專利名稱：一種從淡豆豉中提取抗氧化活性物質(zhì)的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物提取領(lǐng)域，特別是一種從淡豆豉中提取抗氧化活性物質(zhì) 的方法。
背景技術(shù)：
淡豆豉又名香豉、淡豉、大豆豉，是豆科植物大豆(G/_yd"ewa;c(L.)Merr.) 的成熟種子與青蒿、桑葉蒸罨、發(fā)酵加工而成的制品，發(fā)源于中國，是中華人民 的傳統(tǒng)食品，也是我國衛(wèi)生部確定的第一批藥食兼用品種之一。作為常用中藥， 歷版《中國藥典》均有記載。因炮制方法的不同，有的性寒，有的微熱，它具有 解肌發(fā)表、宣郁除煩、解毒清熱、透疹解毒的功效，適用于風熱頭疼，胸悶嘔吐， 痰多虛煩等癥。淡豆豉富含異黃酮及皂苷類化合物。
自由基對細胞和組織的損傷是其致病的基礎(chǔ)，由于人體是由各種各樣不同功 能的細胞組成，因而自由基對不同細胞的損傷可導(dǎo)致表面看起來毫無關(guān)連的疾 病。如自由基摧毀細胞膜，導(dǎo)致細胞膜發(fā)生變性，使得細胞不能從外部吸收營 養(yǎng)，也排泄不出細胞內(nèi)的代謝廢物，并喪失了對細菌和病毒的抵御能力；自由基 攻擊正在復(fù)制中的基因，造成基因突變，誘發(fā)癌癥發(fā)生，自由基激活人體免疫系 統(tǒng)，使人體表現(xiàn)出過敏反應(yīng)，或出現(xiàn)如紅斑狼瘡等自體免疫疾病；自由基作用于 人體內(nèi)酶系統(tǒng)，導(dǎo)致膠原蛋白酶和硬彈性蛋白酶的釋放，這些酶作用于皮膚中的 膠原蛋白和硬彈性蛋白并使這兩種蛋白產(chǎn)生過度交聯(lián)并降解，結(jié)果使皮膚失去彈 性出現(xiàn)皺紋及囊泡；類似的作用使體內(nèi)毛細血管脆性增加，使血管容易破裂，這 可導(dǎo)致靜脈曲張、水腫等與血管通透性升高有關(guān)疾病的發(fā)生；自由基侵蝕機體組 織，可激發(fā)人體釋放各種炎癥因子，導(dǎo)致各種非菌類炎癥；自由基侵蝕腦細胞， 使人得早老性癡呆的疾??；自由基氧化血液中的脂蛋白造成膽固醇向血管壁的沉 積，引起心臟病和中風；自由基引起關(guān)節(jié)膜及關(guān)節(jié)滑液的降解，從而導(dǎo)致關(guān)節(jié)炎； 自由基侵蝕眼睛晶狀體組織引起白內(nèi)障；自由基侵蝕胰臟細胞引起糖尿病。總之， 自由基可破壞膠原蛋白及其它結(jié)締組織，干擾重要的生理過程，引起細胞DNA 突變。而食用含黃酮等抗氧化劑食物可降低患心腦血管疾病的幾率。
淡豆豉應(yīng)用廣泛，但對其抗氧化物的提取及體外抗氧化活性尚缺乏研究。目 前，未見淡豆豉抗氧化物質(zhì)提取工藝研究報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種從淡豆豉中提取抗氧化活性物質(zhì)的方法。采用該方 法能有效提高淡豆豉的抗氧化效率，減少服用量。該方法具有提取效率高，工藝 流程簡單，設(shè)備投入小，生產(chǎn)成本低，易于產(chǎn)業(yè)化的優(yōu)點。
本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)的
一種從淡豆豉中提取抗氧化活性物質(zhì)的方法，其提取方法的步驟如下
(1) 將淡豆豉粉碎，過10 50目篩，制成淡豆豉粗粉；
(2) 將淡豆豉粉置提取容器中，加入10 30倍濃度為50 95%的乙醇溶液進 行提取，提取溫度50 85。C，提取時間為2 4h，重復(fù)浸提2 4次，使淡豆豉 中有效成分充分提取，濾出溶液待用；
(3) 將提取液濃縮至淡豆豉重量的2 10倍體積，然后上聚酰胺柱進行純化；
(4) 采用6 12倍柱床體積的清水洗脫，除去水溶性雜質(zhì)；
(5) 采用3 8倍柱床體積的60 95%濃度的乙醇溶液洗脫，洗脫液經(jīng)濃縮、 冷凍干燥得到抗氧化活性物質(zhì)。
而且，純化采用的聚酰胺為50 400目，上樣方式采用動態(tài)上樣方式。 本發(fā)明的優(yōu)點和有益效果是
本發(fā)明采用常用發(fā)酵類中藥-淡豆豉為原料制備強抗氧化活性物質(zhì)，淡豆豉 在我國年產(chǎn)量巨大，提取原料容易獲得，制備過程中溶劑為水和乙醇，避免了有 毒有機溶劑的使用，這樣能最大程度保持最終產(chǎn)品的安全性，使所得純化物無有 機溶劑殘留。所用乙醇和聚酰胺都可回收重復(fù)使用，工藝流程及設(shè)備簡單適合于 大規(guī)模生產(chǎn)，并為進一歩開發(fā)為抗氧化功能食品奠定了基礎(chǔ)。所制備的淡豆豉抗 氧化活性物質(zhì)產(chǎn)品適用于醫(yī)藥及保健品、食品抗氧化劑、化妝品等行業(yè)，提取物 殘渣經(jīng)加工后可作為飼料、肥料，實現(xiàn)綜合利用。
具體實施例方式
本發(fā)明通過以下實施例進一歩詳述，但本實施例所敘述的技術(shù)內(nèi)容是說明性 的，而不是限定性的，不應(yīng)以此來局限本發(fā)明的保護范圍。
本發(fā)明所涉及的從淡豆豉中提取抗氧化活性物質(zhì)的方法步驟如下
(1) 將淡豆豉粉碎，過50目篩，形成淡豆豉粗粉；
(2) 稱取100克淡豆豉粗粉，在該淡豆豉粉中加入1500mL濃度為75%的乙 醇溶液，75'C提取時間為3h，重復(fù)浸提3次，提取液合并并濃縮至200mL。
(3) 后上聚酰胺柱進行純化，聚酰胺采用100 200目，采用動態(tài)上樣方式； 以UV (紫外色譜)在0.01mol/LNaOH水溶液中于273nm監(jiān)測流出液，至開始泄漏時停止上樣；
(3) 采用IO倍柱床體積的蒸餾水洗脫，以除去水溶性雜質(zhì)；
(4) 采用5倍柱床體積、濃度為75%的乙醇溶液洗脫，合并后的洗脫液經(jīng)濃 縮、冷凍干燥得到抗氧化活性物質(zhì)。
將此抗氧化粉末產(chǎn)品用甲醇配制成100ug/mL溶液，以同濃度的Vc (維生素 c)和BHT (2，4-二叔丁基甲基苯酚)為陽性對照，做DPPH自由基清除試驗和 FRAP法抗氧化能力測試。結(jié)果見表1和表2所示。
表1 100ug/mL樣品DPPH自由基清除率
樣品(100ug/mL)BHT Vc淡豆豉抗氧化物質(zhì)
清除率(o/0)57.53±1.08 97.85±0.97*90.53±0.89*
*表示各樣品之間存在顯著性差異(P <0.01)
表2 100ug/mL樣品FRAP法抗氧化能力樣品(100ug/mL)BHT Vc淡豆豉抗氧化物質(zhì)
A593 0.402±0.035 0.621士0.0K0.594±0.037*
*表示各樣品之間存在顯著性差異(P <0.01)
權(quán)利要求
1. 一種從淡豆豉中提取抗氧化活性物質(zhì)的方法，其特征在于該方法包括如下步驟(1)將淡豆豉粉碎，過10～50目篩，制成淡豆豉粗粉；(2)將淡豆豉粉置提取容器中，加入10～30倍濃度為50～95％的乙醇溶液進行提取，提取溫度50～85℃，提取時間為2～4h，重復(fù)浸提2～4次，使淡豆豉中有效成分充分提取，濾出溶液待用；(3)將提取液濃縮至淡豆豉重量的2～10倍體積，然后上聚酰胺柱進行純化；(4)采用6～12倍柱床體積的清水洗脫，除去水溶性雜質(zhì)；(5)采用3～8倍柱床體積的60～95％濃度的乙醇溶液洗脫，洗脫液經(jīng)濃縮、冷凍干燥得到抗氧化活性物質(zhì)。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從淡豆豉中提取抗氧化活性物質(zhì)的方法，其 特征在于純化采用的聚酰胺為50 400目，上樣方式采用動態(tài)上樣。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從淡豆豉中提取抗氧化活性物質(zhì)的方法。是通過以下步驟實現(xiàn)的采用乙醇提取、聚酰胺純化、洗脫液濃縮、干燥，最終得到具有強抗氧化活性提取物，屬于天然產(chǎn)物提取領(lǐng)域。本發(fā)明采用淡豆豉為原料制備強抗氧化活性物質(zhì)，工藝簡單，投資較少及設(shè)備簡單適合于大規(guī)模生產(chǎn)，為進一步開發(fā)為抗氧化功能食品奠定了基礎(chǔ)。所制備的淡豆豉抗氧化活性物質(zhì)產(chǎn)品適用于醫(yī)藥及保健品、食品抗氧化劑、化妝品等行業(yè)。
文檔編號A61K36/48GK101530455SQ20091011913
公開日2009年9月16日 申請日期2009年3月4日 優(yōu)先權(quán)日2009年3月4日
發(fā)明者崔力劍, 李云鵬, 牛麗穎, 王永利, 王鑫國, 竇玉紅, 蕓 黃 申請人:河北醫(yī)科大學(xué)