專利名稱：作為治療類風(fēng)濕病的糖皮質(zhì)激素受體調(diào)節(jié)劑的(E)-N-{3-[1-(8-氟-11H-10-氧雜-1-氮雜 ...的制作方法
作為治療類風(fēng)濕病的糖皮質(zhì)激素受體調(diào)節(jié)劑的 (E) -N- {3- [1 - (8-氟-11H-10-氧雜-1 -氮雜-二苯并[a, d]環(huán)庚烯-5-亞基)-丙基]-苯基}-甲烷磺酰胺本發(fā)明涉及用于治療或防止對留族糖皮質(zhì)激素(gluocorticoids)有反應(yīng)的炎癥 和免疫病癥的治療劑，涉及包括該藥劑的藥物組合物，涉及治療或防止病人炎癥和免疫疾 病的方法，以及涉及用于合成該治療劑的中間體和方法。天然和合成留族糖皮質(zhì)激素已經(jīng)在超過五十年的時間中廣泛地用于治療急性和 慢性炎癥和免疫病癥，如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，骨關(guān)節(jié)炎，風(fēng)濕熱，哮喘，過敏性鼻炎，系統(tǒng)性紅 斑狼瘡，慢性阻塞性肺病，克勞恩氏(Crohn)病，炎癥性腸病，和潰瘍性結(jié)腸炎。然而，糖皮 質(zhì)激素的使用常常與嚴(yán)重的和有時不可逆的副作用相關(guān)聯(lián)，如骨損失/骨質(zhì)疏松癥，高血 糖癥，糖尿病，高血壓，青光眼，肌肉萎縮，庫辛氏(Cushing)綜合癥，和精神病。因此，仍然 需要備選的治療方案，它具有甾族糖皮質(zhì)激素的有益效果，但是減少了伴隨性的副作用的 可能性或發(fā)病率。糖皮質(zhì)激素在與糖皮質(zhì)激素受體(GR)形成復(fù)合物之后調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄。在糖皮質(zhì) 激素結(jié)合之后，GR-腎上腺糖皮質(zhì)激素復(fù)合物遷移到細(xì)胞核中，在這里它在特定基因的啟動 區(qū)中結(jié)合于糖皮質(zhì)激素敏感元素(GRE)。GR-糖皮質(zhì)激素/GRE復(fù)合物然后隨即啟動(轉(zhuǎn)錄 活化)或抑制鄰位基因的轉(zhuǎn)錄?；蛘?，該GR-糖皮質(zhì)激素復(fù)合物可通過不涉及DNA結(jié)合的 過程來負(fù)面調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄。在稱作轉(zhuǎn)錄抑制的該過程中，GR-糖皮質(zhì)激素復(fù)合物進(jìn)入細(xì)胞 核中并且與其它轉(zhuǎn)錄因子直接相互作用(經(jīng)由蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用)，抑制它們誘導(dǎo)基 因轉(zhuǎn)錄和因此蛋白質(zhì)表達(dá)的能力。對適合作為甾族糖皮質(zhì)激素的替代品的GR配體的探求受到以下事實所妨礙 媒介其它生理學(xué)過程的其它類固醇激素受體例如雄激素受體(AR)、礦物類皮質(zhì)激素受體 (MR)和孕酮受體(PR)具有與GR相似的配體結(jié)合域。結(jié)果，GR配體具有與這些其它受體之 間的交叉反應(yīng)性的潛在性。因此，留族糖皮質(zhì)激素的替代物的所需屬性是它能夠以比其它 類固醇激素受體更高的親合性結(jié)合于GR。新近的觀察表明，在結(jié)合于DNA上的GR不存在的情況下能夠維持糖皮質(zhì)激素的抗 炎癥效果。因此，主要由GR蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用(例如轉(zhuǎn)錄抑制)媒介的糖皮質(zhì)激素 作用的機(jī)理被認(rèn)為足以誘導(dǎo)該抗炎癥響應(yīng)。此外，糖皮質(zhì)激素治療的許多副作用(例如高 血糖癥，糖尿病，青光眼，和肌肉萎縮)現(xiàn)在被認(rèn)為主要由在GR結(jié)合于DNA上之后的轉(zhuǎn)錄活 化機(jī)理所媒介。因此，能夠?qū)R媒介的轉(zhuǎn)錄抑制與GR媒介的轉(zhuǎn)錄活化之間分化的藥劑是 特別令人想望的。此外，顯示出有限的調(diào)節(jié)(即激動，部分地激動，部分地拮抗，或拮抗)其 它類固醇激素受體的轉(zhuǎn)錄活性的能力的藥劑也是特別令人想望的。本發(fā)明的目的是提供以比其它類固醇激素受體更高的親合性結(jié)合于GR的藥劑。 更具體地說，本發(fā)明的目的是提供以超過10倍于AR、MR和ra的親合性結(jié)合于GR上的藥 劑。本發(fā)明的另一目的是提供相對于其誘導(dǎo)與糖皮質(zhì)激素治療有關(guān)的副作用的傾向而言具 有更有效的抗炎癥性能的藥劑。更具體地說，本發(fā)明的目的是提供相對于其誘導(dǎo)骨損失或 骨質(zhì)疏松癥的傾向而言具有更有效的抗炎癥性能的藥劑。本發(fā)明的另一目的是提供顯示出有限的調(diào)節(jié)其它類固醇激素受體(Ar、MR和PR)活性的能力的藥劑。GR調(diào)節(jié)劑是現(xiàn)有技術(shù)中已知的。例如WO 04/052847公開了一類三環(huán)類固醇激素 受體調(diào)節(jié)劑，其可用于治療對礦物類皮質(zhì)激素受體或糖皮質(zhì)激素受體調(diào)節(jié)敏感的病癥。令 人吃驚地，現(xiàn)在已發(fā)現(xiàn)通過從W004/052847的范圍內(nèi)選擇下面作為化合物(I)提供的化合 物而確認(rèn)了一種新型治療劑，該治療劑具有出乎預(yù)料的活性譜，這提示它特別可用于治療 對甾族糖皮質(zhì)激素有反應(yīng)的炎癥和免疫疾病。因此，本發(fā)明提供化合物(I) 化合物(I)((Ε)-Ν-{3-[1-(8-氟-11H-10-氧雜-1-氮雜-二苯并[a，d]環(huán)庚烯_5_亞基)-丙 基]-苯基}-甲烷磺酰胺)或它的藥物學(xué)上可接受的鹽。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了治療或防止炎癥或免疫病癥(特別是類風(fēng)濕 性關(guān)節(jié)炎)的方法，包括對于需要治療或防止的患者施用有效量的化合物(I)，或它的藥物 學(xué)上可接受的鹽。另外，本發(fā)明提供用于治療的化合物(I)，或它的藥物學(xué)上可接受的鹽。 本發(fā)明還提供用于治療或防止炎癥或免疫疾病(特別是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)的化合物(I)，或 它的藥物學(xué)上可接受的鹽。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供化合物(I)或它的藥物學(xué)上可接受的鹽用于制 備用于治療炎癥或免疫病癥(尤其類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)的藥物的用途。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供藥物組合物，它包括化合物(I)或它的藥物學(xué) 上可接受的鹽，以及相結(jié)合使用的一種或多種藥物學(xué)上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑。作 為優(yōu)選的實施方案，本發(fā)明提供用于治療或防止類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物組合物，該組合物 包括化合物(I)或它的藥物學(xué)上可接受的鹽，以及一種或多種藥物學(xué)上可接受的載體，賦 形劑或稀釋劑。另外，本發(fā)明還提供用于合成化合物(I)的新型中間體和方法。本發(fā)明提供化合物(I)用于治療或防止對留族糖皮質(zhì)激素起反應(yīng)的炎癥和免疫 疾病的用途。此類病癥包括，例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，骨關(guān)節(jié)炎，風(fēng)濕熱，哮喘，過敏性鼻炎，系 統(tǒng)性紅斑狼瘡，慢性阻塞性肺病，克勞恩氏疾病，炎癥性腸病，和潰瘍性結(jié)腸炎?；衔?I) 特別有用的病癥是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)是在30至50歲之間的典型年 齡間發(fā)生的以持續(xù)關(guān)節(jié)滑液組織炎癥為特征的慢性病。RA是炎癥性關(guān)節(jié)炎的最普通形式， 其中婦女以男人的兩倍可能性產(chǎn)生該疾病。用于治療或防止炎癥和免疫疾病的化合物(I)的使用也被認(rèn)為與典型地與糖皮質(zhì)激素治療相關(guān)的副作用的減少的傾向、可能性或發(fā)病率相關(guān)。糖皮質(zhì)激素治療的一種此 類副作用是骨損失/骨質(zhì)疏松癥或糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的骨質(zhì)疏松癥(GIOP)。GIOP是藥物誘發(fā) 的骨質(zhì)疏松癥的最常見原因，并且據(jù)報告在最高達(dá)50%的經(jīng)歷長期(即持續(xù)6個月以上) 糖皮質(zhì)激素治療的患者中發(fā)生過。尤其，化合物(I)的使用被認(rèn)為與骨損失或骨質(zhì)疏松癥 的減少的傾向、可能性或發(fā)病率相關(guān)。除非另外定義，否則，本發(fā)明包括化合物(I)的藥物學(xué)上可接受的鹽類，以及 化合物(I)的游離堿的溶劑化物及其藥物學(xué)上可接受的鹽類。然而，化合物(I)的游 離堿是優(yōu)選的。在這里使用的術(shù)語“藥物學(xué)上可接受的鹽”指對活的生物基本上無毒 的化合物(I)的鹽。藥物學(xué)上可接受的鹽類的例子和用于制備它們的方法是現(xiàn)有技術(shù) 中常規(guī)的。參見例如 Stahl 等人，"Handbook of Pharmaceutical Salts =Properties, Selection and Use",VCHA/ffiley-VCH,(2002) ；Gould,P. L. ,"Salt selection for basic drugs", International Journal of Pharmaceutics, 33 201-217(1986)；禾口 Bastin 等 A"Salt Selection and Optimization Procedures for Pharmaceutical NewChemical Entities，，，Organic Process Research and Development, 4 :427_435 (2000)。在這里使用的術(shù)語“患者”指人或非人類的哺乳動物如狗，貓，牛，猴子，馬，或羊。 更具體地說，術(shù)語“患者”指人。在這里使用的術(shù)語“治療”包括禁止，防止，限制，減緩，停 止，或逆轉(zhuǎn)現(xiàn)有癥狀或病癥的進(jìn)展或嚴(yán)重性。在這里使用的術(shù)語“防止”是指禁止，限制或 抑制癥狀或病癥的發(fā)作或出現(xiàn)?；衔?I)或它的藥物學(xué)上可接受的鹽可以經(jīng)過配制作為藥物組合物的一 部分來給藥。因此，包括化合物(I)或它的藥物學(xué)上可接受的鹽以及相結(jié)合使用的一 種或多種藥物學(xué)上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑的藥物組合物是本發(fā)明的重要實施 方案。藥物組合物的例子和制備它們的方法是現(xiàn)有技術(shù)中眾所周知的。參見，例如， REMINGTON :THESCIENCE AND PRACTICE OF PHARMACY, A. Gennaro 等人編著，第 19 版，Mack Publishing(1995)。包括化合物(I)的示例性組合物包括，例如，化合物(I)與羧甲基 纖維素鈉鹽，0. 25%聚山梨酯80，和0. 05%防沫劑1510 (Dow Corning)的懸浮液；和化合 物(I)與0.5%甲基纖維素，十二烷基硫酸鈉，和0. 防沫劑1510在0. OlN HCl中的 懸浮液。本發(fā)明的優(yōu)選組合物包括被配制在膠囊劑或片劑中的化合物(I)或它的藥物學(xué)上 可接受的鹽?；衔?I)或包含化合物(I)的組合物能夠通過可使化合物(I)被生物利用的任 何途徑(其中包括口服和胃腸外途徑)給藥。例如，化合物(I)或包括化合物(I)的組合 物能夠以口服，皮下，肌內(nèi)，靜脈內(nèi)，透皮，鼻內(nèi)，經(jīng)直腸，經(jīng)面頰等途徑來給藥?；蛘撸衔?可以通過連續(xù)灌注來給藥。然而，可以理解的是口服給藥是優(yōu)選的給藥途徑。在這里使用的術(shù)語“有效量”是指在單劑量或多劑量給藥于患者之后在診斷或治 療的患者中提供所需效果的化合物(I)的量或劑量。有效量能夠易由作為本領(lǐng)域中技術(shù)人 員的主治診斷醫(yī)生通過考慮許多因數(shù)來確定，這些因素例如是哺乳動物的種類；其大小，年 齡，和一般健康狀況；所涉及的具體疾病；疾病的程度或嚴(yán)重性；單個患者的響應(yīng)；給藥的 具體化合物；給藥的模式；給藥的制劑的生物利用率特性；所選擇的劑量服用法；和任何伴 隨藥物的使用。生物活性
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在這里使用的“Kd”指配體_受體復(fù)合物的平衡離解常數(shù)；“Ki”指藥物_受體復(fù)合 物的平衡離解常數(shù)，并且是在平衡狀態(tài)下將結(jié)合于一半的結(jié)合部位上的藥物濃度的指標(biāo)； "IC5tl”指產(chǎn)生為該藥劑可能的最高抑制響應(yīng)的50%的藥劑濃度或指產(chǎn)生了結(jié)合于受體上的 配體的50%置換的藥劑濃度；"EC5tl”指產(chǎn)生該藥劑可能的最高響應(yīng)的50%時的藥劑濃度； "ED5tl”指產(chǎn)生該藥劑的最高響應(yīng)的50%的所給藥的治療劑的劑量。細(xì)胞核激素受體結(jié)合分析來自人胚腎HEK293細(xì)胞過表達(dá)人GR (糖皮質(zhì)激素受體)、AR (雄激素受體)、MR (礦 物類皮質(zhì)激素受體)、或PR (孕酮受體)的細(xì)胞溶胞產(chǎn)物用于受體-配體競爭結(jié)合分析中以 測定Ki值。簡短地說，留族受體競爭結(jié)合分析是在含有20mM Hepes緩沖劑(pH = 7. 6)，0. 2mM EDTA, 75mM NaCl, 1. 5mM MgCl2, 20 % 甘油，20mM 鉬酸鈉，0. 2mM DTT (二硫蘇糖醇)，20 μ g/ ml抑肽酶和20 μ g/ml亮肽素的緩沖劑中進(jìn)行的。典型地，留族受體結(jié)合分析包括放射性 標(biāo)記的配體，如用于GR結(jié)合的0. 3nM[3H]-地塞米松，用于AR結(jié)合的0. 36nM[3H]-美曲勃龍 (methyltrienolone)，用于MR結(jié)合的 0. 25nM[3H]-酸甾酮，和用于PR結(jié)合的 0. 29nM[3H]-美 曲勃龍，以及20 μ g 293-GR溶胞產(chǎn)物、22μ g 293-AR溶胞產(chǎn)物、20 μ g 293-MR溶胞產(chǎn)物或 者40yg 293-Η 溶胞產(chǎn)物/孔。這些分析典型地在96孔模式中進(jìn)行。競爭試驗化合物 以約O.OlnM到ΙΟμΜ范圍內(nèi)的各種濃度添加。非特異性的結(jié)合是在用于GR結(jié)合的500ηΜ 地塞米松，用于MR結(jié)合的500ηΜ醛甾酮或用于AR和I3R結(jié)合的500ηΜ美曲勃龍存在下測定 的。結(jié)合反應(yīng)(140 μ L)在4°C下培養(yǎng)一夜，然后將70 μ 1的冷活性炭-葡聚糖緩沖劑(每 50mL的分析緩沖劑含有0. 75g的活性炭和0. 25g的葡聚糖)添加到各反應(yīng)中。這些板在 定軌振蕩器上于4°C混合8分鐘。這些板然后在4°C和3000rpm下離心處理10分鐘。然后 將120 μ 1的結(jié)合反應(yīng)混合物的等分試樣轉(zhuǎn)移到另一個96孔板中，和將175 μ 1的Wallac Optiphase Hisafe3TM閃爍流體添加到各孔中。這些板被密封，然后在定軌振蕩器上劇烈振 蕩。在培養(yǎng)2小時后，這些板在WallacMicrobeta計數(shù)器中讀數(shù)。該數(shù)據(jù)用來計算預(yù)計的IC5tl和在ΙΟμΜ下的百分抑制率。用于GR結(jié)合的[3H]-地 塞米松，用于AR結(jié)合的[3H]-美曲勃龍，用于MR結(jié)合的[3H]-醛甾酮，或用于I5R結(jié)合的 [3H]-美曲勃龍的Kd通過飽和結(jié)合來測定?；衔锏腎C5tl值通過使用Cheng-Prusoff方程 式被換算為Ki。與以上所述的那些類似的結(jié)合分析方案能夠容易地由本領(lǐng)域中的普通技術(shù)人員 所設(shè)計。按照基本上如上所述的程序，化合物(I)顯示出約0.2nM的在GR結(jié)合分析中的 Ki ；約6. 7nM的在AR結(jié)合分析中的Ki ；約9. 2nM的在MR結(jié)合分析中的Ki ；和約32nM的在 I3R結(jié)合分析中的Ki (這些值報道為η = 7次實驗的平均值)。因此，化合物⑴是人GR的 有效配體，并且此外能夠以大約15倍或更多倍于人MR、AR和冊中的每一種的親合性結(jié)合 于GR。為了說明本發(fā)明化合物調(diào)節(jié)類固醇激素受體的活性的能力(即激動，部分激動， 部分拮抗，或拮抗)，進(jìn)行生物分析，其可檢測在暫時轉(zhuǎn)染了核受體蛋白質(zhì)和激素響應(yīng)基 元-報告基因結(jié)構(gòu)的細(xì)胞中的靶基因表達(dá)的功能調(diào)節(jié)。用于功能分析的溶劑、試劑和配體 能夠容易地從商業(yè)來源獲得，或能夠由本領(lǐng)域中的普通技術(shù)人員制備。核激素受體功能調(diào)節(jié)分析
人胚腎HEK293細(xì)胞通過使用Fugene 轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染了類固醇激素受體和報告基 因質(zhì)粒。簡短地說，含有在瑩光素酶報告子cDNA上游的probasin ARE和TK (胸苷激酶)啟 動子的兩個復(fù)制品的報告質(zhì)粒通過使用病毒CMV(細(xì)胞巨化病毒)啟動子被轉(zhuǎn)染到具有在 組成上表達(dá)人雄激素受體(AR)的質(zhì)粒的HEK293細(xì)胞中。含有在瑩光素酶報告子cDNA上游 的GRE和TK啟動子的兩個復(fù)制品的報告質(zhì)粒通過使用病毒CMV啟動子被轉(zhuǎn)染了在組成上 表達(dá)人糖皮質(zhì)激素受體(GR)、人礦物類皮質(zhì)激素受體(MR)或人孕酮受體(PR)的質(zhì)粒。細(xì) 胞在T150cm燒瓶中在含有5%活性炭-抽提的胎牛血清(FBS)的Dulbecco改進(jìn)型Eagle 培養(yǎng)基(DMEM)中轉(zhuǎn)染。在一夜培養(yǎng)后，使轉(zhuǎn)染的細(xì)胞胰蛋白酶化，在96孔的盤子中在含有 5%活性炭_抽提的FBS的DMEM介質(zhì)中平皿培養(yǎng)，培養(yǎng)4小時和然后暴露于在約0. OlnM到 10 μ M范圍內(nèi)的各種濃度的試驗化合物中。在用于分析的拮抗劑模式中，將低濃度的各自 受體的激動劑添加到介質(zhì)(用于GR的0. 25ηΜ地塞米松，用于AR的0. 3ηΜ的美曲勃龍，用 于I3R的0. 05nM的普美孕酮和用于MR的0. 05nM醛甾酮)中。在用試驗化合物進(jìn)行24小 時的培養(yǎng)后，細(xì)胞被溶解和通過使用標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)測定瑩光素酶活性。數(shù)據(jù)被擬合到四參數(shù)擬合的邏輯曲線，該曲線被擬合來測定EC5tl值。相對于用下 列參比激動劑獲得的最高刺激來測定百分效力(具有飽和的最高響應(yīng)的那些化合物)或％ 最高刺激(具有不飽和的最高響應(yīng)的那些化合物)用于AR分析的IOOnM美曲勃龍，用于 PR分析的30nM普美孕酮，用于MR分析的30nM醛甾酮和用于GR分析的IOOnM地塞米松。 IC50值可以類似地通過使用拮抗劑模式分析數(shù)據(jù)來測定。％抑制率也可相對于在單獨的激 動劑存在下的響應(yīng)來測定，如上所述。按照基本上如上所述的程序，化合物(I)在活化轉(zhuǎn)錄中顯示出下列性能譜對于 GR,約44%效力且EC5tl約1. 8nM ；對于AR，約4. 4%效力且EC5tl大于10 μ M ；對于MR，約11 % 效力且EC5tl大于10 μ M ；對于PR，約54%效力且EC5tl大于10 μ M(作為η = 4或5次實驗的 平均值報道的值)。糖皮質(zhì)激素受體媒介的轉(zhuǎn)錄抑制分析1.在人皮膚成纖維細(xì)胞(XD-39SK細(xì)胞中IL-I β -刺激的IL_6生產(chǎn)簡短地說，從ATCC獲得的人皮膚成纖維細(xì)胞(XD-39SK細(xì)胞(20000個細(xì)胞/孔) 在96孔板中在補(bǔ)充有10% FBS，100U/ml青霉素，100 μ g/ml鏈霉素和2mmol/L L-谷氨酰胺 的無血清的生長培養(yǎng)基中接種。細(xì)胞在含有5% CO2的加濕室中維持在37°C。試驗化合物 以約4. 65pM到4. 64 μ M的最終濃度的范圍內(nèi)的各種濃度被添加到各孔中。0. 1 μ M的地塞 米松用作正對照。用試驗化合物的1小時后處理，IL-I β是以lng/ml的最終濃度添加；且 反應(yīng)混合物培養(yǎng)一夜。從各孔中取出10 μ 1的上層清液，通過使用ELISA試劑盒測定IL-6 濃度，其中IL-6濃度是通過讀取在450nm下的吸光率來定量分析的。2.在PMA分化的U937細(xì)胞中LPS刺激的TNF- α生產(chǎn)從ATCC獲得的人U937前單核細(xì)胞型(pre-monocytic)細(xì)胞在含有10% FBS的完 全RPMI 1640介質(zhì)中生長。為了讓單核細(xì)胞分化成粘連的巨噬細(xì)胞，U937細(xì)胞在無鈣、鎂 的介質(zhì)中洗滌并再懸浮在含有20nM佛波醇12-肉豆蔻酸酯-13-乙酸酯(PMA)的新鮮RPMI 介質(zhì)中一夜。在分化后，試驗化合物是以約4. 65pM到4. 64 μ M范圍內(nèi)的各種濃度被添加到 在96孔板中的細(xì)胞中。在用試驗化合物的1小時后處理之后，LPS是以lOOng/ml的最終 濃度添加；然后反應(yīng)混合物培養(yǎng)一夜。25 μ 1無細(xì)胞上層清液從各孔中轉(zhuǎn)移到另一個96孔板中，使用ELISA試劑盒測量TNF-α生產(chǎn)，其中TNF-α通過讀取在450nm下的吸光率來定 量分析。按照基本上如上所述的程序，化合物⑴分別以約8. 5和21nM的IC5tl值誘導(dǎo)IL_6 和TNF-a的內(nèi)源性表達(dá)的約90%或更高的最大抑制率(作為η= 15次實驗(11_6分析) 和η = 4次實驗(TNF- α分析)的平均值報道的值)。因此，化合物(I)是前炎癥性蛋白質(zhì)IL-6和TNF α的內(nèi)源性產(chǎn)生的有效和完全 的轉(zhuǎn)錄抑制劑(最大抑制率的約90%或更高)。另外，化合物(I)在誘導(dǎo)GR/GRE媒介的基 因轉(zhuǎn)錄中顯示出僅僅部分的激動劑活性(最高效力的約50%或更低)。因此，化合物(I) 通過誘導(dǎo)完全GR媒介的轉(zhuǎn)錄抑制，但僅僅部分地誘導(dǎo)GR/GRE媒介的轉(zhuǎn)錄活化來顯示出分 化分布。此外，在調(diào)查對于其它留類受體的功能調(diào)節(jié)的影響作用的分析中，化合物(I)在激 活由AR、MR和I3R媒介的基因表達(dá)時顯示出僅僅有限的活性。動物模型1.角叉菜膠誘導(dǎo)的爪水腫(Paw Edema) (CPE)模型角叉菜膠是能夠在動物中誘導(dǎo)急性炎癥響應(yīng)的一組多糖。緊接著在注射之后在注 射部位產(chǎn)生了包括水腫、痛覺過敏和紅斑在內(nèi)的炎癥性主征。CPE模型是公認(rèn)的炎癥模型并 且可用于評價糖皮質(zhì)激素受體配體的抗炎效果。為了評價化合物(I)的抗炎癥效果，化合物被配制在包含0.5%羧甲基纖維素 和0. 25 % Tween 80的載體中，然后經(jīng)由填喂法口服給藥于雄性Sprague-Dawley大鼠 (180-200g)。為了對比，強(qiáng)的松龍可以在相同的載體中口服給藥。兩個小時后，在50μ1 的0.9%無熱原的鹽水中的角叉菜膠被注射到右后爪的足底下區(qū)域(subplantar regions)。在角叉菜膠注射之后的3小時，大鼠通過CO2被安樂死。爪被切下，然后使用微 量天平稱量重量。然后通過在爪表面上制造幾個切口和立即浸入到液氮中直至冷凍為止， 來解剖這些爪。冷凍的爪然后進(jìn)行離心以抽提該滲出液。然后，根據(jù)廠家說明書由ELISA測 量在炎癥性響應(yīng)過程中產(chǎn)生的IL-I β (—種細(xì)胞活素)的滲出液量?？偟淖Φ鞍踪|(zhì)也通過 使用蛋白質(zhì)分析試劑盒來測量，并且IL-I β的絕對水平被標(biāo)稱化以得到ng IL-I β/mg總 蛋白的濃度值?；衔?I)以約2. 8mg/kg的ED5tl抑制由角叉菜膠誘導(dǎo)的爪重量增力Π。化合物⑴ 也以約3.2mg/kg的ED5(1減少IL-lβ的爪滲出液水平。相反地，在該模型中強(qiáng)的松龍?zhí)幚?以約6. 6mg/kg的ED50抑制爪重量增加，和以低于約lmg/kg的ED50減少IL-1 β水平(其中 ED50值表示5個單獨測定值的平均值)。2.血清骨鈣蛋白分析骨損失/骨質(zhì)疏松癥和所導(dǎo)致的增多骨折風(fēng)險是由于糖皮質(zhì)激素治療引起的常 見和顯著的不利影響。糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的骨質(zhì)疏松癥被認(rèn)為至少部分地由于骨形成的抑制 所導(dǎo)致。血清骨鈣蛋白(骨合成的生物標(biāo)志物)的測量值是評價糖皮質(zhì)激素治療對于骨的 不利影響的公認(rèn)工具。為了評價化合物⑴對于骨形成的影響，化合物⑴被配制在包含0.5%羧甲 基纖維素和0.25% Tween 80的載體中，然后經(jīng)由填喂法口服給藥于十六周齡的雄性 Swiss-Webster 小鼠(Harlan Industries, Indianapolis)共 7 天。為了對比，強(qiáng)的松龍在相 同的載體中口服給藥。在最后的劑量給藥之后的第24小時收集血清，通過采用已改進(jìn)成96孔模式的競爭性放射免疫測定法來測定骨鈣蛋白水平。簡短地說，含有2. 5μ 1小鼠血清， 2. 5μ 1山羊抗小鼠骨鈣蛋白，0.625 μ 1正常山羊血清和119. 375 μ 1 RIA緩沖劑(0. 1225Μ NaCl, 0. OlM NaH2PO4,ρΗ 7. 4,0. 025Μ EDTA 四鈉，0. 1% (w/v)BSA，和 0. 1% (w/v) Tween-20) 的Multiscreen 板的各個孔在定軌振蕩器上在80rpm下于4°C培養(yǎng)18小時。在將在25 μ 1 RIA緩沖劑中的0. 2μ Ci/ml[125I]小鼠骨鈣蛋白添加到各孔中之后，該板在定軌振蕩器上 在80rpm下于4°C培養(yǎng)24小時。通過添加在0. 2M Na2HPO4, ρΗ 7. 4,5% (w/v)聚乙二醇中 的驢抗山羊IgG(l 30)(125μ1/孔)，該復(fù)合物在25°C下沉淀2小時。沉淀物通過真空 過濾被收集，然后用10(^1/孔朋20洗滌一次。該過濾器被穿孔，然后在Y粒子計數(shù)管上 定量分析放射性。在過濾器上從試驗樣品檢測的放射性與血清骨鈣蛋白濃度成反比。提純 小鼠骨鈣蛋白的標(biāo)準(zhǔn)曲線用來計算在試驗樣品中血清骨鈣蛋白濃度。通過對比接近在大鼠CPE模型中測定的ED5tl值的每日劑量(對于化合物(I)是 3mg/Kg/天和對于強(qiáng)的松龍則是10mg/Kg/天)，與強(qiáng)的松龍相比化合物(I)誘導(dǎo)的血清骨 鈣蛋白水平的減少更低。制備化合物(I)的方法是現(xiàn)有技術(shù)中已知的。例如，WO 04/052847提供可以使用 的一般程序。此外，WO 05/066161提供可以使用的附加一般程序。下面的反應(yīng)路線，中間 體和實施例進(jìn)一步舉例說明本發(fā)明和代表了化合物(I)的典型合成方法。試劑和起始原料 是本領(lǐng)域中的普通技術(shù)人員容易獲得的或容易合成的。需要理解的是，反應(yīng)路線，中間體和 實施例是僅僅為了舉例說明而闡述但沒有限制意義，并且本領(lǐng)域中的普通技術(shù)人員可以作 改進(jìn)。本發(fā)明的化合物的名稱一般從ChemDrawUltra ，7. 0. 1版本獲得。在這里使用的“DMS0”指二甲亞砜；“DIAD”指偶氮二羧酸二異丙酯；“ADDP”指1， 1，-(偶氮二羰基)二哌啶；“THF”指四氫呋喃；“DMF”指二甲基甲酰胺；“TMSCN”指三甲基甲 硅烷基氰化物；“TEA”或“Et3N”指三乙基胺；“DME”指1，2_ 二甲氧基乙烷；“AcOEt”指乙酸 乙酯；“pyr”指吡啶；“MsCl”指甲烷磺酰氯；“Et2NH”指二乙基胺；“MeOH”指甲醇；"PhCH3" 指甲苯；“PhH”指苯；“PBu/，指三丁基膦；“PPh3”指三苯膦；“dppf”指1，1，_雙(二苯基 膦基)二茂鐵，“NaO-t-Bu “指叔丁醇鈉；反應(yīng)路線ITMSCN1 ElsN CHjCN
步驟2
CC
N CN
(3)
1)濃HCI
2)MeOH, H2SO4 步驟3
σΒΓ
H2O2, CH3ReO3
、NCH2CI21MnO2
⑴ 步驟1
NaBH4, MeOH
步驟4 “
PhCH3. SOCI2 步驟,
(5a) Hal = Br (5b) Hal -1
HCI N
(6a) Hal * Br (6b) Hal I
1)
α
N^CO2H (7)
OeC
DIBAL CH2CI2, PhMe 78 0C
步驟6
α:
2)I2, O "C
3)H2SO4-MeOH 90。C
步驟5
N ^COjH (8)在反應(yīng)路線I中描述了吡啶中間體(5)和(6)的制備方法。在反應(yīng)路線I步驟1 中，3-溴吡啶(1)被氧化成3-溴-吡啶-N-氧化物(2)。在反應(yīng)路線I步驟2中，氰化物 加成得到3-溴-吡啶-2-腈(3)。通式(3)的腈被水解成羧酸，然后用酸催化被酯化成通 式(4)的酯。在反應(yīng)路線I步驟4中，該酯通過使用硼氫化鈉被還原成通式(5a)的吡啶基 甲醇。按照反應(yīng)路線I步驟5中所示，通過形成吡啶甲酸(7)的二陰離子，隨后用碘進(jìn)行 親電淬滅得到3-碘吡啶甲酸(8)，來獲得其中Hal = I的通式(5b)的吡啶基甲醇。在步驟 6中，通式(8)的酸通過使用二異丁基氫化鋁還原，得到通式(5b)的吡啶基甲醇。在反應(yīng)路線I步驟7中，通式(5a，b)的醇通過使用亞硫酰氯被轉(zhuǎn)化成通式(6a， b)的吡啶基甲基氯。反應(yīng)路線II
10CICH2OCH3 MOMO
fi-Prop)2NEt 步驟1
MOMO
PcICI2(PPh3)2 步驟2
F HCI-丙酮
步驟3
<11)
、Hal (細(xì)> 或(5b) ADDP1 PBu3, PhH
、Hal <6a)或 <6b) K2CO3, CH3CN
(13a) Hal = Br (13b) Hal = I
Cul. PdCI2(PPh3)j Et2NH
步驟Λ對于Hal:
Br
ADDP1 PBu3 PhH
步驟6在反應(yīng)路線II中描述了合成關(guān)鍵中間體(13a，b)的各種方法。在反應(yīng)路線II步 驟1中，5-氟-3-溴-苯酚(9)被保護(hù)，得到通式(10)的甲氧基甲基(MOM)醚。在反應(yīng)路線 II步驟2中，在通式(10)的受保護(hù)的溴苯酚與1- 丁炔之間的Sonagashira偶合得到通式 (11)的芳基炔烴。該反應(yīng)能夠用二乙基胺或三乙胺進(jìn)行。芳基溴在升高的溫度下(70°C) 下偶合，芳基碘在室溫下偶合。按照在反應(yīng)路線I步驟3中所示，通過使用HCl-丙酮將該 酚去保護(hù)，得到通式(12)的酚。或者，該酚作為THP醚加以保護(hù)，并通過使用在甲醇中的對 甲苯磺酸吡啶鐺(PPTS)進(jìn)行去保護(hù)，得到通式(12)的酚。在反應(yīng)路線II步驟4中，在通式(12)的炔基苯酚與通式(5)或(5b)的吡啶甲基 醇之間的Mitsimobu反應(yīng)得到通式(13a，b)的鹵吡啶基芳基炔烴。其它合適的試劑包括在 THF中的DIAD和三苯基膦。或者，在步驟5中，通過使用在乙腈中的碳酸鉀，由通式(12)的 酚與通式(6a)或(6b)的吡啶甲基氯的烷基化獲得通式(13a，b)的鹵吡啶基芳基炔烴。獲得通式(13a)的溴吡啶基芳基炔烴的另一個途徑示于步驟6和7中。在反應(yīng)路 線 II 步驟 6 中，5-氟-2-碘苯酚(Morice，C.等人，TetrahedronLett. 2001，42，6499-6502) 在Mitsimobu反應(yīng)中與通式(5a)的吡啶基甲醇偶合，得到通式(15)的碘芳基醚。在反應(yīng) 路線II步驟7中，碘芳基醚與1-丁炔發(fā)生Sonagashira偶合，得到通式(13a)的鹵吡啶基 芳基炔烴。反應(yīng)路線III
對甲苯磺酸鹽在反應(yīng)路線III步驟1和2中，通式(13a，b)的鹵吡啶基芳基炔烴的鉬催化二溴化 產(chǎn)生通式(16a，b)的二硼酸，后者在稀釋條件(約0. 01M)下通過分子內(nèi)Suzuki偶合之后 形成通式(17)的乙烯基硼酸。需要指出的是，二硼酸化對于其中Hal =Br的化合物(13a) 是最佳的。在反應(yīng)路線III步驟3中，在乙烯基硼酸(17)與3_碘苯胺之間的分子間Suzuki 偶合反應(yīng)獲得通式(18)的苯胺苯并吡啶基-10-氧雜革。在步驟4中，通式(18)的苯胺用 甲烷磺酰氯進(jìn)行磺?；?，得到通式(19)的最終苯并吡啶基-10-氧雜革。或者，在反應(yīng)路線 III步驟5中，通式(19)的苯并吡啶基-10-氧雜革直接通過進(jìn)行與N-(3-碘-苯基)-甲 烷磺酰胺之間的Suzuki偶合來獲得。反應(yīng)路線IV
^HaI <13a> 或(13b)
0mo(% Pt(PPh3)4 DMF, 80。C 步驟1 在反應(yīng)路線IV中示出的是獲得通式(19)的苯并吡啶基-10-氧雜$的又一種方 法。在反應(yīng)路線IV步驟1中，進(jìn)行通式(13a，b)的鹵吡啶基芳基炔烴與3-硝基苯硼酸的 順序分子內(nèi)Heck和Suzuki反應(yīng)，得到通式(20)的硝基苯基苯并吡啶基氧雜革。當(dāng)進(jìn)行硼 酸的緩慢加成以得到其中Hal = I的芳基炔烴時，改進(jìn)了產(chǎn)率。本領(lǐng)域中的那些技術(shù)人員 可以認(rèn)識到，在步驟2-3中化合物(19)通過如下來衍生通式(20)的硝基類似物被還原， 得到通式(21)的苯胺，隨后磺?；?br> 在反應(yīng)路線V步驟1中，按照與反應(yīng)路線2步驟2中類似的方式，在通式(5a)的 2_溴吡啶和1-丁炔之間進(jìn)行Sonagashira偶合，得到通式(22)的炔基吡啶基甲基醇。在 反應(yīng)路線V步驟2中，在通式(22)的吡啶基甲基醇與通式(14)的5-氟-2-碘苯酚之間 的Mitsimobu反應(yīng)得到通式(23)的吡啶。在步驟3中，進(jìn)行分子內(nèi)Heck反應(yīng)，隨后進(jìn)行與 N-[3-(4，4，5，5-四甲基_[1，3，2] 二氧雜硼雜環(huán)戊烷_2_基)-苯基]-甲烷磺酰胺之間的 Suzuki交叉偶聯(lián)，獲得通式(24)的苯并吡啶基-11-氧雜革,它隨后光異構(gòu)化得到通式(19) 的苯并吡啶基-10-氧雜苯。
反應(yīng)路線VI
PPA, 145 0C .Nsa
130 "C
步驟1
步驟2
EtCHaPPh^Br UHMDS, THF
或■
1)n-PrCeClj, THF
2)AcOH-HjSO4
步驟3
Br2. NaHCO3 CH2CI2
或·
DMAP-HBr3
步驟4
Pd(PPh3)4 Na2CO3水溶液 二11 惡坑.90。C
(29卜異構(gòu)體
(30卜異構(gòu)體(31)
Pd(PPh3)4 NasCO3水溶液
二哺烷.90°C
NH
OIB
步驟ι
275 w日光燈
步驟7 在反應(yīng)路線VI步驟1中，通式(25)的內(nèi)酯與通式(26)的鹵酚的鈉鹽進(jìn)行反應(yīng)，獲 得通式(27)的酸。在反應(yīng)路線VI步驟2中，與通式(27)的苯甲酸進(jìn)行弗瑞德-克來福特 反應(yīng)，得到通式(28)的苯并吡啶基氧雜環(huán)庚烷酮。在反應(yīng)路線IV步驟3中，通式(28)的 酮經(jīng)由維蒂希(Wittig)烯烴化作用或烷基鈰加成/脫水序列被轉(zhuǎn)化成作為幾何異構(gòu)體的 混合物形式的通式(29)的鏈烯基苯并吡啶基氧雜革。在步驟4中，通式(29)的鏈烯基苯并 吡啶基氧雜革和它的異構(gòu)體與溴或4-( 二甲基氨基)吡啶鐺三溴化合物進(jìn)行反應(yīng)，得到通 式(30)和(31)的幾何異構(gòu)的乙烯基溴。該乙烯基溴被分離，和按照在步驟5和6中所示， 通過在典型的條件下與N-[3- (4，4，5，5-四甲基-[1，3，2] 二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯 基]-甲烷磺酰胺進(jìn)行Suzuki交叉偶聯(lián)，被轉(zhuǎn)化成它們各自的磺酰胺(19)或(24)。通式 (24)的磺酰胺在反應(yīng)路線VI步驟7中光異構(gòu)化成通式(19)的苯并吡啶基-10-氧雜苯。
中間體1
1-溴-4-氟-2-甲氧基甲氧基-苯 將2-溴-5-氟苯酚(30g，0. 16mol)溶于二氯甲烷(170mL)中和冷卻到0°C。利用 注射器向該溶液中添加二異丙基乙胺(36mL，0. 20mol)，然后經(jīng)由加料漏斗添加氯甲基甲基
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醚(16mL，0. 20mol)。該溶液進(jìn)行攪拌和升溫至室溫。在2小時后，混合物用飽和NH4Cl水溶 液，水和鹽水洗滌。有機(jī)部分在MgSO4上干燥，過濾，和在減壓下濃縮。所得殘留物由快速色 層分離法(Biotage Si65M，20% AcOEt/己烷)提純，得到26. lg(71%)的標(biāo)題化合物，為 澄明的無色油。1H NMR 400MHz (CDCl3) 7. 46-7. 53 (m，1H)，6. 92-6. 99 (m，1H)，6. 63-6. 70 (m， 1H)，5· 26(s，2H)，3· 55(s，3H)。
中間體2 1- 丁 -1-炔基-4-氟-2-甲氧基甲氧基-苯
將1-溴-4-氟-2-甲氧基甲氧基-苯(7.6g，32mmol)加入到耐壓燒瓶中，溶于二 乙基胺(65mL)中，然后用氮氣脫氣15分鐘。過量的丁炔經(jīng)過鼓泡通入到該溶液中，添加 CuI (1. 9g，1 Ommol)和 PdCl2 (PPh3)2 (2. 3g，3. 3mmol)，然后該燒瓶被加熱至 70°C保持 44 小 時?；旌衔镉靡颐严♂?，然后用飽和NH4Cl水溶液和鹽水洗滌。有機(jī)部分在MgSO4I干燥， 過濾，和在減壓下濃縮。所得殘留物由快速色層分離法提純(Bi0tage Si65M，3%THF/ 己烷)，得到6. 12g(91% )的標(biāo)題化合物，為桔黃色固體。GCMS m/e 208[M] +。中間體32- 丁 -1-炔基-5-氟-苯酚 將1-丁-1-炔基-4-氟-2-甲氧基甲氧基-苯(6. lg,29mmol)溶于250mL的由 濃HCl在丙酮中形成的10%溶液中。溶液在室溫下攪拌5小時。反應(yīng)用乙醚稀釋，然后用 飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌。有機(jī)部分在MgSO4上干燥，過濾，和在減壓下濃縮。所得殘 留物由快速色層分離法(Biotage Si65M，5% AcOEt/己烷)提純，得到3. 52g(73% )的 標(biāo)題化合物，為橙色油。GCMS m/e 164[M] +。中間體43-溴-吡啶1-氧化物 將甲基三氧化錸(100mg，0. 401mmol)溶于二氯甲烷(40mL)中，添加3-溴吡啶 (15. 8g，IOOmmol)，隨后添加30%的H2O2水溶液(22. 7mL)。雙相混合物在室溫下攪拌。在18 小時之后，添加Mn02 (25mg，0. 29mmol)，混合物在室溫下攪拌2小時。混合物用二氯甲烷萃 取，合并的萃取液用鹽水洗滌，在MgSO4上干燥，過濾，和在減壓下濃縮，得到9. 52g (55 % ) 的標(biāo)題化合物，為橙色油。GCMS m/e 174[M_H]_。
中間體53-溴-吡啶-2-甲腈 將3-溴-吡啶1-氧化物(9. 4g,54mmol)溶于乙腈(60mL)中，添加三乙胺(15mL)， 隨后添加三甲基甲硅烷基氰化物(21. 7mL, 163mmol)?；旌衔锉患訜嶂?00°C，然后攪拌16 小時?；旌衔锉焕鋮s到0 V，傾倒在250mL的5M NaOH水溶液中，然后用二氯甲烷萃取。合 并的萃取液用鹽水洗滌，在MgSO4上干燥，過濾，和在減壓下濃縮。所得物質(zhì)通過使用快速色 層分離法(Biotage Si65M，20% AcOEt/己烷)提純，得到7. 8g(79% )的標(biāo)題化合物， 為黃色固體。GCMS m/e 182[Μ_ΗΓ。中間體63-溴-吡啶-2-甲酸甲酯將3-溴-吡啶-2-甲腈(14. 7g，80. 3mmol)溶于濃HCl (50mL)中，然后被加熱到 110°C保持18小時?；旌衔锉焕鋮s到0°C，過濾，用少量的乙醚漂洗，和在烘箱中在減壓下干 燥。將所得棕色固體溶于甲醇(80mL)中，滴加濃H2SO4(6. 6mL)，然后溶液被加熱至90°C保持 16小時。在減壓下除去甲醇，添加飽和碳酸氫鈉水溶液獲得堿性pH，然后混合物用AcOEt萃 取。合并的萃取液用鹽水洗滌，在MgSO4上干燥，過濾，和在減壓下濃縮，得到12.8g(74% ) 的標(biāo)題化合物，為白色固體。GCMSm/e 215[M_H]_。中間體7(3-溴-吡啶-2-基)-甲醇 將3-溴-吡啶-2-甲酸甲酯(12. 8g,59. 2mmol)溶于甲醇(150mL)中和冷卻至Ij 0°C。將NaBH4(11.2g，296mm0l)以1. Og的每份添加到該混合物中?；旌衔锷郎刂潦覝兀?后攪拌3小時。在減壓下除去甲醇，添加AcOEt，溶液用飽和氯化銨水溶液和鹽水洗滌。有 機(jī)部分在MgSO4上干燥，過濾，和在減壓下濃縮，得到6. 8g(62% )的標(biāo)題化合物，為白色固 體。GCMS m/e 187[Μ_ΗΓ。中間體83-溴-2- (2- 丁 -1-炔基-5-氟-苯氧基甲基)-吡啶 將由(3-溴-吡啶-2-基)-甲醇(3.09g，16.43mmol)，2-丁-1-炔基-5-氟-苯 酚(2. 70g, 16. 43mmol)，和三苯基膦(6. 46g，24. 64mmol)在二氯甲烷(162mL)中形成的溶液 冷卻到-5°C至0°C。經(jīng)過15分鐘的時間將偶氮二羧酸二異丙酯(DIAD) (4. 85mL, 24. 64mmol) 滴加進(jìn)去。在1小時之后，溶劑被蒸發(fā)，粗物質(zhì)直接用快速色層分離法(SiO2 己烷 AcOEt)提純，得到 3. 5g(64% )的標(biāo)題化合物。LCMS m/e 334[M+H] +。中間體98-氟-5-[l-(3-硝基-苯基)-丙亞基]-5，11- 二氫-10-氧雜-1-氮雜-二苯并[a，d]環(huán)庚烯 將Pd(0Ac)2(0. 18g，5 % )和鄰甲苯基膦(0. 32g，1. 05mmol)添力卩到由 3-溴-2-(2-丁-1-炔基-5-氟-苯氧基甲基)-吡啶(3. 50g，10. 5mmol)，碳酸鈉(3. 39g， 31. 5mmol)和3-硝基苯硼酸(2. 27g，13. 6mmol)在4 1的二噁烷水(IOlmL)中形成的溶 液中。將氮氣鼓泡通入到混合物中達(dá)15分鐘，然后反應(yīng)在75°C下攪拌一夜。混合物被冷 卻到室溫，固體物經(jīng)由Celite 過濾出來。添加水和AcOEt，兩相被潷析。水層用AcOEt萃 取，合并的有機(jī)層在硫酸鎂上干燥，過濾和在減壓下濃縮。所得殘留物由快速色層分離法提 純(Si02，20% AcOEt 己烷)，獲得 1.49g(38% )的標(biāo)題化合物。LCMS m/e 377[M+H] +。中間體103-[l-(8-氟-11H-10-氧雜-1-氮雜-二苯并[a，d]環(huán)庚烯_5_亞基)-丙基]-苯胺。
將8-氟-5-[l-(3-硝基-苯基)_丙亞基]-5，11-二氫-10-氧雜-1-氮雜_二苯并 [a，d]環(huán)庚烯(1.49g,3. 96mmol)溶于乙醇(20mL)中，然后用氮氣吹掃。添加Pd/C(0. 15g，
1710% )，混合物在ι大氣壓的氫氣中被氫化2小時。混合物用氮氣吹掃，經(jīng)由Celite 過 濾，固體物用乙醇洗滌。濾液在減壓下濃縮，獲得1.37g(99%)的標(biāo)題化合物。LCMS m/e 347[M+H]+。實施例1Ν-{3-[1-(8-氟-11H-10-氧雜-1-氮雜-二苯并[a，d]環(huán)庚烯 _5_ 亞基)-丙
基]-苯基}-甲烷磺酰胺 在0°C下將甲烷磺酰氯(0. 34mL，4. 36mmol)滴加到由3_[1_(8_氟-11H-10-氧 雜-1-氮雜-二苯并[a，d]環(huán)庚烯-5-亞基)-丙基]-苯胺(1.37g，3.96mm0l)和吡啶 (0. 35mL，4. 36mmol)在二氯甲烷(IOmL)中形成的溶液中。在2小時后，添加7%碳酸氫鈉水 溶液(20mL)，混合物攪拌30分鐘，潷析，和分離兩層。水相用二氯甲烷(2X20mL)洗滌。有 機(jī)相被收集和用鹽水洗滌，在硫酸鈉上干燥，過濾和在減壓下濃縮，獲得1. 98g的粗產(chǎn)物。 所得物質(zhì)由快速色層分離法提純，其中使用Biotage 和用己烷乙醇(9 1)洗脫，從而 獲得 1. 35g(80% )的標(biāo)題化合物。LCMS m/e 425[M+H]+。
權(quán)利要求
化合物，它是(E) N {3 [1 (8 氟 11H 10 氧雜 1 氮雜 二苯并[a，d]環(huán)庚烯 5 亞基) 丙基] 苯基} 甲烷磺酰胺，或它的藥物學(xué)上可接受的鹽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，它是(E)-N- {3- [1- (8-氟-11H-10-氧雜-1-氮雜-二苯 并[a，d]環(huán)庚烯-5-亞基)-丙基1-苯基}-甲烷磺酰胺。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2中任何一項的化合物或鹽，其用于治療。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2中任何一項的化合物或鹽，它用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，骨關(guān) 節(jié)炎，風(fēng)濕熱，哮喘，過敏性鼻炎，系統(tǒng)性紅斑狼瘡，慢性阻塞性肺病，克勞恩氏病，炎癥性腸 病，或潰瘍性結(jié)腸炎。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的化合物或鹽，其用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。
6.治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕熱、哮喘、過敏性鼻炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、慢性 阻塞性肺病、克勞恩氏病、炎癥性腸病或潰瘍性結(jié)腸炎的方法，該方法包括對需要該治療的 患者施用有效量的根據(jù)權(quán)利要求1或2中任何一項的化合物或鹽。
7.藥物組合物，它包括根據(jù)權(quán)利要求1或2中任何一項的化合物或鹽與一種或多種藥 物學(xué)上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑。
8.用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物組合物，它包括根據(jù)權(quán)利要求1或2中任何一項的 化合物或鹽與一種或多種藥物學(xué)上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑。
全文摘要
本發(fā)明提供化合物(I)或它的藥物學(xué)上可接受的鹽；包含化合物(I)與一種或多種的藥物學(xué)上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑的藥物組合物；以及治療炎癥和免疫病癥的方法，該方法包括對需要該治療的患者施用有效量的化合物(I)或它的藥物學(xué)上可接受的鹽。
文檔編號A61P19/02GK101910179SQ200980101974
公開日2010年12月8日 申請日期2009年1月8日 優(yōu)先權(quán)日2008年1月11日
發(fā)明者M·J·科蘭, M·W·卡森 申請人:伊萊利利公司