專利名稱：裸花紫珠制劑中毛蕊花糖苷含量的測定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及裸花紫珠制劑中有效成分含量的測定方法，尤其涉及裸花紫珠制劑中毛蕊花糖苷含量的測定方法。
背景技術(shù)：
裸花紫珠(Callicarpanudiflorae)為馬鞭草科小灌木植物，有止血、抗菌、收斂、 解毒、鎮(zhèn)痛、以及促進(jìn)愈合的作用。其抗菌、抗病毒作用，尤其對金葡萄球菌、傷寒桿菌、肺炎雙球菌等均有不同的抑制作用，其中對金葡萄球菌，傷寒桿菌抑菌作用最強。裸花紫珠還可抑制毛細(xì)血管的通透性，對早期的炎癥滲出、腫脹有明顯的抗炎性反應(yīng)作用，同時可明顯縮短出、凝血時間，止血效果顯著。裸花紫珠的主要成分為黃酮甙、縮合鞣酸、中性樹脂、酚類、 多糖、羥基化合物及鎂、鈣、鐵鹽等，其中，紫珠萜酮、芹菜素、毛蕊花糖苷、木犀草素及其配糖體等黃酮類物質(zhì)的含量約為5%。當(dāng)以毛蕊花糖苷為指標(biāo)探討裸花紫珠浸膏的抗菌、抗炎和止血的藥理效果時，實驗結(jié)果表明，隨著毛蕊花糖苷含量的升高，裸花紫珠浸膏的抑菌抗炎和止血作用都增強。目前市場上裸花紫珠制劑主要有顆粒劑、膠囊、片劑、分散片、合劑、軟膠囊、栓劑等，上述制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)僅部分制劑進(jìn)行了總黃酮的含量測定，測定方法為紫外分光光度法，定量很不準(zhǔn)確，沒有關(guān)于裸花紫珠制劑中毛蕊花糖苷的含量測定方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種能準(zhǔn)確測定含量的裸花紫珠制劑中毛蕊花糖苷含量的測定方法。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案予以實現(xiàn)的
裸花紫珠制劑中毛蕊花糖苷含量的測定方法，采用高效液相色譜法測定裸花紫珠制劑供試品溶液中的毛蕊花糖苷含量，其特征是，色譜條件與系統(tǒng)適用性為用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，流動相為有機溶劑-酸性溶液，流動相中有機溶劑的體積百分比為10-30%，酸性溶液的體積百分比為70-90%，酸性溶液濃度為0-0. 3%，檢測波長為 322-345nm。所述流動相中的有機溶劑包括甲醇或乙腈中的一種，甲醇和乙腈均為色譜純；酸性溶液的酸包括醋酸或磷酸中的一種，醋酸和磷酸均為分析純。所述色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗的較優(yōu)條件為用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈-醋酸溶液為流動相，流動相中乙腈的重量百分比為16%，醋酸溶液的重量百分比為84%，醋酸溶液的濃度為0. 1%，檢測波長為332nm。所述裸花紫珠制劑供試品溶液的制備方法是取裸花紫珠制劑，相當(dāng)于裸花紫珠浸膏0. 05-1. 5g，稱定，置具塞三角瓶中，加入濃度為30-100%甲醇15-50ml，稱定重量，在功率250w和頻率33kHz下超聲處理15-45分鐘，放冷，再稱定重量，加濃度為30-100%甲醇補足減少的重量，搖勻。濾過，取續(xù)濾液用0. 45 μ m的微孔濾膜再次濾過，取續(xù)濾液，即得。
所述裸花紫珠顆粒供試品溶液的較優(yōu)制備方法是取裸花紫珠顆粒2袋，研細(xì)，取 0. 7g，相當(dāng)于裸花紫珠浸膏0. 187g，稱定，置具塞三角瓶中，加入濃度為50%甲醇25ml，稱定重量，在功率250w和頻率33kHz下超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，加濃度為50%甲醇補足減少的重量，搖勻。濾過，取續(xù)濾液用0. 45 μ m的微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得。所述裸花紫珠制劑為以裸花紫珠為主藥的單方制劑。所述裸花紫珠制劑為含有裸花紫珠的復(fù)方制劑。所述裸花紫珠制劑為含有裸花紫珠的固體制劑、液體制劑、外用制劑、軟膠囊、滴丸、和注射液。所述固體制劑為顆粒、膠囊、片劑、分散片、散劑、丸劑；液體制劑為合劑、口服液、 糖漿劑；外用制劑為栓劑、軟膏劑、乳膏劑。本發(fā)明的有益效果是能準(zhǔn)確有效的測定裸花紫珠制劑中毛蕊花糖苷的含量，誤差小，可進(jìn)一步提高裸花紫珠制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，確保裸花紫珠制劑的質(zhì)量和臨床效果。1.1 色譜條件的選擇色譜柱Dikma Diamonsil C18 O)柱，4. 6mmX 250mm， 5ym，流動相乙腈-濃度為0. 1%的醋酸溶液(乙腈與醋酸溶液的體積百分比為16:84)，流速lml/min，檢測波長332nm，柱溫室溫。在此條件下對照品、供試品在約15min相同時間有一色譜峰，見

圖1-圖2。1. 2陰性對照試驗按處方取不含裸花紫珠藥材的其他輔料，制成陰性對照樣品，再按所述裸花紫珠制劑供試品溶液的制備方法制成陰性對照品溶液，取陰性對照樣品與陰性對照品溶液各10ml，注入液相色譜儀，結(jié)果在對照品毛蕊花糖苷色譜峰相應(yīng)的位置上，無其它色譜峰出現(xiàn)，陰性對照對樣品測定無干擾，結(jié)果見陰性對照色譜圖3。1. 3提取溶劑的選擇分別選擇濃度為70%乙醇、甲醇、濃度為50%甲醇、乙醇為提取溶劑，分別稱取樣品細(xì)粉約0. 8g共4份，置具塞三角瓶中，各加入上述溶劑25ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，分別加入上述溶劑補足減失的重量，濾過。吸取續(xù)濾液，用微孔濾膜(0. 45 μ m)濾過，取濾液，即得對供試品溶液；另取毛蕊花糖苷對照品適量，加濃度為50%甲醇制成每Iml含0. 040mg的對照品溶液。分別吸取上述供試品溶液和對照品溶液各10ml，分別注入液相儀中，測得毛蕊花糖苷含量結(jié)果見表1。表1不同溶劑提取毛蕊花糖苷的含量
表1測定結(jié)果顯示，乙醇提取液中毛蕊花糖苷含量低，濃度為50%甲醇、濃度為70%乙醇提取液中毛蕊花糖苷含量較高，但濃度為70%乙醇提取液顏色較深，故采用濃度為50%甲醇作為提取溶劑。1.4樣品提取時間的考察取樣品，研細(xì)，稱取約0.7g，共3份，置50ml具塞三角瓶中，分別加入濃度為50%甲醇25ml，稱定重量，分別超聲處理15分鐘、30分鐘、45分鐘， 放冷，加濃度為50%甲醇補足減少的重量。濾過，吸取續(xù)濾液，用微孔濾膜(0. 45 μ m)濾過， 取濾液，即得。分別吸取1. 3中對照品溶液、供試品溶液各10ml，注入液相色譜儀，測定，即得。結(jié)果見表2。表2不同提取時間對測定結(jié)果的影響
權(quán)利要求
1.裸花紫珠制劑中毛蕊花糖苷含量的測定方法，采用高效液相色譜法測定裸花紫珠制劑供試品溶液中的毛蕊花糖苷含量，其特征在于色譜條件與系統(tǒng)適用性為用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，流動相為有機溶劑-酸性溶液，流動相中有機溶劑的體積百分比為10-30%，酸性溶液的體積百分比為70-90%，酸性溶液濃度為0-0. 3%，檢測波長為 322-345nm。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的裸花紫珠制劑中毛蕊花糖苷含量的測定方法，其特征在于 所述流動相中的有機溶劑包括甲醇或乙腈中的一種，甲醇和乙腈均為色譜純；酸性溶液的酸包括醋酸或磷酸中的一種，醋酸和磷酸均為分析純。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的裸花紫珠制劑中毛蕊花糖苷含量的測定方法，其特征在于 所述色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗為用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈-醋酸溶液為流動相，流動相中乙腈的重量百分比為16%，醋酸溶液的重量百分比為84%，醋酸溶液的濃度為0. 1%，檢測波長為332nm。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的裸花紫珠制劑中毛蕊花糖苷含量的測定方法，其特征在于所述裸花紫珠制劑供試品溶液的制備方法是取裸花紫珠制劑，相當(dāng)于裸花紫珠浸膏 0. 05-1. 5g，稱定，置具塞三角瓶中，加入濃度為30-100%甲醇15-50ml，稱定重量，在功率 250w和頻率33kHz下超聲處理15-45分鐘，放冷，再稱定重量，加濃度為30-100%甲醇補足減少的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液用0. 45 μ m的微孔濾膜再次濾過，取續(xù)濾液，即得。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的裸花紫珠制劑中毛蕊花糖苷含量的測定方法，其特征在于 所述裸花紫珠顆粒供試品溶液的較優(yōu)制備方法是取裸花紫珠顆粒2袋，研細(xì)，取0. 7g，相當(dāng)于裸花紫珠浸膏0. 187g，稱定，置具塞三角瓶中，加入濃度為50%甲醇25ml，稱定重量，在功率250w和頻率33kHz下超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，加濃度為50%甲醇補足減少的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液用0. 45 μ m的微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得。
6.根據(jù)權(quán)利要求1、3、4或5所述的裸花紫珠制劑中毛蕊花糖苷含量的測定方法，其特征在于所述裸花紫珠制劑為以裸花紫珠為主藥的單方制劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求1、3、4或5所述的裸花紫珠制劑中毛蕊花糖苷含量的測定方法，其特征在于所述裸花紫珠制劑為含有裸花紫珠的復(fù)方制劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求1、3、4或5所述的裸花紫珠制劑中毛蕊花糖苷含量的測定方法，其特征在于所述裸花紫珠制劑為含有裸花紫珠的固體制劑、液體制劑、外用制劑、軟膠囊、滴丸、和注射液。
9.根據(jù)權(quán)利要求1、3、4或5所述的裸花紫珠制劑中毛蕊花糖苷含量的測定方法，其特征在于所述固體制劑為顆粒、膠囊、片劑、分散片、散劑、丸劑；液體制劑為合劑、口服液、 糖漿劑；外用制劑為栓劑、軟膏劑、乳膏劑。
全文摘要
裸花紫珠制劑中毛蕊花糖苷含量的測定方法，涉及裸花紫珠制劑中有效成分含量的測定方法。采用高效液相色譜法測定裸花紫珠制劑供試品溶液中的毛蕊花糖苷含量，色譜條件與系統(tǒng)適用性為用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，流動相為有機溶劑–酸性溶液，流動相中有機溶劑的體積百分比為10-30%，酸性溶液的體積百分比為70-90%，酸性溶液濃度為0-0.3%，檢測波長為322-345nm。本發(fā)明的有益效果是能準(zhǔn)確有效的測定裸花紫珠制劑中毛蕊花糖苷的含量，誤差小，可進(jìn)一步提高裸花紫珠制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，確保裸花紫珠制劑的質(zhì)量和臨床效果。
文檔編號A61P7/04GK102204998SQ20101028913
公開日2011年10月5日 申請日期2010年11月30日 優(yōu)先權(quán)日2010年11月30日
發(fā)明者余寶平, 余顯英, 吳永忠, 張荷英, 李旭, 龔志南 申請人:江西普正制藥有限公司