專利名稱：納米脂質(zhì)立方晶制劑及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種納米脂質(zhì)立方晶制劑及其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
目前，眼科疾病的藥物在臨床使用中仍存在諸多問(wèn)題，以環(huán)孢素A(環(huán)孢素，環(huán)孢霉素A，Cyclosporine A，CysA)為例，環(huán)孢素A在眼部的臨床主要應(yīng)用于角膜移植排斥反應(yīng)，角結(jié)膜干燥癥，Behcet氏綜合征和激素依賴型皰性角膜結(jié)膜炎等。環(huán)孢素A全身給藥后，由于“血眼屏障”的存在藥物難于進(jìn)入眼內(nèi)口服5mg. Kg—1, day—1環(huán)孢素A后平均眼房水濃度僅^ng. mL—1，是血藥濃度的13%。此外，全身用藥不僅價(jià)格昂貴，而且可能引起腎臟、 肝臟毒性損害以及高血壓等并發(fā)癥，因此全身給藥在眼科的應(yīng)用受到限劑。眼局部給藥制劑是最易為患者接受、使用最便利的眼表給藥形式，即透過(guò)眼角膜給藥系統(tǒng)。目前有研究報(bào)道的環(huán)孢素A的眼表局部給藥制劑，主要可分為兩類(1)以油為介質(zhì)的分散體-油溶液和軟膏由于環(huán)孢素A在水中幾乎不溶，所以臨床通常將環(huán)孢素A溶于無(wú)菌橄欖油、蓖麻油或花生油中，但給藥時(shí)產(chǎn)生的油膩感使患者難以接受，有報(bào)道油溶液可致瞼結(jié)膜輕度充血；兔眼滴用后發(fā)生了眼周皮炎和脫毛現(xiàn)象，停藥后可恢復(fù)；而且有報(bào)道，由于油氧化值的升高，此類制劑的有效期不足4周。軟膏由于其造成視力模糊和不舒適感，所以只有獸用的市售制劑Optimmune 含0. 2%環(huán)孢素A。(2)以水為介質(zhì)的分散體-包合物、膠束、乳劑和微乳、脂質(zhì)體和納米粒等以水為介質(zhì)的分散體比油溶液更舒適，但是由于瞬目和淚水作用使藥物在角膜前停留時(shí)間很短，角膜的屏障作用和藥物理化性質(zhì)使藥物的跨角膜轉(zhuǎn)運(yùn)受到限制，只有小于 5%的藥物能夠進(jìn)入到眼睛的前房組織(如房水等)，而分配到后房組織(晶體、玻璃體等) 的藥物則更少。同時(shí)，由于環(huán)孢素A在水中幾乎不溶，因此，新型劑型旨在提高環(huán)孢素A的角膜粘附性和角膜穿透能力，主要有環(huán)糊精包合物和膠體分散體系。Mosteller等制備了環(huán)孢素A的α環(huán)糊精包合物溶液，將其溶解度提高了近100倍，但沒(méi)有延長(zhǎng)藥物角膜前停留。膠體分散體的研究主要報(bào)道有膠束、乳劑和微乳、脂質(zhì)體和納米粒等，能夠提高環(huán)孢素 A的角膜粘附性、角膜穿透能力，但多數(shù)存在無(wú)法高溫高壓或輻射滅菌，以及藥物泄漏、穩(wěn)定性差的問(wèn)題。立方晶(Cubosomes，CS)是兩親性脂質(zhì)和表面活性劑在水中自發(fā)形成的雙連續(xù)相的立方液晶的納米分散體系，屬于自穩(wěn)定體系。立方液晶在控釋藥物和蛋白質(zhì)方面具有很大的優(yōu)勢(shì)，這是因?yàn)槠洫?dú)特的脂水雙連續(xù)相和雙水通道結(jié)構(gòu)，能夠同時(shí)增溶親水、親脂及兩親性分子。近幾年已有關(guān)于立方晶載體用于靜脈給藥、口服給藥、口腔粘膜給藥和透皮給藥等給藥途徑的研究報(bào)道，但至今未見(jiàn)有關(guān)環(huán)孢素A等脂溶性藥物的納米脂質(zhì)立方晶眼部給藥制劑的公開(kāi)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種納米脂質(zhì)立方晶制劑，該制劑進(jìn)行眼部給藥時(shí)，能顯著提高藥物的角膜穿透能力，且穩(wěn)定性好，可以實(shí)現(xiàn)熱壓滅菌。此外，還需要提供一種上述納米脂質(zhì)立方晶制劑的制備方法和應(yīng)用。為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)在本發(fā)明的一個(gè)方面，提供了一種納米脂質(zhì)立方晶制劑，包含脂溶性藥物、兩親性脂質(zhì)、穩(wěn)定劑、水，其重量比如下
脂溶性藥物0. 01% 跳兩親性脂質(zhì)0. 05% 35%穩(wěn)定劑0.005% 4%水60% 99. 4%。所述脂溶性藥物選自環(huán)孢素A、氧氟沙星、紅霉素、氟比洛芬、阿托品、毛果蕓香堿、 阿替洛爾、托品酰胺、阿昔洛韋、腺嘌呤阿糖苷、無(wú)環(huán)鳥(niǎo)苷、匹馬菌素、制霉菌素中的一種或多種。所述兩親性脂質(zhì)選自甘油單油酸酯(M0)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂、植烷三醇中的一種或多種。所述穩(wěn)定劑選自泊洛沙姆407 (Poloxamer 407，F(xiàn)127)、聚乙烯醇(PVA)、短鏈多肽中的一種或多種。優(yōu)選的，所述脂溶性藥物為環(huán)孢素A，所述兩親性脂質(zhì)為甘油單油酸酯，所述穩(wěn)定劑為泊洛沙姆407。優(yōu)選的，還包含重量比為0% 的抑菌劑，該抑菌劑選自苯扎氯銨、羥苯酯類、 三氯叔丁醇、醋酸氯己定中的一種或多種。優(yōu)選的，還包含重量比為0% 10%的酸堿調(diào)節(jié)劑，該酸堿調(diào)節(jié)劑選自鹽酸、氫氧化鈉、磷酸鹽、硼酸、硼酸鹽中的一種或多種。在納米脂質(zhì)立方晶制劑中添加滴眼液輔料酸堿調(diào)節(jié)劑，使該立方晶制劑的PH值達(dá)到眼部耐受的pH5 9。優(yōu)選的，還包含重量比為0% 10%的粘度調(diào)節(jié)劑，該粘度調(diào)節(jié)劑選自透明質(zhì)酸、 卡波姆、泊洛沙姆、聚丙烯酸中的一種或多種。在納米脂質(zhì)立方晶制劑中添加滴眼液輔料粘度調(diào)節(jié)劑，使該立方晶制劑的粘度達(dá)到4 5mPa. s。優(yōu)選的，還包含其他常用的滴眼液輔料，如滲透壓調(diào)節(jié)劑、表面活性劑、助懸劑、金屬離子絡(luò)合劑等。在本發(fā)明的另一方面，還提供了一種上述納米脂質(zhì)立方晶制劑的制備方法，包括以下步驟將穩(wěn)定劑加入兩親性脂質(zhì)至熔化后形成油相，再加入適量脂溶性藥物并使其溶解于油相中；待脂溶性藥物溶解后，加入預(yù)熱的水相，混勻，再經(jīng)均質(zhì)機(jī)均質(zhì)后，即得納米脂質(zhì)立方晶制劑。在本發(fā)明的另一方面，還提供了一種上述納米脂質(zhì)立方晶制劑在制備治療眼科疾病的眼部用藥制劑中的應(yīng)用。本發(fā)明的納米脂質(zhì)立方晶制劑，具有以下有益效果1.與納米粒和脂質(zhì)體相比，該制劑為熱力學(xué)穩(wěn)定體系，60°C加速實(shí)驗(yàn)也證明了該納米脂質(zhì)立方晶制劑具有很好的穩(wěn)定性，可以實(shí)現(xiàn)熱壓滅菌。2.體內(nèi)藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)證明環(huán)孢素A脂質(zhì)立方晶制劑的藥效優(yōu)于橄欖油溶液；體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)實(shí)驗(yàn)證明其能顯著提高藥物的角膜穿透量。3.對(duì)于脂溶性藥物有較高的包封率，通過(guò)凝膠微柱離心法測(cè)定環(huán)孢素A的包封率大于90%，既解決了脂溶性藥物在水中溶解度低的問(wèn)題，又制備出以水為分散介質(zhì)的滴眼液，相比于油溶液，增加了病患使用的眼部舒適度。4.原料無(wú)刺激、生物相容性好，家兔角膜的刺激實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示環(huán)孢素A納米脂質(zhì)立方晶制劑基本無(wú)刺激性。5.現(xiàn)有大型工業(yè)儀器，如高速剪切勻漿(乳化)儀器和高壓均質(zhì)機(jī)，可以實(shí)現(xiàn)該制劑的工業(yè)化生產(chǎn)。


下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施方式
對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說(shuō)明。圖1是本發(fā)明實(shí)施例7空白對(duì)照組大鼠在角膜移植術(shù)后第二天(A)、第十天(B)的眼部裂隙燈照片圖；圖2是本發(fā)明實(shí)施例7環(huán)孢素A橄欖油組大鼠在角膜移植術(shù)后第二天(A)、第十天 (B)的眼部裂隙燈照片圖；圖3是本發(fā)明實(shí)施例7環(huán)孢素A立方晶組大鼠在角膜移植術(shù)后第二天(A)、第十天 (B)的眼部裂隙燈照片圖；圖4是本發(fā)明實(shí)施例8家兔眼部給予環(huán)孢素A橄欖油和環(huán)孢素A納米脂質(zhì)立方晶后不同時(shí)間點(diǎn)房水中的藥物濃度曲線圖。
具體實(shí)施例方式為克服目前眼用制劑藥物角膜穿透能力低，且穩(wěn)定性差，難以實(shí)現(xiàn)高溫高壓滅菌等缺點(diǎn)，經(jīng)歷多次反復(fù)實(shí)驗(yàn)后，終于研制出本發(fā)明納米脂質(zhì)立方晶制劑，包含脂溶性藥物、 兩親性脂質(zhì)、穩(wěn)定劑、水，其重量比為脂溶性藥物0. 01 % 2 %，兩親性脂質(zhì)0. 05 % 35 %，穩(wěn)定劑0. 005 % 4 %，水60 % 99. 4 %。實(shí)驗(yàn)證明本發(fā)明納米脂質(zhì)立方晶制劑能顯著增加藥物的角膜穿透能力，且穩(wěn)定性好，藥效試驗(yàn)和體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)都顯示，以環(huán)孢素A為模型藥物制備的環(huán)孢素A納米脂質(zhì)立方晶的效果都明顯優(yōu)于對(duì)照環(huán)孢素A橄欖油溶液，而且降低了眼部刺激性。實(shí)施例1環(huán)孢素A納米脂質(zhì)立方晶制劑的制備制備環(huán)孢素A納米脂質(zhì)立方晶制劑，成品含1%環(huán)孢素4(1/們。制備方法將Ig泊洛沙姆407加入9g甘油單油酸酯中40°C熔化后形成油相，將 2g環(huán)孢素A加入油相中，繼續(xù)40°C加熱并振動(dòng)促進(jìn)藥物溶解；待藥物完全溶解后，加入預(yù)熱 40°C的188g水中，迅速攪拌混勻，先IOOOOrpm高速剪切均質(zhì)(FJ 200-S數(shù)顯高速分散均質(zhì)機(jī),上海標(biāo)本模型廠)lmin，再用200bar高壓均質(zhì)(EM-C3高壓均質(zhì)機(jī)，Avestin Canada) 3個(gè)循環(huán)。再加入適量的抑菌劑、酸堿調(diào)節(jié)劑、粘度調(diào)節(jié)劑、滲透壓調(diào)節(jié)劑等滴眼液常用輔料， 即得到納米脂質(zhì)立方晶制劑。平均粒徑193. 5nm，多分散系數(shù)PDI值0.199。(粒徑測(cè)定方法各樣品取100 μ L，加蒸餾水900 μ L稀釋，漩渦振蕩混勻后，采用馬爾文^^狀^吐Nano S型納米粒度分析儀測(cè)定粒徑分布和粒子多分散系數(shù)PDI。)實(shí)施例2環(huán)孢素A納米脂質(zhì)立方晶制劑的制備制備環(huán)孢素A納米脂質(zhì)立方晶制劑，成品含0. 01 %環(huán)孢素A (W/W)。制備方法將0. 05g聚乙烯醇加入0. 5g甘油單油酸酯中40°C熔化后形成油相，將 0. Ig環(huán)孢素A加入油相中，繼續(xù)40°C加熱并振動(dòng)促進(jìn)藥物溶解；待藥物完全溶解后，加入預(yù)熱40°C的200g水中，迅速攪拌混勻，先IOOOOrpm高速剪切均質(zhì)(FJ 200-S數(shù)顯高速分散均質(zhì)機(jī)，上海標(biāo)本模型廠)lmin，再用200bar高壓均質(zhì)(EM-C3高壓均質(zhì)機(jī)，Avestin Canada) 3 個(gè)循環(huán)，再加水至lOOOg，混勻。再加入適量的抑菌劑、酸堿調(diào)節(jié)劑、粘度調(diào)節(jié)劑、滲透壓調(diào)節(jié)劑等滴眼液常用輔料，即得到納米脂質(zhì)立方晶制劑。平均粒徑209. 3nm,多分散系數(shù)PDI值 0.185。實(shí)施例3環(huán)孢素A納米脂質(zhì)立方晶制劑的制備制備環(huán)孢素A納米脂質(zhì)立方晶制劑，成品含2%環(huán)孢素A(W/W)。制備方法將7g泊洛沙姆407加入70g甘油單油酸酯中40°C熔化后形成油相，將 4g環(huán)孢素A加入油相中，繼續(xù)40°C加熱并振動(dòng)促進(jìn)藥物溶解；待藥物完全溶解后，加入預(yù)熱 40°C的119g水中，迅速攪拌混勻，IOOOOrpm高速剪切均質(zhì)5min。再加入適量的抑菌劑、酸堿調(diào)節(jié)劑、粘度調(diào)節(jié)劑、滲透壓調(diào)節(jié)劑等滴眼液常用輔料，即得到納米脂質(zhì)立方晶制劑。實(shí)施例4氧氟沙星納米脂質(zhì)立方晶制劑的制備制備氧氟沙星納米脂質(zhì)立方晶制劑，成品含0. 3%氧氟沙星(W/W)。制備處方將Ig泊洛沙姆407加入IOg植烷三醇中40°C熔化后形成油相，將0. 6g 氧氟沙星加入油相中，繼續(xù)40°C加熱并振動(dòng)促進(jìn)藥物溶解；待藥物完全溶解后，加入預(yù)熱 40°C的188g水中，迅速攪拌混勻，先IOOOOrpm高速剪切均質(zhì)lmin，再用高壓均質(zhì)200bar 3 個(gè)循環(huán)。再加入適量的抑菌劑、酸堿調(diào)節(jié)劑、粘度調(diào)節(jié)劑、滲透壓調(diào)節(jié)劑等滴眼液常用輔料。 平均粒徑177. 8nm,多分散系數(shù)PDI值0. 157。實(shí)施例5氟比洛芬納米脂質(zhì)立方晶制劑的制備制備氟比洛芬納米脂質(zhì)立方晶制劑，成品含0. 2%氟比洛芬m)。制備處方將Ig泊洛沙姆407加入9g磷脂酰乙醇胺中40°C熔化后形成油相， 將0. 4g氟比洛芬加入油相中，繼續(xù)40°C加熱并振動(dòng)促進(jìn)藥物溶解；待藥物完全溶解后，加入預(yù)熱40°C的190g水中，迅速攪拌混勻，先IOOOOrpm高速剪切均質(zhì)lmin，再用高壓均質(zhì) 200bar 3個(gè)循環(huán)。再加入適量的抑菌劑、酸堿調(diào)節(jié)劑、粘度調(diào)節(jié)劑、滲透壓調(diào)節(jié)劑等滴眼液常用輔料。平均粒徑158. 4nm,多分散系數(shù)PDI值0. 203。實(shí)施例6環(huán)孢素A納米脂質(zhì)立方晶制劑的眼部刺激性實(shí)驗(yàn)(1)刺激性實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)選擇眼睛健康的家兔，每組4只，一側(cè)眼給予對(duì)照制劑BSS平衡鹽眼灌注液 (ALCONCANADA INC.)，另一側(cè)給予受試制劑，分別為環(huán)孢素A橄欖油滴眼液和環(huán)孢素A納米脂質(zhì)立方晶滴眼液。采用結(jié)膜囊給藥的方法，給藥體積50 μ L。(2)刺激性實(shí)驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)
6
記錄給藥后l、3、6、24、48、72h的眼局部反應(yīng)和裂隙燈觀察結(jié)果。按照Draize眼刺激反應(yīng)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，將每只受試動(dòng)物的眼角膜、虹膜和結(jié)膜的刺激反應(yīng)的分值相加，得到一只受試動(dòng)物眼刺激反應(yīng)的總積分。把每只受試動(dòng)物的刺激反應(yīng)積分的總和除以動(dòng)物數(shù)就是制劑對(duì)眼刺激性的最后平均值，并以此判斷其刺激程度。結(jié)果顯示(見(jiàn)表1)環(huán)孢素A橄欖油滴眼液有一定刺激性，家兔閉眼不愿睜開(kāi)，在他以內(nèi)結(jié)膜有輕度充血，有一只虹膜輕微充血，24h后基本無(wú)刺激反應(yīng)。環(huán)孢素A納米脂質(zhì)立方晶組基本沒(méi)有刺激反應(yīng)，只有個(gè)別短暫的結(jié)膜充血，Ih左右即恢復(fù)。表1 Draize眼刺激反應(yīng)評(píng)分結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種納米脂質(zhì)立方晶制劑，其特征在于，包含脂溶性藥物、兩親性脂質(zhì)、穩(wěn)定劑、水， 其重量比如下脂溶性藥物 0.01% 觀兩親性脂質(zhì) 0. 05% 35% 穩(wěn)定劑0. 005% 4%/K60% 99. 4%。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的納米脂質(zhì)立方晶制劑，其特征在于，所述脂溶性藥物選自環(huán)孢素A、氧氟沙星、紅霉素、氟比洛芬、阿托品、毛果蕓香堿、阿替洛爾、托品酰胺、阿昔洛韋、 腺嘌呤阿糖苷、無(wú)環(huán)鳥(niǎo)苷、匹馬菌素、制霉菌素中的一種或多種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的納米脂質(zhì)立方晶制劑，其特征在于，所述兩親性脂質(zhì)選自甘油單油酸酯、磷脂酰乙醇胺、磷脂、植烷三醇中的一種或多種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的納米脂質(zhì)立方晶制劑，其特征在于，所述穩(wěn)定劑選自泊洛沙姆407、聚乙烯醇、短鏈多肽中的一種或多種。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的納米脂質(zhì)立方晶制劑，其特征在于，還包含重量比為0% 的抑菌劑，該抑菌劑選自苯扎氯銨、羥苯酯類、三氯叔丁醇、醋酸氯己定中的一種或多種。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或5所述的納米脂質(zhì)立方晶制劑，其特征在于，還包含重量比為 0% 10%的酸堿調(diào)節(jié)劑，該酸堿調(diào)節(jié)劑選自鹽酸、氫氧化鈉、磷酸鹽、硼酸、硼酸鹽中的一種或多種。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或5所述的納米脂質(zhì)立方晶制劑，其特征在于，還包含重量比為 0% 10%的粘度調(diào)節(jié)劑，該粘度調(diào)節(jié)劑選自透明質(zhì)酸、卡波姆、泊洛沙姆、聚丙烯酸中的一種或多種。
8.根據(jù)權(quán)利要求2至4中任一項(xiàng)所述的納米脂質(zhì)立方晶制劑，其特征在于，所述脂溶性藥物為環(huán)孢素A，所述兩親性脂質(zhì)為甘油單油酸酯，所述穩(wěn)定劑為泊洛沙姆407。
9.權(quán)利要求1所述納米脂質(zhì)立方晶制劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟將穩(wěn)定劑加入兩親性脂質(zhì)至熔化后形成油相，再加入適量脂溶性藥物并使其溶解于油相中；待脂溶性藥物溶解后，加入預(yù)熱的水相，混勻，再經(jīng)均質(zhì)機(jī)均質(zhì)后，即得納米脂質(zhì)立方晶制劑。
10.權(quán)利要求1所述的納米脂質(zhì)立方晶制劑在制備治療眼科疾病的眼部用藥制劑中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種納米脂質(zhì)立方晶制劑，包含脂溶性藥物、兩親性脂質(zhì)、穩(wěn)定劑、水。本發(fā)明還公開(kāi)了納米脂質(zhì)立方晶制劑的制備方法以及該納米脂質(zhì)立方晶在制備治療眼科疾病的眼部用藥制劑中的應(yīng)用。本發(fā)明的納米脂質(zhì)立方晶制劑，能顯著提高藥物的角膜穿透能力，穩(wěn)定性優(yōu)于脂質(zhì)體和納米粒，可實(shí)現(xiàn)高壓高溫滅菌，具有良好的藥物釋放特性，擁有廣闊的臨床應(yīng)用和市場(chǎng)前景。
文檔編號(hào)A61K45/08GK102274175SQ20111018333
公開(kāi)日2011年12月14日 申請(qǐng)日期2011年7月1日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月1日
發(fā)明者王慶平, 鄒豪, 鐘延強(qiáng), 陳建明, 陳琰, 高申, 魯瑩 申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)