專利名稱：多穗石柯葉藥材的質量控制方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種殼斗科櫟(石柯)屬常綠植物多穗石柯葉 Lithocarpuslitseifolius(Hance)Chun藥材的質量控制領域，提供了多穗石柯葉藥材的質量控制方法。
背景技術：
多穗石柯，拉丁學名為Lithocarpus litseifolius (Hance)Chun，屬于殼斗科 Fagaceae，櫟(石柯)屬Lithoearpus常綠植物，別名多穗石柯《中華本草》、《中藥大辭典》、 黑石虎《廣西藥用植物名錄》、大葉稠子(大葉稠)、雞山柯《中國樹木志》、多穗柯《中國高等植物圖鑒》、綿石櫟、綿柯、剛板栗、羊角櫟、綿櫧、青皮剛、大青K、灰稠、稠木、稠栗、《全國中草藥匯編二版下冊》《新華本草綱要第三冊》、甜茶。人們習慣上稱為甜荼或甘茶。文獻中收載的植物來源中植物名不一致，《海南植物志》收載的植物來源為殼斗科櫟屬(石柯屬)植物Lithocarpus litseifolius (Hance) Chun (中文名為多穗石柯)，而《中華本草》、《中藥大辭典》、《全國中草藥匯編》、《新華本草綱要》、《中藥志》、《中國高等植物圖鑒》收載的植物來源為殼斗科櫟屬(石柯屬)植物Lithocarpus polystachyus Rehd (中文名為多穗石柯、多穗柯等)，經與《中國植物志》及《Flora of China》比照鑒定，認定該植物標本的禾中名為 Lithocarpus litseifolius (Hance) Chun ( = L. polystachyus Rehd.)。該葉味甘甜清爽，不僅生津止渴，且對人體有較好的藥理作用和保健功能。據(jù)《中藥志》上記載及有關文獻資料報導“能防治高血壓、治療濕熱痢疾、皮膚瘙癢、癰疽惡瘡等癥。并具有滋養(yǎng)肝腎和胃降逆、潤肺止咳、解困醒酒等作用；《本草綱目》記載“氣味甘、 平”、“無毒、療痔、止血及血痢、止渴、活血、利小便”;《中藥大辭典》記載“治高血壓”;《中華本草》對多穗石柯葉記載“清熱解毒，化痰，祛風，降壓。主治濕熱瀉痢，肺熱咳嗽，癰疽瘡瘍，皮膚瘙癢，高血壓?！?，其中《四川常用中草藥》記載清熱、止瀉，治癰疽惡毒瘡，皮膚瘙癢， 濕熱痢疾?！墩憬幱弥参镏尽酚涊d治高血壓病。多穗石柯葉特有的藥效已被學術界獲得認同，目前市場上已開始對多穗石柯葉作為食品、保健食品開發(fā)，但對多穗石柯葉的質量如何控制沒有涉及，因此需要對其質量控制方法進行規(guī)范，以控制多穗石柯葉的質量。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是提供一種多穗石柯藥材的含量檢測方法；本發(fā)明的另一目的是提供一種多穗石柯藥材的鑒別方法；本發(fā)明的再一目的是提供一種多穗石柯藥材的質量檢查方法；本發(fā)明的再一目的是提供一種多穗石柯藥材的質量檢測方法。發(fā)明詳述本發(fā)明所述的多穗石柯葉藥材為為殼斗科植物櫟(石柯)屬Lithoearpus常綠植物多穗石柯Lithocarpus litseifolius Chun的干燥葉，該藥材出自于《海南植物志》?！吨腥A本草》、《中藥大辭典》、《中國本草彩色圖鑒》收載品名為多穗石柯葉；《全國中草藥匯編》、 《中藥辭?！肥蛰d品名均為多穗石柯，《中國高等植物圖鑒》收載品名為多穗柯。文獻中收載的植物來源中植物名不一致，《海南植物志》收載的植物來源為殼斗科櫟屬(石柯屬)植物Lithocarpus litseifolius (Hance) Chun (中文名為多穗石柯)，而《中華本草》、《中藥大辭典》、《全國中草藥匯編》、《新華本草綱要》、《中藥志》、《中藥辭海》、《云南植物志》、《中國高等植物圖鑒》收載的植物來源為殼斗科櫟屬(石柯屬)植物Lithocarpus polystachyus Rehd，其中《全國中草藥匯編》、《新華本草綱要》收載的植物名為綿石櫟，《中華本草》、《中藥辭海》、《云南植物志》收載的植物名為多穗石櫟，《中藥大辭典》、《中國高等植物圖鑒》收載的植物名為多穗柯。經與《中國植物志》及《Flora of China》比照鑒定，認定該 is·+示*白勺禾中$力 Lithocarpus litseifolius (Hance) Chun ( = L. polystachyus Rehd.)。本發(fā)明中多穗石柯葉藥材的原植物多穗石柯Lithocarpus Iitseifolius(Hance) Chim為常綠喬木，高ll-15m。小枝幼時淡褐色，老時干后暗黑褐色。葉片革質，長橢圓形或卵狀長橢圓形，長7-14cm，寬3-km，先端急尖或突然漸尖，基部鍥形，全緣，無毛，下面稍帶灰白色，側脈7-10對，支脈纖細，疏離，稍明顯，小脈通常不明顯。雄花序極少復穗狀；雌花 3朵一簇，常1朵結實。果序長8-lOcm，軸纖細，直徑約5mm;殼斗淺盤形，包圍堅果基部，直徑9-14mm，高3_5mm ；鱗狀苞片輪狀排列，細小，除頂部外與殼斗愈合，被褐黑色絨毛；堅果扁球形，直徑1. 6-1. 8cm,長9-13mm，未成熟時頂部錐尖狀，成熟時近平坦，中央有短尖頭， 基部截平，無毛；果臍深內陷，直徑6-8mm?；ㄆ?_9月，果期翌年5_9月。野生于海拔400-2000m的溫暖山林密林中，路邊灌木林中偶見。在湖南、江西、重慶等地有栽培。主產于長江以南各省區(qū)，尤以湖南、江西、廣西、安徽等省資源豐富，而且集中；廣東、云南、四川、福建等省次之。以江西、福建交界的武夷山脈、湖南地區(qū)的武陵山脈分布最廣。印度、泰國也有分布。本發(fā)明通過多穗石柯藥材的薄層、性狀、顯微三方面的鑒別方法來控制藥材的質量。本發(fā)明中多穗石柯葉藥材優(yōu)選的薄層色譜為取本品粉末0. l-10g，加乙醇 lO-lOOml，加熱回流0. 1-2小時，濾過；濾液濃縮至l_50ml，作為供試品溶液。另取根皮苷對照品，加乙醇制成每Iml含0. l_50mg根皮苷的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液1_20μ 1，對照品溶液1_20μ 1，分別點于同一硅膠薄層板上，以三氯甲烷-丙酮-甲醇(3 1 1)5 15°C放置0.1-50小時的下層溶液為展開劑，展開，取出， 晾干，噴以0. 1-70%香草醛濃硫酸溶液，在50-200°C加熱至斑點顯色清晰，置日光下檢視。 供試品色譜中，在與根皮苷對照品色譜相應的位置，顯相同顏色的斑點。本發(fā)明中多穗石柯葉藥材最優(yōu)選的薄層色譜為取本品粉末0.2_5g，加乙醇 20-50ml，加熱回流0. 5-1. 5小時，濾過；濾液濃縮至2_20ml，作為供試品溶液。另取根皮苷對照品，加乙醇制成每Iml含0. 2-20mg根皮苷的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液2-10 μ 1，對照品溶液2-10 μ 1，分別點于同一硅膠薄層板上，以三氯甲烷-丙酮-甲醇(3 1 1)5 15°C放置0.5-20小時的下層溶液為展開劑，展開，取出， 晾干，噴以0. 5-50%香草醛濃硫酸溶液，在80-150°C加熱至斑點顯色清晰，置日光下檢視。 供試品色譜中，在與根皮苷對照品色譜相應的位置，顯相同顏色的斑點。本發(fā)明中多穗石柯葉藥材薄層色譜的展開系統(tǒng)，是在嘗試了各種展開溶劑，包括石油醚、氯仿(三氯甲烷)、乙酸乙酯、甲醇、丙酮等溶劑，進行深入研究，不斷組合篩選，而后確定了較理想的展開體系即三氯甲烷-丙酮-甲醇，通過調整三者間的相互比例，最終研究確定了最為合理的展開系統(tǒng)三氯甲烷-丙酮-甲醇(3 1 1)。本發(fā)明中多穗石柯葉藥材的優(yōu)選性狀鑒別方法為葉多扁平或皺縮卷曲，有些破碎不全，完整葉長5-25cm，寬1-lOcm，葉片革質，卵狀披針形至長橢圓形，葉脈在背面突出， 先端漸尖或長漸尖。葉綠色，上面色深，下面色淡，基部契形，全緣，無毛，葉柄長0. 5-4cm,基部增粗，常呈暗褐色。質脆，氣微，味甜。本發(fā)明中多穗石柯葉藥材的最優(yōu)選性狀鑒別方法為葉多扁平或皺縮卷曲，有些破碎不全，完整葉長7-20cm，寬2-8cm，葉片革質，卵狀披針形至長橢圓形，葉脈在背面突出，先端漸尖或長漸尖。葉綠色，上面色深，下面色淡，基部契形，全緣，無毛，葉柄長 1-2. 5cm，基部增粗，常呈暗褐色。質脆，氣微，味甜。本發(fā)明中多穗石柯葉藥材的優(yōu)選顯微鑒別方法為粉末灰綠色或灰棕色，葉的下表皮細胞呈多角形，壁薄，非腺毛單細胞，直徑1-15 μ m，長15-75 μ m。氣孔不定式或不等式，纖維多已折斷，成束或單根散在，直徑3-25 μ m,螺紋或網(wǎng)紋導管?？梢姈艡诮M織碎片和棕色塊狀物，薄壁細胞含草酸鈣簇晶。本發(fā)明中多穗石柯葉藥材的最優(yōu)選顯微鑒別方法為粉末灰綠色或灰棕色，葉的下表皮細胞呈多角形，壁薄，非腺毛單細胞，直徑3-9 μ m，長22-50 μ m。氣孔不定式或不等式，纖維多已折斷，成束或單根散在，直徑7-17 μ m,螺紋或網(wǎng)紋導管?？梢姈艡诮M織碎片和棕色塊狀物，薄壁細胞含草酸鈣簇晶。本發(fā)明中多穗石柯葉藥材的薄層色譜鑒別方法為取本品粉末0. l-10g，加乙醇 lO-lOOml，加熱回流0. 1-2小時，濾過；濾液濃縮至l_50ml，作為供試品溶液。另取根皮苷對照品，加乙醇制成每Iml含0. l_50mg根皮苷的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液1_20μ 1，對照品溶液1_20μ 1，分別點于同一硅膠薄層板上，以三氯甲烷-丙酮-甲醇(1-4 0-2 0-2) 5 15°C放置0. 1-50小時的下層溶液為展開劑，展開， 取出，晾干，噴以0. 1-70%香草醛濃硫酸溶液，在50-200°C加熱至斑點顯色清晰，置日光下檢視。供試品色譜中，在與根皮苷對照品色譜相應的位置，顯相同顏色的斑點。本發(fā)明通過提供一種多穗石柯藥材的水分、灰分、酸不溶性灰分、浸出物質量檢查方法來控制藥材的質量。本發(fā)明通過采集湖南芷江3-9月份野生、栽培的多穗石柯葉共14份樣品，每份平行試驗，參照水分、灰分、浸出物測定法測定。為確定總灰分的性質，對3-5月份各抽檢1分進行總灰份和酸不溶性灰分的檢測表1.部分樣品的總灰分與酸不溶性灰分對比樣品名稱總灰分(％ ) 酸不溶性灰分(％ )基地苔葉4 月(090402) 3. 500. 07野生葉5 月(090501) 3. 840. 11野生嫩芽3 月(090301) 5. 220. 23由表1可知，總灰分高的樣品對應酸不溶性灰分也相應增高。本發(fā)明通過采集湖南芷江3-9月份野生、栽培的多穗石柯葉共14份樣品，每份平行試驗，照醇溶性浸出物測定法項下的冷浸法用70%乙醇作溶劑測定。表2.樣品的水分、灰分與浸出物的結果
權利要求
1.多穗石柯葉藥材質量控制方法，其特征在于通過高效液相色譜法測定多穗石柯葉藥材中根皮苷含量，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇為流動相A，以0. 01-1%磷酸溶液為流動相B，進行梯度洗脫，檢測波長為250-300nm，柱溫10-60°C。
2.權利要求1中的質量控制方法，其特征在于高效液相色譜法以0.05-0. 5%磷酸溶液為流動相B，進行梯度洗脫，檢測波長為270j90nm，柱溫20-40°C。
3.權利要求1-2的質量控制方法，其特征在于多穗石柯葉藥材中根皮苷含量不得低于 2. 0%。
4.多穗石柯葉藥材質量控制方法，其特征在于通過薄層色譜法鑒別，以多穗石柯葉藥材粉末制成的溶液為供試品，以根皮苷溶液為對照品溶液，以三氯甲烷-丙酮-甲醇混合溶劑于5 15°C放置0. 1-50小時的下層溶液為展開劑，以0. 1-70%香草醛濃硫酸溶液為顯色劑，在50-200°C加熱至斑點顯色清晰。
5.利要求4所述的質量控制方法，其特征在于以多穗石柯葉藥材粉末制成的溶液為供試品，以根皮苷溶液為對照品溶液，以三氯甲烷丙酮甲醇為3 1 1配比在5 15°C放置0. 5-20小時的下層溶液為展開劑，以0. 5-50%香草醛濃硫酸溶液為顯色劑，在 80-150°C加熱至斑點顯色清晰。
6.權利要求4-5所述的質量控制方法，其特征在于供試品是由多穗石柯葉藥材粉末 0. 2-5g，加乙醇20-50ml，加熱回流0. 5-1. 5小時，濾過，濾液濃縮至2_20ml制成。
7.權利要求4-5所述的質量控制方法，其特征在于對照品溶液由根皮苷對照品加乙醇制成每Iml含0. 2-20mg根皮苷的溶液，作為對照品溶液。
8.多穗石柯葉藥材質量控制方法，其特征在于通過多穗石柯葉藥材的性狀鑒別控制質量，其中多穗石柯葉藥材完整葉長7-20cm，寬2-8cm，葉片革質，長橢圓形或卵狀長橢圓形， 葉脈在背面突出，先端急尖或漸尖，葉綠色，上面色深，下面色淡，基部契形，全緣，無毛，葉柄長1-2. 5cm,基部增粗，常呈暗褐色，質脆，氣微，味甜。
9.多穗石柯葉藥材質量控制方法，其特征在于通過多穗石柯葉藥材的顯微鑒別控制質量，其中多穗石柯葉藥材粉末灰綠色或灰棕色，葉的下表皮細胞呈多角形，壁薄，非腺毛單細胞，直徑3-9 μ m，長22-50 μ m。氣孔不定式或不等式，纖維多已折斷，成束或單根散在，直徑7-17 μ m,螺紋或網(wǎng)紋導管?？梢姈艡诮M織碎片和棕色塊狀物，薄壁細胞含草酸鈣簇晶。
10.多穗石柯葉藥材質量控制方法，其特征在于多穗石柯葉藥材中水分不得超過 8. 0%，總灰分不得超過6. 5 %，酸不溶性灰分不得超過0. 3 %，浸出物不得低于18. 0%。
11.權利要求1-10中藥材質量控制方法，其特征在于多穗石柯葉藥材為殼斗科 Fagaceae，櫟(石柯)屬 Lithoearpus 常綠植物 Lithocarpus litseifolius (Hance) Chun 的葉。
全文摘要
本發(fā)明涉及多穗石柯葉藥材的質量控制，提供了多穗石柯葉藥材的質量控制方法，在評價該藥材的含量檢測、薄層鑒別、性狀鑒別、顯微鑒別以及水分灰分控制方法的基礎上，為規(guī)范多穗石柯葉藥材質量提供了科學依據(jù)。
文檔編號A61P17/04GK102218085SQ20101015295
公開日2011年10月19日 申請日期2010年4月13日 優(yōu)先權日2010年4月13日
發(fā)明者孫偉新, 蔣華良, 顧書華 申請人:常州善美藥物研究開發(fā)中心有限公司