專利名稱：人參皂甙Rd在制備治療神經(jīng)病理性疼痛藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及人參皂甙Rd的一種新用途，具體涉及人參皂甙Rd在制備治療神經(jīng)病 理性疼痛藥物中的用途，屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
神經(jīng)病理性疼痛是指由于外周或中樞神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)損傷或功能紊亂所致的一種 慢性疼痛，可持續(xù)數(shù)天、數(shù)月甚至數(shù)年，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量，臨床治療效果不理想，因 而成為疼痛學(xué)研究的熱點(diǎn)之一。神經(jīng)病理性疼痛起源于神經(jīng)系統(tǒng)的損傷，其本質(zhì)是一種傷 害感受。病因包括自身免疫性疾病(如多發(fā)性硬化)、代謝性疾病(如糖尿病性神經(jīng)痛)、感 染(如帶狀皰疹)、血管性疾病、創(chuàng)傷和腫瘤等。大鼠坐骨神經(jīng)結(jié)扎模型(CCI)是目前最廣 泛使用的神經(jīng)病理性疼痛模型之一，它部分再現(xiàn)神經(jīng)病理性疼痛的臨床表現(xiàn)，包括自發(fā)痛、 痛覺過敏和觸誘發(fā)痛。外周重塑及中樞重塑是目前公認(rèn)的痛覺異常形成的主要機(jī)制。研究 證實(shí)，脊髓N-甲基-D-天門冬氨酸(NMDA)受體在中樞敏感化的形成和維持中起著重要的 作用。人參皂甙Rd作為一種非競爭性NMDA拮抗劑，因此有望在疼痛治療中具有重要的作 用。人參是傳統(tǒng)的名貴中藥材，在中國已有上千年的應(yīng)用歷史。主要活性成分人參皂 甙一直倍受研究者的關(guān)注。GS屬三萜皂甙，結(jié)構(gòu)上與類固醇相似，基本結(jié)構(gòu)均含有17個碳 原子的留核。迄今為止，人們已從人參中提取出30余種GS單體，按其在硅膠薄層色譜Rf 值的大小順序?qū)⒏鱾€組分命名為 RO、Ra、Rbl、Rb2、Rb3、Re、RcU Re、Rf、Rgl、Rg2、Rg3、RhU Rh2、Rh3等，這些組分按化學(xué)結(jié)構(gòu)又分為兩類①達(dá)瑪烷型，包括二醇型如Rbl、Rb2、Rc、Rd、 Rh2等，及三醇型，如Re、Rf、Rgl、Rg2、Rhl等；②齊墩果烷型，如R0。其中達(dá)瑪烷型占絕大 多數(shù)，是GS最主要活性組分。我們前期I、II、III期臨床試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，人參皂甙Rd可明顯 改善腦梗死病人的預(yù)后，而無明顯毒副作用，提示其具有神經(jīng)保護(hù)的作用，動物實(shí)驗(yàn)顯示人 參皂甙Rd可能是NMDA受體的非特異性抑制劑。人參皂甙Rd化學(xué)結(jié)構(gòu)式如

圖1所示。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供人參皂甙Rd在制備神經(jīng)病理性疼痛藥物中的用途，并期 望將其推廣應(yīng)用至自身免疫性疾病(如多發(fā)性硬化)、代謝性疾病(如糖尿病性神經(jīng)痛)、 感染(如帶狀皰疹)、血管性疾病、創(chuàng)傷、腫瘤和骨關(guān)節(jié)炎等疾病引發(fā)疼痛的治療中。有效成分含有人參皂甙的藥物可采用片劑、膠囊劑、散劑、丸劑、顆粒劑、注射劑或 乳劑。上述制劑中可含有輔助物質(zhì)、穩(wěn)定劑、潤濕劑和其它常用的添加劑，如乳糖、檸檬酸、 酒石酸、硬脂酸鎂、石膏粉、蔗糖、玉米淀粉、滑石粉、明膠、瓊脂、果膠、花生油、橄欖油、可可 月旨、乙二醇、抗壞血酸、甘露醇等。上述的制劑可按照各種制劑常規(guī)的制備工藝制成。說明書附1人參皂甙Rd的結(jié)構(gòu)式。
圖2人參皂甙Rd單體注射液提高神經(jīng)病理性痛的痛閾曲線。
具體實(shí)施例方式動物實(shí)驗(yàn)人參皂甙Rd由廣州泰禾生物藥業(yè)有限公司提供，利用中國專利ZL01803432. 2的方法制備。1材料與方法1.1實(shí)驗(yàn)動物及分組雄性SD大鼠，由第四軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供，6 7周齡，體重190 210克， 實(shí)驗(yàn)前3天領(lǐng)回，分籠飼養(yǎng)于安靜環(huán)境中。動物室溫度控制在20 24°C，濕度控制在50% 左右，動物自由進(jìn)食、飲水，正常日光周期。1.2神經(jīng)性痛模型建立參照BENNETT等人的方法建立慢性神經(jīng)痛模型。1 %戊巴比妥鈉40mg/kg腹腔注 射，在消毒條件下，沿大鼠右側(cè)后肢大腿外側(cè)切皮，暴露坐骨神經(jīng)干，用四號鉻制羊腸線環(huán) 繞神經(jīng)干分別作3或4個輕度結(jié)扎，結(jié)扎間距約1mm，結(jié)扎強(qiáng)度以引起小腿肌肉輕度顫動反 應(yīng)為宜，術(shù)畢放回原籠。1.3實(shí)驗(yàn)動物分組SD大鼠20只，隨機(jī)分為3組。假手術(shù)組(η = 4)只分離坐骨神經(jīng)不進(jìn)行結(jié)扎， 術(shù)后IOd腹腔注射人參皂甙Rd稀釋緩沖液4ml/kg ；對照組(η = 4) =CCI術(shù)后10d，腹腔注 射人參皂甙Rd稀釋緩沖液4ml/kg;治療組(η = 12) =CCI術(shù)后10d，腹腔分別注射低劑量 (10mg/kg，η = 4)、中劑量(50mg/kg, η = 4)和高劑量(100mg/kg, η = 4)人參皂甙 Rd01.4行為學(xué)測定注射人參皂甙Rd后不同時間點(diǎn)(0.5、l、1.5、2h)測定機(jī)械縮足反射閾值 (mechanical withdrawal threshold,MWT)大鼠置于透明的有機(jī)玻璃箱中，底為IcmX Icm 的鐵絲網(wǎng)，實(shí)驗(yàn)前使之適應(yīng)15min。采用2390 Electro Von-Frey測痛計，由下往上垂直刺 激大鼠足底光滑皮膚，逐漸加大刺激強(qiáng)度，觀測足回縮反應(yīng)(如舔足、甩腿等)時的刺激強(qiáng) 度值為MWT，每次刺激間隔10s，測5次，取平均值。1.5統(tǒng)計學(xué)方法全部數(shù)據(jù)以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(X 士S)表示。多組間比較用單因素方差分析，繼以最 小顯著差法(LSD)行兩兩比較。用SPSS12. 0統(tǒng)計軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，P < 0. 05為差異 有顯著性。2 結(jié)果CCI術(shù)后10天MWL降至最低值，為基礎(chǔ)值的15%。給予中等劑量人參皂甙Rd后 30min即可明顯提高M(jìn)WL，Ih和1. 5h后升高到基礎(chǔ)值的60%左右，與對照組有顯著差異(P < 0. 05)，2h時MWL重新降至最低值(圖2)。表明中等劑量人參皂甙Rd能減緩CCI大鼠 機(jī)械痛覺過敏進(jìn)程，促進(jìn)MWL恢復(fù)。低劑量藥物組作用不明顯，而高劑量組則可引起大鼠血 尿，具有一定的毒性作用。按照中國專利01803432. 2公開的方法獲得人參皂甙Rd。動物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)人參皂 甙Rd可顯著提高CCI大鼠MWL的恢復(fù)。因此，人參皂甙可期望應(yīng)用于治療多種疾病，如多發(fā)性硬化、糖尿病性神經(jīng)痛、帶狀皰疹、血管性疾病、創(chuàng)傷、腫瘤和骨關(guān)節(jié)炎等引發(fā)的疼痛 。
權(quán)利要求
人參皂甙Rd在制備治療慢性神經(jīng)病理性疼痛藥物中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述用途，其中所述的藥物為片劑、膠囊劑、散劑、丸劑、顆粒劑、注 射劑或乳劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及人參皂甙Rd在制備治療慢性神經(jīng)病理性疼痛藥物中的用途。動物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，大鼠坐骨神經(jīng)結(jié)扎(CCI)可很好的模擬慢性神經(jīng)病理性疼痛，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，給予一定劑量的人參皂甙Rd可顯著提高造模后大鼠的痛閾，提示人參皂甙Rd對慢性神經(jīng)病理性疼痛有明顯的鎮(zhèn)痛作用。
文檔編號A61P25/02GK101804063SQ201010151520
公開日2010年8月18日 申請日期2010年4月21日 優(yōu)先權(quán)日2010年4月21日
發(fā)明者史明, 趙鋼, 饒志仁 申請人:中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)