專利名稱：一種單分散納米微球藥物載體的制備方法
技術領域：
本發(fā)明屬于藥用納米微球材料的制備領域，具體涉及一種單分散納米微球藥物載 體的制備方法。
背景技術：
納米微球是指直徑在納米級至微米級，形狀為球形或其它幾何形狀的高分子材料 或高分子復合材料，其形貌可以包括實心、空心、多孔等等。由于其獨特的形狀和形貌，單分 散性的納米級及微米級聚合物微粒具備其它材料所不具備的特殊功能，已經(jīng)廣泛應用于納 米技術、粒子吸附、生物化學、聚合物填料、催化劑、電子信息、藥物控制釋放等領域。聚(乳酸-羥基乙酸)共聚物(PolyLactic-co-Glycolic Acid，簡稱=PLGA)由 乳酸和羥基乙酸兩種單體隨機聚合而成，是一種可生物降解的功能高分子有機化合物，具 有良好的生物相容性、無毒、良好的成球和成膜的性能，被廣泛應用于藥物載體、醫(yī)用工程 材料領域。在美國PLGA通過食品和藥物管理局(FDA)認證，被正式作為藥用輔料收錄進美 國藥典。由于PLGA具有生物可降解性，并且其降解速度可通過調(diào)整分子量和鏈段共聚比來 控制，因此可用于構建具有不同藥物釋放模型的可控釋放載體材料。目前制備PLGA納米微球藥物載體的方法主要有沉淀法、乳化法、溶劑蒸發(fā)法、噴 霧干燥法、相分離法、透析法等。其中乳化法是制備PLGA藥物載體微球最常用的方法。該 方法是將不相混溶的兩相通過機械攪拌或超聲乳化方式制成乳化液，揮發(fā)除去內(nèi)相溶劑， 成球材料析出，固化成微球。該方法中常用的乳化劑是聚乙烯醇(簡稱PVA)。聚乙烯醇 雖然具有較好的成球效果，但本身具有一定毒性；而且如需制備直徑小于500nm的微球載 體，則需要使用高濃度的聚乙烯醇，高濃度聚乙烯醇粘度大，制備過程中洗滌工序繁瑣且容 易殘留；此外，由高粘度聚乙烯醇為乳化劑制備的納米微球分布較寬，容易形成較大粒徑微 球，影響藥物載體的整體均一性，導致在藥物緩控釋階段中不易精準控制。

發(fā)明內(nèi)容
聚乙二醇1000維生素E琥珀酸酯是維生素E的水溶性衍生物，它既含有維生素E 親脂基團，又含有聚乙二醇長鏈的親水基團，是一種非離子型表面活性劑，室溫時臨界膠束 濃度的質量分數(shù)約為0. 02%，親水親油平衡值約為13 17，可用作增溶劑、乳化劑、吸收增 強劑、水溶性維生素E的原料，以提高藥物的生物利用度，提高水溶性差的藥物的溶解性， 從而作為藥物釋放系統(tǒng)、抗癌藥的載體等。而毒理學研究也表明，聚乙二醇1000維生素E 琥珀酸酯作為藥用輔料非常安全。本發(fā)明的目的在于針對制備PLGA藥物載體納米微球的傳統(tǒng)技術缺陷，提供一種 單分散納米微球藥物載體的制備方法，采用聚乙二醇1000維生素E琥珀酸酯作為乳化劑， 獲得球型規(guī)整，粒度在100 500nm之間、大小可控、尺寸均一性好的PLGA單分散納米微球 藥物載體。本發(fā)明的目的通過以下技術方案實現(xiàn)
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一種單分散納米微球藥物載體的制備方法，包括以下步驟(1)將聚(乳酸-羥基乙酸)共聚物溶于有機溶劑構成有機相；(2)將乳化劑溶于蒸餾水構成水相；(3)在超聲和攪拌的協(xié)同作用下，冰水浴下將有機相按體積比滴加到水相中形成 水包油型的乳化溶液；(4)將上述乳化溶液在常溫下繼續(xù)攪拌4 20h，并去除有機溶劑；(5)低速離心去除聚集物后，對上清液超濾冷凍離心和水洗，得到單分散納米微球 藥物載體。本發(fā)明所述聚(乳酸-羥基乙酸)共聚物的平均分子量為5000 1000000，質量 濃度為lmg/mL 100mg/mL;分子鏈段中的丙交酯乙交酯(簡稱LA GA)的摩爾比為 90 10,85 15,75 25,60 40 或 50 50。本發(fā)明所述有機溶劑為二氯甲烷、氯仿、丙酮、乙醇、N’ N’ - 二甲基甲酰胺或乙酸 乙酯中的一種或兩種以上。本發(fā)明所述乳化劑為聚乙二醇1000維生素E琥珀酸酯；水相中聚乙二醇1000維 生素E琥珀酸酯的質量分數(shù)為0. 02 2 %。本發(fā)明所述超聲的功率為40W 500W，攪拌的速度為400 lOOOr/min，攪拌和超 聲的協(xié)同作用時間為1 30min。本發(fā)明所述有機相與水相的體積比為1 20 1 200，滴加速度為0.5滴/秒
至10滴/秒。本發(fā)明所述低速離心的轉速為1000 3000rpm，優(yōu)選2000rpm ；時間為2 lOmin。本發(fā)明所述超濾冷凍離心的轉速為3000 15000rpm，水洗的次數(shù)為3 5次。通過本發(fā)明得到的單分散納米微球藥物載體球型規(guī)整，粒度在100 500nm，大小 可控，尺寸均一性好，單分散性能好。本發(fā)明與現(xiàn)有技術相比，具有如下優(yōu)點1.采用PLGA作為載體材料，制備的單分散納米微球藥物載體具有良好的生物相 容性、無毒、良好的成球性能，生物可降解性，可控釋放藥物；2.采用聚乙二醇1000維生素E琥珀酸酯作為乳化劑，乳化效率高，生物安全性好， 避免了常用乳化劑聚乙烯醇的高粘度不易操作和自身毒性對納米微球載體的影響；3.制備的單分散納米微球藥物載體球型規(guī)整，粒度在100 500nm，大小可控，尺 寸均一性好，單分散性能好。


圖1是本發(fā)明實施例2所制備的單分散納米微球粒度分布圖。圖2是本發(fā)明實施例4所制備的單分散納米微球藥物載體的透射電子顯微鏡照 片。圖3是本發(fā)明實施例5所制備的單分散納米微球藥物載體的掃描電子顯微鏡照 片。
具體實施例方式下面結合附圖對本發(fā)明進行進一步的說明。實施例1(1)將60mg聚(乳酸-羥基乙酸)共聚物(分子量30000，LA GA = 50 50) 溶于Iml N’ N’ - 二甲基甲酰胺中構成有機相；(2)將0. 004mg聚乙二醇1000維生素E琥珀酸酯溶于200ml蒸餾水構成水相；(3)在100W超聲和IOOOrpm攪拌的協(xié)同作用下，冰水浴下將有機相以每秒0. 5滴 的速度滴加到水相中，1分鐘后滴加完畢，停止超聲；(4)常溫下繼續(xù)攪拌6h，旋轉蒸發(fā)儀上揮發(fā)以盡量去除有機溶劑；(5) IOOOrpm離心去除聚集物，上清液再經(jīng)3000rpm超濾冷凍離心lOmin，水洗3 次，得單分散納米微球藥物載體。本實施制備的納米微球藥物載體經(jīng)動態(tài)激光粒度儀測定，其平均粒度為120nm，呈 單分散性。實施例2(1)將250mg聚(乳酸-羥基乙酸)共聚物(分子量30000，LA GA = 50 50) 溶于5ml N’ N’ - 二甲基甲酰胺中構成有機相；(2)將0. 05mg聚乙二醇1000維生素E琥珀酸酯溶于IOOml蒸餾水構成水相；(3)在200W超聲和600rpm攪拌的協(xié)同作用下，冰水浴下將有機相以每秒2滴的速 度滴加到水相中，5分鐘后滴加完畢，停止超聲；(4)常溫下繼續(xù)攪拌6h，旋轉蒸發(fā)儀上揮發(fā)以盡量去除有機溶劑；(5) 2000rpm離心去除聚集物，上清液再經(jīng)5000rpm超濾冷凍離心8min，水洗3次， 得單分散納米微球藥物載體。本實施制備的納米微球藥物載體經(jīng)動態(tài)激光粒度儀測定，其平均粒度為148nm，呈 單分散性。實施例3(1)將IOOmg聚(乳酸-羥基乙酸)共聚物(分子量25000，LA GA = 75 25) 溶于2ml N’ N’ - 二甲基甲酰胺中構成有機相；(2)將0. 2mg聚乙二醇1000維生素E琥珀酸酯溶于200ml蒸餾水構成水相；(3)在40W超聲和400rpm攪拌的協(xié)同作用下，冰水浴下將有機相以每秒4滴的速 度滴加到水相中，10分鐘后滴加完畢，停止超聲；(4)常溫下繼續(xù)攪拌6h，旋轉蒸發(fā)儀上揮發(fā)以盡量去除有機溶劑；(5) 2000rpm離心去除聚集物，上清液再經(jīng)8000rpm超濾冷凍離心6min，水洗4次， 得單分散納米微球藥物載體。本實施制備的納米微球藥物載體經(jīng)動態(tài)激光粒度儀測定，其平均粒度為174nm，呈 單分散性。由圖1可以看出，其納米微球粒度大小均一，成規(guī)整球型狀。實施例4(1)將60mg聚(乳酸-羥基乙酸)共聚物(分子量35000，LA GA = 50 50) 溶于2ml N’ N’ - 二甲基甲酰胺中構成有機相；
(2)將0. 45mg聚乙二醇1000維生素E琥珀酸酯溶于300ml蒸餾水構成水相；(3)在300W超聲和600rpm攪拌的協(xié)同作用下，冰水浴下將有機相以每秒8滴的速 度滴加到水相中，25分鐘后滴加完畢，停止超聲；(4)常溫下繼續(xù)攪拌6h，旋轉蒸發(fā)儀上揮發(fā)以盡量去除有機溶劑；(5)3000rpm離心去除聚集物，上清液再經(jīng)IOOOOrpm超濾冷凍離心4min，水洗4 次，得單分散納米微球藥物載體。本實施制備的納米微球藥物載體經(jīng)動態(tài)激光粒度儀測定，其平均粒度為234nm。由圖2可以看出，制備的納米微球藥物載體呈單分散性。實施例5(1)將IOOmg聚(乳酸-羥基乙酸)共聚物(分子量30000，LA GA = 50 50) 溶于2ml 二氯甲烷中構成有機相；(2)將0. 2mg聚乙二醇1000維生素E琥珀酸酯溶于IOOml蒸餾水構成水相；(3)在500W超聲和SOOrpm攪拌的協(xié)同作用下，冰水浴下將有機相以每秒10滴的 速度滴加到水相中，30分鐘后滴加完畢，停止超聲；(4)常溫下繼續(xù)攪拌6h，旋轉蒸發(fā)儀上揮發(fā)以盡量去除有機溶劑；(5)3000rpm離心去除聚集物，上清液再經(jīng)15000rpm超濾冷凍離心2min，水洗5 次，得單分散納米微球藥物載體。本實施制備的納米微球藥物載體經(jīng)動態(tài)激光粒度儀測定，其平均粒度為338nm。由圖3可以看出，制備的納米微球藥物載體呈單分散性。
權利要求
1.一種單分散納米微球藥物載體的制備方法，其特征在于，包括以下步驟(1)將聚(乳酸-羥基乙酸)共聚物溶于有機溶劑構成有機相；(2)將乳化劑溶于蒸餾水構成水相；(3)在超聲和攪拌的協(xié)同作用下，冰水浴下將有機相按體積比滴加到水相中形成水包 油型的乳化溶液；(4)將上述乳化溶液在常溫下繼續(xù)攪拌4 20h，并去除有機溶劑；(5)低速離心去除聚集物后，對上清液超濾冷凍離心和水洗，得到單分散納米微球藥物 載體。
2.根據(jù)權利要求1所述一種單分散納米微球藥物載體的制備方法，其特征在于步驟 (1)中，所述聚(乳酸-羥基乙酸)共聚物的平均分子量為5000 1000000，質量濃度為 lmg/mL 100mg/mL;分子鏈段中丙交酯乙交酯的摩爾比為90 10,85 15,75 25、 60 40 或 50 50。
3.根據(jù)權利要求1所述一種單分散納米微球藥物載體的制備方法，其特征在于步驟(1)中，所述有機溶劑為二氯甲烷、氯仿、丙酮、乙醇、N’N’ - 二甲基甲酰胺或乙酸乙酯中的 一種或兩種以上。
4.根據(jù)權利要求1所述一種單分散納米微球藥物載體的制備方法，其特征在于步驟(2)中，所述乳化劑為聚乙二醇1000維生素E琥珀酸酯；水相中聚乙二醇1000維生素E琥 珀酸酯的質量分數(shù)為0. 02 2%。
5.根據(jù)權利要求1所述一種單分散納米微球藥物載體的制備方法，其特征在于步驟 ⑶中，所述超聲的功率為40W 500W，攪拌的速度為400 lOOOr/min，攪拌和超聲的協(xié)同 作用時間為1 30min。
6.根據(jù)權利要求1所述一種單分散納米微球藥物載體的制備方法，其特征在于步驟(3)中，所述有機相與水相的體積比為1 20 1 200，滴加速度為0.5滴/秒至10滴 /秒。
7.根據(jù)權利要求1所述一種單分散納米微球藥物載體的制備方法，其特征在于步驟 (5)中，所述低速離心的轉速為1000 3000rpm ；時間為2 IOmin。
8.根據(jù)權利要求1所述一種單分散納米微球藥物載體的制備方法，其特征在于步驟 (5)中，所述超濾冷凍離心的轉速為3000 15000rpm，水洗的次數(shù)為3 5次。
9.根據(jù)權利要求1至8之一所述一種單分散納米微球藥物載體的制備方法，其特征在 于所述單分散納米微球藥物載體粒度為100 500nm。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種單分散納米微球藥物載體的制備方法。該方法包括以下步驟將聚(乳酸-羥基乙酸)共聚物溶于有機溶劑構成有機相；將乳化劑溶于蒸餾水構成水相；在超聲和攪拌的協(xié)同作用下，冰水浴下將有機相按體積比滴加到水相中形成水包油型的乳化溶液；將上述乳化溶液在常溫下繼續(xù)攪拌4～20h，并去除有機溶劑；低速離心去除聚集物后，對上清液超濾冷凍離心和水洗，得到單分散納米微球藥物載體。本發(fā)明制備的單分散納米微球，球型規(guī)整，粒度在100～500nm之間，大小可控，尺寸均一性好，適用于包載各種水溶性或脂溶性的藥物，具有生物可降解性，可控釋放藥物等優(yōu)點。
文檔編號A61K47/34GK102091042SQ20111000869
公開日2011年6月15日 申請日期2011年1月14日 優(yōu)先權日2011年1月14日
發(fā)明者凌友, 魏坤 申請人:華南理工大學