專利名稱：一種治療超級(jí)細(xì)菌的注射用藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種能治療產(chǎn)碳青霉烯酶(如KPC酶)超級(jí)菌株感染的藥物組合物。
背景技術(shù)：
二十世紀(jì)初抗生素的發(fā)現(xiàn)堪稱為醫(yī)藥技術(shù)發(fā)展史上重大里程碑之一。其意義遠(yuǎn)遠(yuǎn) 超過其它藥物(如阿司匹林等)的發(fā)明。19 年，英國細(xì)菌學(xué)家弗萊明在其實(shí)驗(yàn)室中發(fā)現(xiàn) 點(diǎn)青霉(一種霉菌)分泌的一種未知物質(zhì)(即“青霉素”)具有強(qiáng)力抑菌作用。至四十年代 末，美國科學(xué)家攻克了青霉素大規(guī)模生產(chǎn)的技術(shù)難題(發(fā)酵罐深層通氣培養(yǎng)法)從而奠定 了抗生素工業(yè)的基礎(chǔ)。在此后幾十年里，抗生素已發(fā)展成為幾大系列上百個(gè)品種的重要臨 床藥物。以青霉素為代表的抗生素已從病魔手中挽救了無數(shù)的生命，為人類健康立下了不 朽的功勛。但是，由于近年來人們對(duì)抗生素的過分依賴和濫用，耐藥菌株不斷出現(xiàn)，已成為 與耐多藥結(jié)核菌、艾滋病病毒相并列的、對(duì)人類健康構(gòu)成威脅的三大病原微生物之一。據(jù)國 外醫(yī)學(xué)雜志最新報(bào)道，在醫(yī)院化驗(yàn)室分離出的金黃色葡萄球菌中有60%為“耐甲氧青霉素” 耐藥菌株。這就是長期使用抗生素所造成的惡果。目前不僅各種細(xì)菌對(duì)現(xiàn)有抗生素(抗 菌藥物)如青霉素、頭孢菌素、四環(huán)素、大環(huán)內(nèi)酯類、氨基糖甙類和喹諾酮類等，產(chǎn)生了耐藥 性，而且就連藥物學(xué)家稱為是對(duì)付耐藥菌的“特效藥”的萬古霉素在上市后短短幾年亦已在 醫(yī)院里分離到“萬古霉素低敏感性金葡菌”。這一發(fā)現(xiàn)使藥物學(xué)家感到震驚。由于細(xì)菌耐藥 現(xiàn)象的蔓延，現(xiàn)在發(fā)病者眾多的流感桿菌引發(fā)的肺炎與支氣管炎等常見病已無良藥可治。 如何對(duì)付越來越普遍的耐藥細(xì)菌已成為國際醫(yī)學(xué)界所面臨的一棘手難題。已有的研究表明，細(xì)菌在對(duì)付抗生素或抗菌藥物的過程中通常憑借以下幾種手段 產(chǎn)生耐藥性(1)改變自身的染色體(耐藥性遺傳因子)使抗菌藥難以進(jìn)入其細(xì)菌中；(2) 分泌出某種酶，從而使抗菌藥物失去活性；(3)細(xì)菌體內(nèi)產(chǎn)生某種“耐藥排泄泵”(實(shí)際上它 是一種特殊蛋白質(zhì)，可將四環(huán)素之類藥物原封不動(dòng)地從細(xì)菌細(xì)胞膜內(nèi)排出去)；(4)細(xì)菌外 膜通透性降低，使抗生素分子難以進(jìn)入其膜內(nèi)從而保護(hù)了細(xì)菌的生存。青霉素類和頭孢菌素類抗生素是目前臨床上應(yīng)用較廣泛的抗感染藥物，由于長期 大量使用和濫用，細(xì)菌耐藥性的問題也愈來愈嚴(yán)重。先前的研究表明，細(xì)菌對(duì)于青霉素類 (如氨芐西林、哌拉西林等)和頭孢菌素類(如一代至四代頭孢菌素頭孢唑林、頭孢呋辛、頭 孢他啶和頭孢吡肟等)抗生素產(chǎn)生耐藥性的重要原因是這些細(xì)菌能夠產(chǎn)生青霉素酶和頭孢 菌素酶(如β_內(nèi)酰胺酶)，這些酶水解破壞了青霉素類和頭孢菌素類抗生素的活性功能部 位，使藥物本身失去活性，降低藥物的臨床療效。中國專利申請(qǐng)CN1341417A均披露了一種含頭孢噻肟和他唑巴坦的藥物組合物， 這種藥物組合物對(duì)β-內(nèi)酰胺酶有較好的抑制作用。但是，隨著碳青霉烯類抗生素臨床應(yīng)用的深入和科學(xué)家們對(duì)該類藥物研究的進(jìn)一 步探索，研究者們陸續(xù)又發(fā)現(xiàn)了一些其它可以水解碳青霉烯類抗生素的酶，如SME酶、KPC 觀(J. pneumoniae carbapenemase)、IMI 型酶、Nmc — A 型和 GES — 2 酶等。產(chǎn)生這些酶的
3細(xì)菌常常具有多重耐藥性或泛耐藥性，它們引起的感染常常是致死的，目前死于這些細(xì)菌 的患者已數(shù)以千計(jì)。這些能夠水解碳青霉烯類抗生素的多重耐藥的細(xì)菌人們稱之為“超級(jí) 細(xì)菌”。超級(jí)細(xì)菌中可產(chǎn)生KPC酶的細(xì)菌越來越多，許多常見的腸桿菌科細(xì)菌，如大 腸埃希菌和肺炎克雷伯菌，皆可產(chǎn)生KPC酶，且這種產(chǎn)酶菌有著流行的趨勢。KPC酶最早在 一株亞胺培南耐藥的肺炎克雷伯菌中被發(fā)現(xiàn)。從2000年以后，KPC酶家族陸續(xù)在美國的 新英格蘭和亞特蘭大地區(qū)被發(fā)現(xiàn)，主要在克雷伯菌屬中，其他菌株中也有發(fā)現(xiàn)。由于腸 桿菌是臨床上重要的醫(yī)院感染菌，其對(duì)碳青霉烯類抗菌藥物的耐藥給臨床抗感染治療帶 來了極大困難。2010年，這種攜帶KPC酶的細(xì)菌在美國、巴西和以色列等多國的醫(yī)院相繼被 發(fā)現(xiàn)，甚至在中國的杭州，研究超級(jí)細(xì)菌的專家在重癥監(jiān)護(hù)室的病人身上也發(fā)現(xiàn)了這種細(xì) 菌。非常不幸的是，連被視為最后一道防線的碳青霉烯類抗生素，也對(duì)這種抗藥性細(xì)菌不起 作用，之前出現(xiàn)對(duì)其他所有抗生素都耐藥的細(xì)菌感染時(shí)，人們就會(huì)拿出碳青霉烯類這個(gè)殺 手锏，而現(xiàn)在碳青霉烯類對(duì)KPC酶也束手無策了。目前產(chǎn)KPC酶的細(xì)菌已經(jīng)在全球范圍內(nèi) 廣泛播撒，中國也已經(jīng)報(bào)道，造成了對(duì)碳青霉烯類、青霉素類、頭孢菌素類和氨曲南在內(nèi)的 幾乎所有β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物耐藥，并且產(chǎn)KPC酶的菌株種類正在增加，隨時(shí)可能引 起醫(yī)院感染的爆發(fā)和流行，已經(jīng)引起微生物學(xué)家和臨床醫(yī)師的高度重視，因此，產(chǎn)KPC酶 細(xì)菌的感染將是我們面臨的嚴(yán)重問題，尋找一種新型的可以抑制KPC酶的藥物已經(jīng)迫在眉 睫。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是在于尋找一種可用于治療產(chǎn)生KPC酶的超級(jí)細(xì)菌的 藥物。為解決上述技術(shù)問題，申請(qǐng)人經(jīng)過了大量的研究和實(shí)驗(yàn)后，最終將目光投向了已 知的對(duì)β-內(nèi)酰胺酶有較好的抑制作用的含頭孢噻肟和他唑巴坦的藥物組合物，并進(jìn)行了 如下實(shí)驗(yàn)
1、產(chǎn)KPC酶細(xì)菌的篩選
取大腸埃希菌標(biāo)準(zhǔn)株(ATCC25922)的純培養(yǎng)菌落制成菌懸液，調(diào)節(jié)其濁度達(dá) 0. 5McFarland濁度，以無菌棉拭涂布于MH瓊脂平板上，將美羅培南(或厄他培南)藥敏紙片 貼平板中央，利用KPC酶可以水解美羅培南的特點(diǎn)，將臨床分離的大腸埃希菌和肺炎克雷 伯菌沿著美羅培南紙片的射線方向，接種在瓊脂上，在接種線的近紙片端若出現(xiàn)抑菌圈減 小(細(xì)菌長入)，則提示KPC酶陽性。2、將頭孢噻肟和他唑巴坦配成1:1、2:1、4:1、6:1、8:1和10:1不同重量配比 的藥液。以無菌MH肉湯倍比稀釋各藥液，使其中頭孢噻肟的重量濃度為256、128、64、32、 16、8、4、2、1、0· 5、0· 25、0· 125。3、將所選KPC酶陽性且具有多重耐藥性的菌株制成0. 5McFarland濁度的懸 液，等量加入到上述藥液中，37°C培養(yǎng)20h，讀取最小抑菌濃度(MIC)值(結(jié)果見表1 )。4、試驗(yàn)結(jié)論頭孢噻肟/他唑巴坦的復(fù)方制劑能顯著殺滅產(chǎn)KPC酶超級(jí)細(xì)菌，而頭 孢噻肟單方制劑則基本無效。頭孢噻肟與他唑巴坦的重量比從1 1至6:1基本上具有相同
4的殺菌效果，但當(dāng)進(jìn)一步加大兩者的比例時(shí)，其殺菌效果則開始降低。所以頭孢噻肟與他唑 巴坦的重量比從1 1至6:1均是可行的。為了避免他唑巴坦的毒副作用，并降低成本，頭孢 噻肟與他唑巴坦的比例以6 1為最佳。本發(fā)明為人們提供了一種能顯著殺滅產(chǎn)KPC酶超級(jí)細(xì)菌的藥物組合物，為含頭孢 噻肟和他唑巴坦的藥物組合物提供一種新用途。本發(fā)明在臨床應(yīng)用時(shí)的劑型為注射劑，有效成份頭孢噻肟和他唑巴坦的重量比為 6 1，其中他唑巴坦為其鈉鹽，前述重量比是不含鈉在內(nèi)的重量比。本發(fā)明對(duì)產(chǎn)KPC酶超級(jí)細(xì)菌有顯著的殺滅效果，且對(duì)人體的毒副作用小。表1 頭孢噻肟/他唑巴坦不同配比的對(duì)產(chǎn)KPC酶多重耐藥菌的MIC值比較
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具體實(shí)施例方式為了更好地描述本發(fā)明，在此我們列舉實(shí)例。但這并不表示實(shí)施例中所述方 式是實(shí)施本發(fā)明的唯一途徑。此外，實(shí)施例中提到一些的藥用輔料的種類，這些藥用輔料的 選用為制藥行業(yè)內(nèi)普通技術(shù)人員所共知。實(shí)施例1
取0. 17g他唑巴坦鈉和1. Og頭孢噻肟鈉在50%以下相對(duì)濕度的環(huán)境中以常規(guī)方式混 合配制裝入干燥滅菌安剖中；制劑過程中可以加入適量的助溶劑、抗氧化劑等藥用輔料。使 用前加入4毫升生理鹽水溶解。實(shí)施例2
取0. 34g他唑巴坦鈉和2. Og頭孢噻肟鈉在50%以下相對(duì)濕度的環(huán)境中以常規(guī)方式混 合配制裝入干燥滅菌安剖中；制劑過程中可以加入適量的助溶劑、抗氧化劑等藥用輔料。使 用前加入4毫升生理鹽水溶解。本發(fā)明用于臨床治療腸桿菌科細(xì)菌感染的患者時(shí)，需先用本發(fā)明所采用的方 法(Modified Hodge Test)測定KPC酶，如KPC酶陽性可采用本發(fā)明進(jìn)行治療。
權(quán)利要求
1.一種治療超級(jí)細(xì)菌的注射用藥物組合物，其特征在于其有效成份頭孢噻肟和他唑巴 坦的重量比為1-6:1。
2.如權(quán)利要求1所述藥物組合物，其特征在于其有效成份頭孢噻肟和他唑巴坦的重量 比為6 :1。
3.權(quán)利要求1或2所述藥物組合物在制備用于治療產(chǎn)KPC酶的超級(jí)細(xì)菌的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種由頭孢噻肟和他唑巴坦組成的注射用藥物組合物，對(duì)于產(chǎn)碳青霉烯酶(KPC酶)的超級(jí)細(xì)菌有明顯的殺滅作用，其中頭孢噻肟和他唑巴坦重量比為1-6:1。本發(fā)明為人們提供了一種治療產(chǎn)碳青霉烯酶(KPC酶)的超級(jí)細(xì)菌感染患者的新途徑，為含頭孢噻肟和他唑巴坦的藥物組合物提供一種新用途。
文檔編號(hào)A61P31/04GK102125562SQ20111009940
公開日2011年7月20日 申請(qǐng)日期2011年4月20日 優(yōu)先權(quán)日2011年4月20日
發(fā)明者葉海 申請(qǐng)人:葉海