胞周期抑制劑的細(xì)胞的成像標(biāo)記物攝取相比，患病細(xì)胞具有更高的成像標(biāo)記物攝取。上述方法可以在每次對(duì)哺乳動(dòng)物進(jìn)行成像時(shí)隨意重復(fù)。例如，在哺乳動(dòng)物接受細(xì)胞周期抑制劑的施用，終止細(xì)胞周期抑制劑的施用，施用成像標(biāo)記物和成像后，哺乳動(dòng)物可以通過接受另一次細(xì)胞周期抑制劑的施用而再次開始該過程。根據(jù)有資質(zhì)的衛(wèi)生保健管理者的需要和建議，這種方法可以根據(jù)需要被重復(fù)許多次。上述方法不僅有效用于在治療或診斷過程中對(duì)疾病和病癥諸如癌癥進(jìn)行成像，上述方法還可以用于幫助篩選哪種類型的腫瘤更多和更少地受到T型鈣通道阻斷劑的影響以及哪種類型的腫瘤更多和更少地受到治療的影響。例如，基于靶向的腫瘤的類型，T型鈣通道阻斷劑在終止細(xì)胞周期方面具有不同的功效。例如，在響應(yīng)一定劑量的T型鈣通道阻斷劑時(shí)，胰腺癌腫瘤與胰腺腫瘤相比可以有不同的反應(yīng)。利用上述篩選方案，可以確定哪種類型的腫瘤更有效地響應(yīng)該方案以及哪種類型的腫瘤不是那么有效地響應(yīng)該方案。該信息可以在經(jīng)歷治療方案前對(duì)各個(gè)個(gè)體進(jìn)行確定并可以用于以最有效和有利的方式計(jì)劃治療方案。實(shí)施例I為了測(cè)量鈣流入抑制和增殖之間的對(duì)應(yīng)性，將若干化學(xué)試劑抑制鈣流入的能力對(duì)相同試劑抑制增殖的能力作圖，如以下圖2所示。這些試劑是維吉尼亞大學(xué)(UniversityofVirginia)合成的專利化學(xué)實(shí)體。獲得斜率為0.98且R2值為0.92的最小二乘相關(guān)性線。常規(guī)地，相關(guān)性不能用于推斷因果性，但是在該情形中，貝葉斯(Bayesian)方法得到保證，原因在于先驗(yàn)地鈣流入對(duì)于增殖是必需的，以致阻斷鈣進(jìn)入將相應(yīng)地阻斷增殖。斜率非常接近I的回歸線意味著變量中的基本所有變化都通過另一個(gè)中的變化得到說明，這意味著這些試劑對(duì)增殖不存在除了抑制鈣進(jìn)入以外的作用。實(shí)施例2利用流式細(xì)胞計(jì)數(shù)法和BUdR染色進(jìn)行細(xì)胞周期分析。在圖3中，“Con”表示未處理的對(duì)照細(xì)胞。全部其他細(xì)胞培養(yǎng)物均使用諾考達(dá)唑(nocodazole)來處理，諾考達(dá)唑在M期干擾微管聚合并阻斷細(xì)胞周期。如通過流式細(xì)胞計(jì)數(shù)法確定地，單獨(dú)使用諾考達(dá)唑處理AlO細(xì)胞阻斷通過M期的細(xì)胞周期轉(zhuǎn)換。因?yàn)锳lO細(xì)胞主要處于Gtl和G1之間的細(xì)胞周期檢查點(diǎn)(見圖3的“Con”)，所以評(píng)價(jià)藥理學(xué)試劑抑制脫離該時(shí)期的轉(zhuǎn)換的可能性不如確定在其他細(xì)胞周期檢查點(diǎn)處的阻斷那么簡單。因此，在添加諾考達(dá)唑前，使用T通道鈣通道阻斷劑米貝拉地爾(mib)、鎳(Ni)或TTL-1177(屬于受讓人陶制藥公司(TauTherapeutics)的專利化合物)將細(xì)胞培養(yǎng)物處理24小時(shí)。由于缺乏對(duì)T通道阻斷劑的作用，細(xì)胞將被諾考達(dá)唑鎖定在G2和M之間的細(xì)胞周期檢查點(diǎn)處，如單獨(dú)使用諾考達(dá)唑處理的細(xì)胞所發(fā)生的一樣。相反地，使用T型鈣通道阻斷劑的處理在Gc^PG1之間的細(xì)胞周期檢查點(diǎn)處捕獲細(xì)胞并防止否則由諾考達(dá)唑引起的在G2和M之間的細(xì)胞周期檢查點(diǎn)處的累積。這顯示T型鈣通道阻斷劑在h/S捕獲周期性變化的細(xì)胞。實(shí)施例3為了測(cè)量細(xì)胞周期抑制劑米貝拉地爾終止通過細(xì)胞周期進(jìn)程的功效，人肺癌細(xì)胞的細(xì)胞系A(chǔ)549和人前列腺癌細(xì)胞的細(xì)胞系使用10iiM米貝拉地爾來孵育48小時(shí)(M48H)。如圖4中所示，對(duì)于這兩個(gè)細(xì)胞系，米貝拉地爾通過不容許進(jìn)行到S期而增加處于細(xì)胞周期的Gl期中的細(xì)胞的比例。通過使用10uM米貝拉地爾孵育相同細(xì)胞系18小時(shí)，然后進(jìn)行12小時(shí)洗出及隨后使用米貝拉地爾進(jìn)行另外8小時(shí)孵育來收集進(jìn)一步數(shù)據(jù)(M18-12-18h)。這些結(jié)果也顯示與未使用米貝拉地爾孵育的對(duì)照細(xì)胞相比，更大比例的細(xì)胞處于Gl期中。實(shí)施例4為了測(cè)量米貝拉地爾對(duì)人前列腺癌細(xì)胞的細(xì)胞系PC3的細(xì)胞周期的作用，使用不同濃度的米貝拉地爾孵育PC3細(xì)胞不同的時(shí)間。使用5iiM的濃度或10iiM的濃度孵育PC3細(xì)胞24小時(shí)或48小時(shí)。如圖5中所示，米貝拉地爾濃度和接觸時(shí)間的增加增大處于Gl期的細(xì)胞的比例。實(shí)施例5確定在使用細(xì)胞周期抑制劑處理后攝取成像標(biāo)記物的功效。人結(jié)腸癌細(xì)胞(細(xì)胞系HT29)首先使用濃度為5uM(5uM-FDG-HT29)和10uM(10uM-FDG-HT29)的細(xì)胞周期抑制劑米貝拉地爾來孵育24小時(shí)。用米貝拉地爾孵育24小時(shí)后，將HT29細(xì)胞從與米貝拉地爾接觸中移開。從與米貝拉地爾接觸中移開60分鐘后，施用成像標(biāo)記物2-脫氧-2-(18F)氟-D-葡萄糖(下文中，“FDG”)。如圖6中所示，與未孵育的細(xì)胞相比，進(jìn)入到HT29細(xì)胞中的成像標(biāo)記物FDG的攝取在使用米貝拉地爾孵育的細(xì)胞中增加。與未使用米貝拉地爾孵育的細(xì)胞的攝取相比，使用IOiiM米貝拉地爾的濃度，F(xiàn)DG攝取的增加為約100%。還在人肺癌細(xì)胞的細(xì)胞系A(chǔ)549中確定成像標(biāo)記物的攝取。A549細(xì)胞用5iiM、10iiM和15iiM濃度的細(xì)胞周期抑制劑米貝拉地爾孵育24小時(shí)。使用米貝拉地爾孵育24小時(shí)后，A549細(xì)胞從與米貝拉地爾接觸中移開。從與米貝拉地爾接觸中移開30分鐘后,施用成像標(biāo)記物含氚FDG(下文中“3H-FDG”)。如圖7中所示，3H-FDG的攝取在5yM時(shí)最大，在所有濃度的米貝拉地爾孵育中均觀察到攝取的增加。盡管未顯示，但是使用IOyM米貝拉地爾孵育人前列腺癌細(xì)胞的PC3細(xì)胞系72小時(shí)使隨后引入的成像標(biāo)記物3H-FDG的攝取增加約60%。實(shí)施例6作為說明性實(shí)施例，用于對(duì)哺乳動(dòng)物中疾病或病癥進(jìn)行成像的方法被描述為其將在臨床背景中使用。開始，選擇哺乳動(dòng)物(在該實(shí)施方案中所述哺乳動(dòng)物是人)進(jìn)行成像。該選擇可以基于多種因素包括過去對(duì)疾病(在該實(shí)施方案中是前列腺癌)的治療，或作為對(duì)診斷的可能驗(yàn)證來作出。人最初接受治療有效量的細(xì)胞周期抑制劑的施用，在該實(shí)施方案中是遞送一定劑量米貝拉地爾的口服藥丸，在安排的成像時(shí)間前每天兩次，6天。施用6天的劑量后，停止施用米貝拉地爾。停止施用后，在進(jìn)行成像程序前存在一段時(shí)期。在該實(shí)施例中，在停止施用米貝拉地爾和施用成像標(biāo)記物(在該實(shí)施例中是FDG)之間經(jīng)過6小時(shí)。經(jīng)過6小時(shí)后，將足夠劑量的FDG注射到人中。然后使用PET掃描對(duì)該人進(jìn)行成像。由PET掃描產(chǎn)生的數(shù)據(jù)比獲自其中患者未接受細(xì)胞周期抑制劑的PET掃描的數(shù)據(jù)更精確和更準(zhǔn)確。權(quán)利要求1.用于對(duì)哺乳動(dòng)物中疾病或病癥進(jìn)行成像的方法，所述方法包括以下步驟(a)施用治療有效量的細(xì)胞周期抑制劑，從而在G1和S期之間的細(xì)胞周期檢查點(diǎn)處有效終止真核細(xì)胞的增殖；(b)停止施用所述細(xì)胞周期抑制劑達(dá)一段時(shí)期；(C)將成像標(biāo)記物施用于所述哺乳動(dòng)物；和(d)使用成像儀對(duì)所述哺乳動(dòng)物進(jìn)行成像。2.權(quán)利要求I的方法，其中所述疾病或病癥選自由以下組成的組不穩(wěn)定型心絞痛、高血壓、癲癇、神經(jīng)性疼痛、癲癇小發(fā)作、失神發(fā)作、年齡相關(guān)性黃斑變性、癌癥和癌變前病癥。3.權(quán)利要求2的方法，其中所述疾病或病癥是腫瘤。4.權(quán)利要求3的方法，其中所述腫瘤是癌性腫瘤或癌變前腫瘤。5.權(quán)利要求I的方法，其中所述哺乳動(dòng)物是人。6.權(quán)利要求I的方法，其中所述細(xì)胞周期抑制劑包括米貝拉地爾、依福地平、乙琥胺、TTL-1177、鎳及其組合。7.權(quán)利要求I的方法，其中所述成像標(biāo)記物包括IlC甲硫氨酸、2-脫氧-2-(18F)氟_D_匍萄糖、含氣FDG2-脫氧-2-(18F)氟-D-匍萄糖、氟化脫氧胸苷、氣及其組合。8.權(quán)利要求7的方法，其中所述氟化脫氧胸苷是[18F]-3'-氟-3'-脫氧-L-胸苷。9.權(quán)利要求I的方法，所述方法還包括通過重復(fù)步驟(a)-(d)—次或多次來延長治療的方法。10.權(quán)利要求9的方法，其中所述疾病或病癥是腫瘤。11.權(quán)利要求10的方法，其中所述腫瘤是癌性腫瘤或癌變前腫瘤。12.權(quán)利要求I的方法，其中在停止施用所述細(xì)胞周期抑制劑之前，所述細(xì)胞周期抑制劑施用約I-約10天，包括端點(diǎn)。13.權(quán)利要求12的方法，其中在停止施用所述細(xì)胞周期抑制劑之前，所述細(xì)胞周期抑制劑施用約5-約7天，包括端點(diǎn)。14.權(quán)利要求I的方法，其中在施用所述成像標(biāo)記物之前，停止施用所述細(xì)胞周期抑制劑達(dá)約30分鐘至約72小時(shí)。15.權(quán)利要求I的方法，其中所述成像儀選自由以下組成的組磁共振成像儀、正電子發(fā)射斷層攝影機(jī)和計(jì)算機(jī)斷層攝影機(jī)。16.權(quán)利要求I的方法，其中施用所述細(xì)胞周期抑制劑達(dá)到哺乳動(dòng)物血漿內(nèi)約IyM至約10μM的濃度。17.權(quán)利要求I的方法，其中所述用于成像的方法診斷哺乳動(dòng)物中的疾病或病癥。18.權(quán)利要求I的方法，其中所述用于成像的方法篩選在治療所述疾病或病癥中的治療的功效。全文摘要本發(fā)明提供一種用于對(duì)哺乳動(dòng)物中的疾病或病癥進(jìn)行成像的方法，其包括以下步驟施用治療有效量的細(xì)胞周期抑制劑從而在G1和S期之間的細(xì)胞周期檢查點(diǎn)處有效終止真核細(xì)胞的增殖，停止施用所述細(xì)胞周期抑制劑達(dá)一段時(shí)期，將標(biāo)記物施用于所述哺乳動(dòng)物并對(duì)所述哺乳動(dòng)物進(jìn)行成像。文檔編號(hào)A61B5/055GK102781316SQ201180011495公開日2012年11月14日申請(qǐng)日期2011年2月28日優(yōu)先權(quán)日2010年3月1日發(fā)明者勞埃德·S·格雷申請(qǐng)人:陶制藥有限責(zé)任公司