專利名稱：一種利膽片的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物的制備方法，尤其是一種中藥的制備方法。
背景技術(shù)：
利膽片是由大黃、金銀花、金錢草、木香、知母、大青葉、柴胡、白芍、黃芩、芒硝、茵陳11味藥組成，收載于《中華人民共和國藥典》2010版一部，能舒肝止痛，清熱利濕。用于肝膽濕熱所致的脅痛，癥見脅肋及胃部疼痛，按之痛劇，大便不通，小便短赤，身熱頭痛，嘔吐不食；膽道疾患見上述證候者。
現(xiàn)有技術(shù)中，尚未有利膽片在治療痛經(jīng)方面的報道?，F(xiàn)有技術(shù)中，利膽片的制備采用水煎煮的方法，工藝粗糙、落后，雜質(zhì)多，導(dǎo)致患者日用量過大，不方便服用，嚴(yán)重影響了本品在臨床上應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的問題是提供一種利膽片的制備方法，使其安全有效，方便服用。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提出了下述技術(shù)方案。取大黃58g，粉碎，加入0. 6L的65%乙醇，投入微波萃取裝置中進(jìn)行微波萃取，萃取功率300-600W，萃取2次，每次3-10分鐘，合并萃取液，減壓回收乙醇并濃縮，加到DlOl大孔吸附樹脂柱上，30%乙醇洗脫，收集4倍量柱體積洗脫液，然后用60%乙醇洗脫，收集4倍量柱體積洗脫液，與前述洗脫液合并，減壓回收乙醇，濃縮并干燥，得大黃提取物，備用；取金錢草58g、金銀花58g，粉碎，加入1. 2L的水，投入微波萃取裝置中進(jìn)行微波萃取，萃取功率500W，萃取2次，每次5分鐘，合并萃取液，濃縮，加到DlOl大孔吸附樹脂柱上，70%乙醇洗脫，收集5倍量柱體積洗脫液，減壓回收乙醇，通過強堿性苯乙烯型陰離子交換樹脂吸附， 以0. 5mol/L的NaOH溶液洗脫，收集洗脫，濾過，通過強酸性苯乙烯型陽離子交換樹脂，收集流出液，濾過，濃縮并干燥，得二金提取物，備用；取木香96. 5g、知母58g、大青葉58g、柴胡 58g、白芍58g、黃芩^g、茵陳58g共7味藥材，粉碎，加入到(X)2超臨界萃取器中，乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為2-6%，萃取壓力25-35MPa，溫度40-60°C，CO2 流量l-3ml/g生藥· min，萃取時間150-180min，得超臨界萃取物，干燥，備用；取芒硝19g， 加入40mL水，加熱溶解，濾過，取濾液，加入上述大黃提取物、二金提取物、超臨界萃取物混合，加入糊精，70%乙醇制顆粒，干燥，加入硬酯酸鎂，混勻，壓片，包薄膜衣，制成250片，每片重0. 23g。大黃微波萃取功率400W，每次萃取6分鐘。強堿性苯乙烯型陰離子交換樹脂選自201 X 7型，201 X 4型，D201型強堿性苯乙烯型陰離子交換樹脂中的一種。強酸性苯乙烯型陽離子交換樹脂選自001 X 7型、001 X 4型、DOOl型強酸性苯乙烯型陽離子交換樹脂中的一種。
CO2超臨界萃取夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為4%。CO2超臨界萃取的萃取壓力30MPa，溫度50°C，CO2流量2ml/g生藥· min，萃取時間 160min。采用上述技術(shù)方案制備的利膽片，其作為制備治療痛經(jīng)藥物的應(yīng)用?，F(xiàn)有技術(shù)中，利膽片每次需服用8片(相當(dāng)于5g藥材)，而采用本發(fā)明制備而成的利膽片每次僅需服用2片(相當(dāng)于5g藥材)，在具有相似藥理活性的前提下大大減少了服用量。此結(jié)論可以通過下述試驗證明。試驗一不同方法制備的利膽片中大黃素和大黃酚含量的比較。1、儀器及試藥
利膽片(超臨界法，以下簡稱L-LJ，下同)按實施例3方法制備。利膽片(傳統(tǒng)法L-CT，下同)，按《中國藥典》2010版一部方法制備，包薄膜衣。Agilent 1200高效液相色譜儀；METTLER AE240電子分析天平。大黃素、大黃酚對照品(中國藥品生物制品檢定所)。2、方法
色譜條件 Kromasi C18 色譜柱(4. 6mmX 200mm, 5 μ m)；甲醇-0. 1% 磷酸溶液(85:15) 流動相；流速1. OmL -min — \檢測波長254nm。精密量取對照品溶液、供試品溶液各10 μ L。溶液的制備取大黃素、大黃酚對照品適量，精密稱定，分別加無水乙醇-乙酸乙酯(2:1)混合溶液制成每Iml含大黃素10 μ g、大黃酚25 μ g的混合溶液，即得。分別取供品20片，除去包衣，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量(約相當(dāng)于5片的重量)，置具塞錐形瓶中，精密加入乙醇25ml，密塞，稱定重量，加熱回流1小時，放冷，再稱定重量，用乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液10mL，水浴蒸干，加30%乙醇-鹽酸(10 1)的混合溶液15mL，加熱回流1小時，立即冷卻，用三氯甲烷強力振搖提取4次，每次15mL，合并三氯甲烷液，蒸干，殘渣用無水乙醇-乙酸乙酯(2:1)混合溶液使溶解，移置25 mL量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。3、結(jié)果
試驗結(jié)果見表1，結(jié)果表明采用本發(fā)明制備的利膽片中大黃素+大黃酚的含量 (1. 72mg/片)是采用傳統(tǒng)法(0. 41mg/片)的4. 2倍。表1不同方法制備的利膽片中大黃素+大黃酚的含量
樣品含量(mg/片)L-LJ1. 72L-CT0. 41
試驗二不同方法制備的利膽片藥效學(xué)比較。1、試驗材料。1. 1 動物
昆明種小鼠；SD大鼠；新西蘭家兔。由上海斯萊克實驗動物有限公司提供。1. 2 藥品
利膽片(超臨界法，以下簡稱L-LJ)按實施例3方法制備。利膽片(傳統(tǒng)法，簡稱L-CT)，按《中國藥典》2010版一部方法制備，包薄膜衣。己烯雌酚注射液，廣州明興制藥廠生產(chǎn)；縮宮素注射液上海禾豐制藥有限公司ο
1. 3數(shù)據(jù)及統(tǒng)計
數(shù)據(jù)以mean士s表示，用SPSS11. 0軟件進(jìn)行分析。記量資料用單因素方差分析進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)顯著性分析，計數(shù)資料用卡方檢驗。2、方法及結(jié)果。2.1對大鼠膽汁分泌及膽紅素的影響
雄性Wistar大鼠，體重180-220克，隨機均分為5組空白對照組；L-CT組(給藥劑量0. 44g/kg，相當(dāng)于人臨床用量，即15g生藥/日);L-LJ低、中、高劑量組(給藥劑量分別是 0.06g/kg、0. llg/kg、0.22g/kg。其中中劑量組相當(dāng)于人臨床用量，即15g生藥/日)。禁食12小時(自由飲水)后，腹腔注射烏坦(lg/kg)麻醉，背位固定，于劍突下3cm開腹，分離膽總管，結(jié)扎近十二指腸端，在膽總管上作V形剪口，插入膽汁引流管見淡黃色膽汁流出后，固定引流管，關(guān)閉腹腔，穩(wěn)定0. 5小時后先收集0. 5小時膽汁為藥前對照。爾后各組分別經(jīng)十二指腸給予不同藥物，分別收集藥后30、60、120、180分鐘內(nèi)膽汁流量。收集的各動物各時段膽汁合并，測定膽紅素含量。結(jié)果(見表2)表明，與空白對照組相比，L-CT組，L-LJ低、中、高劑量組均能顯著促進(jìn)大鼠膽汁的分泌量(P<0. 05,0. 01)，增加膽紅素含量(p<0. 05,0. 01)。表明利膽素片具有明顯的利膽作用。F-CT組與F-LJ中劑量相比，膽汁分泌量、膽紅素含量無顯著性差異 (p>0. 05)，表明在相應(yīng)劑量下(相當(dāng)于人臨床用量，即15g生藥/日)兩者活性相當(dāng)。表2不同方法制備的利膽片對大鼠膽汁分泌及膽紅素的影響(n=6)
權(quán)利要求
1.一種利膽片的制備方法，由大黃58g、金銀花58g、金錢草58g、木香96. 5g、知母58g、 大青葉58g、柴胡58g、白芍58g、黃芩^g、芒硝19g、茵陳58g作為原料藥制成，其特征在于所述的方法由下列步驟組成取大黃，粉碎，加入0. 6L的65%乙醇，投入微波萃取裝置中進(jìn)行微波萃取，萃取功率300-600W，萃取2次，每次3-10分鐘，合并萃取液，減壓回收乙醇并濃縮，加到DlOl大孔吸附樹脂柱上，30%乙醇洗脫，收集4倍量柱體積洗脫液，然后用60% 乙醇洗脫，收集4倍量柱體積洗脫液，與前述洗脫液合并，減壓回收乙醇，濃縮并干燥，得大黃提取物，備用；取金錢草、金銀花，粉碎，加入1. 2L的水，投入微波萃取裝置中進(jìn)行微波萃取，萃取功率500W，萃取2次，每次5分鐘，合并萃取液，濃縮，加到DlOl大孔吸附樹脂柱上，70%乙醇洗脫，收集5倍量柱體積洗脫液，減壓回收乙醇，通過強堿性苯乙烯型陰離子交換樹脂吸附，以0. 5mol/L的NaOH溶液洗脫，收集洗脫，濾過，通過強酸性苯乙烯型陽離子交換樹脂，收集流出液，濾過，濃縮并干燥，得二金提取物，備用；取木香、知母、大青葉、柴胡、 白芍、黃芩、茵陳7味藥材，粉碎，加入到CO2超臨界萃取器中，乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為2-6%，萃取壓力25-35MPa，溫度40_60°C，CO2流量l_3ml/g生藥·π η，萃取時間150-180min，得超臨界萃取物，干燥，備用；取芒硝，加入40mL水，加熱溶解，濾過，取濾液，加入上述大黃提取物、二金提取物、超臨界萃取物混合，加入糊精，70%乙醇制顆粒，干燥，加入硬酯酸鎂，混勻，壓片，包薄膜衣，制成250片，每片重0. 23g。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種利膽片的制備方法，其特征在于所述大黃微波萃取功率 400W，每次萃取6分鐘。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種利膽片的制備方法，其特征在于所述強堿性苯乙烯型陰離子交換樹脂選自201X7型，201 X 4型，D201型強堿性苯乙烯型陰離子交換樹脂中的一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種利膽片的制備方法，其特征在于所述強酸性苯乙烯型陽離子交換樹脂選自001X7型、001X4型、DOOl型強酸性苯乙烯型陽離子交換樹脂中的一種。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種利膽片的制備方法，其特征在于所述(X)2超臨界萃取夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為4%。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種利膽片的制備方法，其特征在于所述(X)2超臨界萃取的萃取壓力30MPa，溫度50°C，CO2流量2ml/g生藥· min，萃取時間160min。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種利膽片的制備方法，由下列步驟組成取大黃，微波萃取，大孔吸附樹脂柱純化，得大黃提取物；取金錢草、金銀花，微波萃取，大孔吸附樹脂、離子交換樹脂純化，得二金提取物；取木香、知母、大青葉、柴胡、白芍、黃芩、茵陳7味藥材，粉碎，CO2超臨界萃取，得超臨界萃取物；取芒硝，加入水，加熱溶解，濾過，取濾液，加入上述大黃提取物、金錢草提取物、超臨界萃取物混合，加入糊精，70%乙醇制顆粒，干燥，壓片，包薄膜衣。采用本發(fā)明制備的利膽片便于服用。
文檔編號A61K9/28GK102397451SQ20111038135
公開日2012年4月4日 申請日期2011年11月26日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月26日
發(fā)明者張發(fā)成, 王峰, 王琳 申請人:蘇州派騰生物醫(yī)藥科技有限公司