專利名稱：從動物胎盤中提取生物活性肽的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種生物活性肽的提取方法，特別是涉及一種從動物胎盤中提取生物活性肽的方法。
背景技術(shù)：
胎盤是胎兒與母體營養(yǎng)物質(zhì)交換的重要組織，其中含有豐富的營養(yǎng)成分和多種生物活性物質(zhì)。胎盤提取物是以新鮮胎盤為主要原料，從健康胎盤中提取的物質(zhì)，如胎盤球蛋白、胎盤組織液、胎盤粉等，均具有保健、輔助治療的功效，在食品、化妝品、保健食品、藥品中有著廣泛的應(yīng)用。肽是蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)片段，氨基酸的有機(jī)合成物，多個氨基酸通過肽鍵連接成的肽稱為多肽。多肽是介于蛋白質(zhì)和氨基酸之間的物質(zhì)，具有調(diào)節(jié)人體內(nèi)環(huán)境，增強(qiáng)機(jī)體免疫力，凈化血液，促進(jìn)血液循環(huán)的功能。目前胎盤肽的提取一般是從人的胎盤中提取的，從動物胎盤中提取胎盤肽的報道幾乎沒有。同時，現(xiàn)有提取得到的胎盤肽一般都是大分子蛋白質(zhì)，不易為人體吸收，并且存在殘存病毒、細(xì)菌等病原體的缺陷。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種從健康動物胎盤中提取生物活性肽的方法。本發(fā)明從動物胎盤中提取生物活性肽的方法包括以下步驟1)、取新鮮健康動物胎盤，于_5°C 5°C環(huán)境下去除大血管、結(jié)締組織、胎膜，用水清洗干凈，在生理鹽水中以10000 13000轉(zhuǎn)/分的離心速度勻漿粉碎30 120秒，得到組織液；2)、將組織液在_35°C _45°C速凍M小時，然后解凍，反復(fù)三次，得到解凍的組織液；3)、35°C 40°C下，向解凍的組織液中加入Ca(OH)2懸混液和酶，調(diào)整pH值7 8. 5，孵育12小時，得到孵育組織液；4)、將孵育組織液以700 1000轉(zhuǎn)/分的離心速度離心20 60分鐘，取上清組織液超濾后得到超濾液；5)、將超濾液的pH值調(diào)整到4 4. 3，在35°C 40°C滅活病毒4小時，即得生物活性肽。本發(fā)明提取得到的生物活性肽是多肽、多核苷酸、核糖，或者其中任意兩種或三種物質(zhì)的混合物。上述提取方法中，所述組織液的速凍溫度優(yōu)選40°C。所述上清組織液的超濾是截留組織液中粒徑> 20nm的成分。在上述得到的生物活性肽中加入必要的輔料或輔助性成分后，可以作為用于制備美容用品或保健品的原料。
采用本發(fā)明提取方法提取得到的胎盤生物活性肽既含有低溫有效成分，又保留了高溫下易被破壞的活性物質(zhì)，所提取的生物活性肽為低分子量活性肽，利于人體吸收。本發(fā)明提取方法對生物活性肽中殘存的病毒、細(xì)菌等病原體進(jìn)行了滅活和去除處理，安全性高。 本發(fā)明提取方法操作簡便，工藝嚴(yán)格，產(chǎn)品有效性、安全性、穩(wěn)定性高。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1取新鮮健康的羊胎盤^(g，于0°C去除大血管、結(jié)締組織、胎膜，用水清洗干凈后， 加入一定量的生理鹽水，以13000轉(zhuǎn)/分的離心速度離心60秒，勻漿粉碎得到組織液10L。將IOL組織液在_40°C速凍M小時，自然解凍，反復(fù)三次，得到解凍的組織液。37°C下，向解凍的組織液中加入Ca(OH)2懸混液和酶，調(diào)整pH值為8，孵育12小時后得到孵育組織液。將孵育組織液以800轉(zhuǎn)/分的離心速度離心30分鐘，得到上清組織液 7L。將7L上清組織液加生理鹽水稀釋至10L，以20nm的超濾膜超濾，得到超濾液。將超濾液調(diào)整pH值到4. 15，在37°C滅活4小時，得到生物活性肽。上述生物活性肽在_35°C以下凍結(jié)，50Pa真空狀態(tài)下用于制備羊胎素膠囊。實(shí)施例2取新鮮健康的羊胎盤^(g，于5°C去除大血管、結(jié)締組織、胎膜，用水清洗干凈后， 加入一定量的生理鹽水，以10000轉(zhuǎn)/分的離心速度離心60秒，勻漿粉碎得到組織液10L。將IOL組織液在_45°C速凍M小時，自然解凍，反復(fù)三次，得到解凍的組織液。37°C下，向解凍的組織液中加入Ca (OH) 2懸混液和酶，調(diào)整pH值為8. 5，孵育12小時后得到孵育組織液。將孵育組織液以1000轉(zhuǎn)/分的離心速度離心30分鐘，得到上清組織液7L。將7L上清組織液加生理鹽水稀釋至10L，以20nm的超濾膜超濾，得到超濾液。將超濾液調(diào)整pH值到4，在37°C滅活4小時，得到生物活性肽。上述生物活性肽在-40°C以下凍結(jié)，70Pa真空狀態(tài)下用于制備羊胎素膠囊。
權(quán)利要求
1.一種從動物胎盤中提取生物活性肽的方法，包括以下步驟1)、取新鮮健康動物胎盤，于-5°C 5°C環(huán)境下去除大血管、結(jié)締組織、胎膜，用水清洗干凈，在生理鹽水中以10000 13000轉(zhuǎn)/分的離心速度勻漿粉碎30 120秒，得到組織液；2)、將組織液在_35°C _45°C速凍M小時，然后解凍，反復(fù)三次，得到解凍的組織液；3)、35°C 40°C下，向解凍的組織液中加入Ca(OH)2懸混液和酶，調(diào)整pH值7 8.5， 孵育12小時，得到孵育組織液；4)、將孵育組織液以700 1000轉(zhuǎn)/分的離心速度離心20 60分鐘，取上清組織液超濾后得到超濾液；5)、將超濾液的pH值調(diào)整到4 4.3，在35°C 40°C滅活病毒4小時，即得生物活性肽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從動物胎盤中提取生物活性肽的方法，其特征是所述組織液的速凍溫度為40°C。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從動物胎盤中提取生物活性肽的方法，其特征是所述上清組織液的超濾是截留組織液中粒徑> 20nm的成分。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從動物胎盤中提取生物活性肽的方法，其特征是提取得到的生物活性肽為多肽、多核苷酸、核糖，或者任意兩種或三種物質(zhì)的混合物。
全文摘要
從動物胎盤中提取生物活性肽的方法，是將新鮮健康動物胎盤洗凈后，勻漿粉碎得到組織液；連續(xù)速凍解凍三次后，加入Ca(OH)2懸混液和酶孵育得到孵育組織液，離心分離并超濾后，調(diào)整pH值到4～4.3，病毒滅活得到生物活性肽。采用本發(fā)明提取方法提取得到的胎盤生物活性肽既含有低溫有效成分，又保留了高溫下易被破壞的活性物質(zhì)，提取的生物活性肽為低分子量活性肽，利于人體吸收。本發(fā)明提取方法操作簡便，工藝嚴(yán)格，產(chǎn)品有效性、安全性、穩(wěn)定性高。
文檔編號A61P3/02GK102429830SQ201010295340
公開日2012年5月2日 申請日期2010年9月29日 優(yōu)先權(quán)日2010年9月29日
發(fā)明者王靖 申請人:王靖