專利名稱：聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體及其制備方法。
技術(shù)背景 聯(lián)苯雙酯(Bifendate，簡(jiǎn)稱DDB)是人工合成五味子丙素的中間體，是我國(guó)首創(chuàng)的 具有新型結(jié)構(gòu)的高效、低毒的保肝藥。其化學(xué)名為4，4’_ 二甲氧基-5，6，5’，6’_ 二次甲二 氧-2，2’_ 二甲酸甲酯聯(lián)苯，分子式為=C2tlH18Oltl，分子量為418. 36。本品為一種白色結(jié)晶性 粉末，無(wú)臭無(wú)味，幾乎不溶于水，微溶于甲醇及乙醇，易溶于氯仿、二甲基甲酰胺季吡啶，呈 一定的脂溶性。臨床研究表明聯(lián)苯雙酯的主要藥理作用有⑴具有顯著的保肝降酶作用能明 顯降低血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(glutamic pyrumic transaminase,GPT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(glutamic Oxalictransaminase, GOT) ； (2)增強(qiáng)肝臟的解毒功能在體內(nèi)可使P_450等肝微粒體的含 量顯著增加，進(jìn)而增強(qiáng)肝臟的解毒能力；(3)保護(hù)肝臟免受毒物損傷減輕由四氯化碳、抗 癌藥、抗結(jié)核藥等化學(xué)物質(zhì)引起的肝損傷；(4)抗細(xì)胞突變、壞死的作用。該藥毒性甚低，無(wú) 致畸胎、致突變作用，是一種比較安全的藥物，且價(jià)格低廉，易為患者接受，因而具有良好的 研究及應(yīng)用前景。目前該藥臨床用于慢性遷延性肝炎伴隨的谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性升高者，也可 用于化學(xué)毒物、藥物引起的谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性升高。聯(lián)苯雙酯幾乎不溶于水的性質(zhì)使其制劑體外溶出差，雖在胃腸道內(nèi)不被破壞，但 口服后嚴(yán)重的肝臟首過(guò)效應(yīng)，導(dǎo)致該藥口服生物利用度低，一般只有25% 30%。聯(lián)苯雙 酯進(jìn)入體內(nèi)后在肝臟迅速被代謝轉(zhuǎn)化，血漿半衰期只有5小時(shí)左右，24小時(shí)后70%自糞便 排出。雖然僅吸收25%左右，卻表現(xiàn)出很強(qiáng)的降GPT作用，說(shuō)明其生物活性很高，是一有研 究?jī)r(jià)值藥物。目前使用或研究的制劑主要有聯(lián)苯雙酯片、聯(lián)苯雙酯膠囊、聯(lián)苯雙酯滴丸、復(fù) 方聯(lián)苯雙酯片、復(fù)方聯(lián)苯雙酯沖劑、聯(lián)苯雙酯口服混懸液等，CN 200410070669. 4(公開(kāi)號(hào) CN1586472)公開(kāi)了一種聯(lián)苯雙酯口腔崩解片，CN 03145971. 4(公開(kāi)號(hào)CN1476831)公開(kāi)了 一種聯(lián)苯雙酯緩釋制劑，由于聯(lián)苯雙酯不溶于水，因此這些制劑普遍存在生物利用度低的 缺點(diǎn)。CN 03146030. 5公開(kāi)了一種聯(lián)苯雙酯乳劑，CN 100998561A公開(kāi)了一種聯(lián)苯雙酯靜脈 注射乳劑，液體制劑儲(chǔ)存和運(yùn)輸不方便，也容易導(dǎo)致藥物不穩(wěn)定。CN 200610038662. 3(公 開(kāi)號(hào)CN1850071)公開(kāi)了一種聯(lián)苯雙酯固體分散體，CN 200810234507. 8 (公開(kāi)號(hào) CN101401788)公開(kāi)了一種聯(lián)苯雙酯自乳化制劑，以提高其生物利用度和穩(wěn)定性。聯(lián)苯雙酯作為一種長(zhǎng)期使用的藥物，臨床需要一種給藥次數(shù)少、生物利用度高、穩(wěn) 定性好、制備簡(jiǎn)單的有利于患者使用的制劑。納米粒(nanoparticles)是利用天然高分子或合成的化學(xué)物質(zhì)為載體制成的載 藥微粒，直徑10 lOOOnm。納米粒具有靶向性，能直接向靶器官、靶細(xì)胞或細(xì)胞內(nèi)靶結(jié)構(gòu)輸 送藥物，同時(shí)具有緩釋、保護(hù)藥物、提高療效、降低毒副作用等優(yōu)點(diǎn)。血管內(nèi)注射納米粒后， 納米粒主要被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)(RES)吞噬，RES為來(lái)自于骨髓吞噬功能很強(qiáng)的單核細(xì)胞的統(tǒng) 稱。肝中有數(shù)目眾多的網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞，且位置固定，被稱作Kupffer細(xì)胞，因此藥物能在肝臟內(nèi)聚集，然后逐步釋放入血液循環(huán)，使肝臟藥物濃度增加，對(duì)其他臟器不良反應(yīng)減少，對(duì) 肝臟有被動(dòng)靶向作用；當(dāng)納米粒足夠小(100 150nm)且表面覆以特殊包被后，便可逃過(guò) Kupffer細(xì)胞的吞噬，靠其連接的特異性抗體等物質(zhì)定位于肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞發(fā)揮作用，從而具有 主動(dòng)靶向作用。因此，納米粒對(duì)于治療各種肝臟疾病具有特殊意義。
納米脂質(zhì)載體(nanostructured lipid carriers，NLC)是由固體脂質(zhì)納米粒 (solid lipidnanoparticles, SLN)發(fā)展而來(lái)的一種新型膠體載體系統(tǒng)。固體脂質(zhì)納米粒 存在的問(wèn)題在于，SLN是由單一的固態(tài)脂質(zhì)或不同種類的固態(tài)脂質(zhì)混合制成，其高度有序、 規(guī)則的脂質(zhì)結(jié)晶不僅限制了載藥能力，而且會(huì)引起被包裹藥物的外排。而NLC是將常溫下 的液態(tài)脂質(zhì)加入到固態(tài)脂質(zhì)中，從而造成晶體的混亂度增加，使載體具有較高的晶體缺陷， 因而可以容納更多的藥物分子。正是由于NLC是由固態(tài)脂質(zhì)和與其空間不相容的液態(tài)脂質(zhì) 混合組成，使其具有特殊的納米結(jié)構(gòu)，其優(yōu)勢(shì)在于(1)難溶性藥物在液體脂質(zhì)中的溶解度 較固體脂質(zhì)大，引入液體脂質(zhì)可以增加藥物的包封率和載藥量；(2)液態(tài)脂質(zhì)的加入能夠 延緩固態(tài)脂質(zhì)由α晶形向晶形β的轉(zhuǎn)化，可以延緩藥物的泄漏；(3)適量液體脂質(zhì)的引入 不會(huì)改變納米粒固體內(nèi)核的性質(zhì)，因此NLC仍具備與SLN相似的緩控釋特性。由此可見(jiàn)，NLC不僅具有SLN物理穩(wěn)定性高、保護(hù)敏感藥物不被降解、控制釋放、良 好的生物相容性、易于大規(guī)模生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)，還改善了 SLN載藥能力有限、在貯存過(guò)程中藥物 容易泄露、包封率降低等問(wèn)題。因此NLC的這種作用特點(diǎn)，不僅克服了傳統(tǒng)SLN的不足之處， 而且擴(kuò)大了其應(yīng)用領(lǐng)域。綜上所述，將聯(lián)苯雙酯制成納米脂質(zhì)載體，預(yù)期可以達(dá)到改變藥物體內(nèi)分布、延長(zhǎng) 藥物作用時(shí)間、提高生物利用度等目的。雖然將藥物制成納米脂質(zhì)載體是常規(guī)的技術(shù)手段， 但要研制出一種具有療效好、釋藥可控、生物相容性好、穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn)的配方及制備方法并不 是很容易的，需要付出創(chuàng)造性勞動(dòng)，進(jìn)行大量的試驗(yàn)和條件篩選。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明提供了一種聯(lián)苯雙酯的新劑型，即聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì) 載體，該制劑使聯(lián)苯雙酯具有更高的化學(xué)穩(wěn)定性，不易降解；生物相容性好、穩(wěn)定、釋藥可 控，并可通過(guò)控制納米粒的粒徑達(dá)到肝組織被動(dòng)靶向、提高生物利用度、改善患者順應(yīng)性的 目的。并且可以克服固體脂質(zhì)納米粒放置過(guò)程中藥物外排、包封率降低的現(xiàn)象，使制劑可穩(wěn) 定貯存。本發(fā)明還提供了該聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體的制備方法，該方法可采用常規(guī)的工藝 設(shè)備，適合工業(yè)大規(guī)模高效益生產(chǎn)。本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的一種聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體，主要是由聯(lián)苯雙酯、固態(tài)脂質(zhì)材料、液態(tài)脂質(zhì)、水溶 性乳化劑、脂溶性乳化劑和注射用水組成的，以IOOml納米脂質(zhì)載體制劑計(jì)，其組成如下聯(lián)苯雙酯0.002 0.5g固態(tài)脂質(zhì)材料0.05 2g液態(tài)脂質(zhì)0 Ig水溶性乳化劑0.05 5g脂溶性乳化劑0.05 5g
附加劑0 5g注射用水余量。優(yōu)選的，以IOOml納米脂質(zhì)載體制劑計(jì)，其組成如下
聯(lián)苯雙酯0. 002 0. 2g固態(tài)脂質(zhì)材料0. 05 Ig液態(tài)脂質(zhì)0. 01 0. 5g水溶性乳化劑0. 05 2g脂溶性乳化劑0. 05 2g附加劑0 2. 5g注射用水余量。所述固態(tài)脂質(zhì)材料為甘油三酯類、部分甘油酯、脂肪酸類、蠟質(zhì)類或固醇類中的任 一種或任意組合。所述甘油三酯類包括三棕櫚酸甘油酯、三硬脂酸甘油酯、三月桂酸甘油酯、三油酸 甘油酯等；所述部分甘油酯包括單硬脂酸甘油酯、含有單、二、三酰甘油酯的合成甘油酯及 其混合物；所述脂肪酸類包括硬脂酸、棕櫚酸；所述蠟質(zhì)類包括鯨蠟醇十六酸酯、鯨蠟醇棕 櫚酸酯；所述固醇類為膽固醇。所述液態(tài)脂質(zhì)為天然植物油、鏈長(zhǎng)在C8 Cltl之間的中等鏈長(zhǎng)脂肪酸甘油酯、油 酸、亞油酸、維生素E或維生素酯類中的任一種或任意組合。優(yōu)選鏈長(zhǎng)在C8 Cltl之間的中 等鏈長(zhǎng)脂肪酸甘油酯或維生素E。所述水溶性乳化劑為聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物類(如Poloxammer系列)、聚氧 乙烯脂肪酸酯類或聚氧乙烯脂肪醇醚類(如Brij系列)中的任一種或任意組合。所述脂溶性乳化劑為磷脂類、脂肪酸山梨坦類或聚山梨酯類中的任一種或任意組
I=I O所述磷脂類包括大豆磷脂、蛋黃磷脂、卵磷脂；所述脂肪酸山梨坦包括Span60和 Span80 ；所述聚山梨酯包括Tween60和Tween80。為更好地適于靜脈用藥，乳化劑優(yōu)選大豆磷脂和泊洛沙姆188的組合。所述附加劑為滲透壓調(diào)節(jié)劑、金屬離子絡(luò)合劑、抗氧劑或防腐劑中的任一種或任 意組合。所述附加劑可起到增加制劑穩(wěn)定性、調(diào)節(jié)滲透壓、抗氧化等作用。所述滲透壓調(diào)節(jié)劑包括丙二醇、丙三醇、甘露醇等。所述金屬離子絡(luò)合劑包括EDTA、乙二銨四乙酸二鈉鹽等。所述抗氧劑包括維生素C、維生素E等。所述防腐劑包括苯扎溴銨、對(duì)羥基苯甲酸酯類、山梨酸等。聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體的制備方法，包括以下步驟(1)將聯(lián)苯雙酯、固態(tài)脂質(zhì)材料、液態(tài)脂質(zhì)、脂溶性乳化劑溶于有機(jī)溶劑中，加熱至 60 100°C使溶解，以構(gòu)成有機(jī)相；(2)將水溶性乳化劑、附加劑溶于注射用水中，加熱至60 100°C，以構(gòu)成水相；(3)在60 100°C的溫度下，在轉(zhuǎn)速為400 1200r/min攪拌下將有機(jī)相注入水 相中，攪拌0. 5h 6h，使有機(jī)溶劑完全揮發(fā)，得到初乳；(4)將初乳傾入0 2°C的冰水中，在轉(zhuǎn)速為400 1200r/min下攪拌0. 5h 4h，即制得聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體。還包括以下步驟將制得的聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體進(jìn)一步加入凍干保護(hù)劑，以制 成凍干制劑。其中，對(duì)所制得的聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體進(jìn)行凍干處理的工藝可為將1 IOwt% (重量比)的凍干保護(hù)劑溶于聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體的水分散體中，然后分裝于西 林瓶中，置-80°C的超低溫冰箱中預(yù)凍24h，取出，迅速移入冷凍干燥機(jī)中，凍干48h，加塞密 封即可。
所述有機(jī)溶劑為氯仿、丙酮、乙醇、乙酸乙酯或異丙醇中的任一種或任意組合。所述凍干保護(hù)劑為乳糖、葡萄糖、甘露醇、蔗糖、海藻糖、右旋糖苷或山梨醇中的任 一種或任意組合。本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)(1)本發(fā)明的聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體生物相容性好，易降解，降低了聯(lián)苯雙酯的毒 副作用，提高了機(jī)體的耐受性。(2)本發(fā)明的聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體粒徑在200nm左右，能被動(dòng)靶向于肝組織，提 高療效，大大降低毒副作用，可提高聯(lián)苯雙酯的生物利用度。且在體內(nèi)具備緩釋功能，可延 長(zhǎng)藥物的體內(nèi)循環(huán)時(shí)間。采用透析法測(cè)定藥物的體外釋放度，結(jié)果顯示納米脂質(zhì)載體表現(xiàn) 出明顯的緩釋特點(diǎn)(參見(jiàn)圖4)。(3)本發(fā)明采用混合脂質(zhì)作為聯(lián)苯雙酯的載藥材料，通過(guò)向固體脂質(zhì)材料中加入 一定比例的液態(tài)脂質(zhì)，在一定程度上破壞了材料的晶型，提高載藥量和包封率，且避免了藥 物在放置過(guò)程中外排、包封率降低的現(xiàn)象，使制劑可穩(wěn)定貯存。(4)本發(fā)明的工藝為改造的微乳技術(shù)_乳化蒸發(fā)_低溫固化法，具有制備工藝簡(jiǎn) 單，成本低，工藝參數(shù)易于控制等特點(diǎn)，適合工業(yè)大規(guī)模高效益生產(chǎn)。


圖1為聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體透射電鏡圖；圖2為聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體透射電鏡圖；圖3為聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體粒徑分布圖；其中，標(biāo)題粒徑分布(Size distribution (s)，橫坐標(biāo)粒徑(Diameter)，縱坐標(biāo)百分率(% in class)；圖4為聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體體外釋放的釋放百分率_時(shí)間曲線。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的闡述，但本發(fā)明不局限于這些實(shí)施例。實(shí)施例1制備聯(lián)苯雙酯脂質(zhì)載體步驟如下(1)取聯(lián)苯雙酯10mg、膽固醇160mg、油酸40mg、Tween80450mg溶于IOml丙酮-乙 醇(體積比1 1)中，75°c水浴上加熱溶解，構(gòu)成有機(jī)相。(2)將泊洛沙姆188150mg溶于15ml注射用水，水浴加熱至和有機(jī)相相同的溫度， 構(gòu)成水相。(3)在轉(zhuǎn)速為700r/min攪拌下，將有機(jī)相溪流狀緩慢注入水相中，75°C恒溫?cái)嚢?4h，使有機(jī)溶劑完全揮發(fā)，制備初乳。
(4)將所得初乳傾入45ml 0 2°C的冰水中，冰浴下lOOOr/min攪拌2h，從而制得 聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體，4°C密閉保存。實(shí)施例2制備聯(lián)苯雙酯脂質(zhì)載體步驟如下(1)取聯(lián)苯雙酯50mg、單硬脂酸甘油酯240mg、MCT 60mg、大豆磷脂200mg溶于 IOml氯仿中， 75°C水浴上加熱溶解，構(gòu)成有機(jī)相。(2)將泊洛沙姆188450mg溶于15ml注射用水中，水浴加熱至和有機(jī)相相同的溫 度，構(gòu)成水相。(3)在轉(zhuǎn)速為700r/min攪拌下，將有機(jī)相溪流狀緩慢注入水相中，75°C恒溫?cái)嚢?4h，使有機(jī)溶劑完全揮發(fā)，制備初乳；(4)將所得初乳傾入45ml O 2°C的冰水中，冰浴下lOOOr/min攪拌2h，從而制得
聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體，4°C密閉保存。用水稀釋后，以H-7000型透射電子顯微鏡觀測(cè)其形態(tài)，如圖1所示。由圖1可知， 所得聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體大小均一、形態(tài)圓整、粒徑在200nm左右。實(shí)施例3制備聯(lián)苯雙酯脂質(zhì)載體步驟如下(1)取聯(lián)苯雙酯20mg、三棕櫚酸甘油酯120mg、硬脂酸60mg、大豆油30mg、 Span60250mg溶于IOml丙酮-氯仿(體積比1 1)中，80°C水浴上加熱溶解，構(gòu)成有機(jī)相。(2)將泊洛沙姆188450mg溶于15ml注射用水中，水浴加熱至和有機(jī)相相同的溫 度，構(gòu)成水相。(3)在轉(zhuǎn)速為700r/min攪拌下，將有機(jī)相溪流狀緩慢注入水相中，80°C恒溫?cái)嚢?4h，使有機(jī)溶劑完全揮發(fā)，制備初乳。(4)將所得初乳傾入45ml O 2°C的冰水中，冰浴下700r/min攪拌2h，從而制得 聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體，凍干。其中，凍干工藝為取10wt%的甘露醇與右旋糖酐(質(zhì)量比為1 1)，溶于聯(lián)苯雙 酯納米脂質(zhì)載體水分散體中，然后分裝于西林瓶中，置-80°C的超低溫冰箱中預(yù)凍24h，取 出，迅速移入冷凍干燥機(jī)中，-40°C、0. IOmbar凍干48h，加塞密封即可。實(shí)施例4制備聯(lián)苯雙酯脂質(zhì)載體步驟如下(1)取聯(lián)苯雙酯10mg、單硬脂酸甘油酯160mg、MCT 40mg、大豆磷脂200mg溶于 IOml丙酮-乙醇(體積比1 1)中，75°C水浴上加熱溶解，構(gòu)成有機(jī)相。(2)將泊洛沙姆188300mg溶于15ml注射用水中，水浴加熱至和有機(jī)相相同的溫 度，構(gòu)成水相。(3)在轉(zhuǎn)速為700r/min攪拌下，將有機(jī)相溪流狀緩慢注入水相中，75°C恒溫?cái)嚢?4h，使有機(jī)溶劑完全揮發(fā)，制備初乳。(4)將所得初乳傾入45ml O 2°C的冰水中，冰浴下lOOOr/min攪拌2h，從而制得
聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體，凍干。其中，凍干工藝為取5wt %的甘露醇，溶于聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體水分散體 中，然后分裝于西林瓶中，置-80°C的超低溫冰箱中預(yù)凍24h，取出，迅速移入冷凍干燥機(jī)中，-40°C、0. IOmbar凍干48h，加塞密封即可。取適量?jī)龈煞塾盟♂尯?，以H-7000型透射電子顯微鏡觀測(cè)其形態(tài)，如圖2所示。 由圖2可知所得聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體大小均一、形態(tài)圓整、成型性好、粒徑在200nm左右。實(shí)施例5制備聯(lián)苯雙酯脂質(zhì)載體
步驟如下(1)取聯(lián)苯雙酯30mg、單硬脂酸甘油酯75mg、硬脂酸lOOmg、MCT 20mg、大豆磷脂 200mg溶于IOml丙酮-乙醇(體積比1 1)中，70°C水浴上加熱溶解，構(gòu)成有機(jī)相。(2)將泊洛沙姆188600mg溶于15ml注射用水中，水浴加熱至和有機(jī)相相同的溫 度，構(gòu)成水相。(3)在轉(zhuǎn)速為600r/min攪拌下，將有機(jī)相溪流狀緩慢注入水相中，70°C恒溫?cái)嚢?4h，使有機(jī)溶劑完全揮發(fā)，制備初乳。(4)將所得初乳傾入45ml 0 2°C的冰水中，冰浴下lOOOr/min攪拌2h，從而制得
聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體，4°C密閉保存。用水稀釋后，以Zetasizer 3000HS型激光粒度分布儀測(cè)定粒徑分布，測(cè)得平均粒 徑為217. Onm，多分散性系數(shù)為0. 149，如圖3所示。實(shí)施例6制備聯(lián)苯雙酯脂質(zhì)載體步驟如下(1)取聯(lián)苯雙酯20mg、單硬脂酸甘油酯240mg、MCT 40mg、大豆磷脂250mg溶于 IOml丙酮-乙醇(體積比1 1)中，75°C水浴上加熱溶解，構(gòu)成有機(jī)相。(2)將泊洛沙姆188300mg溶于15ml注射用水中，水浴加熱至和有機(jī)相相同的溫 度，構(gòu)成水相。(3)在轉(zhuǎn)速為700r/min攪拌下，將有機(jī)相溪流狀緩慢注入水相中，75°C恒溫?cái)嚢?4h，使有機(jī)溶劑完全揮發(fā)，制備初乳。(4)將所得初乳傾入45ml O 2°C的冰水中，冰浴下lOOOr/min攪拌2h，從而制得
聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體，4°C密閉保存。采用反向動(dòng)態(tài)透析法測(cè)定藥物的釋放度以含30%乙醇的PH為7. 4的磷酸鹽緩 沖液(PBS) 200ml為釋放介質(zhì)，攪拌速度為lOOr/min，溫度為37士0. 5°C。取樣后進(jìn)樣20 μ 1 進(jìn)行HPLC測(cè)定，計(jì)算累積釋放百分率，如圖4所示。實(shí)施例7制備聯(lián)苯雙酯脂質(zhì)載體步驟如下(1)取聯(lián)苯雙酯10mg、單硬脂酸甘油酯80mg、硬脂酸80mg、MCT 60mg、大豆磷脂 200mg溶于IOml丙酮-乙醇(體積比1 1)中，75°C水浴上加熱溶解，構(gòu)成有機(jī)相。(2)將泊洛沙姆188450mg溶于15ml注射用水中，水浴加熱至和有機(jī)相相同的溫 度，構(gòu)成水相。(3)在轉(zhuǎn)速為800r/min攪拌下，將有機(jī)相溪流狀緩慢注入水相中，75°C恒溫?cái)嚢?4h，使有機(jī)溶劑完全揮發(fā)，制備初乳。(4)將所得初乳傾入45ml O 2°C的冰水中，冰浴下lOOOr/min攪拌2h，從而制得
聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體，4°C密閉保存。采用反向動(dòng)態(tài)透析法測(cè)定藥物的釋放度以含30%乙醇的PH為7. 4的磷酸鹽緩沖液(PBS) 200ml為釋放介質(zhì)，攪拌速度為lOOr/min，溫度為37士0. 5°C。取樣后進(jìn)樣20 μ 1 進(jìn)行HPLC測(cè)定，計(jì)算累積釋放百分率，如圖4所示。由圖可知聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體體外 釋放呈雙相動(dòng)力學(xué)，即最初為突釋后為緩釋；液態(tài)脂質(zhì)占總脂質(zhì)比重越大， 釋藥越快。
權(quán)利要求
一種聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體，其特征在于主要是由聯(lián)苯雙酯、固態(tài)脂質(zhì)材料、液態(tài)脂質(zhì)、水溶性乳化劑、脂溶性乳化劑和注射用水組成的，以100ml納米脂質(zhì)載體制劑計(jì)，其組成如下聯(lián)苯雙酯 0.002～0.5g固態(tài)脂質(zhì)材料 0.05～2g液態(tài)脂質(zhì) 0～1g水溶性乳化劑 0.05～5g脂溶性乳化劑 0.05～5g附加劑 0～5g注射用水余量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體，其特征在于以IOOml納米脂質(zhì)載 體制劑計(jì)，其組成如下聯(lián)苯雙酯0. 002 0. 2g固態(tài)脂質(zhì)材料0. 05 Ig液態(tài)脂質(zhì)0. 01 0. 5g水溶性乳化劑0. 05 2g脂溶性乳化劑0. 1 2g附加劑0 2. 5g注射用水余量。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體，其特征在于所述固態(tài)脂質(zhì)材 料為甘油三酯類、部分甘油酯、脂肪酸類、蠟質(zhì)類或固醇類中的任一種或任意組合。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體，其特征在于所述甘油三酯類為三 棕櫚酸甘油酯、三硬脂酸甘油酯、三月桂酸甘油酯、三油酸甘油酯等；所述部分甘油酯為單 硬脂酸甘油酯、含有單、二、三酰甘油酯的合成甘油酯及其混合物；所述脂肪酸為硬脂酸、棕 櫚酸；所述蠟質(zhì)類為鯨蠟醇十六酸酯、鯨蠟醇棕櫚酸酯；所述固醇類為膽固醇。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體，其特征在于所述液態(tài)脂質(zhì)為 天然植物油、鏈長(zhǎng)在C8 Cltl之間的中等鏈長(zhǎng)脂肪酸甘油酯、油酸、亞油酸、維生素E或維生 素酯類中的任一種或任意組合。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體，其特征在于所述水溶性乳化 劑為聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物類、聚氧乙烯脂肪酸酯類或聚氧乙烯脂肪醇醚類中的任一 種或任意組合；所述脂溶性乳化劑為磷脂類、脂肪酸山梨坦類或聚山梨酯類中的任一種或任意組合； 所述附加劑為滲透壓調(diào)節(jié)劑、金屬離子絡(luò)合劑、抗氧劑或防腐劑中的任一種或任意組合。
7.一種制備權(quán)利要求1或2所述的聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體的方法，其特征在于包括 以下步驟(1)將聯(lián)苯雙酯、固態(tài)脂質(zhì)材料、液態(tài)脂質(zhì)、脂溶性乳化劑溶于有機(jī)溶劑中，加熱至 60 100°C使溶解，以構(gòu)成有機(jī)相；(2)將水溶性乳化劑、附加劑溶于注射用水中，加熱至60 100°C，以構(gòu)成水相；(3)在60 100°C的溫度下，在轉(zhuǎn)速為400 1200r/min攪拌下將有機(jī)相注入水相中， 攪拌0. 5h 6h，使有機(jī)溶劑完全揮發(fā)，得到初乳；(4)將初乳傾入0 2°C的冰水中，在轉(zhuǎn)速為400 1200r/min下攪拌0. 5h 4h，即制 得聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體的制備方法，其特征在于還包括以 下步驟將制得的聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體進(jìn)一步加入凍干保護(hù)劑，以制成凍干制劑。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體，其特征在于所述凍干保護(hù)劑為乳 糖、葡萄糖、甘露醇、蔗糖、海藻糖、右旋糖苷、山梨醇中的任一種或任意組合。
10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體，其特征在于所述有機(jī)溶劑為氯 仿、丙酮、乙醇、乙酸乙酯或異丙醇中的任一種或任意組合。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體，主要是由聯(lián)苯雙酯、固態(tài)脂質(zhì)材料、液態(tài)脂質(zhì)、水溶性乳化劑、脂溶性乳化劑和注射用水組成的，其制備方法如下(1)將聯(lián)苯雙酯、固態(tài)脂質(zhì)材料、液態(tài)脂質(zhì)、脂溶性乳化劑溶于有機(jī)溶劑中，加熱使溶解，以構(gòu)成有機(jī)相；(2)將水溶性乳化劑、附加劑溶于注射用水中，加熱，以構(gòu)成水相；(3)在攪拌下將有機(jī)相注入水相中，攪拌使有機(jī)溶劑完全揮發(fā)，得到初乳；(4)將初乳傾入冰水中，攪拌，即制得聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體。本發(fā)明的聯(lián)苯雙酯納米脂質(zhì)載體生物相容性好，易降解，降低了聯(lián)苯雙酯的毒副作用，提高了機(jī)體的耐受性。
文檔編號(hào)A61P1/16GK101843588SQ20101019534
公開(kāi)日2010年9月29日 申請(qǐng)日期2010年6月9日 優(yōu)先權(quán)日2010年6月9日
發(fā)明者馮飛飛, 劉悅, 張典瑞, 段存賢, 王言才, 王飛虎, 荊凡波, 賈樂(lè)嬌 申請(qǐng)人:山東大學(xué)