專利名稱：一種從兩面針中提取生物堿的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從兩面針中提取生物堿的方法，尤其是一種采用超微粉碎和添加 樹脂濃縮裝柱提取純化兩面針生物堿的方法。
背景技術(shù)：
兩面針系蕓香科花椒屬植物，別名上山虎、入地金牛、兩背針，主要分布于我國廣 西、廣東、云南、貴州、臺(tái)灣等省。兩面針是我國民間的常用中藥，藥用其根、莖皮，具有驅(qū)風(fēng) 化濕、消腫止痛、行氣之功效，主要用于治療風(fēng)濕關(guān)節(jié)痛、跌打扭傷腫痛、神經(jīng)痛、牙痛、腸胃 絞痛、膽道蛔蟲癥引起的疼痛及瘍病等。兩面針根中主要含有生物堿、木脂素、黃酮類和留醇類化合物。其中生物堿含量占 1-0.7%，主要是氯化兩面針堿、氧化兩面針堿、二氫兩面針堿、二氫白屈菜紅堿、別隱品堿、 茵芋堿、去甲基白屈菜紅堿、白鮮堿等。兩面針總堿是兩面針?biāo)幉墓δ苄猿煞?，也是衡量?面針?biāo)幉膬?yōu)劣的指標(biāo)?，F(xiàn)有兩面針?biāo)幉奶崛∩飰A的方法多是有機(jī)試劑提取，如莫肖云等發(fā)表的“超聲 波提取兩面針中的總堿”，該文獻(xiàn)對(duì)提取手段和溶劑做了比較。純化方法多是大孔樹脂吸 附和萃取硅膠柱層析，如劉韶等發(fā)表的“大孔吸附樹脂純化兩面針總生物堿”，該文獻(xiàn)采用 60%乙醇提取、大孔樹脂吸附、乙醇洗脫等工序，該方法純化效果顯著。專利(申請(qǐng)?zhí)枮?200810073810) “一種提取分離兩面針總生物堿的方法”，該專利公開的方法是酸醇提取，濃 縮捏揉分散，大孔樹脂吸附?，F(xiàn)有提取兩面針生物堿工業(yè)化方法存在著，所得產(chǎn)品純度低、上柱困難等問題。因 為兩面針?biāo)幉囊掖继崛饪s后，會(huì)析出沉淀，這生物堿和木脂素融合一起，酸水很難分散， 捏揉分散效率低。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種從兩面針中提取生物堿的方法。該方法能夠 提高效率，縮短生產(chǎn)周期，所得產(chǎn)品含量高。本發(fā)明提取技術(shù)方案如下一種從兩面針中提取生物堿的方法，其特征在于包含以下步驟取兩面針?biāo)幉某?微粉碎，加入其重量3-6倍量乙醇溶液動(dòng)態(tài)提取2-3次，合并提取液，加入大孔樹脂減壓濃 縮至少量液體，加入大孔樹脂柱，依次用去離子水、乙酸乙酯、丙酮梯度洗脫，收集丙酮洗脫 液，濃縮小體積，加入氨水調(diào)節(jié)phlO-12結(jié)晶，濾出結(jié)晶物，90-95 %乙醇回流溶解濃縮至其 體積的1/3-1/4，重結(jié)晶，干燥即得產(chǎn)品。所述超微粉碎為原料粉碎粒度不大于400目。所述乙醇溶液動(dòng)態(tài)提取為70-100%乙醇攪拌或循環(huán)提取，提取時(shí)間1-2小時(shí)。所述大孔樹脂為非極性大孔樹脂?？蛇xD101、HPD100或HZ816。所述濃縮樹脂加入量為原料量的10-20%。裝柱樹脂為藥材的1/2即可。
所述梯度洗脫的乙酸乙酯用量為樹脂量的2-3BV，丙酮為樹脂量的3-4倍。綜上所述，本發(fā)明采用超微粉碎冷浸提取，提取率高，雜質(zhì)溶出少，能耗降低；提取 液濃縮過程加入大孔樹脂，無需酸水分散，可以直接上柱，解決了分散難題；水一乙酸乙酯 —丙酮洗脫樹脂柱，產(chǎn)品含量高。下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限 于下列實(shí)施方式。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1 取兩面針?biāo)幉?，超微粉碎，取Ikg加入3L70%乙醇溶液攪拌提取1小時(shí)，提取3次， 合并提取液加入IOOgDlOl大孔樹脂，減壓濃縮至無醇。取500gD101樹脂裝入樹脂柱，把濃 縮液和樹脂加入樹脂柱吸附，去離子水洗至無糖色，取1. 8L乙酸乙酯洗雜質(zhì)，流速控制IL/ h，乙酸乙酯洗脫液收集，濃縮再利用，再取2. 4L丙酮洗脫生物堿，流速控制0. 5L/h，收洗脫 液濃縮至300ml，加入氨水調(diào)節(jié)ph至10結(jié)晶。濾出結(jié)晶物，90%乙醇回流溶解，濃縮至原體 積的1/4結(jié)晶，濾出干燥得產(chǎn)品12g，含量75%。實(shí)施例2:取兩面針?biāo)幉?，超微粉碎，取Ikg加入3L無水乙醇溶液攪拌提取1小時(shí)，提取3次， 合并提取液加入200gD101大孔樹脂，減壓濃縮至無醇。取500gD101樹脂裝入樹脂柱，把濃 縮樹脂加入樹脂柱吸附，去離子水洗至無糖色，取1. 4L乙酸乙酯洗雜質(zhì)，流速控制0. 6L/h， 乙酸乙酯洗脫液收集，濃縮再利用，再取2. IL丙酮洗脫生物堿，流速控制0. 8L/h，收集洗脫 液濃縮至300ml，加入氨水調(diào)節(jié)ph至12結(jié)晶。濾出結(jié)晶物，95%乙醇回流溶解，濃縮至原體 積的1/3結(jié)晶，濾出干燥得產(chǎn)品10g，含量78%。實(shí)施例3 取兩面針?biāo)幉?，超微粉碎，取Ikg加入6L90%乙醇溶液攪拌提取2小時(shí)，提取2次， 合并提取液加入150g HZ816大孔樹脂，減壓濃縮至無醇。取500g HZ816樹脂裝入樹脂柱， 把濃縮液和樹脂加入樹脂柱吸附，去離子水洗至無糖色，取1. 3L乙酸乙酯洗雜質(zhì)，流速控 制0. 8L/h，乙酸乙酯洗脫液收集，濃縮再利用，再取2. 4L丙酮洗脫生物堿，流速控制0. 7L/ h，收集洗脫液濃縮至300ml，加入氨水調(diào)節(jié)ph至12結(jié)晶。濾出結(jié)晶物，90%回流溶解，濃縮 至原體積的1/4結(jié)晶，濾出干燥得產(chǎn)品13g，含量75%。實(shí)施例4 取兩面針?biāo)幉?，超微粉碎，?kg加入20L80%乙醇溶液攪拌提取1小時(shí)，提取3 次，合并提取液加入500g HZ816大孔樹脂，減壓濃縮至無醇。取2. 5kg HZ816樹脂裝入樹 脂柱，把濃縮液和樹脂加入樹脂柱吸附，去離子水洗至無糖色，取6L乙酸乙酯洗雜質(zhì)，流速 控制3L/h，乙酸乙酯洗脫液收集，濃縮再利用，再取12L丙酮洗脫生物堿，流速控制4L/h，收 集洗脫液濃縮至900ml，加入氨水調(diào)節(jié)ph至12結(jié)晶。濾出結(jié)晶物，95%回流溶解，濃縮至原 體積的1/4結(jié)晶，濾出干燥得產(chǎn)品25g，含量75%。實(shí)施例5 取兩面針?biāo)幉?，超微粉碎，?kg加入30L85%乙醇溶液攪拌提取2小時(shí)，提取2 次，合并提取液加入500g HPD100大孔樹脂，減壓濃縮至無醇。取2. 5kg HPD100樹脂裝入樹脂柱，把濃縮液和樹脂加入樹脂柱吸附，去離子水洗至無糖色，取9L乙酸乙酯洗雜質(zhì)，流 速控制4L/h，乙酸乙酯洗脫液收集，濃縮再利用，再取12L丙酮洗脫生物堿，流速控制3L/h， 收集洗脫液濃縮至1L，加入氨水調(diào)節(jié)ph至12結(jié)晶。濾出結(jié)晶物，90%回流溶解，濃縮至原 體積的1/6結(jié)晶，濾出干燥得產(chǎn)品27g，含量70%。實(shí)施例6 取兩面針?biāo)幉?，超微粉碎，?kg加入20L75%乙醇溶液攪拌提取1小時(shí)，提取3 次，合并提取液加入IkgDlOl大孔樹脂，減壓濃縮至無醇。取2. 5gD101樹脂裝入樹脂柱， 把濃縮液和樹脂加入樹脂柱吸附，去離子水洗至無糖色，取IOL乙酸乙酯洗雜質(zhì)，流速控制 3L/h，乙酸乙酯洗脫液收集，濃縮再利用，再取14L丙酮洗脫生物堿，流速控制3L/h，收集洗 脫液濃縮至800ml，加入氨水調(diào)節(jié)ph至12結(jié)晶。濾出結(jié)晶物，90%回流溶解，濃縮至原體積 的1/3結(jié)晶，濾出干燥得產(chǎn)品23g，含量76%。
權(quán)利要求
一種從兩面針中提取生物堿的方法，其特征在于包含以下步驟取兩面針?biāo)幉某⒎鬯椋尤肫渲亓?-6倍量乙醇溶液動(dòng)態(tài)提取2-3次，合并提取液，加入大孔樹脂減壓濃縮至少量液體，加入大孔樹脂柱，依次用去離子水、乙酸乙酯、丙酮梯度洗脫，收集丙酮洗脫液，濃縮小體積，加入氨水調(diào)節(jié)ph10-12結(jié)晶，濾出結(jié)晶物，90-95％乙醇回流溶解濃縮至其體積的1/3-1/4，重結(jié)晶，干燥即得產(chǎn)品。
2.如權(quán)利要求1所述的從兩面針中提取生物堿的方法，其特征在于所述超微粉碎為原 料粉碎粒度不大于400目。
3.如權(quán)利要求1所述的從兩面針中提取生物堿的方法，其特征在于所述乙醇溶液動(dòng)態(tài) 提取為70-100%乙醇攪拌或循環(huán)提取，提取時(shí)間1-2小時(shí)。
4.如權(quán)利要求1所述的從兩面針中提取生物堿的方法，其特征在于所述大孔樹脂為非 極性大孔樹脂。
5.如權(quán)利要求1所述的從兩面針中提取生物堿的方法，其特征在于所述濃縮樹脂加入 量為原料量的10-20%。
6.如權(quán)利要求1所述的從兩面針中提取生物堿的方法，其特征在于所述梯度洗脫的乙 酸乙酯用量為樹脂量的2-3BV，丙酮為樹脂量的2-4倍。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從兩面針中提取生物堿的方法，發(fā)明工藝包括兩面針?biāo)幉某⒎鬯?，?dòng)態(tài)冷浸提取，提取液加入10-20％大孔樹脂濃縮，大孔樹脂層析，去離子水、乙酸乙酯、丙酮梯度洗脫，濃縮氨化結(jié)晶和重90-95％乙醇結(jié)晶。該工藝解決了兩面針生物堿在水相難分散的難題，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)A61P1/00GK101879241SQ20101015685
公開日2010年11月10日 申請(qǐng)日期2010年4月27日 優(yōu)先權(quán)日2010年4月27日
發(fā)明者蘇劉花 申請(qǐng)人:南京澤朗農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司