專利名稱：一種抗癌藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種抗癌藥物組合物，特別涉及一種含有牛蒡苷元和紫杉醇類藥物的藥物組合物。
背景技術(shù)：
目前，癌癥是當(dāng)前嚴(yán)重影響人類健康、威脅人類生命的主要疾病之一。癌癥、心腦血管疾病和意外事故，構(gòu)成當(dāng)今世界所有國家三大死亡原因。因此，世界衛(wèi)生組織和各國政府衛(wèi)生部門都把攻克癌癥列為一項首要任務(wù)。世界上治療癌癥的方法主要有三種，一是采用手術(shù)切除法，切除病變組織，防止癌細胞擴散；二是采用化療或放療，以殺死癌細胞 ’三是用藥物治療。采用手術(shù)切除的方法增加了病人的痛苦，傷其元氣，費用巨大。用化療或放療的方法，在殺死癌細胞的同時，也傷及紅細胞和白細胞，病人苦不堪言。非小細胞肺癌為最常見的肺癌病理類型，約占肺癌的85%左右。非小細胞肺癌又包括鱗狀上皮細胞癌、腺癌和大細胞癌等幾種類型，非小細胞癌的癌細胞生長緩慢，惡性程度相對低些，擴散轉(zhuǎn)移發(fā)生的較晚。臨床上非小細胞肺癌的治療主要包括外科手術(shù)治療、放射治療、化學(xué)治療、中醫(yī)藥治療以及以分子靶向治療為代表的新型治療方法，但是非小細胞肺癌對化療、放療的敏感性差，尋找有效的治療方法是當(dāng)前非小細胞肺癌治療亟需解決的問題。牛蒡子為菊科植物牛蒡的干燥成熟果實，是常用中藥，具有疏散風(fēng)熱、宣肺透疹、 解毒利咽的功能，用于風(fēng)熱感冒、咳嗽痰多、麻疹、風(fēng)疹、咽喉腫痛、癢腮丹毒、癰腫瘡毒。該中藥含有木脂素類化合物，主要是牛蒡苷(arctiin)和牛蒡苷元(arctigenin)等。據(jù)文獻報道，牛蒡苷元比牛蒡苷具有更強的生物活性，比如顯著的抗菌、抗病毒、抗腫瘤、抗PAF 受體及鈣拮抗活性。王潞等在《牛蒡子苷及牛蒡苷子苷元的藥理作用研究進展》(中草藥， 第39卷第3期，2008年，467-470頁)公開了牛蒡苷元具有抗肺癌的活性。以4-硝基喹啉-N-氧化劑為引發(fā)劑，以甘油為促進劑誘發(fā)大鼠肺癌，進行大鼠肺癌的二相癌變試驗，結(jié)果表明牛蒡苷元具有抗大鼠肺癌的活性。但是該文獻及其它現(xiàn)有文獻沒有公開牛蒡苷元具有治療非小細胞肺癌的活性。紫杉醇是紅豆杉屬植物中的一種復(fù)雜的次生代謝產(chǎn)物，是一種可以促進微管聚合和穩(wěn)定已聚合微管的藥物。同位素示蹤表明，紫杉醇只結(jié)合到聚合的微管上，不與未聚合的微管蛋白二聚體反應(yīng)。細胞接觸紫杉醇后會在細胞內(nèi)積累大量的微管，這些微管的積累干擾了細胞的各種功能。特別是使細胞分裂停止于有絲分裂期，阻斷了細胞的正常分裂。通過II-III臨床研究，紫杉醇主要適用于卵巢癌和乳腺癌，對肺癌、大腸癌、黑色素瘤、頭頸部癌、淋巴瘤、腦瘤也都有一定療效。多西紫杉醇是紫杉醇的衍生物，水溶性比紫杉醇好，抑制微管解聚的能力比紫杉醇大2倍，對許多體外和體內(nèi)腫瘤模型的細胞毒活性也高于紫杉醇。臨床研究發(fā)現(xiàn)，多西紫杉醇對多種化療耐藥性實體瘤有效。Gemey報道，對既往未行化療的非小細胞肺癌的有效率為33%。尚春迎等在《紫杉醇聯(lián)合順鉬治療晚期非小細胞肺癌的臨床研究》(中國醫(yī)藥指南，2010年2月第8卷，第5期，第55-56頁)公開了紫杉醇聯(lián)合順鉬治療晚期非小細胞肺癌的技術(shù)方案，紫杉醇135mg/m2，第一天靜脈滴注池，順鉬30mg/m2，第1_3天靜脈滴注，4周為1周期，紫杉醇滴注前采取防過敏措施，但是紫杉醇和順鉬不是同時靜脈滴注的。何安兵等在《多西紫杉醇聯(lián)合奧沙利鉬治療晚期非小細胞肺癌的臨床觀察》(現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2010 年01月，第18卷第01期，第100-101頁)公開了多西紫杉醇聯(lián)合奧沙利鉬治療晚期非小細胞肺癌的技術(shù)方案，多西紫杉醇35mg/m2，第1、8天靜脈滴注池；奧沙利鉬130mg/m2，第一天靜脈滴注池，3周1次為一個周期，但是多西紫杉醇和奧沙利鉬也不是同時給藥的。上述兩篇文獻公開的技術(shù)方案中紫杉醇或多西紫杉醇與鉬類藥物不是以藥物組合物的形式給藥的。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種對非小細胞肺癌很有效的抗癌藥物組合物，該藥物組合物中含有如下活性組分(1)牛蒡苷元；和(2)紫杉醇類。上述紫杉醇類化合物為紫杉醇或多西紫杉醇。本發(fā)明將牛蒡苷元、紫杉醇、多西紫杉醇或它們的可藥用鹽分別單獨給藥用于治療小鼠非小細胞肺癌后，發(fā)現(xiàn)牛蒡苷元對小鼠的非小細胞肺癌有一定的治療效果，與模型組相比具有顯著性差異。為此本發(fā)明提供了牛蒡苷元在醫(yī)藥領(lǐng)域的一種新應(yīng)用，即牛蒡苷元可以作為治療非小細胞肺癌的藥物使用，牛蒡苷元單獨給藥用于治療非小細胞肺癌的有效劑量為 0. l-100mg/kg。本發(fā)明將上述藥物組合物注射給藥用于治療小鼠的非小細胞肺癌，該藥物組合物中含有(1)牛蒡苷元和(2)紫杉醇或多西紫杉醇。其中牛蒡苷元的有效劑量為0. I-IOOmg/ kg，上述紫杉醇的有效劑量為l-100mg/kg，多西紫杉醇的有效劑量為0. l-100mg/kg。給藥時間和給藥次數(shù)需要根據(jù)醫(yī)生對病情的診斷結(jié)果而定。將對小鼠的非小細胞肺癌的治療方案應(yīng)用于人身上，所有藥物對人的有效劑量可以通過該藥物對小鼠的有效劑量進行換算， 這對于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說是顯而易見的。優(yōu)選地，上述藥物組合物中牛蒡苷元與紫杉醇的重量比為(0.001-100) 1，此時牛蒡苷元和紫杉醇的組合物在抑制非小細胞肺癌方面效果極其顯著，與單獨給藥牛蒡苷元或紫杉醇相比，在抑制非小細胞肺癌方面具有協(xié)同作用。優(yōu)選地，上述藥物組合物中牛蒡苷元與多西紫杉醇的重量比為 (0. 001-1000) 1，此時牛蒡苷元和多西紫杉醇的組合物在抑制非小細胞肺癌方面效果極其顯著，與單獨給藥牛蒡苷元或多西紫杉醇相比，在抑制非小細胞肺癌方面具有協(xié)同作用。另外，我們考察了牛蒡苷元與紫杉醇或多西紫杉醇的藥物組合物的不良反應(yīng)發(fā)生率，通過對試驗小鼠毒副作用諸如腹瀉、精神萎靡等觀察發(fā)現(xiàn)，與單獨給藥同劑量的紫杉醇或多西紫杉醇相比，牛蒡苷元與紫杉醇或多西紫杉醇的藥物組合物的不良反應(yīng)發(fā)生率降低約15% 20%。這為臨床上降低紫杉醇或多西紫杉醇藥物劑量提供了一種途徑，即聯(lián)合牛蒡苷元同時給藥。為此本發(fā)明還提供了一種治療非小細胞肺癌的方法，即給與本發(fā)明的藥物組合物，在藥物組合物中含有(1)牛蒡苷元 l_800mg ；禾口(2)紫杉醇10_500mg ；或多西紫杉醇10_500mg。為了更好的表達該藥物組合物的形式，本發(fā)明制備了該藥物組合物的微乳制劑和注射制劑。所述的微乳制劑可以按照常規(guī)制備方法進行制備，制備的微乳制劑的平均粒徑為15-80nm。所述的注射制劑可以按照常規(guī)制劑進行制備。總之，本發(fā)明提供的藥物組合物同現(xiàn)有技術(shù)相比，具有如下突出的優(yōu)勢第一，現(xiàn)有技術(shù)中紫杉醇或多西紫杉醇與鉬類藥物不是以藥物組合物的形式同時給藥的，大都采用按照順序先后依次給藥，而本發(fā)明將紫杉醇或多西紫杉醇與牛蒡苷元的藥物組合物或藥物制劑同時給藥治療非小細胞肺癌，極大地方便患者的使用，提高了癌癥治療的順應(yīng)性。第二，與單獨使用紫杉醇或多西紫杉醇、牛蒡苷元相比，本發(fā)明提供的藥物組合物在治療非小細胞肺癌方面具有顯著的協(xié)同抗癌作用。與紫杉醇聯(lián)合順鉬、多西紫杉醇聯(lián)合奧沙利鉬治療非小細胞肺癌相比，本發(fā)明提供的藥物組合物在抗非小細胞肺癌活性方面具有顯著的差異。第三，該藥物組合物具有較低的毒副作用。由于牛蒡苷元本身毒性很低，牛蒡苷元與紫杉醇或多西紫杉醇作為組合物使用，在達到同樣的抗癌療效的情況下，可以顯著降低紫杉醇或多西紫杉醇的用量，這樣可以進一步降低由紫杉醇或多西紫杉醇帶來的毒副作用。與單獨給藥同劑量的紫杉醇或多西紫杉醇相比，牛蒡苷元與紫杉醇或多西紫杉醇的藥物組合物的不良反應(yīng)發(fā)生率降低約15% 20%。
具體實施例方式以下通過具體實施方式
進一步描述本發(fā)明，本發(fā)明不僅僅限于以下實施例。實施例1本發(fā)明藥物組合物微乳制劑牛蒡苷元0. Olg紫杉醇IOg薄荷油35g聚氧乙烯-23-月桂基醚60g1，2-丙二醇30g 制備工藝稱取處方量薄荷油、聚氧乙烯-23-月桂基醚、1，2-丙二醇，混合后攪拌均勻，然后加入牛蒡苷元、紫杉醇溶解，也可以超聲波處理以加速溶解，得澄清濃縮液，即為牛蒡苷元與紫杉醇微乳濃縮物。激光粒度測定儀測定其粒徑，平均粒徑為15nm。實施例2本發(fā)明藥物組合物微乳制劑
牛蒡苷元IOg
紫杉醇0. Ig
氫化椰油甘油酯5g
月桂?；垡叶^ -32-甘油酯20g
1，2_丙二醇5g
聚乙二醇335020g
制備工藝稱取處方量氫化椰油甘油脂、月桂?；垡叶?32-甘油酯、1，2_丙二醇、聚乙二醇3350，混合后攪拌均勻，然后加入牛蒡苷元、紫杉醇溶解，也可以超聲波處理以加速溶解，得澄清濃縮液，即為牛蒡苷元與紫杉醇微乳濃縮物。激光粒度測定儀測定其粒徑，平均粒徑為40nm。實施例3本發(fā)明藥物組合物微乳制劑牛蒡苷元IOg紫杉醇IOg薄荷油35g聚氧乙烯-23-月桂基醚 60g 1，2-丙:
30g
制備工藝同實施例2。激光粒度測定儀測定其粒徑，平均粒徑為36nm。 實施例4本發(fā)明藥物組合物微乳制劑牛蒡苷元o.oig
多西紫杉醇IOg
留蘭香油30g
十甘油單硬脂酸酯^g
1，2_ 丙:
25g制備工藝稱取處方量留蘭香油、十甘油單硬脂酸酯、1，2-丙二醇，混合后攪拌均勻，然后加入牛蒡苷元、多西紫杉醇溶解，也可以超聲波處理以加速溶解，得澄清濃縮液，即為牛蒡苷元與多西紫杉醇的微乳濃縮物。激光粒度測定儀測定其粒徑，平均粒徑為76nm。實施例5本發(fā)明藥物組合物微乳制劑牛蒡苷元2g多西紫杉醇2g留蘭香油30g十甘油單硬脂酸酯55g 1，2-丙:
25g

制備工藝同實施例4。激光粒度測定儀測定其粒徑，平均粒徑為47nm。 實施例6本發(fā)明藥物組合物微乳制劑牛蒡苷元IOg
多西紫杉醇0. Olg
留蘭香油30g
十甘油單硬脂酸酯 ^g
1，2_ 丙:
25g
制備工藝同實施例4。激光粒度測定儀測定其粒徑，平均粒徑為58nm。 實施例7本發(fā)明藥物組合物注射劑牛蒡苷元o.oig
多西紫杉醇IOg
氯化鈉 1，2_ 丙:
0. 85g 1.5g
制備工藝取處方量的牛蒡苷元和多西紫杉醇，加入適量的蒸餾水，再加入1， 2-丙二醇進行充分溶解，加入氯化鈉，過濾、灌封，100攝氏度滅菌30min即得。實施例8本發(fā)明藥物組合物注射劑牛蒡苷元0. 5g多西紫杉醇0. 5g氯化鈉0. 85g1，2-丙二醇1.5g制備工藝取處方量的牛蒡苷元和多西紫杉醇，加入適量的蒸餾水，再加入1， 2-丙二醇進行充分溶解，加入氯化鈉，過濾、灌封，100攝氏度滅菌30min即得。實施例9本發(fā)明藥物組合物注射劑牛蒡苷元IOg多西紫杉醇0. Olg氯化鈉0. 85g1，2-丙二醇1.5g制備工藝取處方量的牛蒡苷元和多西紫杉醇，加入適量的蒸餾水，再加入1， 2-丙二醇進行充分溶解，加入氯化鈉，過濾、灌封，100攝氏度滅菌30min即得。實施例10本發(fā)明藥物組合物注射劑牛蒡苷元0. Olg紫杉醇IOg氯化鈉0. 85g1，2-丙二醇1.5g制備工藝取處方量的牛蒡苷元和紫杉醇，加入適量的蒸餾水，再加入1，2_丙二醇進行充分溶解，加入氯化鈉，過濾、灌封，100攝氏度滅菌30min即得。實施例11本發(fā)明藥物組合物注射劑牛蒡苷元0. 5g紫杉醇Ig氯化鈉0. 85g1，2-丙二醇1.5g制備工藝取處方量的牛蒡苷元和紫杉醇，加入適量的蒸餾水，再加入1，2_丙二醇進行充分溶解，加入氯化鈉，過濾、灌封，100攝氏度滅菌30min即得。實施例12本發(fā)明藥物組合物注射劑牛蒡苷元IOg紫杉醇0. Ig氯化鈉0. 85g1，2-丙二醇1.5g制備工藝取處方量的牛蒡苷元和紫杉醇，加入適量的蒸餾水，再加入1，2_丙二醇進行充分溶解，加入氯化鈉，過濾、灌封，100攝氏度滅菌30min即得。實施例13本發(fā)明藥物組合物對人肺癌A549細胞裸鼠移植瘤生長的影響1材料與方法
1. 1細胞株肺癌細胞株A549細胞株購自武漢大學(xué)中國典型培養(yǎng)物保藏中心(中國武漢市)。1.2藥品和試劑RPMI-1640培養(yǎng)基，Gibeo公司產(chǎn)品；新生小牛血清，杭州四季青生物工程材料有限公司生產(chǎn)；0. 25%胰蛋白酶，Sigma公司生產(chǎn)。1. 3人肺癌裸鼠移植瘤治療實驗SPF級BALB/c-nu小鼠200只，中國藥品生物制品檢定所提供SCXK 11-00-0010， 6周齡，體質(zhì)量168-188。取對數(shù)生長期4549細胞，用無菌？83調(diào)整々549細胞濃度為3\107 mL,在BALB/c-nu小鼠背部皮下接種A549細胞0. 1ml，待皮下移植瘤體積達75mm3左右時 (約IOd)，按瘤體積和荷瘤鼠體重均衡原則分為14組，每組12只。模型對照組腹腔注射等量的生理鹽水；牛蒡苷元低量組腹腔注射0. 01mg/kg牛蒡苷元；牛蒡苷元中量組腹腔注射lmg/kg牛蒡苷元；牛蒡苷元高量組腹腔注射10mg/kg牛蒡苷元；紫杉醇組腹腔注射0. 4mg/kg ；多西紫杉醇組腹腔注射100mg/kg ；紫杉醇+順鉬組腹腔注射lmg/kg紫杉醇+lmg/kg順鉬；多西紫杉醇+奧沙利鉬組腹腔注射lmg/kg多西紫杉醇+lmg/kg奧沙利鉬；牛蒡+紫杉醇A組腹腔注射如實施例1的微乳制劑(0. 01mg/kg牛蒡苷元+IOmg/ kg紫杉醇)；牛蒡+紫杉醇B組腹腔注射如實施例3的微乳制劑(lmg/kg牛蒡苷元+lmg/kg 紫杉醇)；牛蒡+紫杉醇C組腹腔注射如實施例2的微乳制劑(10mg/kg牛蒡苷元+0. Img/ kg紫杉醇)；牛蒡+多西紫杉醇A組腹腔注射如實施例4的微乳制劑(0. Olmg/kg牛蒡苷元 +10mg/kg多西紫杉醇)；牛蒡+多西紫杉醇B組腹腔注射如實施例5的微乳制劑(lmg/kg牛蒡苷元+Img/ kg多西紫杉醇)；牛蒡+多西紫杉醇C組腹腔注射實施例6的微乳制劑(10mg/kg牛蒡苷元 +0.0 lmg/kg多西紫杉醇)。隔日給藥1次，共計8次，給藥期間每4日用游標(biāo)卡尺測量移植瘤最長徑(L)和最短徑(w)。末次給藥4 后脫白處死小鼠，切除移植瘤，稱取瘤重。瘤重抑制率(％)IR = (1-實驗組瘤重均值/對照組瘤重均值)X 100 %。通過瘤重的比較來體現(xiàn)藥物對人肺癌 A549細胞裸鼠抑制瘤生長的影響。1.4統(tǒng)計學(xué)處理數(shù)據(jù)以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用SPSS15. O軟件進行方差分析。2 結(jié)果試驗結(jié)果表明(見表1):1)與模型對照組相比，各治療組對人肺癌A549細胞裸鼠移植瘤生長的抑制作用均具有顯著性差異。2)與順鉬+紫杉醇組相比，牛蒡苷元和紫杉醇對人肺癌A549細胞裸鼠移植瘤生長的抑制作用具有顯著性差異。該牛蒡苷元和紫杉醇的藥物組合物在治療非小細胞肺癌方面效果很好。3)與奧沙利鉬+多西紫杉醇相比，牛蒡苷元和多西紫杉醇組合物對人肺癌A549細胞裸鼠移植瘤生長的抑制作用具有顯著性差異。該藥物組合物在治療非小細胞肺癌方面效果很好。4)與紫杉醇、牛蒡苷元各單藥組相比，牛蒡苷元和紫杉醇的藥物組合物對人肺癌 A549細胞裸鼠移植瘤生長的抑制作用具有極顯著性差異(ρ < 0. 01)，并具有協(xié)同作用。5)與多西紫杉醇、牛蒡苷元各單藥組相比，牛蒡苷元和多西紫杉醇的藥物組合物對人肺癌A549細胞裸鼠移植瘤生長的抑制作用具有極顯著性差異(ρ < 0. 01)，并具有協(xié)同作用。6)本試驗同時考察了牛蒡苷元與紫杉醇或多西紫杉醇的藥物組合物的不良反應(yīng)發(fā)生率，通過對試驗小鼠毒副作用諸如腹瀉、精神萎靡等觀察發(fā)現(xiàn)，與單獨給藥同劑量的紫杉醇或多西紫杉醇相比，牛蒡苷元與紫杉醇或多西紫杉醇的藥物組合物的不良反應(yīng)發(fā)生率降低約15% 20%。表1本發(fā)明藥物組合物對人肺癌A549細胞裸鼠移植瘤生長的影響
權(quán)利要求
1.一種抗癌藥物組合物，其特征在于它含有如下活性成分(1)牛蒡苷元；和(2)紫杉醇類藥物。
2.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于所述的紫杉醇類藥物為紫杉醇或多西紫杉醇。
3.如權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其特征在于所述的紫杉醇類藥物為紫杉醇。
4.如權(quán)利要求3所述的藥物組合物，其特征在于牛蒡苷元與所述的紫杉醇的重量比為 (0.001-100) 1。
5.如權(quán)利要求4所述的藥物組合物，其特征在于藥物組合物中含有牛蒡苷元l-800mg， 紫杉醇10-500mg。
6.如權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其特征在于所述的紫杉醇類藥物為多西紫杉醇。
7.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于牛蒡苷元與所述的多西紫杉醇的重量比為(0.001-1000) 1。
8.如權(quán)利要求7所述的藥物組合物，其特征在于藥物組合物中含有牛蒡苷元l-800mg， 多西紫杉醇10-500mg。
9.如權(quán)利要求1-8任一所述的藥物組合物，其特征在于它是微乳制劑，平均粒徑為 15 80nmo
10.如權(quán)利要求1-8任一所述的藥物組合物，其特征在于它是注射劑。
11.權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物在制備治療非小細胞肺癌藥物中的應(yīng)用。
12.如權(quán)利要求11所述的應(yīng)用，其特征在于所述的藥物組合物中紫杉醇類藥物為紫杉醇，牛蒡苷元與紫杉醇的重量比為(0.001-100) 1。
13.如權(quán)利要求12所述的應(yīng)用，其特征在于所述的藥物組合物中含有牛蒡苷元 l-800mg，紫杉醇 10-500mg。
14.如權(quán)利要求11所述的應(yīng)用，其特征在于所述的藥物組合物中紫杉醇類藥物為多西紫杉醇，牛蒡苷元與多西紫杉醇的重量比為(0.001-1000) 1。
15.如權(quán)利要求14所述的應(yīng)用，其特征在于所述的藥物組合物中含有牛蒡苷元 l-800mg，多西紫杉醇 10-500mg。
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及一種抗癌藥物組合物，它含有牛蒡苷元和紫杉醇類藥物。與單藥相比，本發(fā)明提供的藥物組合物在抑制非小細胞肺癌方面具有協(xié)同作用。本發(fā)明提供了含有該藥物組合物的微乳制劑和注射劑。
文檔編號A61P35/00GK102526024SQ20101062243
公開日2012年7月4日 申請日期2010年12月27日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月27日
發(fā)明者商慶節(jié), 趙志全 申請人:魯南制藥集團股份有限公司