專利名稱：注射用聚乳酸-羥基乙酸共聚物顆粒支架及制造方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及注射用聚乳酸-羥基乙酸共聚物顆粒支架及制造方法。
背景技術(shù)：
由于創(chuàng)傷、先天性疾病、癌癥、感染、炎癥等原因所造成的組織與器官的缺損日漸增多。目前，臨床上常采用自體、同種異體或異種組織器官進(jìn)行移植修復(fù)，但仍因供源不足、 造成供體受損及免疫排斥等問題而難以滿足臨床需求。傳統(tǒng)的修復(fù)方法是自體組織移植術(shù)，雖然可以取得滿意療效，但它是以犧牲自體健康組織為代價(jià)的辦法，會導(dǎo)致很多并發(fā)癥及附加損傷；人體器官功能衰竭，采用藥物治療、暫時(shí)性替代療法可挽救部分病人生命，但供體器官來源極為有限，因免疫排斥反應(yīng)需長期使用免疫抑制劑，由此而帶來的并發(fā)癥有時(shí)是致命的。近十幾年來，組織工程學(xué)的興起和發(fā)展為解決這一難題提供了新思路和手段。 組織工程學(xué)是應(yīng)用生物學(xué)和工程學(xué)的原理，在正確認(rèn)知哺乳動物正常及病理兩種狀態(tài)下組織結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系的基礎(chǔ)之上，研究開發(fā)能夠修復(fù)、維持或改善損傷組織功能的生物替代物的一門科學(xué)。隨著生物材料和組織工程學(xué)的發(fā)展，組織工程學(xué)產(chǎn)品逐漸應(yīng)用于臨床疾病的診斷及治療，特別是應(yīng)用于人體部分臟器的修復(fù)和再生，生物降解性聚合物在人體內(nèi)上皮組織等多種組織及細(xì)胞的附著及生長方面較容易，而且在細(xì)胞或組織生長后被生物降解，具有可被人體吸收或者排除特性的材料，在組織工程學(xué)上應(yīng)用廣泛。為了使組織更有效率的成長，生物降解性聚合物的基質(zhì)應(yīng)對組織具有吸附力的同時(shí)要促進(jìn)細(xì)胞的成長，維持組織的功能，而且要具備生物相容性和生物降解性，也要根據(jù)不同用途及粒子大小途的性質(zhì)，通過細(xì)胞培養(yǎng)可以廣泛地在人工組織及皮膚美容等相關(guān)領(lǐng)域里應(yīng)用。依據(jù)上述制造方法制作出的降解生物支架顆粒除了在皮膚再生用途以外還可以用于多種細(xì)胞組織恢復(fù)所需的組織上應(yīng)用?，F(xiàn)在作為人工合成的生物降解性聚合物，聚乳酸(Poly Lactic Acid :PLA)和羥基乙酸(Poly Glycolic Acid :PGA)的聚合體使用甚廣，它們的生物降解原理基于其水解作用。聚乳酸現(xiàn)在用在斷骨的固定板和制作生物降解的螺絲上，而羥基乙酸作為吸水性縫合線而使用。以上聚乳酸和聚羥基乙酸，各自的單體聚合物生物降解時(shí)間，根據(jù)分子量有所不同，但是通常在1年以上，它們的共聚體PLGA[Poly(D，L-Lactide-Co-Glycolide)]根據(jù)平均分子量的變化，在生物體內(nèi)降解的時(shí)間為數(shù)周至數(shù)十周?，F(xiàn)在，利用組織工程的組織再生用產(chǎn)品的要求是1、植入時(shí)無超敏反應(yīng)，2、與人體內(nèi)的周邊組織具有親和力，3、擁有生物粘合性表面且沒有排斥現(xiàn)象。要解決以上問題，我們要做到調(diào)節(jié)材料的吸濕度-親水性/疏水性，表面糙性，并且表面電荷和植入時(shí)周圍不能有流動現(xiàn)象。目前常用的材料由于材料本身特性在人體內(nèi)容易誘發(fā)血栓栓塞性疾病，而且又由于其不具有生物降解性，所以在生物體內(nèi)有存積性問題?，F(xiàn)在的合成聚合物及其他聚合物構(gòu)成的組織再生物質(zhì)在皮膚注入時(shí)，作用于人體內(nèi)的細(xì)胞和組織的附著成長的空間有限制，雖然給細(xì)胞提供了一定的生長空間，但不便于細(xì)胞換氧、提供營養(yǎng)物質(zhì)及排出廢物，同時(shí)注入人體后材料的可應(yīng)用性能較差，已經(jīng)無法適用于需要固定形狀的整形部位，有在注入部位流動的現(xiàn)象，這也是必須要解決的問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供注射用聚乳酸_羥基乙酸共聚物顆粒支架及制造方法，在植入人體時(shí)無超敏反應(yīng)，同時(shí)與人體內(nèi)的周邊組織具有親和力，擁有生物粘合性表面且沒有排斥現(xiàn)象。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的注射用聚乳酸-羥基乙酸共聚物顆粒支架，它主要由以下重量比的組分組成基質(zhì)0. 8 1，溫度感應(yīng)性輔助劑3，其中，所述的基質(zhì)為聚乳酸_羥基乙酸組成的生物降解性聚合物PLGA，溫度感應(yīng)性輔助劑包括以下重量比的組分組成聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物1. 95 2. 5，無毒性的降解性海藻酸鈉為主的生物相容性高分子聚合物0. 48 l，Ca2+離子0. 02 0. 05，聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物由聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率為70%的聚合物和聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率為80 %的聚合物組成。所述的注射用聚乳酸-羥基乙酸共聚物顆粒支架的平均分子量為90000 110000,平均顆粒尺寸為50 μ m 90 μ m，具有吸濕性，而且具有植入體內(nèi)時(shí)輔助劑會變成凝膠狀態(tài)的相變特征。所述的聚乳酸_羥基乙酸生物降解性聚合物中聚乳酸和羥基乙酸的重量百分比 75 25。注射用聚乳酸_羥基乙酸共聚物顆粒支架的制造方法，它包括以下步驟(1)篩選生物降解支架顆粒，包括a、把生物降解性聚合物溶解在有機(jī)溶劑和NaCl混合液里形成有機(jī)溶液，形成高濃度溶液，有機(jī)溶劑、PLGA, NaCL各占份額為2 5 0. 5 2 10 15，NaCl顆粒尺寸為80 lOOum，直至PLGA充分溶入到NaCl的間隙里，然后在20士5°C的環(huán)境下加以3 7Mpa, 10 40min的壓力，直至有機(jī)溶劑蒸發(fā)以保證成型時(shí)維持所定形狀，得到成型片狀產(chǎn)品 ；b、將成型片狀產(chǎn)品放入真空干燥箱中，在真空干燥箱里除去把片狀產(chǎn)品表面上留存的殘留有機(jī)溶劑；C、進(jìn)行脫鹽處理，用超純的蒸餾水經(jīng)過3 4次反復(fù)地進(jìn)行不少于24小時(shí)的脫鹽處理，使得殘存的Cl-濃度接近零，然后在-50 80°C的環(huán)境下進(jìn)行10 15小時(shí)的冷凍，再移到_40°C以下的冷凍干燥機(jī)里進(jìn)行至少24小時(shí)的冷凍干燥；d、在無菌室里面對其進(jìn)行篩選、粉碎，粉碎時(shí)對粒子的變形要做到最小化的同時(shí)粒子的平均大小要維持在 70 μ m士 20 μ m。(2)制作溫度感應(yīng)性輔助劑的過程a、把聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率為70%的聚合物和聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率為80%的聚合物混合后在去離子超純水中對其進(jìn)行溶解并稀釋，共聚物的重量份為1. 95 2. 5 ；b、溫度降低到15°C以下以20000rpm以上速度高速攪拌，高速攪拌時(shí)加入Ca2+離子及降解性海藻酸鈉，其中，Ca2+離子和降解性海藻酸鈉的重量百分比為0. 48 1 0. 02 0. 05，攪拌時(shí)間不能超過2分鐘；(3)把步驟⑴和步驟⑵得到的物質(zhì)按0. 8 1 3的比例進(jìn)行混合并分裝涂層，分裝后在-70°C的超低溫冰箱里進(jìn)行12小時(shí)以上的冷凍，結(jié)束后將其放在-40°C以下， 并以55 65Mpa的壓力在凍結(jié)干燥機(jī)里面進(jìn)行M小時(shí)以上的冷凍干燥，然后用環(huán)氧乙烷氣體進(jìn)行滅菌，滅菌結(jié)束后去除殘存的環(huán)氧乙烷氣體，然后對最終得到的成品進(jìn)行檢查，并將最終的合格品進(jìn)行真空包裝。所述的真空干燥箱中的條件為20°C，2atm物理大氣壓。所述的有機(jī)溶劑包括丙酮、三氯甲烷、二甲基甲酰胺、乙酸乙酯、二氯甲烷、丁酮、 二甲亞砜、N-甲基吡咯烷酮、二噁英和四氫呋喃中的一種或兩種混合物。本發(fā)明的有益效果表現(xiàn)在(1)所述的注射用聚乳酸-羥基乙酸共聚物顆粒支架， 可以按使用目的不同而制成不同大小的顆粒，具備了可應(yīng)用于多樣的細(xì)胞和組織上優(yōu)點(diǎn)， 強(qiáng)制性賦予產(chǎn)品濕潤性，最小化了支架粒子注射時(shí)注射出不來的瓶頸現(xiàn)象，也可促進(jìn)細(xì)胞和組織在支架粒子上的附著力；( 顆粒支架被注入人體后使其在身體內(nèi)形成利于組織細(xì)胞生長的微環(huán)境支架，給細(xì)胞提供了生長的三維空間，對細(xì)胞換氧，提供營養(yǎng)物質(zhì)及排出廢物非常有利；C3)在有限的時(shí)間內(nèi)顆粒支架可以完全生物降解，最終會變成二氧化碳和水自然排出體外；(4)本發(fā)明生產(chǎn)中所使用的原料及代謝產(chǎn)物對人體是無害，無毒的；(5)本發(fā)明在注射前是液體狀態(tài)，注入人體后因溫度變化會成為膠凍狀態(tài)，對需要固定形狀的整形部位是相當(dāng)便利的產(chǎn)品；(6)本發(fā)明具有攜帶抗生素的作用，治療時(shí)不需另外給藥。


圖1為聚乳酸-羥基乙酸比例為75/25的PLGA不同分子量的分解數(shù)據(jù)圖2為注射用聚乳酸-羥基乙酸共聚物顆粒支架的物質(zhì)性質(zhì)圖3為注射用聚乳酸-羥基乙酸共聚物顆粒支架在不同溫度下的粘度變化圖4為PLGA中PLA和PGA不同配比條件下的分解數(shù)據(jù)圖5為PLGA化學(xué)的分解機(jī)制圖6為PLGA棱型粒子的彩色掃描電子顯微照片彩色掃描電子顯微圖7為輔助劑與PLGA棱型粒子混合時(shí)的無結(jié)轉(zhuǎn)現(xiàn)象的圖片圖8為注射用聚乳酸-羥基乙酸共聚物顆粒支架的細(xì)胞附著電子的顯微鏡照片圖9為注射用聚乳酸-羥基乙酸共聚物顆粒支架的細(xì)胞附著電子的成品的100倍電子顯微鏡照片圖10為注射用聚乳酸-羥基乙酸共聚物顆粒支架的細(xì)胞附著電子的成品的400 倍電子顯微鏡照片圖11為PLGA分碎粒子GPC數(shù)據(jù)(平面圖)圖12為PLGA分碎粒子GPC數(shù)據(jù)(立體圖)圖13為玻璃轉(zhuǎn)化溫度變化數(shù)據(jù)。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例和附圖對本發(fā)明做進(jìn)一步的描述，但保護(hù)范圍不局限于所述。
實(shí)施例1注射用聚乳酸-羥基乙酸共聚物顆粒支架，它主要以下重量比的組分組成基質(zhì) 0. 8，溫度感應(yīng)性輔助劑3，其中，所述的基質(zhì)為聚乳酸-羥基乙酸組成的生物降解性聚合物 PLGA，溫度感應(yīng)性輔助劑包括以下重量比的組分組成聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物 2，無毒性的降解性海藻酸鈉為主的生物相容性高分子聚合物0. 95，Ca2+離子0. 05，聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物由聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率為 70%的聚合物和聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率為80%的聚合物組成。所述的生物降解性顆粒支架的顆粒平均分子量為90000 110000，平均顆粒尺寸為 70 μ m士20 μ m,具有吸濕性，而且具有植入體內(nèi)時(shí)輔助劑會變成凝膠狀態(tài)的相變特征。所述的聚乳酸-羥基乙酸生物降解性聚合物中聚乳酸和羥基乙酸的重量百分比 75 25。注射用聚乳酸_羥基乙酸共聚物顆粒支架的制造方法，它包括以下步驟(1)篩選生物降解支架顆粒，包括a、把生物降解性聚合物溶解在有機(jī)溶劑和NaCl混合液里形成有機(jī)溶液，形成高濃度溶液，有機(jī)溶劑、PLGA、NaCl各占份額為3.5 1 12. 6，顆粒尺寸為80 lOOum，直至PLGA充分溶入到NaCl的間隙里，然后在20°C的環(huán)境下加以5Mpa，20min的壓力，直至有機(jī)溶劑蒸發(fā)以保證成型時(shí)維持所定形狀，得到成型片狀產(chǎn)品；b、將上一步驟得到的成型片狀產(chǎn)品放入真空干燥箱中，在真空干燥箱里除去把片狀產(chǎn)品表面上留存的殘留有機(jī)溶劑；C、進(jìn)行脫鹽處理，用超純的蒸餾水經(jīng)過3次反復(fù)地進(jìn)行25小時(shí)的脫鹽處理，使得殘存的Cl_濃度接近零，然后在-70°c的環(huán)境下進(jìn)行12小時(shí)的冷凍，再移到-50°c的冷凍干燥機(jī)里進(jìn)行26小時(shí)的冷凍干燥；d、在無菌室里面對其進(jìn)行篩選、粉碎，粉碎時(shí)對粒子的變形要做到最小化的同時(shí)粒子的平均大小要維持在70 μ m士 20 μ m。(2)制作溫度感應(yīng)性輔助劑的過程a、把聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率為70%的聚合物和聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率為80%的聚合物混合后在去離子超純水中對其進(jìn)行溶解并稀釋，共聚物的重量份為2 ；b、溫度降低到12°C以21000rpm速度高速攪拌，高速攪拌時(shí)加入Ca2+離子及海藻酸鈉，其中，Ca2+離子和海藻酸鈉的重量比為0.05 0.95，攪拌時(shí)間1.5分鐘；(3)把步驟⑴和步驟⑵分別得到的物質(zhì)按0. 8 3的比例進(jìn)行混合并分裝涂層，分裝后在-70°C的超低溫冰箱里進(jìn)行14小時(shí)的冷凍，結(jié)束后將其放在-40°C，并以60Mpa 的壓力在凍結(jié)干燥機(jī)里面進(jìn)行25小時(shí)的冷凍干燥，然后用環(huán)氧乙烷氣體進(jìn)行滅菌，滅菌結(jié)束后去除殘存的環(huán)氧乙烷氣體，然后對最終得到的成品進(jìn)行檢查，并將最終的合格品進(jìn)行真空包裝。所述的真空干燥箱中的條件為20°C，2atm。所述的有機(jī)溶劑為乙酸己酯。實(shí)施例2注射用聚乳酸_羥基乙酸共聚物顆粒支架，它主要由以下重量比的組分組成基
7質(zhì)1，溫度感應(yīng)性輔助劑3，其中，所述的基質(zhì)為聚乳酸-羥基乙酸組成的生物降解性聚合物 PLGA，溫度感應(yīng)性輔助劑包括以下重量比的組分組成聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物 2. 5，無毒性的降解性海藻酸鈉為主的生物相容性高分子聚合物0. 48，Ca2+離子0. 02，聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物由聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率為70%的聚合物和聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率為80%的聚合物組成。所述的生物降解性顆粒支架的顆粒平均分子量為90000 110000，平均顆粒尺寸為70 μ m士20 μ m,具有吸濕性，而且具有植入體內(nèi)時(shí)輔助劑會變成凝膠狀態(tài)的相變特征，具有吸濕性，而且具有植入體內(nèi)時(shí)輔助劑會變成凝膠狀態(tài)的相變特征。所述的聚乳酸-羥基乙酸生物降解性聚合物中聚乳酸和羥基乙酸的重量百分比 75 25。注射用聚乳酸-羥基乙酸共聚物顆粒支架的制造方法，它包括以下步驟(1)篩選生物降解支架顆粒，包括a、把生物降解性聚合物溶解在有機(jī)溶劑和NaCl混合液里形成有機(jī)溶液，形成高濃度溶液，有機(jī)溶劑、PLGA、NaCl各占份額為2 0. 5 11，顆粒尺寸為80 lOOum，直至 PLGA充分溶入到NaCl的間隙里，然后在25 °C的環(huán)境下加以7Mpa，IOmin的壓力，直至有機(jī)溶劑蒸發(fā)以保證成型時(shí)維持所定形狀，得到成型片狀產(chǎn)品；b、將成型片狀產(chǎn)品放入真空干燥箱中，在真空干燥箱里除去把片狀產(chǎn)品表面上留存的殘留有機(jī)溶劑；C、進(jìn)行脫鹽處理，用超純的蒸餾水經(jīng)過4次反復(fù)地進(jìn)行M小時(shí)的脫鹽處理，使得殘存的Cl_濃度接近零，然后在-50°c的環(huán)境下進(jìn)行18小時(shí)的冷凍，再移到-40°c的冷凍干燥機(jī)里進(jìn)行18小時(shí)的冷凍干燥；d、在無菌室里面對其進(jìn)行篩選、粉碎，粉碎時(shí)對粒子的變形要做到最小化的同時(shí)粒子的平均大小要維持在70 μ m士 20 μ m。(2)制作溫度感應(yīng)性輔助劑的過程a、把聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率為70%的聚合物和聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率為80%的聚合物混合后在去離子超純水中對其進(jìn)行溶解并稀釋，共聚物重量份為2. 5 ；b、溫度降低到14°C以22000rpm以上速度高速攪拌，高速攪拌時(shí)加入Ca2+離子及降解性海藻酸鈉，其中，Ca2+離子和降解性海藻酸鈉的重量為0.02 0.48，攪拌時(shí)間2分鐘；(3)把步驟⑴和步驟⑵得到的物質(zhì)按重量比1 3進(jìn)行混合并分裝涂層，分裝后在_70°C的超低溫冰箱里進(jìn)行16小時(shí)的冷凍，結(jié)束后將其放在_50°C，并以65Mpa的壓力在凍結(jié)干燥機(jī)里面進(jìn)行觀小時(shí)的冷凍干燥，然后用環(huán)氧乙烷氣體進(jìn)行滅菌，滅菌結(jié)束后去除殘存的環(huán)氧乙烷氣體，然后對最終得到的成品進(jìn)行檢查，并將最終的合格品進(jìn)行真空包裝。所述的真空干燥箱中的條件為20°C，2atm。所述的有機(jī)溶劑包括二氯甲烷和二甲基酰胺。實(shí)施例3注射用聚乳酸-羥基乙酸共聚物顆粒支架，它主要由生物降解性聚合物組成，其中所述的生物降解性聚合物包括重量比的組分組成基質(zhì)0. 9，溫度感應(yīng)性輔助劑3，其中，所述的基質(zhì)為聚乳酸_羥基乙酸組成的生物降解性聚合物PLGA，溫度感應(yīng)性輔助劑包括以下重量比的組分組成聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物1.95，無毒性的降解性海藻酸鈉為主的生物相容性高分子聚合物1. 0,Ca2+離子0. 05，聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物由聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率為70%的聚合物和聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率為80%的聚合物組成。所述的生物降解性顆粒支架的顆粒平均分子量(Mw)為90000 110000，平均顆粒尺寸為70 μ m士20 μ m，具有吸濕性，而且具有植入體內(nèi)時(shí)輔助劑會變成凝膠狀態(tài)的相變特征。所述的聚乳酸_羥基乙酸生物降解性聚合物中聚乳酸和羥基乙酸的重量百分比 75 25。注射用聚乳酸_羥基乙酸共聚物顆粒支架的制造方法，它包括以下步驟(1)篩選生物降解支架顆粒，包括a、把生物降解性聚合物溶解在有機(jī)溶劑和NaCl混合液里形成有機(jī)溶液，形成高濃度溶液，有機(jī)溶劑、PLGA, NaCl各占份額為5:2: 15，顆粒尺寸為80um lOOum，直至 PLGA充分溶入到NaCl的間隙里，然后在15°C的環(huán)境下加以7Mpa，40min的壓力，直至有機(jī)溶劑蒸發(fā)以保證成型時(shí)維持所定形狀，得到成型片狀產(chǎn)品；b、將成型片狀產(chǎn)品放入真空干燥箱中，在真空干燥箱里除去把片狀產(chǎn)品表面上留存的殘留有機(jī)溶劑；C、進(jìn)行脫鹽處理，用超純的蒸餾水經(jīng)過4次反復(fù)地進(jìn)行25小時(shí)的脫鹽處理，使得殘存的Cl_濃度接近零，然后在-80°c的環(huán)境下進(jìn)行10小時(shí)的冷凍，再移到-45°c的冷凍干燥機(jī)里進(jìn)行24小時(shí)的冷凍干燥；d、在無菌室里面對其進(jìn)行篩選、粉碎，粉碎時(shí)對粒子的變形要做到最小化的同時(shí)粒子的平均大小要維持在70 μ m士 20 μ m。(2)制作溫度感應(yīng)性輔助劑的過程a、把聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率為70%的聚合物和聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率為80%的聚合物按7 4的比率在去離子超純水中對其進(jìn)行溶解并稀釋，共聚物重量份為1. 95 ；b、溫度降低到10°C以20000rpm速度高速攪拌，高速攪拌時(shí)加入Ca2+離子及降解性海藻酸鈉，其中，Ca2+離子和降解性海藻酸鈉的重量百分比為1. O 0. 05，攪拌時(shí)間2分鐘；(3)把步驟(1)和步驟(2)得到的物質(zhì)按0. 9 3進(jìn)行混合并分裝涂層，分裝后在-70°C的超低溫冰箱里進(jìn)行12小時(shí)的冷凍，結(jié)束后將其放在-60°C，并以55Mpa的壓力在凍結(jié)干燥機(jī)里面進(jìn)行24小時(shí)的冷凍干燥，然后用環(huán)氧乙烷氣體進(jìn)行滅菌，滅菌結(jié)束后去除殘存的環(huán)氧乙烷氣體，然后對最終得到的成品進(jìn)行檢查，并將最終的合格品進(jìn)行真空包裝。所述的真空干燥箱中的條件為20°C，2atm。所述的有機(jī)溶劑包括二氯甲烷和丙酮。實(shí)施例4注射用聚乳酸-羥基乙酸共聚物顆粒支架，它主要由生物降解性聚合物組成，其中所述的生物降解性聚合物包括重量比的組分組成基質(zhì)1，溫度感應(yīng)性輔助劑3，其中，所述的基質(zhì)為聚乳酸_羥基乙酸組成的生物降解性聚合物PLGA，溫度感應(yīng)性輔助劑包括以下
9重量比的組分組成聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物2. 48，無毒性的降解性海藻酸鈉為主的生物相容性高分子聚合物0. 5，Ca2+離子0. 02，聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物由聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率為70%的聚合物和聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率為80%的聚合物組成。所述的生物降解性顆粒支架的顆粒平均分子量為90000 110000，平均顆粒尺寸為80 μ m 110 μ m，具有吸濕性，而且具有植入體內(nèi)時(shí)輔助劑會變成凝膠狀態(tài)的相變特征。所述的聚乳酸-羥基乙酸生物降解性聚合物中聚乳酸和羥基乙酸的重量百分比 75 25。注射用聚乳酸-羥基乙酸共聚物顆粒支架的制造方法，它包括以下步驟(1)篩選生物降解支架顆粒，包括a、把生物降解性聚合物溶解在有機(jī)溶劑和NaCl混合液里形成有機(jī)溶液，形成高濃度溶液，有機(jī)溶劑、PLGA、NaCl各占份額為4 1 12，顆粒尺寸為80 lOOum，直至PLGA 充分溶入到NaCl的間隙里，然后在15°C的環(huán)境下加以3Mpa，30min的壓力，直至有機(jī)溶劑蒸發(fā)以保證成型時(shí)維持所定形狀，得到成型片狀產(chǎn)品；b、將成型片狀產(chǎn)品放入真空干燥箱中，在真空干燥箱里除去把狀產(chǎn)品表面上留存的殘留有機(jī)溶劑；C、進(jìn)行脫鹽處理，用超純的蒸餾水經(jīng)過4次反復(fù)地進(jìn)行M小時(shí)的脫鹽處理，使得殘存的Cl_濃度接近零，然后在-80°c的環(huán)境下進(jìn)行15小時(shí)的冷凍，再移到-50°c的冷凍干燥機(jī)里進(jìn)行27小時(shí)的冷凍干燥；d、在無菌室里面對其進(jìn)行篩選、粉碎，粉碎時(shí)對粒子的變形要做到最小化的同時(shí)粒子的平均大小要維持在70 μ m士 20 μ m。(2)制作溫度感應(yīng)性輔助劑的過程a、把聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率為70%的聚合物和聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率為80%的聚合物混合后在去離子超純水中對其進(jìn)行溶解并稀釋，共聚物的重量份為2. 48 ；b、溫度降低到14°C以MOOOrpm以上速度高速攪拌，高速攪拌時(shí)加入Ca2+離子及降解性海藻酸鈉，其中，Ca2+離子和降解性海藻酸鈉的重量百分比為0.5 0.02，攪拌時(shí)間 2分鐘；(3)把步驟⑴和步驟⑵得到的物質(zhì)按1 3進(jìn)行混合并分裝涂層，分裝后在-70°C的超低溫冰箱里進(jìn)行18小時(shí)的冷凍，結(jié)束后將其放在_50°C，并以60Mpa的壓力在凍結(jié)干燥機(jī)里面進(jìn)行26小時(shí)的冷凍干燥，然后用環(huán)氧乙烷氣體進(jìn)行滅菌，滅菌結(jié)束后去除殘存的環(huán)氧乙烷氣體，然后對最終得到的成品進(jìn)行檢查，并將最終的合格品進(jìn)行真空包裝。所述的真空干燥箱中的條件為20°C，2atm。所述的有機(jī)溶劑包括三氯甲烷和丁酮。以下是本發(fā)明所述的注射用聚乳酸-羥基乙酸聚合物顆粒支架的物理性質(zhì)、粘度、分解等做一分析說明。1、物理性質(zhì)如圖1，摩爾比為75/25的PLGA的粒子形態(tài)是非定型的，它們的共聚體PLGA根據(jù)平均分子量的變化，它的分解速度也不同，不變形的最大溫度(Tg)為45-52°C。在生物體內(nèi)降解的時(shí)間為20-24周。圖2為注射用聚乳酸-羥基乙酸共聚物顆粒支架的組成成分以及性質(zhì)，從去除水后全部固體中各成分的體積比以及ΡΕ0/ΡΡ0比等不難看出其粒子間的排斥力和引力的大小單位、PH值、平均粒子大小、基準(zhǔn)溫度、最終形成物等都較為穩(wěn)定，無毒，具有較好的生物相容性。2、產(chǎn)品的粘度實(shí)驗(yàn)圖3是根據(jù)溫度變化發(fā)生的粘度變化圖，其中曲線代表本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，根據(jù)人體溫度36 37. 5度為標(biāo)準(zhǔn)，注入人體后產(chǎn)品產(chǎn)生膠凍相變，可見本發(fā)明在注入人體后因溫度變化會成為膠凍狀態(tài)，對需要固定形狀的整形部位是相當(dāng)便利的產(chǎn)品。3、產(chǎn)品中PLGA的產(chǎn)品分解對比實(shí)驗(yàn)如圖4為PLGA分解數(shù)據(jù)，PLGA的Lactide和Glycolide的混合比例不同的體外分解時(shí)間數(shù)據(jù)；其中I曲線代表Lactide和Glycolide的混合比例為50/50時(shí)PLGA的分解曲線，其中II曲線代表Lactide和Glycolide的混合比例為75/25時(shí)PLGA的分解曲線，其中III曲線代表Lactide和Glycolide的混合比例為87/13時(shí)PLGA的分解曲線，其中IV曲線代表Lactide和Glycolide的混合比例為100/0時(shí)PLGA的分解曲線，可見當(dāng)Lactide和Glycolide的混合比例為75/25時(shí)PLGA在人體內(nèi)的分解速度和分解時(shí)間最為合適。因此我公司的研發(fā)項(xiàng)目也正是以它為標(biāo)準(zhǔn)而制作的。4、分解成分說明如圖5為PLGA化學(xué)的分解機(jī)制，PLGA在體內(nèi)被水份分解成單體的過程，其成品以及代謝產(chǎn)物對人體是無害、無毒的。5、效果分析實(shí)驗(yàn)圖6是加工后PLGA的非定型顆粒的彩色掃描電子顯微照片。表面的結(jié)構(gòu)有利于附著細(xì)胞及形成組織。圖7是輔助劑和圖6的顆?；旌?1 3)后的電子顯微鏡照片?？梢钥吹贸龇稚⒌谋砻媸欠浅＞鶆虻?。圖8PLGA顆粒種子干細(xì)胞的照片。電子顯微鏡下可確認(rèn)到干細(xì)胞穩(wěn)定地附著在顆粒支架上。圖9是把圖8擴(kuò)大到100倍的圖片。圖10是把圖8擴(kuò)大到400倍的圖片。6、產(chǎn)品的凝膠滲透色譜法實(shí)驗(yàn)圖11是PLGA顆粒的重均分子量平面圖，也是圖2數(shù)據(jù)的證明材料。圖12是PLGA顆粒的重均分子量3維立體圖，也是圖2數(shù)據(jù)的證明材料。圖13是溫度感應(yīng)性輔助劑的半成品的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度測量圖。各單體均無化學(xué)變化的情況下穩(wěn)定地分散的證明材料。粒子中PLGA的重均分子量(M/w)采取的是凝膠滲透色譜法(GPC)測得。將樣品溶解在含有0. 025%甲苯的氯仿中。往GPC系統(tǒng)容器庫中注入150ul樣品溶液，用折光率檢測器完成測量。容器庫和檢測器的溫度維持在40°C左右。樣品分子量可以通過比較聚苯乙
11烯標(biāo)準(zhǔn)分子量計(jì)算得到，得到粒子的重量平均分子量為90000 110000。
權(quán)利要求
1.注射用聚乳酸-羥基乙酸共聚物顆粒支架，其特征在于它主要由以下重量比的組分組成基質(zhì)0. 8 1，溫度感應(yīng)性輔助劑3，其中，所述的基質(zhì)為聚乳酸-羥基乙酸組成的生物降解性聚合物PLGA，溫度感應(yīng)性輔助劑包括以下重量比的組分組成聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物1. 95 2. 5，海藻酸鈉0. 48 1，Ca2+離子0. 02 0. 05，所述的聚氧乙烯PEO和聚氧丙烯PPO三嵌段共聚物由聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率為70%的聚合物和聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率為80%的聚合物組成，共聚物中PEO和PPO的比率為7 3。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的注射用聚乳酸-羥基乙酸共聚物顆粒支架，其特征在于 所述的聚乳酸-羥基乙酸生物降解性聚合物PLGA中，聚乳酸和羥基乙酸的重量百分比 75 25。
3.注射用聚乳酸-羥基乙酸共聚物顆粒支架的制造方法，其特征在于它包括以下步驟(1)篩選生物降解支架顆粒a、把生物降解性聚合物PLGA溶解在有機(jī)溶劑和氯化鈉NaCl混合液里形成高濃度有機(jī)溶液，有機(jī)溶劑、PLGA, NaCl各占重量份為2 5 0. 5 2 10 15，NaCl顆粒尺寸為80 lOOum，直至PLGA充分溶入到NaCl的間隙里，然后在15 25°C的環(huán)境下加以3 7Mpa, 10 40分鐘的壓力，直至有機(jī)溶劑蒸發(fā)以保證成型時(shí)維持所定形狀，得到成型片狀女口廣 PFt ；b、將成型片狀產(chǎn)品放入真空干燥箱中，在真空干燥箱里除去片狀產(chǎn)品表面上留存的殘留有機(jī)溶劑；C、進(jìn)行脫鹽處理，用超純的蒸餾水經(jīng)過3 4次反復(fù)地進(jìn)行不少于24小時(shí)的脫鹽處理，使得殘存的Cl_濃度接近零，然后在-50 80°C的環(huán)境下進(jìn)行10 15小時(shí)的冷凍，再移到_40°C以下的冷凍干燥機(jī)里進(jìn)行至少24小時(shí)的冷凍干燥；d、在無菌室里面對成型片狀產(chǎn)品進(jìn)行篩選、粉碎，粉碎時(shí)，對粒子的變形要做到最小化，同時(shí)粒子的平均大小維持在50 μ m 90 μ m ；(2)制作溫度感應(yīng)性輔助劑a、把聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率為70%的聚合物和聚氧乙烯和聚氧丙烯三嵌段共聚物中的聚氧乙烯的比率為80%的聚合物混合后在去離子超純水中對其進(jìn)行溶解和稀釋，共聚物重量份1. 95 2. 5 ；b、溫度降低到15°C以下以至少20000rpm轉(zhuǎn)速高速攪拌，攪拌時(shí)加入Ca2+離子及海藻酸鈉，其中，Ca2+離子和海藻酸鈉的重量比為0.48 1 0.02 0.05，攪拌時(shí)間不能超過 2分鐘；(3)把步驟(1)和步驟(2)分別得到的物質(zhì)按0.8 1 3的比例進(jìn)行混合并分裝涂層，分裝后在-70°C的超低溫冰箱里進(jìn)行不少于12小時(shí)的冷凍，結(jié)束后將其放在-40°C以下，并以55 65Mpa的壓力在凍結(jié)干燥機(jī)里面進(jìn)行不少于24小時(shí)的冷凍干燥，然后用環(huán)氧乙烷氣體進(jìn)行滅菌，滅菌結(jié)束后去除殘存的環(huán)氧乙烷氣體，然后對最終得到的成品進(jìn)行檢查，并將最終的合格品進(jìn)行真空包裝。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的注射用聚乳酸_羥基乙酸共聚物顆粒支架的制造方法，其特征在于所述的真空干燥箱中的條件為20°C，2atm物理大氣壓。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的注射用聚乳酸-羥基乙酸共聚物顆粒支架的制造方法，其特征在于所述的有機(jī)溶劑包括丙酮、三氯甲烷、二甲基甲酰胺、乙酸乙酯、二氯甲烷、丁酮、二甲亞砜、N-甲基吡咯烷酮、二噁英和四氫呋喃中的任意一種或兩種的混合物。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或3所述的注射用聚乳酸-羥基乙酸共聚物顆粒支架，其特征在于 所述的注射用聚乳酸-羥基乙酸共聚物顆粒支架的平均分子量為90000 110000，平均顆粒尺寸為50μπι 90μπι。
全文摘要
本發(fā)明公開了注射用聚乳酸-羥基乙酸共聚物顆粒支架及制造方法，它由以下重量比的組分組成聚乳酸—羥基乙酸組成的生物降解性聚合物0.8～1，溫度感應(yīng)性輔助劑3。本發(fā)明所述的共聚物顆粒支架注入人體后在身體內(nèi)形成利于組織細(xì)胞生長的微環(huán)境支架，對細(xì)胞換氧、提供營養(yǎng)物質(zhì)及排出廢物非常有利，在較短的時(shí)間內(nèi)顆粒支架可以完全生物降解，最終會變成二氧化碳和水自然排出體外，本發(fā)明所使用的原料以及代謝產(chǎn)物對人體是無害、無毒的，顆粒支架在注射前是液體狀態(tài)，注入人體后因溫度變化會成為膠凍狀態(tài)，這對需要固定形狀的整形部位是相當(dāng)便利的，并且本發(fā)明具有攜帶抗生素的作用，治療時(shí)不需另外給藥。
文檔編號A61L31/14GK102198290SQ20111012643
公開日2011年9月28日 申請日期2011年5月16日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月16日
發(fā)明者崔明, 朱雪標(biāo), 杜彥軍, 金相鎮(zhèn) 申請人:嘉興天源藥業(yè)有限公司