專利名稱：眼后節(jié)到達用脂質(zhì)體和眼后節(jié)疾病用醫(yī)藥組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及具有眼后節(jié)到達性的脂質(zhì)體和使用該脂質(zhì)體的眼后節(jié)疾病用醫(yī)藥組 合物。
背景技術(shù)：
以往，在對眼后節(jié)疾病的藥劑治療中，廣泛使用向結(jié)膜下和玻璃體內(nèi)的注射等侵 襲性方法。作為其理由，可以列舉在滴眼等眼局部給藥中，由于眼淚等藥劑的滯留時間變短， 和角膜上皮細胞中的藥劑透過性低等。但是，注射除了欠缺簡便性以外，具有存在玻璃體出血和視網(wǎng)膜剝離等并發(fā)癥的 擔心等問題，利用如眼局部給藥的非侵襲性給藥方法也要求眼后節(jié)到達性高的藥劑。另一方面，嘗試在眼局部給藥用中利用脂質(zhì)體，形成有若干種脂質(zhì)體，但是，它們 停留于例如以在角膜表面的滯留時間延長(專利文獻1)為目的等，仍沒有通過脂質(zhì)體的眼 局部給藥而使藥劑到達眼后節(jié)的成功例子。專利文獻2中公開了以到達視網(wǎng)膜細胞內(nèi)為目的的脂質(zhì)體制劑，報道了在含有二 月桂酰磷脂酰膽堿(DLPC)和二油酰磷脂酰乙醇胺(DOPE)的特定的脂質(zhì)體中“封入的DNA” 能夠到達視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞，但沒有封入化學物質(zhì)的脂質(zhì)體。該專利文獻2的“發(fā)明的詳細說明”中公開了各種脂質(zhì)體的組成和制法，但使用磷 脂質(zhì)的脂質(zhì)體中，在實際上封入的DNA到達視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞確認中使用的均為多層脂質(zhì) 體(multi lamellar vesicle 以下記為 MLV)。另一方面，本發(fā)明的發(fā)明人獨自進行的脂質(zhì)體研究和開發(fā)的結(jié)果，可知在MLV中， 脂質(zhì)體自身不能到達眼后節(jié)。即該專利文獻2中，在脂質(zhì)體中封入的DNA雖然到達眼后節(jié)，但存在脂質(zhì)體其本身 在途中崩解，不能到達眼后節(jié)的可能性。這就意味著封入的DNA到達眼后節(jié)的比例不一定高。專利文獻1 專利第3624418號公報專利文獻2 專利第3963506號公報

發(fā)明內(nèi)容
因此，本發(fā)明的發(fā)明人等對能夠到達眼后節(jié)的脂質(zhì)體進行了更深入研究，結(jié)果發(fā) 現(xiàn)，通過使脂質(zhì)體的平均粒徑為亞微米大小，即使是對眼后節(jié)疾病預(yù)防或治療有效的藥劑， 也能夠制造能夠到達眼后節(jié)的脂質(zhì)體制劑，從而完成了本發(fā)明，將其作為目的，在于提供一 種即使通過眼局部給藥也能夠到達眼后節(jié)并且沒有細胞毒性的新型組成的脂質(zhì)體和使用 該脂質(zhì)體的眼后節(jié)疾病用醫(yī)藥組合物。上述目的通過下述的發(fā)明的第一方面至第十方面而實現(xiàn)?！窗l(fā)明的第一方面〉
一種眼后節(jié)到達用脂質(zhì)體，特征在于含有下述(A)以及(B)和/或(C)作為構(gòu)成 成分，具有細胞膜透過性的硬度，平均粒徑為1 μ m以下，(A)磷脂質(zhì)，(B)電荷物質(zhì)，(C)膜強化物質(zhì)?！窗l(fā)明的第二方面〉如發(fā)明的第一發(fā)面所述的眼后節(jié)到達用脂質(zhì)體，特征在于具有細胞膜透過性的硬 度，以下式⑴所示的H/P值計為0. 15 1. 0，Η/Ρ......(I)H 利用原子力顯微鏡測定的、吸附于基板上的脂質(zhì)體的高度，P 禾Ij用動態(tài)光散射測定的脂質(zhì)體的平均粒徑。〈發(fā)明的第三方面〉如發(fā)明的第一方面或第二方面所述的眼后節(jié)到達用脂質(zhì)體，特征在于平均粒徑為 600nm以下?！窗l(fā)明的第四方面〉如發(fā)明的第一方面至第三方面中任一項所述的眼后節(jié)到達用脂質(zhì)體，特征在于 (A)的酰基的碳原子數(shù)為12 18?！窗l(fā)明的第五方面〉如發(fā)明的第一方面至第四方面中任一項所述的眼后節(jié)到達用脂質(zhì)體，特征在于
(A)含有選自二硬脂酰磷脂酰膽堿、二棕櫚酰磷脂酰膽堿、二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿、二月桂 酰磷脂酰膽堿、蛋黃磷脂酰膽堿、氫化磷脂酰膽堿中的至少1種以上的磷脂質(zhì)?！窗l(fā)明的第六方面〉如發(fā)明的第一方面至第五方面中任一項所述的眼后節(jié)到達用脂質(zhì)體，特征在于脂 質(zhì)體顆粒的凝膠_液晶轉(zhuǎn)移溫度為20°C以上?！窗l(fā)明的第七方面〉如發(fā)明的第一方面至第六方面中任一項所述的眼后節(jié)到達用脂質(zhì)體，特征在于
(B)為負電荷物質(zhì)。〈發(fā)明的第八方面>如發(fā)明的第一方面至第七方面中任一項所述的眼后節(jié)到達用脂質(zhì)體，特征在于
(C)為具有類固醇骨架的化合物?！窗l(fā)明的第九方面〉一種眼后節(jié)疾病用醫(yī)藥組合物，特征在于在發(fā)明的第一方面至第八方面所述的眼 后節(jié)到達用脂質(zhì)體中，封入有對眼后節(jié)疾病的預(yù)防或治療有效的藥劑?！窗l(fā)明的第十方面〉一種發(fā)明的第九方面所述的眼后節(jié)疾病用醫(yī)藥組合物，特征在于劑型是滴眼劑。發(fā)明的效果本發(fā)明的脂質(zhì)體具有能夠到達眼后節(jié)并且沒有細胞毒性的優(yōu)點。因此，本發(fā)明的 眼后節(jié)疾病用醫(yī)藥組合物沒有注射等的繁瑣，能夠通過滴眼等簡便的眼局部給藥方法進行 眼后節(jié)疾病的預(yù)防或治療。


圖1是表示在眼后節(jié)到達確認試驗中來自眼球的冷凍切片摘出部位的圖。圖2是表示實施例3，4和比較例1，2的脂質(zhì)體的眼后節(jié)到達確認試驗的結(jié)果的熒 光顯微鏡觀察的圖。圖3是將圖2的熒光強度數(shù)值化的圖。圖4是表示實施例3 7的脂質(zhì)體的細胞與脂質(zhì)體的相互作用(細胞的脂質(zhì)體攝 入量)確認試驗結(jié)果的圖。圖5是表示實施例3，4和比較例1，2的脂質(zhì)體的毒性確認試驗(MTS試驗)的結(jié) 果的圖。圖6是表示實施例3的脂質(zhì)體使用兔的眼后節(jié)到達確認試驗的結(jié)果的熒光顯微鏡 觀察的圖。圖7是將圖6的熒光強度數(shù)值化的圖。圖8是表示實施例8的脂質(zhì)體的眼后節(jié)到達確認試驗的結(jié)果的熒光顯微鏡觀察的 圖。圖9是表示實施例9的脂質(zhì)體的眼后節(jié)到達確認試驗的結(jié)果的熒光顯微鏡觀察的 圖。圖10是表示實施例10的脂質(zhì)體的眼后節(jié)到達確認試驗的結(jié)果的熒光顯微鏡觀察 的圖。圖11是表示實施例11的脂質(zhì)體的眼后節(jié)到達確認試驗的結(jié)果的熒光顯微鏡觀察 的圖。圖12是表示實施例12的脂質(zhì)體的眼后節(jié)到達確認試驗的結(jié)果的熒光顯微鏡觀察 的圖。圖13是表示實施例13的脂質(zhì)體的眼后節(jié)到達確認試驗的結(jié)果的熒光顯微鏡觀察 的圖。圖14是表示實施例14的脂質(zhì)體的眼后節(jié)到達確認試驗的結(jié)果的熒光顯微鏡觀察 的圖。圖15是表示實施例15的脂質(zhì)體的眼后節(jié)到達確認試驗的結(jié)果的熒光顯微鏡觀察 的圖。圖16是表示實施例16的脂質(zhì)體的眼后節(jié)到達確認試驗的結(jié)果的熒光顯微鏡觀察 的圖。圖17是表示比較例3的FITC標識聚苯乙烯顆粒的眼后節(jié)到達確認試驗的結(jié)果的 熒光顯微鏡觀察的圖。圖18是表示實施例5的脂質(zhì)體的眼后節(jié)到達確認試驗的結(jié)果的熒光顯微鏡觀察 的圖。圖19是表示實施例6的脂質(zhì)體的眼后節(jié)到達確認試驗的結(jié)果的熒光顯微鏡觀察 的圖。
具體實施例方式[本發(fā)明的眼后節(jié)到達用脂質(zhì)體]
本發(fā)明的眼后節(jié)到達用脂質(zhì)體特征在于含有下述㈧以及⑶和/或(C)作為構(gòu) 成成分，具有細胞膜透過性的硬度，平均粒徑為1 μ m以下，(A)磷脂質(zhì)，(B)電荷物質(zhì)，(C)膜強化物質(zhì)。[本發(fā)明的眼后節(jié)到達用脂質(zhì)體的構(gòu)成成分]以下，詳述各構(gòu)成成分。(A)磷脂質(zhì)作為可以在本發(fā)明的眼后節(jié)到達用脂質(zhì)體中使用的磷脂質(zhì)，只要能形成脂質(zhì)體顆 粒的硬度則沒有特別地限制，例如，優(yōu)選?；奶荚訑?shù)長達如12 18的某種程度的磷脂 質(zhì)，具體而言，可以列舉二硬脂酰磷脂酰膽堿(DSPC)、二棕櫚酰磷脂酰膽堿(DPPC)、二豆蔻 酰磷脂酰膽堿(DMPC)、二月桂酰磷脂酰膽堿(DLPC)、蛋黃磷脂酰膽堿(EPC)、氫化磷脂酰膽 堿(HyPC)等，其中，從容易形成較硬的顆粒的觀點優(yōu)選DSPC。另外，這些磷脂質(zhì)能夠單獨或組合使用。本發(fā)明的脂質(zhì)體中，除了㈧以外，必須含有下述的⑶和/或(C)，其中，優(yōu)選含 有(B)，特別優(yōu)選同時含有(B)、(C)。(B)電荷物質(zhì)作為可以在本發(fā)明的眼后節(jié)到達用脂質(zhì)體中使用的電荷物質(zhì)，只要是使脂質(zhì)體顆 粒的分散穩(wěn)定性提高的物質(zhì)則沒有特別的限定。電荷物質(zhì)中存在正電荷物質(zhì)和負電荷物質(zhì)，但從存在細胞毒性更低的傾向的觀點 出發(fā)，優(yōu)選負電荷物質(zhì)。作為正電荷物質(zhì)，例如，可以列舉硬脂酰胺(SA)和雙十二烷基二甲基溴化銨 (DDAB)和它們的衍生物等。作為負電荷物質(zhì)，例如，可以列舉雙十六烷基磷酸酯(DCP)和二棕櫚酰磷脂酰甘 油(DPPG)和它們的衍生物等，其中，作為優(yōu)選的負電荷物質(zhì)，可以列舉DCP或其衍生物等。另外，電荷物質(zhì)可以1種或并用2種以上。另外，通過以具有電荷的聚合物對脂質(zhì)體表面進行修飾，能夠付與電荷。本發(fā)明中的⑶電荷物質(zhì)的添加量，相對于磷脂質(zhì)1，優(yōu)選摩爾比為0. 02 0. 3， 特別優(yōu)選為0. 1 0.3。(C)膜強化物質(zhì)作為可以在本發(fā)明的眼后節(jié)到達用脂質(zhì)體中使用的膜強化物質(zhì)，只要是能夠強化 脂質(zhì)體顆粒硬度的物質(zhì)則沒有特別限定，例如，作為優(yōu)選物質(zhì)，可以列舉具有類固醇骨架的 化合物。另外，膜強化物質(zhì)可以1種或并用2種以上。作為具有類固醇骨架的化合物，可以列舉膽固醇(Choi.)及其衍生物等，具體而 言，例如可以列舉二氫膽留醇、膽留醇酯、膽留烷醇、脫氫膽留醇、膽留醇羊毛脂酸酯、膽甾 醇硬脂酸酯、12-羥基硬脂酸膽留醇酯、蓖麻酸膽留醇酯、膽留醇澳洲堅果油酸酯、植物甾 醇、谷留醇、豆留醇、菜油留醇、羊毛留醇、2，4_ 二氫羊毛留醇、1-0-留醇葡糖苷、1-0-甾醇 麥芽糖苷、1-0-留醇半乳糖苷等。本發(fā)明中的(C)膜強化物質(zhì)的添加量，相對于磷脂質(zhì)1，優(yōu)選摩爾比為0. 1 0.3。(C)膜強化物質(zhì)中，通過作為脂質(zhì)體成分添加，具有容易得到均勻的脂質(zhì)體的優(yōu)點ο另外，本發(fā)明的脂質(zhì)體中，只要能夠維持脂質(zhì)體的硬度，能夠適當添加其它成分。[本發(fā)明的眼后節(jié)到達用脂質(zhì)體顆粒的硬度]本發(fā)明的脂質(zhì)體顆粒，必須具有細胞膜透過性的硬度。該“有細胞膜透過性的硬度”是指脂質(zhì)體可以不崩解地進入細胞的程度的硬度，例 如，能夠通過體外研究與人角膜上皮細胞(HCE-T)的相互作用等而確認。具體而言，在播種有永生化人角膜上皮細胞的容器中添加脂質(zhì)體溶液，以一定溫 度孵育一定時間后，進行洗凈，溶解細胞，通過對導入脂質(zhì)體中的熒光物質(zhì)等的標識進行定 量，能夠研究細胞的脂質(zhì)體攝入量，即研究是否具有細胞膜透過性。該熒光物質(zhì)等的攝入量，只要能夠確認多于對照，則能夠認為具有細胞膜透過性。另外，更具體的試驗方法在實施例中記載。另外，具體而言，具有該細胞膜透過性的硬度也能夠利用例如在下述論文中披露 的方法等進行評價。International Journal of Pharmaceutics,355(1-2), P. 203—209，2008May 1， (電子發(fā)表2007Dec. 23)在上述論文中披露的方法是利用原子力顯微鏡(AFM)和動態(tài)光散射(DLS法: Dynamic Light Scattering)評價脂質(zhì)體的硬度的方法。具體而言，使懸濁有脂質(zhì)體的溶液吸附于例如云母(mica)等的基板上，根據(jù) 10 μ mX 10 μ m的區(qū)域內(nèi)的脂質(zhì)體高度(H)的振幅模(amplitude mode)而視覺化。脂質(zhì)體的高度(H)為利用AFM測定在基板表面的10 μ mX 10 μ m的尺寸內(nèi)全部脂 質(zhì)體的高度，使用該裝置的軟件而從頻率分布器的峰頂求出的振幅模。AFM優(yōu)選與能夠在最大10 μ mX 10 μ mX 2. 5 μ m的范圍測定的E-掃描儀共同使用， 例如，能夠使用Digital Instruments, INC.社制的Nanoscope (注冊商標)III a系列控制
-fiffTi" ο另外，在H的測定時，為了得到更正確的H，優(yōu)選在10 μ mX 10 μ m的尺寸內(nèi)吸附有 某種程度數(shù)量的脂質(zhì)體，例如，優(yōu)選最低數(shù)十個/(IOymXlOym)以上，但是使用預(yù)先調(diào)整 為某種程度的大小時，也可以比此更少。為了使這樣數(shù)量的脂質(zhì)體吸附，例如，可以調(diào)整脂質(zhì)體懸濁液中的脂質(zhì)體濃度。另外，向基板上滴加脂質(zhì)體懸濁液后，優(yōu)選靜置例如30分鐘左右。平均粒徑(P)通過在使脂質(zhì)體吸附于基板表面前，利用能夠測定0.6 eOOOnm顆 粒的 ZETASIZER 3000HSA(MALVERN INSTRUMENTLtd.，UK)，由 DLS 法測定。膠體顆粒的ζ 電位使用 Zetamaster (MALVERN INSTRUMENTLtd. , UK)的激光多普 勒法而測定。然后，脂質(zhì)體顆粒的硬度能夠利用下述式(I)算出。Η/Ρ ......(I)作為本發(fā)明的眼后節(jié)到達用脂質(zhì)體，該H/P值優(yōu)選為0. 15 1. 0，更優(yōu)選為0. 3 1. 0。為了實現(xiàn)該硬度，例如，能夠通過作為構(gòu)成脂質(zhì)體的磷脂質(zhì)如上述地使用酰基的 碳原子數(shù)為12 18的磷脂質(zhì)和使用(B)電荷物質(zhì)和/或(C)膜強化物質(zhì)，或使脂質(zhì)體顆粒的凝膠_液晶轉(zhuǎn)移溫度為特定值等而實現(xiàn)。該凝膠-液晶轉(zhuǎn)移是表示磷脂質(zhì)雙層膜狀態(tài)，將其發(fā)生相變化的溫度稱為凝 膠-液晶轉(zhuǎn)移溫度(Tc)，Tc越高于環(huán)境溫度，則磷脂質(zhì)雙層膜越容易在該環(huán)境溫度中維持 膠囊狀的顆粒狀態(tài)。因此，能夠認為該Tc越高，則在機體環(huán)境中本發(fā)明的脂質(zhì)體存在越堅固的傾向。本發(fā)明中，該Tc優(yōu)選為20°C以上，更優(yōu)選為40°C以上，特別優(yōu)選為50°C以上。另外，DSPC的Tc為約54 55°C，DPPC時為約41 42°C，DMPC時為約23 24°C， EPC時為約-15 -7°C。[本發(fā)明的眼后節(jié)到達用脂質(zhì)體的平均粒徑]本發(fā)明的脂質(zhì)體的平均粒徑必須為1 μ m以下，優(yōu)選為600nm以下，更優(yōu)選為80 250nm，更加優(yōu)選為90 220nm，特別優(yōu)選為100 200nm。另外，脂質(zhì)體的平均粒徑是通過上述DLS法測定的值。具體而言，是以大量過剩的分散溶劑(HEPES緩沖液)稀釋1滴以巴氏吸管收集的 脂質(zhì)體懸濁液后，利用 ZETASIZER 3000HSA(MALVERN INSTRUMENT Ltd. , UK)測定的值。[本發(fā)明的眼后節(jié)到達用脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)]本發(fā)明的脂質(zhì)體，可以認為是主要取被稱為SUV(small uni-lamellavesicle)的 單層結(jié)構(gòu)的脂質(zhì)體，但不一定受此限制。[本發(fā)明的脂質(zhì)體的制造方法]本發(fā)明的脂質(zhì)體的制造方法沒有特別限制，可以列舉適當組合下述(1)和(2)的 方法等，其中優(yōu)選薄膜水合-擠壓法。(1)薄膜水合法、逆相蒸發(fā)法、乙醇注入法或脫水-再水合等(MLV的制造)該(1)中，例如在封入如實施例中使用的6-香豆素的疏水性藥劑時，從能夠均勻 地封入的觀點出發(fā)優(yōu)選薄膜水合法。(2)利用將脂質(zhì)體在高壓下通過膜濾器的擠壓法、超聲波照射法、冷凍解凍法、細 胞破碎法、均質(zhì)法的MLV的微細化(ssLip (submicron sized small uni-lamella vesicle (liposome))的制造)該(2)中，在脂質(zhì)體的微細化中，優(yōu)選超聲波照射法和擠壓法，特別是擠壓法，能 夠?qū)⒅|(zhì)體更均勻地微細化，故而優(yōu)選。從容易調(diào)整顆粒大小的觀點出發(fā)，優(yōu)選擠壓法和超聲波照射法。薄膜水合法是指在氯仿等有機溶劑中溶解構(gòu)成脂質(zhì)體膜的基本成分后，使用旋轉(zhuǎn) 式蒸發(fā)器在加熱減壓下蒸餾除去溶劑，由此在蒸發(fā)器的內(nèi)側(cè)形成薄膜，此后，在溫水浴中以 磷酸緩沖液和HEPES-HBSS溶液等水合薄膜的方法。用于在脂質(zhì)體的膜內(nèi)或脂質(zhì)體內(nèi)側(cè)的空間封入的藥劑，是水溶性時，能夠在水合 用的溶液中在脂質(zhì)體內(nèi)封入，是水不溶性時，能夠通過與脂質(zhì)體構(gòu)成成分一起在有機溶劑 中溶解，在脂質(zhì)體內(nèi)封入。HEPES是指4_(2_羥乙基)_1_哌嗪乙烷磺酸。HBSS 是指漢克斯平衡鹽溶液(Hanks' balanced salt solution)。[本發(fā)明的眼后節(jié)疾病用醫(yī)藥組合物]本發(fā)明的眼后節(jié)疾病用醫(yī)藥組合物是在本發(fā)明的眼后節(jié)到達用脂質(zhì)體中封入對眼后節(jié)疾病預(yù)防或治療有效的藥劑的組合物。對眼后節(jié)疾病預(yù)防或治療有效的藥劑具有作 為本發(fā)明的眼后節(jié)到達用脂質(zhì)體構(gòu)成成分的(A)磷脂質(zhì)、(B)電化物質(zhì)或(C)膜強化物質(zhì) 的任意一個的功效時，可以兼作其全部或一部分。對能夠在本發(fā)明的眼后節(jié)到達用脂質(zhì)體中封入而制成為本發(fā)明的眼后節(jié)疾病用醫(yī)藥 組合物的藥劑，沒有特別限定，例如，可以列舉以下的對眼后節(jié)疾病預(yù)防或治療有效的藥劑。鹽酸布那唑嗪、馬來酸噻嗎洛爾、鹽酸卡替洛爾、鹽酸倍他洛爾、尼普洛爾、異丙烏 諾前列酮、前列腺素制劑(拉坦前列腺素、他氟前列素等)、Dibefurin hydrochloride、腎 上腺素、鹽酸毛果蕓香堿、碳酰膽堿、鹽酸多佐胺、乙酰唑胺、硫普羅寧、腮腺激素、吡諾克 辛、谷胱甘肽、金剛烷胺、類固醇制劑(氟米龍、潑尼松龍、倍他米松、地塞米松等)，非類固 醇制劑(吲哚美辛、雙氯芬酸鈉、溴芬酸鈉等)，青光眼的預(yù)防或治療劑、白內(nèi)障的預(yù)防或治 療劑、葡萄膜炎的預(yù)防或治療劑、視神經(jīng)保護劑、眼循環(huán)改善劑、視網(wǎng)膜循環(huán)改善劑、糖尿病 性視網(wǎng)膜病變的預(yù)防或治療劑、老年性黃斑變性的預(yù)防或治療劑、VEGF抑制劑(VEGF抗體、 VEGF適體等)、新生血管抑制劑、玻璃體混濁的預(yù)防或治療劑作為眼后節(jié)疾病，可以列舉老年性黃斑變性、糖尿病性視網(wǎng)膜癥、葡萄膜炎(交感 性眼炎)、青光眼、白內(nèi)障、玻璃體混濁等，但不限定于此，也包括全部在眼后節(jié)發(fā)生病變或 具有疾病原因的疾病。本發(fā)明的眼后節(jié)疾病用醫(yī)藥組合物能夠使用緩沖劑(磷酸緩沖劑、硼酸緩沖劑、 檸檬酸緩沖劑、酒石酸緩沖劑、乙酸緩沖劑、氨基酸等)、等滲劑(山梨糖醇、葡萄糖、甘露糖 醇等糖類，甘油、丙二醇等多元醇類，或氯化鈉等鹽類)、賦形劑、潤滑劑、粘合劑、崩解劑、 穩(wěn)定劑、矯味矯臭劑、稀釋劑、表面活性劑、乳化劑、增溶劑、吸收促進劑、保濕劑、吸附劑、填 充劑、增量劑、賦濕劑、防腐劑(烷基二甲基芐基氯化銨、芐乙銨等季銨鹽，對羥基苯甲酸甲 酯、對羥基苯甲酸乙酯等對羥基苯甲酸酯類，苯甲醇、苯乙醇、山梨酸及它們的鹽、乙基汞硫 代水楊酸、氯丁醇等)、粘稠劑(羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、甲基纖維素、羥丙基甲基纖 維素、羧甲基纖維素等)等添加劑，以公知的方法進行制劑化。本發(fā)明的眼后節(jié)疾病用醫(yī)藥組合物能夠在不妨害藥理效果的范圍內(nèi)含有其它有 效成分。(本發(fā)明的眼后節(jié)疾病用醫(yī)藥組合物的給藥途徑)作為本發(fā)明的眼后節(jié)疾病用醫(yī)藥組合物的給藥途徑，可以列舉向眼后節(jié)注射等侵 襲性方法、利用滴眼和眼軟膏涂布的眼局部給藥的非侵襲性方法，但由于本發(fā)明的脂質(zhì)體 能夠通過滴眼到達眼后節(jié)，因此，在滴眼等眼局部給藥中最能夠發(fā)揮其價值。(本發(fā)明的眼后節(jié)疾病用醫(yī)藥組合物的給藥方式)因此，作為本發(fā)明的眼后節(jié)疾病用醫(yī)藥組合物的給藥方式，例如，可以列舉滴眼 劑、眼軟膏、注射劑等。(本發(fā)明的眼后節(jié)疾病用醫(yī)藥組合物中的脂質(zhì)體含量)本發(fā)明的眼后節(jié)疾病用醫(yī)藥組合物中的脂質(zhì)體含量根據(jù)劑形和封入在脂質(zhì)體中 的藥劑種類與藥劑封入量等而不同，不能一概限定，各種劑型化可以在可能的范圍內(nèi)根據(jù) 與藥劑給藥量的關(guān)系適當選擇，例如，作為醫(yī)藥組合物中脂質(zhì)體的含量，相對于全部醫(yī)藥組 合物，優(yōu)選為0. 01 20.0(w/w% 固體份中的比例)的范圍、特別優(yōu)選0. 1 1.0(w/w% 固體份中的比例)。
另外，醫(yī)藥組合物總量中，藥劑成分優(yōu)選配制為0.0001 10(w/v% )，更優(yōu)選 0. 001 5 (w/v% )，特別為注射劑時優(yōu)選0. 0002 0. 2 (w/v% )，更優(yōu)選0. 001 0. 1 (w/ v%),為滴眼劑時，優(yōu)選0. 01 50 (w/w% )，更優(yōu)選0. 02 20 (w/w% )，但不一定限定于該范圍。(本發(fā)明的眼后節(jié)疾病用醫(yī)藥組合物的給藥量)本發(fā)明的眼后節(jié)疾病用醫(yī)藥組合物的給藥量根據(jù)給藥途徑、癥狀、年齡、體重、醫(yī) 藥組合物的形態(tài)等而不同，例如，眼后節(jié)疾病用醫(yī)藥組合物中的脂質(zhì)體內(nèi)包的藥劑量，相對 于必須給藥的對象體重每lkg，優(yōu)選為0. 005 500mg，更優(yōu)選0. 1 lOOmg，其中，對于成 人，期望每天1次或分為數(shù)次地根據(jù)癥狀給藥，作為下限優(yōu)選0. Olmg (更優(yōu)選0. Img)，作為 上限優(yōu)選20g(更優(yōu)選2000mg，更加優(yōu)選500mg，特別優(yōu)選IOOmg)。[實施例1 2]在約40°C的減壓下，將表1的組成將脂質(zhì)體的構(gòu)成材料加入旋轉(zhuǎn)式蒸發(fā)器，在旋 轉(zhuǎn)式蒸發(fā)器內(nèi)側(cè)使薄膜形成，此后，在約60 70V的水浴中將薄膜以HEPES-HBSS溶液等水 合，制造MLV。將得到的MLV加入擠壓機，得到含有ssLip的溶液(實施例1 2)。另外，本發(fā)明中，實施例中在擠壓機中使用的膜濾器是Nuc 1 eporeTrack-Etch Membrane, Whatman (Schleicher & Schuell)社制的聚碳酸酯制的膜濾器。以上述方法測定這些脂質(zhì)體的硬度(H/P)。(AP處理云母的配制)另外，在測定之前，按照下述文獻對作為基板使用的云母進行前處理。Thomson, 2000, Langmuir 16 (11)，4813—4818
具體而言，如下操作進行。在干燥的帶蓋平皿中加入劈開的云母和3-氨丙基三乙氧基硅烷 (3-aminopropyltriethoxysilane (以下記為 AP)，分子量 221. 4，2 μ 1)和 N，N- 二異丙基乙 胺(N, N-diisopropylethylamine (DI)，分子量129. 2，1 μ L)，以充分密封的狀態(tài)在室溫下 放置指定時間。此時的2個反應(yīng)溶液不是直接向云母滴下，而是剪開干燥離心管的蓋子，在 其中添加，通過氣相中的反應(yīng)在云母表面修飾ΑΡ。此后，從帶蓋平皿取出蓋子和ΑΡ，使用氮 氣在帶蓋平皿內(nèi)充滿充分量的氮氣而進行保存。配制的AP處理云母在24小時以內(nèi)使用。(利用AFM的脂質(zhì)體形狀觀察)使作為脂質(zhì)濃度使用蒸餾水稀釋到0. 02mM的200 μ 1脂質(zhì)體懸濁液吸附于上述AP 處理云母，常溫靜置30分鐘。此后，使用蒸餾水除去未吸附的微粒，進行觀察。作為測定時 的懸臂，使用 DNP-S20 (Length 120 μ m, narrow, nominal spring constant 0. 32N/m)。在 液中單元中固定懸臂，以液中輕敲模式(tapping mode)中觀察微粒的形狀。掃描速度根據(jù) 掃描大小以1. 0或2. 5Hz進行觀察。其結(jié)果，這些脂質(zhì)體顆粒的硬度(H/P)分別為0. 81 (實施例1)、0· 31 (實施例2)， 能夠制造具有理想硬度的本發(fā)明的脂質(zhì)體。[表1]
權(quán)利要求
一種眼后節(jié)到達用脂質(zhì)體，其特征在于含有下述(A)以及(B)和/或(C)作為構(gòu)成成分，具有細胞膜透過性的硬度，平均粒徑為1μm以下，(A)磷脂質(zhì)，(B)電荷物質(zhì)，(C)膜強化物質(zhì)。
2.如權(quán)利要求1所述的眼后節(jié)到達用脂質(zhì)體，其特征在于具有細胞膜透過性的硬度，以下式(I)所示的H/P值計為0. 15 1. 0， H/P……(I)H 利用原子力顯微鏡測定的、吸附于基板上的脂質(zhì)體的高度， P 利用動態(tài)光散射測定的脂質(zhì)體的平均粒徑。
3.如權(quán)利要求1或2所述的眼后節(jié)到達用脂質(zhì)體，其特征在于 平均粒徑為600nm以下。
4.如權(quán)利要求1 3中任一項所述的眼后節(jié)到達用脂質(zhì)體，其特征在于 (A)的?；奶荚訑?shù)為12 18。
5.如權(quán)利要求1 4中任一項所述的眼后節(jié)到達用脂質(zhì)體，其特征在于(A)為含有選自二硬脂酰磷脂酰膽堿、二棕櫚酰磷脂酰膽堿、二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿、 二月桂酰磷脂酰膽堿、蛋黃磷脂酰膽堿、氫化磷脂酰膽堿中的至少1種以上的磷脂質(zhì)。
6.如權(quán)利要求1 5中任一項所述的眼后節(jié)到達用脂質(zhì)體，其特征在于 脂質(zhì)體顆粒的凝膠_液晶轉(zhuǎn)移溫度為20°C以上。
7.如權(quán)利要求1 6中任一項所述的眼后節(jié)到達用脂質(zhì)體，其特征在于(B)為負電荷物質(zhì)。
8.如權(quán)利要求1 7中任一項所述的眼后節(jié)到達用脂質(zhì)體，其特征在于(C)為具有類固醇骨架的化合物。
9.一種眼后節(jié)疾病用醫(yī)藥組合物，其特征在于在權(quán)利要求1 8中任一項所述的眼后節(jié)到達用脂質(zhì)體中，封入有對眼后節(jié)疾病的預(yù) 防或治療有效的藥劑。
10.如權(quán)利要求9所述的眼后節(jié)疾病用醫(yī)藥組合物，其特征在于 劑型是滴眼劑。
全文摘要
本發(fā)明提供一種特征在于含有(A)磷脂質(zhì)以及(B)電荷物質(zhì)和/或(C)膜強化物質(zhì)作為構(gòu)成成分，具有細胞膜透過性的硬度，平均粒徑為1μm以下的眼后節(jié)到達用脂質(zhì)體，和在該脂質(zhì)體中封入藥劑的眼后節(jié)疾病用醫(yī)藥組合物，提供一種通過滴眼也能到達眼后節(jié)并且沒有細胞毒性的脂質(zhì)體和使用該脂質(zhì)體的眼后節(jié)疾病用醫(yī)藥組合物。
文檔編號A61K47/24GK101959503SQ20098010665
公開日2011年1月26日 申請日期2009年2月26日 優(yōu)先權(quán)日2008年2月29日
發(fā)明者原英彰, 竹內(nèi)洋文 申請人:財團法人名古屋產(chǎn)業(yè)科學研究所