專利名稱：將火絨草酸作為有效成分含有的改善皺紋用皮膚化妝料組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種通過(guò)下述化學(xué)式1所表示的作為有效成分含有火絨草酸 {Leontopodicacid ；2-[ (3S)-3-hydroxybutanate]_3，4,5-tris-[(2E)_3_(3,4-dihydroxy phenyl)-2-propenoate]-D-glucaricacid}的改善皺紋用皮膚化妝料組合物。化學(xué)式1皮膚是人體的第一防護(hù)膜，從溫度及濕度變化和紫外線、公害物質(zhì)等外部環(huán)境的刺激中保護(hù)體內(nèi)的諸器官，并在調(diào)節(jié)體溫等維持生物體恒常性的過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。 但是，從外部所受到的過(guò)度的物理刺激、化學(xué)刺激及勞累、缺乏營(yíng)養(yǎng)等會(huì)降低皮膚的正常功能，并促進(jìn)彈力損失、角質(zhì)化、生成皺紋等的皮膚老化現(xiàn)象，為了防止上述現(xiàn)象并維持健康且富有彈性的皮膚的而目前使用的化妝料大部分存在效果不理想或引發(fā)皮膚副作用等諸多問(wèn)題。在進(jìn)行不引發(fā)皮膚副作用且具有防止皮膚老化效果的原料的研究的過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)將火絨草酸適用化妝料等的皮膚化妝料組合物時(shí)顯示出優(yōu)異的防止皮膚老化效果。對(duì)火絨草酸的現(xiàn)有研究有關(guān)于對(duì)抗氧化功效和防止DNA受損的功效 (Leontopodic acid-a novel highly substituted glucaric acid derivative from Edelweiss(Leontopodium alpinum Cass. ) and its antioxidative and DNA protecting properties. Tetrahedron, Volume 61, Issue 19,9May 2005, Pages 4621—4630)的研究，這與本發(fā)明的通過(guò)膠原酶表達(dá)抑制效果，膠原蛋白生物合成促進(jìn)效果的皺紋改善效果是完全不同的。

發(fā)明內(nèi)容
技術(shù)課題本發(fā)明是為了解決上述的現(xiàn)有技術(shù)的問(wèn)題而提出的，本發(fā)明的目的在于提供一種改善皺紋用皮膚化妝料組合物，通過(guò)將皺紋改善效果優(yōu)異的火絨草酸作為有效成分而含有而具有優(yōu)異的膠原酶表達(dá)抑制效果，膠原蛋白生物合成促進(jìn)效果及皺紋改善效果。課題解決方案為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供改善皺紋用皮膚化妝料組合物，其特征在于，作為有效成分含有火絨草酸。并且，提供改善皺紋用皮膚化妝料組合物，其特征在于，含有收集在納米脂質(zhì)體內(nèi)的火絨草酸。本發(fā)明的改善皺紋用皮膚化妝料組合物，其特征在于，上述火絨草酸以整個(gè)組合物的總重量為基準(zhǔn)含有0. 0001重量％至10重量％。并且，其特征在于，收集在上述納米脂質(zhì)體內(nèi)的火絨草酸對(duì)組合物總重量含有 0. 001至50重量％。本發(fā)明的改善皺紋用皮膚化妝料組合物，其特征在于，抑制膠原酶表達(dá)，并促進(jìn)膠原蛋白生物合成。發(fā)明的效果如上說(shuō)明，本發(fā)明的將火絨草酸作為有效成分而含有的改善皺紋用皮膚化妝料組合物的膠原酶表達(dá)抑制效果、膠原蛋白生物合成促進(jìn)效果及皺紋改善效果優(yōu)異。并且，在納米脂質(zhì)體內(nèi)含有穩(wěn)定化的火絨草酸時(shí)劑型穩(wěn)定性及硬皮吸收能力更加優(yōu)越。


圖1是表示從單角鯊?fù)檫^(guò)氧化物(Squalane mono-peroxide)誘導(dǎo)的皺紋的生物體內(nèi)(invivo)皺紋改善效果照片。圖2是表示對(duì)從UV誘導(dǎo)的皺紋的生物體內(nèi)(invivo)皺紋改善效果的照片。發(fā)明的最佳實(shí)施方式本發(fā)明提供改善皺紋用皮膚化妝料組合物，其特征在于，作為有效成分含有火絨草酸。并且，提供改善皺紋用皮膚化妝料組合物，其特征在于，含有收集在納米脂質(zhì)體內(nèi)的火絨草酸。本發(fā)明的改善皺紋用皮膚化妝料組合物，其特征在于，上述火絨草酸以整個(gè)組合物的總重量為基準(zhǔn)含有0. 0001重量％至10重量％。并且，其特征在于，收集在上述納米脂質(zhì)體內(nèi)的火絨草酸對(duì)組合物總重量含有 0. 001至50重量％。上述火絨草酸是高山火絨草中富含的主要成分之一。高山火絨草是雙子葉植物桔梗目菊科的多年生草本，學(xué)名是Leontopodiumalpinum。原產(chǎn)地是歐洲阿爾卑斯山地域，屬高山植物。在韓國(guó)的高山地帶生長(zhǎng)著類似的有黃花、山黃花、漢拿黃花等。高山火絨草從前
4就在民間用于腹痛、扁桃體炎、支氣管炎、癌癥、瘧疾、腹瀉、熱病等疾病的治療。高山火絨草裸露于阿爾卑斯環(huán)境的強(qiáng)紫外線、過(guò)度的溫度、濕度變化、強(qiáng)風(fēng)等極限環(huán)境。高山火絨草中含有酚酸，木脂素(Iignans)，類黃酮，倍半萜(sesquiterpenes)，苯并呋喃，吡喃衍生物， 聚乙炔,香豆素(coumarins)，二萜酸(diterpeneacids)等多種成分。本發(fā)明的改善皺紋用皮膚化妝料組合物中，上述火絨草酸可以通過(guò)粉碎高山火絨草的步驟(a)；將上述步驟(a)的粉碎物通過(guò)由水，碳數(shù)1 4個(gè)的無(wú)水或者含水酒精及丙酮構(gòu)成的溶劑中選擇的一種以上提取的步驟(b)；及將上述步驟(b)的提取物由乙酸乙酯、 乙醚(diethyl ether)、苯、氯仿及己烷構(gòu)成的溶劑中選擇的一種以上再提取的步驟(c)而得到，上述碳數(shù)1 4個(gè)的無(wú)水或者含水酒精可以是甲醇、乙醇、1，3_丁二醇、正丙醇、異丙醇或者正丁醇，上述步驟(b)及步驟(c)的提取可以通過(guò)冷浸，滲濾或者溫浸的方法進(jìn)行。本發(fā)明的改善皺紋用皮膚化妝料組合物中，上述納米脂質(zhì)體的平均粒子直徑可以是 10-500nm。本發(fā)明的改善皺紋用皮膚化妝料組合物，其特征在于抑制膠原酶表達(dá)、促進(jìn)膠原蛋白生物合成。下面，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步地詳細(xì)說(shuō)明。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例的皮膚化妝料組合物中所含有的火絨草酸以將高山火絨草在無(wú)水或者含水的低級(jí)酒精、水或者丙酮中第一次提取后再以乙酸乙酯、乙醚、苯、氯仿、己烷等的低極性溶劑進(jìn)行再提取的高山火絨草提取物制造，從而含量增大，并去除了雜物，其穩(wěn)定度也得到提高。對(duì)上述火絨草酸的制造方法進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明如下。但是，火絨草酸制造方法并不限于此。首先，將高山火絨草細(xì)粉碎后，對(duì)高山火絨草粉碎物的干燥重量按重量比5 20 倍施加將極性溶劑水、碳數(shù)1 4個(gè)的無(wú)水或者含水低級(jí)酒精(甲醇、乙醇、1，3- 丁二醇、正丙醇、異丙醇或者正丁醇等)，水和上述低級(jí)酒精的混合物、丙酮、或者上述溶劑的混合物等提取溶劑而沉積提取、過(guò)濾及減壓濃縮。之后，在上述濃縮液添加水而使其分散后，在濃縮液添加相同量的乙酸乙酯、氯仿、乙醚等的低極性有機(jī)溶劑后進(jìn)行震蕩。震蕩后分離有機(jī)層并進(jìn)行減壓濃縮而得到活性優(yōu)異的高山火絨草提取物。作為提取方法使用冷浸及滲濾時(shí)優(yōu)選提取約12 96小時(shí)，也可以將碳數(shù)1 4 個(gè)的無(wú)水或者含水低級(jí)酒精，乙酸乙酯或者乙醚作為溶劑在4 25°C常溫下放置熟成3 20日而提取有效活性成分。使用溫浸時(shí)根據(jù)所使用的溶劑等的種類和溫度不同，優(yōu)選以接近溶劑的環(huán)流溫度的溫度提取5 M小時(shí)。通過(guò)上述方法獲取的火絨草酸顯示出皺紋改善效果，可以制作成皮膚外用軟膏或涂劑等的皮膚化妝料而作為涂覆于人體皮膚上的無(wú)副作用，安全且效果優(yōu)異的皮膚皺紋改善劑使用。如上所述制造的火絨草酸以整個(gè)組合物的總重量為基準(zhǔn)含有0.0001 10重量％，優(yōu)選含有0. 0005 5. 0重量％是妥當(dāng)?shù)?。因?yàn)樵?. 0001重量％以下的濃度下沒(méi)有明顯的效果，而在10.0重量％以上的濃度下卻沒(méi)有顯示出其效果根據(jù)含有量增加而得到明顯的提升。
在本發(fā)明中納米脂質(zhì)體表示具有脂質(zhì)體形態(tài)的平均粒子直徑為10-500nm的脂質(zhì)體。根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)現(xiàn)例，納米脂質(zhì)體的平均粒子直徑是50-300nm。在納米脂質(zhì)體的平均粒子直徑超過(guò)300nm時(shí)，在本發(fā)明所要實(shí)現(xiàn)的技術(shù)效果中皮膚滲透的改善及劑型穩(wěn)定性的改善非常微弱。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例而用于使火絨草酸提取物穩(wěn)定化的納米脂質(zhì)體通過(guò)包含多元醇(polyols)、油性成分、界面活性劑、磷脂質(zhì)、脂肪酸及水的混合物而制造。用于本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例的納米脂質(zhì)體的多元醇不受特別限制，優(yōu)選地從丙二醇、二丙二醇、1，3_ 丁二醇、甘油、甲基丙二醇、異丙二醇、戊二醇、赤蘚糖醇、木糖醇、山梨醇及其混合物構(gòu)成群中選擇。其使用量對(duì)納米脂質(zhì)體總重量是10-80重量％，優(yōu)選30-70重量％。用于制造本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例的納米脂質(zhì)體的油性(oil)成分可以使用業(yè)界熟知的多種油，優(yōu)選如十六烷及石蠟油等的碳?xì)溆?，酯類的合成油，如二甲硅油及環(huán)甲硅油的硅油，如瓜子油、玉米油、豆油、鱷梨油、芝麻油及魚(yú)油的動(dòng)植物油，如乙氧基化烷基醚類油， 丙氧基烷基醚類油，植物鞘氨醇，鞘氨醇及二氫鞘氨醇的鞘氨醇脂質(zhì)，腦苷膽固醇、谷甾醇硫酸鹽膽固醇、谷留醇硫酸鹽，C10-40脂肪醇及其混合物。其使用量對(duì)納米脂質(zhì)體總重量是1. 0-30. 0重量％，優(yōu)選3. 0-20. 0重量％。用于制造本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例的納米脂質(zhì)體的界面活性劑可以使用業(yè)界熟知的任意一種。例如，可以使用負(fù)離子性界面活性劑，正離子性界面活性劑，陽(yáng)性界面活性劑及非離子性界面活性劑。優(yōu)選負(fù)離子性界面活性劑及非離子性界面活性劑。負(fù)離子性界面活性劑的具體例子包括烷基?；劝彼?、烷基磷酸酯、烷基酰乳酸鈉、二烷基磷酸鹽及三烷基磷酸酯。非離子性界面活性劑的具體例子包括烷氧基烷基醚、烷氧基烷基酯、烷基糖苷、聚甘油酯及糖酯。尤其優(yōu)選的界面活性劑是屬于非離子性界面活性劑的聚山梨酯類。其使用量納米脂質(zhì)體對(duì)總重量是0. 1-10重量％，優(yōu)選0. 5-5. 0重量％。作為用于本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例的納米脂質(zhì)體的制造的另一個(gè)成分磷脂質(zhì)利用兩親脂性脂類，包括天然磷脂質(zhì)(例如，蛋黃卵磷脂或者大豆卵磷脂、鞘磷脂)及合成磷脂質(zhì) (例如，二棕櫚酸磷脂酰膽堿或者氫化卵磷脂)，其中優(yōu)選卵磷脂。特別是，優(yōu)選從大豆或者蛋黃提取的天然的不飽和卵磷脂或者飽和卵磷脂。通常地天然的卵磷脂的磷脂酰膽堿的量為23-95%，還有磷脂酰乙醇胺的量為20%以下。在本發(fā)明的納米脂質(zhì)體的制造中，在納米脂質(zhì)體總重量中卵磷脂的使用量為0. 5-20. 0重量％，優(yōu)選2. 0-8. 0重量％。用于本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例的納米脂質(zhì)體制造的脂肪酸為高級(jí)脂肪酸，優(yōu)選C12-22 烷基鏈的飽和或者不飽和脂肪酸，例如包括月桂酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸、硬脂酸、油酸及亞油酸。其使用量在納米脂質(zhì)體總重量中占0. 05-3. 0重量％，優(yōu)選0. 1-1. 0重量％。用于本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例的納米脂質(zhì)體的制造的水一般是脫離子的蒸餾水，其使用量在納米脂質(zhì)體總重量中占5. 0-40重量％?？梢酝ㄟ^(guò)業(yè)界熟知的多種方法納米脂質(zhì)體的制造，但是最優(yōu)選通過(guò)將包含上述成分的混合物適用于高壓均質(zhì)器而制造。通過(guò)高壓均質(zhì)器而制造納米脂質(zhì)體可以根據(jù)所要的粒子大小而以多種條件(例如壓力、次數(shù)等)實(shí)施，優(yōu)選地，在600-1200毫巴的壓力下通過(guò) 1-5次高壓均質(zhì)器而制造納米脂質(zhì)體。通過(guò)根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例的納米脂質(zhì)體而穩(wěn)定化的火絨草酸具有提高劑型耐穩(wěn)定性及溶解度及硬皮吸收率的效果。根據(jù)本發(fā)明的組合物含有在化妝品學(xué)及皮膚科學(xué)上可允許的媒介及/或者基劑。 這可以提供為適于局部適用的所有劑型，例如以溶液、膠水、固體或者揉和無(wú)水生成物，在水上分散油狀而獲取的乳液、懸浮液、微乳液、微膠囊、微粒或者離子型(脂質(zhì)體)及/或者非離子型的嗉囊分散劑的形態(tài)，或者爽膚水、霜、乳液、散、軟膏、噴霧或者遮瑕棒的形態(tài)提供。這些組合物可以通過(guò)相關(guān)領(lǐng)域的通常方法而制造。并且根據(jù)本發(fā)明的組合物可以以泡沫形態(tài)或者還包括壓縮的推進(jìn)劑的氣霧劑組合物的形態(tài)使用。本發(fā)明的組合物可以含有如脂肪物質(zhì)、有機(jī)溶劑、溶解劑、濃縮劑及膠化劑、軟化劑，抗氧化劑，懸浮劑、穩(wěn)定化劑、發(fā)泡劑、芳香劑、界面活性劑、水、離子型或者非離子型柔化齊 、填充劑、金屬離子封鎖劑及螯合劑、保存劑、維生素、阻斷劑、濕潤(rùn)劑、精油、染料、顏料、親水性或者親油性活性劑、脂類嗉囊或者通常在化妝品中使用的如任意的其它成分的化妝品學(xué)或皮膚科學(xué)領(lǐng)域中通常使用的輔助劑。這些輔助劑以在化妝品學(xué)或者皮膚科學(xué)領(lǐng)域里一般使用的量投入。
實(shí)施例下面，通過(guò)實(shí)施例、實(shí)驗(yàn)例及制造例而進(jìn)一步具體說(shuō)明本發(fā)明。但是下述的實(shí)施例、實(shí)驗(yàn)例及制造例僅以為了有助于對(duì)本發(fā)明的理解的目的而提供，本發(fā)明的范疇及范圍并不限于此。[實(shí)施例1]火絨草酸的制造收集利用甲醇每隔一星期重復(fù)三次冷浸提取室溫下在陰涼處干燥的高山火絨草 (2kg)的提取液而減壓濃縮而獲取160. 5g甲醇提取物。甲醇提取物蒸餾水懸浮并以己烷分劃2g)，而后以乙酸乙酯重新分劃剩余的水層而獲取乙腈分劃物4g)，而后以丁醇重新分劃剩余的水層而獲取丁醇提取物(20. 6g)并最終獲取水分劃40. 6g。然后，利用甲醇溶解含有地表物質(zhì)的上述水分劃40. 6g后利用填充硅膠的玻璃柱
(cp5x70cm, 7734，Merck公司)及水、乙腈、甲醇的混合溶劑而溶出活性物質(zhì)而獲取10小
分劃。其中以含有地表物質(zhì)的小分劃7(1. 153g)為對(duì)象實(shí)施副空心柱色層分析。將ODS填
充到玻璃柱(cpl.6xl00cm)內(nèi)并利用HPLC用泵從10%乙腈水溶液到30%乙腈水溶液按步
驟使用而實(shí)施色層分析并在其中獲取含有地表物質(zhì)的小分劃(1.79g)。將以上所獲取的含有地表物質(zhì)的小分劃重新在填充葡聚糖凝膠(S印hadexLH-20，PharmaciaBiOtech公司)的
玻璃柱(cpl.0x50cm)中以甲醇溶出而最終獲取地表物質(zhì)火絨草酸(70mg)。[實(shí)施例2]制造穩(wěn)定成納米脂質(zhì)體的火絨草酸為了將上述火絨草酸穩(wěn)定成納米脂質(zhì)體混合甘油580g、辛酸癸酸三酸甘油酯 200g、磷脂質(zhì)50g、膽固醇20g而利用攪拌機(jī)攪拌并加溫到75°C而混合溶解后，添加從上述實(shí)施例1獲取的火絨草酸固形粉50g而將其完全溶解。在此緩慢地添加純凈水IOOg而混合后在50°C、1000毫巴壓力的調(diào)節(jié)下使其通過(guò)三次高壓柔化裝置(MicrOfluidiZerM210EH， Microfluidics, USA) 3而制造火絨草酸的納米脂質(zhì)體。該脂質(zhì)體的粒子大小是約70nm。[實(shí)驗(yàn)例1]檢測(cè)膠原蛋白生物合成的促進(jìn)效果與一只可促進(jìn)膠原蛋白生物合成的生育酚及EGCG進(jìn)行比較而檢測(cè)上述實(shí)施例1的膠原蛋白生物合成促進(jìn)效果。首先，在24孔(well)中每孔播種(seeding) IO5個(gè)人成纖維細(xì)胞(fibroblast) (PromoCell, Germany)而將其培養(yǎng)到90%。然后將其以無(wú)血清DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)M小時(shí)后，將融化在無(wú)血清培養(yǎng)基中的實(shí)施例1，生育酚及EGCG分別以10-4摩爾濃度進(jìn)行處理并在CO2培養(yǎng)機(jī)中培養(yǎng)M小時(shí)。打撈這些液體的上層液體并利用前膠原蛋白型(I)酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)工具(procollagentype (I))而檢查前膠原蛋白(procollagen)的增減與否。其結(jié)果表示在下述表1中，在此合成能力是以非處理群為100而進(jìn)行對(duì)照的。表1
權(quán)利要求
1.一種改善皺紋用皮膚化妝料組合物，其特征在于，作為有效成分含有火絨草酸。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的改善皺紋用皮膚化妝料組合物，其特征在于，所述火絨草酸以整個(gè)組合物的總重量為基準(zhǔn)含有0. 0001重量％至10重量％。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的改善皺紋用皮膚化妝料組合物，其特征在于，所述組合物抑制膠原酶表達(dá)或促進(jìn)膠原蛋白生物合成。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的改善皺紋用皮膚化妝料組合物，其特征在于，所述火絨草酸收集在納米脂質(zhì)體中。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的改善皺紋用皮膚化妝料組合物，其特征在于，收集在所述納米脂質(zhì)體中的火絨草酸在組合物總重量中含有0. 001至50重量％。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)一種將火絨草酸(leontopodic acid)作為有效成分含有的改善皺紋用皮膚化妝料組合物，顯示提高的膠原酶(Collagenase)表達(dá)抑制效果，膠原蛋白(Collagen)生物合成促進(jìn)效果及皺紋改善效果的皮膚化妝料組合物。并且還公開(kāi)作為含有穩(wěn)定成納米脂質(zhì)體(nano liposome)的火絨草酸的改善皺紋用皮膚化妝料組合物，具有優(yōu)異的劑型穩(wěn)定性及硬皮吸收能力的皮膚化妝料組合物。
文檔編號(hào)A61K8/35GK102238935SQ200980148755
公開(kāi)日2011年11月9日 申請(qǐng)日期2009年12月7日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月5日
發(fā)明者安順愛(ài), 金德姬, 金漢坤, 金漢星, 金真雄 申請(qǐng)人:株式會(huì)社愛(ài)茉莉太平洋