專利名稱：采用大孔樹脂吸附提取腎茶有效部位的工藝方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種腎茶有效部位的提取分離方法，具體為大孔樹脂吸附提取分離高 含量腎茶有效部位的工藝方法，屬中藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
腎茶是一種珍貴的藥用保健植物，是一種傳統(tǒng)的民間用藥，民間應(yīng)用其治療急慢 性腎炎、尿路感染、尿路結(jié)石、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等疾病，同時(shí)腎茶還具有抗菌、消炎、增加肝腎 脾血流量等功能。其有效部位為內(nèi)含的迷迭香酸與黃酮類化合物。目前腎茶有效部位提 取方法主要有水提法和醇提法，分離方法包括腎茶上柱液的制備步驟、由特定分離物質(zhì)構(gòu) 成的分離柱進(jìn)行分離的步驟、由特定的洗脫劑對分離柱進(jìn)行洗脫的步驟以及對洗脫液進(jìn)行 濃縮等步驟，現(xiàn)有技術(shù)的上述分離柱一般采用硅膠柱，但采用硅膠柱進(jìn)行分離、層析的基本 上是單組份物質(zhì)，且洗脫劑多采用有機(jī)溶劑(如苯、三氯甲烷等)，毒副作用較大，損害操作 人員的身體健康，因此，現(xiàn)有的分離提取方法不宜于工業(yè)生產(chǎn)，可以作為化學(xué)成分的研究手 段。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供了一種采用大孔樹脂吸附提取腎茶有效部位的工藝方法。 本發(fā)明提取的有效部位含量高，迷迭香酸與總黃酮的含量達(dá)到50%以上，達(dá)到五類中藥原 料藥標(biāo)準(zhǔn)；且所用的洗脫劑無毒性，適用于工業(yè)化生產(chǎn)。為了達(dá)成上述目的，本發(fā)明的解決方案是一種采用大孔樹脂吸附提取腎茶有效部位的工藝方法，包括以下步驟1)腎茶的 提??；2)上柱液的制備；3)由大孔吸附樹脂分離柱進(jìn)行分離、用不同極性乙醇水溶液作為 洗脫劑對分離柱進(jìn)行洗脫；4)洗脫液的濃縮。所述的腎茶的提取包括如下工藝步驟1)腎茶采用腎茶質(zhì)量10-20倍的水煮沸得 到的濾液即為腎茶提取液；幻將腎茶提取液合并、過濾、減壓濃縮至膏狀濃縮液轉(zhuǎn)移至已 知重量的容器內(nèi)，凍干，得到粗品提取物。所述的沉淀蛋白質(zhì)用的醇采用濃度為50% -95%乙醇，體積是腎茶提取液體積的 1-2倍；得到的粗品提取物是水提醇沉獲得的提取物。所述的腎茶質(zhì)量10-20倍的水采用腎茶質(zhì)量10-20倍乙醇水溶液替換。所述的乙醇水溶液濃度為50% -95%。所述的上柱液的制備是指將腎茶的提取步驟中得到的粗品提取物溶液配制成 0. lg/ml的上柱液。所述的由大孔吸附樹脂分離柱進(jìn)行分離、用不同極性乙醇水溶液作為洗脫劑對分 離柱進(jìn)行洗脫的步驟為先用水對大孔吸附樹脂柱進(jìn)行洗脫至水洗脫液無色；然后采用濃 度20-40%的乙醇水溶液洗脫，再用濃度40-70%的乙醇水溶液洗脫，最后用濃度70-95%
3的乙醇水溶液洗脫。所述的濃度20-40%的乙醇水溶液洗脫后收集洗脫液，減壓濃縮，濃縮液轉(zhuǎn)移至已 知重量的容器內(nèi)，凍干，得到提取物質(zhì)量；溶解后定容；將濃度40-70%的乙醇水溶液洗脫， 收集洗脫液，減壓濃縮，濃縮液轉(zhuǎn)移至已知重量的容器內(nèi)，凍干，得到提取物質(zhì)量；溶解后定 容；將濃度70-95%的乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，濃縮液轉(zhuǎn)移至已知重量的 容器內(nèi)，凍干，得到提取物質(zhì)量；溶解后定容；三次洗脫得到的提取物即為腎茶有效部位的 提取物。本發(fā)明的有益效果為腎茶上柱液采用水、水提醇沉、醇提而制成，前者為水提，后 者涉及醇提法。本發(fā)明的分離方法在濃度20-70 %的洗脫液濃縮后形成的浸膏中，有效部位 含量高，迷迭香酸與總黃酮的含量達(dá)到50%以上，達(dá)到五類中藥原料藥標(biāo)準(zhǔn)。而且本發(fā)明所 用的洗脫劑無毒性，適用于工業(yè)化生產(chǎn)。因此，本發(fā)明為提純、生產(chǎn)腎茶五類中藥原料藥提 供了高效、可行且可以進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)的方法，為進(jìn)一步進(jìn)行腎茶制劑研究打下了基礎(chǔ)。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1取腎茶50克，用腎茶質(zhì)量10-20倍的水溶液煮沸2-5次，每次進(jìn)行60-240分鐘， 將每次所得的濾液合并，減壓濃縮至膏狀，濃縮液轉(zhuǎn)移至已知重量的容器內(nèi)，凍干，得到粗 提取物的質(zhì)量；再將得到的粗提取物溶解配制成0. lg/ml的溶液作為腎茶的上柱液。將大孔樹脂在濃度95%的醫(yī)用乙醇中浸泡過夜，然后用濃度95%的乙醇溶液洗 脫，收集洗脫液蒸干至無殘?jiān)?，再用去離子水洗脫至流出液無醇味、無混濁。將上述制備好的上柱液直接上柱。首先用水對大孔吸附樹脂柱進(jìn)行洗脫至無色，然后采用濃度20-40%、40-70%、 70-95 %的乙醇水溶液洗脫，洗脫體積為樹脂體積的4-10倍，收集洗脫液，減壓濃縮至膏 狀，濃縮液轉(zhuǎn)移至已知重量的容器內(nèi)，凍干，得到洗脫物質(zhì)量，溶解定容。分別測定濃度 20-40%、40-70%、70-95%的乙醇水溶液洗脫物中迷迭香酸與總黃酮的含量，結(jié)果如表1 所示。實(shí)施例2取腎茶50克，用腎茶質(zhì)量10-20倍的水溶液煮沸2-5次，每次進(jìn)行60-240分鐘， 將每次所得的濾液合并，濃縮至原濾液的十分之一體積，加入等量的濃度75%乙醇(體積 是腎茶提取液體積的1-2倍)，沉淀蛋白質(zhì)，過濾，濾液減壓濃縮至膏狀，濃縮液轉(zhuǎn)移至已知 重量的容器內(nèi)，凍干，得到粗提取物的質(zhì)量；再將得到的粗提取物溶解配制成0. lg/ml的溶 液作為腎茶的上柱液。將大孔樹脂在濃度95%的醫(yī)用乙醇中浸泡過夜，然后用濃度95%的乙醇溶液洗 脫，收集洗脫液蒸干至無殘?jiān)?，再用去離子水洗脫至流出液無醇味、無混濁。將上述制備好的上柱液直接上柱。首先用水對大孔吸附樹脂洗脫至無色，然后采用濃度20-40^^40-70^^70-95% 的乙醇水溶液洗脫，洗脫體積為樹脂體積的4-10倍，收集洗脫液，減壓濃縮至膏狀，濃縮 液轉(zhuǎn)移至已知重量的容器內(nèi)，凍干，得到洗脫物質(zhì)量，溶解定容。分別測定濃度20-40%、 40-70%、70-95%的乙醇水溶液洗脫物中迷迭香酸與總黃酮的含量，結(jié)果如表2所示。
實(shí)施例3取腎茶50克，用腎茶質(zhì)量10-20倍的濃度50_95%的乙醇水溶液回流2_5次，每次 進(jìn)行60-240分鐘，將每次的濾液合并，減壓濃縮至膏狀，濃縮液轉(zhuǎn)移至已知重量的容器內(nèi)， 凍干，得到提取物質(zhì)量；再將得到的提取物溶解配制成0. lg/ml的溶液作為腎茶的上柱液。將大孔樹脂在濃度95%的醫(yī)用乙醇中浸泡過夜，然后用濃度95%的乙醇溶液洗 脫，收集洗脫液蒸干至無殘?jiān)?，再用去離子水洗脫至流出液無醇味、無混濁。將上述制備好的上柱液直接上柱。首先用水對大孔吸附樹脂洗脫至無色，然后采用濃度20-40^^40-70^^70-95% 的乙醇水溶液洗脫，洗脫體積為樹脂體積的4-10倍，收集洗脫液，減壓濃縮至膏狀，濃縮 液轉(zhuǎn)移至已知重量的容器內(nèi)，凍干，得到洗脫物質(zhì)量，溶解定容。分別測定濃度20-40%、 40-70^^70-95%的乙醇水溶液洗脫物中迷迭香酸與總黃酮的含量，結(jié)果如表3所示。上面三個(gè)實(shí)施例所得的提取物經(jīng)高效液相色譜儀與紫外分光光度計(jì)分析，方法中 所得提取物中主要為迷迭香酸與總黃酮類化合物，其含量占提取物的50%以上。表 權(quán)利要求
1.一種采用大孔樹脂吸附提取腎茶有效部位的工藝方法，其特征在于包括以下步 驟1)腎茶的提??；2)上柱液的制備；3)由大孔吸附樹脂分離柱進(jìn)行分離、用不同極性乙 醇水溶液作為洗脫劑對分離柱進(jìn)行洗脫；4)洗脫液的濃縮。
2.如權(quán)利要求1所述的采用大孔樹脂吸附提取腎茶有效部位的工藝方法，其特征在 于所述的腎茶的提取包括如下工藝步驟1)腎茶采用腎茶質(zhì)量10-20倍的水煮沸得到的 濾液即為腎茶提取液；幻將腎茶提取液合并、過濾、減壓濃縮至膏狀濃縮液轉(zhuǎn)移至已知重 量的容器內(nèi)，凍干，得到粗品提取物。
3.如權(quán)利要求2所述的采用大孔樹脂吸附提取腎茶有效部位的工藝方法，其特征在 于所述的腎茶提取液中加入醇用來沉淀蛋白質(zhì)，得到的粗品提取物是水提醇沉獲得的提 取物。
4.如權(quán)利要求3所述的采用大孔樹脂吸附提取腎茶有效部位的工藝方法，其特征在 于所述的沉淀蛋白質(zhì)用的醇采用濃度為50% -95%乙醇，體積是腎茶提取液體積的1-2倍。
5.如權(quán)利要求2所述的采用大孔樹脂吸附提取腎茶有效部位的工藝方法，其特征在 于所述的腎茶質(zhì)量10-20倍的水采用腎茶質(zhì)量10-20倍乙醇水溶液替換。
6.如權(quán)利要求5所述的采用大孔樹脂吸附提取腎茶有效部位的工藝方法，其特征在 于所述的乙醇水溶液濃度為50% -95%。
7.如權(quán)利要求1所述的采用大孔樹脂吸附提取腎茶有效部位的工藝方法，其特征在 于所述的上柱液的制備是指將腎茶的提取步驟中得到的粗品提取物溶液配制成0. lg/ml 的上柱液。
8.如權(quán)利要求1所述的采用大孔樹脂吸附提取腎茶有效部位的工藝方法，其特征在 于所述的由大孔吸附樹脂分離柱進(jìn)行分離、用不同極性乙醇水溶液作為洗脫劑對分離柱 進(jìn)行洗脫的步驟為先用水對大孔吸附樹脂柱進(jìn)行洗脫至水洗脫液無色；然后采用濃度 20-40 %的乙醇水溶液洗脫，再用濃度40-70 %的乙醇水溶液洗脫，最后用濃度70-95 %的 乙醇水溶液洗脫。
9.如權(quán)利要求8所述的采用大孔樹脂吸附提取腎茶有效部位的工藝方法，其特征在 于所述的濃度20-40%的乙醇水溶液洗脫后收集洗脫液，減壓濃縮，濃縮液轉(zhuǎn)移至已知重 量的容器內(nèi)，凍干，得到提取物質(zhì)量；溶解后定容；將濃度40-70%的乙醇水溶液洗脫，收集 洗脫液，減壓濃縮，濃縮液轉(zhuǎn)移至已知重量的容器內(nèi)，凍干，得到提取物質(zhì)量；溶解后定容； 將濃度70-95%的乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，濃縮液轉(zhuǎn)移至已知重量的容器 內(nèi)，凍干，得到提取物質(zhì)量；溶解后定容；三次洗脫得到的提取物即為腎茶有效部位的提取 物。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種采用大孔樹脂吸附提取腎茶有效部位的工藝方法，包括以下步驟1)腎茶的提取；2)上柱液的制備；3)由大孔吸附樹脂分離柱進(jìn)行分離、用不同極性乙醇水溶液作為洗脫劑對分離柱進(jìn)行洗脫；4)洗脫液的濃縮。本發(fā)明提取的有效部位含量高，迷迭香酸與總黃酮的含量達(dá)到50％以上，達(dá)到五類中藥原料藥標(biāo)準(zhǔn)；且所用的洗脫劑無毒性，適用于工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號A61P31/04GK102145040SQ20111008346
公開日2011年8月10日 申請日期2011年4月2日 優(yōu)先權(quán)日2011年4月2日
發(fā)明者吳振, 梁錦添, 王立強(qiáng), 羅格蓮 申請人:華僑大學(xué)