專利名稱：以醚鍵結(jié)合的卟啉二聚體鹽及其制造方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及光動(dòng)力療法(Photodynamic therapy, PDT)中的光敏劑 (Photosensitizer)及其制造方法。具體而言，本發(fā)明涉及一類新的以醚鍵結(jié)合的卟啉二聚 體鹽、其制造方法、包含其的藥物組合物及其作為光動(dòng)力療法的光敏劑的用途。
背景技術(shù)：
PDT是利用光敏劑的光動(dòng)力效應(yīng)進(jìn)行疾病治療的新方法，目前主要用于治療和診 斷惡性腫瘤以及某些癌前病變和良性病變。光動(dòng)力效應(yīng)用于疾病的治療時(shí)，需具備兩個(gè)條 件，一是光敏劑注入體內(nèi)后會(huì)在病變組織中形成較高的蓄積，二是靶部位易于接受特定波 長(zhǎng)光的照射。因?yàn)橹挥羞@樣，強(qiáng)烈的光動(dòng)力效應(yīng)才會(huì)發(fā)生，病變組織才會(huì)受到充分破壞。一 般說來，惡性腫瘤、某些癌前病變和良性病變會(huì)較多地?cái)z取光敏劑，只要這些病灶處于特定 波長(zhǎng)光能夠抵達(dá)照射的范圍，就有可能是PDT的適應(yīng)癥。關(guān)于光敏劑在病變組織中蓄積的 原因，一種廣泛接受的理論是，光敏劑是帶有正電荷并傾向于在酸性環(huán)境中沉淀的化合物， 病變組織例如腫瘤組織內(nèi)有一個(gè)具有乳酸，并帶有高負(fù)電荷的微小結(jié)構(gòu)，且是無氧新陳代 謝的環(huán)境，而正常細(xì)胞卻是具有有氧新陳代謝的特性，所以當(dāng)光敏劑進(jìn)入腫瘤患者體內(nèi)以 后，在一段時(shí)間內(nèi)會(huì)在腫瘤組織中形成相對(duì)高濃度的積聚，并與腫瘤細(xì)胞結(jié)合。此時(shí)用與之 相匹配的特定波長(zhǎng)光照射腫瘤組織，將激活其中的光敏劑分子，在腫瘤組織內(nèi)引發(fā)一系列 光化學(xué)反應(yīng)，生成活性很強(qiáng)的單態(tài)氧和超氧負(fù)離子自由基，進(jìn)而和鄰近的生物大分子發(fā)生 氧化反應(yīng)，直接損傷、滅活腫瘤細(xì)胞，并破壞腫瘤組織內(nèi)的微血管網(wǎng)，導(dǎo)致腫瘤組織的廣泛 壞死。PDT對(duì)靶組織具有一定的選擇性，同時(shí)具有較好的殺傷可控性，因此可在確保腫瘤滅 活目標(biāo)的情況下盡可能減少正常組織的損傷，是一種微侵襲性、低毒性、非產(chǎn)熱性的局部治 療手段，具有廣闊的應(yīng)用前景。光敏劑一直是光動(dòng)力療法研究的核心問題。PH0T0FRIN是美國(guó)羅斯威爾派克腫瘤 研究所(Roswell Park Cancer Institute)研制的第一個(gè)抗癌光敏劑，后由加拿大QLT公 司(Quadra Logic Technologies Phototherapeutics Inc)開發(fā)生產(chǎn)。i亥光敏齊Ll 自 1996 年獲得美國(guó)FDA批準(zhǔn)上市后，開始在北美以及英國(guó)、德國(guó)等歐洲國(guó)家和日本、韓國(guó)等亞洲國(guó) 家應(yīng)用，現(xiàn)已得到多國(guó)的權(quán)威認(rèn)可，成為梗阻性食道癌、梗阻性支氣管肺癌和巴雷特氏食 管(Barrett’ s esophagus)的主要治療手段。加拿大QLT公司還曾于1990年6月5日就 PH0T0FRIN這一產(chǎn)品在中國(guó)申請(qǐng)了名稱為“穩(wěn)定的凍干聚血卟啉醚/酯組合物”的發(fā)明專 利(申請(qǐng)?zhí)枮?0104366. 4)。在德國(guó)和俄羅斯，PH0T0FRIN有相應(yīng)的仿制藥，藥品名分別為 Photosam 禾口 Photogem0雖然PH0T0FRIN對(duì)光動(dòng)力療法起了很大的推動(dòng)作用，但也存在一些顯著的缺點(diǎn)。 PH0T0FRIN是一種由8個(gè)以上卟啉衍生物組成的混合制劑，有效成分不明確，因此無可控的 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。其主要不良反應(yīng)為皮膚光毒性，由于在皮膚中的存留時(shí)間長(zhǎng)達(dá)數(shù)周，容易引起皮 膚光敏副反應(yīng)，如可能會(huì)出現(xiàn)皮疹、水泡、色素沉著等，因此用藥后4-6周內(nèi)，患者需生活在 一個(gè)避光的環(huán)境。另外，PH0T0FRIN價(jià)格昂貴，每瓶(75mg)市售價(jià)1600-2300美元，所以我國(guó)一直未注冊(cè)進(jìn)口。2006年中國(guó)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)重慶市華鼎現(xiàn)代生物制藥有 限責(zé)任公司正式生產(chǎn)光敏劑“喜泊分(Hiporfin) ”?！跋膊捶帧币彩怯啥喾N卟啉衍生物組成 的混合制劑，類同PH0T0FRIN，但臨床使用效果不如PH0T0FRIN，主要原因是質(zhì)量不穩(wěn)定，其 所選擇的質(zhì)控標(biāo)示化合物“血卟啉”是抗腫瘤光動(dòng)力活性很低而皮膚光毒性又較高的成分， 不能起到控制質(zhì)量的作用。經(jīng)檢索可知 Thomas J. Dougherty 禾口 Ravindra K. Pandey 曾于 1990 年 9 月 18 曰 提交了美國(guó)專利申請(qǐng)，名稱為“用于光動(dòng)力治療的精制血卟啉二聚體和三聚體(PURIFIED HEMATOPORPHYRIN DIMERS AND TRIMERS USEFUL IN PH0T0DYNAMIC THERAPY) ” (專利號(hào) 5，190，966，授權(quán)公告日1993 年 3 月 2 日)。他們?cè)?Journal of Medicinal Chemistry 1990年第33卷第7期2032-2038頁中發(fā)表的題目為“作為光動(dòng)力療法光敏劑的卟啉二聚 體(Porphyrin Dimers as Photosensitizers in Photodynamic Therapy)，，一文中介紹了 用單一的羥乙基-乙烯基-次卟啉二甲酯異構(gòu)體合成相應(yīng)的以醚鍵結(jié)合的卟啉二聚體二甲 酯異構(gòu)體或用2(4)-(1-羥乙基)-4 (2)-乙烯基次卟啉二甲酯(2(4)-(l-hydrOXyethyl)-4 (2) -vinyl-deuteroporphyrin dimethyl ester)，即兩個(gè)異構(gòu)體混合物合成三個(gè)以醚鍵結(jié) 合的卟啉二聚體甲酯異構(gòu)體混合物的方法。小鼠在體光動(dòng)力活性試驗(yàn)顯示上述的單一的或 混合的以醚鍵結(jié)合的卟啉二聚體甲酯及其相應(yīng)的混合羧酸均具有相同強(qiáng)度的光動(dòng)力活性， 而血卟啉、羥乙基-乙烯基-次卟啉和原卟啉(即在PH0T0FRIN中含量高達(dá)95%以上的單 分子化合物)的光動(dòng)力活性均非常弱。但是，以醚鍵結(jié)合的卟啉二聚體甲酯或羧酸難溶于 水，至今未見用作光動(dòng)力療法的光敏劑。Christopher J. Byrne 等在 Australia Journal of Chemistry 1990 年第 43卷1889-1970頁中發(fā)表的題目為“以醚鍵結(jié)合的二聚體和三聚體血卟啉衍生物成 分的合成(The Synthesis of the Dimer and Trimer Ether-Linked Components of Hematoporphyrin Derivative) ” 一文中介紹了合成以醚鍵結(jié)合的二聚體和三聚體血卟啉 衍生物的方法用混合的2 (4) - (1-羥乙基)-4 (2)-乙烯基-次卟啉二甲酯[2 (4) - (1-hyd roxyethyl) -4 (2) -vinyldeuteroporphyrin dimethyl ester]為原料,溶于無水二氯甲燒， 加溴化氫氣體飽和的無水二氯甲烷溶液。搖勻后，加塞密閉放置于暗處1小時(shí)。加水和二 氯甲烷，將二氯甲烷層分出，用水洗滌，減壓回收二氯甲烷。粗產(chǎn)物采用硅膠色譜柱進(jìn)行分 離，分別可得以醚鍵結(jié)合的卟啉二聚體甲酯的α異構(gòu)體和β異構(gòu)體。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的化合物屬于以醚鍵結(jié)合的卟啉二聚體鹽，是一類可溶于水、性質(zhì)穩(wěn)定、光 動(dòng)力活性強(qiáng)、皮膚光毒性小、質(zhì)量可控的新型光敏劑，可用于光動(dòng)力療法，例如用于治療或 診斷惡性腫瘤、癌前病變或良性病變。一方面，本發(fā)明提供了式(1)、(2)或(3)的以醚鍵結(jié) 合的卟啉二聚體鹽，
權(quán)利要求
1.式(1)、(2)或(3)的以醚鍵結(jié)合的卟啉二聚體鹽，
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的以醚鍵結(jié)合的卟啉二聚體鹽，其中R獨(dú)立地選自任選被一個(gè) 或多個(gè)羥基取代的Cp6烷基、C2_6鏈烯基、C2_6炔基和CV6?；琈是堿金屬或NH4+,且ρ是1。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的以醚鍵結(jié)合的卟啉二聚體鹽，其中R獨(dú)立地選自CH= CH2、 CH (OH) CH3和COCH3, M是堿金屬或NH4+，且ρ是1。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的以醚鍵結(jié)合的卟啉二聚體鹽，其中R獨(dú)立地選自CH= CH2和 CH (OH) CH3, M是堿金屬或NH4+，且ρ是1。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任意一項(xiàng)所述的以醚鍵結(jié)合的卟啉二聚體鹽，其中M是堿金屬。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的以醚鍵結(jié)合的卟啉二聚體鹽，其中M是Na或K。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的以醚鍵結(jié)合的卟啉二聚體鹽，其選自二[1-[6，7_ 二丙酸 鈉-1，3，5，8-四甲基-4-乙烯基-2-卟吩]乙基]醚，二 [1-[6，7_ 二丙酸鈉-1，3，5，8-四甲 基-2-乙烯基-4-卟吩]乙基]醚，1_[6，7- 二丙酸鈉-1，3，5，8-四甲基-2-乙烯基-4-卟 吩]乙基1_[6，，7，- 二丙酸鈉_1，，3，，5，，8，-四甲基-4-乙烯基-2-卟吩]乙基醚，二 [1-[6，7-二丙酸鉀-1，3，5，8-四甲基-4_乙烯基_2_卟吩]乙基]醚，二 [1_[6，7_ 二丙酸 鉀-1，3，5，8-四甲基-2-乙烯基-4-卟吩]乙基]醚，1-[6，7_ 二丙酸鉀-1，3，5，8-四甲 基-2-乙烯基-4-卟吩]乙基1-[6，，7，-二丙酸鉀-1，，3，，5，，8，-四甲基-4-乙烯基-2-口卜 吩]乙基醚，二 [1-[6，7-二丙酸銨-1，3，5，8-四甲基-4-乙烯基-2-卟吩]乙基]醚，二 [1-[6，7-二丙酸銨-1，3，5，8-四甲基-2_乙烯基_4_卟吩]乙基]醚，和1_[6，7_ 二丙酸 銨-1，3，5，8-四甲基-2-乙烯基-4-卟吩]乙基1-[6，，7，- 二丙酸銨_1，，3，，5，，8，-四 甲基-4-乙烯基-2-卟吩]乙基醚。
8.制備權(quán)利要求1至7中任意一項(xiàng)所述的以醚鍵結(jié)合的卟啉二聚體鹽的方法，所述方 法包括以下步驟a)將式(4)、(5)或(6)的以醚鍵結(jié)合的卟啉二聚體甲酯或其混合物溶解在能與步驟 b)中的堿水溶液混溶的溶劑中，形成溶液，
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中步驟a)中所用的溶劑選自低級(jí)鏈烷醇類，例 如甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇等；多元醇類，例如乙二醇、1，2_丙二醇、甘油等；環(huán)狀醚類， 例如四氫呋喃、二氧雜環(huán)己烷、嗎啉等；酮類，例如丙酮等；腈類，例如乙腈、丁二腈等；酰胺 類，例如甲酰胺、N, N-二甲基甲酰胺等；亞砜和砜類，例如二甲亞砜、環(huán)丁砜等；乙二醇醚 類，例如乙二醇一甲醚、乙二醇一乙醚；二甘醇；或它們?nèi)我獗壤幕旌衔铩?br> 10.根據(jù)權(quán)利要求8或9中任意一項(xiàng)所述的方法，其中步驟b)中所用的堿水溶液濃度 在0. Olmol/L至飽和濃度范圍內(nèi)，例如0. lmol/L。
11.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其包括以下步驟a)將式DVDME-1、DVDME-2或DVDME-3的以醚鍵結(jié)合的卟啉二聚體甲酯或其混合物溶 解在能與步驟b)中的堿水溶液混溶的溶劑中，形成溶液，
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中步驟a)中所用的溶劑是甲醇、乙醇、四氫呋喃、 丙酮或它們的混合物，優(yōu)選四氫呋喃。
13.根據(jù)權(quán)利要求11或12所述的方法，其中步驟b)中所用的氫氧化鈉溶液濃度為 0.lmol/L0
14.一種混合物，其包含兩種或更多種權(quán)利要求1至7中任意一項(xiàng)所述的以醚鍵結(jié)合的 卟啉二聚體鹽。
15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的混合物，其基本由選自以下的化合物組成二[1-[6，7_ 二 丙酸鈉-1，3，5，8-四甲基-4-乙烯基-2-卟吩]乙基]醚，二 [1-[6，7-二丙酸鈉-1，3，5， 8_四甲基-2-乙烯基-4-卟吩]乙基]醚，1-[6，7_ 二丙酸鈉-1，3，5，8-四甲基-2-乙烯基-4-卟吩]乙基1-[6，，7，- 二丙酸鈉_1，，3，，5，，8，-四甲基-4-乙烯基-2-卟吩]乙 基醚，二 [1-[6，7-二丙酸鉀-1，3，5，8-四甲基-4-乙烯基-2-卟吩]乙基]醚，二 [1_[6， 7-二丙酸鉀-1，3，5，8-四甲基-2-乙烯基-4-卟吩]乙基]醚，1-[6，7_ 二丙酸鉀_1，3，5， 8_四甲基-2-乙烯基-4-卟吩]乙基1_[6，，7，- 二丙酸鉀_1，，3，，5，，8，-四甲基-4-乙 烯基-2-卟吩]乙基醚，二 [1-[6，7-二丙酸銨-1，3，5，8-四甲基-4-乙烯基-2-卟吩]乙 基]醚，二 [1-[6，7-二丙酸銨-1，3，5，8-四甲基-2_乙烯基_4_卟吩]乙基]醚，和1_[6， 7_ 二丙酸銨-1，3，5，8-四甲基-2-乙烯基-4-卟吩]乙基1-[6，，7，-二丙酸銨_1，，3，， 5，，8，-四甲基-4-乙烯基-2-卟吩]乙基醚。
16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的混合物，其基本由二[1-[6，7_ 二丙酸鈉-1，3，5，8-四 甲基-4-乙烯基-2-卟吩]乙基]醚、二 [1-[6，7_ 二丙酸鈉-1，3，5，8-四甲基-2-乙烯 基-4-卟吩]乙基]醚和1-[6，7-二丙酸鈉-1，3，5，8-四甲基-2-乙烯基_4_卟吩]乙基 1-[6，，7，- 二丙酸鈉_1，，3，，5，，8，-四甲基-4，-乙烯基-2，-卟吩]乙基醚組成。
17.用于光動(dòng)力療法的藥物組合物，其包含權(quán)利要求1至7中任意一項(xiàng)所述的以醚鍵結(jié) 合的卟啉二聚體鹽或者權(quán)利要求14至16中任意一項(xiàng)所述的混合物，并任選地包含一種或 多種可藥用的賦形劑。
18.權(quán)利要求1至7中任意一項(xiàng)所述的以醚鍵結(jié)合的卟啉二聚體鹽或者權(quán)利要求14至 16中任意一項(xiàng)所述的混合物在制備藥物中的用途，所述藥物用作光動(dòng)力療法的光敏劑。
19.根據(jù)權(quán)利要求18所述的用途，其中所述藥物作為光敏劑用于治療或診斷惡性腫 瘤，例如實(shí)體瘤，如膀胱癌、食管癌、支氣管癌、口腔頌面部癌、鼻咽癌、肋膜間皮瘤、肝癌、胰 腺癌、皮膚癌、陰莖癌、宮頸癌、乳腺癌及乳腺癌切除術(shù)后皮下轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)、肛周腫瘤及肛周腫 瘤擴(kuò)大切除術(shù)后癌殘留、卡波西肉瘤、肺癌、胃癌、膽管癌、前列腺癌、黑色素瘤和腦腫瘤；癌 前病變，例如巴雷特氏食管、口腔粘膜白斑等；良性病變，例如老年性眼底黃斑病變、動(dòng)脈粥 樣硬化斑塊、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、皮膚微血管畸形、牛皮癬、紅斑狼瘡皮損等。
20.一種藥盒，其包含權(quán)利要求1至7中任意一項(xiàng)所述的以醚鍵結(jié)合的卟啉二聚體鹽或 權(quán)利要求14至16中任意一項(xiàng)所述的混合物；以及將其作為光敏劑用于光動(dòng)力療法的說明 書。
21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的藥盒，其中所述的以醚鍵結(jié)合的卟啉二聚體鹽或所述的混 合物是溶液的形式。
22.根據(jù)權(quán)利要求20所述的藥盒，其中所述的以醚鍵結(jié)合的卟啉二聚體鹽或所述的混 合物是凍干制劑的形式，并且所述藥盒還包含用于將該凍干制劑進(jìn)行重新配制以進(jìn)行施用 的溶劑，例如注射用水或注射用5%葡萄糖溶液。
23.檢測(cè)權(quán)利要求1至7中任意一項(xiàng)所述的以醚鍵結(jié)合的卟啉二聚體鹽或權(quán)利要求14 至16中任意一項(xiàng)所述的混合物的高效液相色譜方法，其特征在于使用反相色譜柱，檢測(cè)波 長(zhǎng)為400nm，流動(dòng)相是甲醇和醋酸水溶液的混合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及以醚鍵結(jié)合的卟啉二聚體鹽及其制造方法。具體而言，本發(fā)明涉及一類新的以醚鍵結(jié)合的卟啉二聚體鹽、其混合物、其制造方法、包含其的藥物組合物及其作為光動(dòng)力療法的光敏劑的用途。
文檔編號(hào)A61K41/00GK102030765SQ20091017911
公開日2011年4月27日 申請(qǐng)日期2009年9月28日 優(yōu)先權(quán)日2009年9月28日
發(fā)明者方起程, 楊棟 申請(qǐng)人:青龍高科技股份有限公司