專利名稱：以油茶籽為原料提取角鯊烯的方法及茶油角鯊烯軟膠囊的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，特別是一種以油茶籽為原料提取角鯊烯的方法以 及以該方法提取的角鯊烯為主要原料制成的茶油角鯊烯軟膠囊。
背景技術(shù)：
角鯊烯是一種脂質(zhì)不皂化物，最初是從鯊魚的肝油中發(fā)現(xiàn)的，1914年被命名為 Squalene,其化學(xué)名稱為2，6，10，15，19，23-六甲基_2，6，10，14，18，22- 二十四碳六烯，屬 開鏈三萜，又稱魚肝油萜，具有提高體內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)活性、增強(qiáng)機(jī)體免疫能力、 改善性功能、抗衰老、抗疲勞、抗腫瘤等多種生理功能，是一種無(wú)毒性的具有防病治病作用 的海洋生物活性物質(zhì)。角鯊烯在植物中分布很廣，但含量不高，多低于植物油中不皂化物的 5 %，僅少數(shù)含量較多，如橄欖油含有角鯊烯150-700mg/100g，米糠油含量為332mg/100g ； 茶油是對(duì)油茶籽中油類物質(zhì)的總稱，茶油中也含有較多的角鯊烯。由于深海鯊魚肝中角鯊 烯的含量高，如鎧鯊肝油中含量為40%-74%，小刺鯊含49%-89%，因此，目前大都采用深 海鯊魚肝油來(lái)提取角鯊烯；但如此大量生產(chǎn)角鯊烯，會(huì)導(dǎo)致深海鯊魚的生態(tài)失衡。近些年 來(lái)，出現(xiàn)了采用植物提取角鯊烯的報(bào)道，如中國(guó)專利(專利申請(qǐng)?zhí)枮?00910069670. 8) “以 橄欖油為原料提取高純度角鯊烯的方法”，該方法采用“采用二級(jí)分子蒸餾和硅膠柱色譜 法形成的工藝路線取橄欖油不皂化物使用二級(jí)分子蒸餾分離純化角鯊烯，在蒸發(fā)面溫 度為100-200°C、系統(tǒng)壓力0. 001-0. Olmbar、刮膜轉(zhuǎn)子速度150-300rpm的條件下進(jìn)行第 一級(jí)分子蒸餾，得到的餾余物進(jìn)行第二級(jí)分子蒸餾；蒸發(fā)面溫度為150-30(TC、系統(tǒng)壓力 0. 001-0. Olmbar、刮膜轉(zhuǎn)子速度200_350rpm下進(jìn)行第二級(jí)分子蒸餾，得到的餾出物為角鯊 烯粗品；以不同濃度的乙酸乙酯-正己烷為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，所得洗脫液按時(shí)間收集 后蒸去溶劑，經(jīng)色譜檢測(cè)合并相同餾分，可得到高純度的角鯊烯，其中角鯊烯由原料橄欖油 的含量3. 6%提高到98%左右，尤其是考慮工業(yè)化生產(chǎn)的要求選擇提取條件，可實(shí)現(xiàn)以橄 欖油為原料大規(guī)模生產(chǎn)角鯊烯。”又如中國(guó)專利(專利申請(qǐng)?zhí)枮?01010190275. 8) “從植物 油脫臭餾出物中提取角鯊烯的方法”，該方法“以植物油脫臭餾出物為原料，利用分子蒸餾 與萃取、結(jié)晶相結(jié)合的工藝方法，提取高濃度角鯊烯，并同時(shí)回收得到一定純度的天然維生 素E及植物留醇。具體步驟是將原料進(jìn)行皂化反應(yīng)，將萃取得到不皂化物經(jīng)過(guò)兩次分子蒸 餾后，以第二次蒸餾的餾出物為原料進(jìn)行冷析結(jié)晶獲得植物留醇，濾液中回收角鯊烯及混 合生育酚，再經(jīng)多級(jí)溶劑萃取在兩相中分別富集角鯊烯及維生素E。該工藝流程簡(jiǎn)單，原料 廉價(jià)，分離效率及回收率較高，實(shí)現(xiàn)了脫臭餾出物中有用成分的綜合利用。，，

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種采用原料廣泛的油茶籽提取角鯊烯的方 法，并提供一種以該方法提取的角鯊烯為主要原料制成的既可藥用、又可食療的茶油角鯊 烯軟膠囊。本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是發(fā)明一種以油茶籽為原料提取角鯊烯的方法，其工藝流程如下a、將洗凈、涼干的新鮮油茶籽[Camellia oleifera Abel]粉碎，置入浸取罐中；b、加入罐中油茶籽重量5-8倍的85%的乙醇，加熱煮沸2-3小時(shí)，濾出浸提液；再 對(duì)罐中余渣加入原乙醇量的85%乙醇，加熱煮沸2-3小時(shí)，濾出浸提液；合并兩次浸提液，c、將b步驟備用的浸提液加熱濃縮，回收乙醇，得濃縮浸提液備用；d、向c步驟備用的濃縮浸提液中加入占其體積10%的0.4-1.0mol/L氫氧化 鉀-甲醇溶液(甲醇溶液為體積單位，可為毫升或升或立方米；氫氧化鉀為重量單位，對(duì)應(yīng) 的為克或公斤或噸；依此類推)，然后，將其置于70°C的水浴中在氮?dú)獗Ｗo(hù)下加熱反應(yīng)4小 時(shí)，冷卻后，甲酯化完成，濾出混合液備用；e、將d步驟備用的混合液經(jīng)0. 01mol/L配位劑-硼砂反應(yīng)，采用大孔樹脂色譜分 離純化，收集50-70%的乙醇(乙醇的用量為2個(gè)柱體積)洗脫液備用；f、將e步驟備用的乙醇洗脫液加熱濃縮，回收乙醇，得無(wú)乙醇濃縮液備用；g、將f步驟備用的無(wú)乙醇濃縮液體積1-2倍的石油醚加入到f步驟備用的濃縮 液中，常溫萃取0. 5-1小時(shí)，濾出萃取液；再對(duì)罐中濃縮液加入1-2倍的石油醚，常溫萃取 0. 5-1小時(shí)，濾出萃取液，然后，合并兩次萃取液備用；h、將g步驟備用的萃取液用清水洗滌2-3次，洗滌后，收集上清液備用；i、將h步驟備用的上清液加熱濃縮，回收石油醚，得角鯊烯粗油備用；j、將i步驟備用的角鯊烯粗油經(jīng)超臨界二氧化碳萃取，即得角鯊烯含量> 80%的 角鯊烯精油。同時(shí)，還發(fā)明一種應(yīng)用上述方法提取的角鯊烯制備的茶油角鯊烯軟膠囊，制成其 有效成分的原料組成重量百分比為角鯊烯含量彡80%的角鯊烯精油87-90聚乙二醇400 3-5蜂蠟2-3 磷脂 2-5。優(yōu)化的方案一制成其有效成分的原料組成重量百分比為角鯊烯含量彡80%的角鯊烯精油87聚乙二醇400 5蜂蠟3磷脂5。優(yōu)化的方案二 制成其有效成分的原料組成重量百分比為角鯊烯含量80%的角鯊烯精油90聚乙二醇400 5蜂蠟3磷脂2。優(yōu)化的方案三制成其有效成分的原料組成重量百分比為角鯊烯含量彡80%的角鯊烯精油90聚乙二醇400 3蜂蠟2磷脂5。將明膠、甘油、水按1.0 0.4 0.6的比例(重量配比)制備成膠囊殼，然后，將 上述各方案配成的藥物組合物混合均勻，灌裝于膠囊殼中，即制得茶油角鯊烯軟膠囊成品。為便于服用和適應(yīng)市場(chǎng)的需求，也可采用常規(guī)技術(shù)，將上述各方案配成的藥物組 合物制成茶油角鯊烯片劑或顆粒。本發(fā)明的以油茶籽為原料提取角鯊烯的方法，采用自然生長(zhǎng)的油茶籽作為原料， 其來(lái)源廣泛，而且無(wú)污染；所提取的角鯊烯精油中角鯊烯的含量> 80%。由于角鯊烯具有以下作用①保肝作用，能促進(jìn)肝細(xì)胞再生并保護(hù)肝細(xì)胞，從而改善肝臟功能；②抗疲勞和 增強(qiáng)機(jī)體的抗病能力，能提高人體免疫功能；③保護(hù)腎上腺皮之功能，提高幾天的應(yīng)激能 力；④抗腫瘤，尤其在癌切除外科手術(shù)后或采用放化療時(shí)使用，效果顯著，其最大的特點(diǎn)是 防止癌癥向肺部轉(zhuǎn)移；⑤升高白細(xì)胞的作用。加上具有解毒、生肌、止痢、止血和定痛功效的 蜂蠟和具有增強(qiáng)腦力、安定神經(jīng)、平衡內(nèi)分泌、提高免疫力和再生力、解毒利尿、清潔血液、 健美肌膚、保持年輕和延緩衰老等功用的磷脂，因此，以本發(fā)明方法提取的角鯊烯為主要原 料制備的茶油角鯊烯軟膠囊，是一種可直接被人體吸收的活性物質(zhì)，屬純天然的綠色健康 藥物和食品，尤其適于肝炎、脂肪肝、急慢性炎癥患者、腫瘤患者、化療患者以及糖尿病、心 腦血管病患者做治療和食療服用，且無(wú)任何毒副作用。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例一a、取新鮮油茶籽300公斤，用清水洗凈、涼干、切碎后置入提取罐中；以向罐中加入1.5-2.4噸85%的乙醇(重量含量)，加熱(溫度為60-70°C)回流 提取2-3小時(shí)，濾出浸提液，另加入1. 5-2. 4噸85%的乙醇(重量含量)，又煮沸浸提2_3 小時(shí)，濾出浸提液后棄渣；合并兩次浸提液，備用；C、將上述備用的浸提液加熱(溫度為60-70°C)濃縮，回收乙醇，收集濃縮液200
升備用；d、向上述備用的濃縮液中加入0. 4-1. Omol/L的氫氧化鈉-甲醇溶液(氫氧化鈉 的用量為0. 3-0. 8公斤，甲醇的用量為20升)共20升，然后，將其置于70°C的水浴中，在 氮?dú)獗Ｗo(hù)下回流反應(yīng)4小時(shí)，冷卻6小時(shí)，溶液與沉淀分離，甲酯化反應(yīng)完成，濾出混合液備 用；e、將上述備用的混合液經(jīng)0. 01mol/L配位劑-硼砂反應(yīng)，采用大孔樹脂色譜分離 純化，并采用50-70%乙醇(重量含量)洗脫，乙醇的用量為2個(gè)柱體積，然后收集乙醇洗脫 液備用；f、將上述備用的乙醇洗脫液在60-70°C條件下加熱濃縮，回收乙醇，得無(wú)乙醇濃縮 液200升備用；g、向上述備用的無(wú)乙醇濃縮液中加入200-400升的石油醚，常溫萃取0. 5-1小時(shí)， 濾出萃取液；再加入200-400升的石油醚，常溫萃取0. 5-1小時(shí)，濾出萃取液，然后，合并兩 次萃取液備用；h、將上述備用的萃取液用400-800升的清水分為2_3次進(jìn)行洗滌，洗滌后，收集上 清液(即石油醚溶液)備用；i、將上述備用的上清液(即石油醚溶液)在30-40°C條件下加熱濃縮，回收石油 醚，得角鯊烯粗油8公斤備用；j、將上述備用的角鯊烯粗油進(jìn)行超臨界(X)2萃取，得角鯊烯精油(大約為1公斤 左右)，備用；k、將上述制得的角鯊烯精油用氣相色譜法測(cè)試，若角鯊烯含量≥80%，即為成品， 若角鯊烯含量≤80%，則重復(fù)上述第j步驟。L、當(dāng)上述制得的角鯊烯精油中的角鯊烯含量≥80%后，即可用于制作茶油角鯊烯軟膠囊①取明膠、甘油、水按1. 0 0. 4 0. 6的比例(重量配比)制備成膠囊殼，備用；②按重量百分比份額分別取角鯊烯含量彡80%的角鯊烯精油87份、聚乙二醇400 5份、蜂蠟3份、磷脂5份， 合計(jì)為100份，混合均勻，灌裝于膠囊殼中，即制得茶油角鯊烯軟膠囊成品。實(shí)施例二 ①取明膠、甘油、水按1. 0 0. 4 0. 6的比例(重量配比)制備成膠囊殼，備用；②按重量百分比份額分別取角鯊烯含量彡80%的角鯊烯精油90份、聚乙二醇400 5份、蜂蠟3份、磷脂2份， 合計(jì)為100份，混合均勻，灌裝于膠囊殼中，即制得茶油角鯊烯軟膠囊成品。實(shí)施例三①取明膠、甘油、水按1.0 0.4 0.6的比例(重量配比)制備成膠囊殼，備用；②按重量百分比份額分別取角鯊烯含量彡80%的角鯊烯精油90份、聚乙二醇400 3份、蜂蠟2份、磷脂5份， 合計(jì)為100份，混合均勻，灌裝于膠囊殼中，即制得茶油角鯊烯軟膠囊成品。
權(quán)利要求
1. 一種以油茶籽為原料提取角鯊烯的方法，其特征在于工藝流程如下a、將洗凈、涼干的新鮮油茶籽粉碎，置入浸取罐中；b、加入罐中油茶籽重量5-8倍的85%的乙醇，加熱煮沸2-3小時(shí)，濾出浸提液；再對(duì) 罐中余渣加入原乙醇量的85%乙醇，加熱煮沸2-3小時(shí)，濾出浸提液；合并兩次浸提液，備 用；c、將b步驟備用的浸提液加熱濃縮，回收乙醇，得濃縮浸提液備用；d、向c步驟備用的濃縮浸提液中加入占其體積10%的0.4-1. Omol/L氫氧化鉀-甲醇 溶液，然后，將其置于70°C的水浴中在氮?dú)獗Ｗo(hù)下加熱反應(yīng)4小時(shí)，冷卻后，甲酯化完成，濾 出混合液備用；e、將d步驟備用的混合液經(jīng)0.01mol/L配位劑-硼砂反應(yīng)，采用大孔樹脂色譜分離純 化，收集50-70%的乙醇洗脫液備用；f、將e步驟備用的乙醇洗脫液加熱濃縮，回收乙醇，得無(wú)乙醇濃縮液備用；g、將f步驟備用的無(wú)乙醇濃縮液體積1-2倍的石油醚加入到f步驟備用的濃縮液中， 常溫萃取0. 5-1小時(shí)，濾出萃取液；再對(duì)罐中無(wú)乙醇濃縮液加入1-2倍的石油醚，常溫萃取 0. 5-1小時(shí)，濾出萃取液，回收甲醇；然后，合并兩次萃取液備用；h、將g步驟備用的萃取液用清水洗滌2-3次，洗滌后，收集上清液備用；i、將h步驟備用的上清液加熱濃縮，回收石油醚，得角鯊烯粗油備用；j、將i步驟備用的角鯊烯粗油經(jīng)超臨界二氧化碳萃取，即得角鯊烯含量> 80%的角鯊 烯精油。
2. 一種應(yīng)用權(quán)利要求1所述方法提取的角鯊烯制備的茶油角鯊烯軟膠囊，其特征在于 制成其有效成分的原料組成重量百分比為角鯊烯含量>80%的角鯊烯精油87-90聚乙二醇400 3-5蜂蠟2-3磷脂2-5。
全文摘要
本發(fā)明公開的以油茶籽為原料提取角鯊烯的方法及茶油角鯊烯軟膠囊，涉及生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，其提取方法的工藝流程為備料、粉碎、浸提、濃縮、甲酯化反應(yīng)、配位劑-硼砂反應(yīng)、大孔樹脂色譜分離純化、濃縮、萃取、洗滌、濃縮、得角鯊烯粗油、超臨界二氧化碳萃取、即得角鯊烯含量≥80％的角鯊烯精油；其茶油角鯊烯軟膠囊是由以下按重量百分比的原料制成角鯊烯含量≥80％的角鯊烯精油87-90、聚乙二醇400 3-5、蜂蠟2-3和磷脂2-5。其原料來(lái)源廣泛，所制成的茶油角鯊烯軟膠囊，既可藥用、又可食療，尤其適于肝炎、脂肪肝、急慢性炎癥患者、腫瘤患者、化療患者以及糖尿病、心腦血管病患者做治療和食療服用，且無(wú)任何毒副作用。
文檔編號(hào)A61P37/02GK102146014SQ201110027119
公開日2011年8月10日 申請(qǐng)日期2011年1月22日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月22日
發(fā)明者李文東, 李昕, 桂平, 管天球, 鄒先明, 鄭曉宏 申請(qǐng)人:李文東