專利名稱：用于分析波生坦及相關(guān)物質(zhì)的hplc方法以及這些物質(zhì)作為參比標準和標記的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于分析藥品物質(zhì)波生坦和相關(guān)物質(zhì)的新型HPLC方法、以及所述物質(zhì)作為參比標準和標記的用途。
背景技術(shù)：
為確保醫(yī)藥產(chǎn)品的上市許可，制造商必須向合適的注冊機構(gòu)提交詳細證明，以證實該產(chǎn)品適合向市場發(fā)放。因此必須使注冊機構(gòu)相信該產(chǎn)品對于人類給藥是可接受的，且待上市的特定藥物組合物在發(fā)放之時沒有雜質(zhì)并具有可接受的儲存穩(wěn)定性。向注冊機構(gòu)提交的文件必須包括分析數(shù)據(jù)，該分析數(shù)據(jù)表明在制造時活性藥物成分(API)中沒有雜質(zhì)、或存在可接受水平的雜質(zhì)，并表明藥物組合物的儲存穩(wěn)定性是可接受的。API及藥物組合物中的可能雜質(zhì)包括殘留量的合成前體(中間體)、合成API過程中產(chǎn)生的副產(chǎn)品、殘留溶劑、API的異構(gòu)體(如幾何異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體或?qū)τ钞悩?gòu)體)、合成API或制備藥物組合物所使用的材料中存在的污染物、以及未識別的不定物質(zhì)(adventitious substances)。在儲存期間可能出現(xiàn)的其它雜質(zhì)包括API的降解物 (degradants)，如水解或氧化形成的那些降解物。衛(wèi)生部門具有非常嚴格的標準，生產(chǎn)商必須證明他們的產(chǎn)品相對無雜質(zhì)或雜質(zhì)在可接受的限度內(nèi)，這些標準對于生產(chǎn)的每批藥物產(chǎn)品是可再現(xiàn)的(可重復(fù)使用的)。為證明API或藥物組合物安全有效所需的測試包括純度化驗、相關(guān)物質(zhì)測試、含量均勻度測試和溶出度測試?；灉y試確定與已知純度的標準相比時測試產(chǎn)品的純度，而相關(guān)物質(zhì)測試則用來對產(chǎn)品中存在的所有雜質(zhì)進行定量。含量均勻度測試確保批量產(chǎn)品如片劑含有均勻含量的API，而溶出度測試則確保每批產(chǎn)品具有一致的API溶出度和釋放。選擇用于分析API或藥物組合物(如片劑和膠囊劑)的技術(shù)通常為連接檢測器的高效液相色譜(HPLC)。檢測器包括UV-可見檢測器或質(zhì)譜(MQ檢測器。API和存在的雜質(zhì)(如果有的話)在HPLC固定相上得以分離，并通過所述檢測器進行檢測和定量。HPLC是一種色譜分離技術(shù)，其中，高壓泵迫使所分析的物質(zhì)或混合物連同液體溶劑一流動相(也稱為洗脫劑)-通過含有固定相的分離柱。HPLC分析可在等度(isocratic)或梯度模式下進行。在等度模式下，流動相組分始終恒定。梯度HPLC分離是伴隨一段時間內(nèi)組成流動相的兩種或多種溶劑的百分比逐漸改變而進行的。溶劑的改變由混合器控制，在溶劑通過柱之前，混合器將其混合以產(chǎn)生流動相。如果物質(zhì)與固定相強烈地相互作用，那么其在柱中保留相對較長的時間，而與固定相不那么強烈地相互作用的物質(zhì)則更快地從柱中洗脫出來。取決于相互作用的強度，分析物的各種成分在不同時間(稱為保留時間)出現(xiàn)在分離柱的末端，在那里借助于合適的檢測器如UV檢測器對它們進行檢測和定量。
波生坦(bosentan)屬于一類高度取代的嘧啶，其用于通過阻斷內(nèi)皮素 (endothelin)的作用來治療肺動脈高血壓。波生坦，具有式⑴所示的化學結(jié)構(gòu)，分子量為551. 615，其分子式為C27H29N5O6S15 波生坦是一種白色至淡黃白色(yellowish white)粉末，易溶于乙腈。
權(quán)利要求
1.化合物A，具有化學名N-[6-(2-(2-羥基乙氧基)乙氧基)-5_羥基-2-(嘧啶-2-基)-嘧啶-4-基]-4-叔丁基苯磺酰胺，并具有以下結(jié)構(gòu)
2.化合物B，具有化學名N-[6-(乙烯-1-氧基)-5_羥基-2-(嘧啶-2-基)-嘧啶-4-基]-4-叔丁基苯磺酰胺，并具有以下結(jié)構(gòu)
3.化合物C，具有化學名N-[6-(2-(2-羥基乙氧基)乙氧基)-5-(2_甲氧基苯氧基)-2-(嘧啶-2-基)-嘧啶-4-基]-4-叔丁基苯磺酰胺，并具有以下結(jié)構(gòu)
4.化合物D，具有化學名N-[6-羥基-5-(2-甲氧基苯氧基)-2-(嘧啶-2-基)-嘧啶-4-基]-4-叔丁基苯磺酰胺，并具有以下結(jié)構(gòu)
5.化合物E，具有化學名N-[6-(乙烯-1-氧基)-5-(2_甲氧基苯氧基)-2-(嘧啶-2-基)-嘧啶-4-基]-4-叔丁基苯磺酰胺，并具有以下結(jié)構(gòu)
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項所述的化合物，為分離形式。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的化合物，其為基本上純的形式。
8.根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的化合物，其具有高于約90%的純度。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-8中任一項所述的化合物，用于在測試波生坦或含有波生坦的藥物劑型的樣品純度中作為參比標記或作為參比標準而使用。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-9中任一項所述的化合物在測試波生坦或含有波生坦的藥物劑型的樣品純度中作為參比標記或作為參比標準的用途。
11.一種用于測試波生坦樣品純度的色譜方法，所述方法包括通過利用根據(jù)權(quán)利要求9或10所述的參比標記或參比標準來測定所述樣品中化合物A-E中任何一種或多種的存在。
12.—種色譜方法，包含流動相和固定相，用于在含有波生坦的樣品中通過測定化合物 A-E中任何一種或多種的存在來測試波生坦樣品的純度，所述方法包括(a)將波生坦或含有波生坦的劑型的樣品溶解在溶劑中以制備樣品溶液；(b)將根據(jù)權(quán)利要求1-9中任一項所述的化合物A-E中的任何一種或多種的樣品溶解在溶劑中以制備參比標記溶液；(c)對所述樣品溶液和所述參比溶液實施色譜技術(shù)；以及(d)通過參照所述參比溶液中存在的已知化合物的存在，測定所述樣品中化合物A-E 中任何一種或多種的存在。
13.根據(jù)權(quán)利要求11或12所述的方法，其中，所述方法為HPLC方法或梯度HPLC方法。
14.根據(jù)權(quán)利要求11-13中任一項所述的方法，其中，使用的所述固定相為(a)反相；和/或(b)辛基硅烷硅膠或十八烷基硅烷硅膠
15.根據(jù)權(quán)利要求11-14中任一項所述的方法，其中，所述流動相包含緩沖液(A)和有機溶劑(B)的組合。
16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，其中，所述緩沖液(A)(a)為含水緩沖液；和/或(b)為磷酸鹽、醋酸鹽、甲酸鹽或三氟乙酸或它們的混合物的水溶液；和/或(c)為醋酸鹽水溶液；和/或(d)為醋酸銨水溶液；和/或(e)為醋酸銨水溶液，其中，醋酸銨的濃度為0.OlM至1. 0M。
17.根據(jù)權(quán)利要求15或16所述的方法，其中，所述有機溶劑(B)(a)為極性質(zhì)子溶劑或偶極非質(zhì)子溶劑；和/或(b)選自包括甲醇、乙腈、丙醇或異丙醇或它們的混合物的組中；和/或(c)包含乙腈或甲醇或它們的混合物。
18.根據(jù)權(quán)利要求15-17中任一項所述的方法，其中，所述流動相包含醋酸銨(A)和乙腈(B)的組合。
19.根據(jù)權(quán)利要求15-18中任一項所述的方法，其中，所述流動相包含以下梯度設(shè)計
20.根據(jù)權(quán)利要求19所述的方法，其中，所述流動相包含(a)醋酸銨，作為所述緩沖液(A)；和/或(b)乙腈，作為所述有機溶劑(B)。
21.根據(jù)權(quán)利要求15-20中任一項所述的方法，其中，所述緩沖液(A)的pH為約2至6。
22.根據(jù)權(quán)利要求11-21中任一項所述的方法，其中，所述色譜法在約15-40°C的溫度下進行。
23.根據(jù)權(quán)利要求11-22中任一項所述的方法，用于(a)檢測化合物A-E中的一種或多種；和/或(b)檢測并定量化合物A-E中的一種或多種；和/或(c)以單次操作檢測并定量化合物A-E中的一種或多種。
24.根據(jù)權(quán)利要求11-23中任一項所述的方法，其中，待測試的波生坦樣品為(a)波生坦API；或(b)含有波生坦的劑型；或(c)波生坦鹽和/或溶劑化物；或(d)含有波生坦鹽和/或溶劑化物的劑型。
25.根據(jù)權(quán)利要求Il-M中任一項所述的方法，其中，被測試的所述波生坦用于藥物組合物中。
26.波生坦，其已被實施根據(jù)權(quán)利要求11-25中任一項所述的方法。
27.根據(jù)權(quán)利要求沈所述的波生坦，其基本上沒有如權(quán)利要求1-5中所限定的化合物 A-E中的一種、兩種、三種、四種或全部五種。
28.波生坦，其基本上沒有如權(quán)利要求1-5中所限定的化合物A-E中的一種、兩種、三種、四種或全部五種。
29.一種藥物組合物，含有根據(jù)權(quán)利要求沈-28中任一項所述的波生坦。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用于分析藥品物質(zhì)波生坦和相關(guān)物質(zhì)的新型HPLC方法，本發(fā)明還涉及所述物質(zhì)作為參比標準和標記的用途。
文檔編號A61K31/505GK102272108SQ200980153433
公開日2011年12月7日 申請日期2009年11月2日 優(yōu)先權(quán)日2008年11月3日
發(fā)明者庫馬 埃拉·科特斯瓦拉·薩蒂亞·維賈雅, 阿維納什·普拉巴卡·尼卡姆 申請人:基因里克斯(英國)有限公司